黄俊；杨婉；金世云；产进中；刘中；张野；何淑芳
目的 构建LV5-hCx32慢病毒表达载体,获得稳定高表达人缝隙连接蛋白32(connexin32,Cx32)的Huh7人肝癌细胞系,并研究Cx32对Huh7细胞增殖的影响.方法 采用全基因合成法并经PCR扩增得到Cx32基因序列,将所得目的片段克隆到LV5-GFP载体上,获得重组慢病毒质粒LV5-GFP-hCx32,经酶切鉴定及DNA测序鉴定后,与慢病毒包装质粒系统共转染293T细胞中,包装成重组慢病毒颗粒,经荧光显微镜测定重组慢病毒滴度.将慢病毒载体LV5-hCx32和LV5-NC感染Huh7细胞,嘌呤霉素筛选出细胞阳性克隆并扩大培养.qRT-PCR、Western blot和免疫荧光法分析Cx32的表达及定位;细胞接种荧光示踪法检测细胞缝隙连接(gap junction,GJ)功能;MTT法及克隆形成实验观察细胞增殖能力的变化.结果 双酶切及测序结果表明LV5-GFP-hCx32慢病毒载体构建成功,经293T细胞包装后,成功获得病毒滴度为3×1011TU·L-1的重组慢病毒LV5-GFP-hCx32,慢病毒瞬时感染后的Huh7细胞中Cx32 mRNA和蛋白表达水平明显增多,筛选后建立的稳定转染细胞系中Cx32也稳定高表达,并且部分表达于细胞膜,形成有功能性的GJ.过表达Cx32的Huh7细胞增殖能力减弱(P＜0.05).结论 成功构建Cx32基因过表达慢病毒载体,该载体能够稳定感染Huh7细胞,使外源基因Cx32过表达并抑制细胞的增殖能力.
作者：纪玉婷；杨燕；郑荣生；张吴琼；刘静 刊期： 2018年第02期
目的 研究迷迭香酸衍生物RAD-9诱导胃癌MGC-803细胞凋亡的作用及其机制.方法 MTT法观察RAD-9对胃癌MGC-803细胞增殖的抑制作用;流式细胞术检测细胞的凋亡;Hoechst 33258染色法观察RAD-9对MGC-803细胞核凋亡形态学的影响;Western blot检测RAD-9干预MGC-803细胞36 h后,对Akt、p-Akt、p38 MAPK、p-p38 MAPK蛋白及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、caspase-3的影响.结果 MTT结果显示,RAD-9呈时间、浓度依赖性抑制胃癌MGC-803细胞增殖;流式细胞术结果显示,RAD-9对胃癌MGC-803细胞有明显的促凋亡作用(P＜0.01);Hoechst 33258染色实验结果显示,RAD-9干预胃癌MGC-803细胞36 h后,细胞核呈现典型凋亡形态学改变;Western blot结果显示,RAD-9干预胃癌MGC-803细胞36 h后,Bcl-2蛋白表达水平明显降低,Bax、caspase-3蛋白表达水平明显提高,Akt、p-Akt蛋白表达水平明显下调,p38 MAPK、p-p38 MAPK蛋白表达水平明显上调(P＜0.01).结论 RAD-9能抑制胃癌MGC-803细胞生长,且能诱导其凋亡,其机制可能与抑制PI3 K/Akt和激活p38 MAPK信号通路相关.
作者：韦立群；李清；甘嘉亮；李婉婷；潘晓杭；蒋伟哲；唐双意 刊期： 2018年第02期
目的 利用实时细胞分析仪,并以表皮生长因子(EGF)为促进细胞生长的工具药,观察EGF在不同培养条件下对细胞生长的影响,为建立IEC-6细胞生长(增殖)药理实验模型提供参考.方法 以1×104/孔的密度将细胞接种于E-Plate 16板,并以含10％血清DMEM培养24h,换成无血清DMEM培养(即血清饥饿)20 h后,观察不同培养条件对细胞生长的影响及EGF的药效.结果 ①10％血清时,EGF组(1、10、100 μg·L-1)给药24、48、72 h后,细胞生长指数与空白组比较均P ＞0.05,提示含10％血清培养不能反映EGF的药效;②0％血清时,EGF(1、10 μg·L-1)对无血清培养所致的细胞生长抑制有改善作用,但不能使其恢复正常水平(给药24、48、72 h后,EGF组与5％血清空白组比较均P＜0.01),提示无血清培养不能反映EGF的药效;③0％、0.5％、1％血清可对细胞生长产生不同影响,其中0.5％血清既不会对细胞生长产生明显抑制,也不会由于促进细胞生长时间较长而不利于反映EGF药效;④0.5％血清时,EGF各剂量组给药24、48、72 h后,均能促进细胞生长(细胞指数与空白组比较均P＜0.01),提示0.5％血清培养条件下可较好反映EGF药效;⑤重复验证了0.5％血清时EGF(10μg·L-1)促进细胞生长的药效.结论 在实时细胞分析仪建立IEC-6细胞生长(增殖)药理实验模型的参考方案:细胞以含10％血清DMEM培养24h,再以无血清DMEM培养(即血清饥饿)20 h,然后加受试药,并以含0.5％血清培养48 ～72 h,可观察其对细胞生长(增殖)影响的药效.
