徐静；倪道明；张振龙
目的观察森林脑炎纯化疫苗接种反应和免疫效果.方法选择目标人群,并用原制疫苗作对照,观测疫苗注射后的反应,并采集疫苗免疫前后血清,用蚀斑减少法检测中和抗体,评价疫苗的免疫效果.结果森林脑炎纯化疫苗接种后无全身副反应,局部反应率仅为0.82%.血清中和抗体阳转率高于85%.结论森林脑炎纯化疫苗较原制同类疫苗反应轻微,而中和抗体阳转率明显高于原制疫苗,是现用原制灭活疫苗理想的替代产品.
作者：董关木；宋宗明；刘文雪；安祺；王晓理；王显军；韩亮；涛波；孔艳；杨立宏 刊期： 2005年第06期
目的获得序列正确的SENV-D亚型ORF1 C-端蛋白基因,并进行表达.方法用PCR法从SENV阳性血清中获得SENV-D ORF1 C-端基因,测序验证后,构建pQE30-SD重组表达质粒,并转化E.coli M15,进行IPTG诱导表达及Western blot分析.结果获得的SENV-D亚型ORF1 C-端蛋白基因序列正确,表达蛋白相对分子质量约为38000.经Western blot证实能与阳性血清发生抗原抗体反应.结论已成功获得了SENV-D ORF1 C-端蛋白,为今后进一步研究奠定了基础.
作者：陈蕤；穆士杰；杜娟；王全立 刊期： 2005年第06期
目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(Basic fibroblast growthfactor,bFGF)体外作用于骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)后,诱导其向神经元样细胞和多巴胺能神经元样细胞定向分化的情况.方法从鼠骨髓中获得MSCs,培养传代,用MTT法检测bFGF对骨髓MSCs生长的影响.10ng/ml bFGF作用2 d后,通过IBMX、细胞因子bFGF、GDNF、IL-1β、中脑神经胶质细胞条件培养基和中脑神经细胞膜碎片等分组联合诱导骨髓MSCs向神经元样细胞、多巴胺能神经元样细胞分化,免疫细胞化学方法鉴定特异标志NSE、MAP-2a,b和TH的表达.结果在一定范围内,bFGF对骨髓MSCs具有明显的促增殖作用.分化的神经元样细胞表达NSE、MAP-2a,b和TH,联合应用GDNF、IL-1β、中脑条件培养基和中脑神经细胞膜碎片诱导7 d后,NSE阳性率为(27.774±2.747)%,MAP-2a,b为(28.006±3.080)%,TH为(3.098±0.352)%.结论体外骨髓MSCs被诱导分化成神经元样细胞和多巴胺能神经元样细胞,为帕金森等中枢神经系统疾病的细胞移植治疗奠定了基础.
作者：郭丽；尹飞；王欣；凌翎；呼和塔娜；李鹏；段德生；范洪学 刊期： 2005年第06期
目的制备甲型肝炎病毒抗原定量参比品.方法依据<甲型肝炎灭活疫苗制造及检定规程>制备了1批甲肝病毒抗原参比品,并进行蛋白质含量测定、HAV蛋白纯度分析和酶标抗原含量标化.结果经纯化,杂蛋白去除率达99.9%,参比品的纯度大于95%;抗原含量在20～80EU/ml范围内,抗原含量的对数与其A值呈剂量-效应关系.结论该参比品可用于甲肝病毒ELISA定性及定量标定.
作者：刘建生；庞伟；孟明耀；马进；王萍；杨丽仙；陈统球；侯宗柳 刊期： 2005年第06期
目的研究聚乙二醇(PEG)修饰重组人干扰素-β(rhIFN-β)的免疫原性和药物代谢动力学性质.方法按照rhIFN-β的临床治疗程序免疫家兔,分别用ELISA方法和中和实验法检测家兔血清中的抗体水平;给家兔单剂量注射rhIFN-β及其3种修饰物,建立ELISA双抗体夹心法,检测血清中样品浓度.结果 3种修饰物在家兔体内诱导产生的抗体水平均明显低于rhIFN-β诱导产生的抗体水平,半衰期分别较原来提高5.927倍、14.204倍和14.708倍.结论 PEG修饰rhIFN-β可明显降低其免疫原性,改善了rhIFN-β的药物代谢动力学性质.
