马小彤；葛薇；张秀军；徐玢；林永敏；李戈；宋玉华；吴克复
柘树[Cudrania tricuspidata(Carr)Bur]属桑科植物,在<本草纲目>等资料中记载可治疗关节疼痛、黄疸等.研究了提取的三种柘树根多糖直接及协同有丝分裂原ConA或LPS对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响和三种多糖对腹腔巨噬细胞(MФ)吞噬功能的影响.
作者：董国霞；陈靠山；石磊；宋锦平；李莹辉；徐誉泰 刊期： 2005年第03期
为了进一步研究实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)动物模型,采用从新鲜牛脊髓中提取的MBP免疫诱导非敏感品系BALB/c小鼠和C57BL/6小鼠,通过对实验动物的症状、中枢神经系统的病理改变及细胞因子水平变化的检测,较成功地建立了C57BL/6、BALBL/c小鼠的EAE模型,实验方法稳定可靠.
作者：贾怡；陈文捷；李虹；张林；李明远；官鹏；蒋中华；吕梅励；梁伟波；周斌 刊期： 2005年第03期
为探索并比较人类外周血单个核细胞(PBMC)IL-23、IL-12亚基表达的诱导剂和调控模式,分离正常人PBMC、单核细胞、CD4+、CD8+T淋巴细胞亚群,检测各种细菌、细菌产物、细胞因子、丝裂原对上述细胞IL-23和IL-12亚基表达的诱导作用,半定量RT-PCR方法测定各亚基的mRNA表达水平.结果显示,未经刺激的PBMC可表达IL-23 p19和IL-12 p35mRNA;脂多糖(LPS)和金黄色葡萄球菌(SAC)可上调PBMC IL-23和IL-12各亚基的表达;γ干扰素(IFN-γ)预处理后予LPS刺激可使单核细胞IL-23 p19、IL-12 p35和IL-12p40表达高于LPS直接作用的表达水平.植物血凝素(PHA)可促进CD4+、CD8+T细胞IL-23 p19表达,而对IL-12 p35、p40表达无调节作用.本文结果提示,IL-23的两个亚基的表达都处于紧密调控之下,易受各类诱导剂调节;人类外周血细胞IL-23 p19的表达和调控模式与IL-12 p35既有相似之处又存在不同点.
作者：马小彤；葛薇；张秀军；徐玢；林永敏；李戈；宋玉华；吴克复 刊期： 2005年第03期
人类免疫缺陷病毒(HIV)感染所引起的免疫病理机制中,细胞因子的作用及细胞因子网络失衡是其中的一个重要方面.为研究HIV感染者血清细胞因子水平的异常变化,进一步探讨有针对性的艾滋病(AIDS)治疗方案,对30例HIV感染者血清TNF-α、IL-2、IL-6和IL-10水平进行了测定.
作者：杨兰泽；高静；付朝宏；谢顺清 刊期： 2005年第03期
制备和纯化兔抗小鼠β-catenin抗体,分析其在结肠癌诊断中的应用价值.应用重组小鼠β-catenin蛋白,常规免疫雄性新西兰兔制备抗β-catenin抗体,并用盐析法和离子交换层析技术进行纯化,用免疫印迹法(Western blot)检测β-catenin抗体的纯度和特异性以及结肠癌细胞系SW48和HCT116中β-catenin蛋白的表达.用免疫组化SP法检测β-catenin在正常结肠组织和结肠癌组织中的不同表达.结果,用重组小鼠β-catenin蛋白免疫新西兰兔7周后,应用间接ELISA法检测静脉血中β-catenin抗体效价为1:204 800(A450=1.01).将β-catenin经SDS-PAGE分离,可见1条相对分子质量(Mr)为92 000的蛋白条带.与文献报道相符.用抗β-catenin血清做Western blot分析显示,在Mr为92000处有1条明显的区带,证明是抗β-catenin特异性抗体.从人结肠癌细胞株SW48和HCT116提取全细胞蛋白,经用所制备的β-catenin抗体反应,均可观察到β-catenin蛋白的表达.人结肠组织切片经抗β-catenin抗体免疫组化染色,在正常结肠组织细胞膜中可见棕黄色颗粒,而在结肠癌组织的细胞浆中可见棕黄色颗粒.制备了高效价、特异性的兔抗β-catenin抗体.用该抗体检测证实,正常结肠组织β-catenin表达在细胞膜中,而结肠癌组织β-catenin则在细胞浆中表达.提示结肠癌发生后β-catenin由细胞膜易位入细胞浆中表达,这可作为结肠癌的诊断的参考指标.
