张洋；袁子国；姜秋杰；刘晔；崔艳；张守峰；扈荣良
目的:构建线粒体抗病毒信号蛋白(mitoehondrial antiviral signaling protein,MAVS)真核表达质粒.方法:从人胚肾细胞系HEK293T细胞的总RNA中经过逆转录和PCR获得MAVS的全长cDNA双链片段.经过酶切后连接到真核表达载体pcDNA3/flag中,挑选出转化生成的阳性克隆进行测序,将序列正确的重组质粒命名为pcDNA3/flag-MAVS.借助脂质体转染peDNA3/flag-MAVS质粒到HEK293T细胞中,用Westem印迹检测目的蛋白的表达.同时用β干扰素的荧光素酶报告基因(IFN-β-luc)检测MAVS蛋白活性.结果:Western印迹实验证明pcDNA3/flag-MAVS可以在HEK293T细胞中表达MAVS,并且能使IFN-β报告基因活性明显增强.结论:构建了重组质粒peDNA3/flag-MAVS,在细胞中表达MAVS后具有刺激IFN-β转录的生物活性.
作者：倪才飞；赵帆；郑子瑞；黄蓓；马红芳；李力；宋婷；魏从文；何湘；张艳红；钟辉 刊期： 2008年第06期
目的:对重组表达的StxB和预测的模拟表位肽进行免疫保护效应评价.方法:用分子生物学方法构建基因工程菌,IPTG诱导表达重组StxB,经复性后进行离子交换层析纯化.同时采用生物信息学手段对StxB的表位相关参数进行分析,预测StxB可能的抗原表位.以纯化的StxB和合成的模拟表位肤免疫小鼠后攻毒,评价StxB及其模拟表住肽的免疫保护效应.结果:表达并制备了90%以上纯度重组StxB;发现p14和p17多肽易形成转角和无规卷曲的柔性区段,可及性、极性和亲水性较强,是可能的抗原表位.免疫保护试验显示,经重组StxB和合成多肽免疫的小鼠发病延迟.症状减轻,存活率显著提高.结论:重组StxB和预测的模拟表住肽具有良好的免疫保护效果.为亚单位疫苗及其作用机制的研究奠定了基础.
作者：包士中；史晶；蔡昆；侯晓军；高翔；刘吴；荫俊；王慧 刊期： 2008年第06期
目的:研究Pten缺失后小鼠胚胎成纤维细胞抗氧化能力、细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平、脂质以及DNA氧化损伤水平的变化.方法:采用超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力检测、ROS荧光发光分析、丙二醛(malondialdehyde,MDA)舍量检测和γ-H2AX免疫荧光染色技术.分别比较Pten+/+ MEFs与Pten-/- MEFs细胞SOD活力、ROS、MDA和γ-H2AX水平的差异.结果:Pten-/- MEFs细胞中SOD活力明显减弱,ROS、MDA和γ-H2AX水平均显著增高.结论:Pten可能通过调控细胞抗氧化能力影响ROS水平,从而拮抗脂质和DNA氧化损伤以及由此产生的染色体不稳定性.
作者：苟巧；米粲；胡迎春；李刚；吴德昌；霍艳英 刊期： 2008年第06期
融合技术提出的时间虽然很短,但是已经受到了很多国家的重视,并开展许多相关的研究工作.融合技术不仅是一项技术,而且是一种科学发展的趋势.学科间的交叉融合将有助于人类认识和解决更为复杂的科学问题.促进人类社会的进一步发展.本文从生物技术的应用角度来介绍融合技术的发展现状,从中我们可以看到融合技术对于生物技术发展的巨大促进作用,以及生物技术时于纳米、信息科学的依赖性,从而进一步说明融合技术的发展是科学技术发展的必然.
作者：王海涛；吴乐山 刊期： 2008年第06期
丙型肝炎病毒(HCV)可引起慢性肝炎、肝硬化和肝癌.80%的新发感染发展为慢性感染,干扰素/利巴韦林联合治疗疗效不尽如人意,这些现象提示HCV已建立了一系列抵抗机制对抗宿主的免疫反应和干扰素的抗病毒活性.近年来研究发现,病毒可通过干扰模式识剐受体TIJR3、RIG-I介导的信号通路和干扰素信号通路以及干扰素刺激基因等多个水平的逃避机制,抵抗宿主的抗病毒反应.本文对HCV封闭模式识别受体介导的信号通路,干扰宿主固有免疫以建立持续感染的分子机制进行了综述.
