目的 对2009年浙江省义鸟市暴发流行的登革3型病毒进行系统进化分析并初步研究其E蛋白的免疫原性.方法 RT-PCR扩增义乌分离株全基因组,利用MEGA 4分别构建E及NS1区域核苷酸及氨基酸系统发生树,进行系统进化分析.构建重组质粒JESS -ywD3 prM/E397JEV-pcDNA5,IFA及Western Blot检测E蛋白在293T细胞中的表达及分泌情况.将纯化后的分泌性E蛋白免疫8ALB/c小鼠,通过ELISA、中和试验等方法对体液免疫进行测定.结果 登革3型病毒义乌分离株与广州GZID3株及印度GWIL-25株核苷酸及氨基欧序列同源性均达到99%以上；其分泌性E蛋白可以刺激小鼠产生登革特异性IgG抗体及针对同型病毒的中和抗体.结论 义乌分离株属于登革3型病毒亚型Ⅲ,其分泌性E蛋白具有一定的免疫原性.
作者：顾雯；金聪；张硕；张全福；李建东；杭小同；王芹；李川；梁米芳；李德新 刊期： 2012年第07期
目的 分析贵州省狂犬病病毒的糖蛋白基因(G基因)序列特征,为狂犬病的有效预防和控制提供科学依据.方法 以RT- PCR扩增贵州省近年来不同地区的人和犬狂犬病病毒阳性脑组织标本狂犬病病毒G基因序列,对扩增产物测序后采用生物信息学软件进行序列分析.结果 贵州省狂犬病毒阳性标本经RT-PCR扩增、测序与拼接后得到8份狂犬病病毒阳性样本的G基因序列.同源性分析显示.8份狂犬病病毒阳性样本的G基因序列在核苷酸及氩基酸水平上彼此的同源性分别为87.4％～99.9％和83.3.％～100％,与狂犬病毒基因1型病毒株G基因的核苷酸和氨基酸序列同源性高(分别为86.5％～87.O％和83.3％～100％).进化树分析显示,贵州省狂犬病病毒G基因的亲缘进化关系较近,且与狂犬病毒基因1～7型中的基因1型代表毒株的亲缘进化关系近；除GZ01和GZ09外,其余狂犬病毒G基因与国内湖北、湖南、安徽、广西、江苏和上海毒株相距较近.除GZ09与国外的马来西亚和泰国代表毒株亲缘进化关系近外,其与毒株与印度尼西亚毒株亲缘进化关系近.结论 本研究从狂犬病病毒G基因水平证明贵州省狂犬病毒株属于基因l型,揭示了我省贵州省狂犬病毒与国内外已报道毒株的亲缘进化关系,该研究结果将为贵州省狂犬病的有效预防和控制提供科学依据.
作者：李世军；余春；王定明；唐青；陶晓燕；李浩；庄妍；周敬祝；王月；田克诚；唐光鹏 刊期： 2012年第07期
目的 了解粪肠球菌溶血素激活因子(CylA)基因的遗传变异情况.方法 根据GenBank上已发表的粪肠球菌CylA基因序列设计2对特异性引物,对临床分离的4株致鹅败血症粪肠球菌CylA基因进行克隆及序列测定,并与国外从人体分离的和国内从猪体分离的各4株致病性粪肠球菌的CylA基因,用LaSergene 7.0软件进行同源性比对和构建系统进化发育树.结果 鹅源4株茵CylA基因均长1 239bp,有1个完整的开放阅读框,编码412个氨基酸；序列中无缺失和插入,仅有l处未引起其编码氨基酸变异的无义突变.其余8株菌CylA基因及推导的氨基酸变异程度均不大.4株鹅源菌CylA基因推导的氨基酸同源性为100％；与国外人源菌和国内猪源菌CylA基因推导的氨基酸遗传距离也较近,同源性为98.6％～100％.结论 粪肠球菌CylA基因高度保守,有可能成为检测诊断和免疫预防的靶基因.
