彭晓凤；吴芹；蒋青松
目的 以酵母细胞壁为囊材,制备盐酸氯丙嗪微囊,并观察其稳定性.方法 以载药量为评价指标,采用正交试验设计确定制备盐酸氯丙嗪微囊佳处方和工艺,并对微囊含量的检测方法进行精密度、稳定性及准确性验证.光学显微镜观察微囊形态,考察其体外释放、高湿度和强光照射的稳定性.结果 在40℃,盐酸氯丙嗪与酵母细胞壁质量比为1∶3,时间为6h,微囊的平均载药量可达41.76％.改进的含量检测方法精密度、稳定性、准确性良好.光学显微镜下可见微囊囊壁完整,呈球形或椭球形,形态均一.盐酸氯丙嗪微囊500 min体外累积释放为94.89％.盐酸氯丙嗪微囊对湿度和光度稳定性显著增加.结论 酵母细胞壁可作为囊材用于制备微囊,且能增加药物的稳定性.
作者：江涛；李伟；谭力清；邓春兰；李明；于明安 刊期： 2012年第11期
目的 探讨重组胸腺素α1(Recombinant human thymosin α1,rhTα1)对免疫低下小鼠接种流感疫苗后免疫应答效果的影响.方法 将BALB/c小鼠随机分为5组:疫苗组、环磷酰胺+疫苗组、环磷酰胺+疫苗+rhTα1低浓度(0.2 mg/kg)组、环磷酰胺+疫苗+ rhTα1中浓度(0.4 mg/kg)组、环磷酰胺+疫苗+rhTα1高浓度(0.8 mg/kg)组.经小鼠腹腔注射环磷酰胺,80 mg/kg,共3次,隔天给药；肌肉接种流感疫苗,1.8 μg血凝素/只；皮下注射低、中、高浓度rhTα1,0.2ml/只,每周2次,连续4周.动态监测各组小鼠血清血凝抑制(HI)抗体效价,并观察小鼠脾脏指数及脾脏形态学结构的变化.结果 与疫苗组相比,环磷酰胺+疫苗组小鼠体内HI抗体效价降低,脾指数降低,脾脏组织病理形态退化；与环磷酰胺+疫苗组相比,环磷酰胺+疫苗+ rh-Tα1各浓度组HI抗体效价升高,小鼠脾指数增加,脾脏组织病理形态明显改善.结论 重组胸腺素α1可提高免疫低下小鼠流感疫苗接种的免疫效果,为寻找适合免疫低下人群的疫苗增强剂提供了有益的尝试.
作者：王冀邯；王槐栋；胡亚；黄红兰；聂李亚；李凡 刊期： 2012年第11期
目的 对水痘-带状疱疹病毒(Varicella-zoster virus,VZV) Oka株(V-Oka株)与分离于临床水痘患者的野毒株进行可变区基因序列比对分析.方法 提取V-Oka株和VZV临床分离株的基因组DNA,对其串联重复序列区(R区)进行PCR扩增和测序；将R3基因的纯化产物与pMD18-T载体连接,转化感受态大肠杆菌JM109,提取质粒,经双酶切鉴定及测序；将测序结果与GenBank中登录的V-Oka株基因序列进行比对分析.结果 R1～R5基因扩增产物及R3基因重组质粒的双酶切产物片段大小均与预期相符；V-Oka株较稳定,测序结果与GenBank中登录的V-Oka株R1 ～ R5基因序列一致,野毒株R区序列呈现多态性,与V-Oka株有差异,R4区序列区别明显.结论 水痘患者的致病毒株为野毒株；R4的重复单位拷贝数可为临床快速鉴别V-Oka株与野毒株提供科学的手段.
作者：陈哲文；金于兰；瞿爱东；马相虎；王亮 刊期： 2012年第11期
目的 筛选冻干乙型脑炎减毒活疫苗非动物源性稳定剂的配方及其缓冲液.方法 分别以0.01 mol/L PBS和Earles液为缓冲液,右旋糖苷-70、蔗糖、山梨醇、乳糖及组氨酸不同组合构成的冻干稳定剂,制备乙型脑炎减毒活疫苗半成品及冻干疫苗成品,观察在不同温度存放不同时间的稳定性,并检测不同配方冻干稳定剂的崩解温度(Tc).结果 12种配方冻干稳定剂制成的疫苗半成品可在4℃ 1周内保持滴度稳定性,在25℃3d内保持滴度无明显变化,3d后滴度大幅下降；以0.01 mol/L PBS为缓冲液的稳定剂制备的疫苗的Tc值低于Earles液,以Earles液为缓冲液的D2和F2配方制备的冻干疫苗成品,在4℃及37℃放置1周后,滴度均＞5.7 logPFU/ml.结论 已筛选出以Earles液为缓冲液,含右旋糖苷-70、蔗糖、山梨醇、乳糖及组氨酸的稳定剂配方,用于制备冻干乙型脑炎减毒活疫苗具有良好的保护效果.