作者：徐静；倪道明；张振龙 刊期： 2005年第06期
目的观察重组中国莱姆病螺旋体Borrelia garinii基因型外膜蛋白A(rOspA)的动物免疫效果.方法采用纯化的rOspA作抗原,以新西兰家兔、绵羊和犬为试验动物,分不同剂量组和对照组进行免疫,用间接免疫荧光法(IFA)检测其血清特异性抗体(IgG),并进行体外中和试验.结果用rOspA免疫新西兰家兔、绵羊和犬后,其血清抗体(IgG)效价较免疫前均显著升高,其几何平均滴度为1:169,体外中和试验表明,每毫升兔抗rOspA血清可杀灭1.0×105个莱姆病螺旋体;绵羊和犬的抗rOspA血清杀菌能力因免疫剂量的不同而不同,每毫升绵羊和犬抗rOspA血清高可杀灭1.0×106个莱姆病螺旋体.结论rOspA有较好的免疫原性,可作为中国莱姆病rOspA亚单位疫苗的一种有效成分.
作者：郝琴；何召庆；郭振梅；侯学霞；耿震；胡桂兰；万康林 刊期： 2005年第06期
目的制备重组人干扰素-βSer17(rhIFN-βSer17),并检测其对SARS病毒的抑制作用.方法通过发酵收集菌体,经高压匀浆破碎收集包涵体、有机溶剂抽提、酸沉淀、柱层析纯化重组蛋白,通过细胞病变抑制法检测其对SARS病毒的抑制作用.结果研制的rhIFN-βSer17的纯度超过95%,比活性超过2.0×107 IU/mg蛋白,在体外对SARS病毒具有明显的抑制作用.结论已成功制备rhIFN-β Ser17,并在体外对SARS病毒具有抑制作用.
作者：张振龙；刘建源；杨云凯；邓宛明；崔春青；王淑芳；汤燕文；赵建英 刊期： 2005年第06期
目的检测RFP(Ret finger protein)蛋白在人正常组织及人癌组织中的分布.方法采用实时荧光定量PCR方法,以18SrRNA为内对照,检测RFP在人正常组织及人癌组织中的表达水平.结果 RFP表达水平子宫颈鳞状细胞癌组织高于正常子宫颈组织,子宫内膜腺癌组织高于正常子宫内膜组织,胃腺癌组织高于正常胃组织,食管鳞状细胞癌组织高于正常食管组织,而子宫内膜腺癌组织高于子宫颈鳞状细胞癌组织,胃腺癌组织高于食管鳞状细胞癌组织,脑癌组织高于正常脑组织.结论RFP可能成为治疗恶性肿瘤的一个潜在的分子靶点.
作者：张静敏；金宁一；连海；管国芳；李宵；安汝国；高桥雅英 刊期： 2005年第06期
献血者,男,39岁,在我站献血过程中,因其红细胞与抗-A、抗-B均不凝集,但血清凝集A、B、O红细胞,经进一步血清学检测和基因分析,确定为类孟买型ABhm,现报道如下.
作者：刘芳兰；王振卿；周海江 刊期： 2005年第06期
目的研究静压力对CHO细胞系DR1000L4N表达hGM-CSF的影响.方法应用25cm2T形瓶,装入5.0ml培养基,接种2.4×105cells/ml,在37℃、5%CO2孵箱中培养24h后,移入压力器中加压培养(0.1～0.9 Mpa),并分别检测细胞浓度和hGM-CSF的表达.结果当静压力从0.15 MPa升到0.9 MPa时,细胞的比生长速度几乎不受影响,而hGM-CSF的表达量从1.23×10-13 mg/cell·h提高到1.62×10-13 mg/cell·h.结论静压力可提高CHO细胞对hGM-CSF的表达.
