目的 通过实施对Rh血型系统类抗体的检测与研究,指导临床安全、科学、有效地输血.方法 采用盐水法、抗人球蛋白法、微柱凝胶法及吸收放散试验等对患者血浆和放散液中抗体及自身红细胞血型抗原进行鉴定,分析其抗体特异性.结果 患者的血浆及放散液中抗体鉴定具有明确的抗体特异性,且患者自身相关抗原为阳性,具备Rh血型系统类抗体的血清学特征,鉴定为类抗-e抗体,并给予e抗原阴性血液配合性输注,临床效果较好.结论 Rh血型系统类抗体在AIHA病患者中具有特异性,在临床输血中也会引起溶血性输血反应,通过一系列科学、规范的检测与分析,能较好地规避漏检风险,并给予配合性血液输注,切实保障临床输血安全、科学、有效.
作者:黄海东;李婉红;王丽阳;张颖;许亚亚 刊期: 2016年第01期
目的 探讨不同分期男性糖尿病肾病(DN)患者血清骨转换指标及骨密度的变化情况.方法 2010年1月-2014年12月,对台州医院610例首诊糖尿病(DM)患者(分为单纯DM组、早期DN组、临床期DN组)及207例健康体检者的骨密度及血清骨转换指标进行统计分析.结果 单纯DM组、早期DN组及临床期DN组血清钙(Ca2+)、血清磷(P)、骨钙素N端中分子片段(N-MID)、25羟维生素D(25-OH VitD)、睾酮(TESTO)水平、腰椎及脊柱骨密度呈逐渐下降趋势,β-胶原降解产物(β-CTX)及甲状旁腺素(PTH)水平呈逐渐上升趋势,差异均有统计学意义(P<0.001).25-OH VitD与3组的骨密度具有较高的正相关性,r值分别为0.677、0.728、0.757,P<0.001;N-MID与3组的骨密度具有较高的负相关性,r值分别为-0.415、-0.515、-0.615,P<0.001.结论 男性DN患者骨密度随病情发展呈逐渐降低趋势,25-OH VitD及N-MID可作为DN的重要监测指标.
作者:梅丽萍;孙星达;阮奕 刊期: 2016年第01期
目的 观测急性肺栓塞(APE)患者血清D-D、hs-CRP和cTnI变化,为临床提供依据.方法 选择本科2011年11月-2014年11月住院的急性心肌梗塞(AMI)和APE患者各30例为观察对象,同期体检者30例为对照组.对3组血清D-D、hs-CRP和cTnI进行检测,并与APE病情进行相关性分析.结果 对照组、AMI组、APE组血清D-D、hs-CRP和cTnI浓度的比较,差异均有统计学意义(F值分别为68.11、44.43、106.01,P<0.01).血清D-D、hs-CRP水平随着APE患者分级的增高而增加,差异均有统计学意义(F值分别为9.52、5.95,P<0.01),但cTnI水平在APE患者不同分级中差异无统计学意义(F=2.95,P>0.05),提示血清cTnI水平不能反应APE严重程度.APE患者血清D-D浓度与hs-CRP、cTnI、APE分级均呈显著正相关(r值分别为0.88、0.86、0.59,P<0.01).结论 血清D-D可能是APE早期识别和疗效有价值的指标.
作者:梁小裕;沈艳萍;侯跃辉;管敏昌;王鑫;郑贞苍 刊期: 2016年第01期
目的 探讨检测老年梅毒感染患者血清抗核抗体(ANA)的临床意义.方法 选择2013年1月-2014年12月在本院就诊或住院的264例老年梅毒感染患者为研究对象,200例血清梅毒抗体检测结果为阴性的老年健康体检者为对照组,用间接免疫荧光法(IFA)对2组老年人血清中的ANA进行检测,统计分析2组老年人ANA阳性率和核型分布.结果 老年梅毒感染患者中125例ANA阳性,阳性率为47.3%,而健康对照组老年人中33例ANA阳性,阳性率为16.5%;梅毒抗体阳性组老年人ANA阳性率明显高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05).梅毒抗体阳性合并ANA阳性老年患者中,ANA核型以染色体型和胞浆颗粒型为主.结论 老年梅毒感染患者往往合并自身免疫反应,检测ANA有利于评估和防治老年梅毒感染患者自身免疫性疾病的发生.
作者:蔡淑静;周建伟;杨永军;张昭才;孔翠;申爱华 刊期: 2016年第01期
目的 探讨维持性血液透析对慢性肾功能衰竭(CRF)患者C-反应蛋白、白介素-6和脂蛋白(a)的影响.方法 以36例进行维持性血液透析的CRF患者为研究对象,36例健康体检者为对照组.分别测定试验初次、3个月后、6个月后、12个月后的每次血液透析前、后的CRP、IL-6和Lp(a)水平.结果 CRF患者血液透析前CRP、IL-6和Lp(a)均显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),而每次血液透析前后CRP、IL-6和Lp(a)比较,差异均无统计学意义(P>0.05),试验初次、3个月后、6个月后、12个月后的CRP、IL-6和Lp(a)比较,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 CRF患者普遍存在微炎症状态和高Lp(a)血症,血液透析并不能降低患者的CRP、IL-6和Lp(a)水平,对于维持性血液透析的CRF患者,有必要进行抗炎和降血脂治疗,防止心血管疾病的发生.
作者:李军;徐朝;郭志强;刘建春;于华 刊期: 2016年第01期
目的 研究宫颈上皮内瘤变及宫颈癌组织中人乳头状瘤病毒(HPV)感染与抑癌基因P16表达的关系.方法 采用免疫组织化学法检测35例官颈癌、45例子宫上皮内瘤变(CIN)和30例慢性宫颈炎组织的P16基因的表达情况,同时采用PCR-反向杂交法对其官颈细胞进行HPV分型检测.结果 从慢性宫颈炎、CIN到宫颈癌,各组病例HPV的感染率和P16基因的表达率均呈递增趋势,CIN组和官颈癌组HPV感染率和P16基因的表达率显著高于慢性宫颈炎组,差异有统计学意义(P<0.01).在CIN与宫颈癌病例组织中,P16基因的表达率与HPV感染率呈正相关(r=0.98,P<0.05).结论 在CIN、宫颈癌发生发展过程中,HPV感染和P16基因表达均发挥重要作用,而且HPV感染是导致P16基因高表达的原因之一.
