目的 建立皮肤角朊细胞与表皮干细胞的双向电泳图谱,并分析二者表达蛋白质的差异,为进一步研究体外调控表皮十细胞的增殖、分化提供线索.方法酶消化法获取单个表皮细胞悬液.Ⅳ型胶原快速贴壁法分选表皮干细胞.利用舣向电泳技术(2-DE)建立两种细胞的蛋白质表达图谱,并用Imagemaster 2D elite 5.0软件分析两种细胞的差异表达蛋一点.结果两种细胞的2-DE蛋白表达谱具有良好的重复性和可比性.皮肤角朊细胞与表皮干细胞的电泳图谱平均蛋白质点数分别为(982 ±18)个和(930 ±15)个,匹配点数为(850±13)个和(798±11)个,匹配率是86.56%和85.81%;两种细胞蛋白质间匹配点数是(886 ±8)个,匹配率是76.98%.找到差异蛋白点11个,其中只在表皮下细胞中表达或高表达的有8个;只在皮肤角朊细胞中表达或高表达的有3个.结论利用双向电泳法得到了分辨率较高儿重复性好的皮肤角朊细胞与表皮干细胞蛋白质组图谱,且二者存在有一定的差异.
作者:李孝建;李延仓;曾耀英;沈雁;杨小红 刊期: 2008年第05期
目的 利用激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)实时监测由人骨髓间充质干细胞(hMSC)诱导分化的心肌样细胞内游离Ca2+浓度的动态变化.方法 体外分离培养hMSC,5-氮胞苷诱导向心肌样细胞分化.分别以体外分离培养的原代搏动的出生2 d SD大鼠乳鼠心肌细胞(CM)和同代次的hMSC为阳性对照和阴性对照.Fluo-3/AM荧光探针分别标记hMSC、由hMSC诱导的心肌样细胞及CM,利用LSCM实时监测单细胞内Ca2+动态变化的优势,观察加入心脏正性肌力药物后的细胞反应及细胞内Ca2+水平的动态变化.结果 静息状态下(给药前),搏动的CM荧光强度有变化,而hMSC及心肌样细胞Ca2+的荧光强度保持在稳定的波动水平内,两者差异无统计学意义.给药后,hMSC的Ca2+离子流没有改变,与静息状态下趋于一致;而心肌样细胞则表现出一个明显的Ca2+离子流,且下降后细胞内Ca2+水平明显高于加药前静息钙水平,其Ca2+离子流的表现趋势与搏动的CM基本一致.比较给药后hMSC与心肌样细胞的Ca2+荧光强度落差值,差异具有统计学意义(64.04 ±22.68比180.75 ±34.04,P<0.01).结论 hMSC经5-氮胞苷诱导后,在电学特性方面具有向CM分化的趋势,心肌样细胞与CM具有某些相同的电生理特性.
作者:邓方阁;郭连峰;张秀英;李玉林 刊期: 2008年第05期
目的 探讨人未成熟卵母细胞适宜的培养体系及培养时间.方法 将卵母细胞-卵丘复合体(0CC)332枚和裸卵(DO)393枚随机置入TCM199和P1两种培养体系体外成熟.OCC体外培养48 h,观察其成熟情况.DO分别在24、30、48 h观察第1极体排出情况,计算体外成熟率.OCC和DO成熟后称为成熟的卵母细胞,成熟的卵母细胞行精子卵浆内注射技术(ICSI)受精,比较其在两种培养体系的受精率、卵裂率及囊胚形成率.结果 在TCM199和P1培养体系中,OCC的成熟率、成熟后成为成熟的卵母细胞的受精率和卵裂率的差异无统计学意义(P均>0.05),但成熟的卵母细胞的囊胚形成率为53.7%比37.8%(P<0.05).DO在TCM199和P1培养体系中体外培养24、30、48 h时成熟率的差异无统计学意义;由DO成熟后形成的成熟的卵母细胞在P1培养体系中的受精率、卵裂率和囊胚形成率高于其在TCM199培养体系中,但只有受精率差异具有统计学意义(73.5%比62.9%,P<0.05);DO在两种培养体系中体外培养48 h和30 h的成熟率均明显高于24 h(P<0.05),但48 h与30 h的成熟率相比无差异.结论 OCC适宜在TCM199培养体系的培养;DO适官在P1培养体系的培养.DO体外成熟形成成熟的卵母细胞的时间可以缩短至30 h.
