吴浩；许祖德；张月娥；张秀荣；张锦生；查锡良
我们对多种胃部疾病包括慢性胃炎、活动性胃溃疡及胃癌患者的胃黏膜组织内的一氧化氮合酶(NOS)活性进行了检测，同时分析了幽门螺杆菌(Hp)、病理炎症积分及肠化生等与NOS的关系，旨在探讨一氧化氮(NO)在各种胃部疾病发病机制中的作用。 对象与方法 对象 1998年12月～1999年2月因上腹痛、反酸、嗳气、呕血及黑便等症状在我院内窥镜室检查并经活检病理确诊的患者106例，分为5组：①正常胃黏膜者20例(对照组)；②慢性糜烂性胃炎24例(CEG组)；③萎缩性胃炎21例(CAG组)；④活动期胃溃疡22例(GU组)；⑤胃癌19例(GC组)。男59例女47例。年龄26～85岁，平均47.5岁，病程1月～20年，Hp感染者56例，非Hp感染者37例。病例入选标准：①两周内未服用肾上腺糖皮质激素、硝酸酯类、非甾体消炎药、质子泵抑制剂和血管活性药物；②胆汁反流性胃炎、门脉高压性胃病和有胃手术史患者除外。
作者：徐刚；林庚金；许祖德；孙安阳 刊期： 2000年第04期
复杂性尿道狭窄特别是尿道闭锁、合并假道者被认为是尿道内切开术的相对禁忌证。近年来随着腔内技术及影像医学的发展，使尿道内切开术治疗复杂性尿道狭窄成为可能。本院将超声医学与腔内技术结合，对复杂性尿道狭窄采用B超引导下尿道内切开术，取得显著效果。 资料和方法 临床资料 1993年6月到1999年1月共行尿道内切开术105例，对其中25例复杂性尿道狭窄病人在B超实时引导下行尿道内切开术。25例复杂性尿道狭窄均为男性，年龄21～77岁，平均35.8岁。非闭锁性尿道狭窄15例，狭窄段长度0.3～2.1 cm，<1.0 cm 9例，1.0～2.0 cm 4例，>2.0 cm 2例，平均1.1 cm。其中膜部尿道狭窄12例，前列腺部尿道狭窄2例，球部尿道狭窄1例。狭窄段尿道内径为1～3 mm，平均1.6 mm。既往尿道内切开术时无法插入导引管10例，其余5例术前插入输尿管导管或丝状探条失败。尿道狭窄合并假道者5例，其中3例合并尿道闭锁，假道长度1.2～4.5 cm，平均2.8 cm，4例与膀胱相通，1例为盲端；假道位于尿道腹侧4例，背侧1例。尿道闭锁8例，闭锁段长度为0.3～2.5 cm，<1.0 cm 6例，1.0～2.0 cm 1例，>2.0 cm 1例，平均1.2 cm，其中膜部闭锁6例，前列腺部闭锁1例，球部闭锁1例。致狭窄原因为外伤性者21例，前列腺术后3例，炎症性1例。既往因尿道狭窄手术1～6次，平均1.9次。
作者：吴登龙；金三宝；胡兵；朱家安；张炯；陈曾德 刊期： 2000年第04期
目的观察病毒血症在病程各期的变化。方法根据汉坦病毒血清Ⅰ型76-118株及血清Ⅱ型80-39株M基因G1区设计两对公有引物及一条探针，应用RT-nestedPCR方法对57例96份肾综合征出血热(HFRS)患者血清中HV-RNA检测，所有PCR产物用DOT-Blot证实。结果 96份样本中68份阳性，阳性率70.8%；在病程第1、2、3周，HV-RNA检测率分别为94.7%、47.5%、25%，P<0.05；重型病人持续2周HV?RNA阳性检测率100%，而轻、中型分别为12.5%及42.8%，P<0.05。结论在HFRS病程中，病毒血症是一个急性过程，与发热期相平行，病毒血症持续时间与病情轻重密切相关。
