学术投稿

免疫层析法检测结核抗体对肺结核病诊断的临床价值

俞锡灿;张筱蓉;孙爱莉

关键词:分枝杆菌, 结核, 免疫层析法, 抗体
摘要:结核病在全球范围内仍然是一个重要的社会问题,其实验室辅助诊断目前主要包括:涂片染色镜检、结核分枝杆菌培养、酶联免疫吸附试验(ELISA)、聚合酶链反应(PCR)、核酸探针、结核菌素试验等方法,各种方法皆有利弊.用特异性抗原的血清学检验方法特异而敏感,对活动性结核具有较高的诊断价值,且因其操作简便,敏感性和特异性不断提高而被基层医院实验室所采用[1].
检验医学杂志相关文献
  • 上海地区自身抗体检测质量现状调查分析

    目的 了解上海地区自身抗体检测的质量现状,以便对其检测技术进行规范.方法 分2次共发放8个调查样本,要求各临床实验室在规定的时间内检测抗核抗体(ANA)和抗可提取核抗原(ENA)抗体,并按时回报结果.结果 开展ANA检测项目的 32家实验室均采用间接免疫荧光法,结果总符合率为98.1%,其中阳性结果符合率为96.9%,阴性结果符合率为100.0%.混合核型类样本的次要核型检出率偏低.阳性样本各实验室回报的滴度结果差异较大.开展抗ENA抗体检测项目的 38家实验室均采用免疫印迹法,结果符合率为76.3%,抗核糖核蛋白(RNP)抗体、抗干燥综合征抗原A(SS-A)抗体、抗干燥综合征抗原B(SS-B)抗体检测结果总符合率低于其他抗体,试剂质量参差不齐.结论 自身抗体检测的质量有待提高,其检测技术有待规范.

    作者:肖艳群;陈慧英;叶萍;简敏华;蒋玲丽;陆银华;邵维杰;陈晓翔 刊期: 2008年第03期

  • 肝移植术后患者感染致病菌的整合子基因序列分析

    目的 检测肝移植术后患者感染的细菌标本中整合子的分布及其与耐药的相关性.方法 收集27株肝移植术后分离的革兰阴性杆菌,鉴定并用纸片扩散法做药敏试验;聚合酶链反应(PCR)法检测整合酶及整合子基因盒,对阳性PCR产物采用HinfI限制性片段长度多态性(RFLP)分析.结果 27株细菌均为多重耐药,对9种抗生素耐药率从14.8%到100%;Ⅰ型整合子阳性率为51.9%;有750 bp、1.0 kb、1.8 kb、2.0 kb 4种长度的基因盒片段.结论 Ⅰ型整合子广泛存在于多重耐药的肝移植术后患者感染标本,建议检测整合子,可用于防治院内感染、指导抗生素的合理使用.

    作者:伍勇;李翔;陈辉;漆涌;徐令清 刊期: 2008年第03期

  • 血脂测定在非酒精性肝脂肪变性诊断中的应用

    目的 探讨血清脂质测定在非酒精性肝脏脂肪变性(NAFLD)诊断中的应用价值.方法 测定169例NAFLD患者和123名健康者对照血清脂质、载脂蛋白水平,用受试者工作特征(ROC)曲线分析各参数的诊断价值.结果 NAFLD患者的三酰甘油(TG)、载脂蛋白C3(apo C3)、载脂蛋白E(apo E)、apo C3/apo E、非高密度脂蛋白胆固醇(non-HDL-C)及胆碱酯酶(ChE)明显高于对照组(P<0.05),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、载脂蛋白A-Ⅰ(apo A-Ⅰ)明显低于对照组(P<0.05),ChE、apo C3、apo C3/apo E及apo C3/apo E+ChE+HDL-CROC曲线下的面积分别为0.603、0.654、0.743和0.760.结论 apo C3/apo E比值及其与ChE和HDL-C联合检测可提高对NAFLD的诊断效率.

