目的 应用多交叉置换扩增(MCDA)技术建立单增李斯特菌的简单、快速、敏感且特异的诊断方法,并对该方法进行敏感度、特异性及实际应用评价.方法 根据单增李斯特菌的种特异性基因lmo0733设计引物,采用荧光染料颜色变化、实时浊度检测及琼脂糖凝胶电泳三种方法确认MCDA产物,对MCDA引物进行佳反应条件、敏感度、特异性评估,并对实际样本进行检测.结果 单增李斯特菌MCDA检测方法的佳反应温度为61℃.单增李斯特菌MCDA检测方法的敏感度为10 fg/反应,分别是环介导等温扩增(LAMP)技术和交叉引物恒温扩增(CPA)技术的25倍和250倍.对153份鼠粪便标本2次增菌培养物的检测结果证实,本研究建立的单增李斯特菌MCDA检测方法的检测能力与分离培养方法(ISO 11290-1)相同,且优于LAMP、CPA和PCR方法.结论 MCDA方法作为一种快速、敏感和高效的检测方法可以应用于食品行业及临床标本中单增李斯特菌的检测.
作者：李慧；王毅；王艳；李华；陈峥宏；叶长芸 刊期： 2018年第02期
目的 研究动物源沙门菌耐药及流行特征.方法 对116株动物源沙门菌进行血清学分型、药物敏感试验、耐药基因(簇)检测和多位点序列(MLST)分析.结果 鸡源沙门菌多为ST11克隆肠炎沙门菌和ST17克隆印第安那沙门菌,猪源沙门菌多属于ST40克隆德尔卑沙门菌.ST11克隆主要表现为对氨苄青霉素、萘啶酸、四环素、头孢哌酮耐药,且多数为多重耐药(MDR);ST17克隆多数对9种以上的药物特别是头孢类及氟喹诺酮类耐药,为超级耐药(Super-MDR)克隆.ST11克隆中bla TEM-1-like携带率高,ST17克隆中bla OXA-1-like、bla CTX-M、bla TEM-1-like及floR、aadA2、sul1及aac(6’)-1b高携带率是其成为超级耐药克隆的主要原因.结论 抗菌药物特别是头孢类、氟喹诺酮类药物在动物生产中应当控制使用,对控制耐药菌的产生及传播有重要意义.
作者：岂晓鑫；陈建晧；张小荣；曹永忠；巢国祥；吴艳涛 刊期： 2018年第02期
目的 湖北钉螺(Oncomelania hupensis)先感染目平外睾吸虫(Exorchis mupingensis)虫卵后,再间隔不同时间感染日本血吸虫(Schistosoma ja ponicum)毛蚴,观察螺体分泌物的强度对血吸虫幼虫损害和被杀灭情况的关系.方法 钉螺感染目平外睾吸虫后分别于21 d、37d、55d、70 d和85 d再感染血吸虫毛蚴.钉螺经双重感染后4-82 d,作钉螺整体连续埋蜡切片、染色制片和全片观察,并记录血吸虫幼虫残体数.结果与结论 单独感染外睾吸虫的钉螺,和两吸虫感染间隔时间为21-85 d的钉螺,螺体都产生大量血淋巴细胞和分泌物,它们会围攻再侵入的日本血吸虫早期幼虫并侵入其体内,血吸虫幼虫结构发生异常、停止发育直至死亡.两种吸虫双重感染的间隔时间愈长,螺体血淋巴细胞数随时间增加而逐渐减少;而螺体分泌物不断增多,并见于血吸虫幼虫残骸内,螺体攻击血吸虫幼虫的效力愈强.这现象在单独感染日本血吸虫的钉螺体内未见到.
