背景 白细胞介素-1β(IL-1β)是增生性玻璃体视网膜病变(PVR)早期释放的重要炎性因子,研究证实姜黄素能抑制IL-1β诱导的兔视网膜色素上皮(RPE)细胞的增生,但其是否能够对PVR发挥抗炎作用尚不清楚. 目的 观察姜黄素对IL-1β诱导的兔RPE细胞移行的影响,探讨姜黄素对IL-1β诱导的RPE细胞中炎性因子表达的影响.方法 采用对数生长期原代培养的第4代兔RPE细胞进行实验,在无血清DMEM培养基中分别添加0、0.1、1.0和10.0 μg/L的IL-1β作用于细胞24 h,分别采用Western blot和逆转录PCR法检测细胞中环氧合酶-2(COX-2)蛋白和mRNA的表达以筛选IL-1β佳质量浓度.将培养的RPE细胞分为IL-1β组和姜黄素+IL-1β组,分别在无血清培养基中添加1.0 μg/L IL-1β和1.0μg/L IL-1β联合10 μg/ml姜黄素作用于细胞24、48和72 h,仅用无血清培养基培养的细胞作为对照组.培养的细胞行苏木精-伊红染色,于光学显微镜下计算进入损伤区的细胞数,比较各组细胞的移行能力;分别采用Western blot法和逆转录PCR法检测各组RPE细胞中COX-2蛋白及其mRNA的相对表达量,采用Western blot法检测并比较各组细胞中核因子-κBp65(NF-κBp65)蛋白和核因子κB抑制蛋白-α(IκB-α)的相对表达量;采用免疫化学染色法检测NF-κBp65、IκB-α和COX-2在各组RPE细胞中的表达和定位. 结果 初分离的兔RPE细胞呈球形,细胞中可见大量黑色素颗粒;第4代细胞色素颗粒明显减少,接近融合的细胞形态为长梭形,呈拉网状分布.免疫细胞化学染色法结果显示,细胞角蛋白(AE1/AE3)在细胞质呈阳性表达.对照组在培养24、48和72 h移行的细胞数分别为(31.93±1.21)、(36.27±2.50)和(38.33±2.40)个,IL-1β组分别为(45.73±2.30)、(71.13±1.92)和(80.60±1.71)个,而姜黄素+IL-1β组分别为(13.13±2.20)、(14.93±1.10)和(12.60±1.51)个,各时间点IL-1β组细胞移行细胞数均明显高于对照组,而姜黄素+IL-1β组移行细胞数均明显低于对照组和IL-1β组,差异均有统计学意义(均P<0.05).IL-1β质量浓度为1.0 μg/L时,RPE细胞中COX-2蛋白及其mRNA的相对表达量达峰,以1.0 μg/L IL-1β的剂量进行后续实验.细胞培养后24、48和72 h,姜黄素+IL-1β组细胞中COX-2蛋白及其mRNA的相对表达量均明显低于IL-1β组,差异均有统计学意义(均P<0.05).IL-1β作用于细胞后48 h,细胞中NF-κBp65蛋白的相对表达量高,与IL-1β组相比,各时间点姜黄素+IL-1β组细胞中NF-κBp65蛋白相对表达量降低,差异均有统计学意义(均P<0.05).IL-1β组药物作用于细胞后48 h细胞中IκB-α降至低,各时间点姜黄素+IL-1β组细胞中IκB-α值均明显高于IL-1β组,差异均有统计学意义(均P<0.05).免疫细胞染色结果显示,IL-1β组RPE细胞的细胞核及细胞质中NF-κBp65呈强阳性表达,对照组表达较弱,姜黄素+ IL-1β组细胞中NF-κBp65的表达强度较IL-1β组明显降低;与对照组相比,IL-1β组细胞的细胞质中IκB-α表达强度明显减弱,而COX-2表达明显增强;与IL-1β组比较,姜黄素+IL-1β组细胞中IκB-α表达明显增强,而COX-2表达明显减弱.结论 姜黄素可抑制IL-1β引起的兔RPE细胞的移行,IL-1β通过激活NF-κB信号通路刺激细胞中COX-2的表达,姜黄素可通过阻断这一途径而抑制炎性因子的表达,从而发挥抗炎作用.
作者:刘丽娅;马景学;刘丹岩;安建斌;周娜磊;马月磊 刊期: 2016年第09期
背景 视网膜色素上皮(RPE)细胞的正常超微结构是其执行正常生理功能的解剖基础,目前用透射电子显微镜(TEM)检测RPE细胞的超微结构时常用细胞沉淀法,但经过胰蛋白酶消化的细胞会破坏原有的细胞生长状态,无法真实地反映出体外培养的RPE细胞的超微结构. 目的 探索一种能够简单、真实地反映体外培养的入胚胎干细胞(hESC)来源的RPE细胞超微结构的方法. 方法 将hESC经自然分化法诱导为hESC来源的RPE(hESC-RPE)细胞,采用免疫荧光法检测hESC-RPE细胞特异性蛋白小眼畸形相关转录因子(MITF)和人类配对盒基因6(PAX6)的表达.将hESC-RPE细胞种植于Transwell小室上进行培养,待细胞形成细胞片后通过TEM进行超微结构的观察,并与细胞沉淀法制备的hESC-RPE细胞标本的超微结构和90日龄Long Evans大鼠体内RPE细胞的超微结构进行比较. 结果 hESC-RPE细胞MITF和PAX6表达阳性.TEM下可见大鼠体内RPE细胞正常的超微结构,包括顶端微绒毛、极性分布的RPE细胞色素颗粒和细胞核、细胞基底膜和细胞间紧密连接.细胞片法TEM下可见Transwell小室上细胞片中hESC-RPE细胞形成了类似于大鼠体内RPE细胞的超微结构,但细胞顶端微绒毛较短,而细胞沉淀法观察到hESC-RPE细胞的细胞质中散在分布的色素颗粒、非极性的细胞核和少量的微绒毛.结论 TEM观察细胞超微结构时细胞片法不经过细胞的消化过程,保留了hESC-RPE细胞的正常结构,能简单、真实地反映体外培养RPE细胞的超微结构.
