目的 了解2013-2014年贵阳市腹泻监测病例中沙门菌的血清型别分布及脉冲场凝胶电泳(Pulse-Field Gel E-lectrophoresis,PFGE)分型特征,为贵阳市沙门菌病的防控提供科学依据.方法 收集2013-2014年贵阳市4家哨点医院感染性腹泻病例的432份粪便标本,对其进行沙门菌的分离培养、生化鉴定、血清分型及PFGE分型.结果 432例感染性腹泻患者的粪便标本共检出沙门菌35株,检出率为8.10%(35/432),男女检出之比为1.5:1,发病年龄主要集中在0~5岁;各季度间沙门菌检出率经Fisher确切概率法比较无统计学差异(P=0.052).35株沙门菌分成9种血清型,其中优势血清型为肠炎沙门菌11株(占31.43%)和鼠伤寒沙门菌9株(占25.71%),其次克勒肯威尔沙门菌6株(占17.14%),斯坦利沙门菌3株,德尔卑沙门菌2株,阿贡纳沙门菌、婴儿沙门菌和病牛沙门菌血清型各1株,1株未分型.经XbaⅠ酶切后11株肠炎沙门菌分成8种PFGE型,优势型为JEGX01.CN0007;9株鼠伤寒沙门菌分成9种PFGE型,总体型别呈多样性分布.结论 贵阳市引起感染性腹泻的沙门菌以肠炎沙门菌和鼠伤寒沙门菌为主,PFGE型别呈多样性.
作者:游旅;何寻面;韦小瑜;李世军;王斌;黄荷;唐光鹏;朱琳;王定明 刊期: 2018年第08期
目的 研究2013年贵州省急性弛缓性麻痹(acute flaccid paralysis,AFP)病例中非脊髓灰质炎肠道病毒(non-polio enterovirus,NPEV)的基因型别,并对分离的柯萨奇病毒A4型(coxsackievirus,CVA4)进行基因特征分析.方法 2013年贵州省共报告15岁以下AFP病例235例,采用RD细胞和L20B细胞对235例AFP病例粪便标本进行病毒分离,对分离到的NPEV进行VP1基因序列测定分型.通过MEGA7.0软件采用邻位相接法(neighbor joining method)构建遗传进化树进行基因特征分析,可靠性通过1000 bootstrap值评估.结果 235例AFP病例中共检测到24株NPEV(10.2%),有2株无法定型,另外22株共包括12个血清型,其中人类肠道病毒(human enterovirus,HEV)A组包括4个血清型6株,其中3株为CVA4,均属于C2基因亚型;HEV-B组包括7个血清型15株,1株为HEV-C组,未分离到HEV-D组病毒.结论 2013年贵州省AFP病例病原谱包括多种型别的NPEV,其中CVA4基因特征分析表明2013年贵州地区流行的CVA4毒株为C2基因亚型.
作者:王宇;任刚;王寅寅;苏飞;唐小敏;叶绪芳 刊期: 2018年第08期
目的 探讨rDNA-ITS基因序列在吸血蠓分子鉴定中的应用前景.方法 通过PCR扩增获取台湾蠛蠓rDNA-ITS基因,测定分析ITS1和ITS2基因序列,构建系统发育树.结果 台湾蠛蠓ITS1和ITS2片段长度分别为310 bp与360 bp,与汤斯维尔铗蠓的同源性大,分别为71%和92%.系统发育分析显示,基于ITS1、ITS2基因序列的分子鉴定结果与传统形态学鉴定结果一致.结论 rDNA-ITS基因序列可作为蠓科昆虫分子鉴定的分子标记.