作者：唐崇惕；卢明科；彭文峰；陈东 刊期： 2018年第02期
目的 了解我国不同宿主来源空肠弯曲菌对喹诺酮及氟喹诺酮类抗生素的耐药现状,分析耐药菌株的耐药机制.方法 利用96孔琼脂稀释法分析不同来源空肠弯曲菌对萘啶酸、环丙沙星两种抗生素的小抑菌浓度(MIC).对102株检测耐药的菌株和27株敏感菌株通过基因测序的方法分析其耐药机制.结果 234株空肠弯曲菌中共筛查到218株(93.16％)萘啶酸耐药菌株,其中鸡粪和鸭粪来源菌株耐药率均为100.00％,腹泻病人粪便来源菌株耐药率是97.96％,食品动物来源菌株耐药率是97.83％,牛粪来源菌株耐药率是77.97％,耐药率差异有统计学意义(P＜0.05),鸡粪和鸭粪来源菌株耐药率高;211株(90.17％)环丙沙星耐药菌株,其中鸡粪和鸭粪来源菌株耐药率均为100％,腹泻病人粪便来源菌株耐药率是91.84％,食品动物来源菌株耐药率是95.65％,牛粪来源菌株耐药率是77.97％,耐药率差异有统计学意义(P＜0.05),鸡粪和鸭粪来源菌株耐药率高.所有的耐药菌株gyrA基因的喹诺酮类耐药决定区(QRDR)都存在Thr-86-Ile点突变.gyrB基因相关区域测序显示不存在有意义突变.结论 我国分离空肠弯曲菌菌株对萘啶酸、环丙沙星耐药严重,gyrA基因QRDR内的Thr-86-Ile突变能引起空肠弯曲菌对喹诺酮类及氟喹诺酮类抗生素高水平耐药.
作者：付燕燕；顾一心；宋立；李颖；段永翔；梁昊；张茂俊 刊期： 2018年第02期
目的 在BALB/c小鼠体内评价阿苯达唑(ABZ)联合干扰素(interferon,IFN)-α对于CE的治疗效果.方法 Balb/c小鼠原头蚴腹腔继发感染5个月后,小鼠被随机分配到4组:ABZ组、IFN-α组、ABZ+ IFN-α组和未经处理对照组.不同处理组分别给药2个月.在治疗的第0、7、14、28、36、48、60 d从小鼠尾静脉采血检测血清中抗体水平变化.治疗结束后处死小鼠,检测相关指标评价治疗效果.结果 与对照组(P＜0.01)或ABZ组(P＜0.05)相比,ABZ+ IFN-α组包囊的数量、大小及重量都显著减少.对不同处理组的包囊进行透射电镜观察(TEM)发现,ABZ+ IFN-α组的包囊的超微结构发生了明显的改变.ELISA实验结果表明,ABZ+ IFN-α组的血清与脾细胞分泌的白细胞介素(interleukin,IL)-10显著下降(P＜0.01);血清中IgE、IgG抗体及其亚型浓度与对照组相比显著降低(P＜0.01).结论 本研究证实ABZ联合IFN-α可能成是一种有效的CE治疗方案.
作者：云哲琳；周永升；张焱；李冰 刊期： 2018年第02期
目的 分析重庆市流感发病趋势,探讨低温对流感发病率的独立影响,为制定流感的防控措施和策略提供参考.方法 基于重庆市2010-2015年流感报告发病数据与同期气象资料,以温度为自变量、日流感发病率为因变量,均衡气压、气流等混杂因素,进行卡钳值为0.1的倾向值匹配,建立均衡混杂因素后的负二项回归模型.结果 2010-2015年间重庆市流感流行强度总体有上升趋势(x2 =38.61,P＜0.001);混杂气象因素在经倾向值匹配后的模型中得到平衡,负二项回归模型在x检验、偏差、调整偏差、AIC、AICC上均优于匹配前的对应模型;且日低气温越低,流感日发病率越高.结论 气象因素对流感发病影响有滞后性;匹配前采用负二项回归控制混杂因素可能会低估温度对流感发病的影响;倾向值匹配后的负二项回归模型预测流感发病率,其结果更可靠;此外,低温可能是导致流感发病率增加的一个重要气象因子.
