张文晓;秦宜德;何晓光;郑欣;任明强
目的 通过对全长基孔肯雅病毒包膜蛋白E2(CHIKV-E2,1~404 aa)及其跨膜疏水区(351~378 aa)缺失突变体E2(1~350 aa)进行原核表达,分析跨膜疏水区对E2蛋白在大肠杆菌中表达的影响.方法 利用ExPasy预测软件对E2蛋白跨膜疏水区进行预测分析,根据GenBank数据库中CHIKV-E2氨基酸序列获得其对应的基因序列.结合重叠延伸PCR(OE-PCR) 原理设计用于全基因合成的核酸引物对CHIKV-E2全长基因(404 aa)进行体外合成,构建全长E2蛋白及其缺失突变体原核表达质粒,将序列正确的两种重组质粒分别转至E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测重组质粒的表达情况.结果 OE-PCR法成功合成了大小为1 212 bp的编码CHIKV-E2(1~404 aa)蛋白的全长基因,构建了全长E2蛋白及其缺失突变体重组表达质粒 pET21b-E2(1~404)和pET21b-E2(1~350),经IPTG诱导表达后,SDS-PAGE结果显示缺失突变体pET21b-E2(1~350)融合蛋白表达量较pET21b-E2(1~404)有明显提高.结论 E2蛋白跨膜疏水区(351~378 aa)对该蛋白的原核表达具有重要影响,缺失该疏水区的突变体在大肠杆菌中表达量比全长E2蛋白表达量明显提高.
作者:章萍萍;潘卫;曹洁;陈秋莉;王锦红;张华群;葛宜兵;祁培培;刘超;邓松华 刊期: 2012年第06期
通过右侧股动脉灌注、右侧颈静脉插管引流建立幼龄大鼠体外循环(CPB)模型,14只均顺利建立CPB模型,除3只停机后死于呼吸循环衰竭,余11只顺利脱离CPB.其中采用外周插管的方法、静脉引流通畅、静脉引流穿刺针的合理选择、全血预充方式是CPB模型成功建立的关键.
作者:左逸;孔祥;葛建军 刊期: 2012年第06期
目的 通过对妊娠早期孕妇甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)和甲状腺功能的筛查,并对TPOAb阳性的亚临床甲减孕妇予以左旋甲状腺素(L-T4)干预,比较干预治疗是否可以影响妊娠结局和新生儿促甲状腺激素(TSH)的水平.方法 选择293例甲状腺功能正常的妊娠早期孕妇作为研究对象,分为TPOAb阳性组、阴性组和干预组.比较TPOAb阳性组、阴性组孕妇TSH水平,并比较3组产科并发症(包括先兆子痫、妊高症、早产、胎儿宫内窘迫等)以及产后新生儿临床特征(身高、体重以及Apagar评分)和TSH指标.结果 ①在TPOAb阳性组孕妇中,有38.89%(28/72)存在亚临床甲减,TPOAb阴性组孕妇中有13.92%(28/158)存在亚临床甲减,两组相比差异有统计学意义(χ2=12.03,P<0.05);② 3组间产科并发症差异有统计学意义(χ2=7.66,P<0.05);③ 3组产妇的新生儿临床特征差异均无统计学意义.而TPOAb阳性组产妇的新生儿TSH水平高于TPOAb阴性组,差异有统计学意义(P<0.05).干预组和阴性组之间新生儿TSH水平差异无统计学意义.结论 妊娠早期孕妇TPOAb阳性可能会对妊娠结局有一定影响,但对新生儿临床特征可能没有影响.对伴有亚临床甲减的TPOAb阳性孕妇早期干预治疗,可以改善不良妊娠结局.