作者：时玉霞；李茹柳；邓娇；王东旭；朱易平；胡玲；陈蔚文 刊期： 2018年第02期
目的 观察姜黄素(curcumin)对糖基化终末产物(AGEs)诱导的软骨细胞凋亡及线粒体功能损伤的作用,并探讨相关机制是否与姜黄素上调过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPARγ)相关.方法 原代培养家兔膝关节软骨细胞;TUNEL染色法检测细胞凋亡;Rhodamine-123试剂盒检测线粒体跨膜电位(△Ψm);ATP试剂盒检测线粒体ATP生成;分光光度法检测caspase-3活性;Western blot检测PPARγ、细胞色素C、Bax及Bcl-2蛋白表达;real-time PCR检测PPARγ mRNA含量;DNA-binding法检测PPARγ活性.结果 AGEs(200 mg·L-1)可明显诱导兔软骨细胞凋亡,同时线粒体跨膜电位(△Ψm)降低、ATP生成减少,caspase-3活性增加,细胞色素C释放增加,Bax/Bcl-2的比值增加;线粒体通透性转换孔的抑制剂环孢霉素A (CsA,100 nmol·L-1)可以明显抑制AGEs诱导的细胞凋亡;PPARγ特异性激动剂吡格列酮及姜黄素均可明显抑制AGEs诱导的软骨细胞凋亡及线粒体功能损伤,给予PPARγ特异性抑制剂GW9662 10 μmol·L-1预处理后,可以明显拮抗姜黄素的保护作用.同时,姜黄素可以明显上调AGEs诱导的PPARγ活性的降低,并伴随PPARγ相应的mRNA及蛋白表达水平的升高.结论 姜黄素通过上调PPARγ,有效地保护AGEs诱导的软骨细胞线粒体损伤,从而抑制AGEs诱导的软骨细胞凋亡.
作者：杨青山；吴树金；施松波；毛新展；郭士方；陈志信；台会平 刊期： 2018年第02期
目的 观察孕期咖啡因暴露(PCE)♀胎肾发育病理学变化和皮质酮(CORT)处理对原代后肾间充质细胞基因表达的影响,探究PCE影响胎鼠肾脏发育的可能机制.方法 受孕Wistar大鼠于孕9-20 d(GD 9-20)经口灌胃咖啡因(30、120mg·kg-1·d-1),孕鼠于GD20处死,取♀胎鼠并收集肾脏,检测肾脏病理学变化和基因表达;在原代后肾间充质细胞上给予不同浓度CORT(250、500、1 000 μg·L-1)处理24 h,检测细胞基因表达.结果 与对照组相比,PCE组♀胎肾肾小球的球囊空虚,鲍曼囊腔变大,毛细血管网发育不良,GDNF/c-Ret信号通路抑制;CORT处理原代后肾间充质细胞下调AT1R/AT2 R及GDNF/c-Ret信号通路的表达.结论 PCE♀胎鼠肾脏发育不良,其机制与PCE所致高血CORT下胎肾局部AT1R/AT2R及GDNF/c-Ret信号通路的表达抑制有关.
作者：万阳；敖英；李斌；熊颖；孙朝霞；胡霜霜；汪晖 刊期： 2018年第02期
细胞在长期进化过程中形成的复杂的DNA损伤反应防御机制是维护基因组稳定性的重要途径,DNA损伤反应通路缺陷可导致包括肿瘤在内的多种疾病的发生.DNA损伤反应通路是一个复杂的信号通路,包括DNA损伤修复、凋亡、细胞周期调控等,DNA损伤反应通路已经成为新的抗肿瘤药物靶点.目前,已经开发多种DNA损伤反应通路相关的抑制剂,特别是对BRCA1和BRCA2基因突变的肿瘤,利用协同致死现象而开发的聚腺苷二磷酸核糖聚合酶抑制剂广泛应用于肿瘤个体化治疗.该文重点对DNA损伤反应通路抑制剂中的聚腺苷二磷酸核糖聚合酶抑制剂的作用分子机制、临床治疗、耐药性以及面临的挑战进行综述.