作者：狄婷婷；高原；聂鑫 刊期： 2012年第07期
目的 在研究浙江省各类食品中副溶血性弧茵污染水平的基础上,进行贝类海产品副溶血性弧菌感染风险评估.方法 对2 215件市售食品用科玛嘉弧菌显色培养基分离副溶血性弧菌,并用API 20E鉴定条鉴定；用Risk Ranger软件进行贝类海产品副溶血性弧菌感染风险评估；用PCR方法进行毒力基因检测.结果 副溶血性弧菌检出率鲜(活)海水产品为43.06％、生/半生食海产品为32.52％、鲜活淡水产品为22.22％、生畜肉为13.52％、生禽肉为11.44％、散装熟肉制品为3.44％、中式凉拌菜为2.98％、生食蔬菜为2.10％、鲜奶蛋糕为2.08％.8月～10月副溶血性弧菌检出率显著高于4月～6月(P＜0.01,χ2 =46.445).农贸市场采集的食品副溶血性弧菌检出率显著高于超市(P＜0.01,χ2=10.252).tdh毒力基因携带率为3.66 ％(3/82),trh基因全部阴性.生食或半生食牡蛎等贝类海产品副溶血性弧菌感染风险系数分别为50(生食)和48(半生食),每年因食用牡蛎等贝类海产品导致副溶血性弧菌食源性疾病的人数为4.42×104人(生食)和2.21×104人(半生食),如果烹饪彻底,风险系数降可至零.结论 浙江省各类食品中副溶血性弧菌污染问题突出,防止食品间交叉污染,不生食半生食海水产品,即食食品食用前加热处理是减少副溶血性弧菌食源性疾病发生的有效方法.
作者：梅玲玲；潘雪霞；朱敏；张俊彦；龚璞；潘军航；占利 刊期： 2012年第07期
目的 利用温控表达调节系统在布鲁氏菌中诱导表达裂解基因E,制备布鲁氏菌S2株菌壳,监测其裂解效率,并观察茵壳形态.方法 从pBV220::E中PCR扩增温控裂解盒和裂解基因E融合片段,克隆至pBBR1 MCS-2载体上,构建重组裂解质粒pBBRl MCS-E,并将其电转化至布鲁氏菌S2株,构建重组菌S2(pBBRl MCS-E).通过28℃至42℃升温诱导培养制备布鲁氏菌菌壳,绘制生长曲线和裂解曲线,计算裂解率,并电镜观察菌壳形态.结果 成功构建了重组裂解质粒pB-BRlMCS-E并制备了布鲁氏菌菌壳.绘制出了布鲁氏菌裂解曲线,布鲁氏菌菌壳的裂解率达99.99％,经高渗溶液冻融后可完全消除其中残存的活菌.电镜观察表明布鲁氏菌菌壳保持有细胞的基本形态,但由于细胞内容物外流而使细胞发生变形和皱缩.结论 本研究成功制备出了布鲁氏菌菌壳,为进一步研究布鲁氏菌菌壳的特性奠定了基础.
作者：刘爽；刘军；何永聚；祝令伟；孙洋；周博；纪雪；冯书章 刊期： 2012年第07期
目的 分别采用两种荧光染料对人体蠕形螨染色后置于激光共聚焦显微镜下进行三维重建,对其重要结构进行功能性探讨.方法 先用异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)对虫体进性初染,再用碘化丙啶(propidium iodide,PI)复染,置于激光共聚焦显微镜下,用Imaris5.0软件进行三维重建,观测、鉴定毛囊蠕形螨形态特征.结果 异硫氰酸和碘化丙啶均能与虫体充分结合,在三维重建技术下清楚观察到了虫体外部形态及前段摄食通道等内部结构.结论 荧光双染和三维重建技术的结合,对深入研究人体蠕形外部形态、内部结构及探讨其功能、意义奠定了坚实基础.