作者:王红菊;陈冬;邓大同;陈明卫;姚洁 刊期: 2012年第06期
目的 通过检测急性髓细胞性白血病(AML)中脑膜瘤1基因(MN1)表达,探讨其与AML预后的相关性.方法 使用荧光定量聚合酶链式反应(RTQ-PCR)定量检测216例AML的MN1、同源异型盒基因5(HOXA5)、ETS相关基因(ERG)、核磷蛋白(NPM1)4种基因的表达,分析MN1表达量与AML治疗效果、预后相关因素、分型等的相关性.结果 初治AML的MN1表达量比缓解AML高(P<0.05);初治急性早幼粒细胞白血病(M3)型比非急性早幼粒细胞白血病(非M3)型低(P<0.05);初治AML一次标准诱导治疗完全缓解(CR)组比未缓解(NR)组低(P<0.05).MN1表达量在初治AML年龄≥60岁、<60岁组及男、女组中差异无统计学意义;MN1表达量与血象(WBC、Hb、PLT)、骨髓原始细胞比、免疫表型无相关性;Logistic回归分析显示,MN1表达量、年龄、血象、骨髓原始细胞比、免疫表型均与初治AML一次标准方案化疗缓解与否无相关性.MN1表达量与HOXA5、ERG及NPM1表达量无相关性.结论 MN1可能是AML的一个重要不良预后因素,并可能指导AML的个体化诊治.
作者:李丽丽;夏瑞祥;吴炜;倪静;王霖;梁兴林 刊期: 2012年第06期
目的 探讨细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)和基质金属蛋白酶7(MMP-7)在口腔鳞状细胞癌(OSCC)中表达及其临床意义.方法 应用免疫组化SP法检测62例手术切除中的OSCC组织及11例正常组织中EMMPRIN和MMP-7的表达水平,并采用RT-PCR检测其中18例OSCC组织及5例正常组织中MMP-7 mRNA的表达.结果 EMMPRIN在OSCC组织中阳性率高于其在正常组织中的阳性率(P<0.05);MMP-7在OSCC组织中阳性表达率高于正常组织(P<0.05);MMP-7 mRNA在OSCC组织中表达高于正常组织(P<0.05).EMMPRIN表达与肿瘤的大小、临床分期及淋巴结转移密切相关,MMP-7表达则与肿瘤的临床分期和淋巴结转移相关,两者的表达均与患者性别和年龄无关.相关性分析显示EMMPRIN和MMP-7之间呈正相关(r=0.801).结论 EMMPRIN和MMP-7异常表达与OSCC的生物学行为密切相关,EMMPEIN可能诱导产生MMP-7,进一步导致OSCC的浸润及转移.
作者:赵丽;张令达 刊期: 2012年第06期
目的 研究子痫前期患者母血中胎儿游离肿瘤转移抑制因子(KISS-1)mRNA和人绒毛膜促性腺激素β亚单位(β-HCG)mRNA的表达变化及意义.方法 选择重度子痫前期患者40例,轻度子痫前期患者35例,对照组正常孕妇30例,提取其外周血血浆中游离mRNA,通过实时荧光定量PCR检测KISS-1 mRNA和β-HCG mRNA的表达.结果 各组样本中均可检测到KISS-1 mRNA和β-HCG mRNA表达.其中KISS-1 mRNA和β-HCG mRNA表达量在重度子痫前期组明显高于轻度子痫前期、对照组(P<0.01).轻度子痫前期组KISS-1 mRNA和β-HCG mRNA表达量高于对照组(P<0.01).结论 孕妇血浆中胎盘来源的游离KISS-1 mRNA和β-HCG mRNA的表达对子痫前期发病具有预测价值.
作者:王利平;王安英;李筱梅 刊期: 2012年第06期
放射治疗是目前鼻咽癌首选的治疗方法,尤其是调强放疗技术,对鼻咽癌患者治疗效益明显提高,改善患者的局控率和生存期.鼻咽癌治疗后局部残留或复发也是一个非常棘手的难题,再程放疗对其具有一定的疗效,尤其是再程调强放疗或立体定向放疗技术.目前鼻咽癌的研究主要是单纯放疗技术、放化疗综合治疗及再程放疗技术对改善患者的局控率和生存期的临床应用.