作者:吕定丰;翁幸鐾;张哲;翁跃颂 刊期: 2016年第01期
目的 探讨危重老年患者正常甲状腺功能病态综合征(ESS)与血清硒(Se)含量之间的关联及与疾病预后的关系.方法 采用化学发光法检测血清甲状腺激素,根据甲状腺激素水平将100例ICU危重老年患者分成ESS组和非ESS组,35例健康体检者作为正常对照组.采用湿法消减-原子荧光光谱法检测所有研究对象的血清硒水平,比较各组血清硒水平是否存在差异.结果 非ESS组与正常对照组血清甲状腺激素、血清硒水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05).ESS组Se、TT3、FT3水平低于正常对照组、非ESS组,ESS组FT4高于正常对照组、非ESS组,差异均有统计学意义(P<0.01),3组TSH和TT4水平差异均无统计学意义(P>0.05).血清Se水平与TT3水平和FT3水平呈显著正相关(r值分别为0.781、0.819,P<0.01),与FT4水平呈负相关(r=-0.267,P<0.05).结论 危重老年患者ESS与血清硒水平降低相关,血清硒水平越低,甲状腺功能紊乱越严重.
作者:戴燕萍;翁跃颂;姚浔平 刊期: 2016年第01期
目的 探讨失代偿期肝硬化患者全血细胞减少的临床病因和外周血、骨髓细胞形态学特点,以提高对此类疾病的认识.方法 对2012年1月-2015年6月本院87例失代偿期肝硬化合并全血细胞减少患者的临床资料进行回顾性分析.结果 87例患者主要病因为乙型肝炎肝硬化(64.4%);血象主要表现为三系轻度异常,以血小板为主;骨髓象主要表现为脾功能亢进(47.1%);失代偿期肝硬化患者的骨髓细胞学检查增生度呈多样性,以增生活跃为主,骨髓细胞分类主要表现为红细胞系增生、粒细胞系和巨核细胞系成熟障碍.增生减低组、增生活跃组和增生明显活跃组3组间的粒细胞系与红细胞系比值、粒细胞系、红细胞系、巨核细胞数不全相同,差异有统计学意义(P<0.05).结论 失代偿期肝硬化全血细胞减少的病因是多方面的,肝炎后肝硬化是主要病因,脾亢是肝硬化患者全血细胞减少的主要骨髓象.肝硬化患者骨髓细胞学检查对明确全血细胞减少的诊断、治疗和估计预后有重要的临床意义.
作者:符火;林尤仕 刊期: 2016年第01期
目的 通过检测控制尿酸合成的限速酶黄嘌呤氧化还原酶活性,进一步探索非酒精性脂肪性肝病发生发展的机制.方法 测定261例经腹部超声确诊的非酒精性脂肪性肝病患者和193例健康对照者的血清黄嘌呤氧化还原酶等实验室指标及人体学指标.结果 非酒精性脂肪性肝病组血清黄嘌呤氧化还原酶水平显著高于健康对照组,且非酒精性脂肪性肝病合并代谢综合征亚组黄嘌呤氧化还原酶水平显著高于非合并代谢综合征组,差异有统计学意义(P<0.05);逐步回归分析法显示血清黄嘌呤氧化还原酶是非酒精性脂肪性肝病的一个独立危险因素;在非酒精性脂肪性肝病组中,黄嘌呤氧化还原酶水平与代谢考量指数、肝脏损伤指标以及炎症因子呈显著性正相关(P<0.05),且随着合并代谢综合征组分个数的增多,其水平呈逐渐上升趋势.结论 血清黄嘌呤氧化还原酶与非酒精性脂肪性肝病的发生发展密切相关.
作者:蒋晓颖 刊期: 2016年第01期
目的 探讨床旁即时凝血检测仪(CoaguChek XS)与常规检验科全自动凝血分析仪(Sysmex CA7000/CS5100)间INR结果的相关性与一致性.方法 用CoaguChek XS检测服用华法林患者的手指末梢血INR;用Sysmex CA7000/CS5100检测静脉血INR.对2种INR结果进行相关性分析和Kappa检验.结果 入组49名患者,共获得111对INR.2种方法获得INR的平均差值为0.19±0.30.CoaguChek XS与Sysmex CA7000/CS5100间INR结果有较好的相关性(r--0.970,P<0.001)和一致性(K=0.646,P<0.001).Sysmex CA7000/CS5100检测INR所需检测周转时间为(178.58±45.59) min,远远高于CoaguChek XS检测INR所需检测周转时间.结论 2种检测方法具有较好的相关性与一致性.床旁即时凝血检测仪能节约检测周转时间,可以为服用华法林的患者提供监测INR的另一种选择.
作者:李玲玲;都丽萍;梅丹 刊期: 2016年第01期
目的 探讨本地区氯吡格雷抵抗患者的预测评分方法.方法 用RCT法选取2013年5月-2014年4月在本院心病科就诊的冠心病患者365例,检测血小板数量、血小板聚集率及CD62p.入选患者服用氯吡格雷300 mg,75 mg/d维持7d检测血小板数量、血小板聚集率及CD62p.根据患病史、检测数据与患者服用氯吡格雷前后血小板聚集率的情况,用Logistic回归法分析,终得出氯吡格雷抵抗的预测评分表.结果 服用氯吡格雷前后,血小板聚集率和CD62p差异有统计学意义(t值分别为14.12、4.50,P=0.00).高血脂、糖尿病、CD62p与氯吡格雷抵抗的关系较大,高血压相对较小.结论 急性冠心病患者有糖尿病、高血脂病史或者CD62p活性高,则氯毗格雷抵抗的发生几率较大;积分越高,氯吡格雷抵抗的发生几率就越大.
作者:韩升波;郭三强;李琳 刊期: 2016年第01期
目的 探讨乳腺癌患者手术前后D-二聚体的变化及其临床意义.方法 将62例乳腺癌患者与56例乳腺良性肿瘤患者手术前后的D-二聚体水平进行比较,同时分析乳腺癌患者的D-二聚体水平与年龄、体重、病理分型的相关性,并用Logistic回归分析乳腺癌患者血栓发生的各种危险因素.结果 乳腺癌患者与乳腺良性肿瘤患者手术前后D-二聚体水平、血小板在术后1周、术后1个月比较差异有统计学意义(P<0.05);相关性分析结果显示,乳腺癌患者的D-二聚体水平与纤维蛋白原呈正相关(r=0.588,P=0.01),与血小板呈负相关(r=-0.487,P=0.02).Logistic回归分析显示,乳腺癌患者发生血栓与D-二聚体水平升高及有输血有关(P<0.05).结论 D-二聚体水平为乳腺癌患者预防血栓形成,术后抗凝治疗提供临床依据.
