朱小珊；刘刚；肖二；杨光忠；梅之南
目的 分析人乳腺癌细胞株MCF-7及其紫杉醇耐药株MCF-7/Taxol中的紫杉醇结合的差异蛋白质,探索抗肿瘤药物新靶点.方法 合成生物素化紫杉醇,HPLC-MS联用法检测合成产物.SRB法检测生物素化紫杉醇的生物活性,免疫磁珠偶联后与MCF-7及其MCF-7/Taxol的全细胞蛋白液反应,获得紫杉醇结合蛋白,SDS-PAGE电泳获得差异蛋白条带,LC-MS/MS分析,Western blot鉴定差异结合蛋白.结果 成功合成生物素化紫杉醇,生物素化紫杉醇的生物活性和紫杉醇相当.经过蛋白电泳分析,MCF-7/Taxol的紫杉醇结合蛋白较MCF-7多一差异条带,LC-MS/MS分析提示数个目标蛋白,经过Western blot验证差异条带中有Heat shock protein HSP 90、Dermcidin Precursor、Actinin.结论 成功获得了MCF-7和MCF-7/Taxol之间的紫杉醇细胞差异结合蛋白,对这些蛋白作用机制的的深入探索,可能为抗肿瘤药物的研究寻找到新的靶点蛋白,发现新的肿瘤耐药机制.
作者：张正华；梁晓华；吴学勇；侯凯生；张小平；吕中伟 刊期： 2010年第02期
血管内皮细胞和平滑肌细胞是血管壁两种主要细胞,两者在结构上和功能上有着密切的关系,动脉粥样硬化的发生源于循环因子和血管壁细胞间的相互作用,内皮细胞损伤等所导致的分泌功能失调和平滑肌细胞的异常增殖而引起的血管腔狭窄和痉挛是动脉粥样硬化等多种血管疾病发生发展的共同病理基础.本文从动脉粥样硬化病理状态下血管内皮分泌的生长因子、细胞因子、血管活性物质对平滑肌细胞增殖影响的新研究进展做一综述.
作者：李磊；戴敏 刊期： 2010年第02期
目的 探讨间尼索地平(m-Nis)对5-羟色胺(5-HT)诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖和迁移的影响,并深入研究其作用机制.方法 采用植块法培养大鼠PASMCs.实验分为6组:空白对照组、5-HT(1 μmol·L~(-1))组,m-Nis(10~(-5)、10~(-6)、10~(-7)、10~(-8) mol·L~(-1))组.噻唑蓝(MTT)比色法、Transwell迁移小室法分别测定PASMCs的增殖和迁移,Western blot法检测大鼠PASMCs中增殖细胞核抗原(PCNA)的蛋白表达及细胞外信号调节激酶1和2(ERK1/2)的磷酸化水平,研究m-Nis对ERK1/2/MAPK信号通路的影响.结果 不同浓度m-Nis明显抑制了5-HT诱导的大鼠PASMCs增殖(P<0.05或P<0.01)和迁移(P<0.01),并呈现一定的浓度依赖性;另外,Western blot结果 显示m-Nis对5-HT诱导的大鼠PASMCs中PCNA的蛋白表达有不同程度的抑制作用(P<0.05或P<0.01),10~(-5),10~(-6),10~(-7) mol·L~(-1) m-Nis还明显抑制了5-HT诱导的大鼠PASMCs中ERK1/2磷酸化水平的升高,p-ERK1/2/ERK1/2比值均有不同程度地降低(P<0.05或P<0.01).结论 m-Nis对5-HT诱导的大鼠PASMCs增殖和迁移有明显的抑制作用,可能与其抑制PCNA蛋白表达及ERK1/2/MAPK信号通路有关.