作者:秦雷 刊期: 2012年第06期
目的 乳源免疫调节肽(PGPIPN)在人卵巢癌细胞株(SKOV3)上进行受体蛋白的筛选.方法 异硫氰酸荧光素(FITC)标记PGPIPN,作用于SKOV3观察其细胞定位;从SKOV3中提取作用部位的蛋白;通过NHS-activated亲和层析柱进行分离和纯化受体蛋白质,SDS-PAGE的初步鉴定.结果 在激光扫描共聚焦显微镜下观察荧光标记肽结合于SKOV3的胞膜上.通过提取膜蛋白和亲和层析法成功筛选了受体膜蛋白.结论 PGPIPN的作用位点位于细胞膜上,其抗癌作用可能通过胞膜结合蛋白而启动信号转导通路,为进一步探讨其抗癌机制奠定基础.
作者:何晓光;郑欣;任明强;张文晓;杨浩然;魏彩;顾芳;秦宜德 刊期: 2012年第06期
目的 探讨高级糖基化终末产物受体(RAGE)、血管紧张素Ⅱ受体-1(AT1R)在糖尿病(DM)脑组织病变的可能机制.方法 20只SD大鼠随机分为对照组和糖尿病组.第16周末行脑磁共振检查;于20周末处死大鼠,留取脑组织标本,行HE染色检测其病理学改变;采用免疫组化SP法检测脑组织RAGE、AT1R、基质金属蛋白酶9(MMP9)及胶原纤维酸性蛋白(GFAP)的表达,并进行相关性分析.结果 糖尿病组大鼠磁共振显示大脑白质病变,T1WI低信号、T2WI高信号;组织病理学显示脑组织小血管周隙明显增宽,未见坏死及炎细胞浸润;糖尿病组脑组织RAGE、AT1R、MMP9阳性细胞数较对照组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05),GFAP阳性细胞数无明显变化;糖尿病组脑组织RAGE、AT1R呈正相关(P=0.015);糖尿病组大鼠MMP9与RAGE、AT1R呈正相关(P=0.001,0.037).结论 DM大鼠白质病变的病理表现是脑小血管周围的水肿,其机制可能与RAGE、AT1R及MMP9表达有关.
作者:邓大丽;余锋;胡向阳;郑丽 刊期: 2012年第06期
建立野菊干燥头状花序中9种黄酮类化合物的毛细管电泳分析方法.通过优选检测波长、pH值、缓冲溶液浓度和进样时间等确定分离检测条件,通过精密度实验、回收率实验验证方法的重复性、准确性.该方法简便、重复性好、准确,是野菊花黄酮类化合物定量测定中的一种可靠方法,能够为野菊花药材和制剂的质量控制提供依据.
作者:吴婷妮;李俊;余长柱;黄艳;马云鹏 刊期: 2012年第06期
利用肉眼观察反应产物颜色的变化探讨研发试剂与酶标准品的佳反应条件,在pH值6.2,37℃,15 min,MSTT为10 μg时,研发干片与酶标准品达到佳反应.临床实验中,将研发试剂、细菌性阴道病(BV) BLUE、国产试剂盒分别对临床标本进行对比检测,研发试剂与BV BLUE对BV的检测效果差异无统计学意义,符合率为97%.而国产A试剂盒与BV BLUE对BV的检测效果差异有统计学意义(P<0.01,χ2=0.390,r=0.42),符合率仅为67%.
作者:刘锐;沈佐君;万士林 刊期: 2012年第06期
目的 研究贵州土家族葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)基因致病突变型,检测G6PD缺乏症发生率及基因频率.方法 通过硝基四氮唑蓝纸片法对2 789例土家族男性进行G6PD缺乏症定性筛查,用变性高效液相色谱技术和DNA测序对78例个体进行基因突变型鉴定.结果 在2 789例纯系土家族男性中,发现2例酶活性异常.在印江县采集的78例(2例酶活性异常和76例正常)纯系土家族男性血样中,共检出G6PD c.1388G>A突变2例、c.1376G>T突变1例和c.1311C>T/IVS 11+93T>C突变2例,基因突变型分别占2.6%、1.3%和2.6%.结论 在贵州土家族人群中发现c.1388G>A、c.1376G>T和c.1311C>T/IVS 11+93T>C 3种突变型,是共同存在于中国人群的G6PD基因突变型,中华民族可能源于共同的祖先;贵州省印江县土家族男性G6PD缺乏症的基因频率为6.5%,可为上述地区G6PD缺乏症的防治提供依据.