作者:吴畏;屈娅;王磊;曾玉晓;徐海伟;阴正勤 刊期: 2016年第09期
背景 视网膜色素上皮(RPE)细胞移植是目前人类尝试治疗视网膜色素变性(RP)的主要手段.诱导多能干细胞(iPSCs)将成为移植细胞的一个重要来源,人胚胎干细胞(hESCs)可以无限期地自我更新和分化,是RPE细胞移植的重要供体来源.此外,iPS-RPE细胞为患者自身细胞成为治疗源组织提供了个性化治疗平台. 目的 评估利用逆转录病毒将Oct4、Sox2、c-Myc和Klf44种基因导入RP患者皮肤成纤维细胞后诱导人iPSCs的可行性,并建立将正常人iPSCs诱导分化为RPE细胞的方法. 方法 分别采集基因突变点为SNRNP200 p.S1087L的RP患者及无SNRNP200 p.S1087L突变受试者的大腿皮肤组织块约2 cm×3 cm.采用胰蛋白酶消化和组织块培养法分离纯化得到成纤维细胞并进行传代,取第3代细胞用于研究,分别采用形态学和免疫荧光技术对培养细胞进行鉴定.采用含OCT4、SOX2、C-MYC和KLF4 4种cDNA的质粒病毒转染的成纤维细胞,并用hESCs条件培养液诱导iPSCs,采用细胞形态学、碱性磷酸酶(AP)染色、干细胞表面多潜能标志物表达对所得到的iPSCs和iPS-RPE细胞进行鉴定,并通过细胞在SCID小鼠的体内种植考察iPSCs的成瘤性.采用诱导分化拟胚体(EB)法将不含SNRNP200 p.S1087L突变的iPSCs诱导分化为RPE细胞,分别采用免疫荧光技术和实时荧光定量PCR法检测细胞中特异性蛋白的表达.结果 用皮肤组织块培养的成纤维细胞呈梭形和多角形,光学显微镜下可见细胞间排列紧密,细胞形态和大小趋于一致,细胞中特异性蛋白Vimentin表达阳性.经逆病毒转染的成纤维细胞培养后第5~7天可见小的细胞聚集,细胞形态由梭形变为圆形;培养后20d出现类似hESCs集落形态的iPSCs克隆;培养后25 ~ 30 d细胞中的标志物SSEA3、SSEA4、TRA-1-60、TRA-1-81及Nanog均呈阳性表达,培养后12周形成的iPSCs克隆中AP染色阳性,接种到SCID小鼠体内后形成畸胎瘤.免疫荧光染色显示,诱导分化后30 d时iPS-RPE细胞中RPE细胞特异性标志物RPE65、闭锁小带蛋白1(ZO-1)和卵磷脂视黄醇酰基转移酶(LRAT)蛋白均呈阳性表达.结论 利用逆转录病毒将Oct4、Sox2、c-Myc和Klf44种基因转入SNRNP200 p.S1087L突变的RP患者皮肤成纤维细胞后可以获得iPSCs,建立的iPSCs有ESCs的形态和多能分化的特征.采用同样的转染技术可在无SNRNP200 p.S1087L突变的人皮肤成纤维细胞中建立体外高分化、高效能的iPS-RPE细胞.