作者：于玉根；傅水林；宫衡；高木睦 刊期： 2005年第06期
目的探讨生物可降解材料聚乳酸-聚乙醇酸-聚乙二醇(PLGA-PEG)与血管平滑肌的细胞相容性,为可降解血管支架材料的研究提供依据.方法采用体外培养的兔血管平滑肌细胞种植在PLGA-PEG膜片上,用相差显微镜观察细胞的生长情况,每天计数,绘制细胞生长曲线,用MTT法测定细胞增殖指数,流式细胞仪检测细胞周期分布.结果兔血管平滑肌细胞在PLGA-PEG膜片上生长良好,与对照组差异无显著意义;MTT法检测细胞增殖指数,与对照组差异无显著意义;流式细胞仪检测细胞周期显示对细胞增殖活性无明显影响.结论 PLGA-PEG与兔血管平滑肌细胞具有良好的细胞相容性,可以用于可降解血管支架的制备.
作者：邢玥；李淑梅；张基昌；景瑕斌；迟宝荣；徐效义 刊期： 2005年第06期
目的研究在KMB17细胞中培养脊髓灰质炎减毒活疫苗病毒及其用于生产疫苗的可行性.方法应用悬浮吸附和添加血清的方法,在KMB17细胞上培养Sabin Ⅰ、Ⅱ、中Ⅲ2型病毒,用微量法检测病毒滴度.结果在悬浮吸附加10%血清培养条件下,Sabin Ⅰ滴度可达8.125 LgCCID50,SabinⅡ滴度可达7.5 LgCCID50,中Ⅲ2滴度可达7.583 LgCCID50.与传统的猴肾原代细胞培养的病毒滴度比较,差异无显著意义(P＞0.05).结论可进一步研究应用KMB17细胞进行疫苗生产.
作者：胡凝珠；王荣福；瞿素；刘国栋；姬秋彦；胡云章 刊期： 2005年第06期
治疗性疫苗的用途主要是诱导抗原特异性T细胞反应,增强保护性细胞免疫应答.本文就各类治疗性疫苗的特点、应用情况、存在问题及研究趋势等做了全面综述.
作者：闫东梅；朱迅 刊期： 2005年第06期
1.临床资料患者,罗××,男,56岁.2004年3月27日消化道出血.查体:体温36.1℃,脉搏60次/min,呼吸18次/min,血压10.74/4.86 kPa.化验检查:RBC 1.82×1012 cells/L,Hb54g/L,WBC 4.5×109cells/L,总胆红素40.2 μmol/L,直接胆红素25.3μmol/L.临床诊断:消化道出血,伴有自身免疫溶血性贫血(AIHA).为纠正贫血需输血治疗,医院与数名献血者交叉配血,主次侧均出现凝集,送本站鉴定及交叉配血.
作者：胡继征 刊期： 2005年第06期
目的建立钩端螺旋体疫苗鉴别试验方法,制备系列免疫血清作为国家参考品.方法应用疫苗生产用菌株免疫家兔,制成免疫血清,冻干后进行标定,并经上海生物制品研究所和武汉生物制品研究所两单位采用试管凝集试验进行验证.结果冻干参考品血清效价符合要求,协作标定14批钩端螺旋体疫苗,结果一致.结论所制备的冻干参考品合格.钩端螺旋体疫苗鉴别采用试管凝集试验是可行的.
作者：辛晓芳；秦进才；王国柱；薄淑英；张谨；王国治 刊期： 2005年第06期
目的研制敏感、特异的人类免疫缺陷病毒Ⅰ+Ⅱ型(HIV Ⅰ+Ⅱ)化学发光免疫试剂盒.方法采用碱性磷酶标记重组gp120、gp41和合成肽gp6抗原,金刚烷胺增敏化学发光体系作为酶底物,采用ELISA双抗原夹心法检测.结果敏感度为0.1 ncu;检测范围为0.1～100 ncu;HIV浓度为0.5、1.2、5.1、19.8 ncu时,批内变异系数3%～8%(n=20),批间变异系数5%～9%(n=20);与anti-HAV、anti-HBV、anti-HCV、anti-HEV无交叉反应;具有良好的稳定性,在1年的效期内(4℃保存)其整体变化幅度＜10%.结论该试剂盒灵敏度高,特异性好,稳定性强,检测范围宽,有良好的准确性和重复性.