作者:石宇;龙晓林;杜红姿;黄玉玲;张伟良;刘凤华 刊期: 2008年第05期
目的 观察创面床准备埘慢性溃疡创而的疗效.方法 2000年9月至2005年4月本院本科室的107例慢性溃疡创面入选患者,随机分为试验组(n=58)和对照组(n=49).前者采用创面床准备方法 进行创面处理,对照组采用传统创而处理方法 ,比较两组患者的住院大数、组织病理变化、创面情况变化及手术失败率.结果 试验组的住院天数(35.1±26.8)d较对照组(49.7±32.9)d短(P<0.05).HE染色发现试验组创而组织变化朝有利于愈合的方向发展.试验组和对照组的换药后白愈率分别为26%(15/58)和10%(5/49)(P<0.05);植皮术手术失败率分别为9%(3/33)和23%(6/26)(P>0.05);皮瓣转移术失败率分别为0%(0/10)和44%(8/18)(P<0.05).结论 创而床准备方法 是慢性溃疡一种有效和科学的创面处理手段,可促进较小创面愈合.经创面床准备后选择手术覆盖创而可减少手术失败率,加快创面愈合.
作者:谢春玲;陈东;朱家源;朱斌;唐冰;蔡浩;张伟 刊期: 2008年第05期
目的 构建强迫振荡测量系统,在无创正压通气(NPPV)条件下检测人呼吸系统阻抗(Rrs)和电抗(Xrs),用于评估肺阻力(RL)和弹件阻力(EL).方法 基于现有的强迫振荡技术,构建包括振荡发生器和信号分析软件在内的新强迫振荡测量系统,采用呼吸系统一阶线性力学模型(R-I-E模型)验证新系统测量的准确性和可靠性.8例健康正常人为研究对象,分别经鼻罩给予不同水平的双水平气道止压(BiPAP)和持续气道正压(CPAP)通气,探讨在不同通气模式和压力水平下利用Rrs无创评价R,的可行性.结果 (1)振荡压力和振荡流量的相干函数系数值r2=0.98,强迫振荡测量可靠.5 Hz强迫振荡测定的模型阻抗与模型的粘性阻力接近,两者平均相差(1.26±0.44)cm H2O·s·L-1,一敛性范嗣在(0.36~2.14)cm H2O·s·L-1.(2)8例在不同通气模式及压力条件下测定的Rrs值大小接近,与RL平均相差(0.16±1.58)cm H2O·s·L-1.RL的预计方程式为RL=1.40+0.77Rrs,[决定系数(r2)=0.43,P<0.01].(3)强迫振荡弹性阻力EFOT(EFOT=-2πfXrs)显著大于实际值EL,(P<0.01).两者存在低水平的相关(r=0.40,P<0.01).结论 新强迫振荡系统测量准确、可靠.Rrs近似地反映了RL的大小,RL预测值可用于优化NPPV的压力支持水平,使呼吸机提供的压力支持能有效地克服肺阻力.
作者:王华;陈荣昌;何晟;罗群 刊期: 2008年第05期
目的 研究促性腺激素释放激素激动剂(GnRHa)对子宫腺肌病(AM)在位内膜细胞凋亡的影响.方法 取本院妇科住院行全子宫切除术的32例AM患者在位子宫内膜细胞为研究组;同期因卵巢上皮性良性肿瘤行卵巢囊肿剔除术的20例患者正常子宫内膜细胞为埘照组.两组细胞进行体外培养,用GnRHa 10-7、10-5mol/L分别作用24、48、72 h后,用末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)及流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率.结果 (1)镜下可见两组部分细胞固缩、漂浮、核浓缩、碎裂,呈典型的凋亡小体;(2)不含GnRHa培养的AM在位内膜细胞凋亡率在各时间点均低于对照组,且两组都随时间的延长凋亡率增加(P<0.01);(3)GnRHa作用后,两组的凋亡率高于作用前,且均随浓度的增加而增加,且研究组符时间点、各浓度AM在位内膜细胞凋亡率均显著高于同时间、同浓度的对照组(P<0.01).结论 在位内膜细胞凋亡率异常可能是AM发病机制之一.GnRHa可能以自分泌或旁分泌机制直接作用于子宫在位内膜细胞,提高了AM在位内膜细胞的凋亡率.
