连觅；裴军；高嵩；初明；陈咏冰；徐兰；岳芳桦；张德有；李津；王月丹
目的 观察H2O2对Apg-2与BCR/ABL蛋白亚细胞定位的影响.方法 用50μmol/LH2O2分别处理BaF3-BCR/ABL、BaF3-MIGR1及过表达Apg-2蛋白的BaF3-BCR/ABL细胞,激光共聚焦显微镜观察细胞内Apg-2、BCR/ABL蛋白的亚细胞定位变化.结果 Apg-2和BCR/~ABL蛋白在细胞中定位于胞浆,H2O2损伤可致Apg-2和BCR/ABL蛋白在BaF3-BCR/ABL细胞中发生核转位,Apg-2蛋白过表达可引起BCR/ABL蛋白核转位.结论 Apg-2蛋白在H2O2诱导的损伤后发生核转位,可能与BCR/ABL蛋白相互作用,保护H2O2诱导的细胞损伤.
作者：李春莉；刘钉宾；袁颖；陶崑；史梦；冯文莉 刊期： 2012年第11期
目的 分析哈尔滨市2011年疑似预防接种异常反应(Adverse event following immunization,AEFI)的特征,评价AEFI监测系统运转情况.方法 对《疑似预防接种异常反应信息管理系统》报告的哈尔滨市2011年AEFI数据进行描述性分析.结果 2011年哈尔滨市共报告188例AEFI,以一般反应为主,占报告总数的86.7％；下半年报告的病例占全年总数的72.9％；年龄≤1岁和1岁＜年龄≤2岁组报告病例多,分别占总数的42.0％和36.2％；吸附无细胞百白破联合疫苗因接种针次多,AEFI发生数也多,占总数的49.5％；一般反应中,报告多的是发热、红肿、硬结,占85.1％.结论 哈尔滨市AEFI及时报告率、及时调查率、调查表及时上报率等监测指标均达到较高水平.今后应加强对基层人员的培训和督导检查,在乡级单位开展网络直报,进一步提高AEFI监测系统的敏感性和及时性.
作者：叶昕；闫滨；高士锐；马玉杰；薄芳；李岩；徐虹 刊期： 2012年第11期
目的 分析重组汉逊酵母表达的乙型肝炎表面抗原(HBsAg)各纯化工序样品中内毒素的去除效果.方法 采用鲎试剂法检测重组汉逊酵母表达的HBsAg小量工艺探索、中量工艺验证、中试纯化工艺中破碎细胞、微滤、超滤、硅胶吸附、层析、除菌过滤各工序样品的内毒素含量,计算内毒素去除率,分析各纯化工序与内毒素去除率的关系,并以重组酿酒酵母表达HBsAg各纯化工序中样品作为对照.结果 重组汉逊酵母表达的HBsAg纯化过程中内毒素含量由细胞破碎样品的241 EU/ml以上降至除菌过滤样品的1.0 EU/ml以下.微滤和超滤样品内毒素去除率平均可达56％和86％,占总体纯化工艺中内毒素去除率的90％以上.结论 重组汉逊酵母表达HBsAg纯化工序微滤、超滤和疏水层析均可有效去除内毒素,以超滤去除内毒素效果明显,为重组汉逊酵母纯化工艺去除内毒素的研究提供了技术参数和实验依据.