作者：陈雪彦；刘焕龙；潘振华；张永健 刊期： 2010年第02期
目的 观察细胞因子信号传导抑制蛋白1(SOCS-1)对糖基化终末产物(AGEs)诱导肾小管上皮细胞(HKC)转分化及JAK/STAT信号通路的影响.方法 体外培养人肾小管上皮细胞(HKC),应用脂质体2000分别转染pCR3.1/SOCS-1表达质粒和pCR3.1空质粒载体,G418筛选阳性克隆.分别采用白蛋白和AGEs进行刺激.采用Western印迹检测SOCS-1、α-SMA、E-钙黏着糖蛋白(E-cadherin)、Ⅰ型胶原(collagen I,Col I)、信号转导和转录活化因子1、3(STAT1、STAT3)及其磷酸化蛋白(p-STAT1、p-STAT3)的表达;酶联免疫吸附实验(ELISA)测定细胞上清液中转化生长因子-β_1(TGF-β_1)的分泌;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测α-SMA和E-cadherin mRNA的表达.结果 与对照组相比,AGEs组肾小管细胞α-SMA和Col I蛋白表达明显上调,细胞培养上清中TGF-β_1含量增加,α-SMA mRNA的表达增加,而E-cadherin蛋白和mRNA表达下调.SOCS-1过表达能够抑制AGEs刺激引起的HKC细胞α-SMA和Col I的表达及STAT1和STAT3的磷酸化,减少TGF-β_1的含量,下调AGEs刺激引起的HKC细胞α-SMA mRNA的表达,同时能够逆转AGEs刺激引起的HKC细胞E-cadherin蛋白和mRNA的下调表达.结论 SOCS-1过表达抑制AGEs诱导的肾小管上皮细胞转分化可能是通过抑制JAK/STAT信号通路活化实现的.
作者：史永红；任韫卓；赵松；郝军；姚芳；刘巍；吴海江；段惠军 刊期： 2010年第02期
目的 观察天山花楸叶总黄酮对大鼠心肌缺血/再灌注 (I/R) 损伤的保护作用,探讨其作用机制.方法 采用改良的Langendorff逆行恒压灌流方法 ,建立大鼠离体心脏I/R损伤模型,观察天山花楸叶总黄酮(4.0、6.0 mg·L~(-1))对心脏I/R损伤后心功能、心肌组织中超氧岐化酶 (SOD) 活性和丙二醛(MDA)含量变化的影响.利用DPPH、羟自由基、超氧阴离子、脂质过氧化反应体系,检测了天山花楸叶总黄酮 (6.25、12.5、25、50、100 mg·L~(-1))体外抗氧化能力.结果 天山花楸叶总黄酮(6.0 mg·L~(-1))可明显改善离体心脏I/R损伤后左心室发展压(LVDP)和左室压力升高或降低大速率 (± dp/dt_(max)),明显增加冠脉流量;天山花楸叶总黄酮(6.0 mg·L~(-1))处理后I/R损伤心肌组织中SOD活性升高,MDA含量减少.天山花楸叶总黄酮(6.25～100 mg·L~(-1))可浓度依赖性地清除DPPH自由基、羟自由基和超氧阴离子自由基,并抑制脂质过氧化反应.结论 天山花楸叶总黄酮对心肌缺血/再灌注损伤具有明显保护作用,与其具有较强的抗氧化活性有关.
作者：付伟；刘婷；杨彩玉；王婷；郑秋生；唐辉；王振华 刊期： 2010年第02期
目的 研究钙调素拮抗剂0-4-乙氧基-丁基-小檗胺(EBB)增强阿霉素诱导乳腺癌多药耐药细胞系MCF-7/ADR细胞的杀伤作用及其相关机制.方法 用MTT法测定阿霉素、EBB单独及联合用药对阿霉素杀伤乳腺癌多药耐药细胞系(MCF-7/ADR)及其亲代细胞系(MCF-7)的作用的IC50值,用不同浓度EBB处理MCF-7/ADR细胞后用FACS法分析EBB对阿霉素诱导细胞凋亡及对mdr1 mRNA和P-gp蛋白水平表达的影响,通过激光共聚焦显微镜观察EBB处理前后及用EBB预处理24和48 h后MCF-7/ADR和MCF-7细胞内阿霉素浓度的改变.结果 MTT结果 显示EBB对MCF-7和MCF-7/ADR都具有抗肿瘤活性;EBB还能协同提高阿霉素的细胞毒作用,MCF-7组两药相互作用指数(CDI)值为0.73,MCF-7/ADR组CDI值为0.49,其对耐药细胞的协同作用更为明显.随EBB剂量增加,低剂量阿霉素诱导MCF-7/ADR细胞凋亡增加而且P-gp蛋白表达水平逐渐下降,细胞内阿霉素浓度逐渐提高,而且用EBB预处理MCF-7/ADR细胞24和48 h后细胞内阿霉素和罗丹明浓度也逐渐提高.结论 EBB是有效的肿瘤细胞化疗药物,它不但能直接抑制P-gp功能还具有下调P-gp蛋白表达的作用,从而有效逆转MCF-7/ADR细胞的耐药现象,协同增强化疗药物对耐药细胞的杀伤作用.