作者：段凯；李黎 刊期： 2012年第11期
目的 建立重组戊型肝炎疫苗工程菌三级种子库,并分析其稳定性.方法 将工程菌株HEV179/BL21 (DE3)复苏活化,经全面检测合格后冻干保存即为原始种子库；原始种子库传代扩增,经全面检定合格后,冻干保存即为主种子库；主种子库经传代扩增和全面检定合格后,甘油冻存即为工作种子库.对三级种子库进行全面检定,并对工程菌进行冻干及甘油冻存稳定性、甘油冻存时间稳定性及质粒稳定性检测.结果 建立的三级种子库经全面检定合格；菌种冻干稳定性、甘油冻存稳定性、甘油冻存时间稳定性及质粒稳定性指标均合格,菌种生长特性、遗传和表达稳定性均未发生变化.结论 成功建立了HEV179/BL21(DE3)工程菌三级种子库,菌种稳定性良好,适用于重组戊型肝炎疫苗的工业化生产.
作者：曹玉锋；徐军；时成波；孟多佳；迟春萍；王玉梅；贾媛；张剑锋；常东英；王伟善 刊期： 2012年第11期
目的 建立豚鼠感染EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)动物模型,分析EBV对豚鼠的易感性.方法 将EBV经鼻腔和口腔感染豚鼠,建立感染EBV动物模型.提取分离的豚鼠淋巴细胞总RNA,巢式PCR法检测EBNA1及BcLF1基因mRNA的表达水平；ELISA法检测豚鼠血清中抗EBV IgG抗体水平的变化.取豚鼠肝脏、肺、脾脏、腮腺进行病理分析.结果 10只模型组豚鼠中有6只检测到BcLF1基因mRNA的表达,其中有4只同时检测到了EBNA1和BcLF1基因mRNA的表达；经双酶切及测序鉴定,扩增的EBNA1及BcLF1基因大小与预期相符.10只豚鼠血清中VCA IgG和EBNA-IgG抗体水平均有所升高.模型组中有5只豚鼠的肝脏、肺、脾脏、腮腺的组织发生不同程度的病变.结论 豚鼠可作为EBV感染动物模型的备选动物.
作者：刘国超；张晶；孙晓梅；胡凝珠；胡云章；董佳妮 刊期： 2012年第11期
目的 将腺病毒Ad5F35-GFP、Ad5-GFP及LipofectamineTM 2000对4种细胞的转染效率进行比较,以获得Ad5F35-GFP适用的细胞种类及各类细胞适用的转染方法.方法 采用携带绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein,GFP)基因的Ad5F35-GFP、Ad5-GFP及LipofectamineTM 2000,分别转染人慢性粒细胞白血病细胞K562、人外周血单个核细胞(PBMC)、小鼠脂肪细胞3T3-L1和肝癌细胞Hep A1-6,于转染48 h后,倒置荧光显微镜下观察转染效率,RT-PCR法检测GFP基因mRNA的转录水平.结果 Ad5F35-GFP转染K562细胞、PBMC效率均较高,分别为61％和56％,但不能有效地转染3T3-L1(5％)、HepA1-6(15％)细胞；Ad5F35-GFP、Ad5-GFP及LipofectamineTM 2000均不能有效地转染3T3-L1细胞,转染效率分别为5％、5％和6％; Ad5-GFP、LipofectamineTM 2000转染Hep A1-6细胞效率均较高,分别为73％和71％.结论 Ad5F35-GFP可有效转染人造血细胞和单核细胞,为相关基因的研究及治疗领域的应用奠定了基础.