作者：陈晶；单保恩；贺占国；陈兴；马洪 刊期： 2005年第03期
探索RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术在抑制血管内皮细胞激活中的应用前景.利用阳离子脂质体LipofectamineTM000作为转染试剂将化学合成的小鼠NF-κB p65的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)转染人小鼠EOMA细胞,RT-PCR测定细胞内NF-κB p65 mRNA表达,Westem blot检测细胞内NF-κB p65蛋白水平.同时观察siRNA对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的NF-κB激活的抑制作用.结果显示:在转染siRNA后的第24小时,细胞内NF-κB p65mRNA水平降低,蛋白表达量明显减少,而在第48小时、72小时细胞内NF-κB p65蛋白已经无法测出;在TNF-α刺激后,转染siRNA的细胞组内NF-κB p65的表达也明显受到抑制.说明RNAi技术可以抑制NF-κB p65的表达,为进一步研究血管内皮细胞的保护提供了有效的方法.
作者：周晓彤；沈振亚；于曙东；余云生；叶文学；黄浩岳；焦鹏；滕小梅 刊期： 2005年第03期
利用RT-PCR技术,从稳定分泌抗人Lipocalin型前列腺素D合酶(Lipocalin-type prostaglandin D synthase,L-PGDS)单克隆抗体的鼠杂交瘤细胞中获得抗体可变区基因;通过一柔性连接短肽[(Gly)4Ser]3,SOE PCR法将此重、轻链可变区拼接成完整的抗人L-PGDS单链抗体基因,并装入表达载体pET-28a(+),在BL21宿主菌中进行表达.经SDS-PAGE检测显示,在低剂量0.02 mmol/LIPTG诱导和较低温度25℃或28℃条件下培养,重组菌表达了一定量的可溶性单链抗体.后经Ni-NTA亲和层析柱纯化,得率为2 mg/100ml,纯度达92%;双夹心ELISA和免疫荧光竞争抑制实验证实,纯化后的单链抗体具有较好的亲和力和特异性.
作者：朱国华；陈德宇；黄宇烽；宛传丹；许晓风 刊期： 2005年第03期
白介素18(IL-18)具有强烈的诱导IFN-γ的能力,能促进NK细胞的活化和杀伤能力以及CTL的细胞毒活性.现已研究IL-18水平与肿瘤临床的关系,并将IL-18应用于肿瘤的免疫治疗.在许多小鼠的肿瘤模型中,IL-18表现出显著的抑制肿瘤和治疗效应,并由此探索出多种IL-18应用方式.文章着重介绍了IL-18的三种主要应用方式、效果和IL-18可能的抗肿瘤机制.
作者：杨永杰；葛锡锐 刊期： 2005年第03期
通过研究卵巢癌及良性卵巢肿瘤患者外周血NK细胞表面受体的表达情况及NK活性的变化,分析探讨宿主NK细胞受体与肿瘤免疫逃逸的关系及其临床价值.分离受检者外周血单个核细胞,应用MTT法检测NK细胞的细胞毒活性,流式细胞术检测NK细胞受体NKG2D和NKG2A的表达,并结合临床病理因素作比较分析.结果显示,与良性卵巢肿瘤组和正常组相比,卵巢癌患者外周血NK细胞的细胞毒活性降低,NK细胞表面NKG2D的表达水平降低,而NKG2A的表达水平明显升高,其变化与卵巢癌的病情进展有关.此结果表明,卵巢癌患者机体NK细胞杀伤活性下降,NKG2D与NKG2A二者之间的平衡表达可能对NK细胞的功能状态起着重要的调节作用.
作者：刘敏；孔北华；曲迅 刊期： 2005年第03期
抗MIP-1α抗体可以阻断P.acnes对DC前体细胞的动员作用.对C57BL/6J(B6)小鼠静脉直接注射MIP-1α,24 h后在B6小鼠外周血中F4/80-B220-CD11c+细胞明显增多,占外周血单个核细胞(PBMC)13.47%±1.4%.新鲜分离的F4/80-B220-CD11c+细胞不具有成熟DC的特征,经过细胞因子GM-CSF、IL-4和mTNF-α体外培养7 d后的F4/80-B220-CD11c+细胞呈现树突状突起并形成细胞团簇,高度表达Ia、CD11c、DEC205、CD80、CD86,中度表达CD40,不表达CD8α、F4/80表面标志,并具有极强的刺激异源性T细胞增殖的能力.总之,研究表明趋化性细胞因子MIP-1α参与调节DC前体细胞的动员,并且注射MIP-1α可以直接迅速动员F4/80-B220-CD11c+DC前体细胞进入小鼠外周血.实验首次提出了用趋化性细胞因子MIP-1α动员DC前体细胞进人外周血的思路和实践,为体外获取大量功能正常的DC开辟了新的便捷途径.