作者：赵英新；刘荣；范冬梅；任思楣；李崴；师锐赞；张砚君；杨铭 刊期： 2010年第02期
目的 研究冬凌草甲素(oridonin)对人胰腺癌SW1990细胞生长抑制作用并探究其可能机制.方法 采用MTT法检测冬凌草甲素对SW1990细胞增殖抑制作用、Hoechst 33258染色法及透射电镜观察细胞的形态学变化、流式细胞仪检测细胞周期及凋亡率、RT-PCR法检测survivin、p21 mRNA表达.结果 冬凌草甲素对人胰腺癌SW1990细胞具有明显的生长抑制作用,荧光显微镜和透射电镜下均见到典型的凋亡形态学改变,流式分析出现亚G_1峰并显示G_2/M期周期阻滞.RT-PCR分析结果 显示p21 mRNA表达增加而survivin mRNA表达减少.结论 冬凌草甲素通过诱导凋亡和G_2/M期周期阻滞来抑制人胰腺癌SW1990细胞生长,其分子机制可能与survivin和p21调节的信号途径有关.
作者：宋芳；冯一中；蒋小岗；顾振纶；郭次仪 刊期： 2010年第02期
目的 观察蒺藜皂苷单体B(TTSMB)对大乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用.方法 分离出生1～3 d大鼠心肌细胞,培养72 h后随机分为:正常对照组(Control)、缺氧/复氧模型组(H/R)、蒺藜皂苷组(GSTT)、蒺藜皂苷单体B(TTSMB )10、1、0.1 nmol·L~(-1)组.观察细胞形态学变化,应用MTT比色法检测细胞存活率,测定培养基中肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)释放量,超氧化物歧化酶(SOD)活性,丙二醛(MDA)含量,并采用流式细胞仪检测心肌细胞凋亡率及应用Western blot检测TTSMB对凋亡相关蛋白caspase-3的作用.结果 与对照组比较,H/R组心肌细胞存活数明显减少,心肌细胞培养液中CK、LDH、AST释放量增加(P<0.01),SOD活力下降,MDA含量升高(P<0.01);与模型组比较,TTSMB 10、1、0.1 nmol·L~(-1)组存活心肌细胞数明显增多(P<0.05,P<0.01),心肌细胞培养液中CK、LDH、AST含量降低,SOD活力增加、MDA含量降低(P<0.05,P<0.01),心肌细胞凋亡率明显下降,caspase-3表达亦下降.结论 TTSMB可减轻心肌细胞缺氧/复氧损伤,抑制心肌细胞凋亡,具有心肌细胞保护作用,其机制与抗自由基作用有关.
作者：张爽；李红；杨世杰 刊期： 2010年第02期
酸敏感离子通道(ASICs)是一类由细胞外酸化所激活的阳离子通道,属于钠通道超家族的新成员.近来发现,ASICs不但在神经系统具有重要的生物学功能,对神经系统以外的组织(如:味蕾、心血管、骨等)的生理和病理过程中也具有重要的作用.该文对有关ASICs在神经以外其他组织中研究的新进展作一综述,以增进对ASICs生物学功能和病理作用的了解.
作者：袁凤来；陈飞虎；陆伟国；李霞；吴繁荣；张腾跃；王玉 刊期： 2010年第02期
群体药动学(PPK)应用统计学原理,综合评价影响药动学个体间及个体内差异的各种因素,进一步利用Bayesian反馈,能够较为准确地预测患者个体药动学参数.PPK在免疫抑制剂环孢素、他克莫司、霉酚酸及西罗莫司的合理用药均有广泛应用.
