林莉；徐俊华；丁贞英；姜唯声；王长喜
目的了解张家口地区医院病人弓形虫感染情况，为临床提供一定的参考价值。方法采用间接红细胞凝集试验对583例住院病人进行弓形虫抗体检测。结果张家口地区医院病人弓形虫抗体阳性率10.12％。其中男性11.01％，女性9.06％，不同类型疾病弓形虫抗体阳性率明显不同，以系统性红斑狼疮、肿瘤患者较高，分别为27.27％，16.92％。结论张家口地区医院病人弓形虫抗体阳性率(10.12％)高于全国正常人群弓形虫抗体阳性率(5.17％)，不同类型疾病间阳性率明显不同，其中以系统性红斑狼疮、肿瘤患者较高。提示来医院就诊病人中可能有弓形虫病患者，免疫功能低下或受抑制患者易感染弓形虫病。
作者：卢致民；张振明；王春清 刊期： 2000年第06期
于1999年9月17-20日对内蒙古自治区呼伦贝尔盟鄂伦春自治旗大杨树镇的3个自然村(富饶对、新华村、前进村)的居民区和田野进行了肾综合征出血热(HFRS)疫源地性质调查。通过现场调查和血清学检测，结果表明黑线姬鼠为该地区汉坦病毒主要宿主动物，其占捕获鼠类构成71.23％(151／212)；捕获动物的总密度为28.30％(212／749)，其中黑线姬鼠的密度为20.16％(151／749)；捕获动物总感染率为9.78％(40／409)，黑线姬鼠的感染率为7.09％(29／409)，占感染鼠总数的72.50％(29/40)，带病毒率为11.90％(18／151)。褐家鼠占鼠种构成的8.49％，其密度为2.40％，带病毒率为16.70％，感染率为0.90％。结果表明，大杨树地区的疫源地性质是黑线姬鼠为主要宿主动物的肾综合征出血热自然疫源地，目前已演变为姬鼠型为主的混合型疫区。
作者：唐浏英；陈化新；邹学义；罗成旺；余陶；董俊杰；康凤春；赵林英 刊期： 2000年第06期
目的观察分析弓形虫表面抗原P22编码基因真核表达质粒(pBK／P22)接种小鼠诱导的细胞免疫效果。方法采用肌肉注射免疫接种BALB／c小鼠，5周后，取鼠脾细胞作ConA刺激淋转试验(MTT法)及T细胞亚群的测定。结果 MTT试验中，pBK／P22免疫组、空质粒pBK-CMV对照组与NS对照组的ConA孔的光密度值与不加ConA孔的光密度值的差值疫苗免疫组略高于二对照组，统计学分析无明显差异(P＞0.05)；CD+4细胞数量变化无显著性差异(P＞0.05)，而CD+8细胞数量则明显增多，pBK/P22免疫组、空质粒pBK-CMV均高于NS对照组，其差异有显著性(P＜0.01)；pBK／P22免疫组与空质粒组间无显著性差异(P＞0.05)。结论 pBK／P22对ConA刺激的淋巴细胞增殖功能作用不明显；T淋巴细胞亚群测定结果表明，pBK／P22免疫后小鼠CD+4淋巴细胞增殖不明显，而CD+8淋巴细胞则显著增殖。
作者：高世同；吴少庭；林敏；占国清；郑春福 刊期： 2000年第06期
目的构建抗华支睾吸虫噬菌体抗体库，以期筛选出抗循环抗原的抗体组合。方法应用噬菌体表面呈现技术，从感染华支睾吸虫病人淋巴细胞中提取总RNA，逆转录成cDNA后，用相应引物PCR扩增出重链Fd和轻链基因，经Xho I和Spel、Sac I和Xba I双酶切，先后克隆入噬粒载体pComb3，再电转化大肠杆菌XL1-blue菌株，辅助噬菌体VCSM13超感染。结果从感染华支睾吸虫病人淋巴细胞中扩增出约700bp重链γ1、γ3Fd段和轻链κ、λ基因，分别和pComb3连接后成功导入XL1-blue，得到滴度为7.5×1010cfu／ml，库容量为5.6×106噬菌体抗体库。结论抗华支睾吸虫Fab段噬菌体抗体库的构建，为进一步筛选抗华支睾吸虫循环抗原单克隆抗体奠定了基础。
作者：俞慕华；陈代雄；王轶；何蔼；梁瑜；黎宝玲；潘恩信；詹希美 刊期： 2000年第06期
