背景人类和哺乳动物视觉发育关键期内视网膜处于发育阶段,其各个亚层的正确排列以及细胞的准确定位是视觉信息正常传递的基础之一.频域光学相关断层扫描(SD-OCT)可活体测量并连续观察大鼠视网膜厚度的变化.目的了解视觉发育关键期内SD大鼠视网膜厚度的变化规律.方法选择新生SD大鼠30只,其中10只于出生后14、18、21、24、42 d进行双眼眼底SD-OCT扫描,对视网膜厚度以及部分亚层包括内界膜(ILM)至内丛状层(IPL)、内核层(INL)、外核层(ONL)至视网膜色素上皮(RPE)层的厚度进行生物测量.另取20只SD大鼠,分别于14、18、21、24、42 d各处死4只大鼠并摘除双眼,制作石蜡切片行苏木精-伊红染色,对视网膜厚度以及部分亚层结构进行测量.并对两种方法测量数据的相关性进行评价.结果大鼠视网膜Cirrus HD-OCT图像由内向外可显示视网膜IPL、INL、外丛状层(OPL)、ONL、光感受器内节/外节(IS/OS)层以及RPE层等结构.比较各个时间点的视网膜厚度、ILM至IPL厚度、INL厚度以及ONL至RPE层厚度,差异均有统计学意义(F=15.425,P=0.000;F=3.973,P=0.007;F=17.529,P=0.000;F=7.038,P=0.000).随大鼠日龄的增加,视网膜厚度、INL厚度及ONL至RPE层厚度均呈递减趋势.测量视网膜组织切片各对应层次厚度,并与OCT测量结果进行线性回归分析,结果表明两种方法测量的视网膜厚度、INL厚度以及ONL至RPE层厚度均呈正相关(r=0.794,P=0.000;r=0.784,P=0.000;r=0.681,P=0.000).结论 Cirrus HD-OCT可以清晰地显示并测量大鼠视网膜各主要层次,且与组织学测量具有较好的相关性.视觉发育关键期内大鼠视网膜逐渐变薄,OCT测量主要表现为INL厚度和ONL至RPE层厚度减少.
作者：华宁；李筱荣；赵乐冬；林松；刘勃实；袁佳琴 刊期： 2011年第04期
背景感染性眼内炎是白内障摘出及人工晶状体(IOL)植入术后严重的并发症之一,细菌黏附于IOL表面随手术带入眼内是其主要原因,了解细菌对IOL的黏附情况对预防术后眼内炎的发生具有重要意义.目的研究不同材料的IOL光学表面表皮葡萄球菌的黏附情况,比较细菌培养菌落计数及扫描电子显微镜计数2种方法的优缺点.方法疏水性丙烯酸酯IOL、聚甲基丙烯酸甲酯IOL(PMMA IOL)、肝素修饰聚甲基丙烯酸甲酯(HSM-PMMA IOL)、硅凝胶IOL(SI IOL)、亲水性丙烯酸酯IOL 5种不同材料的IOL(每种6枚)置于表皮葡萄球菌(ATCC12228)细菌悬液1h后,采用细菌培养菌落计数及扫描电子显微镜2种方法观察表皮葡萄球菌在各种IOL表面的黏附数量.结果细菌培养菌落计数发现疏水性丙烯酸酯IOL和PMMA IOL易于黏附细菌,亲水性丙烯酸酯和HSM-PMMA IOL黏附的细菌少,5种IOL中细菌黏附数的比较差异有统计学意义(F=100.084,P=0.000),亲水性丙烯酸组和HSM-PMMA组间差异无统计学意义(t=2.285,P=0.052);扫描电子显微镜观察结果显示5种IOL组细菌在IOL上光学分布表面计数的总体比较差异有统计学意义,按照细菌在IOL上黏附的数量从多到少依次为Hydrophobic>PMMA>SI>Hydrophilic＞HSM-PMMA(F=118.065,P=0.000).两种细菌菌落计数方法比较发现扫描电子显微镜法优于细菌培养菌落计数法,差异有统计学意义(t=5.019,P=0.000).结论 5种IOL中以亲水性丙烯酸酯和HSM-PMMA IOL 黏附的细菌少,提示亲水性丙烯酸酯IOL和HSM-PMMA IOL在降低白内障IOL植入术后眼内炎的发生方面有一定的作用.