作者：成凤；王秦；匡文斌；李朴；董晋豫；梁勤东；涂植光 刊期： 2012年第11期
目的 对注射用A型肉毒毒素(Botulinum toxin type A for injection,商品名衡力,出口商品名BTXA)制品中的活性药用成分(Active pharmaceutical ingredient,API)的性质及2009 ～ 2011年生产的注射用A型肉毒毒素原液的比活性进行分析.方法 对BTXA收获物样品进行阴离子交换层析,分离毒素复合体各组分；采用血凝试验、HPLC法、SDS-PAGE、等点聚焦电泳及N-末端氨基酸测序等方法分析A型肉毒毒素复合体及其各组分的性质；统计2009 ～ 2011年连续生产的注射用A型肉毒毒素原液的比活性数据,分析连续生产的工艺稳定性和质量重现性.结果 BTXA收获物样品在碱性条件下可被解离,解离出的A型肉毒神经毒素相对分子质量约为150 000,无血凝效价；BTXA的API为完整的单体,纯度均在99.5％以上；复合物和神经毒素的等电点分别为4.97、4.91,N-末端氨基酸测序结果与GenBank基本一致；在连续3年的生产过程中,原液比活性平均为3.0×107 LD50/mg蛋白,BTXA成品中API载量约为5 ng/瓶.结论 注射用A型肉毒毒素的活性成分是特异的复合体结构,可在碱性条件下解离出A型肉毒神经毒素；BTXA原液的比活性在连续3年的生产中持续稳定,具备很好的连续性,为临床使用的安全性提供依据.
作者：何星；苗承辉；李小娟；王云天；梁琪；张雪平；王荫椿 刊期： 2012年第11期
目的 构建大容量、多样性的人源核糖体展示(Ribosome display,RD)单链抗体(Singe chain Fv segment,scFv)库.方法 收集20名健康献血者的新鲜外周血,分离淋巴细胞,提取细胞总RNA；设计兼并引物,利用RT-PCR分别扩增人抗体的VH-linker、Vκ、Vλ及Cκ基因；采用重叠PCR(SOE-PCR)技术,构建VH-linker-Vκ和VH-linker-Vλ-Cκ单链抗体库；将VH-linker-Vκ和VH-linker-Vλ-Cκ等量混合后,与pMD19-T载体连接,并转化感受态E.coli DH5α,对所构建的scFv库进行菌落PCR和测序分析.结果 构建的核糖体展示单链抗体库重组率较高,转化产物经菌落PCR鉴定,均可见约1 000 bp的scFv基因片段,库容量为2.06×1013.经分析该抗体库单链抗体序列均完整,内部无终止密码子,可变区序列无一重复,多样性良好,均具有完整的体外核糖体展示框架.结论 已成功构建了大容量、多样性好的人源核糖体展示单链抗体库,为进一步筛选高特异性、高亲和力的人源抗体奠定了基础.
作者：刘彬；李长青；林芳昭；肖薇；赵睿；肖小璞 刊期： 2012年第11期
我国自2001年开始逐步实行生物制品批签发,至2006年1月1日将所有预防用疫苗、血液制品及用于血源筛查的体外诊断试剂纳入批签发.生物制品的批签发工作包括对每批制品的资料审核和样品的检验.批签发的实施保证了生物制品的质量[1-2].
作者：刘欣玉；张洁；贾丽丽；董关木；俞永新；徐苗；沈琦 刊期： 2012年第11期
目的 探讨酶法处理短棒状杆菌(Enzyme-digested Corynebacterium parvum product,ECPP)对荷瘤鼠脾淋巴细胞免疫功能的影响.方法 将NIH小鼠随机分为5组:生理盐水对照组(NS)、荷瘤对照组(CK)、阳性对照组(CPP)、低剂量ECPP组(ECPPⅠ,500 μg/ml ECPP)和高剂量ECPP组(ECPPⅡ,1 000 μg/ml ECPP).除NS组经腹腔注射0.2 ml 0.9％ NaCl外,其他4组小鼠均经腹腔注射0.2ml艾氏腹水瘤(Ehrlich ascites carcinoma,EAC)细胞悬液(5.0×106个/ml),接种次日,每组小鼠腹腔注射相应药物(注射体积均为0.25 ml),每次间隔1d,连续5次,停药次日,颈椎脱臼处死小鼠,检测腹水量；3H-TdR法检测脾淋巴细胞转化能力；流式细胞术分析T淋巴细胞亚群及NK细胞活性；RT-PCR检测脾淋巴细胞中IFNγ、TNF-α基因mRNA的转录水平.结果 与CK组相比,各给药组均能明显降低小鼠腹水量(P＜0.01),CPP组和ECPPⅡ组间差异无统计学意义(P＞0.05),ECPPⅡ组降低腹水的能力明显高于ECPPⅠ组(P＜0.01)；与NS、CK及ECPPⅠ组相比,ECPPⅡ组可明显提高T、B淋巴细胞的转化能力,增加脾CD4+、CD8+及NK细胞数量(P＜0.01),而与CPP组比较,差异无统计学意义(P＞0.05)；与NS、CK和ECPP Ⅰ组比较,ECPPⅡ组IFNγ、TNF-α基因mRNA转录水平明显提高(P＜0.01),与CPP组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 ECPP能显著提高荷瘤鼠脾细胞的免疫功能.