作者：何竞；张贺秋；凌世淦 刊期： 2008年第06期
目的:在体外模型HepG2.2.15细胞中研究靶向人乙型肝炎病毒(HBV)小分子干扰RNA(siRNA)的构效关系.方法:靶向HBV基因不同位置合成21条siRNA,分析多条siRNA在HBV 8个基因型(共120条序列)中的保守性情况以及siRNA的二级结构特点.利用乙肝表面抗原(HBsAg)ELISA定量方法与荧光定量PCR方法检测8iRNA在不同浓度下(1,10,100 nmoL/L)对HepG2.2.15细胞中乙肝病毒HBsAg和mRNA表达的抑制情况.SPSS进行定量构效关系(QSAR)分析.结果:半数(13/21)的siRNA以浓度依赖模式抑制靶基因的表达(P＜0.05).其中537,672,1263,1658等序列活性显著高于阳性对照序列.QSAR分析显示siRNA基因型同源性(P＜0.01)、S/P和X区(P＜0.05)与siRNA活性有紧密关系;重叠基因[S/P/前基因组(pregenome)mRNA]区域局部靶mRNA二级结构保守性、发卡环、多茎环和茎的碱基数目与siRNA活性相关(R=0.994,P=0.009).结论:siRNA的靶点序列、siRNA本身的一级序列与二级结构对其抑制靶基因的活性有显著影响,具有明显的构效关系.优选siRNA可能作为治疗多基因型乙肝感染的候选序列.
作者：付洁；汤仲明；高新；赵帆；钟辉；李鹏；温茂荣；孙效；宋海峰；钱小红 刊期： 2008年第06期
目的:获得P11-A1融合蛋白并对融合蛋白的生物活性进行分析.方法:将人类栽脂蛋白A1和P11基因进行拼接.然后连接在表达载体pBV220上,将表达载体转化到大肠杆菌BL21进行表达,SDS-PAGE分析其表达情况.通过离子交换层析对融合蛋白进行纯化、Western印迹检测纯化产物.用液体闪烁计数器检测融合蛋白体外合成高密度脂蛋白(HDL)的能力来测定转酯活性,同时用溶圈法检测融合蛋白的溶栓活性.结果:融合蛋白的表达量为29%;离子交换层析获得纯度约为90%的蛋白;Western印迹显示该重组蛋白能够特异地识别载脂蛋白A1抗体,并且该融合蛋白在浓度为0.28 mg/ml时转酯活性为21.93 nmol/(h·ml),溶栓活性为22.2 U/mg.结论:成功获得具有转酯活性和溶栓功能的P11-A1融合蛋白.
作者：龙民慧；王园园；朱贺；王旻；邹民吉；马百坤；王嘉玺；徐东刚 刊期： 2008年第06期
目的:建立同时测定小鼠全血中6种CYP450探针药物,即咖啡因(CYP1A2)、甲苯磺丁脲(CYP2C)、奥美拉唑(CYP2C)、右美沙芬(CYP2D22)、氯唑沙宗(CYP2E1)和咪达唑仑(CYP3A11)的方法,并采用cocktail法快速评价药物对CYP450同工酶的影响.方法:蛋白沉淀法处理血样,离心后取上清,LC-MS/MS检测.选取地塞米松作为药酶诱导剂,对所建立的模型进行验证.结果:咖啡因、甲苯磺丁脲和氯唑沙宗的线性范围均为20～4000 ng/ml,咪达唑仑、奥美拉唑和右美沙芬的线性范围均为1～200 ng/ml.6种探针药物的日内及日间精密度均小于15%,方法回收率均大于90%.地塞米松表现出对小鼠CYP450有诱导作用.结论:本方法准确、灵敏、重现性好,可用于cocktail法快速评价整体动物主要CYP450亚型酶的活性.
作者：王丹；刘萍霞；张振清；阮金秀 刊期： 2008年第06期
目的:探讨以树突状细胞(dendritic cells,DC)联合细胞因子介导杀伤细胞(cytokine induced killer,CIK)为基础的免疫途径治疗恶性实体肿瘤的临床疗效.方法:将60例临床确诊的肾透明细胞癌患者随机分为两组:治疗组给予手术联合细胞免疫治疗,对照组给予手术及细胞因子治疗.采集肿瘤患者的外周血单核细胞,体外诱导培养成熟DC及CIK细胞,后再回输给患者.观察疗效和治疗前后细胞免疫指标变化(CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、NK细胞)、外周血象、肝肾功能变化(白细胞、转氨酶、尿素氮、肌酐)及不良反应.结果:治疗组有效率43.33%,对照组有效率26.67%,治疗组与对照组相比,差异有统计学意义(P＜0.05).治疗组CD3+、CD4+、CD4+/CD8+免疫学指标治疗前后比较,差异有统计学意义(P值分别为0.010,0.026,0.021),治疗组细胞免疫学指标(CD3+、CD4+、CD4+/CD8+)在治疗前后变化与对照组相比,结果差异有统计学意义(P值分别为0.001,0.023,0.012).两组患者外周血象及肝肾功能检测无异常,免疫治疗过程中未出现明显的毒副作用.结论:以DC、CIK细胞为基础的细胞免疫治疗可以明显改善肾癌术后患者临床疗效,提高外周血淋巴细胞亚群及NK细胞水平,临床应用无明显不良反应,是肾癌术后重要的辅助治疗手段.