作者：吴雨岗；汪良；丘凌；何宋兵；杨桂林；万兵；张雁云 刊期： 2005年第03期
B细胞激活因子BAFF是新近发现的TNF超家族成员,因其在B细胞发育及自身免疫病中起注.BAFF对外周B细胞发育及功能十分重要.BAFF信号的缺失导致外周B细胞大量减少,B细胞发育在T1 B向T2 B转换阶段被阻断.BAFF介导TD及TI抗原诱导的抗体应答.BAFF转基因小鼠发生系统性红斑狼疮样表型.在天然狼疮小鼠及部分红斑狼疮患者血清中可溶性BAFF蛋白水平增高.老年的BAFF转基因小鼠还出现干燥综合征样表型.这些研究结果提示,BAFF是参与某些自身免疫病发病的重要致病因子.
作者：居忠亮；臧敬五 刊期： 2005年第03期
本实验旨在研究熊果酸对正常人外周血淋巴细胞Th1型细胞因子的影响,并对机制作初步探讨.采用半定量RT-PCR和夹心法ELISA分别检测不同浓度熊果酸对PHA和PMA活化的外周血淋巴细胞的Th1型细胞因子(IFN-γ和IL-2)mRNA的表达及分泌的影响.结果显示Th1型细胞因子mRNA和蛋白的表达水平均随熊果酸浓度的增加而下降(P＜0.05),表明熊果酸可能对IFN-γ和IL-2在转录和(或)转录后水平发挥抑制作用,有可能用于自身免疫性疾病和超敏反应性疾病的防治.而熊果酸和地塞米松分子结构相似,可能通过类似机制下调糖皮质激素受体发挥作用.
作者：董兴高；邓涛；谢珞琨；陈会敏；胡志芳；江华；谭锦泉；张秋萍 刊期： 2005年第03期
采用RNA干涉(RNA interference,RNAi)技术将合成的两段有回文结构的c-Jun互补cDNA序列插人PAVU6 siRNA表达载体,构建PAVU6-cJun siRNA干涉质粒,电转化U937细胞,观察沉默c-Jun的基因表达对GR蛋白表达和转录激活能力的影响,探讨c-Jun与GR功能的相互关系.PAVU6-cJun siRNA转化U937细胞后GR的表达和转录激活活性均有所增强.提示抑制U937细胞c-Jun蛋白表达,在一定程度上可促进GR表达及增强其转录激活功能.
作者：程晓刚；粟永萍；罗成基；刘晓宏 刊期： 2005年第03期
利用计算机技术模拟SARS冠状病毒S蛋白的抗原表位并合成了7条多肽,研究合成肽与SARS患者早期血清的反应性.利用中和吸收实验筛选合成肽,得到一条肽1,并分别用SARS患者早期血清和健康献血员的血清进行检测.结果显示,它在SARS患者中的阳性率为25.85%(53/205),健康献血员中为9.57%(9/94),统计学分析表明,两者间存在明显差异.合成肽1可能是SARS相关抗体靶抗原的一个表位,为靶抗原的进一步研究打下了基础.
作者：何卫平；赵军；文翠蓉；李伯安；李靖；陈昊；戚扬；程云 刊期： 2005年第03期
T细胞在胸腺发育过程中,TCR通过VDJC基因重排(rearrangement)和选择(细胞水平选择或克隆选择,cell or clonal selection),而组成了外周多样性的T细胞库.现证实外周的T细胞存在着TCR的第二次重排(编辑/修正,editing/revision)与选择(受体水平或分子水平的选择,receptor or molecular selection),即外周的T细胞能重新开放RAG酶等进行VDJC基因的重新编排,修正原来的TCR或产生全新的TCR,再一次选择成为产生耐受或特异应答的新的T细胞,这种机制在外周T细胞库的扩展、自身免疫病、T细胞的外周耐受、肿瘤和感染、免疫缺陷和移植等免疫应答机制中发挥重要作用.