    作者:白萍;陆元善;仇梅琼 刊期: 2008年第03期

  • 应用实时荧光聚合酶链反应技术与第二代杂交捕获法检测高危亚型人乳头瘤病毒

    目的 比较实时荧光聚合酶链反应(PCR)与第2代杂交捕获法(HC-Ⅱ)2种人乳头瘤病毒(HPV)检测方法.方法 采用实时PCR与HC-Ⅱ分别检测223例宫颈脱落细胞标本中的高危亚型HPV,对结果不一致的标本进行测序分析.结果 实时PCR和HC-Ⅱ2种方法检测高危亚型HPV的一致性较好,总符合率为77%,总一致性指数(Kappa指数)为0.538.其中,高度鳞状上皮细胞内病变(HSIL)组二者的符合率为82%,Kappa指数为0.410,一致性比其他组好.结论 实时PCR与HC-Ⅱ检测结果一致性较好,尤其对于HSIL患者,可作为临床上HPV高危亚型检测的有效手段.

    作者:唐振华;李柱南;胡伟平 刊期: 2008年第03期

  • 血浆B型钠尿肽和心钠素在小儿慢性充血性心力衰竭诊断中的价值

    目的 探讨血浆B型钠尿肽(BNP)、心钠素(ANP)在小儿慢性充血性心力衰竭(cHF)中的诊断价值.方法 分别采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和放射免疫法检测41例CHF患儿及35名健康体检儿童的血浆BNP和ANP浓度.结果 CHF组的血浆BNP、ANP水平均较对照组显著升高(P<0.01).纽约心脏学会(NY-HA)Ⅲ、Ⅳ级的cHF患儿血浆BNP、ANP水平显著高于NYHAⅡ级患儿(P<0.05),NYHAⅣ级患儿的BNP也显著高于Ⅲ级患儿(P<0.05).CHF组血浆BNP、ANP均与左心室舒张末期内径(LVEDD)呈正相关,与左心室射血分数(LVEF)呈负相关,且血浆BNP与LVEDD、LVEF的相关性显著优于ANP(P<0.01).结论 CHF患儿的血浆BNP及ANP水平升高显著,且与心力衰竭程度关系密切,可以作为临床诊断和心力衰竭分级的一个有效指标.

    作者:章英宏 刊期: 2008年第03期

  • 基因重组降钙素原蛋白在大肠杆菌中的克隆表达及纯化

    目的 构建降钙素原(PCT)基因的原核表达载体,并在大肠杆菌中进行表达,以获取高产量、低成本、高纯度的PCT蛋白.方法 按人的全长PCT cDNA序列,设计引物用标准的聚合酶链反应(PCR)法全基因合成步骤合成扣除信号肽外PCT的片段,应用基因重组技术将该片段克隆到质粒pET21a(+)中,进行限制性内切酶酶切分析和DNA测序鉴定.将重组质粒转化大肠杆菌E. coli(DH5αt),经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达后,用镍.氮三乙酸(Ni-NTA)亲和层析纯化获取蛋白,用十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印迹(Western blot)的方法鉴定.结果 扩增出的人PCT片段于原核表达载体中克隆,经酶切和核酸测序鉴定,得到正确的重组质粒pET-PCT,并在大肠杆菌中得以表达.纯化后的蛋白经考马氏亮蓝染色呈单一条带;用抗PCT的抗体进行Western blot分析证明目的 蛋白有反应性.结论 本研究成功构建了表达基因重组人PCT的原核表达载体,基因重组人PCT蛋白在大肠杆菌中获得了表达和纯化,为进一步获取高纯度、高效价的单克隆抗体和开展临床检测提供了必要的条件.

    作者:陈洁;张志萍;谢惠芳 刊期: 2008年第03期

  • 应用新鲜全血对多台血液分析仪比对的临床应用

    目的 应用正常人新鲜全血对多台血液分析仪进行比对,使血液分析仪各参数之间具有可比性.方法 用Sysmex XT-1800i血液分析仪作为规范操作检测系统,对正常人新鲜全血进行定值,分别对2台SysmexKX-21和1台KX-21N血液分析仪进行比对.结果 3台血液分析仪比对前偏倚超过允许范围的参数占53.3%(8/15),比对后偏倚超过允许范围的参数占13.3%(2/15).结论 比对后各参数之间可比性增加,同时提高了检测结果的一致性.