RNA催化的切割反应自1981年〔1〕起陆续有人报告。后来将此类具有催化能力的核糖核酸称为核酶(ribozyrne)，并先后发现了第一型内含子，第二型内含子，RNase P，发卡式核酶(HP)，锤头状核酶(HH)，D型肝炎核酶(斧头状核酶)等种类。 锤头状核酶的结构模型是1987年Symons等〔2〕在研究、比较了多种植物病原体RNA自催化切割反应活性区域的核苷酸序列后提出的。Haseloff等〔3〕在此基础上合成了能有效切割氯霉素乙酰基转移酶(CAT)转录本的锤头状核酶，实现了核酶的人工合成。这为将核酶技术用于抑制和阻断有害基因的表达打下了坚实的理论基础。
作者：刘建伟；林立辉；赵文忠；方美玉 刊期： 2000年第06期
目的提取黄果茄植物灭螺有效成份并观察其灭螺效果。方法利用有机溶剂对黄果茄植物果实提取并获得原粉；经电子轰击质谱(EI-MS)测定分子量；采用浸杀法、喷洒法和喷粉法观察黄果茄植物灭螺有效成份的灭螺效果。结果黄果茄灭螺有效成份的分子量为722。湖北钉螺在4.3200mg／L浓度中，室温25C±1C条件下，浸泡24h、48h的死亡率分别是96.7％、100％；其24h、48h、72h的LC50分别为0.621、0.332、0.181mg／L。结论黄果茄原粉为一种新的植物提取物，对湖北钉螺有较好的杀灭效果。
作者：魏风华；徐兴建；刘建兵；戴裕海；杨先祥；李文新；赵利琴；盛桂莲 刊期： 2000年第06期
目的探讨pDL121的1.0kb017株问号赖型钩端螺旋体DNA片段可否作为钩体重组疫苗广谱保护性抗原的候选。方法采用SDS-PAGE制备23kDa蛋白，免疫日本大耳兔制备抗23kDa抗血清，Western blot鉴定其免疫原性。结果 23kDa重组抗原兔抗血清可识别pDL121体外表达23kDa抗原产物和问号赖型钩端螺旋体017株超声抗原成份；用Westem blot鉴定抗血清效价，其抗体滴度为1／12800；用pDL121重组质粒主动免疫豚鼠，可使豚鼠抵抗强毒力株钩端螺旋体攻击，表现出免疫保护作用。结论该重组23kDa抗原有良好的免疫原性，可能是赖型钩体017株的保护性抗原。
作者：刘洪斌；戴保民；李胜富；方之茂；章涛 刊期： 2000年第06期
目前，国内用于鼠疫的血清学诊断技术种类繁多，各鼠疫疫源地大多采用WHO推荐的被动血凝(PHA)试验方法去监测动物间鼠疫流行动态和状况。这一技术的应用，对我国新疫源地的发现、鼠疫流行病学调查、鼠疫动物病的监测以及鼠疫病人的诊断和追溯诊断等曾起到重要作用。但是，在实践中亦发现该方法假阳性率较高，其敏感性远不及放射免疫沉淀试验。在鼠疫动物病处于静息状态或动物病流行强度较弱的地区及我国南方家鼠疫源地或历史疫源地中，由于染疫动物血清中抗体滴度较低，用PHA难以查到阳性结果，故选择一种较为敏感的方法显得十分必要。
作者：谢辉；李敏 刊期： 2000年第06期
目的扩增日本血吸虫26kDa谷胱甘肽S-转移酶(Sj26GST)基因片段，构建其重组真核表达载体，以研制SjGST核酸疫苗。方法根据已知基因序列设计一对引物，运用RT-PCR技术扩增Sj26GST目的基因片段，将其克隆到pcD-NA3质粒中，并经酶切、PCR鉴定，测序证实。结果获得GST-pcDNA3重组克隆。结论：本实验获得Sj26GST重组克隆，为进一步研制核酸疫苗创造了条件。
作者：李焱；余新炳；WU Zhongdao；吴忠道；冯新港；周俊梅；郑亦男 刊期： 2000年第06期
目的为研究人微小病毒B19在广东地区母婴及异常胎儿和新生儿中的感染状况。方法应用PCR方法检测700份孕妇外周血和新生儿脐血，PCR结合限制性内切酶分析以及原位杂交检测24份异常胎儿和新生儿组织。结果孕妇和胎儿血清中B19病毒的检出率分别为1.14％(4／350)和0.28％(1／350);17例异常胎儿和7例新生儿中，分别有5份胎儿和3份新生儿组织PCR结果阳性。PCR产物经限制性内切酶HaeI酶切分析，证实为PVB19特异的DNA片段。用原位杂交的方法，在部分异常胎儿的脑或脾组织小血管内或周围的原始红细胞核中检测到DNA阳性颗粒。结论广东地区孕妇B19病毒的感染可引起母婴传播，并可能对胎儿造成一定的危害，但其感染率很低。在评估B19病毒感染时，应有可靠方法区分现症感染和既往感染。