作者:林艳;吴玉清 刊期: 2016年第01期
目的 探讨类风湿关节炎(RA)患者血清中同型半胱氨酸(Hcy)的水平及其在合并心血管病变(CVD)的RA患者血清中的变化.方法 选取于2011年-2014年在河北省人民医院就诊的143例RA患者及143例健康体检者,根据患者是否患有心血管病变分为RA合并CVD组及RA未合并CVD组,用酶循环法法分别检测3组的Hcy水平,同时记录RA患者的病程、DAS28评分、C-反应蛋白(CRP)、类风湿因子(RF)、抗环瓜氨酸肽抗体(ACCP)、血沉(ESR)、血脂等相关指标,分析Hcy与各项指标之间的相关性.结果 RA患者血清Hcy水平明显高于健康体检者,差异具有统计学意义(P<0.05).RA合并CVD患者血清Hcy水平明显高于RA未合并CVD患者,差异具有统计学意义(P<0.05).相关性分析显示,RA患者血清Hcy水平与其关节肿痛数、ESR、LDL-C呈显著正相关(P<0.05).结论 RA患者血清Hcy水平较健康体检者有所升高,并与心血管疾病的发展密切相关.
作者:赵培;李永辉;高伟;周丽霞;于悦卿;霍丽静 刊期: 2016年第01期
目的 对不同年龄细菌性肺炎(BP)患者进行血清降钙素原(PCT)、C-反应蛋白(CPR)和白细胞介素-6(IL-6)水平相关性分析,并探讨其临床意义.方法 收集326例细菌性肺炎患者,其中18岁~35岁患者112例,为青年组;36岁~60岁患者106例,为中年组;>60岁患者108例,为老年组.分别对患者住院24h内、治疗3d~Sd后、出院前1d采集静脉血8.0ml,检测血清PCT、CPR、IL-6水平,并对其进行对比分析及Pearson线性相关分析.应用ROC曲线评价PCT、CRP和IL-6在不同年龄的BP患者中的诊断价值.结果 与对照组比较,青年组、中年组及老年组PCT、CRP和IL-6水平明显升高,差异具有统计学意义(P<0.01);青年组PCT和CRP水平明显高于老年组,差异具有统计学意义(P<0.01),老年组和青年组IL-6水平明显高于中年组,差异具有统计学意义(P<0.05).老年组治疗前、治疗中、治疗后PCT与CRP呈明显正相关(P<0.01).中年组和老年组治疗后PCT与IL-6呈明显正相关(P<0.05).结论 PCT、CRP和IL-6水平与各组BP患者具有一定的相关性,对细菌性肺炎的诊断及疗效具有一定的临床意义,且PCT优于CRP和IL-6.
作者:王会芳;于彩霞;刘鹏年;朱丽莉;匡铁吉;李健 刊期: 2016年第01期
目的 建立饮用水及水源水中土臭素和2-甲基异莰醇的液液萃取气相色谱-质谱联用测定方法.方法 土臭素和2-甲基异莰醇经过正己烷液液萃取、浓缩、进样,经气相色谱-质谱联用法分析测定,选择离子模式定量.结果 该方法分离效果好,土臭素和2-甲基异莰醇的浓度为2.5 ng/L ~ 100.0 ng/L时,线性关系良好,线性方程分别为y=1 335.72x +390.6(r =0.999 2)和y=1 130.80x +287.8(r =0.999 3),检出限分别为1.0 ng/L和2.0 ng/L.标准样品添加量为10.0 ng、20.0 ng、50.0 ng时,方法的加标回收率为83% ~94%,相对标准偏差(RSD)为3.0%~4.9%.对待测组分在水中的稳定性进行了研究,样品于4℃保存7d后仍可获得较准确的结果.结论 该方法简便,灵敏度高,可用于饮用水及水源水中土臭素和2-甲基异莰醇的测定.
作者:马杰;方赤光;李青;杨大鹏 刊期: 2016年第01期
目的 建立生活饮用水中环氧氯丙烷检测的高灵敏度方法,以满足GB 5749-2006《生活饮用水卫生标准》中的限值要求.方法 生活饮用水中环氧氯丙烷经过C18固相萃取柱吸附、富集后,用二氯甲烷溶剂洗脱、浓缩,将浓缩后的样品上机检测.目标化合物经气相色谱部分的DB-624毛细管柱分离,在离子源(EI)70 eV电压下解离,解离后的碎片离子经四级杆质量分析器分离、过滤,后以质量选择检测器(MSD)检测.结果 该方法的变异系数均<10%,加标回收率为95%~115%,取水样量为500 ml、浓缩体积为1ml时,低检出限为0.02μg/L.结论 使用气相色谱-质谱联用仪检测生活饮用水中的环氧氯丙烷,对比国家标准方法中经填充柱分离、FID检测器检测的方法具有灵敏度高、特异性好的特点,完全满足GB 5749-2006《生活饮用水卫生标准》的要求.
作者:刘跃坤;张特 刊期: 2016年第01期
目的 确定液氯消毒水样顶空气相色谱法对三氯甲烷测定结果的主要影响因素.方法 测定空白水样与实际水样添加不同脱氯剂时的加标回收率,验证不同脱氯剂的脱氯效果,测定不同时间和不同pH值的平行样品,并与萃取法进行比较.结果 加抗坏血酸和硫代硫酸钠2种脱氯剂对纯水空白加标样品的影响不大.水样中加不同量抗坏血酸,pH <4.5时测定结果基本没有影响;水样加不同量硫代硫酸钠,pH值几乎没有变化.不调节水样的pH值时,加同样量的不同脱氯剂测定结果差别较大,偏差值为20.7% ~41.8%.pH值对萃取法测定结果的影响较小,且萃取法与样品加抗坏血酸、样品加硫代硫酸钠和亚硫酸钠调节pH值为酸性的顶空气相色谱法测定结果有较好的一致性.结论 pH值是影响顶空气相色谱法测定结果的主要因素.
作者:范爱萍;张虹飞;欧维平 刊期: 2016年第01期
目的 建立尿样中二氯甲烷的顶空固相微萃取-气相色谱分析方法,为我国二氯甲烷职业接触者生物监测提供方法参考.方法 利用顶空固相微萃取技术进行分离富集,并对萃取涂层、平衡温度、平衡时间和盐析剂等萃取条件进行优化;气相色谱法测定,以保留时间定性,蜂面积定量.结果 二氯甲烷在0.015 mg/L~0.662 mg/L时,呈现良好的线性关系,相关系数(r) =0.999 5,检出限为0.015 mg/L.在0.166 mg/L、0.331 mg/L、0.662 mg/L 3种加标浓度下,方法的平均回收率为92.2%~ 104.2%,精密度为1.59%~3.64%.选择萃取涂层为50/30 μm DVB/CAR/PDMS,平衡温度为25℃,顶空萃取时间为10 min,盐析剂为2.0g无水Na2SO4,尿样体积为5.0ml.结论 该法操作简便,灵敏准确,适用于职业接触者尿中二氯甲烷的生物监测.
