为探讨豚鼠上橄榄核簇(superior olivary complex, SOC)各亚核亮氨酸脑啡肽(leu-enkephalin, L-ENK)阳性神经元表达和注射庆大霉素(gentamycine, GM)时的变化,本文采用免疫组化ABC法结合图像分析技术研究SOC内L-ENK阳性神经元分布, 并观察阳性细胞形态、灰度值、胞体截面积和在注射GM时细胞数的改变. 结果表明,SOC内L-ENK阳性神经元主要分布在外侧上橄榄核(lateral superior olive, LSO),以小梭形或圆形细胞为主,其他亚核阳性神经元数量较少且分布弥散,以大多极细胞多见.注射GM时LSO与橄榄周核(periolivary nuclei, PON)内L-ENK 阳性细胞的变化较为明显,除形态不规则、突起变短或消失外,其阳性细胞的灰度值呈降低趋势,胞体截面积在GM1d和GM3d组明显增大,细胞数则在GM3w组显著减少(P＜0.05).提示L-ENK参与声信号在脑干水平的传递、整合及GM损害听力的病理过程.
作者：赵明光；王唯析；高永中 刊期： 2002年第02期
探讨L-精氨酸(L-Arginine, L-Arg)对高肺血流量所致肺动脉高压平滑肌细胞增殖与凋亡的干预作用.18只雄性SD大鼠随机分为对照组、分流组和分流+L-精氨酸(L-Arg)组.对分流组和分流+ L-Arg组大鼠行腹主动脉-下腔静脉分流术.观察术后11周大鼠肺动脉平均压(mPAP)和右心室肥厚的改变,采用免疫组织化学方法研究肺动脉平滑肌细胞PCNA和Fas的表达,并通过原位缺口末端标记方法(TUNEL)检测大鼠肺动脉平滑肌细胞的凋亡.结果表明分流组大鼠mPAP、右心室(RV)与左心室加室间隔(LV+S)的比值,肺中、小型动脉平滑肌细胞增殖指数(PI),凋亡指数(AI),PI/AI比值明显高于对照组大鼠(P＜ 0.05),同时,分流后肺动脉平滑肌细胞Fas表达增高.然而,分流+L-精氨酸组大鼠mPAP、RV/LV+S明显低于分流组(P＜0.05及0.01),并且L-Arg减少了肺中、小型动脉平滑肌细胞的增殖,促进了凋亡(P＜0.01),wv iyc L-Arg组大鼠PI/AI比值较分流组明显降低(P＜0.01),同时,L- Arg使分流大鼠肺动脉平滑肌细胞Fas表达明显增强.以上结果提示,L-精氨酸通过抑制肺动脉平滑肌细胞的增殖,促进其凋亡,从而对高肺血流量所致肺动脉高压的形成有重要的调节作用.
作者：魏冰；杜军保；李简；汪立；齐建光；唐朝枢 刊期： 2002年第02期
研究实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)及甲基维生素B12治疗中溶血磷脂酸(LPA)水平的变化.通过注射豚鼠脊髓匀浆和完全弗氏佐剂诱导大鼠发生EAE.用有机溶剂提取、并进一步分离,终用定磷方法测定甲基维生素B12治疗的EAE大鼠血浆及脑溶血磷脂水平,未经治疗的EAE大鼠为对照组.发现甲基维生素B12治疗组EAE大鼠与未经治疗EAE大鼠比较,恢复期脑与血浆LPA水平增高,分别为 30.23±11.59μmol/L血浆、245.45±144.89 nmol/g 脑和9.27±3.25μmol/L血浆、56.33±5.66 nmol/g 脑(P＜0.05); 急性期血浆的LPA增高,分别为10.05±1.70μmol/L血浆和1.87±0.59 μmol/L血浆(P＜0.05).溶血磷脂酸可能参与自身免疫性脑脊髓炎髓鞘的恢复过程.