作者:田媛媛;蒋超;陈雪;丁思加;徐敏;赵晨 刊期: 2016年第09期
背景 视网膜小胶质细胞(RMG)的活化在视网膜变性疾病的发病过程中发挥重要作用,趋化因子CX3C模体配体1(CX3CL1)参与小胶质细胞稳态的调节.骨髓间充质干细胞(BMSCs)可通过旁分泌的方式释放可溶性因子,保护中枢神经系统组织细胞的生物功能,但其对治疗视网膜变性疾病的途径和靶细胞是否为RMG尚不清楚. 目的 观察BMSCs对脂多糖(LPS)活化的RMG生物学功能的影响,探讨CX3CL1/CX3CR1信号通路对二者相互作用的影响.方法 采用视网膜胶质细胞混合培养和振荡分离的方法分离培养SD大鼠RMG,采用免疫荧光染色法观察细胞中CD11b、Iba1和谷氨酰胺合成酶(GS)的表达以鉴定培养的RMG.在细胞培养液中添加1 mg/ml的LPS液2μl以刺激RMG 24 h,然后将细胞分为LPS对照组、BMSCs组和CB-BMSCs组,其中BMSCs组将RMG与BMSCs共培养24 h,CB-BMSCs组将RMG与中和性抗体封闭CX3CL1的BMSCs共培养24 h,未予LPS刺激的RMG作为空白对照组.采用ELISA法检测共培养体系中RMG分泌肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)的变化;采用EdU法观察各组RMG的增生能力;采用流式细胞术检测RMG吞噬荧光微球后的平均荧光强度(MFI);利用Transwell小室试验检测RMG的迁移细胞数.结果 用视网膜胶质细胞混合培养和振荡分离的方法成功分离和培养出RMG,细胞中CD11b和Iba1阳性表达呈绿色荧光,GS呈阴性表达.空白对照组、LPS对照组、BMSCs组和CB-BMSCs组细胞上清液中TNF-α的分泌量分别为(2.55±0.97)、(24.91±3.07)、(20.38±2.97)和(24.90±1.88) ng/ml,总体比较差异有统计学意义(F=119.90,P<0.05);IL-1β的分泌量分别为(1.12±0.36)、(10.40±2.76)、(7.00±1.75)和(9.55±1.11)ng/ml,总体比较差异有统计学意义(F=34.96,P<0.05);其中BMSCs组TNF-α和IL-1 β分泌量均低于LPS对照组(均P<0.05),而CB-BMSCs组与LPS对照组间TNF-α和IL-1β分泌量的差异均无统计学意义(均P>0.05).各组间RMG增生率的总体比较差异有统计学意义(F=42.94,P<0.05),其中BMSCs组RMG增生率明显低于LPS对照组,差异有统计学意义(P<0.05),而BMSCs组与CB-BMSCs组间差异无统计学意义(P>0.05).各组间RMG的MFI值和迁移细胞数量的总体比较差异均有统计学意义(F=70.55、15.49,均P<0.05),其中BMSCs组MFI值和迁移细胞数量均明显高于LPS对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05),而CB-BMSCs组与LPS对照组间MFI值和迁移细胞数量的比较差异无统计学意义(均P>0.05).结论 BMSCs能够抑制LPS活化的RMG的增生能力,可能通过CX3CL1/CX3CR1信号通路来抑制活化的RMG分泌促炎性因子,并增强RMG的吞噬和迁移能力.
作者:黄礼彬;徐国兴;谢茂松;林雯;崔乙;李剑冰 刊期: 2016年第09期
背景 干眼的发病率有逐渐升高的趋势,炎症反应参与干眼的发生和进展过程,而目前的治疗方法通常仅能缓解症状,而不能达到彻底治愈的目的.已有研究将干细胞移植用于眼表损伤引起的角膜缘干细胞缺乏症,但干细胞是否可用于干眼及其作用机制的研究鲜见报道. 目的 探讨人脐带间充质干细胞(HUCMSCs)移植治疗干燥综合征的可行性及治疗途径. 方法 采用完全随机方法将20只24周龄雄性NOD/Ltj小鼠分为尾静脉注射组、泪腺注射组、点眼组和模型组,分别采用HUCMSCs悬液尾静脉注射法、泪腺注射法和点眼法进行HUCMSCs移植,模型组小鼠不移植HUCMSCs,采用ICR雄性小鼠5只作为正常对照.分别于注射后1、2和3周采用酚红棉线法测量各组小鼠的泪液分泌量;采用角膜荧光素钠染色法对角膜上皮的缺损情况进行评分;采用ELISA法检测各组小鼠血清白细胞介素(IL)-6、IL-17a、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和γ干扰素(IFN-γ)质量浓度;采用Western blot法检测各组小鼠泪腺组织中p65、Stat3、Stat5和细胞外信号调节激酶-1(Erk-1)的相对表达量.对各组小鼠上述指标的测定结果进行比较.结果 模型组、尾静脉注射组、泪腺注射组和点眼组NOD/Ltj小鼠干预后1、2和3周时组间泪液分泌量的总体比较差异均有统计学意义(第1周:F=3.700,P=0.040;第2周:F=5.150,P=0.008;第3周:F=10.130,P<0.001),其中注射后第1、2和3周尾静脉注射组、泪腺注射组小鼠的泪液分泌量均明显多于模型组,差异均有统计学意义(均P<0.05),但各时间点点眼组小鼠的泪液分泌量与模型组比较差异均无统计学意义(均P>0.05).注射后1周ICR小鼠对照组、模型组、尾静脉注射组、泪腺注射组和点眼组角膜荧光素钠染色评分分别为3.00±0.63、9.40±1.62、5.20±1.17、4.20±1.17和7.20±0.98,其中尾静脉注射组、泪腺注射组和点眼组小鼠角膜荧光素染色评分值明显低于模型组,差异均有统计学意义(P=0.001、0.000、0.033).注射HUCMSCs后尾静脉注射组小鼠血清IL-6、IL-17a和TNF-α质量浓度均明显低于模型组,差异均有统计学意义(t=4.70、3.46、11.00,均P<0.01),而各组间小鼠血清IFN-γ,质量浓度总体比较差异无统计学意义(F=1.740,P=0.170).尾静脉注射组和泪腺注射组小鼠眶外泪腺中Stat5蛋白相对表达量低于模型对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 NOD/Ltj干燥综合征模型小鼠全身和泪腺局部注射HUCMSCs能够分别抑制血清和泪腺中炎性相关因子的表达,减轻炎症反应,从而治疗干眼.HUCMSCs点眼法能够发挥润滑和营养角膜的作用,从而缓解干眼症状.
