目的 分离鉴定龟头化脓性包皮炎病原菌,检测分离菌株耐药性并了解其耐药机制.方法 采取尿道分泌物及龟头脓包液标本,革兰染色镜检并采用Mycoplasma IST 2试剂盒检测支原体.上述标本接种哥伦比亚血平板、淋病奈瑟菌选择平板、酵母菌鉴定平板进行细菌分离培养,获得的菌落用VITEK 2-compact全自动细菌检测分析系统进行鉴定,另采用PCR检测上述标本及菌落的淋病奈瑟菌16S rRNA基因.采用K-B法检测分离菌株对5种常用抗生素的敏感性,采用β内酰胺酶和超广谱β-内酰胺酶确证试验了解该菌株产酶情况,PCR检测该菌株耐药相关tetM、TEM、mefA和ermF基因.结果 各标本支原体检测结果均为阴性.尿道分泌物标本分离培养结果均为阴性,龟头脓包液血平板和选择平板培养结果为阳性.VITEK 2-compact系统和16S rRNA-PCR检测结果显示分离菌株为淋病奈瑟菌.该菌株产β内酰胺酶且对青霉素G、环丙沙星、四环素耐药,其基因组携带tetM、TEM、mefA和ermF基因.结论 淋病奈瑟菌可引起龟头化脓性包皮炎,该淋病奈瑟菌菌株多重耐药并与其携带的耐药基因密切相关.
作者：葛玉梅；胡庆丰；朱永泽；周永列；吕火烊 刊期： 2017年第05期
目的 探讨miR-16表达水平与金黄色葡萄球菌脓毒症严重程度的关联性,进一步探讨其潜在的临床意义.方法 收集金黄色葡萄球菌脓毒症血液标本共计32例,脓毒性休克、严重脓毒症和一般脓毒症各8例,不同年龄段的健康对照24例;另外,收集革兰氏阴性菌脓毒症血液标本8例.用Trizol液裂解全血后提取microRNA,采用荧光定量PCR测定miR-16在不同组的表达水平(2-△△Ct法),用SPSS 13.0软件分析各组之间的统计学差异.采用SPSS 13.0软件将miR-16定量值与相应CRP和PCT值进行相关性分析.结果 miR-16表达水平与金黄色葡萄球菌脓毒症严重程度呈明显的负关联,各实验组与对照组相比均有统计学差异(P＜0.001),实验组之间也有统计学差异(P＜0.01).miR-16表达水平与CRP和PCT值呈负相关性,相关系数分别为-0.561和-0.769.结论 miR-16表达与金黄色葡萄球菌脓毒症有明显的负关联性,提示其可能作为该菌脓毒症严重程度的标记物.
作者：王家学；陈燕；刘小香；孙爱华；杨珺；吕火烊；周永烈 刊期： 2017年第05期
目的 检测不同种类耐万古霉素肠球菌(VRE)毒力基因携带情况及其差异,为研究VRE致病机制提供基础.方法 采用微量稀释法检测浙江地区490株屎肠球菌和862株粪肠球菌临床分离菌株对万古霉素的耐药性.采用PCR检测VRE菌株ace、asa1、cylA、efaA、esp、gelE、hyl七种毒力基因.结果 10％(49/490)屎肠球菌株和0.8％(7/862)粪肠球菌株为VRE.万古霉素耐药屎肠球菌株中,5株未检出任何毒力基因,其余44株仅可检出asa1、esp、gelE和hyl基因,其中esp基因(73.5％,36/49)和hyl基因(53.1％,26/49)为优势基因,以单或双基因为主要携带模式.万古霉素耐药粪肠球菌株中可检出除hyl基因以外其他6种毒力基因,且每株菌均同时携带3～6种致病基因.结论 本地区VRE以屎肠球菌为主,耐万古霉素屎肠球菌和粪肠球菌毒力基因携带率、携带种类和模式均有明显差异.
