目的研究多发性骨髓瘤(MM)患者骨髓Flkl+间充质干细胞(Flk1+MSCs)的成骨特性,探讨其与多发性骨髓瘤骨病的关系.方法分离并鉴定MM患者骨髓源Flk1+MSCs;利用实时定量RT-PCR检测Flk1+MSCs成骨诱导前后成骨指标的表达,诱导2周后用Von-Kossa染色法测定钙盐沉积;同时测定Flk1+MSCs中转录共刺激因子(TAZ)的表达.结果MM患者骨髓Flk1+MSCs在体外经成骨诱导后,其成骨指标的表达较正常人明显降低,VonKossa染色也可见矿化基质沉积相应减低.同时Flk1+MSCs中TAZ的表达在MM中较正常人明显下调(P＜0.05).结论多发性骨髓瘤患者的骨髓Flk1+MSCs成骨能力较正常人减低,此因素可能参与了MM患者骨病的发病环节,而TAZ表达的减弱可能在此过程中发挥一定作用.
作者：李炳宗；李静；史明霞；陈磊；高伟波；赵春华 刊期： 2006年第06期
目的观察纯化的人C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)对合并放射损伤家兔创面的影响.方法亲和层析法纯化CRP,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和双向免疫扩散法鉴定CRP纯度和抗原特异性.家兔接受5Gy γ射线照射后,背部切出4个直径为2 cm的圆形创面,随机选择创面给予生理盐水或CRP(每个创面5、50、500 μg),连续5 d.伤后3、7、14及21 d测定创面愈合率、创面组织蛋白和羟脯氨酸含量.结果分离纯化的CRP纯度为92%,抗原特异性好.伤口局部使用CRP未显著加快放、创复合伤创面愈合速度,但50、500μg/每个创面的CRP治疗组伤后7 d创面组织蛋白和羟脯氨酸含量明显高于对照组(P＜0.05).结论本研究表明CRP提高放、创复合伤创面愈合早期的愈合质量.
作者：陈晓红；孙仁山；程天民；冉新泽 刊期： 2006年第06期
目的研究CpG寡核苷酸(CpG-ODN)对慢性乙肝患者(CHB)外周血树突细胞(DC)表型和功能、细胞因子信号传导分子(STAT)及其抑制因子(SOCS)表达的影响.方法以细胞因子GM-CSF、IL-4自CHB和健康者外周血单核细胞诱导扩增DC,以CpG-ODN或TNF-α刺激DC,评价其对DC表型和功能的影响;应用Western印迹法检测DC胞质STAT1、3、4、5、6以及SOCS1、3蛋白的表达.结果TNF-α、CpG-ODN能明显增强CHB患者DC的HLA-DR和IL-12 p70表达以及T细胞促增殖能力,但不能增强CD1a的表达;两者能不同程度增强DC胞质STAT1、4、6和SOCS1、3的表达,但不影响STAT3、5的表达.结论CpG-ODN与TNF-α一样可能通过调节DC胞质信号分子STAT1、4、6及SOCS1、3的表达促进CHB外周血DC分化、成熟及其抗原递呈功能.
作者：向晓星；周霞秋；王俊学；谢青；蔡雄；俞红；周惠娟 刊期： 2006年第06期
目的研究口服强力霉素对兔骨关节炎软骨组织形态的影响及其机制.方法30只日本大耳白兔随机平分为对照组(假手术组)、模型组和治疗组.对照组只行右膝关节切开术,模型组和治疗组行右前交叉韧带切断术,以建立兔膝关节炎模型.术后4周起,治疗组每日给予口服强力霉素1次(4 mg/kg),共5周,观察指标包括软骨大体形态,软骨Mankin评分,关节液中NO含量.结果强力霉素治疗组软骨面退变明显轻于模型组,Mankin评分和NO含量亦显著降低.结论口服强力霉素对兔骨关节炎软骨退变有明显的治疗作用,其机制与抑制NO产生有关.