作者:余佳;康佳丽;王小霞;聂妙玲;邓玲红 刊期: 2008年第05期
目的 探究肱_二头肌不同模式运动任务刺激下的颈髓激活区分布及是否存在运动刺激-颈髓激活强度的同侧优势性.方法 9例健康右利手受试者行双上肢的肱二头肌负荷任务和屈肘运动仟务试验.采用GE 1.5T磁共振系统运用GRE-EPI扫描序列行颈髓功能磁共振成像(Fmri),行BOLD图像分析,对激活区的信号强度变化进行统计学分析.结果 (1)肱二头肌不同模式运动任务刺激下的颈髓激活区主要分布于C5~C6节段,邻近C7~C8节段亦出现少量激活;(2)单侧上肢运动条件下,脊髓双侧激活现象多见;(3)运动肢体同侧的脊髓激活区信号强度变化显著大于对侧(P<0.05).结论 肱二头肌不同模式运动任务诱发颈髓激活的节段分布与主要收缩肌——肱二头肌的脊髓支配节段(C5、C6)相符合,存在运动刺激-颈髓激活强度的同侧优势性.
作者:李威;张媛媛;张权;伊慧明;张云亭 刊期: 2008年第05期
目的 体外构建喹诺酮耐药肺炎克雷伯菌模型并研究其gyrA、parC基因突变与唪诺酮耐药的关系.方法 运用亚抑菌浓度的左旋氧氟沙星与肺炎克雷伯菌在培养基中共培养,并倍比增加诱导药物的浓度,直至肺炎克雷伯菌能够在含高浓度的左旋氧氟沙星培养基上良好生长.收集耐药菌株,用PCR扩增和DNA测序法榆测gyrA、parC基因喹诺酮耐约决定区域(QRDR)的突变情况.结果 体外成功构建喹诺酮高浓度耐药肺炎克雷伯菌模型,所有耐药菌株QRDR均发生了变异,绝大部分为gyrA和parC双重突变.gyrA基因以Ser83、Asp87突变为主,Ser83→Ile,Asp87→Arg、Gly,也有菌株86位氨基酸发生了突变,由Tyr86→Ser.几乎所有菌株parC基因80位氨基酸的突变均为Ser80→Ile.结论 长期低浓度用药可以诱导喹诺酮耐药性的产生.QRDR突变与喹诺酮耐药性有关,gyrA及parC的双重突变可以导致高水平耐药,同时町能存在其他耐药机制.
作者:叶晓光;李永春;王若伦 刊期: 2008年第05期
目的 探讨经导管肝动脉化疗栓塞(TACE)对肝癌患者外周血黑色素瘤抗原1(MAGE-1)mRNA表达水平的影响.方法 采用巢式RT-PCR方法 测定18例肝癌患者TACE治疗前后外周血MAGE-1 mRNA的表达.分析其与肝癌临床病理特征间的关系.结果 18例肝癌患者治疗前外周血MAGE-1 mRNA表达10例阳性、8例阴性;TACE治疗后11例阳性、7例阴性.治疗前后外周血MAGE-1mRNA阳性率差异无统计学意义(55.6%比61.1%.P>0.05).治疗前后肝癌患者外周血MAGE-1mRNA阳性率与肿瘤TNM分期((0%比76.9%,20%比76.9%,P<0.05)、远处转移有关(85.7%比36.4%,100%比36.4%,P<0.05),而与肿瘤大小、血清AFP无关(P>0.05).结论 TACE治疗肝癌不会促进肿瘤的血源性转移,MAGE-1 mRNA可作为评估肝癌疗效的一个重要指标.
作者:李传行;黄子林;吴明玮;张福君;黄金华;范卫君;吴沛宏 刊期: 2008年第05期
目的 探讨多频稳态诱发电位,即听觉稳态反应(ASSR)与纯音听阈在传导性聋患者诊断中的相关性.方法 对72例传导性聋患者的72耳分别行ASSR和纯占测听测试,并进行ASSR与纯音听阈的相关性分析.结果 对于传导性聋的诊断,ASSR反应阈与纯音听阈的相关性分析显示,在不同刺激声信号载波频率情况下二者的相关性:0.5 kHz(r=0.634,P>0.05)、1 kHz(r=0.792,P<0.05)、2 kHz(r=0.814,P<0.05)、4 kHz(r=0.927,P<0.01).除低频(0.5 kHz)外,随着频率增高,二者相关性越高.不同程度气骨导差传导性聋患者中,ASSR反应阈与纯音听阈的相关性:气骨导差≤30dB HL组(r=0.723,P<0.05),气骨导差31~60 dB HL组(r=0.816,P<0.05).结论 ASSR与纯音听阈有相关性,ASSR对传导性聋诊断有临床应用价值.