作者：刘英微；王曦；张德有；杨旭琴；许宁；张昀；苏锦锋；何亚丽；王树毅；李津 刊期： 2012年第11期
目的 观察国产无明胶冻干水痘减毒活疫苗的安全性和免疫原性.方法 采用随机、双盲、对照、多中心的方法,在广东省兴宁市、揭东县和梅县选择无水痘病毒暴露史的1～ 12岁健康儿童1 050名,分别接种国产的无明胶冻干水痘减毒活疫苗(试验组)及GlaxoSmithKline Biologicals S.A.(比利时)生产的冻干水痘减毒活疫苗(对照组),进行为期6周的安全性观察；并对其中531名受试者采集免前和免后6周双份血样,采用膜抗原荧光抗体(Fluorescent antibody to membrane antigen,FAMA)法检测抗体水平,评价冻干水痘减毒活疫苗的免疫原性.结果 试验组和对照组全身反应的总发生率分别为6.62％和8.06％,组间差异无统计学意义(P＞0.05)；局部反应的总发生率分别为4.35％和9.60％,组间差异有统计学意义(P＜0.01)；全身反应中以发热为主,局部反应中以疼痛和瘙痒为主,除瘙痒症状(P＜0.01)外,其他症状组间差异均无统计学意义.试验组和对照组免疫后抗体几何平均滴度(GMT)分别为1∶126和1∶140,组间差异无统计学意义(P＞0.05)；抗体阳转或免疫成功率分别为96.99％和96.98％,组间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 与对照疫苗相比,在免疫原性相近的前提下,国产无明胶冻干水痘减毒活疫苗会降低过敏反应的发生率,具有更高的安全性.
作者：汤妍；苏家立；夏艳辉；冯社庄；黄易都；林伟波；杨劲英；邱志远；刘雅姬；温万敏；陈晓荣；邓友华；瞿鸿鹰 刊期： 2012年第11期
目的 建立维持正常肝细胞静息细胞周期状态的小鼠肝细胞的分离纯化及原代培养方法.方法 对传统小鼠肝细胞分离纯化的原位两步胶原酶灌流法进行改良,台盼蓝染色法计数细胞总数并鉴定肝细胞活率；用改良的WME培养基对C57BL/6小鼠肝细胞进行原代培养,经过碘酸雪夫氏染色(Periodic acid-Schiff stain,PAS)和全自动生化分析仪鉴定肝细胞的生物学特性及功能；Western blot法检测分离纯化后的小鼠肝细胞及原代培养24、48、72、96 h小鼠肝细胞的细胞周期蛋白p16、cyclin D1和cyclin A的表达水平.结果 分离纯化后可从每只小鼠肝脏稳定获取(3～5)×107个肝细胞,细胞活率达(86.68±2.46)％；原代培养96 h内的小鼠肝细胞能保持合成糖原、白蛋白、尿素的功能；原代培养小鼠肝细胞中,细胞周期蛋白p16、cyclin D1和cyclin A的表达水平与分离纯化的小鼠肝细胞相比,差异无统计学意义(P＞0.05),表明原代培养96 h内的小鼠肝细胞均能维持静息细胞周期状态.结论 改良的分离纯化方法能稳定获得高产量、高活率的小鼠肝细胞；改良后的原代培养方法可使肝细胞维持其特异性功能、分化特性及静息细胞周期状态.
作者：罗娜；蔡园；张俊；汤为学；吴小翎；何松 刊期： 2012年第11期
目的 筛选冻干乙型脑炎减毒活疫苗非动物源性稳定剂的配方及其缓冲液.方法 分别以0.01 mol/L PBS和Earles液为缓冲液,右旋糖苷-70、蔗糖、山梨醇、乳糖及组氨酸不同组合构成的冻干稳定剂,制备乙型脑炎减毒活疫苗半成品及冻干疫苗成品,观察在不同温度存放不同时间的稳定性,并检测不同配方冻干稳定剂的崩解温度(Tc).结果 12种配方冻干稳定剂制成的疫苗半成品可在4℃ 1周内保持滴度稳定性,在25℃3d内保持滴度无明显变化,3d后滴度大幅下降；以0.01 mol/L PBS为缓冲液的稳定剂制备的疫苗的Tc值低于Earles液,以Earles液为缓冲液的D2和F2配方制备的冻干疫苗成品,在4℃及37℃放置1周后,滴度均＞5.7 logPFU/ml.结论 已筛选出以Earles液为缓冲液,含右旋糖苷-70、蔗糖、山梨醇、乳糖及组氨酸的稳定剂配方,用于制备冻干乙型脑炎减毒活疫苗具有良好的保护效果.