作者：傅永慧；杨璐璐；付勤；杨军；王海义 刊期： 2006年第06期
目的探讨RNA二级结构对RNA干扰效果的影响,为RNA干扰靶序列的选择及设计有效siRNA提供依据.方法以K562细胞为模型,N-RAS基因mRNA为模板,分别针对二级结构茎区及二级结构环区设计4对siRNA,并分别采用RT-PCR、细胞活力检测及流式细胞检测等方法在RNA及细胞水平检测干扰效果差异.结果干扰结果表明,针对目标序列的siRNA均能对同源基因的表达产生一定程度的抑制,而针对二级结构环区目标序列的siRNA干扰效果明显优于针对二级结构茎区的siRNA.结论RNA干扰效果与目标序列二级结构密切相关,在进行RNA干扰实验的目标序列选择时,应考虑二级结构的因素.
作者：燕翔；马文丽；宋艳斌；张宝；郑文岭 刊期： 2006年第06期
目的探讨肝星状细胞(HSC)激活与糖尿病树鼩早期肝纤维化的关系.方法将树鼩随机分为正常对照组和链脲佐菌素(STZ)处理组;静脉注射STZ,共持续8周给药,根据血糖水平,再分为糖尿病组(血糖≥11.1 mmol/L)和STZ对照组(血糖＜11.1 mmol/L).分别于成模前和成模后4、8周测定3组动物的血清ALT、AST和Ⅳ-C、LN、HA.8周末行肝组织活检,经HE、PAS、D-PAS、Masson染色及α-SMA免疫组化染色后光镜下观察.用病理图像分析系统对相关指标进行分析.以透射电镜观察肝超微结构.结果注射STZ 8周后糖尿病模型动物出现早期肝纤维化的电镜及光镜病理组织学变化,肝小叶内均出现激活的HSC,而正常和STZ对照组无一例出现激活的HSC;糖尿病组树鼩肝组织α-SMA表达较其他两组高,α-SMA表达的面积密度与胶原纤维面积密度呈显著正相关.结论HSC激活可能在糖尿病早期肝纤维化的发生、发展中发挥重要作用.
作者：冼苏；朱春晖；韦敏怡；秦映芬 刊期： 2006年第06期
目的构建Cre-loxP条件性基因敲除系统中Cre酶的重组腺病毒表达载体,作为体细胞条件性基因敲除的基础,并为传统ES细胞条件性基因敲除提供新的选择.方法用pAd-easy系统在大肠杆菌内经同源重组的方法构建Cre酶的复制缺陷型重组腺病毒载体;Western blot方法鉴定Cre蛋白的表达.结果在大肠杆菌内构建出重组腺病毒质粒,在包装细胞系内包装出重组病毒颗粒;测定病毒滴度为106pfu/L;重组病毒在细胞内表达Cre蛋白.结论表达Cre酶的重组腺病毒载体构建成功,阳性重组质粒的鉴定方法得以改进,为进一步的体细胞Cre-loxP条件性基因敲除提供了基础.
作者：段素素；张云；杨帆；王颖；李文辉；王树惠；刘力 刊期： 2006年第06期
目的探讨与卵巢癌侵袭潜能相关的蛋白质.方法将卵巢癌细胞系SKOV-3在裸鼠体内多次传代,体外培养建系,结合体外黏附、侵袭、移动实验,筛选不同侵袭潜能的细胞亚系,用表面增强激光解吸电离-飞行时间-质谱技术检测其蛋白质谱.结果SKOV-3F3细胞亚系较其母系SKOV-3侵袭潜能更高.有6个差异蛋白质峰(质荷比M/Z分别为6249、14675、15425、15717、17123和17660)仅在SKOV-3中表达,3个差异蛋白质峰(M/Z分别为4355、4823和5763)仅在SKOV-3F3中表达,2个差异蛋白质峰(M/Z分别为1842和3145)可在SKOV-3的3代亚系中捕获.此外,5个差异蛋白质峰(M/Z分别为1242、5465、6899、6568和14027)和1组蛋白质谱峰簇在SKOV-3和其3代亚系中均可表达,但强度不同.结论体内传代结合体外实验可筛选出不同侵袭潜能的卵巢癌细胞,它们之间的差异蛋白与侵袭潜能密切相关.