作者:陈敏;肖颖;林妙端;黄恩炯 刊期: 2018年第08期
目的 探讨结核分枝杆菌感染对小鼠B淋巴细胞分化发育的影响.方法 建立Mtb感染BALB/c小鼠模型,在感染早期(4周)及晚期(8周)分别取小鼠骨髓细胞及脾脏细胞,或经培养后,荧光抗体染色,用流式细胞术对感染早期及晚期小鼠的B细胞表型进行分析,设生理盐水处理的小鼠作为对照.结果 Mtb感染组与对照组比较,pro-B细胞(CD45R+CD43+)(4周:t=2.886,P<0.05)、未成熟B细胞(CD45R+IgM+IgD-)(4周:t=4.760,P<0.05)减少,骨髓成熟B细胞(CD45R+IgM+/-IgD+)(4周:t=-3.485,P<0.05;8周:t=-2.594,P<0.05)与脾脏成熟B细胞(CD45R+IgMlowIgDhi)(4周:t=-2.275,P<0.05;8周:t=-2.97,P<0.05)增多;小鼠脾脏B细胞活化分子CD69表达升高(4周:t=-2.271,P<0.05;8周:t=-2.052,P<0.05);小鼠脾脏记忆性B细胞(CD45R+CD27+IgD+/-)升高(4周:t=-4.203,P<0.05;8周:t=-5.280,P<0.05).结论 Mtb感染能影响B细胞的分化发育,促使B细胞向成熟细胞分化,并能促使B细胞活化,使机体更有利于抗结核的感染.
作者:刘文文;吕艳;王聪;赵微;王涛;白丽 刊期: 2018年第08期
目的 分析福建省外环境H5亚型禽流感病毒分布情况及与人感染H5N6禽流感的关系,为人感染禽流感的科学防治提供依据.方法 收集2013-2017年福建省外环境常规监测标本信息,进行统计分析.从数据库下载相关禽流感病毒基因序列,进行基因同源性比对和系统进化分析.结果 外环境监测结果统计分析显示:2013-2017年共采集样本4903份,H5亚型阳性率为4.24%,且不同的网络实验室(χ2=101.033)、监测场所(χ2=45.526)、标本类型(χ2=31.751)和季节(χ2=48.174)阳性率均存在统计学差异(P<0.05).福建省首例人感染H5N6禽流感(A/Fujian-Sanyuan/21099/2017)病毒全基因序列与6株福建省外环境H5N6病毒的同源性在85.1%~98.5%,与病家院中采集的1株加强监测外环境标本的HA和NA基因同源性分别为100.0% 和99.9%.系统进化分析显示:福建省人感染H5N6病毒HA基因与加强监测的外环境H5N6病毒的进化距离近,与其余6株距离较远,处在不同的进化分枝中,其基因源于H5N8病毒;而NA基因则与7株外环境H5N6病毒的进化距离较近,源于H5N6病毒.结论 福建省冬春季外环境中禽流感活动较为活跃,应加强活禽交易市场的卫生管理工作.福建省发现的首例人感染H5N6禽流感与外环境禽流感病毒的重配可能存在一定的相关性.
作者:陈平;谢剑锋;林琦;赵琳;张炎华;陈宏彬;翁育伟;郑奎城 刊期: 2018年第08期
目的 分析1984-2016年石家庄市肾综合征出血热(HFRS)发病水平变迁,探讨时间序列求和自回归移动平均模型(autoregressive integrated moving average,ARIMA)在肾综合征出血热疫情分析预测中的应用.方法 收集1984-2016年石家庄市HFRS发病率资料,用Excel 2003软件建立数据库,并进行描述性分析;采用SPSS16.0统计分析软件实现模型建立,经过模型识别、参数估计、诊断检验后,利用建立好的模型对2016-2020年石家庄市HFRS发病率进行预测.结果 石家庄市肾综合征出血热发病水平总体呈下降趋势;报告发病数位居前5位的高发地区由1984-1994年的新乐、辛集、藁城、深泽、赵县变迁为2006-2016年的行唐、深泽、平山、元氏及藁城县.2017-2020年石家庄市HFRS年发病率预测值分别为0.44/100000(95%CI:0.00~7.39/100000)、0.54/100000(95%CI:0.00~8.83/100000)、0.54/100000(95%CI:0.00~9.33/100000)、0.47/100000(95%CI:0.00~9.46/100000).结论 石家庄市HFRS发病水平发生了变迁,总体呈下降趋势,高发地区由既往的东部地区向西北部地区扩散.2016-2020年石家庄市HFRS发病略有上升趋势,故需继续加强石家庄市HFRS疫情的防控.