作者：段凯；李黎 刊期： 2012年第11期
目的 将腺病毒Ad5F35-GFP、Ad5-GFP及LipofectamineTM 2000对4种细胞的转染效率进行比较,以获得Ad5F35-GFP适用的细胞种类及各类细胞适用的转染方法.方法 采用携带绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein,GFP)基因的Ad5F35-GFP、Ad5-GFP及LipofectamineTM 2000,分别转染人慢性粒细胞白血病细胞K562、人外周血单个核细胞(PBMC)、小鼠脂肪细胞3T3-L1和肝癌细胞Hep A1-6,于转染48 h后,倒置荧光显微镜下观察转染效率,RT-PCR法检测GFP基因mRNA的转录水平.结果 Ad5F35-GFP转染K562细胞、PBMC效率均较高,分别为61％和56％,但不能有效地转染3T3-L1(5％)、HepA1-6(15％)细胞；Ad5F35-GFP、Ad5-GFP及LipofectamineTM 2000均不能有效地转染3T3-L1细胞,转染效率分别为5％、5％和6％; Ad5-GFP、LipofectamineTM 2000转染Hep A1-6细胞效率均较高,分别为73％和71％.结论 Ad5F35-GFP可有效转染人造血细胞和单核细胞,为相关基因的研究及治疗领域的应用奠定了基础.
作者：成凤；王秦；匡文斌；李朴；董晋豫；梁勤东；涂植光 刊期： 2012年第11期
目的 构建携带小鼠IL-17a编码基因的重组耻垢分枝杆菌(Recombinant Mycobacterium smegmatis,rMs),并研究其对巨噬细胞表达炎症因子的影响.方法 双酶切质粒pET28a/mIL-17a和pMFA41,转化感受态E.coli TOP10,构建大肠杆菌-分枝杆菌穿梭表达质粒pMFA41/mIL-17a,电转化耻垢分枝杆菌mc2155,经SDS-PAGE和Western blot鉴定表达产物.分别以MOI为10∶1加入rMs、rMs+anti-IL-17A、Ms感染小鼠巨噬细胞系RAW264.7,并设PBS对照组.荧光定量PCR法检测转染细胞中β防御素-2(Defensin β2,Defb-2)、巨噬细胞炎症蛋白(Macrophage inflammatory protein,MIP)-1α和MIP-2β基因mRNA水平；ELISA法检测细胞培养上清中MIP-1α、MIP-2β、IL-4及IFNγ蛋白的表达水平.结果 重组表达质粒pMFA41/mIL-17a经双酶切及测序鉴定证明构建正确；表达的重组蛋白mIL-17A可与大鼠抗小鼠IL-17A单克隆抗体特异性结合,在相对分子质量约20 000处可见特异性反应条带；rMs组RAW264.7细胞中Defb-2、MIP-1α、MIP-2β基因mRNA水平较Ms组及PBS组明显升高(P＜0.01);rMs组细胞培养上清中MIP-1α、MIP-2β、IL-4和IFNγ的蛋白浓度较Ms组及PBS组明显升高(P＜0.01).结论 成功构建了表达具有生物学活性mIL-17A的重组耻垢分枝杆菌疫苗,该疫苗可有效促进体外培养的巨噬细胞表达MIP、Defb2、IFN-γ及IL-4,为新型疫苗的研发奠定基础.
作者：郭盛；张建华；吴良霞；陈凌；郝春莉；范小勇 刊期： 2012年第11期
目的 建立重组戊型肝炎疫苗工程菌三级种子库,并分析其稳定性.方法 将工程菌株HEV179/BL21 (DE3)复苏活化,经全面检测合格后冻干保存即为原始种子库；原始种子库传代扩增,经全面检定合格后,冻干保存即为主种子库；主种子库经传代扩增和全面检定合格后,甘油冻存即为工作种子库.对三级种子库进行全面检定,并对工程菌进行冻干及甘油冻存稳定性、甘油冻存时间稳定性及质粒稳定性检测.结果 建立的三级种子库经全面检定合格；菌种冻干稳定性、甘油冻存稳定性、甘油冻存时间稳定性及质粒稳定性指标均合格,菌种生长特性、遗传和表达稳定性均未发生变化.结论 成功建立了HEV179/BL21(DE3)工程菌三级种子库,菌种稳定性良好,适用于重组戊型肝炎疫苗的工业化生产.