作者：曹芳；杜瑞林；郭立君 刊期： 2012年第11期
目的 对1例献血者血型血清学鉴定为A2B血样进行基因型分析.方法 应用常规血型血清学方法进行血型鉴定；采用PCR-SSP法进行ABO初步基因分型的检测,并对ABO基因第6和第7外显子的核苷酸序列进行扩增、测序和分析.结果 血型血清学鉴定为A2B亚型,基因分型为BB型,初步判定为B(A)型；基因测序发现两条等位基因第6外显子均不存在261delG及297 G/G,判定该献血者血型为B与B基因的组合,经与A101核苷酸序列比对,对第7外显子的核苷酸序列分析发现,有一条核苷酸链上有526C＞G,657C＞T、703G＞A及803G＞C点突变,另一条核苷酸链上有297A＞G、526C＞G、657C＞T、703G＞A、796C＞A、803G＞C及930G＞A点突变,确定该献血者血型基因型为CisAB02/B101.结论 血型血清学对CisAB和B(A)判定有一定的局限性,通过核苷酸序列及分析能够明确本例献血者基因型为CisAB02/B101.
作者：何子毅；刘赴平；胡应明；邹文涛 刊期： 2012年第11期
目的 研究忍冬水提物对卵清蛋白(Ovalbumin,OVA)致敏小鼠的疗效.方法 建立OVA致敏小鼠模型,将OVA致敏BALB/c小鼠随机分为5组,即忍冬水提物高浓度组(H组)、中浓度组(M组)、低浓度组(L组)、模型对照组(CH组)及阴性对照组(NS组)；采用小鼠足垫肿胀试验检测迟发型超敏反应；甲苯胺蓝及HE染色观察小鼠肠系膜、空肠肥大细胞及空肠绒毛上皮细胞形态；ELISA法检测小鼠血清OVA特异性IgE及IgG1、小肠黏液总IgA及OVA特异性IgA水平.结果 OVA致敏小鼠出现急性腹泻；致敏小鼠经足垫皮内激发,出现迟发型超敏反应；致敏小鼠肠系膜及空肠肥大细胞聚集、胞质颗粒外泄及空肠绒毛炎症细胞浸润；小鼠血清OVA特异性IgE及小肠黏液OVA特异性IgA水平明显升高(P均＜0.01).经H、M组忍冬水提物灌胃后致敏小鼠的一般状态、腹泻情况及空肠炎症明显缓解；OVA介导的足垫肿胀反应明显减弱；小鼠血清OVA特异性IgE及小肠黏液OVA特异性IgA水平明显降低(P均＜0.01).结论 一定浓度忍冬水提物可有效缓解OVA致敏小鼠的速发型与迟发型超敏反应,其中高浓度金银花忍冬水提物效果较好.提示忍冬科植物中某些成分具有抗过敏作用.
作者：谢芸芸；黎海芪 刊期： 2012年第11期
目的 分析哈尔滨市2011年疑似预防接种异常反应(Adverse event following immunization,AEFI)的特征,评价AEFI监测系统运转情况.方法 对《疑似预防接种异常反应信息管理系统》报告的哈尔滨市2011年AEFI数据进行描述性分析.结果 2011年哈尔滨市共报告188例AEFI,以一般反应为主,占报告总数的86.7％；下半年报告的病例占全年总数的72.9％；年龄≤1岁和1岁＜年龄≤2岁组报告病例多,分别占总数的42.0％和36.2％；吸附无细胞百白破联合疫苗因接种针次多,AEFI发生数也多,占总数的49.5％；一般反应中,报告多的是发热、红肿、硬结,占85.1％.结论 哈尔滨市AEFI及时报告率、及时调查率、调查表及时上报率等监测指标均达到较高水平.今后应加强对基层人员的培训和督导检查,在乡级单位开展网络直报,进一步提高AEFI监测系统的敏感性和及时性.
