目的 研究雄激素受体(AR)在胸腺萎缩中的作用机制.方法 用免疫组化和RT-PCR观察AR在小鼠胸腺内的分布;用刀豆蛋白A(ConA)诱导胸腺细胞增殖,观察睾酮对细胞增殖的影响;构建AR和Rwdd1的真核表达载体pcDNA3.1-AR和pcDNA3.1-Rwdd1-V5,共转染293T细胞,通过免疫共沉淀(CoIP)法观察二者之间在细胞内是否存在相互作用.结果 AR广泛分布在胸腺皮质和髓质,且主要定位于胞核.在不同胸腺细胞亚群中均有AR表达,其中以CD4-CD8-(DN)细胞表达水平高.3种胸腺上皮细胞系中仅皮质来源的427.1细胞系存在AR表达.胸腺细胞中存在功能性AR.AR与Rwdd1之间不存在直接相互作用.结论 小鼠胸腺细胞中存在AR的表达,目前尚不能证明AR与Rwdd1存在直接的相互作用.
作者：陈岱；康宁；汤龙；刘庆丰；胡愉；崔莲仙；何维 刊期： 2008年第07期
目的 探讨缺血后适应(PC)缓解海马rCBF与血管内皮生长因子(VEGF)的变化及其机制.方法 建立树鼩血栓性局部脑缺血模型,通过激光多普勒血流计测量海马CA1区rCBF含量;用免疫组化法测定海马VEGF的表达.结果 树鼩脑缺血时海马rCBF逐渐降低,以24 h的改变显著,脑缺血后海马CA1区VEGF阳性细胞数增多,12 h表达强(P<0.01);缺血PC可显著影响缺血所致的改变:rCBF逐渐增加,72 h显著(P<0.01),与此同时VEGF的表达除8 h外均比血栓性缺血组增强(P<0.01),12 h组明显;电镜显示缺血24 h血栓性缺血组的海马线粒体应激及内质网池形成明显,给予PC后得以缓解.结论 缺血12 h内PC通过明显增强VEGF的表达可能与其改善rCBF有关,从而延长治疗的时间窗.
作者：罗海芸；李树清 刊期： 2008年第07期
目的 长片段双链COX-2 RNA(dsRNAs)在体外经Dicer酶消化获得小RNA(D-siRNAs)抑制A549细胞COX-2的表达.方法 (1)IL-1β5 g/L干预A549细胞,Western blot法观察其COX-2蛋白表达的时间依赖性.(2)Trizol法抽提A549细胞总RNA,RT-PGR扩增COX-2基因.(3)设计两端带T7 promoter,SP6 promoter的COX-2 cDNA的PCR引物,通过PCR方法,获得两端带,T7及SP6 promoter的COX-2 DNA.(4)用RiboMAX Large Scale RNA Produc-tion Systems-SP6 and T7试剂盒体外将COX-2 DNA转录为RNA.(5)长片段COX-2 RNA经Dicer酶消化为小RNA(D-siRNAs).(6)用TransMessenger Transfection Reagent将D-siRNAs转染A549细胞.(7)COX-2 mRNA表达用RT-PCR检测,细胞培养上清液中PGE2含量用ELISA测定.结果 (1)IL-1β干预A549细胞9 haCOX-2表达到高峰.(2)在体外,长片段COX-2 dsRNAs经Dicer酶消化获得D-siRNAs.(3)D-siRNAs可有效抑制A549细胞COX-2的表达并降低PGE2的分泌.结论 长片段双链COX-2 RNA(dsRNAs)在体外经Dicer酶消化获得小RNA可有效抑制A549细胞COX-2的表达.