作者:赵树青;张世勇 刊期: 2018年第08期
目的 了解生猪屠宰加工过程中沙门氏菌的污染状况、分离菌株的毒力基因携带情况及其溯源性追踪.方法 应用液相芯片法对分离沙门氏菌进行血清分型,并对分离菌株进行毒力基因筛查,通过基因间重复序列为引物的聚合酶链式反应(ERIC—PCR)分型技术对代表性沙门氏菌分离株进行基因分型,并用NTSYS-pc2.10软件进行聚类分析.结果 1480份样品共得到298株沙门氏菌菌株,分离率为20.14%;98.32%的分离菌株携带肠毒素stn基因;96%以上的分离菌株携带毒力岛SPI1、SPI5核心蛋白基因mog A、ara B以及菌毛基因;选择实验的沙门氏菌遗传相似性在70%~100%之间,共分为9个基因型.结论 山东地区屠宰环节猪肉中分离沙门氏菌携带多种耐药基因和毒力基因,德尔卑、鼠伤寒沙门氏菌占试验菌株的45.97%.
作者:黄秀梅;张倩;盖文燕;曲志娜;李晨阳;赵思俊;赵建梅;赵格;李月华;王玉东;王君玮;王娟 刊期: 2018年第08期
目的 在原核表达系统中表达HPV16 L1蛋白,纯化后在体外自组装成VLPs并鉴定.方法 优化GenBank中HPV16 L1基因序列并截短C末端25个氨基酸,构建至原核表达载体pET-28a上,获得重组表达载体pET28a-16L1△C25.采用镍亲和层析法纯化超声上清,于体外解组装-重组装HPV16 VLPs,采用动态光散射和透射电镜进行形貌分析,纯化后于第0、2和4周免疫小鼠,假病毒中和试验检测HPV16 VLPs免疫后血清中和抗体.结果 双酶切和测序结果表明成功构建pET28a-16L1△C25重组质粒,诱导表达后,经SDS-PAGE和Western blotting分析显示表达的L1蛋白大部分以可溶性形式存在,纯化后的蛋白样品于体外重新组装,动态光散射和透射电镜能够观察到形态与天然病毒颗粒相似的VLPs,第6周小鼠血清中和抗体滴度Log10平均值达到4.43.结论 利用原核表达系统成功表达了截短型HPV16 L1蛋白,并于体外组装成结构完整的VLPs,且具有较好的免疫原性,为低成本HPV预防性疫苗的研发奠定基础.
作者:刘微;郭明旸;纪莉婷;韩亚如;谢文静;王会岩 刊期: 2018年第08期
目的 研究O型口蹄疫病毒中VP21-33肽段能否增强VP1141-160肽段的免疫原性及其可能的免疫机制.方法 分别构建两种新的含有VP1和VP2的重组质粒(PcDNA3.1-VP1、PcDNA3.1-VP2),并将重组质粒制备成纳米颗粒,检测其体外转染效率.然后将上述纳米颗粒作为基因疫苗免疫Balb/c小鼠,PBS及空载质粒作为对照.液相阻断ELISA方法检测不同时间小鼠血清中抗体情况;流式细胞术和免疫组化染色的方法分析免疫小鼠外周血、脾脏和腹股沟淋巴结中CD4+、CD8+T淋巴细胞的差异;淋巴细胞增殖实验检测免疫28 d后小鼠外周血中淋巴细胞的增殖能力.结果 对重组质粒进行鉴定,结果显示重组质粒(PcDNA3.1-VP1、PcDNA3.1-VP2)构建成功;体外转染实验结果显示该纳米颗粒体外转染效率约为28%,具有较高的转染效率.ELISA检测显示VP1与VP2共同免疫小鼠血清中的抗体滴度均在初次免疫后的第21和28 d达到高,并显著高于对照组(F=4.625,P<0.05);流式和免疫组化染色结果分析发现VP1与VP2共同免疫小鼠血液、淋巴结和脾脏中CD4+、CD8+T淋巴细胞数均显著高于对照组;淋巴细胞增殖实验结果显示VP1与VP2共同免疫小鼠淋巴细胞增殖能力均显著高于对照组(F=12.73,P<0.05).结论 O型FMDV VP2的1-33肽段能增强VP1的141-160肽段的免疫原性,其可能通过激活细胞免疫和体液免疫实现.