作者：李丹；伍期专 刊期： 2002年第02期
为了研究载脂蛋白E(apoE)基因调控序列-219(G/T)多态性与人类冠心病(CHD)及其血脂水平的关系,本文采用聚合酶链反应结合限制性片段长度多态性方法, 分析了108例健康人及86例冠心病患者的-219(G/T)基因型.PCR产物直接测序验证.我们发现冠心病组 apoE -219(T/T)基因型频率(0.651)和T等位基因频率(0.767)分别显著高于对照组(0.444, 0.653; P＜0.05); 冠心病组和对照组T/T基因型者血清总胆固醇高于G/G基因型者.这一结果提示apoE 调控区基因多态性可能影响冠心病的发生.推测apoE-219(T/T)基因型是冠心病的危险因子之一.
作者：陈谦；周新；刘芳；彭剑虹；冯霞 刊期： 2002年第02期
研究纳米碳改性聚氨酯复合材料表面的血液相容性.将经过表面处理的纳米碳分散到聚氨酯体系中,制成聚氨酯/纳米碳复合薄膜.通过血小板荧光标记人全血灌注实验和羊全血体外循环等实验,观察和测定血小板在材料表面的粘附作用以及血液中血红蛋白浓度、纤维蛋白原浓度的变化,探讨纳米碳对聚氨酯抗凝血性能的影响.实验结果显示聚氨酯/纳米碳表面血小板的粘附明显低于单纯聚氨酯对照组;体外循环4h后,血液中血红蛋白浓度、纤维蛋白原浓度的变化程度减小.表明纳米碳与聚氨酯的复合可以提高材料的血液相容性.
作者：孔桦；许海燕；蔺嫦燕；李冰一 刊期： 2002年第02期
采用微电泳法观察了谷氨酸(Glu)、乙酰胆碱(Ach)、多巴胺(DA)和γ-氨基丁酸(GABA)等药物对大鼠STN神经元自发放电活动的影响.结果表明:Ach、Glu和DA分别使67.05%(59/88),92.94%(79/85),90.02%(80/86)神经元自发放电频率加快,它们的作用依赖于电流强度.GABA抑制所有神经元的自发放电活动,其作用也依赖于电流强度.在微电泳Ach或Glu过程中,给予GABA可拮抗其兴奋作用.双钴碱(Bic)可使78.79%(52/66)的神经元自发放电频率加快,阿托品(ATR)可使60% (15/25)神经元自发放电减少,给药前后放电频率差异显著(P＜0.05).而MK-801对STN自发放电影响较小,但能拮抗Glu的兴奋作用.结果表明:GABA、Ach、Glu和DA等递质活动在同一STN神经元有重要会聚作用,GABA和Ach分别对STN神经元有紧张性抑制及兴奋作用.
作者：刘颖；高东明 刊期： 2002年第02期
PCR合成互补于HBV pre-S2起始区的反义寡核苷酸(as-preS2),以HBV DNA转染的HepG2.2.15细胞接种裸鼠制备人肝癌模型,通过连续用药、一次性用药、混合用药等三种途径研究其对人肝癌裸鼠模型的抑瘤生长及体内抗HBV作用. 流式细胞术(FCM)分析asON诱导瘤细胞凋亡作用,ELLSA法检测反义核酸作用裸鼠血清中HBV抗原含量的变化.结果显示,一次性与混合用药组裸鼠均表现为成瘤潜伏期延长,成瘤率明显低于瘤细胞对照未用药组(P＜0.05),瘤体生长缓慢.裸鼠瘤内连续用药,在48h FCM测凋亡峰值为39.57%,S期细胞降低显著,生理盐水与无关序列对照分别为7.92%、10.89%,提示as-preS2可能诱导S期细胞凋亡.as-preS2对荷瘤鼠HBeAg和HBsAg的抑制率分别为45%和65%.提示,as-preS2可有效抑制体内HBV抗原表达,对人肝癌裸鼠在体内的生长有明显的抑制作用.