作者：叶昕；闫滨；高士锐；马玉杰；薄芳；李岩；徐虹 刊期： 2012年第11期
目的 应用7.5L生物反应器,培养Vero细胞和乙型脑炎病毒,规模化生产乙型脑炎灭活疫苗.方法 应用7.5L生物反应器,分别以5、10、15、20、25 g/L的微载体密度加装,采用灌流方式培养Vero细胞,分别将P3株乙型脑炎病毒按0.005 00、0.002 50、0.001 60、0.001 25、0.001 00 MOI接种至生物反应器内,收获乙脑病毒液.经浓缩、灭活、纯化等工艺制备疫苗半成品,经疫苗灭活及纯化试验进行工艺验证,合格后分装为疫苗成品,按照《中国药典》三部(2010版)中《冻干乙型脑炎灭活疫苗(Vero细胞)》要求,进行疫苗全项检定.结果 当微载体密度为20、25 g/L时,细胞密度可达1.2× 107个/ml,病毒滴度平均达8.33 ～ 8.52 lgLD50/ml;当病毒接种量为0.001 25 MOI时,病毒高滴度可达9.02 lgLD50/ml.经超滤浓缩后的病毒原液,使用1∶4 000 β-丙内酯灭活72 h,可达到灭活效果；纯化后可去除90％以上杂蛋白.应用7.5L生物反应器生产的6批乙型脑炎灭活疫苗,经检定各项指标均符合国家要求.结论 应用7.5L生物反应器培养Vero细胞和P3株乙型脑炎病毒,经连续灌流收获,可规模化生产Vero细胞乙型脑炎灭活疫苗.
作者：周荔葆；殷建文；赵新；吴栩涛；廖辉；刘苗苗；曲格霆；甄祖刚；焦龙；吴琼 刊期： 2012年第11期
目的 观察H2O2对Apg-2与BCR/ABL蛋白亚细胞定位的影响.方法 用50μmol/LH2O2分别处理BaF3-BCR/ABL、BaF3-MIGR1及过表达Apg-2蛋白的BaF3-BCR/ABL细胞,激光共聚焦显微镜观察细胞内Apg-2、BCR/ABL蛋白的亚细胞定位变化.结果 Apg-2和BCR/~ABL蛋白在细胞中定位于胞浆,H2O2损伤可致Apg-2和BCR/ABL蛋白在BaF3-BCR/ABL细胞中发生核转位,Apg-2蛋白过表达可引起BCR/ABL蛋白核转位.结论 Apg-2蛋白在H2O2诱导的损伤后发生核转位,可能与BCR/ABL蛋白相互作用,保护H2O2诱导的细胞损伤.
作者：李春莉；刘钉宾；袁颖；陶崑；史梦；冯文莉 刊期： 2012年第11期
目的 采用正交试验法优化凝血酶原复合物(Prothrombin complex concentrate,PCC)的制备工艺.方法 取DEAE-Sephadex A-50凝胶平衡体系中的柠檬酸钠、氯化钠、pH值3因素,每因素取3水平设计正交试验；称取9等份DEAE-Sephadex A-50凝胶干粉,分别采用试验设计的平衡体系进行平衡；平衡后的凝胶分别与等量健康人去冷沉淀混合血浆混合,制备凝血酶原复合物浓缩物；测定浓缩物蛋白浓度及凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、X活性,获得4种凝血因子比活；通过正交试验直观分析及直接对比法确定较优及较差比活制备条件,对确定的条件进行验证；测定平衡体系电导率,分析正交试验中平衡体系电导率与4种凝血因子比活的相关性.结果 正交试验直观分析法与直接对比法确定的凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、X较优比活凝胶平衡条件一致:柠檬酸钠0.005 ～0.012 mol/L,氯化钠0.06 ～0.10 mol/L,pH 6.9～7.2;两种方法确定的较差平衡条件不同,分别为:柠檬酸钠0.012 ～0.02 mol/L、氯化钠0.1～0.14 mol/L,pH7.2～7.5及柠檬酸钠0.005 ～0.012 mol/L,氯化钠0.1～0.14 mol/L,pH7.2～7.5,经实验验证,两种方法确定的较优条件比活均优于较差条件,但两种较差条件中,直接对比法确定的条件更符合实际.平衡液电导率与4种凝血因子比活之间不存在线性关系,但在不同电导率条件下,4种凝血因子比活有较大波动,电导率9.67～10.34 ms/cm,4种凝血因子比活均较高；电导率12.16 ～ 12.90 ms/cm,4种凝血因子比活均较低.结论 正交试验可用于凝血酶原复合物制备工艺优化,但不同分析方法结果有一定差异.平衡体系电导率对凝血酶原复合物比活有一定影响,在工艺优化时应予注意.