作者：陈敏强；汪强；周永列；吕火烊；胡庆丰；葛玉梅 刊期： 2017年第05期
目的 建立一种通用、敏感、特异的microRNA检测方法,用于检测布鲁氏菌病患者血浆microRNA-146a的表达,探讨其作为诊断标识的可能性.方法 以microRNA-146a模拟物为待检物,通过正交实验设计,对退火温度、探针浓度、试剂盒选择进行优化,建立特异敏感的通用检测方法;从布病患者和正常健康人血浆样本提取RNA,应用通用探针法进行检测,比较布病患者血浆microRNA-146a的表达变化.结果 建立了优化的通用探针法,与染料法相比特异性更强、扩增范围更大,具有通用检测能力.应用通用探针法检测布鲁氏菌病患者血浆microRNA-146a,发现布病患者血浆中microRNA-146a的表达被抑制(P＜0.01),表明其可能作为布病诊断的分子标识.结论 经优化的通用探针法是一种通用、敏感、特异的检测方法,可用于microRNA的检测,microRNA-146a可能作为布病诊断的标识分子.
作者：程慧敏；魏青青；张欢；刘金玲；韩小虎；王大力；王兴龙 刊期： 2017年第05期
目的 分析2010-2015年贵州省克-雅病(Creutzfeldt-Jakob disease,CJD)监测病例流行病学、临床特征、以及病例转归情况.方法 对贵州省克-雅病监测网络发现的疑似病例的流行病学、临床特征以及随访资料进行分析,同时结合病例脑脊液、血液标本的实验室检测结果.结果 2010-2015年贵州省报告的23例CJD疑似病例中发现CJD病例11例,其中sCJD临床诊断病例8例,sCJD临床疑似病例2例,gCJD确诊诊断病例1例.11例病例中,首发症状以快速进行性痴呆为主要表现,其次是精神症状、锥体外系症状、小脑症状和皮质性失明;临床症状中进行性痴呆为主要症状,其次是视觉或小脑障碍、肌阵挛、锥体系/锥体外系功能异常、无动性缄默;辅助检查以头颅核磁共振(MRI)异常为主(45.45％);实验室检测脑脊液14-3-3蛋白阳性率较高(70％),血液标本中朊蛋白基因(PRNP)检测129位氨基酸多态性均为M/M型,除1例gCJD确诊诊断病例PRNP基因检测发现D178N突变外,均未发现其它位点突变.11例CJD病例无季节、地区聚集性和职业倾向,以男性为主,年龄中位数在65岁,主要为汉族.流行病学史无特殊.对所有CJD病例在报告当年进行随访,失访率27％,大多数病例均在1年内死亡.结论 2010-2015年贵州省CJD病例中以sCJD为主,其流行病学特征与同期全国监测情况相符.首次在贵州省发现1例gCJD病例,其PRNP基因突变与2011-2014年全国CJD监测网络发现的gCJD突变位点均不相同,与河南2011-2013年间报告的2例遗传型朊蛋白病病例在临床表现及PRNP基因突变位点相似.
作者：蒋维佳；焦玲；黄荷；李世军；刘艳；朱英武；徐竹；孙美璐；方旭明；韩璐；熊洁；蔡立君 刊期： 2017年第05期
目的 对临床分离于皮脂腺囊肿标本中的菌株进行表型和基因型鉴定,描述该菌株的生物学特性及致病性,为临床诊断提供准确地病原学依据.方法 对分离菌株进行革兰氏染色等,并使用VITEK 2 Compact全自动微生物分析仪进行鉴定.采用K-B法进行药敏试验.提取分离菌株DNA,采用通用引物对16S rRNA基因进行PCR扩增并测序,将测序结果与GenBank中收录的16S rRNA基因序列进行BLAST同源性对比.结果 分离菌株经VITEK 2 Compact鉴定为玫瑰色库克菌,后经16S rRNA序列测定方法鉴定,分离菌株为产丙酮酸棒状杆菌.药敏试验显示该菌株对四环素、万古霉素、利福平敏感,对青霉素、红霉素、克林霉素、环丙沙星、左氧氟沙星、复方新诺明、头孢吡肟、亚胺培南、庆大霉素等均耐药.结论 对于表现型不易鉴定或鉴定不准确的细菌,采用16S rRNA序列测定的方法进行鉴定是准确的.产丙酮酸棒状杆菌是引起患者疾病的致病菌.在完善产丙酮酸棒状杆菌生化反应信息的同时,探索出有效可行的生物学鉴定方法.