作者:夏红芳;梅勇;张鑫;刘佩佩;吴宇伉;张博 刊期: 2016年第01期
目的 水中土臭素(GSM)、2-甲基异莰醇(2-MIB)、2-异丙基-3甲氧基吡嗪(IPMP)、2-异丁基-3-甲氧基吡嗪(IBMP)、2,4,6-三氯苯甲醚(TCA)、二甲基三硫醚(DMTS)和β-紫罗兰酮(β-lonone)的吹扫捕集-气相色谱-质谱联用检测方法.方法 对7种典型嗅味物质的色谱分离条件、样品吹扫条件等进行优化.在40ml水样中加入2 g氯化钠,吹扫捕集装置于20℃高纯氦气吹扫11 min,250℃下脱附2 min,吹扫流量为40 ml/min.以保留时间和质谱全扫描(Scan)方式进行定性分析,扫描质量为m/z 35~350;以质谱选择离子监测(SIM)模式进行定量分析.结果 7种嗅味物质浓度为2.5 ng/L ~ 500 ng/L时,线性关系良好;除了TCA的低检出限为2.50 ng/L之外,其他6种嗅味物质的检出限均为1.25 ng/L.在20 ng/L、100 ng/L 2种加标浓度水平下,回收率分别为77%~120%、91%~109%,相对标准偏差分别为3.9%~10.5%、2.0% ~6.8%.结论 该方法快速、准确,可用于水中7种异味有机物的检测.
作者:张力群;吴平;金铨;边天斌;樊继彩;任韧 刊期: 2016年第01期
目的 研究建立用石墨消解-等离子体发射光谱法测定血液中15种元素的检测方法.方法 取1ml血样与1.5ml硝酸混合,于石墨消解仪中,在120℃下消解1h,冷却定容至10 ml,利用等离子体发射光谱法对消解液中的15种元素进行检测.结果 该方法线性关系良好,相关系数(r)为0.9995~0.9999,低检出限为0.001 0 mg/L~0.063 0 mg/L,回收率为85.5% ~ 107.6%,相对标准偏差(RSD)为0.33%~2.07%.另外,采用本法和微波消解-等离子体发射光谱法对标准样品进行处理和检测,钼元素因参考值低于本方法的检出限,检测结果偏差较大,其余14种元素的RSD分别为0.21% ~8.91%、0.89%~ 10.2%.结论 本方法具有高效、灵敏、准确、干扰少、精密度高、检出限低、线性范围宽、同时检测多元素等特点,适合于大批量血液样品中部分宏量元素和微量元素的测定.
作者:宋志洲;朱兆中;桂婷婷;王梦影;王慧 刊期: 2016年第01期
目的 建立全自动固相萃取-气相色谱法检测水中2,4-滴的方法.方法 取1L水样,加浓硫酸使水样pH<1,通过全自动固相萃取仪以15 ml/min将水样过HLB固相萃取柱(Waters,500 mg,Oasis)萃取,用0.1 mol/L NaOH甲醇溶液洗脱HLB固相萃取柱上吸附的待测物,氮气吹干,用三氟化硼甲醇溶液衍生后,加纯水用正己烷提取,经气相色谱仪进行检测.结果 水样中2,4-滴的浓度为0 μg/ml~ 1.0 μg/ml时,与峰面积呈良好的线性关系,相关系数(r)均>0.999,低检出浓度为0.01 μg/L(1 L水样).0.1 μg/L加标水样组2,4-滴的回收率为110.0%,相对标准偏差(RSD)为6.9%;1.0 μg/L加标水样组2,4-滴的回收率为106.0%,RSD为2.3%.结论 该方法简便、准确,适用于水中2,4-滴的检测.
作者:张念华;王军淋;应英;冯靓;赵永信;沈向红 刊期: 2016年第01期
目的 建立了贝类产品中石房蛤毒素(STX)、新石房蛤毒素(neoSTX)、膝沟澡毒素(GTX1&4)、脱氨甲酰基类毒素(包括dcSTX、dcneoSTX和dc GTX2&3)8种麻痹性贝类毒素的固相萃取-高效液相色谱-串联质谱测定方法.方法 匀浆贝组织以0.1 mol/L乙酸提取,HLB固相萃取小柱净化,10000 MW超滤离心管离心纯化.采用TSK gel Amide-80柱分离,以乙腈-2 mmol/L乙酸铵溶液(均含0.1%甲酸)为流动相进行梯度洗脱,以正离子多反应监测模式检测,基质标准校正外标法定量.结果 8种麻痹性贝类毒素的定量限为10μg/kg~50μg/kg;在各自相应浓度范围内线性关系良好,相关系数>0.990;2种添加水平的平均加标回收率为75.5%~103.0%;相对标准偏差为4.3%~13.2%.应用建立的方法对多份贝类样品进行分析,均未检出目标组分.结论 方法选择性高、灵敏、准确,适用于贝类产品中麻痹性贝类毒素的确证及定量分析.
作者:陈剑刚;朱炳辉;梁素丹;张瑰;吴西梅 刊期: 2016年第01期
目的 本研究采用重组酶介导的等温核酸扩增方法(RAA),通过使用逆转录酶,建立黄热病毒的一步法等温核酸扩增(RT-RAA)方法.方法 根据黄热病毒基因组保守序列设计引物和探针,建立并分析RT-RAA的重复性、特异性、灵敏度;以所建立方法对黄热病毒样本进行检测,同时以基因测序进行验证.结果 黄热病毒RT-RAA扩增,体系中加入40U的逆转录酶扩增效果佳.该方法检测时间短(<20 min),并且灵敏度高,检测下限可达100 copy,与登革病毒、西尼罗病毒、日本乙型脑炎病毒、基孔肯雅热病毒等蚊媒病毒无交叉反应,具有良好的特异性.结论 构建的黄热病毒RT-RAA方法具有快速、特异以及灵敏的特点,适应于黄热病毒的口岸快速检测.
作者:郑伟;徐琦;罗鹏;冯娟;郭利川;应清界 刊期: 2016年第01期
目的 对同一地区食品污染中分离出的单增李斯特菌进行DiversiLab分型,研究其同源性关系,为保障食品安全和进行食源性疾病溯源提供科学依据.方法 应用DiversiLab分型系统对2005年-2007年从哈尔滨地区食品样品中分离出的21株单增李斯特菌进行分型,其中分型流程包括DNA提取、rep-PCR、微电泳芯片分离检测和数据分析.结果 经DiversiLab分析软件聚类分析,相似度为97%时,21株菌被分成了11组,这11组中的菌株在遗传水平不可区分;相似度为95%时,21株菌被分成了9组,这9组中的菌株在遗传水平具有相关性.结论 DiversiLab分型结果较准确地揭示了21株菌株间的遗传特征和亲缘性关系;自动化的DiversiLab分型是一种分辨率高、重复性好、操作简单的基因分型方法,可以作为食源性疾病同源性分析的分型工具.