作者:黄守强;付艳霞;毛科杰;张旭;张诚;彭秀军 刊期: 2016年第09期
背景 了解动物或人的角膜神经分布和发育过程对于角膜疾病的临床和基础研究具有重要意义,目前关于动物角膜神经发育和特异性定位的研究结果已有发表,但是有关胚胎发育阶段角膜神经纤维的分布规律和角膜神经纤维的定量研究结果尚少见. 目的 了解鸡胚发育过程中角膜神经纤维的分布,并定量评价随着鸡胚龄增长其角膜神经纤维长度和密度的变化规律. 方法 选取胚胎期6 ~20 d(E6~E20)的鸡胚作为角膜胚胎发育模型,获取相应胚期的带有角膜缘的完整鸡角膜,使用β-tubulinⅢ抗体进行角膜免疫荧光染色,以标记角膜神经,将角膜上皮面朝上做角膜上皮的放射状切开,制备全角膜铺片,用含DAPI抗荧光淬灭缓冲甘油封片.利用正置荧光显微镜拍摄获取整个角膜的神经纤维图像,使用Photoshop CS4测量不同胚龄的鸡胚角膜表面积和神经纤维束数量,采用Imaris x64 7.4.2软件测量不同胚龄的鸡胚角膜神经纤维总长度和密度.结果 全角膜铺片显示,鸡胚E6 ~ E8可见神经束从颞侧巩膜进入角膜缘,E9 ~ E10时神经纤维在角膜缘呈环状分布,E11~ E15时延伸进入角膜中央,E16 ~ E20时角膜形成神经纤维丛.E6~E20期间,鸡胚角膜表面积、角膜神经纤维长度、角膜神经纤维密度均随着胚龄的增长而逐渐增加,总体比较差异均有统计学意义(F=127.007、227.051、67.748,均P<0.01),鸡胚角膜表面积与角膜神经纤维长度间呈强正相关(r=0.863,P<0.01).鸡胚角膜神经纤维束从E13开始出现,为(59.00±1.14)/mm2,此后缓慢增加,至E18达到高峰,数量为(576.75±29.16)/mm2,至E20时角膜神经纤维束数量减少,为(299.67±25.46)/mm2,不同胚龄期鸡胚角膜神经纤维束数量的总体比较差异有统计学意义(F=13.759,P=0.000).结论 鸡胚角膜神经发育从E9开始,随着发育鸡胚角膜表面积、角膜神经纤维总长度及密度均快速增加.
作者:薛芸霞;马征来;李志杰;杨雪松 刊期: 2016年第09期
背景 已有研究表明飞秒激光小切口基质透镜取出术(SMILE)短期疗效好,术后视力恢复快,并发症少,因此已广泛用于临床,但目前仍缺乏其术后长期疗效和安全性评价研究. 目的 评估SMILE矫正近视及近视散光的远期有效性、安全性、可预测性、稳定性及相关手术并发症. 方法 采用系列病例观察研究方法,纳入2013年1-6月在河南省眼科研究所就诊的近视及近视散光患者34例67眼,所有患者均由同一有角膜屈光手术经验的医师行SMILE,分别于术前,术后1d、1周、1个月、3个月、1年及2年时进行随访观察,检查患者裸眼视力(UCVA)、佳矫正视力(BCVA)、电脑验光、主觉验光、眼压及角膜地形图等参数.SMILE的效果评价指标主要包括有效性指数(术前BCVA/术后UCVA值)、安全性指数(术后BCVA/术前BCVA值)、可预测性[对术眼实际等效球镜度(SE)与预矫正SE进行线性回归分析]和术后屈光稳定性(术后不同时间点SE变化). 结果 术前术眼BCVA≥20/20者60眼,占89.55%;术后3个月及2年分别有61眼和60眼UCVA≥20/20,分别占91.04%和89.55%.术后3个月和2年时SMILE有效性指数分别为1.038±0.182和1.029±0.231,差异无统计学意义(t=0.400,P>0.05).与术前BCVA相比,术后3个月及2年分别有8.96%和10.45%术眼BCVA降低1行,未发现BCVA降低2行及以上者;术后3个月和2年SMILE安全性指数分别为1.141±0.193和1.312±0.242,差异有统计学意义(t=0.414,P>0.05).术后3个月及2年术眼实际SE与预矫正SE均呈明显线性关系,回归方程分别为Y=0.897 1X-0.440 8(R2 =0.914 2,P<0.05)和y=0.893 7X-0.382 3(R2=0.915 7,P<0.05).术后1d、1周、1个月、3个月、1年和2年术眼SE分别为(0.013±0.578)、(-0.033±0.489)、(-0.106±0.508)、(-0.103±0.375)、(-0.154±0.518)和(-0.147±0.366)D,总体比较差异无统计学意义(F=0.185,P=0.176).术中12例18眼出现轻度弥散型不透明气泡(OBL),4例6眼发生弥漫性板层角膜炎(DLK),1例2眼出现点状角膜炎,药物治疗后症状消失. 结论 SMILE治疗近视及近视散光并发症少,术后2年随访证实其有效性、安全性、可预测性和稳定性较好.