作者：陈立军；王斌；许元斌；王惠先；赵立；曲楠；孙震鹏；李学超；赵纪宇 刊期： 2008年第06期
神经-肿瘤腹侧抗原(NOVA)是第一个在哺乳动物中发现的组织特异性剪接因子,广泛分布于中枢神经系统,通过其KH结构域(KH domain)与靶基因mRNA前体中的YCAY基序(YCAY motif)结合,调控可变剪接过程.根据其与靶标结合位置的不同,NOVA作为剪接调节因子具有双重作用,既可以增强剪接,也可以抑制剪接.NOVA作为剪接因子特异性地调控了神经突触中一组功能密切相关的基因.
作者：韩冷；李稚锋；任长虹；孟祥勋；张成岗 刊期： 2008年第06期
动物的发育是一个严格受控的复杂过程,需要在时空上精确控制相关基因的表达.miRNA通过抑制靶mRNA翻译或使之降解失稳从而在转录后降低基因的活性.近期的实验研究表明,miRNA在动物发育的诸多方面发挥着重要调控功能,并表现出特有的调控模式.本文对miRNA参与动物发育过程的调控研究进行了综述.
作者：李鹏；伯晓晨；王升启 刊期： 2008年第06期
1临床资料患者为男性,9岁于2007年1月12日入院,诊断为烟雾病.入院后进行各项常规检查,未见明显异常.于2007年1月25日上午行左侧脑硬膜颞浅动脉血管融通术.术后恢复良好,术后第3天患者右侧下肢呈软瘫.考虑系病情进一步发展,颅内缺血、缺氧所致.
作者：曲波宏；刘芳 刊期： 2008年第06期
论文研究目的是构建军事医学系统论.作者研究提出了军事医学系统论的概念,构建军事医学系统论的意义,初步研究勾划了军事医学的系统环境、系统结构、系统功能、系统特征、系统演化等.
作者：王松俊；雷二庆；吴乐山 刊期： 2008年第06期
乳杆菌在食品、工业、微生物学等领域发挥着重要作用,作为益生菌,既可向体外生物反应器方向开发,又可作为潜在疫苗的抗原递送载体.由于乳杆菌属革兰阳性菌,细胞壁厚,重组质粒电转化效率低,甚至不能实现转化,影响了它作为基因工程受体菌的应用.笔者研究了近年来有关乳杆菌的电转化方案,总结了影响电转化效率的因素,如细胞壁预处理、电转缓冲液、电击参数、培养基、孵育时间以及菌体密度、质粒用量、热击条件等,并根据自己的试验结果提出优化方案,为乳杆菌在疫苗及生物反应器等领域的遗传开发研究提供较全面的借鉴.
作者：曹晓梅；张虎成；李曼；陈薇 刊期： 2008年第06期
模式生物秀丽隐杆线虫(C. elegans)是多细胞无脊椎动物,其中神经细胞占体细胞的三分之一之多.虽然解剖结构十分简单.但神经递质、突触蛋白、离子通道等基本组成与人类具有高度的保守性.由于其全基因组遗传信息已知,基因操作便捷,秀丽隐杆线虫已经在高级神经功能活动、神经系统疾病等研究领域中发挥重要作用.本文就秀丽隐杆线虫在神经科学研究中的应用进行综述.
作者：任长虹；张成岗 刊期： 2008年第06期
目的:对2008年分离自河南新乡手足口病患者粪便标本的病原进行分离鉴定及全基因组序列测定,并同相关毒株序列进行同源性比对和进化分析,以了解新分离病毒基因组序列特征及可能的传播来源.方法:将手足口病患者粪便标本接种敏感细胞进行分离传代培养,制备抗原片进行间接免疫荧光检测,采用特异性引物进行PCR鉴定,将病毒基因组分为8个片段进行RT-PCR扩增,扩增产物纯化后进行PCR测序.通过末端重叠序列拼接成全长病毒基因组序列,利用生物信息学软件对序列进行比对分析,绘制进化树.结果:测序获得的3株EV71病毒基因组全长均为7 405 nt,VPI氨基酸序列同源性达100%.Blast分析表明F3(F8)-Henan-08毒株均与安徽阜阳2008年分离的EV71毒株同源性高,而F4-Henan-08毒株与我国台湾省2004年分离的EV71毒株同源性高.序列进化分析表明,新分离毒株属于C4基因亚型.结论:新分离的河南EV71毒株与安徽阜阳分离的毒株可能具有相同来源.