作者：余俊萍；张锡林；王光西；孙源；王利芳；胡朝惠 刊期： 2012年第07期
目的 研发猴B病毒ELlSA检测试剂盒中替代全病毒的抗原.方法 根据已报道的猴B病毒E2490株gB蛋白基因序列(GenBank登录号:AF533768)人工合成gB基因,通过XbaⅠ和EcoR I特异性酶切,将gB基因克隆于昆虫杆状病毒表达载体pFastBacHTA,经PCR、酶切、测序鉴定后,成功构建了携带gB基因的重组质粒pFastBac-HTa-gB.结果 该重组质粒转化含有杆状病毒穿梭载体的DH10BAC感受态细胞,经抗生素、PCR筛选,获得转座的杆粒bacmid-gB.在脂质体介导下转染sf9昆虫细胞,细胞变大变圊细胞核扩大,收获重组杆状病毒,再感染细胞,收获目的蛋白.通过SDS-PAGE和Western blot分析及间接免疫荧光检测,结果表明该蛋白得到表达,且具有良好的生物活性,大小约为98 kDa.实验结果表明已成功构建了携带目的基因的重组质粒pFastBac- HTa-gB和转座的杆粒bacmid-gB,转染后在sf9昆虫细胞上得到表达.结论 研究结果为下一步以表达的gB蛋白为诊断抗原,替代现阶段以病毒作为抗原的猴B病毒ELISA检测试剂盒的研制奠定了基础.
作者：段博芳；王琼；段纲；毛永杨；叶玲玲；杨建明；徐维加；董俊；周晓黎；艾军 刊期： 2012年第07期
目的 探讨和评价hsp65 and rpoB PCR-RFIP用于龟／脓肿分枝杆菌复合群种的快速鉴定.方法 收集经PNB/TCH鉴别培养基表型鉴定和16s rRNA基因测序鉴定为龟／脓肿分枝杆菌复合群的临床分离菌株,用hsp65 and rpoB PCR-RFLP进行种／亚种鉴定.结果 经表型鉴定为非结核分枝杆菌的27株临床菌株,16s rRNA基因测序分析与龟／脓肿分枝杆菌的同源性达到99.7％.经hsp65 PCR-RFLP and rpoB PCR-RFLP鉴定18株为脓肿分枝杆菌(M:abscessus),4株为溃疡分枝杆菌(M.absecces),另5株表现为独特的指纹特征,可能是一个新的亚种.结论 能够快速进行龟／脓肿分枝杆菌复合群种／亚种的鉴定.
作者：李艳冰；张媛媛；黄明翔；赵秀芹；张丽水；万康林；刘文恩 刊期： 2012年第07期
目的 检测狂犬病基因工程灭活疫苗(Hep-Flury-dG株)注射犬只后的免疫效力.方法 在广州市增城区某村进行狂犬病基因工程灭活疫苗(Hep-Flury-dG株)环境释放试验,登记该村所有家养犬的信息并存档,同时进行疫苗免疫.随机采集免疫前血清样品66份,免疫后21 d仍获得血清样品66份,使用ELISA方法检测样品的抗体水平.结果 免疫前该村犬只抗体阳转率为26％,免疫后21 d抗体阳转率达到83％.经统计分析表明免疫前后抗体水平差异具有统计学意义；性别不是影响抗体水平变化的因素,但年龄可影响抗体水平变化,成犬抗体水平的增加明显高于幼犬.结论 狂犬病基因工程灭活疫苗(Hep-Flury-dG株)免疫犬只后可提供足够的保护力,有效保护犬只免受狂犬病病毒感染,因而预防狂犬病从犬-犬或犬-人的传播；为农村地区家养犬建立免疫档案,监控犬只抗体水平,使犬群间形成狂犬病抗体阳性率达到70％以上的坚强免疫带,是预防农村地区狂犬病发生的一种可行、有效的方法.