作者:任胜卫;庞辰久;孟志红;代丽娟;鲁传琴;顾宇伟;彭海鹰 刊期: 2016年第09期
背景 黄斑水肿是视网膜中央静脉阻塞(CRVO)常见的并发症之一,目前的治疗方法是激光疗法和抗新生血管药物的玻璃体腔注射.康柏西普是人源化血管内皮生长因子(VEGF)受体抗体,临床上常用于眼底新生血管性疾病的治疗,其在治疗CRVO继发性黄斑水肿方面疗效的研究较少. 目的 比较康柏西普和曲安奈德(TA)玻璃体腔注射对CRVO继发黄斑水肿的疗效及安全性. 方法 采用非随机对照临床研究方法,纳入2012年3月至2013年8月在潍坊市益都中心医院诊断为CRVO继发黄斑水肿者60例60眼,按照就诊日期分为康柏西普组和TA组,每组30例30眼,2个组患者人口基线特征接近.2个组患眼分别行0.05 ml康柏西普或0.05 ml(0.05 mg)TA玻璃体腔注射,分别于注射前和注射后1周、1个月、3个月、6个月进行复查.主要评价指标包括注射眼佳矫正视力(BCVA)和OCT检查的黄斑中心凹厚度(CMT),次要指标包括注射前后眼压变化和眼部并发症. 结果 康柏西普组和TA组患眼玻璃体腔注射后1周、1个月、3个月和6个月BCVA均明显优于注射前,差异均有统计学意义(均P<0.01);注射后1个月TA组注射眼平均BCVA优于康柏西普组,差异有统计学意义(P<0.05).康柏西普组患眼注射前及注射后1周、1个月、3个月和6个月CMT值分别为(572.00±100.01)、(325.12±91.55)、(280.00±92.37)、(258.65±88.65)、(300.00±87.64)μm,TA组分别为(570.00±102.21)、(345.12±89.31)、(290.00±80.27)、(309.65±84.13)和(303.00±90.59)μm,2个组患眼注射后CMT值较注射前均明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05),注射后3个月康柏西普组患眼CMT值下降更明显,与TA组比较差异有统计学意义(P<0.05).TA组患眼注射前及注射后1周、1个月、3个月和6个月眼压值分别为(15.20±3.52)、(21.20±3.80)、(26.40±4.00)、(23.60±3.73)和(21.50±3.27)mmHg(1 mmHg =0.133 kPa),注射后各时间点眼压值均明显高于注射前,且TA组注射后各时间点患眼眼压均明显高于康柏西普组,差异均有统计学意义(均P<0.05),而康柏西普组注射前后患眼眼压变化差异无统计学意义(P>0.05).结论 玻璃体腔注射TA及康柏西普治疗CRVO所致黄斑水肿有效,可减轻视网膜水肿并改善视力.与TA相比,玻璃体腔注射康柏西普无眼压升高的风险,更加安全可靠.
作者:马锋伟;杜翠云;程美红;马玉胜 刊期: 2016年第09期
背景 白内障是目前全球主要的致盲眼病,患者视功能状态的全面评价要结合临床检查结果和患者主观评价.视功能指数量表(VF-14)是针对发达国家白内障患者研发的评估工具. 目的 研制中国版视功能指数量表并评估其在白内障患者生活质量(QoL)测量中的应用价值,探讨白内障患者QoL的影响因素.方法 采用前瞻性横断面调查研究方法,对原版VF-14量表进行翻译、回译和文化调试,形成中国版VF-12量表(VF-12-CN).于2013年2-10月在温州医科大学附属眼视光医院对拟行白内障手术的年龄相关性白内障或糖尿病性白内障患者215例中发放VF-12-CN进行QoL问卷调查,分析量表的条目区分度、信效度以及白内障患者得分的影响因素.任意选取完成问卷的48例白内障患者,由2名经过统一培训的调查员独立进行评分,由专家小组成员采用4级评分法对量表各条目内容是否能反映所测患者的心理特质、是否达到测量的目的进行评价. 结果 从受试者中共收回有效调查答卷200份,应答率为93.02%.根据中国的文化和经济背景及生活习惯对原版VF-14量表中涉及填表、体育和娱乐活动的3个条目进行了修改,对于应答率过低的关于驾车的2个条目进行删除.形成的VF-12-CN量表的条目区分度好,Cronbach's α系数为0.863,Guttmann Split-Half系数为0.874,调查员间信度为0.958.VF-12-CN量表中所有内容效度指数均为1.0;经因子分析共提取2个公因子,累计方差贡献率为59.3%.量表总分与年龄、较好眼裸眼远视力、较差眼裸眼远视力均呈正相关(r=0.277、0.534、0.367,均P<0.01);文盲与非文盲组的量表得分分别为12.5±8.6和15.7±7.4,差异有统计学意义(t=2.798,P<0.01);此外,不同年龄、较好眼裸眼远视力、较差眼裸眼远视力和白内障眼数间量表得分的差异均有统计学意义(均P<0.05).不同性别间及是否有眼部伴发病或全身伴发病组间患者总评分的比较,差异均无统计学意义(t=-0.426、0.304、-1.019,均P>0.05).较好眼裸眼远视力、患者年龄及文化程度为白内障患者QoL的主要影响因素,回归方程为量表总分=25.045-10.927×较好眼裸眼远视力-3.342×文化程度+3.201×年龄(R=0.586,R2=0.334,F=34.247,P=0.000). 结论 VF-12-CN量表具有良好的测量特性,可用于中国人白内障患者QoL的评估.较好眼裸眼远视力是影响白内障患者QoL的主要因素.