作者:付丽新;唐冬梅;周彪;刘香易;罗又才;严亨秀 刊期: 2018年第08期
MicroRNAs(miRNAs)作为基因表达关键的转录后调节因子,参与调节上皮细胞防御微小隐孢子虫(Cryptospo-ridium parvum)感染的固有免疫应答.目前,已发现Let-7i,miR-98,miR-27b,miR-513,miR-221,miR-424和miR-503与防御C.parvum感染的固有性免疫调控机制有关,包括调控上皮细胞防御C.parvum感染的反应、启动被感染上皮细胞释放外质体,调控胆管上皮细胞炎性反应,调控TLR/NF-κB信号通路、抑制信号转导转录激活酶蛋白的磷酸化,调控上皮细胞与T细胞的相互作用,以及调控iNOS和IL8 mRNA的稳定性等.本文综述了与C.parvum感染有关的miRNAs在调节宿主细胞固有性免疫反应方面的作用机制.
作者:张贵玲;王艳歌;张素梅;张龙现;王荣军 刊期: 2018年第08期
肺炎支原体是社区获得性肺炎的主要病原体.大环内酯类抗菌药物是治疗儿童肺炎支原体感染的首选药物.近年来我国耐大环内酯肺炎支原体比例有所下降,但仍处于高水平.耐药肺炎支原体感染造成患者发热时间、住院时间延长,并有更高的并发症发生率和抗生素治疗方案改变率,因此对肺炎支原体耐药机制的研究还需进一步深入.肺炎支原体对大环内酯类抗生素耐药机制主要与抗生素作用靶点突变、抗生素作用靶点修饰、药物主动外排、酶性失活有关.
作者:倪珊珊;孙红妹 刊期: 2018年第08期
目的 了解河南省环境中沙门菌的分布情况,探讨环境中沙门菌的不同型别分布和药物敏感情况.方法 采集动物粪便、生熟肉制品和厨具等各类标本4488份,进行沙门菌分离培养、生化鉴定、血清学分型,采用CLSI推荐的K-B法对分离株进行13种抗生素敏感试验.结果 从18种标本中共分离出332株沙门菌,分离率为7.40%;分离株分属于39种血清型,优势血清型是肠炎沙门菌(23.79%)和德尔卑沙门菌(20.18%).环境中沙门菌对各类抗生素均有不同程度的耐药,其中对氨苄西林、四环素和萘啶酸的耐药率较严重,对三代头孢类抗生素和喹诺酮类抗生素敏感.结论 河南省环境中沙门菌血清型分布呈多样性,不同来源的沙门菌的血清型有一定的差异;对目前常用的抗菌药物均有耐药菌株出现,提示在防控食源性疾病中应关注环境细菌的危害.
作者:穆玉姣;张白帆;李懿;赵嘉咏;尤爱国;夏胜利;黄学勇;许汴利 刊期: 2018年第08期
目的 了解韩城市黑热病流行病学特征及高危因素,为进一步开展流行病学调查奠定基础.方法 对韩城市历史数据进行描述,回访调查2012-2016年报告病例发病诊治经过,按照1:4匹配的病例对照研究方法,对生活行为习惯和居住环境等因素进行问卷调查,数据用Excel 2007、R软件描述分析.结果 韩城市1953-2016年共报告病例599例,死亡9例,年平均发病率为14.61/10万,病死率为1.50%;2012年至2016年报告病例18例,死亡2例,发病高峰期是5-9月,占报告病例数的72.22%;病例大部分分布在北部山区;农民发病较多,男性发病高于女性,成人多于儿童;病例主要症状体征为发热、脾大;利用COX回归分析患病因素,养犬OR值为4.618,95%CI为1.519~14.039,P<0.05,病例组与对照组间存在统计学差异,其余因素病例组与对照组不存在统计学差异.结论 韩城市为黑热病历史疫区,2012年至2016年报告病例呈点状分布,家中养犬是患病的危险因素,综合分析韩城市可能为山丘型或人犬共患型黑热病流行区.
