目的 探讨弓形虫Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ型 ROP16对宿主基因表达谱的影响及其意义.方法 以 A549细胞株为研究模型,建立弓形虫Ι、Ⅱ和Ⅲ型ROP16稳定转染的A549细胞株,通过表达谱芯片技术筛选差异表达基因,并对差异基因进行GO分析和Pathway通路分析.结果 对差异基因进行聚类,发现 ROP16Ⅰ转染组776个基因表达上调,494个基因表达下调;ROP16Ⅲ转染组842个基因表达上调,520个基因表达下调;而ROP16Ⅱ转染组5063个基因表达上调,5989个基因表达下调.另外,ROP16Ⅰ/Ⅲ转染组基因表达谱相似.而 ROP16Ⅱ转染组则不同,表达谱差异显著.对 ROP16Ⅱ转染组差异基因进行 Path-way通路分析发现,显著改变的通路共有74条,其中 ROP16Ⅱ单独调控的信号通路有19条,主要与 NF-κB、Toll 样受体,趋化因子等信号通路、炎症反应及免疫调节和代谢等相关.结论 ROP16入侵宿主细胞核后影响宿主细胞基因表达谱.同Ι、Ⅲ型弓形虫相比,Ⅱ型弓形虫在基因组上的差异导致其具有独特的差异基因表达谱和信号通路,了解其单独调控的信号通路对于Ⅱ型弓形虫的防治具有重要意义.
作者:苏雅静;董辉;王云杰;刘学雷;赵志军 刊期: 2018年第03期
目的 建立荧光定量PCR (qPCR)对流产衣原体的检测方法.在流产衣原体灭活疫苗的生产中,代替具有主观判断影响的涂片染色疫苗效价检测方法.方法 根据流产衣原体富含半胱氨酸的胞质蛋白(envB)基因保守序列设计特异性引物,利用 EnvB-PMD19T阳性质粒为参考标准品,优化了反应条件,进行了敏感性、特异性及重复性试验,检测了感染流产衣原体小鼠的菌体载量.结果 以重组质粒为标准品建立的标准曲线在1×102copies/μL~1×106copies/μL内呈现良好的线性关系,扩增效率为97%.灵敏度试验表明,该检测方法的低检出限低至10 copies/μL.组内、组间重复性试验的变异系数均小于2 %,具有良好的重复性和稳定性.消化道检测到的菌体载量高于腹腔注射的菌体载量.结论 本研究建立的方法能够有效的检测小鼠相应脏器的菌体含量,为流产衣原体灭活疫苗的效检提供可靠的检测方法.
作者:张志君;李兆才;娄忠子;周继章 刊期: 2018年第03期
目的 调查澳门地区鸡源性产气荚膜梭菌的污染情况及基因分型.方法 利用双管法分离产气荚膜梭菌,再作生化测试以鉴定;利用多重PCR测定分离菌株的基因分型.结果 从120个样本中检出率为37.5%,所分离到的产气荚膜梭菌均为 A 型产气荚膜梭菌.结论 初步研究指出本澳供应的鸡肠、新鲜鸡和冰鲜鸡中存在 A 型产气荚膜梭菌污染,为产气荚膜梭菌所致的公共卫生问题提供了参考数据.
作者:陆宗浩;黄慧怡;梁晓君;吴志君;李婉芬 刊期: 2018年第03期
目的 研究人工建立肝脏接种泡球蚴模型后小鼠的死亡规律及主要死亡原因,探讨造模术后导致死亡的主要并发症的风险因素及预防.方法 开腹直视肝脏穿刺法接种50只健康昆明小鼠,术后15 d内动态观察小鼠的生理变化并记录死亡时间与数量,着重分析其死亡原因及相关因素.结果 术后15 d共死亡19只,第9 d死亡1只,其余18只在术后7 d内死亡.术后死亡量于第2d开始上升,第4、5d达高峰后逐渐下降至第7d死亡1只.结论 泡球蚴接种术后小鼠的主要死亡原因与手术方式、麻醉、感染、泡球蚴的抗原性、肝损伤等导致的并发症密切相关.有效预防此类并发症是提高造模生存率的关键.