作者：曹玉锋；徐军；时成波；孟多佳；迟春萍；王玉梅；贾媛；张剑锋；常东英；王伟善 刊期： 2012年第11期
目的 研究罗格列酮(Rosiglitazone,RSG)对高糖高胰岛素(High glucose and insulin,HGI)诱导心肌肥大中的抵抗作用及其机制.方法 用HGI培养SD大鼠乳鼠心肌细胞,建立心肌细胞肥大模型,并给予不同浓度的RSG处理；以细胞表面积、蛋白含量和心钠肽(Atrial natriuretic peptide,ANP)基因mRNA的水平为心肌肥大指标,观察RSG对HGI诱导心肌肥大的作用；Real-time PCR和Western blot分别检测过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(Peroxisome proliferator-activated receptor-γ,PPAR-γ)和内皮型一氧化氮合酶(Endothelial nitric oxide synthase,eNOS)基因mRNA水平和蛋白的表达水平；双抗体夹心ABC-ELISA法和硝酸还原法分别检测eNOS和NO的含量.结果 HGI成功诱导大鼠心肌细胞肥大；RSG呈浓度依赖性地抑制HGI诱导的心肌细胞肥大,并明显上调HGI所致的PPAR-γ和eNOS基因mRNA水平的降低,同时增加PPAR-γ蛋白的表达水平、eNOS和NO的含量(P均＜0.05).PPAR-γ抑制剂GW9662及NOS抑制剂L-硝基-精氨酸甲酯(L-NAME)均可阻断RSG的上述作用.结论 RSG通过激活PPAR-γ受体、增加eNOS的含量、促进NO释放,从而产生抗HGI诱导的心肌细胞肥大作用.
作者：彭晓凤；吴芹；蒋青松 刊期： 2012年第11期
目的 构建大容量、多样性的人源核糖体展示(Ribosome display,RD)单链抗体(Singe chain Fv segment,scFv)库.方法 收集20名健康献血者的新鲜外周血,分离淋巴细胞,提取细胞总RNA；设计兼并引物,利用RT-PCR分别扩增人抗体的VH-linker、Vκ、Vλ及Cκ基因；采用重叠PCR(SOE-PCR)技术,构建VH-linker-Vκ和VH-linker-Vλ-Cκ单链抗体库；将VH-linker-Vκ和VH-linker-Vλ-Cκ等量混合后,与pMD19-T载体连接,并转化感受态E.coli DH5α,对所构建的scFv库进行菌落PCR和测序分析.结果 构建的核糖体展示单链抗体库重组率较高,转化产物经菌落PCR鉴定,均可见约1 000 bp的scFv基因片段,库容量为2.06×1013.经分析该抗体库单链抗体序列均完整,内部无终止密码子,可变区序列无一重复,多样性良好,均具有完整的体外核糖体展示框架.结论 已成功构建了大容量、多样性好的人源核糖体展示单链抗体库,为进一步筛选高特异性、高亲和力的人源抗体奠定了基础.
作者：刘彬；李长青；林芳昭；肖薇；赵睿；肖小璞 刊期： 2012年第11期
目的 对汉逊酵母表达的adr亚型重组乙型肝炎(简称乙肝)疫苗(adr疫苗)进行免疫学特性与功能学研究.方法 采用adr疫苗与酿酒酵母表达的重组乙肝疫苗(adw疫苗)免疫转入HLA-A2基因小鼠,免疫剂量2μg/0.2 ml,于初免3周后进行第2次免疫.于第2次免疫1周后,采血,分离血清,经ELISA法检测小鼠血清中抗-HBs抗体水平.同时取小鼠脾脏,制备脾细胞悬液,采用HLA-A2/WLSLLVPFV五聚体荧光标记流式细胞术分析细胞中特异性抗乙肝病毒表位的CTL比例.结果 adr疫苗与adw疫苗均可诱导转基因小鼠产生抗乙肝表面抗原抗体,且抗体水平差异无统计学意义(P＞0.05),2种疫苗对转基因小鼠的体液免疫应答的增强作用相似；adr疫苗诱导的乙肝表面抗原特异性CTL应答作用较adw疫苗更明显(P＜0.05).结论 adr重组乙肝疫苗(汉逊酵母)诱导转基因小鼠的体液免疫应答作用与现有adw疫苗相似,但其诱导机体产生细胞免疫应答的能力更显著,可能具有更加良好的预防HBV感染作用和前景.