作者：明鑫；肖达勇；何晶晶；刘勋；谢佳伽；王怡；邓丹 刊期： 2018年第02期
目的 评价胶体金免疫层析法检测血清中结核分枝杆菌特异性IgG/IgM抗体在结核病诊断中的应用价值.方法 收集结核病患者和健康人的血清样本共332份及其背景资料,采用胶体金法检测血清中特异性结核抗体IgG/IgM,与临床诊断和细菌学检测结果比较,使用SPSS 22.0统计软件对结果进行比较分析,以P＜0.05为差异具有统计学意义.结果 胶体金免疫层析法检测结核病患者中特异性结核抗体IgG/IgM的灵敏度为41.15％、特异性为91.67％,检测菌阳和菌阴结核病患者的敏感性分别为51.38％和33.77％.在全部结核病患者中,特异性结核抗体IgG/IgM检测检出率(41.15％)显著高于痰涂片法(18.84％)和痰菌培养法(36.15％)(P＜0.05).结核抗体检测、痰涂片法和痰培养法三种方法联合检测阳性率为61.54％,高于单种方法检测或其中两种方法联合检测.结论 胶体金免疫层析法检测血清中结核分枝杆菌抗体具有灵敏、特异、快速和简便等优点,可用于结核病的筛查,同时该方法也具有一定的局限性,敏感度和特异度有待进一步的提高,因此不可单独用于诊断结核病,可配合痰细菌学、影像学和临床表现等进行辅助诊断.
作者：李霜君；张治国；余琴；罗巧；王莉；李晓琴；李马超；刘海灿；万康林 刊期： 2018年第02期
目的 分析宁波地区耐多药结核分枝杆菌(Multiple drug-resistant tuberculosis,MDR-TB)不同基因型构成及氨基糖苷类药物耐药相关基因突变特征,为本地区耐多药结核病防控提供科学依据.方法 宁波市疾病预防控制中心2014-2016年耐药监测组共收集106例MDR-TB临床分离株,对其进行3种氨基糖苷类药物卡那霉素(Km)、阿米卡星(Am)、卷曲霉素(Cm)耐药检测.应用RD105缺失基因检测法鉴定北京基因型及非北京基因型菌株.采用DNA直接测序法对所有MDR-TB菌株氨基糖苷类药物耐药相关基因rrs、tlyA、eis、gidB进行测序分析.结果 106株MDR-TB菌株中,北京基因型83株78.3％(83/106),非北京基因型23株(21.7％,23/106).耐氨基糖苷类药物的菌株中北京基因型10株12.0％(10/83),非北京基因型0株0.0％(0/23).10例耐氨基糖苷类药物的耐多药菌株中有4株发生耐药基因突变,突变率为40.0％(4/10),96例对氨基糖苷类药物全敏感的耐多药菌株中有24株发生耐药基因突变,突变率为26.7％(24/96),差异无统计学意义(x2=1.048,P＞0.05).结论 宁波地区MDR-TB中北京基因型与氨基糖苷类药物耐药相关,目前已知的耐药相关基因突变不能完全解释结核分枝杆菌对氨基糖苷类药物耐药的原因.
作者：车洋；杨天池；平国华；林律 刊期： 2018年第02期
金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)是一种常见的人兽共患病病原菌,其分泌的外毒素如溶血素、杀白细胞素、脱皮毒素、肠毒素等可引发人或养殖动物多种疾病.耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)是携带含mec基因簇的葡萄球菌盒氏染色体(Staphylococcal chromosome cassette mec,SCCmec)遗传元件的多重耐药菌.SCCmec对MRSA的多重耐药性起重要作用.SCCmec元件中mecA基因介导了MRSA对β-内酰胺类药物的耐药性,而SCCmec元件的可变区插入的耐药基因对MRSA的多重耐药性具有重要作用.近年来,欧洲、北美等国家陆续报道在养殖业环境及动物中检测到多重耐药的养殖源MRSA(Livestock-associated MRSA,LA-MRSA),且LA-MRSA可以通过养殖环境等途径传播到人,对人的健康和公共卫生安全构成潜在威胁.本文综述了S.aureus的耐药性变化、MRSA的SCCmec耐药元件和SCCmec型别变迁以及LA-MRSA的毒力危害和流行状况,对了解S.aureus耐药性和SCCmec分型以及控制和预防LA-MRSA在人兽间传播、感染具有一定的指导意义.