作者:郑晶;唐中伟;陈彬;黄晓蓉;林杰;张体银 刊期: 2016年第01期
目的 探讨实际样品中槲皮素测定的新方法.方法 合成了Fe3 O4/羧甲基-羟丙基-β-环糊精聚合物磁性纳米材料(CM-HP-β-CDCP-MNPs),并通过傅里叶红外光谱及透射电镜对该材料进行表征.将其作为磁性固相萃取剂与紫外可见光谱联用分离分析槲皮素,并应用于实际样品中槲皮素的测定.结果 该方法中槲皮素吸附液于波长373 nm处测定,洗脱液于波长360 nm处测定.室温下,CM-HP-β-CDCP-MNPs能快速定量吸附槲皮素(吸附率为96%),2.0 mol/L NaOH-0.01 mol/L β-CD在30 min内可脱附槲皮素(脱附率为90%).在佳实验条件下,方法的富集倍数为10,CM-HP-β-CDCP-MNPs可重复使用12次,具有较好的重现性.CM-HP-β-CDCP-MNPs固相萃取分离-紫外可见光谱测定槲皮素的检出限为7.6 ng/ml,线性范围为0.06 μg/ml~7.00 μg/ml.结论 该方法简单、快速、灵敏,可用于测定槲皮素胶囊、苹果肉、苹果皮中的槲皮素,结果令人满意.
作者:平文卉;周楠;陈建忠;杨娟 刊期: 2016年第01期
目的 旨在了解西藏酥油中金黄色葡萄球菌携带肠毒素A(sea)毒力基因及脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型情况.方法 通过聚合酶链式反应(PCR)检测35株酥油来源的金黄色葡萄球菌的sea毒力基因并利用PFGE分型技术对上述金黄色葡萄球菌进行全基因组分析,DNA酶切图谱用BioNumerics软件进行聚类分析.结果 35株金黄色葡萄球菌中sea毒力基因检出率为8.6%(3株);PFGE图谱聚类分析共得到5大簇和25种PFGE型别.结论 建立的金黄色葡萄球菌PFGE分型数据库分子型别较多,对西藏地区酥油中由金黄色葡萄球菌引起的食物中毒的防控与溯源工作具有重要的意义.
作者:潘虎;次顿;李颖;达娃卓玛;魏娜;王秋玲 刊期: 2016年第01期
目的 了解甘肃省西和县农村小学生营养状况,并探讨其形成原因,为制定经济落后地区的农村小学生营养状况改善对策提供科学依据.方法 分层随机整群抽取36所农村小学,对709名小学生进行体格和血红蛋白浓度(Hb)测试,采用身高、体重标准法和Hb水平评价小学生营养状况,并对可能影响营养状况的因素进行分析.结果 该地区农村小学生身高较矮和矮者(≤身高中位数-2SD)237人,占学生总数的33.43% (237/709);体重较轻和轻者(≤体重中位数-2SD) 267人,占学生总数的37.66% (267/709);贫血学生71人,占学生总数的10.01%,学生贫血均为轻度贫血,尚未发现重度贫血患者.结论 该地区农村小学生的身高体重偏低,贫血患病率较高,因此存在营养不良问题,相关部门和学生家长应该加强学生的膳食营养.
作者:魏琳琳;胡萍;王文龙 刊期: 2016年第01期
目的 通过对医务人员发生的血源性职业暴露伤情况进行统计,探讨相关因素并制定相应的防护对策.方法 采用回顾性分析法选择2012年1月-2014年12月在本院登记的发生血源性职业暴露伤的医务人员70例,对其人群分布、工龄、暴露源血源传播性疾病分布、血源性职业暴露医务人员乙型肝炎疫苗接种情况进行统计分析.结果 70例医务人员职业暴露人群主要为护士(64.3%)和医生(22.9%);工龄≤5年的人数多,占51.4%;暴露源乙型肝炎病毒居首位,占48.6%;血源性职业暴露医务人员乙型肝炎疫苗未接种占30.0%.结论 应加强高风险医务人员的职业安全培训,规范操作流程;对新入职人员免费乙型肝炎疫苗接种,提高疫苗接种率;定期检测乙型肝炎病毒抗体滴度,及时强化免疫,降低乙肝病毒感染的危险.
作者:许悦;卢泽明;荣芳 刊期: 2016年第01期
目的 探讨2009年-2013年嘉兴地区无偿献血者梅毒感染的流行病学特征.方法 回顾性分析无偿献血者血样的ELISA-TP和TPPA检测结果,对不同年份、性别、年龄、血型、学历、职业的梅毒阳性献血者进行分析.结果 210 186位无偿献血者中,检出梅毒阳性858例,阳性率为0.41%.不同年份、性别、年龄、血型、学历、职业间比较差异有统计学意义(P<0.05).梅毒阳性率男性(58.7%)高于女性(41.3%);血型中以A型感染者偏多;年龄以31岁~55岁居多;学历以初中和高中为主体;职业中以服务业和自由职业者为主要易感人群;随着S/CO值提高,初筛梅毒阳性的确认阳性结果就越高,差异有统计学意义(x2=228.69,P<0.01).结论 嘉兴地区无偿献血人群中梅毒感染率处中度流行,呈逐年增长趋势;应加大对易感人群的教育和筛选,从低危人群中招募血源,减少梅毒经血传播.
作者:倪修文;孙健琦;王朋 刊期: 2016年第01期
目的 调查桐庐县女性官颈人乳头状瘤病毒(HPV)感染状况及基因分型特点,为宫颈癌的筛查和防治工作提供理论依据.方法 对2014年1月-2015年6月妇科就诊的2 475例女性患者进行HPV基因分型检测,同时分析受检者的相关资料.结果 2 475例女性中有1 011例HPV感染者,感染率为40.85%;不同民族(汉族、畲族)女性HPV的总感染率基本一致,差异均无统计学意义(x2=1.61,P>0.05).HPV单一型感染786例,占77.74%,多重型感染225例,占22.26%;汉族与畲族单一型感染率、多重型感染率比较,差异均无统计学意义(x2=1.71,P>0.05).高危型HPV检出1 176次(87.70%),低危型HPV检出165次(12.30%),HPV 16、HPV 58、HPV 52、HPV 66、HPV 53位居前5位.15岁~年龄组HPV感染率高,为72.73%;≥60岁和20岁~年龄组HPV感染率次之,分别为61.90%、61.54%;各年龄段之间的HPV感染率相比较,差异有统计学意义(x2=66.73,P<0.01).结论 桐庐县女性HPV感染率较高并有明显的年龄分布特点,以高危型单一感染为主;桐庐地区HPV感染分布不存在民族差异.