作者：曹海军；叶生亮；王宗奎；张学俊；杜晞；刘彬；李志雄；狄姗姗；李长清 刊期： 2012年第11期
目的 观察森林脑炎灭活疫苗的接种反应和免疫效果.方法 对内蒙古和黑龙江2个观察区共3 134名志愿者接种森林脑炎灭活疫苗,观察接种后志愿者的局部和全身不良反应,采用森林脑炎病毒IgG抗体ELISA试剂盒检测免疫后血清抗体滴度,并计算抗体阳转率.结果 接种疫苗后,在整个观察期间,所有志愿者均未发生全身反应,局部反应仅4例,不良反应总体发生率为0.13％.内蒙古观察区志愿者免疫后血清抗体GMT在1∶83.2～1∶117.5之间,总体血清抗体阳转率达88.1％；黑龙江观察区志愿者血清抗体GMT在1∶71.2～1∶84.6之间,血清抗体阳转率为86.2％.2个观察区接种疫苗后总体GMT为1∶80.4,血清抗体阳转率为86.8％.结论 森林脑炎灭活疫苗接种反应轻微、免疫原性良好,可大规模推广应用.
作者：杜瑞林；宋宗明；刘国云；王伟；刘双军；张伟红；孙洪亮；李文娟；尹兵 刊期： 2012年第11期
目的 制备重组乙型肝炎疫苗(CHO细胞)冻干参考品,用于重组乙型肝炎疫苗(CHO细胞)的效力评价.方法 选取检定合格的重组乙型肝炎疫苗(CHO细胞)原液,经协作标定表面抗原蛋白含量后,加入氢氧化铝佐剂和冻于保护剂,冷冻干燥制备重组乙型肝炎疫苗(CHO细胞)冻干参考品,并按《中国药典》三部(2010版)要求进行各项检定.经10次独立试验测定冻干参考品小鼠效力,采用Reed-Münch计算ED50值；将冻干参考品置4℃(8周)、37℃(4和8周)后分别检测疫苗效力,分析其稳定性,依据Q10法进行效期推测；并对2个生产企业10批疫苗进行效力测定,分析其适用性.结果 制备的冻干参考品各项指标均符合规定,小鼠ED50均值为0.183μg,CV为50.5％；该CHO细胞效力冻干参考品蛋白含量定为20 μg/ml,规格为10 μg/0.5 ml;冻干保护剂、冻干工艺对乙型肝炎疫苗(CHO细胞)的效力影响较小,冻干参考品在37℃放置不同时间,效力变化不明显,表明冻干参考品稳定性较好,有效期约为7年；10批疫苗中,不合格率为10％,表明该参考品可用于乙型肝炎疫苗(CHO细胞)效力质控.结论 制备的冻干参考品可作为重组乙型肝炎疫苗(CHO细胞)效力检定的质控参考品.
作者：邱少辉；方鑫；何鹏；梁争论；张红霞；张卫婷；赵坤福；李德桂；周根喜；郭玉芬；钟熙；胡忠玉 刊期： 2012年第11期
目的 经紫外-亚硝基胍(NTG)复合诱变选育高产淀粉酶菌株.方法 以蜡状芽孢杆菌SWWL06(Bacillus cereus SWWL06)为出发菌株,分别经紫外、亚硝基胍(NTG)诱变原始菌株,获得佳诱变条件；经紫外-NTG复合诱变,所得突变菌株以透明圈与菌落直径比值大小进行初筛,再经摇瓶培养进行复筛,得高产淀粉酶突变株；连续传代,检测其遗传稳定性.结果 确定紫外波长254 nm,照射时间120 s,垂直照射距离20 cm为佳紫外诱变条件；NTG浓度为0.5 mg/ml,诱变时间40 min为佳NTG诱变条件；紫外-NTG复合诱变筛选出9株突变株,其中UV-NTG-3酶活力为3.515 U/ml,增幅高,较原始菌株SWWL06提高3.59倍；将UV-NTG-3连续传代10次,酶活性仍可达到第一代的97％.结论 已成功选育出1株高产淀粉酶菌株UV-NTG-3.
作者：李旭媛；王刚；费卓群；陈光 刊期： 2012年第11期
中国生物制品学杂志
主管:中华人民共和国卫生部
主办：中华预防医学会,长春生物制品研究所有限责任公司