作者:张志敏;蒋玮莹;许世艳;刘玲;田秋红;肖潇;李学英;余晓 刊期: 2012年第06期
目的 探讨影响肺炎患者住院费用的因素,为合理控制医疗费用过快增长提供参考.方法 调查某三甲医院的2 808例肺炎住院患者病例资料,数据采用单因素非参数分析及设置哑变量行多元逐步回归分析来探讨影响肺炎患者住院费用的主要因素.结果 肺炎患者的住院费用呈逐年上升趋势,费用结构中药费所占比重较大,占52.01%.单因素分析结果表明:住院费用与肺炎患者住院日、医疗费支付方式、病情严重程度、诊疗质量有关.多因素线性回归分析结果显示:住院日是影响住院费用的首要因素.结论 控制医疗费用的不合理增长应从合理控制药费和住院日着手.
作者:范冬冬;苏虹;彭美玲;单晓伟;韩琴;王忱诚;林雪萍 刊期: 2012年第06期
探讨应用接力扩张法修复大面积瘢痕性秃发的临床效果.手术分期进行:Ⅰ期按设计在头皮帽状腱膜下埋置扩张器,缓慢扩张正常头皮组织;Ⅱ期取出扩张器,推进或旋转扩张皮瓣修复部分瘢痕性秃发区,同时于头皮瓣下接力置放扩张器,待切口愈合良好后注水扩张;扩张过程完成后再次手术修复残余瘢痕秃发区.以此方法重复进行,直至瘢痕完全去除,效果满意.
作者:刘烨;朱飞;宁金龙;汪垠 刊期: 2012年第06期
目的 评价准分子激光原位角膜磨镶术(LASIK)与前弹力层下角膜磨镶术(SBK)矫正中度近视术后的视觉质量.方法 中度近视患者59例(114眼),其中LASIK组与SBK组各57眼,分别记录患者术前、术后1周、1个月、3个月和6个月视力、等效球镜和高阶像差,并进行统计学分析.结果 术后6个月,LASIK组与SBK组术后裸眼视力(UCVA)≥5.0分别占82.46%、87.72%,剩余等效球镜在±0.5D之间分别占80.70%、85.96%,差异均无统计学意义.两组患者垂直慧差(C7)、水平慧差(C8)、球差(C12)和总高阶像差均方根(Rmsh)均于术后1周开始显著增高(P<0.05),除术后1个月SBK组C7明显低于LASIK组外,余各时间点C7、C8、C12和Rmsh组间差异无统计学意义,LASIK组C7、C12和Rmsh术后3个月较术后1周显著下降,SBK组C7和Rmsh术后1个月较术后1周显著下降,至术后6个月,两组的C7、C8、C12和Rmsh均未恢复至术前水平.结论 两种手术方式对术后视觉质量均有显著性影响,术后早期,SBK组较LASIK组视觉质量好,随着时间的推移,LASIK组与SBK组视觉质量无明显差异.
作者:汪晨洁;廖荣丰 刊期: 2012年第06期
瘢痕疙瘩是临床常见皮肤损伤后异常愈合.由于其产生机制一直未能阐明,因而临床治疗缺乏有效手段.随着基因研究方法日益成熟,瘢痕疙瘩的基因研究受到广泛的关注.现就瘢痕疙瘩基因学研究的新进展和试验性的基因治疗做以下综述.