作者：黄玉仙；杨佩珍；瞿涤；何丽芳；尹有宽；翁心华 刊期： 2000年第04期
目的探讨全子宫切除术后对患者性行为的影响因素，以提高术后妇女的生活质量。方法观察了107例行全子宫切除手术6个月以上的患者，其中全子宫切除19例，全子宫及单侧附件切除18例和双附件切除70例。按不同术式及年龄<45岁、45～50岁、>50岁分组，对术后性生活的恢复、性生活的频率及质量等进行手术前、后自身比较，并观察促卵泡刺激素(FSH)、雌二醇(E2)及睾酮(T)水平对性行为的影响。结果术后性生活恢复时间各组间差异无显著意义，术后47例(43.9%)患者恢复性功能如同术前，有性行为异常(性生活频率减少，性交痛及缺乏性高潮)为28例(26.2%)，19例(17.8%)患者有术后恐惧心理或误认为需要禁欲。不同术式同一年龄组中术后性生活恢复时间及频率方面差异无显著意义。而年龄<45岁3组不同术式比较在性生活质量及性欲望的差异方面有显著意义(χ2=11.263,P=0.003 6)，不同术式组FSH、E2水平差异有显著意义，而T水平差异无显著意义，E2水平对性生活质量及性欲望影响明显(t=2.18,P=0.032)，FSH、T则不明显。结论全子宫切除术本身对妇女的性行为影响不明显，术前术后对患者的指导，消除心理障碍显得十分重要。卵巢功能对维持正常的性功能有着重要作用。［全文刊登于中华医学杂志 1999，79(6)：441］
作者：杨丹 刊期： 2000年第04期
目的检测肾细胞癌(RCC)组织脆性组氨酸三联体(fragile histidine traid，FHIT)基因蛋白编码外显子及mRNA表达情况，了解RCC组织中FHIT基因异常特征，探讨FHIT基因与RCC发生发展的关系。方法收集RCC及相应癌周肾组织标本，提取组织DNA及RNA。DIG标记FHIT全长cDNA探针。PCR法扩增FHIT基因E5～E9。扩增产物电泳转膜后行Southern blot杂交。RNA转膜后行Northern bolt杂交。结果 68.2%(15/22)RCC组织、37.5%(6/14)相应癌周肾组织存在FHIT基因蛋白编码外显子缺失或异常。E5和E8异常(缺失、突变等)发生率为40.9%(9/22)和36.4%(8/22)。42.8%(12/28)RCC及75%(12/16)癌周肾组织存在Northern blot阳性条带。FHIT mRNA失表达与RCC组织学高分级及临床高分期关系密切(P<0.05)。存在FHIT基因蛋白编码外显子缺失或异常的15例RCC中14例(93.3%)FHIT基因mRNA表达阴性。结论 RCC组织常发生FHIT基因蛋白编码外显子缺失或突变。FHIT mRNA失表达与FHIT基因异常基本一致，其表达情况可提示患者预后。本实验结果支持FHIT基因可能是肿瘤抑制基因。
作者：刘本春；王忠；丁强；张元芳 刊期： 2000年第04期
目的对分支杆菌的一种分泌蛋白Ag85B的基因进行克隆、表达，为结核病进行诊断打下基础。方法以结核杆菌H37Rv株基因组DNA为模板，以PCR法对基因ag85b进行扩增，产物与载体质粒pET24b构建表达Ag85B的重组质粒，将此重组质粒先转化入大肠杆菌DH5α内，抽提质粒，酶切检验，再转化入表达宿主大肠杆菌JM109(DE3)菌株内，对转化菌株以IPTG进行诱导后，破菌，离心，上清进行SDS-PAGE电泳。结果电泳发现转化了重组质粒的菌株有蛋白表达，所表达的蛋白质分相对分子质量为30000。结论目的基因克隆入宿主菌内，重组结核杆菌分泌蛋白Ag85B的成功表达为进行临床诊断试验奠定了基础。