作者：范小娥；田芳；李筱荣 刊期： 2011年第04期
背景神经营养因子的缺乏与青光眼的视神经损害密切相关.外源性神经营养因子的补充具有短暂的保护作用.腺相关病毒(AAV)介导的神经营养因子可在眼内长期表达,但是否对青光眼动物的视神经具有持久的保护作用有待研究.目的评估AAV介导的脑源性神经营养因子(BDNF)基因在DBA/2J小鼠眼内的表达及其对视网膜神经节细胞(RGCs)的保护作用.方法健康清洁级DBA/2J小鼠10只从4月龄起,每月使用Tonolab眼压计测量眼压.6月龄时左眼玻璃体腔内注射AAV介导的BDNF和绿色荧光蛋白(GFP)基因(AAV-BDNF-GFP)1μl,右眼注射等量的生理盐水作为对照.注射后3个月心脏灌流后取出视网膜,荧光显微镜下观察GFP在视网膜中的表达,免疫组织化学法计算存活的RGCs数目并进行比较.结果DBA/2J小鼠4月龄时AAV-BDNF-GFP眼眼压平均为11.90 mmHg,对照眼眼压为11.40 mmHg.实验眼与对照眼眼压5月龄时均开始升高,8月龄时达到高峰.从4月龄到9月龄,实验组和对照组眼压比较差异无统计学意义(t=-1.78～0.61,P=0.11-0.90).玻璃体腔注射AAV.BDNF-GFP 3月龄后视网膜可以观察到GFP阳性细胞,转染率为46.33%±8.08%.AAV-BDNF-GFP组实验眼的平均RGCs的密度为(3168.13±1319.33)mm2,对照眼为(2024.81±796.38)mm2,差异有统计学意义(t=2.75,P=0.02).结论 AAV介导的BDNF对DBA/2J小鼠RGCs有保护作用.
作者：黄楚开；张铭志；刘丽芳；岑令平；韩淼淼 刊期： 2011年第04期
背景糖尿病视网膜病变(DR)的分子生物学发病机制仍不清楚,以往的研究表明内质网应激相关因子在糖尿病患者外周血中呈高表达,而P58 IPK 可以抑制这些因子的表达,因此P58 IPK 和糖尿病之间的关系值得深入研究.目的检测P58 IPK 在糖尿病大鼠模型视网膜中的动态表达,为进一步研究P58 IPK 抑制DR的机制奠定基础.方法 18只SD大鼠腹腔注射60 mg/kg链脲佐菌素(STZ)制作糖尿病动物模型,分别于造模后1、3、6个月各处死6只大鼠;另6只匹配的正常SD大鼠作为正常对照组.取视网膜组织采用实时定量聚合酶链反应(real-time PCR)法检测P58 IPK mRNA在大鼠视网膜中的表达,观察P58 IPK mRNA随糖尿病的发展出现的动态变化.结果造模后糖尿病组大鼠表现出多饮、多食、多尿,血糖均≥16.5 mmol/L,造模成功率为100%.造模后1个月、3个月鼠视网膜中P58 IPK mRNA/β-actinm RNA 的A值分别为0.800±0.005和0.975±0.008,明显高于对照组的0.725±0.006,差异有统计学意义(t=22.589、t=62.784,P＜0.05),造模后6个月鼠视网膜P58 IPK/β-actin的A值为0.671±0.004,并明显低于对照组,差异有统计学意义(t=-17.984,P＜0.05).结论 P58 IPK 参与DR的发病机制,可能具有延缓DR发生和发展的作用.
作者：刘荣；石慧；胡维琨；闫淑；崔铮；李涛；裴晗；李斌 刊期： 2011年第04期
背景选择理想的基因载体是当前基因研究和治疗的前提与关键,超声微泡造影剂作为一种新型的基因载体,可安全、快速、有效地增强目的基因的转染和表达.目的观察超声微泡造影剂介导睫状神经营养因子(CNTF)基因转染视神经损伤大鼠对视功能及视网膜神经节细胞(RGCs)存活的影响.方法SD大鼠60只随机分为正常对照组、假伤组、单纯损伤组、单纯质粒组、质粒+超声组、超声微泡组.采用钳夹大鼠右眼视神经法制作视神经损伤大鼠模型,然后各处理组大鼠分别接受相应的干预处理.质粒采用玻璃体腔注射法注入,超声则采用辐照法进行干预.造模前1 d和损伤后第7天检测每组大鼠闪光视觉诱发电位(F-VEP),并于第7天处死各组大鼠.应用荧光金逆行标记法计数各组大鼠RGCs存活数,采用实时定量聚合酶链反应(real-time PCR)检测大鼠视网膜中CNTF mRNA的表达量.结果损伤后第7天,单纯损伤组大鼠F-VEP P1波的隐含时较单纯质粒组、质粒+超声组和超声微泡组明显延长,超声微泡组P1波的隐含时短于单纯质粒组和质粒+超声组,差异均有统计学意义(P＜0.05).单纯质粒组、质粒+超声组和超声微泡组F-VEPP1波的振幅均高于单纯损伤组,超声微泡组高于单纯质粒组和质粒+超声组,差异均有统计学意义(P＜0.05).超声微泡组大鼠与正常对照组比较P1波振幅降低,差异有统计学意义(P＜0.05).单纯质粒组、质粒+超声组和超声微泡组平均RGCs数目均明显高于单纯损伤组,超声微泡组平均RGCs数多于单纯质粒组和质粒+超声组,但少于对照组及假伤组,差异均有统计学意义(P＜0.05).超声微泡组CNTF mRNA表达量高于正常对照组、假伤组、单纯损伤组、单纯质粒组和质粒+超声组,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论超声微泡能增强CNTF基因在眼内的转染及表达,对视神经损伤大鼠RGCs早期有明显的保护作用,可有效促进视功能的恢复.