作者：刘素侠；孙汶生；曹英林；马春红；丁培芳；韩丽辉 刊期： 2002年第02期
建立人FL(human flt3 ligand, hFL)在大肠杆菌中的高效表达系统,分离纯化重组hFL为其功能和应用研究打下基础.根据大肠杆菌偏爱密码子人工合成hFL基因膜外区DNA片段,由PCR方法获得的hFL基因膜外区DNA片段,经测序证明序列正确.构建表达载体pET30a-Trx-hFL并转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,hFL融合蛋白的表达占菌体总蛋白的60%以上,并以包涵体形式存在.融合蛋白经离子交换层析、分子筛层析纯化,并用FXa切割,切割效率＞80%.切割产物经亲和层析纯化.纯化产物进行Western blot鉴定.纯化的rhFL(recombinant hFL)与GM-CSF及TNFα联合作用,具有良好的刺激DC增殖活性,其增殖能力是GM-CSF+TNFα的2.5倍左右.本文以大肠杆菌为宿主,成功地表达了融合蛋白Trx-hFL.经纯化的rhFL在体外与GM-CSF及TNFα联合使用能有效地刺激人DC的增殖.
作者：张友鸿；周希亚；陈松森；娄可佳；刘深基；杨克恭；何维 刊期： 2002年第02期
气道平滑肌增殖是支气管哮喘的特征性病理改变.本研究用体外培养的大鼠气道平滑肌细胞(ASMC),观察了白细胞介素4 (IL-4)对其增殖的影响.实验用四唑盐比色法(MTT法)和3H-TdR掺入法.MTT检测结果以OD值表示,加入IL-4的24h组和48h组分别为0.323±0.026 (x -±s,下同)和0.453±0.048,比相应时间对照组的0.191±0.018和0.335±0.063明显增加,(P均＜ 0.001);3H-TdR掺入也得到类似结果,IL-4 24h组 3H 掺入量为7658±634,高于对照组的6060±671counts/min(P＜0.01);用MTT检测法还观察到作用24h,IL-4+胸腺肽组为0.308±0.007、IL-4+地塞米松组为0.245±0.008比IL-4组0.324±0.014降低(分别P＜0.05及P＜0.001),说明两种药物均可抑制IL-4的促增殖作用.实验表明IL-4可能还通过促进ASMC的增殖参与哮喘发病;而抑制IL-4对ASMC的促增殖作用可能是胸腺肽和地塞米松治疗哮喘的机制之一.
作者：郑宏宇；张嘉琳；赵汉青；刘传合；陈育智 刊期： 2002年第02期
以从树（鼠/句）肝脏mRNA反转录获得的cDNA一链为模板,应用SMART-RACE技术,获得了树NEA4DapoCⅡ的cDNA序列,并推导出其蛋白质氨基酸序列,应用分子生物学软件对该蛋白的一级、二级结构进行分析和比较.结果显示,树NEA4DapoCⅡ cDNA序列(在GenBank中的注册号为AF335585)长483 bp,其中开放阅读框架306 bp,编码101个氨基酸的前原蛋白,其蛋白原由79个氨基酸组成.树NEA4DapoCⅡ的氨基酸顺序与人、猴、狗的同源性分别为86%、87%和81%.与人及其它种属动物的相同序列比较显示,树NEA4DapoCⅡ分子C-端激活LPL功能区比N-端脂质结合区更具保守性.
作者：曾武威；张坚；陈保生；吴钢；张文成；薛红 刊期： 2002年第02期
为进一步探讨和阐明E6蛋白的致癌机制以及充分认识新发现的抑癌基因p73的作用,在体外通过免疫共沉淀法研究p73和牛乳头瘤病毒1型E6蛋白(BPV-1 E6)的相互结合情况,后将表达p73和BPV-1 E6的质粒导入SAOS-2细胞内,进一步研究细胞内E6蛋白对p73蛋白的诱导凋亡和转录活化功能等生物学活性的影响.结果发现,BPV-1 E6与p73蛋白结合较弱,且未检测到E6能诱导p73蛋白的降解.在SAOS-2细胞内,BPV-1 E6 蛋白确实能部分抑制p73蛋白的诱导细胞凋亡的功能,并且 E6蛋白对p73蛋白的转录激活作用也有影响,但这种影响作用颇弱.