作者:王凤萍;陈飒;刘东立;李广智;刘刚;张怡;王天海;王益群;王维华;张义 刊期: 2018年第08期
目的 调查分析黑河口岸地区蜱种类多样性.方法 对2012年至2014年黑龙江省黑河区域内蜱种群密度、数量、分布以及季节变迁方面的数据进行整理及总结,通过形态学的观察及PCR检测明确黑河地区蜱的分类及携带病原体情况.结果 黑河口岸地区的蜱类采集活动中,共获得蜱类1343只,经鉴定分属3属3种,其中森林革蜱1054只,占总体构成78.48%,为优势蜱种;嗜群血蜱236只,占总体构成17.57%;全沟硬蜱53只,占总体构成3.94%.之后本试验对采集到的1343只蜱针对10种病原体进行PCR检测.在黑河地区的蜱类中,森林革蜱的立克次体感染率为64.37%、巴尔通体感染率为3.35%、类似巴贝西虫病原体检出率为1.70%,其他相关蜱虫病原检测结果为阴性.结论 森林革蜱为试验采集蜱虫中的优势蜱种;进行病原体检查发现立克次体具有较高感染率,其中病原体主要在森林革蜱中发现,森林革蜱仍然是监测新发蜱媒传染病的前哨种类.携带的病原体的种类随着生态环境的变化在慢慢发生变化,边境的生态环境复杂多样,在蜱虫比较活跃繁多的地区和季节应该增大防范措施,以免人们在工作以及生活中被其感染,从而造成生命财产损失.
作者:叶楠楠;裴希超;孙善华 刊期: 2018年第08期
目的 评估新疆家畜布鲁氏菌病的防制效果,为该病的综合防控提供有效参考依据.方法 通过现场开展对不同养殖方式状态下的问卷调查,了解饲养、引种、防疫等情况,同时采集血清和流产胎儿等样本带回实验室开展布病血清学和病原学检测.结果 养殖方式、养殖密度、流动状况与布鲁氏菌病感染有直接关系,其中牛羊规模场感染阳性率明显高于牛羊散养户,牛羊场群感染率规模场高于散养户,羊布鲁氏菌病平均感染率高于牛布鲁氏菌病平均感染率.细菌学和PCR方法共检出羊种布鲁氏菌19株.结论 新疆部分地区牛羊等畜群间羊种布鲁氏菌病呈不同程度流行态势,该疫情在被监测区域可能已成为地方性流行病种,该疫情在可控范围内,对布病易感畜未进行布病疫苗免疫接种及未开展系统的检疫净化是易感家畜暴露风险的主要风险因素.
作者:多里坤·努尔沙发;米吉提·莫合塔尔汗 刊期: 2018年第08期
目前流感疫苗的生产还是以鸡胚苗为主,问题仍然在于候选疫苗株的筛选方面;细胞苗的设计理念与流行病毒匹配,因此其保护效果也强于鸡胚苗,但由于设施不够完善等原因,目前细胞苗的生产还不能与鸡胚苗相比,因此本文认为应在鸡胚苗的基础上改善季节性流感疫苗疫苗株的筛选.高危人群的界定仍以世界卫生组织(WHO)为主,但在儿童和青少年的接种方面各国有所不同;一般敏感人群也可以进行疫苗接种保护.通用疫苗目前还处于研究阶段,但人们不宜把希望太多寄托在该苗上.
作者:严延生 刊期: 2018年第08期