作者:王岩;苏争明;陈骞;张怀;李江;代平;张示杰 刊期: 2018年第03期
目的 建立检测隐孢子虫的夹心 ELISA方法.方法 本试验以纯化的抗隐孢子虫 IgG、IgY分别作为包被抗体和捕获抗体,棋盘滴定法确定夹心 ELISA的适工作条件.用基于18SrRNA的PCR方法评估饱和蔗糖溶液、饱和食盐水漂浮和PBST洗涤剂洗涤3种方法预处理样品对夹心 ELISA检测效果的影响.结果 建立的夹心 ELISA 捕获抗体、抗原、检测抗体、酶标二抗佳工作浓度分别是1:800、2.5 μg/mL、1:100和1:5000,适捕获抗体包被、抗原抗体反应、酶标二抗反应条件分别为37 ℃作用1 h后4 ℃过夜、37 ℃作用30 min、45 min;适终止条件是2 mol/L H2SO4,50 μL/孔;TMB室温显色10 min;特异性试验结果显示仅可以检出隐孢子虫抗原,而与常见肠道寄生的球虫卵囊、圆线虫和蛔虫虫卵无交叉反应.批间和批内变异系数均小于10%.3种方法前处理粪便用于 ELISA检测与 nested-PCR检测结果总符合率分别为95.83%、91.67%和83.33%,以饱和蔗糖溶液漂浮法处理检测样品的效果佳.与爱德士的隐孢子虫检测试剂盒比较,结果显示,本方法敏感性低于爱德士试剂盒的低检出量(6×103个/mL),整个试验过程比试剂盒多用15 min,但特异性和重复性均一致,且本试验方法更加经济实用.结论 该方法简便,快速,灵敏,可用于临床粪样中隐孢子虫病原检测或隐孢子虫流行病学调查研究.
作者:张璐;刘珍珍;陈凯丽;王荣军;张龙现;宁长申;菅复春 刊期: 2018年第03期
目的 对云南省永善县恙虫病开展流行病学调查.方法 应用胶体金免疫试验对发热患者血清进行恙虫病东方体(Orientia tsutsugamsushi)IgG和 IgM抗体检测,采用夜夹法诱捕调查地区鼠类,用巢氏 PCR方法对鼠脾脏做groEL 基因片段扩增和基因序列分析.结果 2015年5-10月在永善县发现恙虫病患者34例,其中实验室确诊病例21例,临床诊断病例13例;主要发病于8月,占总病例数的32.35%;40—49岁年龄组发病多,占总病例数的32.35%;农民发病数多,占总病例数的79.41%;有焦痂或溃疡的病例占总病例数的94.12%,其中位于腹股沟多(占有焦痂或溃疡患者的31.25%);有皮疹的病例占总病例数的50.00%.在捕获的39 份黄胸鼠(Rattus flavipectus)脾组织样品中,恙虫病东方体groEL基因片段扩增阳性 9 份(阳性率 23.08%).groEL基因片段序列进化树分析显示本次检测到的 YSP30 株与的 HSB1、FAR1、UAP4 等Saitama型菌株的遗传进化关系密切,检测到的其余8株与 UT213、UT221、SH205等 Karp 型菌株的遗传进化关系密切.结论 血清学和分子生物学方法证实了永善县存在恙虫病疫源地,当地存在 Karp 和 Saitama相关的2种基因型恙虫病东方体.
作者:亚红祥;董万贤;魏培发;周天惠;周济华;张云智;樊荣 刊期: 2018年第03期
目的 比较 RT-LAMP、LAMP、L-J 法检测 MTB的效果,为结核病的快速诊断提供依据.方法 用常见的非结核分枝杆菌与其他常见的呼吸道感染病菌(金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯杆菌)检测特异性,并用酶切实验对结核分枝杆菌特异性产物进行酶切鉴定;用 RT-LAMP、LAMP、L-J 法检测100名结核病患者和22名来自无结核病患者痰标本中的结核分枝杆菌测试灵敏性;对浓度为1 ng/μL H37Rv标准株进行对倍比稀释用于 RT-LAMP 极限检测实验.结果 RT-LAMP、LAMP、L-J 方法的阳性率分别为100%,92%和88%;RT-LAMP和L-J,RT-LAMP和LAMP差异均有统计学意义;RT-LAMP的灵敏度比LAMP高10倍;RT-LAMP不仅可以识别活菌,并且能够重复检测MTB的单一拷贝.结论 RT-LAMP检测效果优于 LAMP及 L-J,适于基层医院结核病诊断的推广和应用.
作者:吴丹丹;李保胜;亢继文;孙殿兴 刊期: 2018年第03期
目的 分析中缅树鼩(Tupaiabelangeri,Tree Shrew)自然感染 5 种高致病性人腺病毒(Human Adenovirus, HAdv)的血清流行病学,以探讨人腺病毒感染树鼩的可能性.方法 采用固定病毒稀释血清法测定34份树鼩血清对 Ad3、Ad4、Ad7、Ad14和 Ad55的中和抗体水平.结果 4种B组腺病毒的中和抗体阳性率及中和效价较 E组4型的大,阳性率由大到小依次为:Ad14(55.88%)、Ad3(47.06%)、Ad55(29.71%)、Ad7(14.71%)、Ad4(8.82%),树鼩血清主要表现为 Ad3、Ad14和 Ad55混合型多价抗血清.结论 中缅树鼩可自然感染5种人腺病毒,有望以树鼩为实验动物,建立一种成熟的人腺病毒感染模型.