作者：曹虹；张文炳；王香云；钟梅 刊期： 2000年第06期
目的探讨吡喹酮治疗对日本血吸虫病患者血清抗幽门螺杆菌HpIgG水平的影响。方法利用Hp全菌抗原对流行区94例日本血吸虫病人治疗前后血清抗HpIgG进行检测。结果治疗后3、6个月，Hp感染阳性率分别为73.4％和70.2％(治疗前为75.5％)，HpIgG抗体水平分别为0.71±0.30和0.65±0.21(治疗前为0.80±0.23)，对照组均有轻度升高。各年龄组Hp感染阳性率和血清HpIgG水平均随治疗进展而降低，其中0～20岁年龄组血清HpIgG下降快。血清抗HpIgG和同期对应的日本血吸虫31／32kDa(Sj31／32)IgG抗体平均水平及阴转值之间高度相关(治疗后3个月r分别为0.85和0.65，治疗后6个月r分别为0.85和0.50)。结论日本血吸虫病人经吡喹酮治疗后Hp感染阳性率及血清HpIgG水平降低，日本血吸虫与Hp感染高度相关，血吸虫可能作为Hp感染的危险因素之一。
作者：沈定文；罗金萍；陈喜；彭胜国；王松茂；陈爱山 刊期： 2000年第06期
1 中国血吸虫病流行及防治概况 中国血吸虫病流行于长江流域及其以南的12个省市自治区的407个县市中。据1956～1958年调查推算，全国约有1亿人口受血吸虫病威胁，有1200万感染者，有病牛120万头，钉螺分布面积达148亿m2。中国台湾省流行的血吸虫为动物株，不感染人，故未列为日本血吸虫的流行区〔1〕。 经过近50年的防治，广东、上海、福建、广西、浙江5个省市区已阻断了血吸虫病的传播。尚未控制流行的为湖南、湖北、江西、安徽、江苏湖区5省和四川、云南山区2省。在409个流行县市中现已有238个阻断了传播，有56个县市控制了传播，尚未控制流行的县市为115个〔2〕。据1995年全国血吸虫病抽样调查推算，全国尚有86.5万病人，10万头病牛，有35亿m2面积的钉螺〔3〕。在中国湖沼和高原山区，动物传染源在流行中起着主要的作用。2 血吸虫动物宿主的分布 据报告，中国血吸虫宿主除人外，尚有7个目28属42种哺乳动物〔1,24〕，以家畜为主要传染源。
作者：郑江；郭家钢 刊期： 2000年第06期
恙虫病是危害人民健康的自然疫源性疾病。闽东沿海60年代有恙虫病流行，1964年霞浦县就报告44例。80年代我们对其流行情况和媒介宿主进行初步调查。为了进一步探索其流行趋势，为今后防治提供科学依据。1997～1998年又进行较深入的调查，现将结果报告如下。1 调查方法 搜集地方和部队医疗单位恙虫病疫情。抽取农村健康青年血清，检测恙虫病抗体水平。在调查地点用铁丝捕鼠笼，黄昏布，清晨收。每日捕获活鼠，处死后收集血清检测恙虫病抗体及检集鼠体上的恙螨，进行分类、鉴定、计数、登记。恙螨检测恙虫病病原体。 血清学和病原学由福建省卫生防疫站协助完成。2 结果和讨论2.1 人群监测2.1.1 近年共发现恙虫病11例，其中1996、1997、1998、1999年各3、4、3、1例，均在夏秋季节。霞浦10例(其中海岛9例)、宁德1例；部队战士8例、农民3例。
作者：袁高林；郑祖针；陈文锦；李翔莺；李方平 刊期： 2000年第06期