作者：冯佳佳；吴倩倩；王保强；孙铭艳；陶元勇 刊期： 2017年第05期
目的 了解西北地区结核分枝杆菌耐药状况及其影响因素,为预防和控制耐药结核病提供基础科学依据.方法 选取中国西北4省、自治区(甘肃、西藏、新疆、内蒙古)2005-2011年从结核病患者痰标本中分离培养的757株结核分枝杆菌(MTB),采用比例法检测MTB对4种一线抗结核药物链霉素(SM)、利福平(RFP)、异烟肼(INH)和乙胺丁醇(EMB)的敏感性,结合病例背景资料分析相关影响因素.结果 共检测了757株结核分枝杆菌,对SM、RFP、INH和EMB的耐药率分别为28.14％、26.68％、26.02％和7.53％,总的耐药率和耐多药率分别为40.55％和18.63％.西藏、新疆、甘肃和内蒙古的总耐药率和MDR率分别为64.42％和42.94％、40.48％和23.81％、41.61％和3.36％、27.90％和11.29％.x2检验结果显示,各省份间菌株对INH、RFP和SM 3种药物的耐药率以及耐多药率差异有统计学意义(P＜0.05).多因素Logistic回归分析结果显示,影响结核病耐药产生的主要原因是病例类型.复治病例发生耐药的危险性是新发病例的2.582倍(95％CI1.869-3.566).结论 中国西北地区耐多药情况较为严重,特别是西藏和新疆.加强对结核病耐药性监测,规范化和针对性的全程治疗,防止疾病复发,是预防和控制耐药结核病的关键.
作者：李雨睛；万李；陈杏；刘海灿；蒋毅；赵秀芹；管茶香；万康林；袁秀琴 刊期： 2017年第05期
目的 对2005-2011年间,福建省福州市胸科医院分离获得的非结核分枝杆菌临床菌株进行菌种鉴定.方法 分别使用传统鉴别培养基法和多位点PCR、hsp65-PRA与rpoB-PRA,以及hsp65、rpoB、16s rRNA和ITS基因测序等分子生物学方法,对全部菌株进行菌种鉴定.结果 450株被初步鉴定为非结核分枝杆菌的临床分离菌株中,有45株被鉴定为结核分枝杆菌,其余405株被鉴定为23种不同的非结核分枝杆菌和1株支气管戈登菌.结论 在该地区有多种非结核分枝杆菌传播和流行,其中,6种非结核分枝杆菌和支气管戈登菌为在福建省内首次发现.