作者:金航芸;赵华;吴炳坤;方玉才 刊期: 2016年第01期
目的 对宁夏医科大学总医院心脑血管病医院的内分泌室间质量评价结果进行总结分析,发现可能存在的误差,进一步提高检测水平,促进质量改进.方法 采用卫生部临床检验中心发放的内分泌室间质量评价样本进行检测,对其中的卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、睾酮(TSTO)、雌二醇(eE2)、催乳素(PRL)、孕酮(PRGE)、皮质醇(COR)、C-肽(CpS)、胰岛素(IRI)项目的反馈结果进行统计分析.结果 在对30份质量评价样本、270项检测的测试结果分析显示,符合NCCL标准的检测266项,合格率达98.5%.其中PRGE合格率低,且室内质量控制的变异系数较大.结论 参加NCCL室间质量评价并对结果进行回顾性总结,有助于实现对检测结果正确性的持续性监测,达到提高工作人员素质,推动科室全面质量控制的目的,更好地为临床诊疗服务.
作者:张成磊;孟繁君;张永华;韩鹏鹏;王利新 刊期: 2016年第01期
目的 了解衙州市2001年-2014年甲型病毒性肝炎(甲肝)的流行病学特征,为全市甲肝的预防控制提供依据.方法 收集衢州市14年中甲肝疫情的资料,运用流行病学方法进行分析.结果 甲肝发病率为0.52/10万~6.99/10万,甲肝疫苗纳入免费接种前后年均发病率分别为4.81/10万和1.08/10万,差异有统计学意义(P<0.01).纳入免费接种前,季节分布明显,发病高峰在3月-5月和8月;纳入免费接种后,季节分布不明显.龙游县和江山市甲肝发病率较高,衢江区低.职业以农民为主,占68.94%;发病年龄以30岁~49岁青壮年为主,占43.24%;男性高于女性,差异有统计学意义(P<0.01).结论 衢州市甲肝报告发病率逐年下降,加强以甲肝疫苗接种为主的综合预防控制措施能有效降低甲肝发病率.
作者:蓝岳云;姜宪尘 刊期: 2016年第01期
目的 分析西安市2014年百日咳病例及实验室检测结果.方法 对西安市2014年传染病报告系统中所报告的所有百日咳病例进行流行病学分析,并通过百日咳鲍特菌分离培养、鲍特菌属特异性PCR以及百日咳毒素IgG检测方法对所有病例进行检测并分析.结果 西安市2014年共报告百日咳病例71例,发病数较2013年(21例)增加238%, 个别区县的发病率超过1/10万.3种实验方法显示共有41例为百日咳鲍特菌感染,6例为百日咳鲍特菌可疑感染,未见霍氏鲍特菌及副百日咳鲍特菌感染.其中PCR方法的检出率高(90.2%).结论 百日咳发病可能有增高的趋势.尽快对报告病例进行实验室检测有助于百日咳病例的确诊.
作者:韩锐郡;刘莹;栾阳;刘小乖;李亚绒;王增国 刊期: 2016年第01期
目的 研究抑肝散对慢性应激模型大鼠的影响,并初步探讨其抗抑郁的作用机制.方法 采用慢性不可预知应激刺激与孤养结合的方式,建立大鼠慢性应激抑郁模型,通过糖水偏好、强迫游泳和悬尾实验,观察阳性药氟西汀(10 mg/kg)和抑肝散低、中、高3个剂量(1 mg/kg、2 mg/kg、4 mg/kg)对模型大鼠行为学的影响;采用Western blot和试剂盒检测的方法,观察各组大鼠海马星形胶质细胞阳性表达情况和Na+/K+-ATPase活力.结果 与对照组相比,氟西汀和抑肝散低、中、高3个剂量(1 mg,/kg、2 mg/kg、4 mg/kg)能明显改善慢性应激模型大鼠糖水偏好程度,缩短强迫游泳和悬尾实验中的不动时间,显著增加模型组大鼠星形胶质细胞的表达,提高海马脑组织Na+/K+-ATPase活力.结论 抑肝散具有显著抗抑郁作用,其机制可能与逆转抑郁引起的星形胶质细胞减少,增强海马脑组织Na+/K+-AT-Pase活力有关.
作者:应娜;李莹;李姗姗;马世平 刊期: 2016年第01期
目的 对同型半胱氨酸检测试剂进行验证,确定其分析性能是否与厂家声明一致.方法 根据EP-15中生化定量检测试剂性能验证方案,对同型半胱氨酸试剂的准确度、精密度、线性范围、分析灵敏度、特异性进行系统评估.结果 准确度低值偏差为5.24%,高值偏差为1.84%,偏差<10%;重复性标准差为0.182 4,变异系数为1.838 6%,偏差<10%;线性回归方程:y =63.790x +3.3442,r2=0.998 3;分析物灵敏度均值为-0.057 5,标准差为0.132,灵敏度为0.338 5;血清中分别加入特异性干扰物,测定结果偏差大为8.17%,小为-2.78%,正负偏差均<10%.结论 北京九强公司生产的同型半胱氨酸检测试剂在测定准确度、精密度、线性范围、灵敏度、特异性方面与厂家声明的一致性良好,各项性能指标符合临床和实验室规范的要求.
作者:朱薇;王丽娜;王静;葛君琍 刊期: 2016年第01期
目的 EGFR19基因有19种常见突变型,临床检测分析一般很难分辨是何种突变型,探讨利用Excel软件制作EGFR19突变焦磷酸测序法参考图,提高工作效率.方法 根据体细胞基因突变特点,假设EGFR19的突变型基因占20%,野生型基因占80%,将突变前后序列从2235号碱基起按顺序录入并按比例依次赋值,再利用Excel强大的图表生成和函数计算功能生成峰值模型图,经优化处理后可得到参考图.结果 EGFR 19的19种参考图可根据录入的数据自动描点生成相应的参考图,实验室工作人员可灵活应用其对检测结果进行基因分型判断,进而更加合理的指导临床用药.结论 应用Excel制作EGFR19的参考图具有操作简单、快捷准确和灵活性等优点,参考图有利于基因检测结果的分型.
