张镝；周颖
目的:建立稳定高表达人野生型DNA聚合酶beta(polβ)的食管癌细胞系Ec9706,并对该细胞系的生物学特征进行分析.方法:脂质体转染法将人野生型polβ重组绿色荧光蛋白表达载体pEGFP-AC3转染入Ec9706细胞,荧光显微镜观察转染效果,经G4l8筛选得到稳定转染细胞系.RT-PCR方法检测转染细胞polβmRNA的表达水平,绘制生长曲线,软琼脂实验测细胞克隆形成率,MTr法测转染前后细胞对顺铂的敏感性.结果:荧光显微镜下转染细胞荧光强,转染效率高,RT-PCR结果表明转染细胞的polβ表达较空载体转染细胞、对照细胞增加.转染前后细胞生长速度接近,转染细胞周期分布发生改变,多被阻滞在S期,在软琼脂实验中克隆形成率增加,对顺铂的敏感性降低.结论:成功建立了稳定高表达人野生型polβ的Ec9706细胞系,polβ的高表达与细胞的细胞周期分布、恶性增殖能力及耐药性有一定关系.
作者：李敏；付庆；赵国强；董子明 刊期： 2007年第02期
SARS病毒在实验室造成人员感染事件后,世界各国都意识到了实验室生物安全管理的重要性,2004年WHO出版了《实验室生物安全手册》(第三版),加拿大出版了《实验室生物安全指南》.我国也先后颁布了《病原微生物实验室生物安全管理条例》(2004)、《国家突发公共事件总体应急预案》(2006)、《人间传染的病原微生物名录》(2006)、《可感染人类的高致病性病原微生物菌(毒)种或样本运输管理规定》(2006)、《实验室生物安全通用要求》GB19489-2004、《CNAL实验室生物安全认可准则》(2005),使实验室生物安全的管理更加科学、规范.
作者：徐东群 刊期： 2007年第02期
目的:建立一种快速、准确、特异、定量检测金黄色葡萄球菌及其肠毒素A、D的方法并探讨肠毒素在食物中毒引起腹泻中的意义.方法:选择femB、SEA和SED基因分别作为金黄色葡萄球菌菌株、肠毒素A、肠毒素D的靶序列,设计合成引物和探针;收集食物中毒导致腹泻患者粪便标本487份,并对其进行检测分析.结果:采用荧光聚合酶链反应检测金黄色葡萄球菌和肠毒素A的灵敏度为1.0×102拷贝,而检测肠毒素D的灵敏度为1.0×103拷贝;487份粪便标本中检出金黄色葡萄球菌femB基因72例(14.8%),检出产肠毒素A菌株为11例(15.3%,11/72),产肠毒素D菌株为9例(12.5%,9/72),同时产肠毒素A、D菌株1例(1.4%,1/72).结论:应用Taqman探针实时荧光PCR技术能够快速、准确检测金黄色葡萄球菌及其肠毒素,适合于大样本筛查.
作者：张红河；范建中；董晓勤；张卫英；王贤军；陈瑜 刊期： 2007年第02期
目的:建立Taq Man-MGB探针Real-time荧光PCR快速检测单增李斯特菌技术.方法:在对单增李斯特菌invA序列进行分析、比较基础上,设计一对特异性Taq Man-MGB探针法引物及探针,通过Real-timePCR反应条件和反应体系的优化,实现对单增李斯特菌的快速检测;用克隆到pMD18-T载体上的李斯特菌invA基因阳参片段及不同菌株、食品标本验证方法的特异性和敏感性.结果:方法的灵敏性高,其循环阈值与模板浓度的对数值具有很好的对应关系,低可检测57个拷贝数,经18 h增菌,可检测低至4.5 cfu/ml的细菌;特异性强,检测6株单增李斯特菌标准株和100株单增李斯特菌样品分离株的PCR循环域值(CT值)均小于25,而90株威氏李斯特菌、英诺克李斯特菌、绵羊李斯特菌以及非李斯特菌PCR循环域值(CT值)大于35;快速,快1 h可出结果,实际样品20 h可出结果,而常规细菌培养法需要一周以上;对103份速冻米面食品进行检测,13份阳性,与常规方法无显著性差异(P＞0.05).结论:Taq Man-MGB探针的单增李斯特菌Real-time荧光PCR检测方法具有特异性强,敏感性高,易操作等优点,可推广应用.