作者:宋江顺;王心旺;谢景华;李鹏;吴晓钟;高雄辉;梁勇;李苏卫;谭慈珍;谭曼玲 刊期: 2008年第05期
目的 观察自体角膜缘干细胞移植联合丝裂霉素C治疗复发件翼状胬肉的疗效.方法 将58例(62眼)复发性翼状胬肉患者随机分为2组,治疗组(32例,35跟)采用角膜缘于细胞移植联合应用丝裂霉素C;对照组(26例,27眼)单纯采用角膜缘干细胞移植术治疗.术后随访6~30个月并比较疗效.结果 治疗组1眼冉复发,再复发率2.86%;对照组5眼再复发,再复发率18.52%,两组差异具有统计学意义(P<0.05).治疗组角膜创面上皮平均愈合时间为(8.34 ±2.38)d,对照组为(7.21±2.55)d,差异无统计学意义(P>0.05).两组均未发现严重并发症.结论 角膜缘干细胞移植联合应用丝裂霉素C治疗复发性翼状胬肉再复发率低,并发症少,为复发性翼状胬肉安全和有效的治疗方法 .
作者:程浩;夏天;洪海峰;路晓明;麦庆怡;黄丹平 刊期: 2008年第05期
目的 研究人肝细胞癌(HCC)组织中血管内皮生长因子C(VEGF-C)、血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2)及VEGFR-3表达与HCC临床病理特征之间的关系.方法 取HCC石蜡切片标本50例及正常肝组织标本15例,免疫组化法检测止常肝组织及HCC组织中VEGF-C、VEGFR-2及VEGFR-3表达,分析其与HCC临床病理特征之间的关系.结果 (1)HCC组织中VEGF-C、VEGFR-2及VEGFR-3表达阳性率高于正常肝组织(62%比26.7%,34%比6.7%,40%比0%,P均<0.05).(2)HCC组织中,VEGF-C表达与肝内转移、门静脉癌柃形成及肝门淋巴结转移有关(P<0.05);VEGFR-2表达与肝内转移及门静脉癌栓形成有关(P<0.05);VEGFR-3表达与肝门淋巴结转移有关(P<0.05).结论 HCC组织中VEGF-C、VEGFR-2及VEGFR-3表达与HCC的侵袭及转移有密切关系.
作者:蔡文松;徐波 刊期: 2008年第05期
目的 监测全凭静脉麻醉(TIVA)下双相气道正压(BiPAP)面罩通气时的胃食管反流情况,评估该通气方法 在伞身麻醉中应用的安全性.方法 选择择期行腹腔镜胆囊切除手术的成年患者40例,美国麻醉师协会(ASA)分级Ⅰ~Ⅱ级,无胃食管反流危险因素,随机分为面罩通气组(Ⅰ组)和气管内插管通气组(Ⅱ组),每组20例.麻醉前经鼻置人胃食管舣探头pH电极,使远端探头位于食管下段(A点),近端探头置于食管中上段(B点).麻醉诱导后,两组分别应用BiPAP面罩通气和间歇正压机械通气(IPPV),连续实时监测同术期食管下段及中上段pH值变化直至患者清醒.以pH值小于4.0作为胃食管反流的诊断标准.结果 麻醉后30 min、气腹后30 min、麻醉结束后pH值监测结果 显示,Ⅰ组食管下段pH 值分别为5.43±0.51、5.24±0.47、5.36±0.53;Ⅱ组食管下段pH值分别为5.37±0.67、5.29±0.68、5.36±0.78.Ⅰ组和Ⅰ组食管下段及食管中上段各时点pH值监测无1例小于4.0,反流发生率均为0,两组比较pH值差异无统汁学意义(P>0.05).结论 在无胃食管反流病史的患者行腹腔镜胆囊切除术时,应用BiPAP而罩通气全身麻醉不增加胃食管反流概率,是较安全的方法 之一.