作者：陈冰；蔡卫民 刊期： 2010年第02期
目的 在中国男性健康受试者中研究CYP2C19基因多态性对奥美拉唑药代动力学及不同奥美拉唑制剂相对生物利用度的影响.方法 筛选18名男性健康志愿者,其中CYP2C19 野生型(w/w)、CYP2C19突变杂合子(w/m)、CYP2C19突变纯合子(m/m)各6名.采取随机双交叉试验,受试者随机口服试验制剂或参比制剂奥美拉唑肠溶胶囊40 mg.抽取血样3 ml至给药后12 h.1 wk后交叉服药.采用LC/MS法测定血浆奥美拉唑浓度,用3P97软件进行个体药动学建模并估算药动学参数.结果 w/w、w/m、m/m组参比制剂奥美拉唑的AUC与C_(max)分别为1178.44±340.24、2328.10±1011.83、5062.02±1097.29 μg·h·L~(-1)与602.87±118.25,926.43±134.48,1406.29±233.58 μg·L~(-1),3组间差异存在显著性(P<0.05).k_e 、CL/F、T_(1/2)和Vd/F也均存在组间差异(P<0.05).w/w、w/m、m/m组试验制剂奥美拉唑的AUC与C/_(max)分别为1224.82±531.67、2723.34±519.29、5692.49±1575.35 μg·h·L~(-1)与618.74±231.43、910.67±125.99、1303.31±152.01 μg·L-1,3组间差异存在显著性(P<0.05).3组间的k_e 、CL/F、T_(1/2)和Vd/F等参数差异均有显著性(P<0.05).w/w、w/m、m/m组奥美拉唑的相对生物利用度分别为94.29%±14.06%、93.08%±11.22%、91.84%±13.03%,3组间差异无统计学意义(P>0.05).结论 不同的CYP2C19基因型,表现为不同的CYP2C19酶活性,影响奥美拉唑的血药浓度和体内药动学过程.临床患者在使用奥美拉唑治疗前进行CYP2C19基因分型,将有利于优化个体治疗方案.CYP2C19基因多态性对奥美拉唑的相对生物利用度无影响.
作者：马晶晶；李金恒；曹晓梅；张尊建；田媛 刊期： 2010年第02期
高糖引起的细胞衰老与氧化应激、糖基化终产物的产生增加、信号转导通路的活化密切相关~([1]).二苯乙烯苷(TSG)是何首乌中提取的一种具有明显药理活性水溶性有效成分~([2]),具有抗氧化作用、延缓衰老、改善脂质代谢等功能.
作者：李彩蓉；蔡飞；黎荣；赵辛元；杨颖乔 刊期： 2010年第02期
目的 探讨新型萘酰亚胺-多胺缀合物NNINspm对多胺转运体的识别及诱导肝癌HepG2细胞凋亡的机制.方法 以MTT法检测细胞毒性;流式细胞仪检测细胞周期、凋亡率及线粒体膜电位的变化;高内涵活细胞成像系统检测NNINspm对多胺转运体识别及Akt易位的影响;Western blot检测NNINspm对cytochrome C、14-3-3、Bad、Bcl-xL、mTOR、p70S6K、Cdk4 、p27~(kip1)、Akt、Caspase-3、Caspase-9等蛋白表达的影响.结果 NNINspm具有良好的多胺转运体识别能力及肿瘤细胞靶向性,其通过抑制Akt磷酸化从而引起一系列的信号分子发生改变,如14-3-3蛋白与Bad解离并与Bcl-xL结合,随后引起cytochrome C释放及caspase-9及caspase-3活化并终诱导细胞凋亡;此外,NNINspm诱导mTOR和p70S6K脱磷酸化,Cdk4下调及 p27~(kip1)上调并终诱导细胞周期阻滞于G_0/G_1期.结论 NNINspm通过PI_3K/Akt信号途径诱导肝癌HepG2细胞凋亡.