作者：张阳；周文渊；张志刚；邹忠爱；闫鹤 刊期： 2018年第02期
目的 了解中国不同地区市售鸡肉源大肠杆菌耐药性和耐药特征,为抗生素的合理使用提供参考.方法 对全国8个省市的超市或农贸市场随机采集的1 152份鸡肉样品进行大肠杆菌的分离鉴定,采用琼脂稀释法对15种抗生素进行药敏试验.结果 鸡肉大肠杆菌的分离率为65.97％;大肠杆菌对15种抗生素具有不同程度的耐药,萘啶酮酸、阿莫西林—克拉维酸、四环素、甲氧苄啶—新诺明和氨苄西林的耐药率高达60％以上;而对加替沙星、头孢哌酮和阿米卡星的抗性均低于20％.大肠杆菌多重耐药为70.53％,其中以8重耐药多10.26％.结论 大肠杆菌存在区域性耐药差异,并且多重耐药现象严重,存在通过食物链传播给人的风险.
作者：李穗霞；席美丽；王盼盼；吴倩；吴聪明；沈建忠；付骋宇；张鹏飞；王新 刊期： 2018年第02期
目的 克隆羊传染性脓疱病毒(Orf virus,ORFV) ORF047基因,并进行真核表达及亚细胞定位,为筛选与其相互作用的蛋白提供依据.方法 提取羊传染性脓疱病毒分离株的DNA,以其为模板,参照OV-SA00毒株(NC-005336.1)基因ORF047序列,采用PCR技术扩增ORFV ORF047基因片段,凝胶回收后将其插入pEGFP-N1载体,构建重组质粒pEGFP-ORF047,测序后重组质粒共转染293T细胞,Western blotting鉴定融合蛋白的表达.后将重组质粒pEGFP-ORF047与pH-cRed1-Nuc、pHCRed1-mito、pHeRed1-ER分别共转染Vero-E6细胞,通过激光共聚焦显微镜对融合蛋白进行亚细胞定位分析.结果 ORFV ORF047基因片段大小为735 bp;重组质粒pEGFP-ORF047能够在293 T细胞中明显表达融合有目的分子的绿色荧光蛋白,Western blotting检测表达的融合蛋白大小约54 kD;亚细胞定位分析表明,ORF047蛋白主要定位于胞浆中,少量在线粒体中.结论 成功分析了ORF047基因的表达与其蛋白在亚细胞定位.
作者：陈国华；贾怀杰；何小兵；王春燕；金启旺；景志忠 刊期： 2018年第02期
目的 筛选出包虫病特异性诊断抗原分子并验证其免疫原性.方法 对国家人类基因组南方研究中心公布的细粒棘球绦虫测序数据进行分析,利用生物信息学的方法筛选出六钩蚴中不表达且原头蚴中高表达的抗原分子Eg-07279,经重组克隆、表达后用亲和层析法纯化获得重组蛋白rEg-07279;重组蛋白免疫小鼠检测其特异性IgG水平并使用Western blot验证其免疫原性.结果 筛选出的抗原分子Eg-07279经克隆、表达、纯化获得重组蛋白.利用该重组蛋白免疫小鼠,ELISA检测结果显示Eg-07279产生的特异性IgG水平(2.559±0.125)明显高于空白组(0.319 0±0.01),差异有统计学意义(P＜0.01);Western blot检测结果显示原头蚴继发感染组和重组蛋白免疫组血清均可识别该重组蛋白而空白对照组鼠血清不能识别.结论 获得细粒棘球蚴差异表达抗原Eg-07279并证实该重组蛋白具有较好的免疫原性,是较好的诊断抗原候选分子.
作者：徐士梅；赵殷奇；朱明星；赵嘉庆；王浩；赵巍 刊期： 2018年第02期
目的 探讨旋毛虫肌幼虫虫体蛋白对小细胞肺癌H446细胞凋亡的影响及其作用的可能机制.方法 将H446细胞与0.2 mg/mL、0.4 mg/mL、0.6 mg/mL、0.8 mg/mL、1.0 mg/mL、1.2 mg/mL虫体蛋白分别培养并设为实验组,不处理的H446细胞设为对照组,采用噻唑兰(MTT)比色法检测旋毛虫肌幼虫虫体蛋白对H446细胞增殖活性的抑制作用;采用流式细胞术(FCM)检测旋毛虫肌幼虫虫体蛋白诱导H446细胞株凋亡的情况;采用Real-timePCR及Western blot法检测细胞色素C(cytochrome C,Cyt-C)和凋亡蛋白酶活化因子(apoptotic protease activating factor 1,Apaf-1) mRNA及蛋白的表达.结果 MTT比色法结果表明虫体蛋白能够抑制H446细胞增殖活性;流式细胞术结果表明虫体蛋白作用于H446细胞24 h后,有明显的促凋亡作用;Real-timePCR及Western blot法结果显示,与阴性对照组相比,促凋亡基因Cyt-C和Apaf-1表达均上调.结论 旋毛虫肌幼虫虫体蛋白能够抑制H446细胞增殖活性,并诱导细胞凋亡,其作用可能与Cyt-C和Apaf-1表达上调有关.