作者：郑宇静；左彤彤；封宇飞 刊期： 2018年第02期
目的 建立H2O2诱导视网膜色素上皮细胞ARPE-19(acute retinal pigment epithelial-19)细胞损伤模型,研究蓝莓花青素对细胞的保护作用.方法 采用MTT法测定细胞存活率,免疫荧光法测定细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平.以浓度0～3 200 μmol·L-1的H2O2为诱导剂,刺激细胞2、6、24 h,用1、5、10 mg·L-1花青素提取物(blueberry anthocyanin extract,BAE)预处理细胞6、24 h,比较对细胞的保护作用,确定H2O2的浓度及诱导时间.通过ARPE-19细胞损伤模型的建立,研究蓝莓花青素对细胞的保护作用.结果 以800 μmol·L-1 H2O2刺激2h为条件,建立ARPE-19细胞损伤模型,细胞存活率为63.69％.5 mg·L-1蓝莓花青素提取物、锦葵色素(malvidin,My)及其葡萄糖苷(malvidin-3-glucoside,Mv-3-glc)和半乳糖苷(malvidin-3-galactoside,Mv-3-gal)预处理6h后,细胞存活率明显提高(P＜0.01),分别达到86.57％、115.72％、98.15％、127.97％;细胞中ROS水平明显下降(P＜0.05),依次减少52.38％、95.38％、77.55％、116.09％.结论 蓝莓花青素可以有效抑制H2O2诱导产生的视网膜细胞氧化损伤,其中主成分锦葵色素及其糖苷发挥重要作用.
作者：吴寒；HUTABARAT Ruth Paulina；黄午阳 刊期： 2018年第02期
目的 研究黄芪多糖(Astragalus polysaccharide,APS)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠心肌细胞凋亡的影响,并探讨其作用机制.方法 体外实验采用H9c2细胞预先给予APS,30 min后加入LPS(1 mg· L-1)共孵育24 h,建立心肌细胞凋亡模型.体内实验采用SPF级昆明小鼠预防性给予APS 14 d后,腹腔注射LPS (10mg·kg-1)建立心肌细胞凋亡模型.8h后采用超声心动测定小鼠心脏射血分数(EF)、左心室缩短分数(FS)等;TUNEL测心肌细胞凋亡;ELISA检测血清中IL-1β、TNF-α含量;Western blot检测组织和体外心肌细胞中JNK、NF-κB信号通路及Bcl-2家族、caspase-3相关蛋白表达.结果 LPS能明显抑制小鼠的左心室收缩功能;促使心肌细胞凋亡;增加血清中IL-1β、TNF-α,心肌细胞中JNK、p-JNK、Bax、caspase-3,胞核中NF-κB蛋白浓度;降低Bcl-2和胞质中NF-κB、IκB-α蛋白浓度.APS能明显保护LPS诱导的小鼠心肌收缩功能,减少心肌细胞凋亡;减少血清中IL-1β、TNF-α,心肌组织细胞中p-JNK、Bax、caspase-3和胞核NF-κB蛋白含量;相对增加Bcl-2和胞质中NF-κB、IκB-α蛋白含量.而JNK蛋白表达无明显变化.结论 APS通过抑制NF-κB和JNK信号通路,减轻LPS诱导的小鼠心肌细胞凋亡.
作者：韩琳；王洪新；鲁美丽 刊期： 2018年第02期
目前,临床上常用的抗炎药物主要为非甾体抗炎药,其疗效明显,但均存在潜在的副作用[1].因此,寻找低毒高效的新型抗炎药是药物研究的一个重要课题.新疆圆柏(Juniperus Sabina)为柏科圆柏属植物常绿匍匐灌木,广泛分布于新疆、甘肃和陕北的干旱荒山和沙地之中.据《维吾尔药志》记载,新疆圆柏枝叶和果实常用于类风湿关节炎等疾病的治疗[2].花生四烯酸(arachidonic acid,AA)代谢途径和细胞因子网络是抗炎作用的重要靶点,也是类风湿关节炎治疗药物研发的关键所在.