作者:钟焱;胡维新;李庆 刊期: 2016年第01期
目的 了解厦门环境禽流感病毒分布情况及职业暴露人群高致病性禽流感病毒感染情况.方法 采用实时RT-PCR对环境标本进行禽流感病毒核酸检测;采用血凝抑制试验对职业暴露人群血清标本进行H5N1抗体检测,2014年增加H7N9抗体检测.结果 环境标本A型流感病毒阳性率为40.08%,各病原阳性率由高到低依次为H9(33.97%)、H7(5.22%)、H5(3.82%).25家城乡活禽市场,H9阳性24家,H7阳性15家,H5阳性11家;6处家禽散养户集中的地区,H9和H5阳性各1处;4家家禽规模养殖场(户)均无阳性.H9阳性率以12月-次年1月高.5种类型标本阳性率由高到低依次为宰杀或摆放禽肉案板表面的擦拭标本(50.00%)、禽类饮水(44.88%)、清洗禽类的污水(44.44%)、笼具表面擦拭标本(44.38%)、粪便(34.27%).574份职业暴露人群血清H5N1、H7N9抗体均阴性.结论 厦门市城乡活禽市场存在H9、H7、H5;家禽散养户集中的地区仅个别地区个别时间存在H9和H5;家禽规模养殖场(户)未发现禽流感病毒.职业暴露人群未发现H5N1和H7N9感染.
作者:刘红莲;郑惠能;颜玉炳;蒋丽娜;沈惠燕 刊期: 2016年第01期
目的 了解金华市食源性疾病流行病学特征和病原体分布.方法 收集哨点医院符合病例定义的就诊患者信息,并采集粪便样本进行病原体检测.结果 2014年共报告食源性疾病4 095例,男、女比例为1.33:1,以20岁~年龄组病例数多(52.60%);职业以农民、学龄前儿童为主;报告的可疑食品多为水果及其制品.采集粪便样本3 927例进行病原体检测,检出病原体161株,其中副溶血性弧菌55株、沙门菌46株、志贺菌18株、致泻性大肠埃希菌1株,诺如病毒41株.结论 食源性疾病主动监测系统能较好地反映本市食源性疾病发展趋势,应重点加强农民和学龄前儿童主动监测,降低散在食源性疾病发生.
作者:王鸽;申屠平平;朱珈慧 刊期: 2016年第01期
目的 检测南充市区4种面制食品中的铝含量,对南充市普通人群面食中铝的暴露量进行分析.方法 对南充市区在售的4种面制食品进行采样,用灰化法处理样品,依据GB/T 5009.182-2003《面制食品中铝的测定方法》,即铬天青S比色法定量检测面制品中的铝含量.按食品中污染物限量GB/T 5009.182-2003《面制食品中铅的测定方法》进行卫生学评价.结果 抽检的250份样品中,总检出率为84.4%,其中油条中铝的检出率高(100.0%),其次为馒头(91.9%);总超标率为22.0%,其中以油条中铝的超标率高(67.7%),其次为馒头(54.1%)、蛋糕(18.7%),面包样品未出现铝含量超标的现象.抽检的3个区的面制品中,均以油条中铝含量的超标率高,其次是馒头、蛋糕,面包中铝的检出含量未见超出国家标准限值.结论 目前南充市居民所摄入的馒头、油条中的铝含量严重超标,应引起消费人群和监督机构的高度关注.
作者:黄慧湘;杨婷;易星月;柳旭萍;刘俊良;刘振中 刊期: 2016年第01期
目的 比较急性呼吸道感染住院和门诊病例的流感流行特征.方法 在深圳市2家国家级流感哨点医院收集急性呼吸道感染住院病例、门诊流感样病例和病原学检测数据进行分析.结果 2家医院在2013年12月-2014年4月,共监测192例急性呼吸道感染住院病例,经检测35例(18.2%)流感阳性;共采集823份门诊流感样病例的咽拭子标本,经检测181份(22.0%)流感阳性.门诊病例的流感病毒检出率女性高于男性,差异有统计学意义(P<0.05).5岁~ 14岁年龄组的流感病毒检出率在住院和门诊病例中均为高,分别为31.2%和40.7%.住院和门诊病例的流感病毒检出率均在1月-2月达到高.结论 急性呼吸道感染住院和门诊病例的流感流行特征基本相同,门诊病例的流感感染率略高于住院病例,女性流感感染率高于男性,性别差异在门诊病例中更明显,5岁~14岁年龄组儿童的流感感染率高.
作者:王昕;房师松;彭博;武伟华 刊期: 2016年第01期
能够引起肠道内感染,包括胃肠炎、腹泻等症状的大肠埃希菌称为致泻大肠埃希菌(Diarrheagenic Escherichia coli,DEC),它是现今引起全球感染性腹泻流行和地方腹泻暴发的主要病原体,国外研究显示,在腹泻患者中DEC检出率为17.4% ~ 28.0%[1-3],而国内研究中该菌检出率稍低,为12.7%~18.9%[4-5].根据不同的毒性特征可将DEC分为6类,肠致病性大肠埃希菌(Enteropathogenic E.coli,EPEC)、肠产毒性大肠埃希菌(Enterotoxigenic E.coli, ETEC)、肠侵袭性大肠埃希菌(Enteroinvasive E.coli, EIEC)、肠出血性大肠埃希菌(Enterohemorrhagic E.coli,EHEC)、肠黏附性大肠埃希菌(Enteroadherent E.coli,EAEC)及弥散黏附性大肠埃希菌(Diffusely adherent E.coli,DAEC)[6].
作者:叶珍珍;陈应坚;金玉娟;刘渠 刊期: 2016年第01期
传统的蛋白表达是指通过细菌、酵母、动物细胞或植物细胞等表达外源基因的生物学技术.随着科学技术的发展,蛋白质相关的前沿领域逐渐兴起,无细胞蛋白合成系统应运而生,其是以外源mRNA或者DNA为模板,在RNA聚合酶及转录因子等组分作用下合成相应的mRNA,通过在体系内加入氨基酸、ATP和GTP完成蛋白质翻译的体外系统[1].
作者:马英伟;温红玲;王志玉;刘春晓 刊期: 2016年第01期
由并殖吸虫(Paragonimus)感染引起的肺吸虫病在我国是一种分布广泛、危害严重的人兽共患病[1-3].并殖吸虫属于并殖科,目前报道的并殖吸虫已有50余种[4-5].国内寄生于人体的并殖吸虫主要有卫氏并殖吸虫[Paragonimus westermani(Kerbert,1878) Braun,1899]和斯氏并殖吸虫(Paragonimus skrjabini chen,1959).并殖吸虫种类繁多,虫种分类和鉴定较为困难,而不同虫种对人体的致病性存在显著差异,应用分子生物学技术深入研究并殖吸虫生物学特征,对虫种鉴定和肺吸虫病的诊断与防治均具有重要意义[6-9].本文对近年并殖吸虫分子病原学研究进展进行综述.