目的为探察伯氏疟原虫氯喹抗性株(RC株)和敏感株(N株)的遗传学差异。方法先维持对RC株连续大剂量氯喹治疗(50mg／(kg·d)，再通过简化逆转录差示多聚酶链反应技术(sDDRT-PCR)寻找RC株和N株疟原虫cDNA差异片段并对所产生的可疑差异片段进行反复的DNA回收和PCR鉴定，然后选其肯定的差异片段(N25和R25)作克隆测序和序列分析及同源性检索。结果尽管差异片段N25和R25的克隆分子N252和R251的DNA序列相同性为99.8％，但由于多点突变导致它们的编码氨基酸及其模拟二级结构出现很大差异。BLAST(2.06)检索未能在基因库中发现与R251和N252相似的基因序列，不过它们的部分核苷酸序列(从128nt到189nt)与褐鼠磷脂酶BmRNA部分序列(从1053nt到1114nt)具有高度同源性：在R251和N252分别为93.5％和91.9％。结论简化的差示PCR技术结合差异片段的反复验证和序列分析可用于氯喹抗性相关基因的分离。
作者：严继舟；宋关鸿 刊期： 2000年第06期
目的评价基因扩增法应用于检测鼠类标本调查恙虫病疫源地的作用。方法用一定量恙虫病东方体人工感染昆明种小鼠，攻击后第3、6、9天处死小鼠取血块及脾脏用特异性套式PCR技术进行恙虫病东方体DNA的检测，再用该技术测定现场采集的鼠类标本，以可从标本中扩增出一段长88bp的DNA片段作为实验或现场捕获鼠感染了恙虫病东方体的指标，继而估计该地区是否存在恙虫病疫源地。结果实验感染恙虫病东方体3天时在两类标本中均不能检出该病原DNA，而第6天测定时均可发现含有恙虫病东方体；从福建闽西北地区采集的111份鼠类脾脏中检出1份阳性标本，另从江西送检的29份野鼠血块中也检出1份阳性标本，说明采集标本区域已成为恙虫病疫源地。结论套式PCR扩增技术具有很好的特异性和敏感性，可用于现场鼠类标本的恙虫病病原学的调查。
作者：严延生；陈亮；何似；于恩庶 刊期： 2000年第06期
目的以昆明小鼠作实验动物模型，探讨猪囊虫病基因工程疫苗的免疫效果。方法 78只昆明小鼠随机分为3组，第一组用猪囊虫病基因工程疫苗免疫1次，每二组免疫2次，第三组不免疫。第一次免疫后20d各小鼠经尾静脉感染已孵化的有活力的六钩蚴，63d后剖检小鼠检查有无囊虫.并观察虫体的活力。用免疫学方法检测血清中囊虫抗原和抗体，以监测疫苗的免疫反应及虫体寄生状况。结果所有免疫小鼠均未出现不良反应；免疫7d后部分免疫小鼠可检测到囊虫抗体，免疫后21d所有免疫小鼠的囊虫抗体均呈阳性。未免疫的第三组各小鼠均检出囊虫，共65个，主要寄生在胸腔；第一组和第二组分别有2只和1只小鼠检出囊虫，分别为2个和1个，保护率分别为96.9％和98.4％。CA检测结果与剖检结果一致，检出囊虫的小鼠，其CA均呈阳性。结论用小鼠动物模型可进行猪囊虫病免疫预防试验，猪囊虫病基因工程疫苗安全性好，免疫效力高。
作者：唐雨德；顾志香；刘玉；郁兴明 刊期： 2000年第06期
庚型肝炎病毒(GBV-C／HGV)是近年来新发现的一种新型肝炎病毒，其基因组为单股正链的RNA病毒，主要经血传播，可致急、慢性肝炎和无症状病毒携带状态[1]。GBV-C／HGV感染呈全球分布，我国GBV-C／HGV感染分布较广，流行较为严重[2]。为了解合肥地区献血员中GBV-C／HGV感染情况，我们对合肥市某医院输血科献血员进行调查。1 材料与方法1.1 血清来源合肥市某医院输血科1998年3月～7月的所有献血员，共1110名，取血清1050份；所有血清检测抗-GBV-C／HGV后，剩余部分-40℃冻存备检GBV-C／HGVRNA。1.2 抗-GBV-C／HGV检测包被抗原为人工合成多肽，分别选自非结构区NS3、NS5，进行混合包被，部分序列参见文献[3]，EIA法检查血清中抗-GBV-C／HGV。1:20倍稀释血清，临界值=阴性对照平均OD值+0.25，≥临界值为阳性，否则为阴性，连续两次检测阳性者，判为阳性。
作者：黄芬；郑惠玲；王玉琴；胡兆平；汪兴太 刊期： 2000年第06期