作者：罗红；胡冬煦；陈平 刊期： 2008年第07期
目的 探讨脆性X智力低下蛋白(FMRP)的克隆表达与纯化条件.方法 用分子克隆的方法构建重组质粒pET22b(+)-FMR1,并将其转入原核表达菌株E.coli BL21(DE3)中诱导表达;用固化Ni2+吸收色谱纯化重组FMRP,Western-blot鉴定并将纯化得到的蛋白与已知的RNA片段进行结合反应.结果 成功构建了重组表达质粒pET22b(+)-FMR1,在E.coli BL21(DE)中表达出相对分子质量约79 000的蛋白;该蛋白为FMRP,且可与特定RNA相互作用.结论 在原核系统中表达得到了纯度和活性都较为理想的FMRP蛋白,为相关功能性研究奠定了基础.
作者：刘剑；邹柯；朱宁；沈岩 刊期： 2008年第07期
目的 探讨胰腺癌中CYCHND1、CDK4的表达及其与临床病理参数的关系;研究增殖细胞核抗体(PCNA)的评分和CYCHND1、CDK4表达的关系.方法 应用免疫组织化学二步法检测CYCHND1、CDK4和PCNA在48例胰腺癌和14例慢性胰腺炎组织中的表达.结果 胰腺癌组织中CYCHND1、CDK4的阳性表达率明显高于慢性胰腺炎组(P<0.01).在低分化、有淋巴结转移、临床分期Ⅲ,Ⅳ期的胰腺癌组织中CYCHND1和CDK4的阳性表达率明显高于高分化、无淋巴结转移、临床分期Ⅰ、Ⅱ期的胰腺癌(P<0.05);胰腺癌中CYCHND1、CDK4表达阳性组中PCNA评分明显高于阴性组(P<0.05).结论 CYCLIND1、CDK4过表达参与胰腺癌的发生、发展,促进胰腺癌细胞的增殖.
作者：杨勇；黄允宁；苏刚；杨世杰；姚保国 刊期： 2008年第07期
目的 探讨视黄醇结合蛋白4(RBP4)的血清水平及-G 803 A SNP与代谢综合征的关系.方法 收集116名伴2型糖尿病的代谢综合征患者和93名正常体检者,放射免疫法测定RBP4血清水平,聚合酶链式反应及序列分析检测G 803 A多态性基因型.结果 (1)RBP4水平在所有受试者中与体质指数(BMI)、腰围、空腹胰岛素(FINS)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、三酰甘油(TG)正相关,对照组中与TG、TC、LDL-C正相关,男性组中与DBP正相关,女性组中与年龄、FINS、HOMA-IR、TG、SBP正相关,多元逐步回归分析发现腰围、BMI、TG和年龄是独立相关因素;RBP4水平在代谢综合征组和男性组显著升高,在有规律运动组显著降低.(2)代谢综合征组与正常对照组的RBP4-G 803 A多态性基因型分布未见显著差异,按不同基因型分组的代谢指标亦无显著性差异.结论 在中国汉族人群中,RBP4水平与多个代谢参数相关,RBP4基因-G 803 A SNP与代谢综合征没有关联.
作者：徐玲玲；肖新华；孙琦；王妲 刊期： 2008年第07期
目的 探讨CCNH基因启动子区-1SNP位点碱基变异对CCNH基因转录活性的影响.方法 通过PCR和定点突变技术,构建了含CCNH基因基础启动子及-1G突变启动子,用双荧光素酶报告系统观察此SNP对CCNH基因启动子转录活性的影响.结果 在AD293细胞中,-1G突变启动子活性比CCNH基础启动子活性低26%(P<0.05).结论 -1T→G碱基变异可显著降低CCNH基因启动子转录活性.