作者：朱秋爽；梅仲秋；刘涛；赵军；由淑萍 刊期： 2018年第02期
心血管疾病以高发病率、高死亡率的特点成为危害人类健康的严重疾病.SIRT6作为组蛋白去乙酰化酶家族的重要成员,在动脉粥样硬化、心肌梗死以及缺血/再灌注损伤、病理性心肌肥大、心力衰竭等心血管疾病中发挥重要作用.该文主要针对SIRT6在心血管疾病中的作用进行综述,并对以SIRT6为靶点的激动剂和抑制剂的研究做一总结.
作者：张晓英；张致英 刊期： 2018年第02期
目的 探讨儿茶素(catechin)对过敏性哮喘小鼠炎症反应的治疗作用及其机制.方法 采用BALB/c♀小鼠建立鸡卵清蛋白(OVA)致敏和激发的过敏性哮喘模型,给药组分别给予儿茶素(75、150、300 mg·kg-1)干预.记录外周血白细胞分类及计数;HE染色观察肺组织病理学改变;ELISA法检测血清OVA特异性IgE水平及肺组织TSLP、IL-5、IL-13的含量;Western blot检测肺组织NF-κB p65、IκB蛋白表达情况;免疫荧光检测NF-κB p65核转录情况.结果 儿茶素可明显减少外周血白细胞总数,降低血清OVA特异性IgE含量,减少肺组织中TSLP以及Th2型炎症因子IL-5、IL-13的含量,抑制NF-κB p65核转录.结论 儿茶素可有效缓解OVA所致的过敏性哮喘小鼠的Th2型炎症反应,其作用可能是通过调控NF-κB通路,抑制TSLP表达而实现的.
作者：潘增烽；周园；阮岩；罗霞；闫亚杰；周联 刊期： 2018年第02期
疼痛是临床上的常见症状,也是当今困扰人类健康的严重问题之一,而控制疼痛是临床用药的主要方面之一.该文对现阶段已有的镇痛靶点及新型镇痛靶点进行简要的阐述,以期为新型、不良反应小、无耐受性、无成瘾性的镇痛药物的研究和开发,以及临床上的应用提供参考.
作者：苏漫；朱清；李俊旭 刊期： 2018年第02期
目的 探讨桃仁-红花药对对大鼠颈椎间盘软骨终板退变的影响.方法 选取清洁级健康Wistar大鼠50只,♂,随机分为对照组、模型组、假手术组、美洛昔康组、桃仁-红花药对组,每组10只.其中模型组、美洛昔康组、桃仁-红花药对组通过手术方法建立动静力失衡性大鼠椎间盘退变模型,假手术组切开皮肤后不做进一步操作.造模12周后,对照组、模型组、假手术组每日给予生理盐水灌胃,美洛昔康组、桃仁-红花药对组每日分别给予等量美洛昔康悬浊液、桃仁-红花煎剂灌胃,连续给药30 d后处死全部大鼠,完整取出C4、C6/7椎间盘.C4/5椎间盘固定、切片,ABOG染色法观察椎间盘组织形态学变化;免疫组化法检测Ⅱ型胶原(type Ⅱ collagen,Col Ⅱ)、X型胶原(type X collagen,Col X)蛋白的表达情况;C6/7椎间盘提取总mRNA,实时定量PCR检测Col Ⅱ、Col X基因的表达情况.结果 与模型组比较,桃仁-红花药对组上调软骨终板细胞Col Ⅱ的mRNA及蛋白表达,下调软骨终板细胞Col X的mRNA及蛋白表达,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 桃仁-红花药对可以抑制动静力失衡性大鼠椎间盘退变中的软骨终板退变,进而延缓椎间盘退变.
作者：王艺儒；唐德志；梁倩倩；徐浩；赵永见；郑为超 刊期： 2018年第02期
目的 研究槲皮素抑制人宫颈癌HeLa细胞增殖的机制.方法 采用CCK-8法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞周期的变化;运用紫外可见分光光度计测定OD480值,反映色氨酸代谢及犬尿氨酸的生成情况;qPCR法检测IDO1的mRNA表达;表达、纯化IDO1蛋白并进行体外酶活性反应,用高效液相色谱法检测色氨酸和犬尿氨酸的含量变化.结果 槲皮素抑制HeLa细胞的增殖,引起Go/G1细胞周期阻滞;槲皮素抑制色氨酸的代谢;槲皮素能够明显抑制IDO1的体外酶催化活性,但不影响IDO1的表达;外源性添加色氨酸的代谢产物犬尿氨酸可以逆转槲皮素引起的细胞增殖抑制.结论 槲皮素可能通过抑制IDO1的酶催化活性,影响细胞色氨酸的代谢,这可能是槲皮素发挥其抗宫颈癌HeLa细胞增殖作用的机制之一.