肝吸虫感染在河北地区少见，同时伴胆道蛔虫，乙肝感染在临床未见报道，现将我们收治的一例病人介绍如下： 患者女性，35岁，原籍四川，现居河北保定，已婚汉族。近两个月来无明显诱因出现上腹不适，疼痛，食欲不振，恶心，无腹泻。近一个月来又出现尿深黄，眼黄。曾在当地乡、县级医院以肝气淤滞，脾胃不和治疗，用药不详，效果不佳。既往体质较差，食少，无肝炎、结核等传染病史，粪便中有排蛔虫史，作过驱虫治疗。18岁结婚，离开原籍到现居住地，在原籍有食生鱼片粥史。查体：患者神清，慢性病容，全身皮肤轻度黄染，巩膜明显黄染。心肺未闻及异常。腹平坦，未见肠型及蠕动波，莫斐氏征(+)，无移动性浊音，肠鸣音无亢进。实验室检查：血、便常规及血脂、血糖未见异常，尿胆红素(++)，乙肝五项:HBsAg(+)，抗HBc(+)，余(-)。肝功：T／D-Bil：145.4／119.7μmol／L，ALT:56U，TTT：正常A／G：40／29g/L。B型超声示：1.胆囊结石，肿大积液。2.胆道蛔虫?3.胆管扩张。根据临床表现，实验室检查，B超诊断为：1.胆囊炎，胆结石。2.胆道蛔虫症?3.乙肝?经用抗生素消炎，药物排石，保肝治疗效果不佳，转入肝胆外科，行胆囊摘除术，术后T形引流，将摘除胆囊送病理室：胆囊壁增厚，炎症明显，胆囊内有虫体残段，为雌蛔虫成虫并有部分钙化。在引流液中，另有两块大小为3mm×1.5mm，2.5mm×1.8mm的虫体碎片不能确定为何物。取胆囊内容物涂片镜检，视野下可见芝麻粒样虫卵，高倍镜下象灯泡，有卵盖，内含幼虫，大小为24～29μm×14～16μm，根据特征，确诊为肝吸虫卵。随后给病人服用吡喹酮，排出大量葵花子仁样成虫，镜下观察为肝吸虫，充满引流液，因病人有头痛、头晕症状，考虑系吡喹酮副作用引起。改服丙硫咪唑，连续引流排虫5天，共排出完整虫体732条，另有少量虫体残片。之后继续消炎，保肝治疗，25天后临床表现消失。再次化验结果为：尿胆红素(一)，乙肝五项：HBsAg(+)，抗HBc(+)，肝功:T／D-B：1＜17.1μmol／L，ALT，TTT：正常，A／G:42／27g/L修正诊断：①肝吸虫病。②胆道蛔虫症。③胆囊炎，胆结石。④乙肝病毒携带，病人临床痊愈出现。回访2年至今无复发。
作者：苑文英；马士恒 刊期： 2000年第06期
1998年、1999年夏季，江苏省海安、如皋、通洲、泰兴等部分地区曾两度发生人与猪的突发感染性疾病，引起数十人和数万头猪死亡。经流行病学调查，临床观察，病原体分离鉴定，猪的人工感染试验及菌株PCR指纹图同源性分析等，确定这是由血液链球菌引起的感染中毒综合征，为人猪同患疾病，人群中发病死亡是由猪感染而来[1]。两年来，我院收治了共30例病人，本文着重临床特点分析，现报道如下。1 临床资料1.1 一般资料30例中男28例，女性2例，年龄29～75岁，平均52岁，26例为屠宰工，4例为农民，均有与屠宰病猪或售病猪肉接触史，其中12例有皮肤破损。接触病猪至发病时间为2至5天，发现至入院时间2h至3d，住院时间24h至31d。1998年收治病人11例，1999年收治病人19例，流行时间1998年7月下旬至8月中旬，1999年7月上旬至9月中旬。
作者：王宝平；王华雨；王广和 刊期： 2000年第06期
目的对恶性疟原虫热休克蛋白基因进行体外扩增，构建HSP86基因打靶载体，利用基因敲除技术进行恶性疟原虫热休克蛋白基因功能的研究。方法恶性疟原虫体外培养，基因组DNA提取，目的基因扩增，载体与目的片段连接、阳性克隆筛选及酶切鉴定。结果经酶切鉴定PCR产物及插入片段大小与预期值相符，进一步测序鉴定证实PCR产物及插入片段为所需目的基因片段。插入片段经酶切鉴定证实插入方向正确。结论成功构建了用于恶性疟原虫基因打靶的插入型及置换型载体(pHCl-HSP86int和pHCl-HSP86rep)，该打靶载体的成功构建为随后将进行的恶性疟原虫细胞内基因转染和进一步的功能研究奠定了基础。
作者：叶苓；余新炳；徐劲 刊期： 2000年第06期
中国人兽共患病学报杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中国微生物学会