作者：刘海灿；黄明翔；蒋毅；连璐璐；赵秀芹；张丽水；吴移谋；万康林 刊期： 2017年第05期
目的 评价高分辨率熔解曲线分析技术(high-resolution melting curve,HRM)检测结核分枝杆菌异烟胼耐药性的应用价值.方法 1)通过传统比例法药敏实验对本实验室保存的49株结核分枝杆菌进行异烟肼耐药性分析.2)进一步对该结核分枝杆菌进行异烟肼耐药相关基因KatG基因和inhA基因进行异烟肼耐药决定区测序分析,筛查突变位点.3)根据筛查到的突变位点设计高分辨率熔解曲线分析所用的特异性引物,对异烟肼耐药基因耐药决定区进行高分辨率熔解曲线分析检测DNA突变,评估用高分辨率熔解曲线分析技术对结核分枝杆菌异烟肼耐药性检测的效率.结果 1)比例法药敏结果显示,49株实验菌株中20株为异烟肼耐药株,29株为异烟肼敏感株.2)测序分析结果显示:①KatG基因出现了4种突变形式,分别是234单位点突变;234、315双位点突变;234、463双位点突变;234、315、463三位点联合突变.②inhA基因检测到3种突变,即-8位、-15位、-152位.3)①对耐药株的基因突变进行分析发现:20株异烟肼耐药株中11株存在KatG基因第315位密码子的突变、占异烟肼耐药株的55％;6株存在inhA基因-15(4株)位碱基、-8(1株)位碱基、-152(1株)位碱基的突变,共占异烟肼耐药株的30％;2株同时存在基因KatG315密码子和inhA-15位碱基的突变,占异烟肼耐药株的10％;1株均未检测到KatG基因和inhA基因的突变,占异烟肼耐药株的5％.通过基因突变检测结核分枝杆菌异烟肼耐药性的敏感性为95％、特异性为100％.②用高分辨率溶解曲线检测实验菌株耐药基因突变的结果显示,18株存在基因突变,24株不存在基因突变,检测的灵敏度为94.7％、特异性为80％.③以高分辨率熔解曲线检测到突变为耐药的判断标准,检出19株为耐药株,24株为敏感株.以比例法药敏结果为参照,检测的灵敏度为95％、特异性为82.76％.结论 高分辨率溶解曲线用于结核分枝杆菌对异烟肼耐药性的检测具有较好的灵敏度,耗时短,在异烟肼耐药结核病的快速诊断方面具有一定的应用价值.
作者：杨彩虹；杨敏；于璐；包海洋；吴长新；曹旭东；陈创夫 刊期： 2017年第05期
目的 探讨结核分枝杆菌毒素-抗毒素(toxin-antitoxin,TA)系统中的4对基因的功能,为研究结核分枝杆菌的传播机制提供基础科学数据.方法 选取结核分枝杆菌TA系统VapBC家族中4对基因,包括Va pC 4个毒素基因(Rv1720c、Rv2103c、Rv2494和Rv3408)和VapB 4个抗毒素基因(Rv1721c、Rv2104c、Rv2493、Rv3407),在大肠杆菌和耻垢分枝杆菌中分别构建严谨型阿拉伯糖诱导质粒体系及乙酰胺诱导穿梭质粒体系观察Va pC对细菌生长的抑制作用,及其对应的VapB解除抑制作用.结果 在大肠杆菌和耻垢分枝杆菌的实验结果一致,Rv2103c具有一定抑制作用和Rv2104c具有消除抑制作用,其余3对毒素-抗毒素基因未见到明显的对细菌生长的抑制和消除抑制的作用.结论 成功构建了VapBC家族在大肠杆菌及耻垢分枝杆菌中的表达体系,并发现了一对TA系统基因对细菌生长的抑制和消除抑制的作用.
作者：刘静仪；贾俊楠；李卫民；张俊杰；高基民 刊期： 2017年第05期
microRNA为一类非编码小RNA,主要通过其种子序列(seed sequence,SS)与靶mRNA位于5'端的SS结合序列特异性结合后抑制靶mRNA转录或降解靶mRNA,从而在转录后水平负调控靶基因表达.microRNA首先发现于秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans),此后发现各种真核细胞均存在大量各种microRNA.真核细胞首先转录出microRNA前体,经剪切后成为21～23 nt有功能的microRNA,大多与靶mRNA的3'端序列结合后引起靶mRNA翻译抑制或降解.近年不少细菌等原核细胞microRNA被发现,但原核细胞microRNA不需剪切即有活性,大小为50～400 nt,其特性、作用位点和机制等也与真核细胞有一定差异.本文简要介绍真核和原核细胞基因表达调控主要机制、microRNA特点及其调控基因表达的机制,以期为深入研究原核细胞型病原微生物基因表达调控与致病机制奠定基础.