作者：王宝林；翁心华；季朝能；潘孝彰；陈一平；李忠明；毛裕民 刊期： 2000年第04期
目的研究缓症链球菌外毒素蛋白的分子量、等电点、氨基酸组成及N-末端序列。方法将纯化的毒素蛋白用SDS-PAGE电泳，据低分子量标准蛋白质算出其相对分子质量；以微型聚丙烯酰胺等电聚焦(miniIEF)法进行此毒素蛋白的等点电测定；采用电印迹将SDS-PAGE电泳胶上的毒素蛋白转移到PVDF膜上，用Beckman344HPLC仪测定外毒素蛋白的氨基酸组成；用自动化蛋白质序列仪测定缓症链球菌外毒素N-末端氨基酸序列。结果缓症链球菌外毒素蛋白的相对分子质量为34000；测定毒素蛋白的等点电为6.2，是一种偏酸性蛋白；外毒素蛋白由17种氨基酸组成，其中谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸、门冬氨酸、赖氨酸、缬氨酸等氨基酸含量较高；缓症链球菌外毒素蛋白N-末端氨基酸序列为：VSNLSRGMGA，本毒素N-末端氨基酸序列与β溶血链球菌外毒素蛋白(SPEA、SPEB、SEPC)N-末端氨基酸序列不同。结论此外毒素蛋白的分子量、等电点、氨基酸组成和末端氨基酸序列均与其他β溶血性链球菌外毒素不同，可能是一种新的链球菌致热性外毒素。
作者：卢洪洲；翁心华；尹有宽；朱白；彭宝珍；龚祖埙 刊期： 2000年第04期
目的观察表皮生长因子受体(EGFR)单克隆抗体是否可诱导人肺癌SPC A1细胞凋亡，以进一步说明EGFR单抗所具有的抗肿瘤作用。方法以不同浓度的EGFR单克隆抗体干预培养人肺腺癌SPC A1细胞株72 h，收集癌细胞并提取DNA，采用凝胶电泳法和流式细胞仪分析细胞凋亡现象。结果凝胶电泳显示，单抗浓度为1.0 μmol/L时，可见明显的凋亡梯状条带出现。流式细胞仪分析发现，在EGFR单抗干预培养的各SPC A1细胞样本存在低荧光的亚G1细胞群，而在空白对照和正常非相关IgG对照样本均未见低荧光细胞群存在。结论表皮生长因子受体单克隆抗体可诱导人肺癌SPC A1细胞出现凋亡。
作者：陈小东；张尚权；严缘昌 刊期： 2000年第04期
目的了解顺铂对正常大鼠卵巢的毒性作用。方法使用体重为120～180 g的6周龄Wister大鼠，分组用不同浓度顺铂5、10 d腹腔内连续每日给药，实验结束予静脉采血，摘除双侧卵巢，测定并比较各组的卵泡数、卵泡成熟度以及血促卵泡刺激素(FSH)、雌二醇(E2)值。结果顺铂给药组随着用药量的增加和用药期间的延长，与正常对照组相比，卵泡数明显减少(P<0.05)，其中大卵泡数的减少尤为明显(P<0.05)，且血FSH升高(P<0.05)，E2下降(P<0.05)。结论顺铂对大鼠卵巢的毒性作用，与用药量、用药期间有关。
作者：齐聪 刊期： 2000年第04期