作者：连觅；裴军；高嵩；初明；陈咏冰；徐兰；岳芳桦；张德有；李津；王月丹 刊期： 2012年第11期
目的 研究调控异养培养基中碳源和氮源浓度对小球藻Chlorella protothecoides(C.protothecoides)胞内生化成分积累的影响.方法 分别以葡萄糖为碳源(尿素初始浓度为3 g/L,葡萄糖浓度分别为10、20、30、40、50 g/L)、尿素为氮源(葡萄糖初始浓度为30 g/L,尿素浓度分别为3.00、0.00、0.15、0.30、0.45、0.60 g/L),避光培养小球藻细胞,收集藻液,制备冻干藻粉.采用傅里叶变换红外光谱法(Fourier transform infrared spectroscgy,FTIR)测定小球藻胞内蛋白质、油脂和碳水化合物的变化.结果 当培养基葡萄糖浓度为30 g/L,尿素浓度为3 g/L时,蛋白质吸收峰强度大,相对含量较高,碳水化合物次之,油脂含量低；与氮充足(3.00 g/L)条件下相比,氮缺失(0.00 g/L)条件下,蛋白质吸收峰强度骤然降低43.22％,油脂增高1.41倍,碳水化合物提高6.04％.结论 培养基中不同碳、氮水平可实现胞内不同大分子组分(油脂、蛋白质和碳水化合物)产量的调控,满足不同层次的工业需求.
作者：李玉芹；袁正求；冯跃；陈迪；穆锦秀；刘令 刊期： 2012年第11期
目的 观察高脂状态下肺泡Ⅱ型上皮细胞(Alveolar typeⅡ epithelial cells,ATⅡ)株A549细胞的脂质蓄积,并探讨炎症对高脂状态下A549细胞脂质蓄积的影响及可能的作用机制.方法 将A549细胞分为4组:对照组(不加药物)、高脂组(100 μg/ml LDL)、炎症组(300 ng/ml LPS)、联合处理组(100μg/ml LDL+ 300 ng/ml LPS),处理24 h后,油红O染色观察各组细胞内脂质蓄积情况；Real-time PCR检测固醇调节元件结蛋白2(Sterol regulatory elememnt binding proteins 2,SREBP2)、HMGCoA(3-Hydroxy-3-methlglutary 1 coezyme A)还原酶和低密度脂蛋白受体(Low-density lipoprotein receptor,LDLr)基因mRNA转录水平；Western blot法检测SREBP2、LDLr和三磷酸腺酐结合盒转运体A1 (ATP-binding cassette sub-family A member 1,ABCA1)蛋白表达水平.结果 联合处理组细胞内脂质蓄积较对照组、高脂组及炎症组严重；与对照组相比,高脂组的SREBP2、HMGCoA还原酶、LDLr基因mRNA转录水平反馈性下调(0.54±0.09)、(0.51±0.06)及(0.34±0.06)倍(P＜0.05)；联合处理组各基因mRNA转录水平下调程度低于高脂组；SREBP2及LDLr蛋白表达水平的变化趋势与基因转录水平基本一致；与对照组相比,高脂组ABCA1蛋白的表达反馈性上调(2.78±0.38)倍(P＜0.01)；联合处理组ABCA1蛋白表达上调无高脂组明显.结论 炎症可加重高脂状态下肺泡Ⅱ型上皮细胞内的脂质蓄积,其机制可能与炎症干扰SREBP2-LDLr/HMGCoA还原酶通路介导的细胞内脂质稳态有关.