作者：刘敏；刘苏；王志刚；谢文跃 刊期： 2011年第04期
背景以往对近视眼巩膜力学特性变化的研究局限于其巩膜整体和条带的力学特性变化方面,目前对近视眼细胞水平力学特性的研究日益受到重视.目的明确TGF-β2对豚鼠镜片诱导型近视眼后极部巩膜成纤维细胞力学特性的影响.方法 2周龄豚鼠12只,随机选取一侧眼用镜片诱导方法制备近视动物模型,对侧眼为对照.造模30 d后,用组织块培养法培养豚鼠后极部巩膜成纤维细胞并传2代,采用免疫组织化学法以兔抗鼠波形蛋白、结蛋白、角蛋白、S-100抗体进行细胞鉴定.将不同质量浓度的TGF-β2(分别为0、1、10、100 mg/L)加入无血清DMEM中作用24 h,利用细胞微管吸吮的方法测定各组巩膜成纤维细胞的力学特性.结果模型眼0 mg/L TGF-β2组与对照眼0 mg/L TGF-β2 组比较,模型眼的巩膜成纤维细胞的平衡杨氏模量、黏弹性参数明显升高,二者之间差异有统计学意义(P＜0.05).模型眼与对照眼在TGF-β2作用下,0mg/L组与1 mg/L组、10mg/组比较,细胞的平衡杨氏模量、黏弹性参数差异均有统计学意义(P＜0.05).模型眼和对照眼培养细胞的平衡杨氏模量、黏弹性参数与TGF-β2 的质量浓度均呈正相关(r=0.743、r=0.533;r=0.654、r=0.576),模型眼和对照眼中的0 mg/L组与100 mg/L组比较细胞的平衡杨氏模量、黏弹性参数差异均无统计学意义(P＞0.05),模型眼1 mg/L组、10 mg/L组与对照眼1 mg/L组、10 mg/L组比较,巩膜成纤维细胞的平衡杨氏模量、黏弹性参数之间差异有统计学意义(P＜0.05);模型眼组100 mg/L TGF-β2 与对照眼的100 mg/L TGF-β2组比较,巩膜成纤维细胞的平衡杨氏模量、黏弹性参数差异无统计学意义(P＞0.05).结论随着TGF-β2 质量浓度的增加,近视眼巩膜成纤维细胞的平衡杨氏模量、黏弹性参数值明显升高,1 mg/L和10 mg/L TGF-β2可以降低正常巩膜成纤维细胞的平衡杨氏模量及黏弹性参数,导致细胞力学特性的更大变化.
作者：陈博宇；王超英；马景学；陈维毅；郝岚；刘迎庆；仝春梅；王彩荣 刊期： 2011年第04期
背景去瓣准分子激光角膜上皮瓣下磨镶术(Epi-LASIK)术后上皮愈合快,创伤反应轻,受到眼科医师的关注.但去瓣Epi-LASIK术后上皮愈合的机制一直是目前研究的热点.目的研究兔准分子激光角膜切削术(PRK)和去瓣Epi-LASIK对不同屈光度眼切削术后早期角膜基质中炎性细胞、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、核转录因子(NF-κB)的表达,探讨两种手术方式在不同切削深度时角膜创伤愈合反应的机制.方法将16只新西兰大白兔按随机数字表法分为高度切削组(-10.00 D)6只、低度切削组(-3.00 D)6只和空白对照组2只.实验组取一侧眼行PRK,对侧眼行去瓣Epi-LASIK,术后每日裂隙灯下观察活体兔角膜愈合情况.术后7 d空气栓塞法处死兔,角膜组织用苏木精-伊红染色和免疫组织化学法检测早期角膜上皮及基质中炎性细胞、bFGF和NF-κB的表达.结果裂隙灯检查表明,去瓣Epi-LASIK手术眼术后炎症反应轻于PRK眼.在低度切削组,2种术式间术后角膜炎性细胞的数量以及NF-κB和bFGF在角膜组织中表达的差异均无统计学意义(P＞0.05),而在高度切削组,PRK手术眼角膜中炎性细胞数量为(12.25 ±1.22)个/400倍视野,明显高于去瓣Epi-LASIK手术眼的(6.67±0.31)个/400倍视野,差异有统计学意义(t=-8.87,P＜0.01).角膜中PRK手术眼NF-κB的表达量(A)分别为6.11±1.36、41.82±8.71,较去瓣Epi-LASIK手术眼的3.01±0.81、11.59±4.55明显增加,而角膜中PRK手术眼bFGF的表达量(A)分别为33.59±6.98、123.68±18.81,较去瓣Epi-LASIK手术眼的69.20±8.85、123.68±18.81降低,差异均有统计学意义(P＜0.05).去瓣Epi-LASIK上皮愈合速度快于PRK组,而随着切削深度的增加,愈合速度减慢.结论在低度切削时,去瓣Epi-LASIK手术眼角膜上皮的愈合速度与PRK手术眼无明显差别,但在高度切削时,去瓣Epi-LASIK术眼角膜上皮的愈合速度稍快于PRK术眼,炎症反应程度轻.