目的研究高密度脂蛋白-3(HDL3)介导大鼠皮肤成纤维细胞胆固醇(ch)流出机制。方法用N-乙酰咪唑修饰HDL，阻断HDL与细胞受体相互作用，观察其对HDL3介导细胞ch流出的影响。用FITC标记HDL示踪HDL3在介导细胞ch流出中自身代谢过程。结果牛血清白蛋白(对照组)介导4.74%细胞ch流出，HDL3组和N-乙酰咪唑HDL组分别为31.85%和8.41%。FITC-HDL3与细胞37-℃培养3h后，细胞内吞荧光强度(FS)占细胞结合FS的65.78%，其中93.5%FS存在于TCA可沉淀部分。细胞进一步37-℃培养2h后，细胞释放FS占内吞Fs80.77%，其中92.7%FS存在于TCA可沉淀部分。结论HDL3通过与细胞受体相互作用，介导细胞ch流出。其可能机制是HDL3通过受体进入胞内，在胞内不经历溶酶体分解过程。它接受胞内ch后通过逆向胞饮形式流出胞外。
作者：尹春燕；吴满平；楼滨；陈佩芳；杨小琪 刊期： 2000年第04期
目的运用慢性移植物抗宿主反应(GVHR)诱导系统性红斑狼疮(SLE)样小鼠模型，为进一步探索SLE发病机制奠定基础。方法将亲代BALB/C小鼠淋巴细胞经静脉途径输入(BALB/C×C57 BL/6)F1代小鼠体内，用ELISA测定IgG类抗dsDNA抗体和抗组蛋白抗体，用免疫荧光法检测抗核抗体(ANA)核型和免疫复合物沉积，用免疫印迹法测定抗可浸出核抗原(ENA)抗体。结果亲代淋巴细胞所致的慢性移植物抗宿主反应可诱导F1代小鼠产生高滴度的抗dsDNA抗体、抗组蛋白抗体等多种ANA，免疫小鼠的肾脏有显著的免疫复合物沉着。结论运用慢性GVHR诱导的SLE样小鼠模型，小鼠发病迅速，抗核抗体的产生与人SLE相似，有利于实验室进行有关SLE的研究。
作者：郭玲；吴厚生；胡新美 刊期： 2000年第04期
目的克隆与结核分支杆菌耐异烟肼密切相关的KatG基因，实现其在大肠杆菌中的表达并对其酶活性进行初步检测。方法构建含KatG基因的表达质粒pET24b-KatG，转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株，获得稳定的高表达菌株后对表达产物进行过氧化氢酶活性的初步检测。结果限制性内切酶分析结果显示所构建的pET24b-KatG表达质粒已成功克隆了KatG基因。含pET24b-KatG表达质粒的大肠杆菌在导丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导下表达，对表达产物进行SDS-PAGE，发现KatG表达产物相对分子质量约为80×103，表达产物约占总蛋白量的17.7%。表达产物检测具有过氧化氢酶活性。结论克隆并在工程菌中表达了异烟肼耐药密切相关的KatG基因，表达产物具备过氧化氢酶活性。可藉此方法研究结核分支杆菌的耐药机制。
作者：张文宏；翁心华；金詟；陈一平；陈澍；邬祥惠 刊期： 2000年第04期
目的利用基因工程技术原核表达人可溶性APO2L并复性纯化成具生物活性形式。方法用PCR方法扩增APO2LcDNA(密码子114～281)并克隆至表达载体，重组体转化大肠杆菌JF1125摇瓶发酵，筛选高表达克隆于发酵罐经温度诱导表达。经盐酸胍溶解，空气氧化法稀释复性，超滤，Q-SepharoseFF阴离子交换柱层析等方法纯化人可溶性APO2L。利用流式细胞术检测产物对细胞的诱导凋亡活性。结果表达产物约占菌体总蛋白质的20%并在菌体内形成了包涵体，SDS-PAGE鉴定表达产物相对分子质量约21000。经上述纯化蛋白质纯度达90%以上，蛋白质可溶性好。观察到人可溶性APO2L诱导人宫颈癌HeLa细胞发生明显的凋亡。结论原核表达产物与真核表达产物一样具明显的诱导肿瘤细胞凋亡活性。