作者：朱婷婷；王双；方严；练雪梅 刊期： 2012年第11期
目的 探讨酶法处理短棒状杆菌(Enzyme-digested Corynebacterium parvum product,ECPP)对荷瘤鼠脾淋巴细胞免疫功能的影响.方法 将NIH小鼠随机分为5组:生理盐水对照组(NS)、荷瘤对照组(CK)、阳性对照组(CPP)、低剂量ECPP组(ECPPⅠ,500 μg/ml ECPP)和高剂量ECPP组(ECPPⅡ,1 000 μg/ml ECPP).除NS组经腹腔注射0.2 ml 0.9％ NaCl外,其他4组小鼠均经腹腔注射0.2ml艾氏腹水瘤(Ehrlich ascites carcinoma,EAC)细胞悬液(5.0×106个/ml),接种次日,每组小鼠腹腔注射相应药物(注射体积均为0.25 ml),每次间隔1d,连续5次,停药次日,颈椎脱臼处死小鼠,检测腹水量；3H-TdR法检测脾淋巴细胞转化能力；流式细胞术分析T淋巴细胞亚群及NK细胞活性；RT-PCR检测脾淋巴细胞中IFNγ、TNF-α基因mRNA的转录水平.结果 与CK组相比,各给药组均能明显降低小鼠腹水量(P＜0.01),CPP组和ECPPⅡ组间差异无统计学意义(P＞0.05),ECPPⅡ组降低腹水的能力明显高于ECPPⅠ组(P＜0.01)；与NS、CK及ECPPⅠ组相比,ECPPⅡ组可明显提高T、B淋巴细胞的转化能力,增加脾CD4+、CD8+及NK细胞数量(P＜0.01),而与CPP组比较,差异无统计学意义(P＞0.05)；与NS、CK和ECPP Ⅰ组比较,ECPPⅡ组IFNγ、TNF-α基因mRNA转录水平明显提高(P＜0.01),与CPP组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 ECPP能显著提高荷瘤鼠脾细胞的免疫功能.
作者：曹芳；杜瑞林；郭立君 刊期： 2012年第11期
目的 以酵母细胞壁为囊材,制备盐酸氯丙嗪微囊,并观察其稳定性.方法 以载药量为评价指标,采用正交试验设计确定制备盐酸氯丙嗪微囊佳处方和工艺,并对微囊含量的检测方法进行精密度、稳定性及准确性验证.光学显微镜观察微囊形态,考察其体外释放、高湿度和强光照射的稳定性.结果 在40℃,盐酸氯丙嗪与酵母细胞壁质量比为1∶3,时间为6h,微囊的平均载药量可达41.76％.改进的含量检测方法精密度、稳定性、准确性良好.光学显微镜下可见微囊囊壁完整,呈球形或椭球形,形态均一.盐酸氯丙嗪微囊500 min体外累积释放为94.89％.盐酸氯丙嗪微囊对湿度和光度稳定性显著增加.结论 酵母细胞壁可作为囊材用于制备微囊,且能增加药物的稳定性.
作者：江涛；李伟；谭力清；邓春兰；李明；于明安 刊期： 2012年第11期
目的 研究忍冬水提物对卵清蛋白(Ovalbumin,OVA)致敏小鼠的疗效.方法 建立OVA致敏小鼠模型,将OVA致敏BALB/c小鼠随机分为5组,即忍冬水提物高浓度组(H组)、中浓度组(M组)、低浓度组(L组)、模型对照组(CH组)及阴性对照组(NS组)；采用小鼠足垫肿胀试验检测迟发型超敏反应；甲苯胺蓝及HE染色观察小鼠肠系膜、空肠肥大细胞及空肠绒毛上皮细胞形态；ELISA法检测小鼠血清OVA特异性IgE及IgG1、小肠黏液总IgA及OVA特异性IgA水平.结果 OVA致敏小鼠出现急性腹泻；致敏小鼠经足垫皮内激发,出现迟发型超敏反应；致敏小鼠肠系膜及空肠肥大细胞聚集、胞质颗粒外泄及空肠绒毛炎症细胞浸润；小鼠血清OVA特异性IgE及小肠黏液OVA特异性IgA水平明显升高(P均＜0.01).经H、M组忍冬水提物灌胃后致敏小鼠的一般状态、腹泻情况及空肠炎症明显缓解；OVA介导的足垫肿胀反应明显减弱；小鼠血清OVA特异性IgE及小肠黏液OVA特异性IgA水平明显降低(P均＜0.01).结论 一定浓度忍冬水提物可有效缓解OVA致敏小鼠的速发型与迟发型超敏反应,其中高浓度金银花忍冬水提物效果较好.提示忍冬科植物中某些成分具有抗过敏作用.