作者：陈佩林；陈鑫；郑红霞；吴奇涵 刊期： 2008年第07期
目的 观察氟喹诺酮类抗菌药安妥沙星(ATFX)对豚鼠心肌动作电位的影响.方法 微电极记录豚鼠右心室乳头肌动作电位.结果 (1)当刺激周长为1000 ms时,各浓度的司帕沙星(SPX)均显著性延长APD50和APD90(P<0.05),而左氧氟沙星(LVFX)和ATFX在浓度超过10μmol/L时明显延长APD90(P<0.05),且ATFX延长APD90的效应明显弱于LVFX和SPX.(2)用E-4031阻断IKr电流,ATFX延长APD90的效应部分被逆转;而用Chro-manol 293B阻断IKr电流,ATFX延长APD90的效应仍存在(P<0.05);但E-4031和Chromanol 293B共同作用阻断IK电流后,ATFX延长APD90的效应可明显被逆转.(3)在药物浓度为10μmol/L时,随着刺激周长的延长,3种药物虽呈不同程度延长APD90,但相差无显著性,提示药物引起的APD延长无明显的频率依赖性.结论 ATFX可能通过抑制IKr,电流而延长APD,但其效应明显弱于LVFX和SPX.
作者：尚曙玉；韩圣娜；景莹；成树模；乔鹏；张朝 刊期： 2008年第07期
目的 研究α-突触核蛋白(α-SYN)在大鼠脑神经元的亚细胞分布.方法 利用2种新的识别不同表位的抗α-SYN单克隆抗体2E3和3D5,应用免疫组织化学、免疫荧光标记和Western blot分析法对α-SYN在大鼠脑神经元的分布进行观察.结果 2E3单抗检测到α-SYN主要存在于神经元的突触前终末;3D5单抗除了能够检测到突触前终末的α-SYNCh,还可以检测到α-SYN在神经细胞核的大量存在.Western blot分析表明,2种抗体在胞质和核组分中均可以检测到一个19 ku的蛋白,与α-SYN的表观分子质量一致.结论 α-SYN免疫活性物质不仅存在于脑神经元的突触前神经末梢,而且也存在于核中,但识别不同表位的抗体对不同亚细胞部位的α-SYN的结合能力不同.
作者：李昕；刘光伟；殷娟娟；李尧华；陈彪；于顺 刊期： 2008年第07期
目的 本研究拟阐明内吞调节蛋白Rab5在Notch活化中的作用.方法 用RNA干扰的方法抑制BxPC3细胞中Rab5蛋白的表达,用Western blot测定Notch1活性型Notch ICD的表达.用Wortmannin和LY294002抑制PI3激酶的活性,观察Notch活性的变化.结果 抑制Rab5蛋白的表达,或者抑制PI3激酶的活性后,Notch1的活性型Notch ICD的表达量均显著下降,同时BxPC3细胞的生长受到抑制.结论 在胰腺癌细胞BxPC3中内吞调节蛋白质Bab5和PI3激酶在Notch活化中起着关键的作用,提示Notch的活化依赖于内吞.
作者：张娟；余和芬；王泽生；张玉祥 刊期： 2008年第07期
目的 观察急性应激对大鼠血小板一氧化氮(NO)释放的影响及其机制.方法 大鼠浸水-束缚应激(WRS)2、4和8 h,以胃溃疡指数(UI)作为应激损伤的标识,采用Greiss法测定血小板孵育液中亚硝酸盐(NO2-)含量;同位素法测其一氧化氮合酶(NOS)活性和L精氨酸(L-Arg)转运量.结果 WRS 2 h血小板L-Arg转运量、NOS活性和孵育液NO2-含量较对照组显著增加,但随应激时间延长,其呈下降趋势,应激8 h时均显著低于对照组,胃溃疡逐渐加重.结论 WRS应激早期阶段可上调血小板L-Arg/NO通路,促进血小板NO生成;长时间应激下调L-Arg/NO通路,减少NO释放.