作者：杨海宁；于修平；Yihui Hong；Minjie Du；Jason J.Chen；卞继峰；赵蔚明 刊期： 2002年第02期
探讨银杏叶提取物(GBE)对脂多糖(LPS)诱导大鼠急性肺损伤(ALI)的保护作用.给大鼠静注LPS复制ALI动物模型.首先动态观察ALI的形成过程,注LPS 后2 h已形成明显的ALI.另批大鼠随机分成:对照组(静注生理盐水),LPS组(静注LPS,5mg/ kg体重), GBE+LPS组 (注LPS前三天开始每天灌胃给GBE一次,按黄酮甙8mg/kg 体重计算,当日在给LPS前2 h再给一次GBE),每组6只大鼠.注LPS或盐水后2 h收集标本,进行测定.发现:注LPS后肺湿/干重量比,肺泡灌洗液中蛋白含量及肺血管通透指数均升高(均P＜0.01);血中乳酸(LD),一氧化氮(NO),内皮素-1(ET-1), 肿瘤坏死因子-α (TNF-α)含量及血乳酸脱氢酶(LDH)活性,均有显著升高(P＜ 0.01,P＜0.001).而肺组织细胞膜Na+-K+-ATPase活性显著下降(P＜0.01).预先给予GBE 可显著缓解上述变化(P＜0.05, P＜0.01).提示 GBE在防治肺的急性炎症性疾病中有一定应用前景.
作者：张宏；孟亚娟；斯琴；王士雯；孙仁宇 刊期： 2002年第02期
探讨3,4-二羟基苯甲醛降低大鼠肺动脉压(PPA)和体动脉压(PBA)的作用及机制.以PPA和PBA为指标,在氨基甲酸乙酯麻醉、三碘季胺酚制动、呼吸机控制呼吸的SD大鼠上观察3,4-二羟基苯甲醛对大鼠PPA和PBA的影响,连续观察30min PPA和PBA曲线变化,并与对照组和生理盐水组比较.给药后大鼠PPA和PBA明显降低,其中PPA在10～15min达低值,PBA在5～10min降至低值,与对照组和生理盐水组比较差异显著(P＜0.01).3,4-二羟基苯甲醛有明显降低大鼠PPA和PBA的作用.侧脑室预先注射β-受体阻断剂普萘洛尔可部分阻断3,4-二羟基苯甲醛的降压效应.推测3,4-二羟基苯甲醛降低PPA和PBA的作用可能部分由脑内β-受体所介导.
作者：王明江；冯桂香；罗超；鲁芳 刊期： 2002年第02期
为了探讨针对人类端粒酶RNA(hTR)基因的反义寡核苷酸(AS-ODN)对乳腺癌细胞系MCF-7的影响,将AS-ODN作用于细胞.进行细胞计数,MTT比色法测细胞生长抑制率,PCR-ELISA法测端粒酶活性,流式细胞仪测细胞周期与凋亡.结果表明该AS-ODN能抑制MCF-7细胞生长,降低端粒酶活性并诱导细胞凋亡.针对hTR的AS-ODN对治疗恶性肿瘤有潜在意义.