作者:高蓉蓉;郭燕;陈海丝;章思芳;王勤美;俞阿勇;黄锦海 刊期: 2016年第09期
背景 硅油填充眼超声生物学测量的准确性和可行性是眼科诊疗过程中的难题,对硅油眼性白内障行超声乳化联合人工晶状体(IOL)植入术时IOL度数的计算造成困难.一些大型医院常采用光学测量仪IOLMaster实现对硅油填充眼的生物学测量,但其对屈光介质严重混浊的病例仍无法进行测量.曾有研究者采用超声改良法或眼轴分段测量法进行估算,但其研究结果可能由于硅油黏度的不同而差异较大.目的 探讨超声对黏度5 500 mPas硅油填充眼生物学测量的计算方法,为超声法对不同黏度硅油填充眼进行生物学测量提供方法学参考依据. 方法 采用B型超声仪于37℃下对高度分别为20、24和28 mm的平衡盐溶液进行测量,并与黏度5 500 mPas硅油的相应测量高度进行比较,以得到计算硅油眼实际眼轴长度(AL)的公式.收集于2012年5月至2014年3月在青岛市海慈医疗集团接受黏度为5 500mPas硅油填充治疗的复杂性视网膜疾病患者30例32眼,按实际AL分为AL<26 mm组(16例18眼)和AL≥26 mm组(14例14眼),分别于硅油取出术前1d行B型超声、IOL Master测量AL,并于术后3个月用A型超声及B型超声测量AL.对不同方法测量的AL值进行差异比较和相关分析,并对手术前后受检眼玻璃体腔长度和屈光度进行比较.结果 B型超声波在黏度5 500 mPas硅油中的传播速度为1 023 m/s,超声波在硅油眼与正常玻璃体腔中测算AL的校正系数为0.668,校正AL=角膜顶点至晶状体后极或囊膜中央点距离+0.668×晶状体后极或囊膜中央点至黄斑距离.AL<26 mm组和AL≥26 mm组受检眼用术前B型超声校正公式法、IOLMaster测量法、术后A型超声测量法和术后B型超声测量法测量的AL值的总体比较,差异均无统计学意义(F=0.108,P=0.955;F=0.011,P=0.998);硅油取出术前,B型超声校正公式法测量的AL值与IOLMaster测量法、术后B型超声测量法和术后A型超声测量法间测得的AL值均呈明显正相关(AL<26 mm组:r=0.876、0.921、0.809,均P<0.01;AL≥26 mm组:r=0.943、0.956、0.955,均P<0.01).硅油取出术前1d,B型超声测量的玻璃体腔长度校正值为(20.78±2.13)mm,硅油取出术后3个月测量的玻璃体腔实际长度为(20.89±2.16) mm,二者间差异无统计学意义(t=0.795,P=0.219).受检眼中16眼行IOL植入术后平均屈光度为(-1.25±1.69)D,与术前保留的(-1.50±0.00)D比较,差异无统计学意义(t=0.585,P=0.284).结论 B型超声法对硅油填充眼的生物学测量准确、简便,用于临床的可行性较好.
作者:孙琼琼;刘国军;臧新杰;王秀萍 刊期: 2016年第09期
背景 角膜屈光手术会对角膜生物力学产生显著影响,然而目前对角膜屈光手术前近视人群的角膜生物力学仍然研究较少,缺乏大样本人群报道. 目的 使用眼反应分析仪(ORA)分析单纯近视眼角膜生物力学参数,即角膜滞后量(CH)和角膜阻力因子(CRF)的特性及其影响因素.方法 采用前瞻性队列研究设计,收集2010年4月至2011年1月在北京同仁医院眼科中心拟行角膜屈光手术的单纯近视患者896例1 792眼,按受检眼等效球镜度(SE)不同分为-0.25 ~ <-3.0 D组、-3.0 ~ <-6.0 D组、-6.0~ <-9.0 D组、-9.0~<-12.0D组、-12.0~ <-15.0 D组和≥-15.0 D组;按受检眼中央角膜厚度(CCT)不同分为<500μm组、500 μm≤CCT<550 μm组、550 μm≤CCT<600 μm组和CCT≥600 μm组.所有受检眼均经过常规眼科检查;采用ORA测定受检眼CH值和CRF值,比较不同SE组或CCT组间受检眼CH值和CRF值的差异,采用Pearson直线相关分析法评估近视眼CH和CRF的影响因素. 结果 受检眼CH和CRF值平均为(9.84±1.52) mmHg(l mmHg=0.133 kPa)和(10.46±1.71) mmHg.-0.25~ <-3.0D组、-3.0~<-6.0 D组、-6.0~<-9.0D组、-9.0~<-12.0 D组、-12.0 ~<-15.0 D组≥-15.0 D组受检眼CH值分别为(10.35±1.53)、(10.07±1.55)、(9.81±1.46)、(9.71±1.59)、(9.35±1.55)和(9.23±1.28) mmHg,总体比较差异有统计学意义(F=20.69,P<0.01),其中-6.0 ~ <-9.0 D组、-9.0~<-12.0D组、-12.0~<-15.0 D组≥-15.0 D组受检眼CH值均明显低于-0.25 ~ <-3.0 D组,差异均有统计学意义(均P<0.01),而不同SE组CRF值的总体比较差异无统计学意义(F=0.65,P=0.49).<500 μm组、500 μm≤CCT<550 μm组、550 ~ <600 μm组和≥600μm组受检眼随着CCT的增加CH值和CRF值逐渐增加,总体比较差异均有统计学意义(CH:F=110.99,P<0.01;CRF:F=84.35,P<0.01),其中550 ~ <600μm组和≥600 μm组受检眼CH值和CRF值明显高于<500 μm组,差异均有统计学意义(均P<0.01).受检眼CH值与SE间呈弱的正相关(r=0.24,P<0.01),CRF与SE间无明显相关(r=0.03,P=0.20);受检眼CH值和CRF值与CCT值间均呈中等正相关(r=0.42、0.57,均P<0.01);CH和CRF值随着SE、角膜曲率(CC)、CCT的增加而增加,回归方程为CH=-7.87+0.08SE+0.16CC+0.02CCT(R2 =0.26,P<0.01)和CRF=-11.42+0.14CC+0.03CCT(R2=0.34,P<0.01),受检者的CH值和CRF值不随年龄和性别的变化而变化. 结论 近视眼角膜生物力学的改变与CCT、CC和SE有关,其CH和CRF值随着CCT和CC值的增加而增加,CH值与SE之间呈显著正相关.