作者：张新蔚；黄燕颖；严杰；孙爱华 刊期： 2017年第05期
链霉菌产生两类重要的抗肿瘤药物阿霉素和柔红霉素,链霉菌通过ABC家族的DrrAB外排泵将这两种抗生素运输到细胞外.本文对DrrAB外排系统的结构,DrrA和DrrB蛋白的表达与相互作用以及该复合物的装配和多药外排功能的研究进展做一简要综述.
作者：冯振月；刘德福；刘硕；王丽姿；崔玉东 刊期： 2017年第05期
益生菌是一类对宿主有益的活性微生物,可以有效治疗胃肠道、呼吸道感染和过敏性疾病.虽然目前主要用于治疗细菌和病毒感染,但也有研究表明益生菌对寄生虫感染有抑制作用.因此,以益生菌制成的微生态制剂将为寄生虫防治提供一种新的途径.
作者：杨桂连；王春凤 刊期： 2017年第05期
目的 探讨聚发性肺型并殖吸虫病的早期CT表现特征.方法 搜集两起9例由聚餐生食石蟹引发的肺型并殖吸虫病,均经实验室及临床证实,其中8例在我院就诊,回顾性分析其影像学表现特点.结果 8例均有不同程度的胸腔积液,7例表现为肺内浸润性病变,随机分布于胸膜下,部分伴有月晕征,其中1例灶中可见特征性CT表现“隧道征”,2例伴发支气管周围炎.结论 CT检查如发现随机分布的胸膜下肺内浸润性病变或“隧道征”,合并胸腔积液,结合生食石蟹等河鲜史,外周血嗜酸粒细胞升高,可提示并殖吸虫病的诊断.
作者：周永飞；谢益兵；洪加林；许京轩；谢品楠；许崇永；陈棋 刊期： 2017年第05期
目的 探究钩端螺旋体病的发病规律和诊疗方法.方法 对2015年8月至11月在中国农业大学动物医院确诊的3只钩端螺旋体病犬的发病和诊疗情况进行回顾分析.结果 病犬均出现精神沉郁、黄疸、厌食和呕吐等症状,其中2例有体温升高病史,并且在发病前接触过外界水源.实验室检查3只病犬均存在肝肾损伤和贫血.依据尿液PCR检测结果为阳性确诊病犬患钩端螺旋体病.在诊疗过程中3只病犬有1只死亡,其余2只经抗菌素和对症治疗后康复.结论 犬感染钩端螺旋体和接触疫水相关,尿液PCR检测可作为该病的确诊方法,治疗上推荐使用青霉素和多西环素等四环素类药物.
作者：肖园；吴海燕；孙艳争；庞海东；张海霞；陈宋杰；刘洋；吕艳丽 刊期： 2017年第05期
艾滋病抗病毒治疗(ART),现已取得很大成效.该病原为致死性疾病,现已成为一种可治可管理的传染病,全球艾滋病病毒感染者/艾滋病(HIV/AIDS)的病例虽仍多达3 800万,但有一半以上已经抗病毒治疗.除了药物治疗外,目前一些新技术新方法如基因组编辑等也已介入艾滋病的治疗,并且在人源化动物试验中业已取得很好的效果.不容置疑,艾滋病终究会被人类控制消除.但随着艾滋病抗病毒治疗的不断发展,根本的问题也就是HIV潜伏库的问题日益突出,不论是分子治疗、组合治疗都存在这样的问题.因此,不断寻找新的潜伏病毒细胞的标记,缩小病毒潜伏库,是当前艾滋病治疗必须解决的课题.此外,尽管艾滋病的防治取得了很大成绩,但目前全球每天仍有近6 000例HIV/AIDS感染的病例发生.因此,安全有效疫苗的研发,不论在预防领域、还是在临床治疗方面,都有其积极的意义.
作者：严延生；颜苹苹；陈亮；吴守丽；谢美榕；吴婷婷；夏品苍；邱月锋 刊期： 2017年第05期