作者：赵丽；曹英林；孙汶生 刊期： 2002年第02期
为深入探讨LIM矿化蛋白1(LMP-1)在成骨细胞分化中的作用,体外培养大鼠成骨细胞,在培养基中加入LMP-1反义寡核苷酸(LMP-1 antisense 终浓度为0.8mol/L),以阻断大鼠成骨细胞中LMP-1 mRNA的表达.对照组加nonsense(终浓度为0.8mol/L).测定细胞的碱性磷酸酶(ALP)活性、培养基中骨钙素 (OC)的含量,免疫组化分析Ⅰ型胶原蛋白的表达,Northern blotting 检测Ⅰ型胶原mRNA的表达.结果显示: LMP-1 mRNA被LMP-1antisense阻断后,ALP活性降低、OC分泌减少、Ⅰ型胶原蛋白和mRNA的表达下降.上述结果表明: LMP-1 mRNA被LMP-1反义寡核苷酸阻断后,成骨细胞分化受到明显的抑制,提示LMP-1是成骨细胞分化必不可少的正调节因子.
作者：刘素彩；赵志刚；赵长安；张志勇；刘靖；李恩 刊期： 2002年第02期
为探讨原代肝细胞体外增殖和分化的培养条件和机制,观察了肝细胞生长素(HPN)、二甲亚砜(DMSO)及尼克酰胺(NA)对肝细胞增殖、分化的影响.结果显示肝细胞生长素刺激离体肝细胞 3H-TdR掺入和钙动员.DMSO抑制钙动员,NA无显著影响.肝细胞原代培养证实:NA促进DNA合成,而DMSO抑制 3H-TdR掺入,但DMSO在NA协同下使肝细胞表现为一定的延迟合成活性;肝细胞cAMP水平在96h内与增殖活性呈负相关.7d条件培养后,DMSO+HPN及DMSO+NA+HPN培养组肝细胞对 3H-TdR掺入分别为NA+HPN组的3.83及3.58倍,[Ca2+]i瞬增分别为3.0及3.3倍.表明HPN具有体外刺激原代肝细胞增殖和分化的作用,加入NA可以促进肝细胞DNA合成;DMSO则抑制 3H-TdR掺入,长期表现为稳定肝细胞作用,移除DMSO后肝细胞具有较高的增殖活性.
作者：汤习锋；周东耀；康格非 刊期： 2002年第02期
检测NDR2基因在人类正常组织及相应肿瘤组织中的表达分布,为进一步研究该基因功能提供线索.提取人脑与胶质瘤、肺与肺癌、胃与胃癌、结肠与结肠癌组织总RNA,用RT-PCR方法半定量分析NDR2基因在上述组织中的表达水平.在人脑和胶质瘤组织、肺与肺癌组织、胃与胃癌组织、结肠与结肠癌组织中均有NDR2 mRNA表达,其表达水平以脑组织为高.NDR2 mRNA在正常脑和肺组织的表达水平分别显著高于胶质瘤与肺癌组织,而结肠与结肠癌组织,胃与胃癌组织NDR2 mRNA表达水平则无显著差别.以上结果表明,NDR2基因可能广泛表达于人体正常组织内,而在胶质瘤与肺癌中的表达较相应正常组织减低,提示该基因可能与神经系统与呼吸系统肿瘤的发生发展有关.
作者：李剑；药立波；林树新；刘新平；邓艳春；聂晓燕 刊期： 2002年第02期
急性冠脉综合征(不稳定性心绞痛,急性心肌梗塞,心原性猝死)(Acute Coronary Syndrome ,ACS)原理基于斑块的破裂是启动一系列事件并导致血栓形成的原因.临床研究表明,ACS患者血液检查显示激活的凝血级联反应会增加临床事件的发生风险[1].近年来通过对组织因子(tissue factor ,TF)、组织因子途径抑制物(tissue factor pathway inhibitor ,TFPI)的研究,提出了止血的外源性启动,内源性维持的观点.本研究采用ELISA法和发色底物法测定、分析51例不稳定性心绞痛(UA)患者血浆中的TF、TFPI含量和活性水平变化,并对其临床意义进行探讨.