作者：冯浩楼；崔玉英；魏芳；王保水；唐朝枢 刊期： 2008年第07期
目的 探讨肿瘤坏死因子α(TNF-α)和维生紊D受体(VDR)基因多态位点交互作用与2型肝炎病毒(HBV)感染慢性化的关系.方法 391例慢性乙型肝炎(CHB)患者为病例组和212例乙型肝炎病毒自限性感染者为对照组,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测TNF-α基因启动子区-238G/A、-857C/T、-863C/A、VDR-TaqⅠT/C和FokⅠC/T位点的基因型,采用相乘模型分析基因-基因问的交互作用.结果 TNF-α-238 GA与VDR-FokⅠCT/CC(ORint=4.04)、TNF-α-863 CC与-857CC(ORint=1.26)、VDR-FokⅠCT/CC与TNF-α-857CC的基因间(ORint=1.37)均为正交互作用,增加HBV感染发展为慢性乙型肝炎的风险;TNF-α-238 GA与-857 CC(ORint=0.92)、VDR-FokⅠCT/CC与TNF-α-863 CC基因间(ORint=0.95)为负交互作用,降低HBV感染发展为慢性乙型肝炎的风险.结论 TNF-α和VDR基因间交互作用可能影响HBV感染结局.
作者：高冀蓉；李洪权；李卓；刘英；李俊红；曾宪嘉；李辉 刊期： 2008年第07期
目的 探讨硫化氢(H2S)生成酶抑制剂炔丙基甘氨酸(PPG)对高肺血流大鼠肺动脉结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响.方法 将32只雄性SD大鼠随机分为分流组、分流+炔丙基甘氨酸(PPG)组、假手术组和假手术+PPG组,每组8只.在大鼠高肺血流动物模型上,观察肺组织H2S含量、血浆ET-1含量、肺组织ET-1 mRNA的表达和肺动脉CTGF蛋白表达的变化.结果 分流4周后,肺组织H2S含量、血浆ET-1含量、肺组织ET-1 mRNA表达及肺动脉CTGF表达均明显升高(P<0.01);应用PPG干预后,分流+PPG组大鼠H2S含量明显降低;血浆ET-1含量、肺组织ET-1 mRNA的表达及肺动脉CTGF蛋白表达比分流组明显增加(P<0.05).结论 内源性H2S可能通过降低血管活性肽ET-1及CTGF在肺组织的表达参与对高肺血流时肺循环结构与功能的调节.
作者：李晓惠；杜军保；卜定芳；金红芳；唐朝枢 刊期： 2008年第07期
目的 为进一步研究T细胞在阿尔茨海默病(AD)患者脑内发挥的作用,探讨CCR5在6T-CEM穿过人脑微血管内皮细胞(HBMECs)过程中所发挥的生物学功能.方法 应用免疫荧光和Western blot等技术,集中探讨了HBMECs膜受体CCR5在6T-CEM细胞穿过HBMECs过程中作用.结果 在6T-CEM细胞与HBMECs单层单独孵育过程中,引起HBMECs膜受体CCR5表达变化;HBMECs膜受体CCR5的高表达使6T-CEM细胞穿过HBMECs单层能力增强.结论 HBMECs膜受体CCR5参与了6T-CEM细胞穿过HBMECs单层过程.
作者：马怡然；尚德淑；赵伟东；方文刚；陈誉华 刊期： 2008年第07期
目的 表达具有生物活性的hMSH2蛋白.方法 用搭桥PCR获得hMSH2全长基因,构建pAcGP67B-hMSH2重组质粒,与AcNPV昆虫病毒DNA共转染昆虫细胞sf9,表达hMSH2蛋白(同时构建pET30a-hMSH2重组质粒,用大肠杆菌表达hMSH2蛋白);Western blot鉴定hMSH2蛋白;ELISA,流式细胞仪检测蛋白与OT3肽及TCRγδ的结合特异性;检测细胞增殖(MTT法)和细胞因子分泌,观察重组蛋白体外活化γδT细胞的生物学功能.结果 克隆到正确的hMSH2基因,并将其插入到表达载体pAcGP67B和pET30a中的正确位置.经Western blot鉴定获得了hMSH2蛋白.用昆虫病毒表达载体系统表达的hMSH2蛋白能与其探针肽OT3及TCRγδ特异性结合,并能在体外刺激γδ细胞增殖及分泌IFN-γ,其活性更优于原核表达的蛋白.结论 成功利用昆虫病毒载体表达系统得到了比原核大肠杆菌表达系统更具生物活性的hMSH2蛋白.