作者：施赫赫；宋伟科；黄永亮；刘祥茵；代元元；傅秋玲；张莹；林颖仪；阳佑天；徐晓娟；王怡飞；郭霄峰 刊期： 2012年第07期
目的 分析p53介导的抗流感病毒感染过程中,Toll-like receptors (TLRs)及其信号通路分子mRNA表达变化,为p53抗病毒作用机制的解析提供帮助.方法 流感病毒PR8感染p53+/+、p53-/-小鼠,通过小鼠表达谱芯片分析病毒感染后小鼠肺脏中TLR家族成员及其信号通路分子基因表达差异.结果 流感病毒感染后,表达谱芯片分析结果表明,p53+/+小鼠肺组织中TLR8、TLR9以及信号通路中的NF-κB、TNF-α、IFN-α表达等基因的表达与p53-/-小鼠相比差异显著.结论 TLRs及其信号通路分子参与了p53介导的抗流感病毒作用.
作者：晏文君；史子学；魏建超；邓绪芳；朱紫祥；邵东华；王少辉；李蓓蓓；马志永 刊期： 2012年第07期
目的 评价多位点PCR用于分枝杆菌临床分离株快速鉴定效果.方法 收集从临床结核病患者分离到的抗酸染色阳性的培养物,经PNB/TCH鉴别培养基进行培养鉴定后,采用聚合酶链反应(PCR)对16SrRNA、Rv0577、IS1561、Rvl510、Rv1970、Rv3877/8和Rv3120基因位点进行扩增,鉴定至种,再经rpoB-PRA、hsp65和rpoB基因测序进行验证.结果 共对391株分枝杆菌临床分离株应用多位点PCR进行了鉴定,结果显示结核分枝杆菌378株,非洲分枝杆菌I型6株,非结核分枝杆菌7株.7株非结核分枝杆菌分别为鸟分枝杆菌1株,马赛分枝杆菌2株,胞内分枝杆菌4株.而PNB/TCH鉴别培养基培养鉴定结果为结核分枝杆菌复合群385株,非结核分枝杆菌6株.多位点PCR结果与rpoB-PRA,hsp65和rpoB基因测序结果一致.结论 多位点PCR技术鉴定分枝杆菌菌种结果准确可靠,且具有简便和快速等优点,有较大的分子流行病学应用价值,且对于临床诊断和治疗都具有重要意义.
作者：包训迪；连璐璐；徐东芳；赵秀芹；董海燕；王庆；万康林 刊期： 2012年第07期
目的 对微小隐孢子虫(Cryptosporidium parvum,Cp)含EF-hand结构域家族蛋白进行生物信息学研究,探讨该家族蛋白的EF-hand结构域与Ca2+信号的关系以预测该家族蛋白的功能,为隐孢子虫病的诊断和治疗提供新的方向.方法 首先通过数据收集,获得EF-hand结构域家族蛋白的序列信息,接着对每个蛋白进行CDD结构域搜索和NCBI BLAST 的比对分析,确证为EF-hand结构域家族蛋白,后进行结构域分析和功能预测.结果 搜索到了C.parvum Iowa Ⅱ中18个含有EF-hand结构域的蛋白,它们之间的氨基酸长度,分子量大小以及等电点等都有很大的区别,通过结构域分析把EF-hand家族分成了含一个EF-hand结构域、二个EF-hand结构域、同时含EF-hand和STKc-AGC两种结构域和同时含EF-hand和PKC两种结构域四大类.结论 EF-hand结构域蛋白家族与重要的钙离子信号作用有着密切的关系,而C.parvum对宿主细胞的侵袭能力与胞内的Ca2+水平密切相关,所以EF-hand蛋白家族很有可能成为隐孢子虫病治疗的一个新的突破点.
作者：郭志云；杨光；荆春霞；付芹芹；孙小会；王穗湘；李月琴；周天鸿 刊期： 2012年第07期
目的 博尔纳病病毒是一种非细胞溶解性,嗜神经性核糖核酸病毒.该病毒具有广泛的感染宿主,感染范围从鸟类、马、灵长类等到人类,博尔纳病是一种致死性中枢神经系统疾病,临床上以精神、行为异常为主要表现.其流行病学调查、检测和治疗显得尤为重要.