作者：郑晓勇；官孝群；林芷英；宋后燕 刊期： 2000年第04期
楔状缺损是成年人的牙体病，发病率非常高，并且随着年龄增长发病率也逐渐增高。国内局部地区统计楔状缺损发病率高达51%，已经逐渐接近并超过龋病的发病率。笔者对上海地区1 071例中年以上人群进行楔状缺损发病率调查，目的在于了解上海地区的楔状缺损发病情况所造成的危害及楔状缺损与刷牙的关系。 材料和方法 选择来我院就诊的所有40岁以上人员，记录年龄、性别、缺失牙。用牙科探针检查每一颗牙齿的唇颊舌面，记录有楔形缺损的牙齿(调查不包括第三磨牙)，同时记录每个人的刷牙方法。
作者：陈莉莉 刊期： 2000年第04期
食管呼吸道瘘大多数由食管、气管、肺肿瘤所致，主要症状是进食后呛咳及严重的肺部感染。由食管癌所致的食管呼吸道瘘采用食管旷置、胃造瘘、化疗等姑息疗法预后极差。放置食管内支架是目前首选的疗法。传统的塑料支架质硬，口径大，操作困难，并发症率及死亡率较高。应用自扩性金属支架(self-expanding metallic stents,SEMS)则操作简单、安全，对食管癌性梗阻及食管呼吸道瘘有明显疗效。我院自1995年至今已为12例食管气管瘘病人放置了SEMS，临床效果满意。 对象和方法 对象本组12例病人，男性9例，女性3例，年龄41～72岁，平均61.2岁。均为食管鳞癌，病变长度4～7 cm，平均5.8 cm，其中食管气管瘘7例，食管支气管瘘5瘘(左侧3例，右侧2例)。所有病例均在内镜及X线食管造影下证实，全组病例均有进食梗阻和呛咳症状，吞咽困难5级评分平均2.7，5例伴有肺部感染。
作者：王群；谭黎杰；葛棣；徐正浪；仇德惠 刊期： 2000年第04期
目的应用重组和克隆技术在大肠杆菌中表达葡萄球菌肠毒素B(SEB)突变体。方法利用PCR和PCR致变技术从产SEB的标准株扩增SEB基因，与原核表达载体pTrc99A重组后引入大肠杆菌JM109。通过序列测定鉴定突变基因；用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和单向免疫扩散试验分别检测表达产物和表达量。结果获得了3株重组菌NJM109、M23JM109、M150JM109。测序表明，SEB-N序列与已报道的天然seb完全一致；SEB-M23第23位天冬酰胺密码子AAT发生定向突变，即由丝氨酸密码子AGT替代(N23S)；SEB-M150第150位氨基酸发生非定向突变，由苏氨酸密码子ACT突变为丙氨酸密码子GCT(T150A)。表达SEB-M150和SEB-M23的重组细菌裂解液经SDS-PAGE，在28000处可见有表达条带，非重组菌则无。单向免疫扩散试验和蛋白浓度测定表明，重组菌表达目的蛋白量为5μg/ml培养液，表达量占菌体总蛋白量的3.5%。结论获得了2株能表达SEB突变体的工程菌，为进一步作功能研究奠定了基础。
作者：俞红；钱利生；李雪萍 刊期： 2000年第04期