作者：路亚枫；秦明照 刊期： 2002年第02期
Graves病(Graves disease,GD) 是器官特异性自身免疫性疾病,近年来的研究表明,粘附分子在淋巴细胞从血液循环向效应器官--甲状腺浸润的过程中起主要作用;而这一效应的产生主要是借助了细胞间粘附分子-1/白细胞功能相关抗原- 1(ICAM-1/LFA-1)这一粘附途径.有研究显示:GD患者外周血淋巴细胞表达的ICAM-1(膜型ICAM-1)与正常人没有差别,但其血清可溶性形式sICAM-1(soluble ICAM-1)的水平却明显高于正常人[1].目前sICAM-1升高的意义亦在不断探索中,本实验拟通过对GD患者治疗前后不同阶段血清sICAM-1水平的动态监测来评估其在反应疾病免疫活动性方面的价值.
作者：孟凤苓；南国珍；苏胜偶；黄振国；张力辉；赵志弘 刊期： 2002年第02期
应用cDNA芯片技术筛选腹主动脉绑扎后4周大鼠的压力负荷型心肌肥厚相关基因.在反转录来自假手术及腹主动脉绑扎(4周)的大鼠心肌组织RNA的过程中,用α-33P-dATP进行探针的标记.然后将探针与微阵列尼龙膜杂交,高严谨度洗涤后分析杂交图谱.通过所获某种特定基因信号的相对强度值来比较其在对照及腹主动脉绑扎的大鼠心肌组织中表达水平的差异.结果显示有235个基因片段在两组之间信号差别在3倍以上,其中5倍以上差异的基因有55个,而在这55个基因中有26个基因功能未知.所得差异片段包括TGFβ受体III ,raf, ARF, clk2 等重要的信号传导分子与心肌肥厚的发生密切相关.
作者：李健；喻峰；陈兰英 刊期： 2002年第02期
纳米材料和纳米技术是八十年代以来兴起的一个崭新的领域,随着研究的深入和技术的发展,纳米材料开始与许多学科相互交叉、渗透,显示出巨大的潜在应用价值,并且已经在一些领域获得了初步的应用.本文主要介绍了纳米材料的一些基本概念和特性,并对纳米陶瓷材料、纳米碳材料、纳米高分子材料、微乳液以及纳米复合材料等在生物医学领域中的研究进展和应用做了综述.
作者：许海燕；孔桦 刊期： 2002年第02期
提高重组DNA对培养细胞及活体水平的转染效率是利用重组DNA进行预防和治疗疾病所必须解决的难题之一.一种新型阳离子多聚物--Starburst PAMAM dendrimers的出现为解决现存的难题带来了一线曙光.Starburst PAMAM dendrimers是1985年之后出现的一类新型星射状树形高分子,它们结构规整,具有呈辐射状对称的刚性球体结构,在生理条件下,Starburst PAMAM dendrimers分子具高的表面正电荷密度,能与天然状态下存在的带负电荷的生物活性物质(如核酸)发生静电相互作用形成复合物. 该类树形高分子可极大增强DNA转染真核细胞的转染效率,具有许多优于其它现有转染试剂的优良特性,并具有在活体内应用的潜力.本文介绍了九十年代以来对该类树形高分子在体外培养细胞及活体水平增强DNA转染效率的研究现状并对今后的研究和应用进行了分析.
作者：郭晨莹；王恒 刊期： 2002年第02期
血管损伤后再狭窄是影响经皮血管成型术和动脉旁路手术预后的主要原因.由于血液的流动和冲刷,使血管病变局部用药很难长期、持续发挥作用.纳米技术和纳米粒子载体的出现为这一临床问题的解决带来了希望:其亚微米的结构特性使之能顺利的通过组织间隙,分布于血管壁,同时极易被细胞吸收,使血管病变局部达到有效的治疗浓度;治疗剂经纳米粒子载体包载后,具有缓释效应,这有效的延长了治疗剂在血管病变局部的作用时间.
作者：李拥军；管珩；徐意瑶 刊期： 2002年第02期