作者:温晓晖;林治川;余革;傅艳妮 刊期: 2008年第05期
目的 比较异丙酚复合瑞芬太尼与七氟烷复合芬太尼对全麻术后快速动眼运动恢复时间的影响.方法 60例成年患者,随机分为两组,每组30例.R组(异丙酚复合瑞芬太尼)用异丙酚复合瑞芬太尼进行诱导及麻醉维持,S组(七氟烷复合芬太尼)用异丙酚及芬太尼诱导,七氟烷维持麻醉.麻醉停药后开始每2分钟评价麻醉恢复程度.至患者可行快速动眼运动为恢复时间,麻醉恢复后开始进行眼科评价.结果 快速动眼运动平均恢复时间,R组短于S组[(14.72±5.10)min比(23.43±5.52)min,P=0.000],差异有统计学意义.术后S组恶心呕吐发生率高于R组(37%比10%,P=0.037),差异有统计学意义.结论 需要进行即时术后眼科评估的斜视手术中,异丙酚复合瑞芬太尼更有优势.
作者:陈樱;廖志婕;沈卫华;陈倩茹 刊期: 2008年第05期
目的 分析改良定量主观整体评估(MQSGA)方法 与临床常用营养评估指标之间的关系,探讨MQSGA评价血液透析患者营养状况的可靠性.方法 使用MQSGA表评估本院103例血液透析患者营养状况,同时测定患者血清白蛋白(Alb)、前白蛋白(PA)、转铁蛋白(TRF)、肌酐(Scr)及肱三头肌皮褶(TSF)、上臂中部肌肉周径(MAMC)、体质量指数(BMI)等,并统计分析比较MQSGA与各种营养指标之间的相关性.结果 按MQSGA评分,103例血液透析患者中,轻中度营养不良71例(68.9%);重度营养不良8例(7.8%).MQSGA评分与患者血清Alb、PA、TRF及人体测量学指标包括TSF、MAMC、BMI之间有良好的相关性(r分别为-0.732、-0.841、-0.785、-0.812、-0.753、-0.901,P<0.05).结论 MQSGA评分可较真实、客观、全面地反映血液透析患者的营养状态,是评估血液透析患者营养状态的新方法 .
作者:方静;王伟 刊期: 2008年第05期
目的 研究化疗对恶性肿瘤患者卵巢功能的影响.方法 收集34例女性恶性肿瘤存活者(病例组)与34例月经正常的女性健康者(对照组)l临床资料,调查病例组恶性肿瘤类型与治疗后月经情况,比较两组血清卵泡刺激素(FSH)、黄体牛成素(LH)、抗苗勒氏管激素(AMH)水平.结果 34例病例组中23例(67.6%)闭经,7例(20.6%)月经小规则,4例(11.8%)月经规则.病例组血清FSH、LH水平分别为(50.88±27.12)U/L、(36.87±27.86)U/L,对照组血清FSH、LH分别为(5.94±1.46)U/L、(4.13±1.78)U/L,两组血清FSH、LH水平差异有统计学意义(P均=0.000).病例组血清AMH显著低于对照组[(0.412±0.183)μg/L比(1.770±0.941)μg/L,P=0.000].病例组中月经规则的患者血清AMH水平显著低于对照组[(0.811±0.155)μg/L比(1.770±0.941)μg/L,P=0.000).病例组中血清FSH<10 U/L的患者,其AMH水平亦显著低于对照组[(0.581±0.225)μg/L比(1.770±0.941)μg/L,P=0.000].结论 化疗对恶性肿瘤患者的卵巢功能有损害.血清AMH水平对恶性肿瘤患者卵巢储备功能下降的评估可能比FSH更敏感.
作者:赖宝玲;丁淼;莫亚勤;苏逢锡;欧阳能勇;何英明;杨冬梓 刊期: 2008年第05期
水通道蛋白(aquaporin protein,AQP)是一种内在膜蛋白,除可以通透水以外,还可以通透一些小分子蛋白,如甘油,尿素等.AQP3是AQP家族成员之一,是第1个被发现的除了对水有通透性以外,还能够通透甘油和尿素的AQP.由于它对甘油转运的功能,初也叫甘油内在蛋白.
作者:熊正方;刘慧妹 刊期: 2008年第05期
肝细胞癌(heIDatocellular carcinoma,HCC)是亚洲人肝脏常见的恶性肿瘤,临床出现症状时往往已是中晚期.早期肝癌的手术切除率高,晚期肝癌多已经失去手术机会,预后极差.因而早发现、早治疗是关键.
作者:陈亮;江新青;夏建东 刊期: 2008年第05期