作者：苏杰；袁满红 刊期： 2011年第04期
背景研究表明氧化损伤在糖尿病并发症的发生发展中发挥着重要的作用,Peroxiredoxin 6(Prx6)是双功能的蛋白质,其清除磷脂氢过氧化物的活性非常重要,因为细胞质中普遍存在的谷胱甘肽过氧化物酶(GPx1)无此功能.目的观察Prx6在实验性糖尿病大鼠视网膜中的表达,分析随着糖尿病病程的延长其在视网膜的表达情况.方法 Wistar大鼠60只,随机分为正常对照组12只和糖尿病组48只.糖尿病组腹腔注射链脲佐菌素(STZ)65 mg/kg诱发糖尿病,将造模成功的大鼠随机分为糖尿病1、2、3个月组,每组16只.于各时间点处死大鼠,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学法分析Prx6在不同时间点糖尿病组大鼠视网膜中的表达,应用Image-Pro Plus 6.0图像分析软件测定阳性反应强度,即平均吸光度(A)值.结果免疫组织化学染色结果显示,正常对照组大鼠视网膜内外颗粒层及视网膜、脉络膜血管均有Prx6蛋白的表达,视网膜神经节细胞(RGCs)层有少量Prx6蛋白的表达,表达于细胞质;糖尿病1个月组大鼠视网膜内外颗粒层棕黄色阳性染色细胞增多;2个月组、3个月组大鼠视网膜各层Prx6蛋白的表达均为阴性,各组间总体比较差异均有统计学意义(F=22 967.63,P＜0.05).RT-PCR结果显示,正常对照组大鼠视网膜有Prx6 mRNA的表达;糖尿病1个月组视网膜Prx6 mRNA表达增高;2个月组Prx6 mRNA表达量明显降低,仅有少量表达;3个月组表达阴性,各组间总体比较差异均有统计学意义(F=942.84,P＜0.05).结论Prx6作为一种抗氧化蛋白存在于视网膜中,可保护组织细胞免受活性氧簇、氧自由基等的损害,随着糖尿病病程的延长,Prx6在视网膜组织和细胞中的表达量逐渐降低,直至消失.
作者：戚卉；吴雅臻；金燕；韩宁；范斌 刊期： 2011年第04期
背景滤过泡瘢痕化是抗青光跟滤过性手术失败的主要原因,研究表明汉防己甲素(Tet)可抑制体外培养的人Tenon 囊成纤维细胞的增生,从而具有抗滤过术后瘢痕化的潜在作用.目的了解兔眼滤过性手术中植入Tet缓释系统(DDS)抑制瘢痕形成的作用.方法将18只新西兰白兔36只眼行滤过性小梁切除术,按随机数字表法将白兔随机分为3组,每组12只眼,术中按照分组将含0.3 mg Tet、0.2 mg Tet的DDS及无药物的空白DDS分别植入各组兔眼结膜瓣下.术后1、4、7、10、14 d在裂隙灯下依据邻近角膜厚度标准的滤过泡面积对滤过泡进行评分;术后7 d、14 d行活体滤过泡组织的共焦显微镜检查,然后制备滤过泡组织学标本行常规组织病理学检查.结果各组的平均滤过泡得分显示,术后4～14 d Tet DDS组兔眼的滤过泡评分明显高于空白DDS组,差异有统计学意义(P＜0.01);术后7～14 d,0.3 mg Tet组兔眼的滤过泡评分高于0.2 mg Tet组,差异有统计学意义(P＜0.05).光学显微镜下及共焦显微镜下滤过泡形态学观察显示.术后7 d、14 d Tet DDS组兔眼均可见清晰的滤过泡腔隙,滤过泡七皮下平均囊腔数量值及囊腔面积均大于空白DDS组(P＜0.01),0.3 mg Tet组兔眼滤过泡上皮下平均囊腔数量值及囊腔面积均大于0.2 mg Tet组,差异有统计学意义(P＜0.05).组织病理学研究还表明,0.3 mg Tet组兔眼滤过泡组织中炎性细胞浸润明显轻于0.2 mg Tet组和空白DDS组.结论研究结果表明Tet DDS能有效抑制滤过性手术后成纤维细胞的增生,提高兔眼滤过性手术的成功率.