作者：于莉；苏萌；谢广成；李丹；邴玉艳；方艳辉；赵蕾；杜娈英 刊期： 2018年第02期
Q热(Q fever)为一种世界性分布的重要人兽共患病,疫苗接种是预防Q热的有效手段.专性细胞内寄生的贝氏柯克斯体是Q热的病原体,灭活I相贝氏柯克斯体Q热疫苗(WCV)免疫保护效能几乎为100％,但是其免疫副反应强.氯仿—甲醇提取贝氏柯克斯体(CMR)和三氯醋酸提取贝氏柯克斯体可溶性抗原(TCA)Q热疫苗保留灭活Q热疫苗的免疫保护效能,且免疫副反应显著减轻.但CMR和TCA Q热疫苗均需要用鸡胚大量培养贝氏柯克斯体,需要在高等级生物防护实验室采用复杂步骤提取、纯化贝氏柯克斯体,这些使Q热疫苗的生产成本高、批量生产难.近十年来,国内外Q热疫苗研究着力于分子疫苗,并已经由研究贝氏柯克斯体保护性抗原转移到筛选能诱导特异性细胞免疫应答的C D4+和CD8+T细胞表位上,以期望T细胞表位在机体内高效表达,诱导机体产生良好的抗Q热保护性免疫应答.
作者：熊小路；焦俊；温博海 刊期： 2018年第02期
许多病原菌能产生溶血素溶解红细胞,但近年发现细菌溶血素还能损伤或致死多种有核细胞和血小板.根据分子结构、结合细胞方式、膜孔道形成机制等不同,可将大多数细菌溶血素分类为重复子毒素家族(repeats in toxin family,RTX)和胆固醇依赖细胞溶素家族(cholesterol-dependent cytolysin family,CDC)毒素.细菌溶血素可通过膜损伤、细胞溶解或裂解、离子失衡相关病变、细胞凋亡或坏死性凋亡以及TLR2/4介导的NF-κB、p38MAPK、JNK信号传导通路和NLRs介导的NLRP3炎症小体引发强烈的炎症反应并导致炎症性组织损伤,从而在细菌感染过程中发挥重要致病作用.
作者：马碧书；马丽娜；林旭瑷；严杰 刊期： 2018年第02期
近年来,国际新发、烈性传染病疫情发生的频率大大加快,对我国的影响也日益加大.西尼罗病毒、马尔堡病毒、拉沙病毒、委内瑞拉马脑炎病毒、尼帕病毒、布氏锥虫、裂谷热病毒等多种人兽共患病原体均曾引起过人间或动物间较大规模的暴发流行.随着我国对外经贸、人员往来的日趋频繁,上述传染病疫情存在传入我国并引起国内地方性流行的巨大风险,应引起我国高度关注.
作者：李小波；黄吉城 刊期： 2018年第02期
目的 分析安徽省首例人感染H5N6禽流感病例发病与流行病学特征,为制定监测方案与防控措施提供科学依据.方法 对人感染H5N6禽流感病例、密切接触者、感染来源进行流行病学调查,采集相关生物和环境标本进行实验室检测,应用描述性流行病学方法进行分析.结果 安徽省首例人感染H5N6禽流感病例为单个散发病例,密切接触者无感染,早期临床表现无特异性,发病前一周有明确的病死禽接触史,病禽市场检出2份H5N6阳性标本.结论 该病例为本地感染病例,感染来源与接触病死禽有关,未发现人传人的证据.
作者：张进；侯赛；吴家兵；史永林；何军；吴光健；夏志才 刊期： 2018年第02期