作者：谢松强；李骞；张亚宏；王建红；赵瑾；王超杰 刊期： 2010年第02期
目的 探讨儿茶素对大鼠脑缺血/再灌注损伤的保护作用及机制.方法 40只大鼠随机分成5组,假手术组、模型组和儿茶素低、中、高剂量(50,100,200 mg·kg~(-1))组.采用改良的线栓法制备大鼠局灶性脑缺血(2 h)/再灌注(24 h)损伤模型,儿茶素各组于缺血前30 min和缺血后2 h腹腔注射儿茶素溶液,假手术组和模型组给与等体积的NS.再灌注24 h,用改良的Bederson评分法对大鼠进行神经功能缺损评分后,进行海马组织形态学观察及MPO和NOS活性测定.结果 儿茶素可降低大鼠脑缺血/再灌注损伤的神经功能缺损评分,能不同程度地改善脑组织学损伤,并且降低脑组织中MPO和NOS的活性.结论 儿茶素对大鼠脑缺血/再灌注损伤有保护作用,作用机制之一可能与抗炎、抗氧化有关.
作者：刘珊丽；刘宗文；卢沛琦；张艳；张建东；贾丹辉；姚昱欧；曹志斌 刊期： 2010年第02期
目的 本文采用两种化学刺激建立两种新的大鼠内脏高敏感性肠易激综合征(IBS)模型.方法 采用成年大鼠,经肠道连续6 d给予冰醋酸或芥末油刺激后,进行直肠扩张,评估肠道敏感性,记录胃肠电频率、峰电位、峰峰值和面积,检测血清5-HT含量.结果 与对照组相比,冰醋酸模型肠敏感性(P<0.05)、胃肠电频率(P<0.01)均升高;芥末油模型肠敏感性(P<0.01),胃肠电频率(P<0.01)、峰电位(P<0.05)、峰峰值(P<0.01)、峰面积(P<0.01),血清5-HT含量(P<0.05)均有变化,提示模型组敏感性增高.与模型组比较,反证药物组肠敏感性、胃肠电及血清5-HT含量均有一定恢复.结论 通过对成年大鼠肠道进行化学刺激,成功建立了新的大鼠内脏高敏感性IBS模型.
作者：朱力阳；彭成；谢晓芳；王嫣虹 刊期： 2010年第02期
目的 检验猫眼草水煎液的致突变性;改进经典的Ames试验体系使之适应于中药体外致突变性检验.方法 通过经典的Ames试验检测猫眼草的体外致突变性;通过哺乳动物骨髓细胞染色体畸变试验检测猫眼草的致畸作用;改进的Ames试验通过增设含补充组氨酸(含量对应于猫眼草水煎液中组氨酸浓度)的阴性对照,排除样品中组氨酸成分对试验结果 的影响.结果 猫眼草水煎液在经典的Ames试验中为强阳性;对哺乳动物骨髓细胞染色体致畸作用为阴性;在改进的Ames试验中猫眼草水煎液的致突变性为阴性.结论 经典的Ames试验不适合猫眼草水煎液致突变性检测,改进后的Ames实验体系适合.猫眼草水煎液在体外和体内均没有致突变性.
作者：金建玲；张辉；刘波；蔡玉品；高培基 刊期： 2010年第02期
目的 探讨SHR大鼠在高血压发展进程中,不同血管内皮功能损伤程度及抗高血压药物对其的修复.方法 以SHR为模型,7～24 wk(wk:周龄)给予卡托普利(3.375 g·kg~(-1)·d~(-1)),停药观察至32 wk.6、18、24和32 wk时分别进行病理学切片检查胸主动脉、肠系膜上动脉和心尖小动脉形态结构,及胸主动脉和肠系膜上动脉乙酰胆碱(ACh)浓度依赖性血管舒张功能检测(n=6).结果 SHR在18 wk时胸主动脉、肠系膜上动脉和小动脉均出现结构病变,并随时间逐渐加重,三级动脉中胸主动脉病变较之严重,表现为内皮细胞脱落和中膜增厚;随年龄增大SHR胸主动脉和肠系膜上动脉ACh依赖性舒张度均下降,但胸主动脉舒张度降低幅度大于肠系膜上动脉(P=0.10,18 wk;P<0.01,24、32 wk);卡托普利能抑制18 wk SHR胸主动脉舒张度的降低(P<0.05 vs SHR),但对肠系膜上动脉没有该作用.结论 伴随SHR高血压的发病进程,体内各级动脉内皮细胞均发生损伤,内皮依赖性舒张功能降低,大动脉内皮功能损伤出现早,程度也往往高于中、小动脉,抗高血压药物可抑制大动脉内皮功能障碍,但对中、小动脉内皮功能损伤无作用.