作者：郑蓥蓥；成洪波；应方微；黎明；文宠；陈庆 刊期： 2011年第04期
背景翼状胬肉复发是翼状胬肉手术切除的常见并发症,其发生机制与细胞增生、炎症过程和新生血管形成有关,用抗增生药物控制翼状胬肉复发是目前研究的热点和方向.研究证实罗格列酮具有显著的抗炎、抗肿瘤、抑制新生血管作用,但其对翼状胬肉复发的作用研究较少.目的观察过氧化物酶体增生物激活受体(PPARγ)激动剂罗格列酮对体外培养的人翼状胬肉成纤维细胞(HPFs)增生和凋亡的影响,寻求预防和辅助治疗翼状胬肉术后复发的新药物.方法对手术切除的原发性进展期翼状胬肉组织采用组织块培养法进行原代和传代培养,用酶消化法对培养的HPFs进行人工纯化.HPFs培养板中加入终浓度为5、10、25、50、75、100、150、200、400 μmol/L的PPARγ激动剂罗格列酮,同时设未加药物干预的对照组和只加培养液的空白对照组.观察不同浓度罗格列酮作用12-72 h后对HPFs生长的影响,MTT比色法检测细胞的生长抑制率,流式细胞仪检测细胞周期时相和凋亡的变化.实时定量聚合酶链反应(real-time PCR)检测增生细胞核抗原(PCNA)的表达变化.结果培养的HPFs呈长梭形,体积较大,呈铺路石样排列,对波形蛋白呈阳性反应,角蛋白反应阴性.罗格列酮作用后,培养的HPFs形态变圆.色变淡,核固缩或碎裂,局部细胞膜不完整.25～125μmoL/L罗格列酮作用12-72 h可抑制HPFs的增生,其作用呈剂量和时间依赖性(剂量:F=158.312,P=0.006;时间:F=1.924,P=0.135).流式细胞仪检测结果显示,25、75、125μmol/L罗格列酮作用于HPFs 24 h,随着浓度的增加G0/G1期细胞百分比逐渐上升,S期细胞百分比逐渐下降(P＜0.05),表明细胞阻滞于G0/G1期.罗格列酮组HPFs凋亡率明显高于对照组(P＜0.05),且随罗格列酮浓度的升高、作用时间的延长、HPFs凋亡率上升,差异有统计学意义(P＜0.05).随着罗格列酮浓度的增加,PCNA mRNA在HPFs中的表达明显降低,差异有统计学意义(F=3244.329,P＜0.05).结论 PPARγ激动剂以剂量和时间依赖的方式抑制HPFs的增生,并诱导其凋亡.大剂量的PPARγ激动剂可抑制细胞PCNA的合成和表达.
作者：邹媛；张明昌 刊期： 2011年第04期
背景玻璃体切割术中,角膜接触镜已得到广泛使用,配合接触镜使用的角膜环的改进也倍受关注.本课题组研制了一种新型免缝线的角膜环,其理化特性及生物相容性研究能为临床应用提供必要的理论依据.目的检测新型免缝线硅胶角膜环的理化性能特征和生物相容性.方法对新型免缝线硅胶角膜环进行邵氏硬度测试、拉伸应力应变测试、撕裂强度测试、透光率和雾度测试.收集人角膜上皮细胞进行细胞毒性分析以评价新型免缝线硅胶角膜环的生物相容性.6只成年白兔结膜囊内放置硅胶环产品,于6、24、48、72 h后记录白兔角膜荧光素着色面积以对硅胶环产品的刺激反应进行评价.6只成年SD大鼠备皮后皮肤表面放置硅胶环,并于6、24、48、72 h后测量SD大鼠局部皮肤红肿的面积以评价其过敏反应.结果新型免缝线硅胶角膜环的邵氏硬度为63.4度,拉伸强度大于5.86 MPa,伸长率大于100%,撕裂强度为34 kN/m.新型免缝线硅胶角膜环3爪的透光率均大于93%,而雾度均小于0.1%.免缝线硅胶角膜环对角膜细胞的细胞毒性测试值为3.11×10-6%.结膜囊内放置免缝线硅胶角膜环6、24、48、72 h,所有的兔眼均未见角膜荧光素着色.实验前及免缝线硅胶角膜环置于SD大鼠皮肤面后6、24、48、72 h,所有的SD大鼠皮肤均未见红肿.结论采用的硅橡胶理化特性能满足角膜环的制作要求,生物学评价符合ISO 10993-1评估医疗器材生物相容性的国际标准和生物体的要求,是制备角膜环较为理想的材料.