作者:李潇;周志超;田新贵;廖嘉仪;樊晔 刊期: 2018年第03期
目的 分析全国狂犬病疫情的时间分布特征,探讨用自回归移动平均模型(Autoregressive Integrated Moving Average Model,ARIMA)预测疫情发展趋势的可行性.方法 建立2004 ― 2015年全国狂犬病月度发病率时间序列,用 R3. 3.2软件建立优 ARIMA模型,对2016年1~11月发病率进行预测,并评价预测效果.结果 2007年以来我国狂犬病年发病率呈下降趋势,8~10月为高峰季节;建立的优模型为 ARIMA(2,1,1)(2,0,0)12,其平均绝对标准化误差(The mean ab-solute error,MASE)为0.755;2016年1~11月发病率预测结果显示,平均相对误差为15.61%.结论 我国狂犬病疫情存在季节性发病高峰,ARIMA模型能用于我国狂犬病疫情的短期预测.
作者:任江萍;陈直平;孙继民;陈恩富;施旭光;张蓉;刘营;凌锋 刊期: 2018年第03期
目的 了解肉鸭屠宰生产链中沙门氏菌的污染、耐药状况以及毒力基因携带情况.方法 参照 GB 4789.4-2010,从肉鸭屠宰链中分离疑似沙门氏菌,采用双重PCR对疑似菌株进行准确鉴定,并进行血清分型;采用纸片扩散法对分离株进行10种抗菌药物敏感性试验,根据CLSI标准判定结果;通过PCR检测与沙门氏菌致病性相关的9个基因.结果 343份样品共分离鉴定出99株沙门氏菌,总体分离率为28.86%,宰前、脱毛、掏膛、分割、宰后样品沙门氏菌分离率分别为45.71%、22.68%、24.72%、38.33%、25.81%;分离株共产生了7种血清型,以印第安纳、纽兰和鸭沙门氏菌为优势血清型;药敏试验结果表明,沙门氏菌对 NAL(91.92%)的耐药率高,对 TET(43.43%)、AMP(42.42%)、SXT(34.34%)、CIP(29.29%)、CRO (27.27%)、GEN(24.24%)、KAN(22.22%)的耐药率相对较低,对 AMC(9.09%)和 MH(6.06%)的耐药率低,多重耐药率为47.47%,其中印第安纳、伤寒和鼠伤寒沙门氏菌的耐药性较突出;沙门氏菌分离株 spvR(94.95%)、avrA(93.94%)、ssaQ (90.91%)、mgtC(87.88%)、sopB(83.84%)、bcfC(80.81%)、siiD(77.78%)毒力基因的携带率较高,spvB(29.29%)和spvC (11.11%)的携带率较低.结论 肉鸭屠宰生产链容易受到不同血清型、不同耐药特征,且毒力基因携带率高的沙门氏菌污染,相关企业和部门应当在卫生和抗菌药物的使用上加强监督和管理,保障食品安全和公众健康.
作者:彭峻烽;曾杭;吴思凡;邢天;巫梦雨;黄勇;邹立扣;刘书亮;韩新锋 刊期: 2018年第03期
艾滋病在全球采用联合抗逆转录病毒治疗后发病率及死亡率呈持续下降趋势,使之成为一种可管理的慢性传染病.但因受各种因素制约,艾滋病仍然是全球一个重要公共卫生问题.HIV/AIDS 持续存在的主要原因是现有的治疗无法清除人体中存在的 HIV潜伏库,由于这种库的存在,HIV/AIDS患者必须终生使用抗病毒药物来抑制病毒复制和反弹.成簇规律间隔短回文重复序列和相关核酸酶Cas9(CRISPR/Cas9)系统几年前以一种简单、快速及易操作的基因编辑技术问世,多项研究表明其在 HIV感染的细胞和在动物模型实验中具有消除或破坏 HIV储存库或 HIV感染细胞的潜力,可能由此产生治愈 HIV/AIDS的方法.本文分析了CRISPR/CAS9系统应用于消除潜伏 HIV的结果,并对可能产生的问题和趋势进行了讨论.
作者:严延生;吴守丽 刊期: 2018年第03期
隐孢子虫是重要的食源性和水源性人兽共患原虫之一,主要引起人和动物腹泻.本文对马属动物隐孢子虫病的病原分类、人兽共患风险、致病性和地理隔离特征进行综述,为隐孢子虫病的有效防控提供参考.