作者:余忠义 刊期: 2012年第06期
目的 探讨RGS22对人胃癌SGC-7901细胞在裸鼠体内转移的影响.方法 将人RGS22基因克隆到逆转录病毒表达质粒LZRsPBMN中,构建重组质粒LZR-RGS22.以GFP为对照构建LZR-GFP.转染人胃癌SGC-7901细胞,Western blot法检测不同细胞中RGS22的表达.设计不同针对RGS22的RNAi片段和对照RNAi,将其构建入pSilencer2.1-U6 neo siRNA载体中,转染SGC-7901-LZR-RGS22细胞.RT-PCR法检测不同细胞中RGS22的表达.将不同组细胞注射于裸鼠腹腔内,观察不同肿瘤细胞的转移情况.结果 SGC-7901-LZR-RGS22细胞中146、112和76 ku片段RGS22蛋白表达较对照SGC-7901-LZR-GFP细胞表达均明显提高.RNAi 484片段和3313片段对RGS22的表达均有抑制作用.在裸鼠肿瘤转移实验中,RGS22能抑制SGC-7901肿瘤细胞向远处器官的转移,当其表达下调后,这种抑制效应又变弱.结论 RGS22能够抑制人胃癌SGC-7901在裸鼠中的转移.
作者:胡艳秋;郑英 刊期: 2012年第06期
目的 研究5-脂氧合酶(5-LOX)siRNA转染人肝癌HepG2细胞后对裸鼠移植瘤生长的作用及对细胞外信号调节激酶(ERK)1/2信号通路的影响.方法 将5-LOX siRNA转染人肝癌HepG2细胞,验证在细胞水平5-LOX表达受抑制.再用转染后的细胞建立裸鼠移植瘤模型.裸鼠分3组:转染组(接种5-LOX siRNA转染的HepG2)、转染空载体组(接种空白质粒转染的细胞)、未转染组(接种未转染的HepG2).接种21 d后处死裸鼠,测量移植瘤体积.Western blot和RT-PCR检测瘤体5-LOX、ERK1/2的蛋白和mRNA表达.结果 转染组肿瘤平均体积与转染空载体组、未转染组比较明显减小(P<0.01),检测瘤体5-LOX、ERK1/2蛋白水平及mRNA表达量明显下降(P<0.05,P<0.01).结论 抑制5-LOX表达可显著抑制肝肿瘤生长,测得ERK1/2表达下降,提示其作用机制可能通过抑制ERK信号转导途径抑制肿瘤增殖.
作者:盛华嵩;熊奇如;钱叶本 刊期: 2012年第06期
回顾性分析经手术与病理证实的19例Rathke囊肿的CT及MRI资料.CT平扫发现4例为低密度,1例为等密度,14例为高密度.MRI平扫发现病变1例位于鞍内,18例位于鞍内并向鞍上延伸.病变呈圆形、椭圆形或哑铃形,T1低信号、T2高信号有6例;T1高信号、T2等信号有5例;T1等信号、T2高信号有4例;T1等信号、T2等信号有3例;T1高信号、T2高信号有1例.19例MRI增强扫描,均未见明显强化.Rathke囊肿囊液密度和信号变化多样,但结合临床和影像学表现对其中多数病例可做出正确诊断.
作者:胡晓峰;程琦;金启安;王昌新;刘影;邓克学;吕维富 刊期: 2012年第06期
目的 利用激光光镊拉曼光谱系统,测定健康者、心律失常患者和心肌梗死患者红细胞的拉曼光谱.方法 取新鲜静脉血样本,经洗涤、离心处理后分离出红细胞,用激光光镊拉曼系统采集其红细胞的拉曼光谱.结果 与正常红细胞比较,心血管疾病患者红细胞的光镊拉曼光谱有较大的差异,红细胞的整体谱线偏弱;部分特征谱数发生位移.结论 通过对红细胞的分离和捕获并测定其拉曼散射光谱,研究和分析红细胞的内容物及生物大分子的变化.进一步收集并建立心血管疾病的拉曼光谱数据库,为分子水平上探讨常见心血管疾病的类型及发病机制提供依据.
作者:吴智辉;肖熙;黄代政;陈朝旺;莫华 刊期: 2012年第06期