作者：赵宏伟；田秀珠；张华屏；郭素堂；任连生；赵嘉惠；王波 刊期： 2006年第06期
目的探讨α-突触核蛋白(α-synuclein)在鱼藤酮处理的人类多巴胺能SH-SY5Y细胞内的作用.方法用脂质体转染的方法将α-synuclein基因转染入SH-SY5Y细胞内,并筛选稳定表达α-synuclein的细胞.经过不同浓度的鱼藤酮处理后,测定细胞活力、细胞内氧化应激和抗氧化能力.结果经鱼藤酮处理后,所有的细胞均表现为细胞活力下降和细胞内氧化应激增强.与正常SH-SY5Y细胞相比,过表达α-synuclein的细胞表现为较高的细胞活力和抗氧化能力(P＜0.01).结论α-synuclein过表达可能通过增强SH-SY5Y细胞活力和抗氧化能力,来部分对抗鱼藤酮的毒性作用.
作者：刘延英；赵焕英；赵春礼；杨慧 刊期： 2006年第06期
目的克隆人神经系统表达RNA结合蛋白HuC的cDNA并原核表达纯化.方法提取人神经母细胞瘤SHSY5Y细胞株总RNA,经RT-PCR扩增得到人HuC全长cDNA的克隆.将HuC cDNA克隆到原核表达载体pGEX4T-3载体中,并转化到大肠杆菌中,在获得高效表达后,利用GST纯化系统,对HuC重组蛋白进行纯化.结果经过表达及纯化条件的摸索,终获得重组HuC蛋白.结论HuC蛋白是一种神经系统表达RNA结合蛋白,重组HuC蛋白的获得为HuC抗体的制备及进一步研究该蛋白的功能奠定了基础.
作者：强华；王先平；狄文娜；胡洁淼；彭小忠；贾连顺；阴彬 刊期： 2006年第06期
目的观察牛磺酸(taurine)对链脲菌素(STZ)引起胰岛细胞凋亡及胰岛素分泌与BCL-xL和BAX蛋白表达变化的影响.方法用体外单层培养的方法,培养已存活3～5 d的Wistar乳鼠的胰岛细胞,在瑞氏染液染色后光镜下分别检测STZ使用前后胰岛凋亡细胞百分率、DNA片段、培养液中NO2-/NO,-含量、NOS活性、胰岛素分泌以及BCL-xL和BAX的变化,并进一步观察牛磺酸对上述指标的影响.结果STZ可诱导胰岛细胞凋亡率明显增加,从(4.0±0.7)%升至(40.5±5.7)%,使DNA明显片段化、胰岛素分泌明显降低、BCL-xL表达下降、BAX表达增强(P＜0.01)和NO2-/NO3-含量升高,但NOS活性变化不明显.牛磺酸能有效抑制STZ引起的上述指标(NO2-/NO3-含量除外)的变化,该效应具有一定的剂量依赖性.结论牛磺酸能够改善STZ诱导的胰岛细胞凋亡,其机制可能与下调BAX/BCL-xL比例有关,而与NO2-/NO3-含量及NOS活性关系不大.
作者：余华荣；张能；董毅龙；周岐新 刊期： 2006年第06期
肿瘤细胞对化疗药物耐药是肿瘤治疗的主要障碍,肿瘤干细胞(CSC)是造成肿瘤耐药的根本原因,故肿瘤治疗的关键应以CSC为治疗靶点.CSC概念的提出为癌症靶向治疗的研究带来了新的思路,提供了选择性杀伤CSC的靶向分子疗法,即新的药物应有选择的杀伤CSC而不损伤正常的干细胞,克服肿瘤耐药、防止治疗后的复发与转移,达到真正的治愈肿瘤.