    作者:高原;郑岚;杨剑敏;倪桂英;张泓 刊期: 2008年第03期

  • 细菌性阴道病四项检测指标观察

    目的 探讨细菌性阴道病(BV)患者阴道分泌物中过氧化氢(H2O2)、白细胞酯酶、唾液酸苷酶和线索细胞4项指标的变化与BV的相关性,以及湿片观察线索细胞的可行性.方法 收集临床诊断为BV的阴道分泌物样本192例,以BV联合测定试剂盒检测H2O2、白细胞酯酶和唾液酸苷酶,并分别用生理盐水的湿片、滴加10%氢氧化钾(KOH)的湿片和于片革兰染色3种方式观察线索细胞.结果 BV患者与对照者比较,阴道分泌物中H<2,O2、唾液酸苷酶、自细胞酯酶和线索细胞检测敏感性分别为40.63%、90.10%、99.48%、92.19%,特异性分别为92.80%、99.20%、66.00%、95.60%;BV组(192例)中线索细胞与H2O2、唾液酸苷酶、白细胞酯酶一致率分别为43.75%、91.67%、92.19%,预测线索细胞阳性率为93.59%、96.53%、92.67%;线索细胞检出方法革兰染色与滴加KOH后湿片直接镜检差异无统计学意义(P>0.05),与生理盐水湿片镜检差异有统计学意义(P<0.05).结论 4项实验指标中唾液酸苷酶与线索细胞检出符合性好,可作为BV诊断的客观指标;线索细胞检查能在滴加KOH湿片中直接观察,比革兰染色更便捷.

    作者:田根富;俞夏美 刊期: 2008年第03期

  • 苄索氯胺法——一种新的脑脊液蛋白质检测方法

    目的 对苄索氯胺脑脊液蛋白质检测方法进行评价.方法 用罗氏公司的苄索氯胺试剂,以比浊法进行脑脊液蛋白质测定,并观察了本法的精密度、灵敏度、检测范围等.结果 苄索氯胺法的批内精密度为1.5%、2.3%,日间精密度为0.62%、0.72%;灵敏度为0.08 g/L;检测范围可达1.9 g/L.传统磺基水杨酸蛋白质测定法与之比较,回归方程为Y=0.854 X+0.097,r=0.985.结论 本法简便、快速、准确且样本用量少,适合临床实验室推广应用.

    作者:宋斌;白芳;张德泰;胡丽华 刊期: 2008年第03期

  • 慢性乙型肝炎患者外周血CD80、CD86及其受体CD28的表达

    目的 研究慢性乙型肝炎患者外周血CD80、CD86及其受体CD28与其病情状态、乙型肝炎病毒复制的关系.方法 用流式细胞术检测了24名健康体检者和92例慢性乙型肝炎患者外周血CD80、CD86、CD28的表达和CD8+CD28+、CD8+CD28-亚群淋巴细胞,并与病毒载量和乙型肝炎e抗原(HBeAg)进行相关分析.结果 慢性乙型肝炎CD80和CD86表达明显高于正常对照组和乙型肝炎病毒携带组(P<0.01);肝炎后肝硬化组明显高于慢性乙型肝炎组(P<0.05);慢性乙型肝炎轻、中、重度3组间差异也有统计学意义.慢性乙型肝炎组CD28的表达明显低于正常对照组和乙型肝炎病毒携带组(P<0.05).病毒载量高低和HBeAg是否阳性与外周血CD80、CD86、CD28及CD8+CD28+和CD8+CD28-亚群淋巴细胞差异无统计学意义.结论 CD80、CD86及受体CD28可能在慢性乙型肝炎免疫损伤过程中起重要作用,但与血清中病毒载量的变化和HBeAg阳性与否无关.

    作者:周永列;邱莲女;陈永健;李洪波;林惠君;刘建栋 刊期: 2008年第03期

  • 蛋白质组技术研究人血清功能蛋白质的新进展

    在人血清蛋白质组的组成、结构与功能研究领域中,目前已拓展一种较为完善的非在线双向凝胶电泳分离与质谱鉴定联用分析技术,可同时鉴定人血清中490种蛋白质[1],使医学科学家从当初对人血清单个蛋白质结构与功能的研究模式跨入对人血清蛋白质组研究的新阶段.