作者：穆泽辰；李筱荣；吴建国 刊期： 2011年第04期
背景研究证实免疫调节剂CpG ODN对蛋白类过敏原引起的变态反应性结膜炎有防治作用,但其对真菌引发的变态反应性结膜炎是否有类似作用尚不清楚.目的研究局部应用CpG ODN是否能够预防或减轻烟曲霉菌引发的变态反应性结膜炎.方法建立烟曲霉菌变态反应性结膜炎小鼠模型,用CpGODN或对照ODN(GpC ODN)对其进行干预,PBS干预作为阴性对照.实验分为预防实验(模型动物在变态反应原再次激发前给药)和治疗实验(激发后给药),对小鼠眼部临床症状进行评分.取小鼠结膜组织进行组织病理学检查,并计数标本中的炎性细胞.应用实时定量聚合酶链反应(real-time PCR)法动态观察小鼠结膜组织中TLR4 mRNA的变化;将烟曲霉菌免疫原与眼部回流淋巴结和脾脏的细胞进行共培养,流式细胞分析培养细胞中调节性T淋巴细胞的比例和活化状态.结果预防实验中,结膜下注射CpG ODN组与GpC ODN对照组、PBS对照组比较,小鼠眼部过敏症状评分差异均无统计学意义(P＞0.05);CpG ODN组与GpCODN对照组、PBS对照组比较结膜组织中性粒细胞数降低,差异均有统计学意义(21.25±11.59 vs 30.75 ±11.44,21.25±11.59 vs 69.00±9.90;t=5.140,t=3.210,P＜0.01);TLR4 mRNA表达上调.在治疗实验中,CpG ODN组与GpC ODN对照组、模型对照组比较,眼部过敏症状评分降低(t=4.000,t=2.750,P＜0.05);中性粒细胞数显著减少(t=4.870,t=3.829,P＜0.01).CpG ODN治疗组小鼠眼部回流淋巴结CD4+ CD25+细胞以及CD4+ CD25+ CD69+ 细胞所占的比例均显著高于GpC ODN组和PBS对照组(P＜0.05).结论 CpG ODN通过上调结膜TLR4的表达、活化Treg细胞来预防和治疗烟曲霉菌引起的变态反应性结膜炎,预先结膜下注射和点眼均可减轻小鼠眼部过敏症状和晚期结膜炎性细胞的聚集.
作者：李思媛；赵格；李长优；杨玲玲；陈豪；王宜强 刊期： 2011年第04期
背景激光共焦显微镜可从细胞水平对正常和病变组织进行活体观察,在眼表系统中的应用越来越广泛,但国内对正常球结膜的活体激光共焦显微镜检测结果报道较少.目的利用活体激光共焦显微镜观察分析正常球结膜的形态.方法应用德国海德堡激光共焦显微镜(HRT3)对健康志愿者15例21眼的上方、鼻下方、鼻侧、颞侧球结膜进行扫描,分辨率为1μm,激光波长为670 nm.观察视野为400μm×400μm.分析球结膜细胞的形态,对球结膜上皮细胞进行计数,并计算杯状细胞和树突状细胞(DC)的密度.结果球结膜表层上皮细胞胞核小,边界模糊.基底上皮细胞边界清晰晰但胞核不可见.类似杯状细胞的细胞呈卵圆形,胞体较大,细胞内充满高反光均一明亮颗粒.成群或散在分布,上皮表面的孔洞结构可能是已经分泌排出内容物的杯状细胞.DC呈高反光颗粒,伴树枝状突起,分布于球结膜上皮各层.球结膜基质由密集的白色网状纤维构成,其间可见含有细胞成分的血管穿过.球结膜表层上皮细胞密度和基底上皮细胞密度分别为(2556±692)mm2和(2985±376)mm2,杯状细胞和DC的密度分别为(77±39)mm2和(26±35)mm2.经统计学分析各方位上皮细胞密度差异无统计学意义(P=0.204,P=0.130),各方位杯状细胞和DC的差异有统计学意义(P=0.001,P=0.000).结论激光共焦显微镜是活体研究人类球结膜形态的有用工具,有助于眼表疾病的诊断和治疗.
作者：宋影慧；王丽娅；荆洋；张月琴；李金 刊期： 2011年第04期
背景年龄相关性黄斑变性(AMD)的早期诊断和治疗至关重要.以往对AMD的诊断主要参照荧光素眼底血管造影(FFA)和光学相干断层扫描(OCT),但眼底自发荧光技术(FAF)无需注射造影剂,大大优化了诊断过程.目的观察萎缩性AMD的FAF特征.方法 28例39眼萎缩性AMD按照陈松的分类方法进行分组,应用激光共焦扫描检眼镜HRA2获得所有患者的FAF平均图像,并与眼底照相或FFA结果进行比较.结果萎缩性AMD的FAF信号异常增高或降低区域与眼底的改变可能对应或不对应.萎缩性AMD萎缩前期FAF改变包括轻微改变、局灶性、片状、线性、花边样、网状和斑点状增强等7种形态.萎缩性AMD萎缩期地图状萎缩区呈边界清晰的低FAF区,其交界区表现为正常FAF、FAF带状增强或弥漫性增强;非地图状萎缩呈边界不清的低FAF区,其交界区FAF弥漫性增强.结论 FAF成像技术为萎缩性AMD的诊断提供了一种新的非侵入性检查手段.