作者：陈慧；李峥；何小鹃；崔莲仙；何维 刊期： 2008年第07期
目的 研究脂多糖(LPS)对黑质多巴胺(DA)能神经元的毁损情况及其与血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平之间的关系.方法 向大鼠右侧黑质立体定位注射LPS或PBS后,用免疫组化法观察DA能神经元的损伤状况,用放射免疫法测定血清TNF-α水平.结果 LPS注射后24 h右侧黑质酪氨酸羟化酶(TH)阳性神经元较左侧显著减少(P<0.001),14 d达到低点,14～28 d没有明显改变;血清TNF-α水平在LPS组24 h、14 d和28 d显著高于对照组(P<0.01);LPS组大鼠的黑质TH阳性神经元存留率与其血清TNF-α水平之间存在负直线相关(P<0.05).结论 LPS注入黑质能诱导DA能神经元变性、血清TNF-α水平升高,且两者之间存在负直线相关.
作者：张莉；王彦永；崔冬生；顾平；王铭维 刊期： 2008年第07期
瘦素主要是由脂肪细胞分泌的调节能量平衡和脂肪代谢的重要激素.近年研究发现瘦素与人类多种恶性肿瘤相关.本文就瘦素及其在前列腺癌发生发展过程中作用的研究进展展开综述.
作者：叶洁梅；周洁；冷静 刊期： 2008年第07期
迄今蛋白质组学技术已被广泛应用于生理与病理状态下差异蛋白表达的研究,在人类精子蛋白质组学研究方面,许多研究应用该技术对生理与病理状态下精子差异蛋白表达进行了探索,从蛋白质组水平揭示了精子不同生理与病理条件下的蛋白质表达谱的变化规律,为全面理解精子生理与病理的分子机制提供了可靠的理论依据.
作者：彭咏波；邱宗荫；夏永鹏；马永平 刊期： 2008年第07期
肺纤维化主要的病理变化是肺间质中成纤维细胞活化为肌成纤维细胞(Myofibroblast,MF)及大量细胞外基质聚集.
作者：孙玉敏；张丽萍；宋福成；董静；陈晓玲 刊期： 2008年第07期
房室结折返性心动过速(atrioventricular nodal reentrant tachycardia,AVNRT)中房室结双径路的解剖学部位一直是研究的热点.1995年,Doig等提出,扩张的冠状静脉窦口(coronary sinus ostium,CSO)是形成房室结慢径的病理学基础,在CSO周围消融慢径,靶点易于标测,成为AVNRT射频消融手术的新方法[1],但不同能量消融CSO周围局部组织病理改变以及放电能量与损伤范围的关系尚未见报道,本实验以猪作为研究对象,对上述问题进行研究,为临床工作提供实验数据.
作者：韩丽英；信栓力；刘凡；李志梅；邵丽莉；白晓敏 刊期： 2008年第07期
目的 建立一种去除胰岛β细胞的α细胞大鼠模型.方法 12周龄SD大鼠分为3组(n=8):正常对照组(NC)、模型1组(M1)和模型2组(M2),M1和M2组大鼠分别腹腔注射1次链脲佐菌素(STZ)100和150 mg/kg,5 d后处死大鼠,胰腺组织匀浆检测胰岛素(Ins)和胰高糖素(Glc)的含量;胰腺组织HE染色,Ins、Glc经免疫组织化学染色并图像定量分析.结果 去β细胞大鼠(M1和M2组)胰岛丽积约为正常大鼠的1/7,β细胞面积占胰岛面积比例由正常状态的74.3%分别下降到5.4%和5.2%,胰腺匀浆液Ins的含量不到正常的3%,而Glc的含量略有上升.NC组Glc阳性细胞位于胰岛周边,数量较少,M1和M2组Glc阳性的α细胞由周边向中央聚集,α细胞面积占胰岛面积比例由16.4%分别上升到76.5%和74.4%.结论 STZ一次大剂量腹腔注射可获得完全去除胰岛β细胞的大鼠模型,且不影响α细胞的形态和功能,建立胰岛α细胞大鼠模型.