    作者:金宏伟;曾新华;黄河清 刊期: 2008年第03期

  • 妊娠高血压综合征患者脂蛋白(a)及半胱氨酸蛋白酶抑制剂 C 水平变化的研究

    目的 探讨妊娠高血压综合征(简称妊高征)患者血中脂蛋白(a)[Lp(a)]、半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(Cys C)水平变化在妊高征发生、发展中的作用.方法 用免疫增强透射比浊法检测52例妊高征患者(轻度12例,中度22例,重度18例)及28名正常足月妊娠妇女(对照组)血清Lp(a)和Cys C水平.结果 中、重度妊高征患者血中Lp(a)及Cys C水平均明显高于对照组(P<0.01).重度妊高征患者Lp(a)及Cys C水平高于中度妊高征患者(P<0.05).轻度妊高征患者Lp(a)及Cys C水平与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 血清中Lp(a)水平升高可能参与了妊高征的血管内皮损伤,观测Lp(a)、Cys C可以预测妊高征的严重程度及预后.

    作者:晏峰 刊期: 2008年第03期

  • 利用荧光定量聚合酶链反应快速检测沙门菌

    沙门菌病是公共卫生学上具有重要意义的人畜共患病之一,其病原沙门菌属肠杆菌科,包括那些可引起食物中毒、胃肠炎、伤寒和副伤寒的细菌.人畜感染后可呈无症状带菌状态,也可表现为有临床症状的致死疾病.

    作者:傅松维;董明国;沈小文 刊期: 2008年第03期

  • Rh阴性血型鉴定及其重要意义

    目的 确保鉴定输血安全,防止溶血性输血反应的发生.方法 对我院2403例血型鉴定标本同时进行了Rh血型的鉴定.结果 Rh血型阴性者有9例,检出率为0.37%.结论 将Rh血型鉴定作为血型筛查的常规检验,对有效预防溶血性输血反应的发生,提高输血的安全性具有重要意义.

    作者:姚雯颖 刊期: 2008年第03期

  • 非发酵菌致泌尿系统感染的菌种分布及耐药性

    目的 探讨泌尿系统感染中非发酵菌的种类及耐药性.方法 按标准要求留取清洁中段尿,每份标本做定量细菌培养和菌落计数;药敏试验采用纸片扩散法.结果 在泌尿系统感染中,非发酵菌感染比例较高,占19.8%;构成比中前3位非发酵菌依次是铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌和栖稻黄色单胞菌;非发酵菌对不同抗生素表现为多重耐药.结论 监测泌尿系统感染中非发酵菌种类及耐药性变化对指导临床合理应用抗生素十分有益.

    作者:孙阳;张友玲;丁莉莉 刊期: 2008年第03期

  • 败血症患者血小板相关参数的变化及意义

    目的 了解败血症患者血小板相关参数的变化及临床意义.方法 将败血症患者的4项血小板参数血小板计数(PLT)、平均血小板体积(MPV)、血小板压积(PCT)、血小板体积分布宽度(PDW)与对照组进行比较,同时将败血症患者分为死亡组和存活组、发病期组和恢复期组、革兰阴性杆菌组和革兰阳性球菌组并分别比较这4项参数.结果 败血症患者血小板及相关参数发生明显变化,PLT、PCT显著降低而MPV、PDW明显增高,这一变化在重症患者中尤为显著并且与病情的转归密切相关.另外,不同病原菌所致的败血症,血小板及相关参数无显著差异.结论 血小板及相关参数既可作为辅助诊断败血症的参考依据之一,也是反映败血症病情严重程度和预后的有用指标.