作者：张薇；何龙；刘潇忆；韩琴；葛啸垠 刊期： 2018年第02期
目的 基于网络药理学探讨淫羊藿可能的物质基础,并分析淫羊藿抗骨质疏松可能的分子机制.方法 采用活性成分筛选、靶点预测技术,结合生物信息学手段,确定淫羊藿防治骨质疏松症的特异性靶点,并进行信号通路富集分析,以进一步分析其治疗骨质疏松症的分子机制.结果 淫羊藿在TCMSP数据库中共检索到130个相应成分,根据OB和DL参数共筛选到23个入血活性成分,同时利用相关靶点预测技术,共获得101个预测靶点.通过对GEO芯片数据库的基因芯片进行二次挖掘分析,共获取124个明显的差异基因;在疾病基因相关数据库共检索到356个与骨质疏松症发生、发展密切相关的已知的相关靶点基因.利用cytoscape构建并合并活性成分及疾病的蛋白质相互作用关系网络,通过网络拓扑分析共筛选出221个关键基因;ClueGO富集分析显示,淫羊藿除与直接作用于骨质疏松症关键节点涉及的信号通路,如Wnt信号通路、TGF-β信号通路、Notch信号通路等有关,还对PI3 K-Akt信号通路、VEGF信号通路、甲状腺素信号通路等同时进行调控.结论 淫羊藿治疗骨质疏松症具有多成分、多靶点的特点;其主要通路不仅直接参与骨重建的细胞分化,调节成骨、破骨代谢平衡,还通过全身其他系统,如循环系统、神经系统等来干预和影响骨微环境,与目前抗骨质疏松的作用机制相符合.
作者：李刚；许波；梁学振；盖帅帅；夏聪敏；阎博昭；李嘉程 刊期： 2018年第02期
目的 研究肝X受体激活对全脑缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)小鼠的海马神经干细胞增殖及认知功能的影响,及其作用机制.方法 将75只C57BL/6小鼠随机分为3组,即假手术组(Sham)、全脑缺血/再灌注组(I/R)、全脑缺血/再灌注+肝X受体激动剂TO901317干预组(L/R+TO90),每组25只.采用双侧颈总动脉夹闭方法建立全脑I/R小鼠模型;肝X受体激动剂TO901317 (30 mg·kg-1)在缺血后24 h腹腔注射(i.p,1次/天,连续14 d).Morris水迷宫实验测定小鼠学习与记忆等认知功能的改变;HE染色观察小鼠海马CA1区病理形态学的改变;免疫组化观察小鼠海马齿状回区DCX阳性细胞的表达;免疫荧光观察海马齿状回区BrdU阳性细胞的表达;Western blot检测海马LXRα、LXRβ、ABCA1、p-ERKl/2、t-ERK1/2、p-CREB、t-CREB、BDNF等蛋白的表达情况.结果 LXR激动剂TO901317处理后,I/R小鼠的海马齿状回DCX与BrdU阳性细胞的表达数目均增加(P＜0.01),认知功能得到了改善(P＜0.01),同时,海马ABCA1、p-ERK1/2、p-CREB、BDNF等蛋白表达水平也上调(P＜0.01).结论 肝X受体的激活促进了I/R小鼠海马齿状回颗粒下层神经干细胞的增殖和认知功能的改善,其机制可能与激活ERK1/2-CREB-BDNF信号通路,促进I/R小鼠海马DG区内源性神经发生有关.
作者：陈莉莉；杨雪梅；湛贝贝；承欧梅 刊期： 2018年第02期
目的 探讨ALLN (N-acetyl-leu-leu-norleucinal)在过氧化氢(H2O2)对661W光感受器细胞的毒性损害过程中的可能影响.方法 MTT法测定H2O2对661W细胞活性的影响;Western blot法检测在H2O2作用661W光感受器细胞中不同时间点Calpain 1和Calpain 2的蛋白水平.结果 MTT结果表明,H2O2作用于661W细胞24 h后,661W细胞数明显下降;100 μmol·L-1的H2O2作用于661W细胞12、18、24 h,Calpain 1和Calpain 2的蛋白水平随H2O2作用时间的延长而增加;MTT法测定661W细胞活性,发现ALLN+H2O2组细胞活性明显比单纯H2O2组高;MTT法检测不同浓度ALLN组(25、50、100、200 μmol·L-1)的细胞活性,结果显示ALLN组细胞活力与空白对照组无明显差别.结论 Calpain抑制剂ALLN可减轻H2O2对661W细胞的毒性损害作用,为光感受器细胞氧化损伤及保护提供了实验依据.