目的研究甘草次酸和甘草酸对离体大鼠肝细胞的膜效应及膜结合位点。方法应用体循环灌注胶原酶法分离正常大鼠肝细胞，在肝细胞培养中分别加入D-Hanks液、猪苓多糖、甘草酸及甘草次酸，24 h后收集细胞。分别作扫描电镜和透射电镜观察膜效应，应用胶体金探针法检测正常肝细胞表面甘草次酸及甘草酸的结合位点。结果扫描电镜示：加入甘草次酸的肝细胞表面微绒毛缺乏，呈现大量大小不等的光滑的囊泡状隆起；胶体金探针实验示：透射电镜下可见加入甘草次酸?牛血清白蛋白-胶体金颗粒探针的正常肝细胞表面覆有密集的黑色胶体金颗粒。结论甘草次酸和甘草酸对大鼠离体肝细胞具有明显的生物膜效应；肝细胞膜上有与甘草次酸、甘草酸相结合的位点；且以甘草次酸更为显著。
作者：顾云娣；周方成；杨山麦；张剑霞；金史；成令忠 刊期： 2000年第04期
目的探讨新生儿胃食管反流与胃排空的关系。方法通过99mTc-DTPA胃食管显像方法测定从1997年11月到1999年2月共77例相对正常新生儿的60 min胃排空率和胃食管反流指数，其中足月儿46例，早产儿31例，以此了解相对正常新生儿无症状反流的发生率，胃食管反流与胃排空的关系。结果足月儿无症状胃食管反流率为60.9%(28/46)，早产儿达83.9%(26/31)，差异有显著性。无症状反流指数平均为6.7%。足月儿或早产儿组中，有反流或无反流者，其胃排空率没有差异。结论新生儿中存在一定比例的无症状胃食管反流，尤其是早产儿；未发现胃食管反流指数与胃排空率之间的相关关系。
作者：黄瑛；邵肖梅；曾纪骅；赵瑞芳 刊期： 2000年第04期
目的探讨中性粒细胞对心肌复氧损伤的影响及L?精氨酸对中性粒细胞介导损伤的保护作用。方法采用体外培养的乳鼠心肌细胞，72 h后分4组：Ⅰ组单纯缺氧5 h，再给氧10 h；Ⅱ组在再给氧的同时加入中性粒细胞；Ⅲ、Ⅳ组在缺氧前分别先用1、5 mmol/L的L?精氨酸孵育2 h，再行缺氧复氧。实验过程中在相差显微镜下观察细胞形态、搏动状况，各组在实验开始前、缺氧后和再给氧后抽取上清液，测LDH，并在实验结束时计数各组的细胞存活率。结果Ⅲ、Ⅳ组缺氧后LDH值明显低于Ⅰ、Ⅱ组(分别为P<0.05和<0.01)；复氧后Ⅱ组LDH明显高于Ⅰ组(P<0.05)，而Ⅲ、Ⅳ组则明显好于Ⅱ组(P<0.01)；细胞存活率在Ⅱ组低于Ⅰ组(P<0.05)，Ⅲ、Ⅳ组则明显较高(与Ⅱ组相比P<0.01)。结论中性粒细胞可通过多种机制加重心肌的再给氧损伤，而L?精氨酸可拮抗中性粒细胞的损伤，起到良好的保护作用。
作者：郭克芳；姜桢；郭棋；杨英珍 刊期： 2000年第04期
目的研究高胆固醇血症在自发性高血压大鼠(SHR)肾脏损害中的作用及其作用机制。方法将14只23周龄的SHR随机分在对照组和高胆固醇组，后者喂以4%胆固醇+1%3号胆盐+7%猪油混合加工成的大鼠饼干。测量每只大鼠的体重、血压、24h尿蛋白排泄量、血、尿NO及肾皮质TGFβ1-mRNA的表达(RT-PCR法)。实验结束时，取其肾脏送HE光镜检查及电镜检查。结果高胆固醇组的尿蛋白排泄高于对照组，血、尿NO低于对照组，肾皮质TGFβ1-mRNA表达增强。形态学检查发现，高胆固醇组大部分肾小球局灶节段硬化，小管扩张，可见蛋白管型和间质炎症细胞浸润；电镜下可见系膜细胞增生和吞噬脂滴。结论高胆固醇血症加重SHR的肾脏损害可能通过TGFβ1参与的小球硬化途径。
作者：竺艳娟；傅辰生；庄亚敏；蒋金根；廖履坦；丁小强 刊期： 2000年第04期
复旦学报（医学版）杂志
主管:中华人民共和国教育部
主办：复旦大学