作者：王现珍；蒋嘉烨；陆家凤；罗珊珊；王勋；卞卡；可燕 刊期： 2010年第02期
骨桥蛋白(osteopontin,OPN)是一种分泌型糖基化磷蛋白,广泛存在于各种组织和体液中,具有多种生物学活性,整合素α_v β_3是其主要受体.OPN主要参与细胞的增殖、分化、迁移及黏附.目前国内外对OPN的研究主要集中在骨吸收、血管生成、动脉粥样硬化、消化系统、泌尿系统、创面愈合、皮肤纤维化、肝纤维化、肾纤维化等方面,而在肺纤维化方面的研究报道较少,现将OPN与肺纤维化的关系作一综述.
作者：贺海彪；顾振纶；蒋小岗；周文轩；郭次仪 刊期： 2010年第02期
目的 观察不同剂量阿霉素诱导大鼠膈肌急性损伤时膈肌收缩特性的变化与大鼠膈肌细胞骨架蛋白和肌浆网钙泵表达变化的关系.方法 一次性腹腔注射阿霉素制备急性膈肌损伤动物模型,♂ SD大鼠随机分成:阿霉素低剂量组(10 mg·kg~(-1))、中剂量组(20 mg·kg~(-1))和高剂量组(40 mg·kg~(-1))及对照组,每组10只.对照组用生理盐水腹腔注射.3 d后剖胸取膈肌,应用体外灌流大鼠膈肌肌条方法 ,分别测量其单收缩张力(Pt)、大强直张力(Po)、峰值收缩时间(CT)、半舒张时间(1/2RT) ,张力大上升速度(+dt/dt_(max))及张力大下降速度(-dt/dt_(max)).应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定膈肌骨架蛋白肌联蛋白(titin)、伴肌动蛋白(nebulin)和肌浆网钙泵(sarcoplasmic reticulum Ca~(2+)-ATPase,SERCA)mRNA的表达.结果 与对照组相比,阿霉素中、高剂量模型组大鼠膈肌Pt,Po,±dt/dt_(max)下降(P<0.01),CT、1/2RT延长(P<0.01).阿霉素中毒大鼠膈肌各基因表达较对照组相比分别降低(P<0.01).结论 阿霉素中毒大鼠膈肌细胞膈肌骨架蛋白titin、nebulin和SERCA mRNA表达下调,并可能与膈肌张力改变有关.
作者：胡杰；于影；高琴；关宿东 刊期： 2010年第02期
目的 观察淀粉样β蛋白_(1-42)(Aβ_(1-42))和thiorphan对恒河猴大脑海马神经元淀粉样蛋白、乙酰胆碱转移酶(ChAT)以及胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的影响,为注射thiorphan和Aβ_(1-42)建立恒河猴AD模型提供数据准备.方法 开颅后先注射thiorphan到猕猴的大脑皮质和基底核,消耗已存在的Neprilysin,然后再缓慢的注射孵育好的纤丝状Aβ_(1-42),后植入含有thiorphan的微渗透泵到基底核.HE染色观察海马结构病理改变.免疫组化的方法 检测猴子海马Aβ_(1-42)、乙酰胆碱转移酶(ChAT)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)阳性细胞的表达.结果 HE染色显示海马CA1、CA2等区神经元萎缩,海马齿状回局部颗粒细胞丢失被胶质细胞取代;免疫组化结果 显示模型组海马各区Aβ_(1-42)、ChAT、GFAP阳性细胞吸光度(OD值)分别为0.59±0.05、0.21±0.04、0.19±0.04,与对照组比较P<0.01,差异具有统计学意义.结论 Aβ_(1-42)和thiorphan联合颅内给药导致恒河猴海马产生类似AD患者的病理改变.
作者：李文德；吴玉娥；闵凡贵；李卓；黄家园；黄韧 刊期： 2010年第02期
中国药理学通报杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中国药理学会