作者：谢芸芸；黎海芪 刊期： 2012年第11期
目的 观察森林脑炎灭活疫苗的接种反应和免疫效果.方法 对内蒙古和黑龙江2个观察区共3 134名志愿者接种森林脑炎灭活疫苗,观察接种后志愿者的局部和全身不良反应,采用森林脑炎病毒IgG抗体ELISA试剂盒检测免疫后血清抗体滴度,并计算抗体阳转率.结果 接种疫苗后,在整个观察期间,所有志愿者均未发生全身反应,局部反应仅4例,不良反应总体发生率为0.13％.内蒙古观察区志愿者免疫后血清抗体GMT在1∶83.2～1∶117.5之间,总体血清抗体阳转率达88.1％；黑龙江观察区志愿者血清抗体GMT在1∶71.2～1∶84.6之间,血清抗体阳转率为86.2％.2个观察区接种疫苗后总体GMT为1∶80.4,血清抗体阳转率为86.8％.结论 森林脑炎灭活疫苗接种反应轻微、免疫原性良好,可大规模推广应用.
作者：杜瑞林；宋宗明；刘国云；王伟；刘双军；张伟红；孙洪亮；李文娟；尹兵 刊期： 2012年第11期
目的 构建携带HA标签的重组腺病毒Ad5F35-HF2S.方法 体外合成HA标签DNA双链,以K562细胞cDNA为模板,分别扩增FKBP1、FKBP2和SH2基因,依次亚克隆至穿梭质粒pAdTrack-CMV-HA中,构建重组穿梭质粒pAdTrack-CMV-HF2S,穿梭质粒经Pme I酶切线性化,与腺病毒骨架质粒pAd5/F35在Ad5/F35-BJ5183感受态细胞中同源重组,获得重组腺病毒质粒pAd5/F35-HF2S,经Pac I酶切线性化后,转染AD-293细胞进行包装、扩增,获得重组腺病毒Ad5/F35-HF2S,经2轮扩增后,测定病毒滴度；采用PCR及Western blot法检测感染细胞中HF2S基因的转录及蛋白的表达.结果 重组穿梭质粒pAdTrack-CMV-HF2S及重组腺病毒质粒pAd5/F35-HF2S经鉴定均构建正确；经包装及2轮扩增后,重组腺病毒Ad5/F35-HF2S病毒滴度可达1013IU/ml;经PCR及Western blot鉴定表明,重组腺病毒携带的HF2S基因能够在AD-293细胞中表达.结论 已成功构建了表达HF2S基因的重组腺病毒Ad5/F35-HF2S,为研究Grb2-SH2结构域在CML中的基因治疗和作用机制奠定了基础.
作者：李千音；黄峥兰；高淼；钟梁；冯文莉 刊期： 2012年第11期
目的 建立鹅红细胞的醛化方法,用于百日咳疫苗生产中的血凝活性测定.方法 以新鲜鹅红细胞为对照,分别采用方法一、方法二醛化鹅红细胞,比较两种处理方法制备的醛化鹅红细胞的溶血性和活性,确定佳醛化条件.结果 采用方法一制备的醛化鹅红细胞的实验效果优于方法二,其测定结果与新鲜红细胞一致,在4℃保存90 d未出现溶血现象,戊二醛佳处理浓度为1.25％,醛化时间为40 min,佳醛化鹅红细胞工作浓度为0.8％.结论 已成功建立鹅红细胞的醛化方法.
作者：赵伟；胡业勤；薛红刚；李新国；刘玉兰；朱红伟；刘胜 刊期： 2012年第11期
中国生物制品学杂志
主管:中华人民共和国卫生部
主办：中华预防医学会,长春生物制品研究所有限责任公司