作者:齐萌;张龙现 刊期: 2018年第03期
蠕虫感染可导致宿主脏器、消化道等发生病理损伤,危害人和动物的健康,造成繁殖能力下降,抑制幼年动物的生长发育,严重情况下甚至可导致人和动物的死亡,对公共卫生和畜牧业经济发展造成重大影响.目前,蠕虫病的防控主要依靠包括驱虫在内的综合防治措施,但由于药效不佳、药物残留、耐药性的产生等问题,新型药物及疫苗研发迫在眉睫,迄今为止少有理想的疫苗来防治蠕虫病.这是由于蠕虫在长期进化的过程中,进化出了逃避宿主免疫攻击的机制,例如免疫隔离、抗原变异、分子模拟等.因此,本文综述近年来寄生蠕虫免疫逃避机制的新研究进展,旨在为开发有效防控蠕虫病的新型疫苗或药物提供参考.
作者:田艾灵;张芙恺;陈丹;黄思扬;朱兴全 刊期: 2018年第03期
ATG5和BECLIN-1(酵母 ATG6同源物)是自噬体形成过程中所必需的两种自噬相关蛋白质,它们除了促进自噬体的形成,还能诱导细胞凋亡的发生,被认为是调控细胞自噬和凋亡的分子开关蛋白.前期研究揭示 ATG5通过组成泛素化系统 ATG5-ATG12-ATG16L介导自噬体的形成,而BECLIN-1通过组成磷脂酰肌醇3-激酶(PtdIns3KC3)复合体诱导细胞自噬,现在认为 ATG5的氨基端截短分子 tATG5-N和BECLIN-1的羧基端截短分子 BECLIN-1-C 能诱导细胞凋亡.本研究对近年来 ATG5和 BECLIN-1调控细胞自噬和凋亡的研究进展作一综述,为研究 ATG5/BECLIN-1调控细胞自噬和凋亡的分子机理奠定基础.
作者:谢昆;李密杰;蒋成砚;鲁海菊;孔琼;高波;杨婉莹 刊期: 2018年第03期
目的 分析宁波地区肺吸虫病患儿的临床特征,为儿童肺吸虫病的临床诊治提供依据,减少误诊率.方法 收集2010年1月至2016年12月宁波市妇女儿童医院儿科确诊的儿童肺吸虫病病例共36例,回顾性分析患儿的临床特点及诊治情况.结果 36例患儿年龄3.4岁-12岁,平均年龄6.6岁,其中男20例,女16例,城区22例,农村14例;29例发病前有生吃或烤吃溪蟹、淡水虾病史,7例有下水游泳捕捉溪蟹或饮用生溪水史.临床症状以咳嗽咳痰、发热、胸闷胸痛、腹痛为主. 36例外周血嗜酸性粒细胞比例及绝对值计数均增高,31例血 IgE明显升高,36例肺吸虫血清抗体检测均阳性.32例患儿胸部CT显示以为肺内斑片影及胸腔积液为主的异常表现.头颅MRI检查2例存在肺吸虫脑病影像学表现.36例患儿在确诊后均给予吡喹酮治疗,均未出现明显不良反应.结论 宁波地区儿童肺吸虫病临床表现复杂多样,应详细询问患儿的饮食及生活习惯病史,并结合外周血嗜酸性粒细胞、IgE检测结果及影像学资料综合分析,从而早期诊断及治疗,减少误诊率.
作者:吕海涛;沈腾腾;郑吉善 刊期: 2018年第03期
目的 探讨西双版纳州登革热合并脂肪肝病例的肝脏酶学变化特征,为制定当地登革热有效治疗方案提供依据.方法 对2013和2015年西双版纳州191例登革病毒感染合并脂肪肝病例临床资料和191例随机对照组进行登革病例主要肝脏酶学指标回顾性分析.结果 191例登革病毒感染合并脂肪肝患者丙氨酸氨基转氨酶增高率为84.8%,天门冬氨酸氨基转氨酶增高率为90.1%,γ-谷氨酰转移酶增高率76.8%和黄疸指数增高率20.4%,除黄疸指数外,其它3个指标均明显高于对照组(P<0.05).结论 西双版纳州登革热病例中合并脂肪肝患者肝损伤严重,其中以丙氨酸氨基转氨酶、天门冬氨酸氨基转氨酶、γ-谷氨酰转移酶增高为主,提示一旦发现登革热患者合并脂肪肝时,临床医师应密切监测患者上述3种酶的变化并及时给予相关治疗.
作者:崔新国;陈邑洪;周红宁;刘霭迎;张丽红 刊期: 2018年第03期