作者：买制刚；杨青；李振勇；李建军；屈凌波 刊期： 2005年第06期
目的制备抗百日咳丝状血凝素(FHA)的单克隆抗体,并建立特异、准确的FHA定量检测方法.方法采用杂交瘤技术制备McAb,以ELISA间接法筛选稳定分泌抗FHA-McAb的杂交瘤细胞株,并进行系统的鉴定和纯化,建立定量检测FHA的ELISA 方法.结果获得6株分泌抗FHA-McAb的杂交瘤细胞株,抗体类别均为IgG1(κ),效价达1:105～1:1:106,并能特异性识别FHA,与流感病毒血凝素及百日咳毒素无交叉反应,应用ELISA检测FHA的灵敏度为1.04μg/L,批内变异系数为5.49%,批间变异系数为9.31%,平均回收率为94.18%.结论已成功制备了抗FHA-McA,建立了一种特异、准确地定量检测FHA的ELISA方法,可用于无细胞百日咳疫苗原液中FHA含量的检测,为该疫苗的质量控制提供了有力的手段.
作者：徐颖华；孟淑芳；张庶民；侯启明；雷殿良 刊期： 2005年第06期
目的研制A+C群脑膜炎球菌多糖-破伤风类毒素结合疫苗.方法 A群和C群脑膜炎球菌多糖在溴化氰(CNBr)的活化下,以1,6己二酰肼(ADH)作为连接子,与精制破伤风类毒素(TT)在碳二亚胺(EDAC)作用下结合,再按一定的比例将两者混合,制成A+C群脑膜炎球菌多糖结合疫苗原液,加保护剂冻干后,制成A+C群脑膜炎球菌多糖结合疫苗.结果经检定,A+C群脑膜炎球菌多糖结合疫苗各项指标均达到了质控标准.该疫苗安全性及免疫原性良好.结论已成功研制出冻干A+C群脑膜炎球菌多糖结合疫苗,该制备工艺是可行的.
作者：黄镇；钱雯；袁琳；施競；陈燕；陈南萍；周红军；李文春；杨美峰；刘红岩 刊期： 2005年第06期
目的建立乙肝病毒表面抗原(HBsAg)的人参细胞表达系统.方法构建含有HBsAg基因的植物细胞表达载体质粒pBIBSb.采用农杆菌感染人参细胞的方法,经农杆菌培养、农杆菌与受体细胞共培养、受体细胞的脱菌培养以及转化体细胞的选择培养后,筛选在G418抗生素培养基上正常生长的细胞株.应用ELISA方法检测抗性细胞株的HBsAg表达;提取基因组DNA进行PCR扩增反应.结果质粒pBIBSb的酶切结果正确.经G418抗生素筛选得到8株正常生长的细胞株,其中5株能够表达HBsAg,提取基因组DNA进行PCR扩增反应,得到大小约700bp的扩增片段.结论获得了整合HBsAg基因,并能够稳定表达HBsAg的人参细胞表达系统.
作者：刘丹；盛军；刘晓宇；于海鹏；王志武；李娟；姚为民；杨贵贞 刊期： 2005年第06期
传染性法氏囊病毒感染主要采用疫苗进行预防.近年来由于变异毒株不断出现,给疫病预防带来困难,因此:人们积极投向基因工程疫苗的研究.本文综述了基因工程疫苗的研究进展.
作者：赵怀龙；贾世玉；陈如明 刊期： 2005年第06期
中国生物制品学杂志
主管:中华人民共和国卫生部
主办：中华预防医学会,长春生物制品研究所有限责任公司