作者：金兴振 刊期： 2012年第07期
疫苗作为预防和控制传染病的重要手段,已成功的控制了很多传染病的流行.因此,许多研究者希望研制一种安全有效的血吸虫病疫苗,以期达到控制血吸虫病流行的目的.近年来,鉴于单价疫苗有限的免疫效果,人们开始进行日本血吸虫DNA疫苗联合免疫的研究.本文对日本血吸虫DNA疫苗联合免疫的研究资料进行了归纳整理,发现日本血吸虫DNA疫苗联合免疫涉及鸡尾酒式DNA混合疫苗、双价和多价DNA联合疫苗以及佐剂研究等方面,比较减虫卒、减卵率等指标,联合免疫疫苗的效果明显优于单价DNA疫苗的效果,而且具有潜在的实际应用价值.
作者：冯其梅；张树菊；汪世平 刊期： 2012年第07期
在自然环境中,细菌需要应对生长环境的不断变化.细菌发展了一些机制以适应这些环境的变化.其中,对可用碳源的适应性机制是其中的重要方面.碳源是细菌对复杂环境作出适应反应的信号之一,某种特定碳源的出现也许使细菌感受到正处于感染相关的机体组织或细胞中,从而促使毒力基因表达.本文简述了细菌对可用碳源的适应性机制,并就致病菌碳源代谢与毒力调控的关联性进行了综述.这些致病菌主要包括了硬壁菌门的链球菌、单增李斯特菌、产气夹膜杆菌；变形菌门的牛种布鲁氏杆菌、脑膜炎奈瑟氏菌、鼠伤寒沙门氏菌、霍乱弧菌、根瘤菌；以及放线茵门的结核分枝杆菌,它们的碳源代谢通过多种途径,如HprK/P及PTS蛋白、CRP-cAMP、ABC转运系统、双组分系统等,影响其毒力表达.
作者：周妍妍；阚飙 刊期： 2012年第07期
环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术是近10年来发展起来的具有简便、快速、灵敏度高、特异性强等优点的新的恒温核酸扩增技术,已被应用于致病菌检测的研究.LAMP技术需针对靶基因的6个区域设计4种特异性引物,并采用链置换型DNA聚合酶,操作步骤少,不需要聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)技术复杂的设备.本文就LAMP技术在致病菌检测中的应用作一综述.
作者：贺尔娜；蔡挺；张顺 刊期： 2012年第07期
慢性疲劳综合征(CFS)的病原学一直没有明确的结论.2009年美国一家实验室在《科学》杂志发表论文,宣称在CFS患者样品中检测到一种逆转录病毒XMRV.而随后对其它CFS人群相关样品的一系列调查却不支持该结论.经过全球科学家近两年的重新调查,证明该实验室所用细胞系、PCR试剂可能存在污染,2011年底《科学》杂志撤销了这篇论文.这次事件说明,病原生物学研究中要警惕实验室污染,需要严谨地提出新的病原体与疾病的关系.
作者：张拥军 刊期： 2012年第07期
目前,7株鹦鹉热嗜衣原体全基因组己测序完整,揭示了不同株之间的相同性与差异性.主要外膜蛋白基因、多形态膜蛋白多基因家族、Ⅲ型分泌系统基因和包涵体膜蛋白基因是鹦鹉热嗜表原体(Chlamydophila psittaci,Cps)研究的重点.对多个种株Cps基因组完整核苷酸序列测定的研究,将有助于进一步了解Cps的致病机制,寻找更好的诊断方法和防治措施,预防和控制Cps的流行.
作者：黎知青 刊期： 2012年第07期
住肉孢子虫病是一种食源性人兽共患原虫病,目前人们对猪源住肉孢子虫的危害性认识不足.车文就近年来猪住肉孢子虫病的病原种类、生活史、致病性,猪源住肉孢子虫对人的感染风险性等病原学特性方面取得的进展进行综述与分析,以期提高兽医界对猪住肉孢子虫病危害性或潜在风险的认识,为有效防控猪和人住肉孢子虫病提供参考和启发.