作者：姚新生；王小宁 刊期： 2005年第03期
为了研究细胞因子和凋亡分子在类风湿性关节炎(RA)发病中的作用,用ELISA法分析了26例RA患者滑膜液和血清中IL-12、IL-10和可溶性FasL(sFasL)的含量.结果表明RA患者滑膜液中IL-12、IL-10含量分别为(419.9±89.2)pg/ml和(187.7±34.5)pg/ml,外周血中这两种细胞因子的含量均较低,分别为(65.3±34.2)pg/ml(IL-12)和(85.0±12.7)pg/ml(IL-10).滑膜液中sFasL的含量为266 pg/ml,明显高于血清含量(36 pg/ml).这一结果提示,RA患者滑膜液中IL-12含量和sFasL增高,这些炎性细胞因子增高可能参与了关节滑膜中的自身反应性T细胞的活化,继而造成免疫损伤.
作者：邱潮林；徐莉敏；谢秋华；费新娣 刊期： 2005年第03期
探讨脑梗塞患者血液中GMP-140、sICMA-1及VEGF水平变化关系.采用酶联免疫吸附试验检测80例脑梗塞患者及30例正常对照的血液水平变化的相关性.结果发现脑梗塞组GMP-140 (36.7±5.9)ng/ml,明显高于正常对照组(17.2±3.1)ng/ml(P＜0.05);脑梗塞组sICAM水平为(670.2±206.8)ng/ml,明显高于正常对照组(290±80.5)ng/ml(P＜0.05);脑梗塞组VEGF水平为(317.3±105.2)pg/ml,明显高于正常对照组(81.6±10.6)pg/ml(P＜0.05).此三个变量与正常对照比较均有明显的相关性.据此上述三项水平的测定有助于评价脑梗塞患者的病理状态及转归.
作者：黄红宇；魏云玉；徐默玲；许静 刊期： 2005年第03期
探讨不同预处理方法移植后树突状细胞亚群早期重建情况.采用三色流式细胞仪动态检测不同移植方法后早期患者外周血树突状细胞亚群DC1(Lin-HLA-DR+CD11c+)、DC2(Lin-HLA-DR+CD123+)水平.结果:清髓性干细胞移植组包括同胞全相合干细胞移植和HLA半相合移植,移植后14 d DC1分别为0.093%±0.091%,0.090%±0.064%,DC2为0.056%±0.026%,0.130%±0.036%,二者差别无统计意义.非清髓性干细胞移植组移植后14 d DC1为0.223%±0.084%,DC2为0.360%±0.023%,非清髓性干细胞组DC1、DC2略低于正常对照组,和清髓性移植组相比,非清髓性干细胞组明显增高,P＜0.05,二者差别有统计学意义.移植前的预处理方案强度影响树突状细胞亚群重建.
作者：曹俊杰；吴德沛；李彩霞；张学光；吴小津；刘跃均；常伟荣；朱子玲；孙爱宁；马骁；傅铮铮；唐晓文 刊期： 2005年第03期
为了制备白介素18前体(proIL-18)和白介素1β转化酶(ICE)共表达肿瘤疫苗,从小鼠脾细胞克隆proIL-18和ICE基因,构建小鼠proIL-18和ICE共表达质粒(pIRES-proIL-18-ICE),经测序证实序列正确后,脂质体法转染小鼠淋巴细胞白血病细胞系L1210,筛选稳定表达细胞株.转染细胞RT-PCR及转染细胞培养上清IL-18 ELISA检测结果表明,肿瘤细胞可以表达并分泌成熟的IL-18.培养上清的IL-18可显著诱导ConA刺激的小鼠脾细胞产生IFN-γ,表明其具有功能活性.生长曲线和细胞周期实验证实与未转染的肿瘤细胞相比,转染空载体pIRES、pIRES-proIL-18、pIRES-ICE、pIRES-proIL-18-ICE基因对肿瘤细胞生长增殖无明显影响.IL-18白血病瘤苗的成功制备表明,利用pIRES载体在同一肿瘤细胞中共表达的proIL-18和ICE能够完全模拟生理过程,在真核细胞内有效酶切,分泌出成熟并有功能活性的IL-18;构建的IL-18瘤苗为进一步评价其在小鼠体内的抗白血病效果奠定基础.
作者：徐玢；马小彤；董成亚；石洋；林永敏；宋玉华；吴克复 刊期： 2005年第03期
耐受性树突状细胞(DC)通过与T细胞间的作用诱导免疫耐受.这种特性为治疗自身免疫性疾病提供了新的思路和途径.文章就耐受性DC在自身免疫性疾病中的作用以及机制做一综述.
作者：顾春瑜；郑磊；王前 刊期： 2005年第03期
现代免疫学杂志
主管:上海市教育委员会
主办：上海市免疫学研究所,上海市免疫学会