作者:邓铮铮;李仕明;周跃华;张晶 刊期: 2016年第09期
背景 Corvis ST生物力学眼压测量仪(Corvis ST)可测得角膜形变的参数,同时可记录角膜受力时的动态变化过程,对近视眼行角膜屈光手术前后角膜结构和功能的预测具有重要的临床意义,但单纯近视眼角膜各形变参数的测定值范围及意义有待研究. 目的 利用Corvis ST测量近视眼角膜形变参数值范围并分析其临床意义,为角膜屈光手术的术前筛查及术后稳定性、安全性的预测等提供参考.方法 采用描述性研究方法,纳入2014年6月至2015年1月在天津市眼科医院拟行角膜屈光手术的单纯近视眼患者257例477眼,所有受检眼均采用Corvis ST测定角膜形变参数,包括第1次压平时间(1stA-time)、角膜长度(1stA-length)和压平速度(1stA-velocity),第2次压平时间(2ndA-time)、角膜长度(2ndA-length)和压平速度(2ndA-velocity),产生大压陷的时间(HC-time)和大压陷时的变形幅度(HC-DA)、峰距(HC-PD)、反向曲率半径(HC-R),非接触式眼压(IOPnct)和中央角膜厚度(CCTst);用Pentacam三维眼前节分析诊断系统(Pentacam)检查受检眼结构参数CCT和角膜曲率;用眼反应分析仪(ORA)测定受检眼角膜生物力学参数,包括角膜阻力因子(CRF)、角膜滞后量(CH)、模拟Goldmann眼压(IOPg)和角膜补偿眼压(IOPcc).对上述参数值行Shapiro-Wilk正态性检验并计算各参数总体均值的95%可信区间(CI);用Pearson线性相关分析或Spearman秩相关分析法对角膜形变参数与角膜结构参数及角膜生物力学参数的相关性进行分析;采用多元线性回归法分析1stA-time、2nd A-time和HC-DA随着各角膜形态学及角膜生物力学参数的变化. 结果 角膜形变参数中仅1stA-time、2nd A-time、HC-time、HC-DA、CCTst和IOPnct服从正态分布;1stA-time、1stA-length、2ndA-length、2ndA-velocity、HC-R与CCT值间均呈正相关(r=0.338、rs=0.129、rs=0.282、rs=0.374、r=0.306,均P<0.01),而1stA-velocity、2ndA-time、HC-DA及HC-PD与CCT均呈负相关(rs=-0.235、r=-0.130、r=-0.259、r=-0.226,均P<0.01).CRF和CH与1stA-time、2ndA-length、2ndA-velocity、HC-time、HC-R均呈正相关(均P<0.05),而与HC-PD、△A-length均呈负相关(均P<0.05).1stA-time、2nd A-time和HC-DA均随着CRF和IOPcc改变发生变化,回归方程分别为1stA-time=6.185+0.066CRF+0.034IOPcc(F=300.123,P=0.000)、2ndA-time=23.397-0.074I0Pcc-0.044CRF(F=227.979,P=0.000)和HC-DA=1.523-0.017IOPcc-0.017CRF(F=152.662,P=0.000).Corvis ST测得的CCTst值、IOPst值和IOPnct值均明显低于Pentacam测得的CCT[(548.23±26.31) μm]和ORA测得的IOPg值[(15.02±2.72) mmHg](1 mmHg =0.133 kPa)和IOPcc值[(16.02±2.56) mmHg],差异均有统计学意义(t=11.00、2.919、6.815,均P<0.01).结论 Corvis ST测定的单纯近视眼的角膜形变参数可客观定量描述角膜生物力学特性,IOP及角膜3 mm区陡中心曲率(K2)均可影响角膜的形变反应,Corvis ST在测量CCT及IOP方面的可信度有待进一步研究.