作者：李小军；韩利方；闫文朝；王天奇 刊期： 2012年第07期
目的 对广西家畜布鲁氏菌病进行监测.方法 采用虎红平板凝集和试管凝集试验对2009-2011年广西14个市的16 143份家畜血清进行布鲁氏菌抗体监测；同时对1 070份家畜脾、胎衣、流产胎儿等样本以及10份布鲁氏菌试管凝集试验抗体阳性家畜的子宫或睾丸进行布鲁氏菌分离和鉴定.结果 2009年有1头种公猪,2010年有1头牛和8头山羊被检出为布鲁氏菌抗体阳性；经生化特性和PCR鉴定有1株从布鲁氏酋试管凝集试验抗体阳性羊内脏分离到的细菌被鉴定为羊种布鲁氏菌.对分离的芋种布鲁氏菌毒力基因VirB8的克隆测序结果显示,VirB8基因在布鲁氏菌种型间高度保守.结论 虽然广西家畜布鲁氏菌防治达到稳定控制标准,但需加强家畜引种和动物流通检疫工作,防止因引种和动物流通而将布鲁氏菌引入广西.
作者：李军；陈泽祥；杨威；谢永平；李常挺；傅启宽；骆永泉；李常春；许力干；赵武 刊期： 2012年第07期
目的 通过分析2000-2010年西安市病例资料,描述肾综合征出血热(HFRS)流行特征和变化趋势.方法 对2000-2010年传染病监测信息报告管理系统网络直报的HFRS病例资料,用描述性流行病学方法进行统计分析.结果 全市共报告HFRS病例10 647例,死亡115例,病死率1.08％.病例主要集中在周至县、户县、长安区,占总发病数的71.61％(7 624/10 647);HFRS时间分布具有明显的“双峰”特点.82.25％的患者集中在16～60岁年龄段,农民占发病73.15％(7 788/10 647).野外和居民区优势鼠种分别是黑线姬鼠和褐家鼠,带毒率为10.56％、带毒指数为0.55.结论 西安市HFRS疫情总体呈现持续平稳下降趋势,与近年采取疫苗接种和防鼠灭鼠为主的综合性防治措施有关.个别地区鼠密度和/或带病毒率仍然较高,有些疫区也在演变,甚至出现新疫区,HFRS暴发流行的隐患依然存在.
作者：蔡正华；李倩；于立芬；李琴丽；王戬 刊期： 2012年第07期
目的 分析1996-2010年江苏省人狂犬病流行特征与流行趋势.方法 用描述流行病学方法对江苏省人狂犬病疫情资料进行分析.结果 1996年以来江苏省出现了全省范围的狂犬病流行,疫情呈迅速的定向扩散,波及全省82.3％的县级行政区；1996-2010年报告病例占同期中国大陆的5.1％,死亡病例排在所有法定报告传染病前4位；同期1 235例人狂犬病统计,农民占73.1％,男女性别比2.0:1,报告病例数集中于15岁以下和35～75岁年龄范围.结论 江苏省处于我国重要的狂犬病流行区,人狂犬病的大范围流行表明犬间疫情的流行强度较高,如果不能有效控制犬间狂犬病的流行,人间疫情很难得到控制.
作者：孟繁岳；鲍倡俊；李亮；祖荣强；汤奋扬 刊期： 2012年第07期
目的 分析本地区分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)葡萄球菌盒染色体mec(SCCmec)类型.方法 利用3套多重PCR体系扩增耐甲氧西林金黄色葡萄球菌SCCmec型特异性位点、共同位点、鉴别位点、内参照位点以及mec基因复合物和ccr基因复合物进行SCCmec分型.结果 分离的156株MRSA中,6株MRSA不能分型,可分型率为96.2％.其中,Ⅲ型SCCmec 125株,占83.3％,Ⅱ型SCCmec 11株,占7.3％,Ⅳ、V型SCCmec各7株,占4.7％.结论 本地区分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌流行携带多耐药基因的Ⅲ型SCCmec.
作者：黄革；蒋文玲；黄爱伟；李运雄 刊期： 2012年第07期
作者：谢剑锋 刊期： 2012年第07期