作者：苏兰萍；彭锡嘉 刊期： 2011年第04期
背增生性玻璃体视网膜病变(PVR)是导致视网膜脱离手术失败的主要原因之一.蛋白质组学是研究人体组织中差异蛋白的重要方法.目的应用双向凝胶电泳(2-DE)联合质谱分析法对原发性视网膜脱离伴PVR患者进行差异蛋白质组分析,筛选出PVR眼特异的蛋白质表达.方法经玻璃体切割术收集PVR B级(轻度PVR),PVR C、D级(重度PVR)患者各8例8眼的玻璃体标本进行(2-DE)联合质谱检测分析,正常供体8眼作为对照.抽取的玻璃体标本再水化液重溶后,加至固相pH梯度胶条(18 cm,pH3-10)水化,等电聚焦,平衡后进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,银染.对差异明显的蛋白质点(至少2倍以上的吸光度)进行胶内酶解,质谱鉴定.结果供体眼、轻度PVR眼和严重PVR眼经2-DE图谱分别检测到玻璃体标本中47、184和336个蛋白质点,PVR增加的蛋白质点的pH等电点以5-8居多,轻度PVR和重度PVR分别为104(56.5%)和230点(68.5%),在13个明显差异点中鉴定到7种蛋白质.其中,烯醇酶为供体眼所特有,甲状腺激素结合蛋白单体和视黄醇结合蛋白(RBP)单链为重度PVR玻璃体中特异表达的蛋白质,前列腺素D合成酶和RBP3前体在供体眼和PVR眼玻璃体均能检测到,且在轻度PVR眼中表达量较高,严重PVR眼下调.玻璃体中血清白蛋白和转铁蛋白随PVR严重程度的增加而明显上调.结论 PVR发病过程中,原有的玻璃体蛋白质发生降解,部分血清中的蛋白质明显上调,表明PVR眼有血-视网膜屏障的破坏.
作者：于靖；王方 刊期： 2011年第04期
背景青光眼以视网膜内层的神经节细胞丢失为主要病理特征,但其是否累及视网膜外层尚有争议.部分研究认为青光眼将导致视网膜外层(光感受器)功能的异常,而病理学研究得出了不同的结论.目的用频域OCT测量正常人和青光眼患者光感受器细胞层的厚度,探讨青光眼对光感受器细胞层厚度的影响.方法采用病例对照研究.用频域OCT(SD OCT)对正常人38例38眼和青光眼患者48例48眼的黄斑区进行扫描,由一位检测者采用Sigma图像分析软件盲法测量黄斑中心凹和旁中心凹处(中心凹外1.5 mm)视网膜光感受器层的厚度.同时采用时域OCT(Stratus OCT)测量所有检测眼的视盘周围视网膜神经纤维层(RNFL)厚度,比较正常组和青光跟组光感受器细胞核层的平均厚度,分析光感受器细胞层厚度与BNFL厚度的关系.结果正常组和青光眼组在黄斑中心凹光感受器细胞核层厚度分别是(96.7±10.7)μm、(103.7±13.3)μm,差异有统计学意义(P=0.011);中心凹光感受器内节和外节层厚度分别是(59.3±5.5)μm、(59.5±5.5)μm,差异无统计学意义(P=0.890).正常组和青光眼组在中心凹外3 mm处光感受器细胞核层厚度分别是(70.9±14.0)μm、(68.7±10.7)μm,光感受器内节和外节层厚度分别为(45.2±6.4)μm,(43.6±5.5)μm,差异均无统计学意义(P=0.410.P=0.228).黄斑中心凹处光感受器细胞核层厚度和RNFL厚度两者有二元线性关系(Y=-0.019X2+2.73X+10.34,R2=0.211,P=0.005).结论青光眼的黄斑中心凹光感受器细胞核层显著增厚,并随病程的变化而改变.
作者：樊宁；黄丽娜；成洪波；赖铭莹 刊期： 2011年第04期
常染色体显性视神经萎缩(ADOA),又称为Kjer型视神经萎缩,是显性遗传性视神经疾病中常见的一种,其发病率为1∶10 000-1∶50 000.其主要的临床表现为视力下降、色觉障碍、视野缺损等,特征性的眼底改变为颞侧视盘苍白.本病还可以伴随听力下降、白内障、眼外肌麻痹、上睑下垂等.目前,已发现的ADOA侯选基因位点包括OPA1(3q28-29)、OPA3(19q13.2-13.3)、OPA4(18q12.2-12.3)和OPA5(22q12.1-13.1)等.其中,OPA1与OPA3位点均已克隆出相应的同名基因,但本病的基因型与表型的关系及致病机制还不十分明确.就ADOA的临床表现、与ADOA相关的侯选基因、位点及其鉴别诊断的新研究进行总结.