作者:窦瑞;王雁;李华 刊期: 2016年第09期
泪液功能障碍被认为主要是泪膜构成的异常导致促炎因子的产生.近期的研究表明,泪膜成分的改变导致泪液功能障碍,加速眼表上皮细胞的死亡和脱落,从而导致角膜表面的不规则、泪膜不稳定和角膜神经末梢的高度敏感化.很大一部分患者在准分子激光角膜原位磨镶术(LASIK)和飞秒激光小切口透镜取出术(SMILE)后存在泪液功能障碍.本文就LASIK和SMILE术后泪液功能障碍的临床特点、泪液功能障碍潜在的发生机制以及以机制为基础的合理治疗方案进行综述.
作者:李美燕 刊期: 2016年第09期
视网膜的神经细胞一旦损伤,便无法再生修复,利用干细胞疗法使神经细胞得到再生修复已成为当今研究的热点.视网膜中存在具有自我修复能力的内源性干细胞,激活视网膜中的内源性干细胞,利用其对损伤的视网膜神经元进行修复,具有重要的研究价值和应用前景,近年来受到世界神经生物学、眼科学等领域研究者的重视.鱼类、两栖类动物的视网膜具有较强的再生修复能力,而鸟类和哺乳类动物的视网膜的再生能力有限,且各类动物的视网膜再生存在各自的特征.睫状体边缘带、视网膜色素上皮细胞、Müller细胞等细胞都是视网膜再生可能的细胞来源,如鱼类、鸟类和哺乳类动物新生成的视网膜细胞来自于视网膜Müller细胞,而两栖类动物再生的视网膜则来源于视网膜色素上皮细胞.各种视网膜内源性干细胞需要被活化后才能发挥干细胞特性对损伤的视网膜神经细胞进行修复,激活这些细胞的方法有多种,如利用兴奋性氨基酸、生长因子、转录因子、细胞内信号等.本文就不同物种,包括鱼类、两栖类、鸟类和哺乳类动物在内的视网膜的再生能力、睫状体边缘带、视网膜色素上皮细胞、Müller细胞等不同的视网膜内源性神经干细胞的来源及各种能够活化视网膜内源性干细胞进行增生和分化的因素的相关研究进展进行综述.
作者:朱瑞琳 刊期: 2016年第09期
视网膜变性疾病是引起视力丧失的重要原因,由于这类眼病的病因不明确、发病机制复杂,目前尚无有效的治疗方法.近年来,干细胞研究领域取得了突破性进展,干细胞具有分化为机体所有细胞的潜能,可以利用胚胎干细胞(ESCs)分化出各种视网膜细胞,这为视网膜变性疾病的治疗带来了新的曙光.ESCs治疗视网膜变性疾病至关重要的一步是将ESCs分化为视网膜光感受器细胞和视网膜色素上皮(RPE)样细胞.本文对自发诱导培养法、共培养法、细胞因子诱导法、单层贴壁诱导培养法和3D诱导培养法等ESCs分化为视网膜光感受器细胞和RPE细胞方法的新进展进行综述.
作者:赵永吉;庞丽 刊期: 2016年第09期
视网膜色素变性(RP)是一组以视网膜色素上皮(RPE)和感光细胞的功能障碍或丧失为主要特征的致盲眼病,有很大的临床和遗传异质性.碘酸钠是抗代谢药物,可以选择性破坏RPE,它引起的视网膜病变与人类RP疾病的片状RPE缺损极为相似,因此常被用来制作RP疾病的模型.碘酸钠能诱发多种实验动物的RP模型,人们多使用单次碘酸钠注射的方法建立RP动物模型.由于碘酸钠诱发的RP动物模型的发病年龄和疾病进展均可人为操控,制备简单,病变稳定,周期短,且某些动物的RPE细胞在特殊条件下有再生的潜能,极有利于RP发病机制、药物或干/前体细胞治疗及再生医学方面的研究.目前有关碘酸钠诱发动物RP模型的研究和应用已有不少报道.本文根据国内外文献将碘酸钠诱发的RP动物模型的研究进展作一综述.
作者:范美花 刊期: 2016年第09期
患者,男,61岁,2014年2月因右眼视力下降伴视物变形9个月就诊于北京协和医院眼科.既往史无特殊.眼部检查:佳矫正视力右眼0.2,左眼0.8.眼压:右眼14 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa),左眼15 mmHg.双眼晶状体轻度混浊,余眼前节未见明显异常.右眼后极部可见灰红色圆形隆起,其周散在黄白色硬性渗出,中央隐约可见橘红色病灶(图1);左眼底未见异常.
作者:吴婵;陈有信;戴荣平;王尔茜;杜虹;李东辉 刊期: 2016年第09期
眼组织工程是利用特定生物学活性的组织、细胞或支架材料在体外或体内构建成为眼部的组织和器官,用以维持、修复或诱导组织再生,使眼部组织器官功能得到改善或提高的一个科学方向.随着社会人口的老龄化和平均寿命的延长,眼组织工程与再生医学正逐渐成为眼科学的重要发展方向之一,其相关产品和技术研究将成为未来眼科医用替代类医疗器械的热点.大力发展中国的眼组织工程基础研究,不断革新眼组织工程技术是促进中国眼组织工程产业发展的基础,包括将相关领域的基础研究成果向工业化生产和应用等方面转化的研究,将大大提高中国在此领域的国际地位和研究市场竞争能力,为中国眼科学的发展提供新的动力.
作者:刘祖国;刘靖 刊期: 2016年第09期