作者：方丽君；林颖彬；黄恩；黄天文 刊期： 2018年第02期
脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)是神经营养家族中的重要成员.BDNF可促进神经系统的发育,维持神经系统的功能,在各种神经的生长发育以及再生中起重要作用.近年来的研究表明,BDNF在抑郁症及其并发症的诊治中发挥重要作用.该文综述了BDNF、BDNF受体和信号转导通路在抑郁症以及糖尿病、脑卒中、产后、慢性疼痛等并发抑郁症中的研究现状.
作者：关书；熊伟；高云 刊期： 2018年第02期
目的 以LPS致敏的小鼠巨噬细胞J774A.1作为炎症细胞模型,研究灯盏花乙素对ATP诱导的炎症小体活化和细胞焦亡的影响及其机制.方法 利用碘化丙锭(PI)染色法检测LPS+ ATP诱导的小鼠J774A.1巨噬细胞发生细胞焦亡的情况;免疫印迹法检测细胞裂解液和上清中IL-1β、caspase-1、HMGB1等蛋白的表达水平;基于微珠的免疫测定法(CBA)检测细胞上清中IL-1β的分泌水平.结果 ATP能够明显诱导LPS致敏的J774A.1巨噬细胞中caspase-1活化、成熟IL-1β(17 ku)和HMGB1释放至培养上清中,并诱导细胞焦亡;而灯盏花乙素预处理能够剂量依赖性地抑制ATP诱导的caspase-1活化以及成熟IL-1β、HMGB1的释放,并抑制细胞焦亡;同时,经腺苷酸环化酶抑制剂MDL12330A和蛋白激酶A(PKA)抑制剂H89处理,可以逆转灯盏花乙素对ATP诱导的细胞焦亡的抑制作用.结论 灯盏花乙素通过调节PKA活性,抑制NLRP3炎症小体的活化与细胞焦亡,从而发挥抗炎作用.
作者：景艳芸；李陈广；颜亮；徐丽慧；白文静；欧阳东云；何贤辉 刊期： 2018年第02期
目的 探讨细胞外信号调节激酶(extracellular signaling-regulated kinase,ERK)在吗啡预处理减轻大鼠全心缺血/再灌注损伤中的作用.方法 健康成年♂ SD大鼠,采用随机数字表法分为6组(n=10):对照组(control,CON)、缺血/再灌注组(ischemia/reperfusion,I/R)、缺血预处理组(ischemia preconditioning,IPC)、吗啡1μmol·L-1预处理组(morphine preconditioning,MPC)、MPC+ERK抑制剂PD98059组(MPD)、ERK抑制剂PD98059对照组(PD).利用Langendorff灌流系统对各组大鼠离体心脏在进行相应处理后,化学比色法检测基线、再灌注5、10 min时冠脉流出液乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活性;同时利用充水球囊置入左心室持续监测左心室发展压(left ventricular developed pressure,LVDP).2,3,5-氯化三苯基四氮唑(triphenyltetrazolium chloride,TTC)染色测量梗死区(infarct size,IS)、缺血危险区(area at risk,AAR)体积及IS/AAR比值;Western blot检测心肌组织ERK磷酸化水平.结果 与I/R组比较,MPC组IS和IS/AAR减小,再灌注5、10 min时LDH活性降低,再灌注结束时LVDP升高,心肌组织磷酸化ERK(p-ERK)相对表达量增加;ERK抑制剂PD98059阻断MPC的保护作用,增加心肌梗死面积,升高再灌注5、10 min时LDH活性,降低再灌注末LVDP,此外,PD98059抑制MPC诱导的ERK磷酸化.结论 吗啡预处理可能通过诱导ERK磷酸化水平升高而减轻大鼠全心缺血/再灌注损伤.
作者：黄俊；杨婉；金世云；产进中；刘中；张野；何淑芳 刊期： 2018年第02期
中国药理学通报杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中国药理学会