作者：高伟波；陈书长；赵春华 刊期： 2006年第06期
CD44是属于黏附因子家族的跨膜糖蛋白.它广泛表达于多种内皮细胞、间充质细胞、造血干细胞及中胚层来源的细胞和组织.其初作用被描述为介导淋巴细胞归巢到外周淋巴组织;后来发现CD44蛋白在多种生理和病理过程中起到重要作用,如造血、免疫反应(淋巴细胞活化和归巢)、发育、创伤愈合、炎症和肿瘤等.本文旨在分析CD44结构与功能的关系,探讨其与癌症的相关性.
作者：付英杰 刊期： 2006年第06期
心室重塑是心力衰竭基本病理改变过程,急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)后心室重塑是指左心室大小、形状和组织结构的变化过程,亦即梗死区室壁心肌的梗死扩展和非梗塞区室壁心肌的反应性肥厚、伸长,致左心室进行性扩张和变形伴心功能降低的过程,一般在心肌梗死后24 h内出现.近年来,羟甲基戊二酰辅酶A还原酶抑制剂--他汀类药物的非调脂作用备受重视.本研究用氟伐他汀干预SD大鼠AMI模型的心室重塑作用并探讨其可能的相关机制.
作者：赵志宏；郭继鸿；闫征；单江 刊期： 2006年第06期
自20世纪70年代Opelz开始,人们注意到同种异体输血可以使患者的免疫功能受到抑制,甚至可以导致肿瘤患者术后感染率和复发率增加,但是现有的研究既不能给出足够的证据认为围手术期异体输血本身引发了足够的免疫抑制,导致了术后的细菌感染及肿瘤复发,也不能确定这种潜在的效应不存在[1],只是认为可能与血浆中的某些成分、白细胞及其向血液中释放的一些成分有关[2].国内外关于骨肉瘤围手术期成分输血对患者细胞免疫功能影响的报道很少,所以本实验通过观察T淋巴细胞亚群及自然杀伤(NK)细胞的变化,来探讨成分输血对肿瘤患者围手术期细胞免疫功能的影响,为异体输血的免疫研究提供依据.
作者：丰荣杰；千建荣；谢飞彬；李恩惠；杨志平；汤继文；李建民 刊期： 2006年第06期
白塞综合征(Behcet's syndrome,BS)是原因不明的多系统慢性炎症性疾病,有人推测BS发病与Th2优势有关,认为Th2优势可使BS患者产生抗口腔黏膜自身抗体[1],但也有人研究提出存在Th1优势的观点[2].我们检测BS患者血清白细胞介素-12(IL-12)和IL-4的水平,目的是探讨Th1/Th2细胞因子与BS发病的关系.
作者：熊芬；徐国林；眭维耻 刊期： 2006年第06期
目的在活体状态下应用CT灌注扫描技术,评价大鼠急性脑缺血再灌注模型的可靠性.方法利用线栓法建立大鼠急性脑缺血再灌注模型,并通过其CT灌注扫描图像与脑切片TTC染色图像相比较对模型进行评价.结果大脑中动脉栓塞后2 h,CT灌注扫描显示明确的缺血范围.持续栓塞组大鼠脑切片TTC染色均显示明显的脑梗死灶,与CT灌注扫描显示的缺血范围具有一致性;再通组大鼠回撤栓线后,栓塞侧脑血流能够恢复,TTC染色未发现明显梗死灶.结论线栓法制作可复性大鼠急性脑缺血模型稳定可靠,操作简单.如能用CT灌注扫描对梗死模型进行筛选则可进一步降低由模型变异引起的实验误差,从而为脑梗死的治疗研究提供可靠平台.