作者：潘琳；杜瑞琴；李宏亮；杨文英；李光伟 刊期： 2008年第07期
目的 应用磁共振频谱(Magnetic Resonance Spectroscopy,MRS)对新西兰兔活体肌肉总谷氨酸(Glx)浓度水平进行测定.方法 取20只新西兰兔,用SS-PRESS序列进行MRS采集,记录Glx/总肌酸(TCr)信号比;采集后立即取血并对采集部位进行肌活检,用生化方法测定新西兰兔的血肌酐(Cm)、肌肉Glx和TCr浓度,对上述指标进行相关性分析,并选用MRS采集Glx/TCr信号比和血Cm浓度来预测肌肉Glx浓度.结果 MRS采集Glx/TCr峰高比与肌活检Glx/血 Crn浓度比相关系数为0.681.得到线性回归公式:肌肉Glx浓度预测值(μmol/g肌肉)=[MRS采集Glx/TCr峰高比]×[血Crn浓度(mg/dL)]×28.754-0.631.结论 应用线性回归公式来预测新西兰兔肌肉组织内Glx浓度,结果能反映实际水平;其精确度尚难以胜任定量分析,但本方法避免了肌活检.
作者：张帆；于健春；樊跃平；何桂珍；胡凌；李晓圳；金征宇 刊期： 2008年第07期
目的 观察丙泊酚联合不同剂量咪达唑仑用于长时间显微外科手术患者的镇静效果.方法 40例美国麻醉医师协会(ASA)分级Ⅰ～Ⅱ级在神经阻滞麻醉下行显微外科手术患者,随机分成4组.Ⅰ组生理盐水2 mL,Ⅱ、Ⅱ、Ⅳ组分别给予0.01、0.02和0.04 mg/kg咪达唑仑,1 min后用微量泵持续静注丙泊酚5～10 mg/kg·h.同时Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组每小时分别泵入上述剂量咪达唑仑.以听觉诱发电位指数(AAI)为监测指标,待其降至40,调整丙泊酚用量使AAI维持在30～45,维持镇静5 h.记录镇静诱导及镇静维持时丙泊酚用量,苏醒时间及术中知晓.结果 AAI30～45时,4组患者警觉/镇静评分(OAA/S)均在0～1分.镇静诱导时间Ⅱ～Ⅳ组比Ⅰ组缩短,丙泊酚用药量减少.镇静维持丙泊酚用量Ⅰ、Ⅱ组都高于Ⅲ、Ⅳ组.苏醒时间Ⅳ组明显长于其他3组(P<0.05).结论 以AAI30～45为镇静目标,丙泊酚联合咪达唑仑能较好满足长时间显微外科手术镇静需求.
作者：张高峰；李刚；许永广；程显玲 刊期： 2008年第07期
骨骼肌纤维类型及其表达的专一蛋白同功型的多样性,是骨骼肌功能和适应性的结构和分子基础.肌球蛋白重链同功型被认为是决定肌纤维快、慢类型的主要因素,已成为区分肌纤维类型和研究肌适应性的分子标志.运动可以导致肌球蛋白重链不同亚型之间的转变.本文就肌球蛋白重链与骨骼肌纤维类型的关系,以及不同运动模式对骨骼肌纤维肌球蛋白重链同功型转变的影响作一综述.
作者：李俊平；王瑞元 刊期： 2008年第07期
本文以激素类药物和利尿剂为例介绍了兴奋剂检测中液质联机用于利尿药物、糖皮质激素和一些气质联机难以完成的药物检测工作.
作者：杨树民 刊期： 2008年第07期
本文介绍了兴奋剂检测技术的发展概况,阐述了应用于兴奋剂检测样品的前处理,分离及分析方法,并探讨了在线提取柱切换检测技术及灵敏,快速的高通量检测技术等的应用前景.
作者：秦旸；徐友宣 刊期： 2008年第07期