作者：韩剑峰；安康；刘洪；陈浩利；于曼；张勇朝；司炳银；杨再维；秦成峰；赵世方；秦鄂德；林小军；祝庆余；常国辉 刊期： 2008年第06期
目的:急救止血训练模拟系统是战伤急救训练模拟人中的一个重要的功能模块,如何模拟动脉出血伤情是系统的关键.本文提出了运用四联阀组合的控制研究.方法:基于三元件Westerhof模型理论建立了止血训练模-拟装置;通过系统辨识时域方法获得止血训练模拟系统的四联阀的函数模型,设计控制器,进行Maflab数值仿真并优化控制参数;后建立了以C8051F330为核心的单片机系统,实现了压力信号采集及A/D转换,运用PI控制算法对四联阀组合的优化控制,终实现了肱动脉压力曲线的模拟.结果与结论:肱动脉压力曲线的模拟真实反映了模拟血管中的血流压力,急救止血训练模拟系统能够真实地再现出血伤情.
作者：倪爱娟；孙秋明；谢新武；田丰；王政 刊期： 2008年第06期
目的:从海泥样品中分离培养并筛选获取野生型与突变型药源微生物抗肿瘤活性菌株.方法:通过单菌落挑选与划线培养,分离纯化野生菌株;利用核糖体工程抗性筛选技术.筛选获得抗生素抗性突变株;用K562细胞,采用MTT法测试发酵样品的抗肿瘤活性.结果:从天津塘沽驴驹河渤海湾潮间带海泥样品中分离得到放线菌126株、真菌29株,其中,在100μg/ml样品浓度下抑制率大于20%的放线菌17株、真菌3株,在1000μg/ml样品浓度下抑制率小于5.5%的无活性放线菌19株.以1000μg/ml样品浓度下抑制率为4.8%的无活性放线菌野生株L8-5x为原始茼,经抗性筛选获得链霉素抗性突变株78株,其中在100μg/ml样品浓度下抑制率大于25%的活性突变株2株.结论:所获野生型与突变型抗肿瘤活性菌株为后续新药筛选提供了药源微生物活性菌株.由无活性菌株转化获取活性突变株的研究结果表明,已分离得到的大量无活性菌株也是可转化获取药源活性突变株的很好资源.
作者：孙玉雯；崔承彬；韩小贤 刊期： 2008年第06期
目的:研制一种既具有过滤净化超压防护功能又具有过滤净化负压防护功能的车用生物污染防护系统.方法:通过综合集成设计过滤净化超压防护装置、过滤净化负压防护装置、防护控制装置和监测报警装置,实现对生物污染的有效防护,并实时监测过滤器的工作状态,及时发出失效报警.结果:试验表明,该系统既能使车辆内部实现不低于300 Pa的超压,同时对生物气溶胶的平均过滤效率不低于99.95%;又能使车辆内部实现不高于-70Pa的负压,同时对生物气溶胶的平均过滤效率不低于99.93%.结论:该系统既能使车辆安全通过生物污染区运送伤病员,也能使车辆在运送生物污染伤病员或传染病员时保护沿途环境不受污染.
作者：刘亚军；徐新喜；王政；刘志国；谭树林；崔向东；郝丽梅 刊期： 2008年第06期
单细胞凝胶电泳(彗星)试验分析中,彗星图像的自动分析能够快速、准确地获取多个彗星指标,这有助于提高彗星试验的分析速度和试验结果的准确度、可比度.彗星轮廓的合理分割是后续分析各项指标的前提,由于彗星尾部灰度值较低且与背景对比度差,导致彗星轮廓自动分割的困难.本文在分析彗星图像特点和比较现有分割方法的基础上,对传统迭代阈值分割方法进行了改进,并推广至双阈值迭代分割.测试结果表明,迭代双阅值分割方法具有快速、可靠、分割效果理想等优点,可以较好地实现彗星图像的自动分割.
作者：闫学昆；张洪涛；陈英；张学清；倪宁 刊期： 2008年第06期
军事医学杂志
主管:军事医学科学院
主办：军事医学科学院