作者：张晓波；金征宇；李明利；薛华丹；窦万臣 刊期： 2006年第06期
目的建立从外周血中获取循环内皮细胞(CECs)的免疫磁珠分离技术.方法取1 mL全血按1:2稀释,加入20 μL抗CD146磁珠抗体,4℃孵育,再加入等体积缓冲液,置于磁架上,吸弃液体,用100 μL缓冲液重悬磁珠.用吖啶橙或Giemsa染色在荧光倒置相差显微镜下计数与磁珠结合的细胞,并用抗-vWF及CD31进行免疫细胞化学鉴定.结果经抗-vWF及CD31鉴定所分选的CECs是内皮细胞.正常健康体检者的CECs数量为10.5(6～16.5)个/mL.使用此法对正常人脐静脉内皮细胞(HUVECs)混合于正常人全血中的高回收率为91%.结论用CD146免疫磁珠技术分离CECs,具有客观、准确、省时、特异性强及回收率高、取血量少和对内皮细胞损伤小的特点,本方法可用于不同疾病患者血液中CECs的定量检测及其功能状态分析.
作者：李宏伟；王春玲；修瑞娟 刊期： 2006年第06期
目的建立一种适用于中枢神经系统蛋白质抗原定位的包埋后免疫电镜胶体金标记方法.方法利用还原饿酸固定大鼠脑组织切片,首先在冰冻漂浮切片上用NaIO4确定待检抗原的可修复性,然后在亲水树脂Technovit7100包埋的半薄切片寻找使抗原得以大程度修复的佳NaIO4浓度,后在超薄切片上进行相应抗原的免疫胶体金标记.结果NaIO4对不同抗原的修复作用明显不同.对于可修复抗原,低浓度NaIO4即可以使其充分修复.低浓度NaIO4处理组织可使组织超微结构保持完好,并可使胶体金高密度标记.
作者：李昕；李尧华；于顺 刊期： 2006年第06期
目的用基因芯片技术检测肺鳞癌和肺腺癌基因表达的异同.方法提取人肺鳞癌和肺腺癌组织及正常肺组织的RNA,分别用Cy5-dCTP或Cy3-dCTP标记,再与4096点基因芯片杂交,检测肺鳞癌和肺腺癌组织基因表达的异同.结果肺鳞癌和肺腺癌表达共同上调的基因17条,共同下调的基因19条;肺鳞癌表达显著高于肺腺癌的基因20条,显著低于肺腺癌的基因14条.结论多基因参与肺癌发病,基因芯片技术是肺癌基因表达检测的有效方法.
作者：赵健；王树成；陈蔚文 刊期： 2006年第06期
目的提高对原发性浆细胞白血病的认识.方法病例报告及文献复习.结果本报道及文献中共有6例原发性浆细胞白血病病人神经系统复发,其中免疫球蛋白IgG型3例、IgD型2例.神经系统临床表现各不相同,出现神经系统复发症状距起病的平均时间间隔为16.5个月.4例复发时行脑脊液检查均发现有浆细胞存在.出现神经系统侵犯后平均存活时间为6.7个月.结论神经系统是原发性浆细胞白血病的一个少见的髓外侵犯部位,预后极差.
作者：林洁；周道斌；许莹；韩冰；冯俊；单渊东；冯瑞娥 刊期： 2006年第06期
1病历摘要患者女,19岁,因头痛、抽搐、发热6天入院.1.1病史患者6天前夜间无诱因出现头痛,无发热、恶心呕吐.自服芬必得1片后入睡.数小时后同学发现其四肢抽搐、双眼上翻、牙关紧闭、口吐白沫、呼之不应,持续时间不详.无二便失禁.急送至当地医院时神志转清但较烦躁,之后再次发作上述症状,予甘露醇、安定、鲁米那,15 min后抽搐停止,嗜睡.
作者：沈敏；葛瑛；刘晓清；李太生；盛瑞媛；邓国华 刊期： 2006年第06期
实验室生物安全是社会安全的一部分,实验室安全管理必须警钟长鸣.本文根据我国医学实验室生物安全的现状和特点,结合国家实验室安全管理的法律法规,提出加强实验室生物安全管理应采取的一些安全防范措施.
作者：王欣 刊期： 2006年第06期