作者:尹光辉;张荣光 刊期: 2016年第01期
目的 了解198例耐多药肺结核患者对左氧氟沙星、卡那霉素二线抗结核药物的耐药情况,为耐多药肺结核防治工作提供科学依据.方法 采用比例法检测198例耐多药肺结核患者临床分离株对Ofx、Km二线抗结核药物的耐药性,分析其耐药情况.结果 198例耐多药肺结核,对Km耐药占10.6%(21例),对Ofx耐药占25.3%(50例),对Ofx、Km2种二线抗结核药物同时耐药(XDR-TB)的比例达到2.5%(5例).登记分类为新发患者和复发患者分别占MDR-TB患者的36.4%(72例)和39.9%(79例);男性耐多药肺结核159例;中年组耐多药肺结核93例,占MDR-TB患者的47.0%.结论 左氧氟沙星耐药率较高,新发患者和复发患者耐多药率较高,中年男性患者耐多药率较高.应规范、合理使用氟喹诺酮类药物,将新发患者和复发患者作为耐多药肺结核重点筛查人群,重点关注中年男性患者群体的耐多药肺结核防治工作.
作者:舒奇;邱林西 刊期: 2016年第01期
目的 研究76株沙门菌的耐药谱和耐药基因携带情况,为沙门菌引起的腹泻病治疗提供依据.方法 采用琼脂扩散法测定76株沙门菌对23种抗生素药物的敏感性.采用PCR方法检测耐药菌株的耐药基因携带情况.结果 18株(23.7%)沙门菌有不同耐药表型.9株携带blaTEM-1,5株携带blaOXA-1,1株携带blaCMY-2;5株携带acc(6')-Ib-cr,各有1株分别携带rmtB和armA1;3株耐喹诺酮类药物的沙门菌发现gyrA和parC存在点突变.结论 2010年-2013年北京市沙门菌对青霉素类药物的耐药率高,β-内酰胺类药物耐药株主要携带blaTEM-1和blaOXA-1基因,氨基糖苷类药物耐药株主要携带acc(6')-Ib-cr基因,喹诺酮耐药主要由gyrA和parC点突变及acc(6')-Ib-cr引起.
作者:崔海洋;王宵雪;霍哲;安希龙;白书媛;王永全 刊期: 2016年第01期
目的 观察本院实验室在使用头孢菌素新折点CLSI2014 (S24)后,大肠埃希菌体外药敏结果及产超广谱酶分布的影响.方法 对本院微生物实验室鉴定的588株大肠埃希菌药敏结果,用WHONET 5.6软件根据CLSI(S19,S24)进行回顾性分析.结果 实验室采用S24折点时头孢吡肟、头孢噻肟、头孢他啶、头孢唑林的耐药率对比采用S19折点时的耐药率均有上升趋势.采用S24折点分布在头孢噻肟、头孢他啶耐药菌株中的产ESBLs株对比采用S19折点时的分布增加.头孢吡肟SDD检测率为3.4%(20/588).结论 本院实验室采用新折点后大肠埃希菌头孢菌素耐药率均有不同程度的上升,其中头孢吡肟、头孢他啶上升较为明显,同时新折点提高了大肠埃希菌耐药表型与产ESBLs的一致性,补充了头孢吡肟SDD结果,指导临床合理用药.
作者:徐立冬;杨青;董莉倩 刊期: 2016年第01期
目的 建立超声辅助萃取、高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱(HPLC-ICP-MS)联用技术测定水产品中无机汞、甲基汞和乙基汞的方法.方法 采用醋酸铵/L-半胱氨酸缓冲盐及甲醇(洗脱比例为95%:5%)体系组成的流动相进行洗脱,对样品进行超声辅助萃取,使目标物与络合剂反应后进而提取分离,同时检测无机汞、甲基汞和乙基汞的浓度.结果 确定佳萃取时间为1h,无机汞、甲基汞和乙基汞的分析时间分别为1.75 min、2.57 min和5.08 min,低检出浓度分别为0.001 5 mg/kg、0.001 0 mg/kg和0.002 2 mg/kg,标准曲线回归方程相关系数(r)均>0.999.在低、中、高3种浓度下,无机汞、甲基汞、乙基汞的加标回收率分别为84.0% ~ 100.4%、88.0%~99.2%、88.0%~102.6%,相对标准偏差(RSD)≤3.0%.用本方法检测鱼组织标准物质,测得值与标准值吻合,进一步验证了本方法的准确性.结论 该方法前处理简单,提取效率高,精密度及准确度结果理想,可用于实际样品水产品中汞含量的测定.
作者:欧阳珮珮;黄诚;丘福保 刊期: 2016年第01期
目的 制备用于CYP4 F2和β-actin基因mRNA实时荧光定量PCR检测的标准品质粒与标准曲线.方法 通过PCR扩增CYP4F2和β-actin进行双酶切鉴定和测序分析,确保重组质粒完整正确;大量抽提重组质粒,测定其拷贝浓度,10倍稀释成梯度标准品,目的片断纯化后直接连接于pGEM-T easy载体,转化Ecoli DH5α宿主菌,获得阳性克隆;通过PCR扩增进行荧光定量PCR检测分析.结果 CYP4 F2和β-actin基因目的片段均成功重组,获得的重组质粒保持了目的片段的特异性和序列完整性.梯度浓度标准质粒的实时荧光定量PCR结果显示,循环阈值(Ct)与起始模板量的对数值之间有着良好的线性关系.结论 成功构建了CYP4 F2和β-actin基因实时荧光定量PCR标准品质粒和标准曲线.
作者:赵永攀;石磊;李晋;李晓泽;李健;赵树进 刊期: 2016年第01期
目的 构建高效表达人Bach2基因的慢病毒重组质粒,并探索其在免疫疾病中的机制.方法 取健康人外周血分离单个核细胞并提取总RNA逆转录为cDNA,扩增Bach2基因CDS序列,插入pLVX-IRES-ZsGreen1慢病毒质粒.磷酸钙共转染法包装慢病毒,感染人HEK293T细胞.空白质粒感染HEK293T细胞作为对照.免疫印迹分析空白质粒和过表达质粒HEK293T细胞中Bach2基因表达.结果 PCR结果显示,Bach2成功插进pLVX-IRES-ZsGreen1质粒中,real-time PCR以及Western blot证实,Bach2基因成功在HEK293T细胞中高效表达.结论 成功构建高效表达Bach2基因的慢病毒穿梭质粒,并成功在HEK293T细胞表达.
作者:庞珍珍;马学峰 刊期: 2016年第01期