作者：邓婷 刊期： 2011年第04期
圆锥角膜是一种严重影响患者视功能的扩张性角膜病变,目前其治疗方式包括配戴框架眼镜或角膜接触镜、角膜表面镜片术、角膜移植术等.飞秒激光是一种以脉冲形式运转的红外线激光,精确度高,安全性好,操作简便,已在角膜移植、基质环植入及角膜胶原交联等研究领域得到了较好的应用;尤其是在角膜胶原交联中的应用可极大地改善患者的舒适程度,此外飞秒激光与多种圆锥角膜的治疗方法联合应用也会达到更好的效果.就近年来飞秒激光在圆锥角膜治疗中的相关应用进展进行综述.
作者：董子献 刊期： 2011年第04期
晶状体的混浊可造成光线散射,导致视网膜成像的对比度和清晰度下降,影响白内障患者的正常工作和生活.进行白内障手术后,部分患者虽然视力检查良好,但仍反映视觉质量很差.寻求一种能够相对客观地反映屈光介质和视网膜成像的检测系统来评价视觉质量显得尤为重要.目前临床上常用的方法为对比敏感度(CS)检查和视觉问卷调查,通过测量CS可以判断白内障患者视觉质量和生活质量下降的程度,且对白内障术后疗效的评价有重要价值.通过文献回顾,就年龄相关性白内障患者术前及术后CS特征的研究进展进行综述.
作者：黄静 刊期： 2011年第04期
新生血管性年龄相关性黄斑变性(nAMD)和息肉状脉络膜血管病变(PCV)是常见的引起老年人致盲和严重视力损害的眼病,都以黄斑区出血和渗出为特征.近年来,关于PCV是否为nAMD的一种亚型存在着争论.nAMD和PCV具有部分相同的强关联易感基因位点(CFH,ARMS2/HTRA1),但在更多不同的基因位点(如BF/C2,Elastin,PEDF,SERPING1,VEGF,APOE等基因)上存在区别,这可能提示了PCV和nAMD在病因学上存在差异.但就目前nAMD和PCV的研究现状,尚无法严格地将其定义为两种不同的疾病.就nAMD和PCV的分子生物学研究现状和存在问题进行阐述.
作者：文峰；吴崐芳 刊期： 2011年第04期
背景研究表明,导致先天性视网膜劈裂症(XLRS)的原因是RSI基因突变,XLRS的不同临床表现型与不同的基因突变类型有关,但基因型与表现型的关系仍不十分清楚.目的研究12个中国人XLRS家系及检测到的11种XLRS1基因突变与临床表现型的关系.方法对12个XLRS家系的28例男性患者(其余3例已死亡)及女性携带者和正常对照者分别进行详细的眼科检查,包括视力、屈光度、裂隙灯及眼底检查,部分患者行全视野视网膜电图(ERG)、眼底血管造影、光学相干断层扫描(OCT)及A/B型超声检查.采用聚合酶链反应(PCR)和单链构象多态性(SSCP)分析,对XLRS1基因突变进行筛查,并对发现异常泳带的PCR产物进行DNA测序,以明确突变位点及突变类型.结果 12个家系的28例男性患者中27例有典型的黄斑及视网膜劈裂表现,ERG检查可见b波振幅下降,b/a波比值倒置.12个家系中检出11种不同的XLRS1致病基因突变,其中有4种新发现的基因突变,即:位于外显子1的移码突变(L9CfsX20);位于外显子5的Asp145His,Arg156Gly和Trp163X突变,并新发现1种非疾病相关多态性(NSP),即位于外显子6的576C→T(Pro192Pro)改变.同时发现位于外显子1的移码突变(22 del T),外显子1与内含子1剪接位点突变(IVSI+2T to C)和Arg102Gln,Arg209His,Arg213Gln突变家系的患者,临床表现为严重型XLRS.结论XLRS1基因突变是导致中国人先天性视网膜劈裂的原因,XLRS的严重临床表现与基因突变的类型及突变位点具有一定的相关性.
作者：马翔；黎晓新；赵贵阳 刊期： 2011年第04期
病理性眼压升高多源于房水排出受阻,与小梁网内皮小梁细胞形态和功能的变化密切相关.小梁细胞间存在紧密连接,对细胞内外各种物质的交换起调节作用[1-3].紧密连接由跨膜蛋白、细胞质附着蛋白和细胞骨架蛋白组成,水控蛋白-1、闭合蛋白、连接黏附蛋白(Junctional Adhesion Molecule-1,JAM-1)组成紧密连接的跨膜结构[4-9],3种蛋白的失衡直接影响小梁细胞间紧密连接的结构和功能,从而改变小梁网的通透性.皮质类固醇性青光眼是否有细胞间紧密连接的改变尚不明了.本研究观察地塞米松对人眼小梁细胞水控蛋白-1、闭合蛋白、JAM-1表达的影响,探讨皮质类固醇性青光眼可能的发病机制.
作者：黄亚琳；卓业鸿；魏雁涛；葛坚 刊期： 2011年第04期