    作者:徐瑞龙;朱以军;马拥军;郑昭璟 刊期: 2008年第03期

  • 两种试剂盒测定三酰甘油的差异及其对低密度脂蛋白胆固醇计算结果的影响

    目的 探讨去游离甘油法与不去游离甘油法[甘油磷酸氧化酶(GPO)-过氧化物酶(POD)]测定部分脂蛋白代谢可能紊乱的患者血清与生化质控血清中三酰甘油(TG)的差异及由此带来的计算法低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)与直接法测定结果的差异.方法 分别采用去游离甘油法与GPO-POD法测定单纯高TG血症、糖尿病、肝胆疾病、肾病综合征、冠状动脉综合征患者及妊娠患者(各30例)的TG,并测定总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),按Friedwald公式计算LDL-C,将其与直接法的测定结果进行比较.同时,测定卫生部2006年和2007年第1次常规化学室间质评样本中的TG,比较两法测定结果的差异.结果 2种方法测定6组患者的TG水平差异均有统计学意义;GPO-POD法测定结果计算出的LDL-C与直接法结果相比,单纯高TG患者显著偏低,而肝胆疾病患者明显偏高;其余4组患者无差异.而去游离甘油法计算出的LDL-C与直接法结果相比,单纯高TG患者显著偏低,而糖尿病、肝胆疾病、肾病综合征患者显著偏高,冠状动脉综合征与妊娠组无差异.两法测定不同品牌、不同批次的卫生部室间质评样本TG结果可相差数倍.结论 2种方法测定血清TG可能对TG的水平划分发生误判;若采用汁算法由此确定单纯高TG、肝胆疾病等部分患者的LDL-C水平很不可靠.部分品牌的生化质控血清含大量的游离甘油,两法的结果可出现明显差异.

    作者:袁耀钦;潘小划 刊期: 2008年第03期

  • 老年患者泌尿系统感染致病菌及其耐药性分析

    目的 调查老年患者泌尿系统感染致病菌及其耐药性,为临床合理使用抗生素提供依据.方法 对428例老年患者中段尿标本进行细菌培养及耐药性监测.结果 共检测出病原菌435株,其中革兰阴性杆菌占61.8%,革兰阳性球菌占25.1%,真菌占10.3%;老年女性革兰阴性杆菌的感染率显著高于男性(P<0.01);革兰阴性及阳性细菌中分别以大肠埃希菌(39.1%)和肠球菌属(16.3%)多.产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的大肠埃希菌对亚胺培南、哌拉西林-他唑巴坦、呋喃妥因、氨卞西林-舒巴坦、阿米卡星的耐药率低;肠球菌属细菌对万古霉素、利奈唑烷均100%敏感;葡萄球菌属细菌耐甲氧西林株达90.6%.结论 老年患者泌尿系统感染以革兰阴性菌为优势菌株,细菌耐药性监测对指导临床合理用药具有重要意义.

    作者:金立钢;方芳;陈允硕;何银华;缪亚兰 刊期: 2008年第03期

  • 血管活性肠肽抑制实验性类风湿性关节炎自身抗体表达的研究

    目的 研究血管活性肠肽(VIP)足否对类风湿性关节炎(RA)具有抑制作用以及其作用机制.方法 通过利用建立的胶原诱导的实验性RA大鼠模型(CIA),注射VIP,观测大鼠的发病率和严重程度,并检测大鼠血清中的抗胶原抗体水平.结果 VIP对CIA有显著的抑制作用,明显降低了CIA的发病率和关节损伤程度,显著降低大鼠抗胶原抗体水平.结论 本研究成功建立了CIA,VIP对CIA的抑制作用与抑制抗胶原抗体水平有关.

    作者:蔡志昌 刊期: 2008年第03期

  • 噬菌体法与比例法在结核分枝杆菌药敏检测的比较研究

    目的 探讨噬菌体检测技术(PhaB)同时快速检测4种一线抗结核药物耐药性的可能性,分析其临床应用价值.方法 应用PhaB同时测定53株结核分枝杆菌(MTB)临床分离株对链霉素、异烟肼、利福平和乙胺丁醇的耐药性,并与比例法的药敏结果比较,对2种方法检测结果不符的菌株进行Bactec-960药敏测定.结果 PhaB检测链霉素、异烟肼、利福平、乙胺丁醇药敏结果与比例法药敏结果符合率分别为94.3%、90.6%、96.2%和88.7%.共有7株菌株16个药敏结果PhaB与比例法检测结果不符.Bactec-960检测结果有5株12个药敏结果支持PhaB结果,2株4个药敏结果支持比例法结果.结论 PhaB同时检测链霉素、异烟肼、利福平、乙胺丁醇药敏结果与比例法检测结果有较高的符合率,可作为MTB耐药性的快速筛选方法.

    作者:戴俊华;吴蓉;康向东;胡忠义;王洁 刊期: 2008年第03期

检验医学杂志

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主管:上海市卫生局

主办:上海市临床检验中心