作者：梅玲玲；王晶；孟真；朱敏；高筱萍 刊期： 2007年第02期
目的:建立保健食品中酪蛋白磷酸肽的高效液相色谱测定方法.方法:样品经处理后,采用不同比例的乙腈、0.1%醋酸溶液梯度洗脱,用带有紫外检测器的高效液相色谱仪测定.结果:方法检测限为10 μg/ml,相对标准偏差为3.2%,回收率为91%～103%.结论:本方法前处理简便、检测灵敏度高,适用于保健食品钙片中酪蛋白磷酸肽含量的测定.
作者：田随安；张向兵；李永利 刊期： 2007年第02期
目前,人们对实验室质量管理工作越来越重视,实验室质量管理工作日益科学化、规范化.实验室质量体系内部审核(以下简称内审)是质量管理工作的重要组成部分,是确保实验室各项质量活动处于受控状态的重要手段,是质量体系自我完善、自我提高的保证.
作者：陈欣然；常战军；庞健 刊期： 2007年第02期
目的:建立自来水中8种氨基甲酸酯农药(仲丁威,异丙威,速灭威,甲萘威,灭多威,残杀威,苯氧威,猛杀威)的液相色谱-串联质谱分析方法.方法:水样在离心或液液萃取后通过C18色谱柱,以含0.2%的甲酸的甲醇和0.2%的甲酸溶液进行梯度洗脱,采用电离喷雾电离方式(ESI+),通过多反应监测(MRM)定量.结果:在20 min完成分析,离心处理后8种农药在0.05～5 μg/ml浓度范围内线性相关系数＞0.9973.加标回收率为96.67%～111.52%(添加水平分别为0.1,1和5 μg/ml),相对标准偏差5.4%～14.2%,低检出限介于0.02～0.03 μg/ml.对0.1 μg/L的加标样在液液萃取后回收率在75.5%～128.3%,相对标准差4.7%～31.5%.结论:本法灵敏度高,选择性强,分析时间短,适合于对水中该8种氨基甲酸酯类的分析.
作者：韩嘉媛；赵人(王争)；乔善磊；张淳文；周建伟 刊期： 2007年第02期
目的:自来水厂消毒工艺过程中产生的氯仿、四氯化碳对人的健康有严重的危害,需建立灵敏度高的检测方法监测饮用水中的氯仿和四氯化碳.方法:建立了顶空采样用质谱作为检测器并采用选择离子监测的方法检测饮用水中的氯仿和四氯化碳.结果:氯仿和四氯化碳浓度在0～80 μg/L范围内,线性较好,相关系数分别为0.9993和0.9991;氯仿的低检出浓度为0.05 μg/L,四氯化碳的低检出浓度为0.03 μg/L,跟国标方法相比降低了两个数量级,灵敏度大大提高.结论:实验表明本方法操作简单,准确度和精密度较高均符合检测要求,回收率范围93.6%～106.4%,RSD为5.0%～7.5%之间.
作者：任红波 刊期： 2007年第02期
目的:了解我市1995～2005年间从业人员的梅毒感染情况.方法:采用快速环状卡片测试方法(RPR)和梅毒螺旋体血球凝集试验(TPPA)对80 562例从业人员进行血清梅毒抗体检测分析.结果:梅毒抗体阳性306例,阳性率37.98/万,其中男性83例,女性223例,以娱乐业从业人员阳性率高为50.47/万.结论:我市从业人员梅毒感染从1995～2002年呈逐年上升趋势,2003至2005年有所回落,阳性率同1998年持平.
作者：朱国良；平国华；周伟艳；朱旦蓉；姚漫红 刊期： 2007年第02期
水中铜的检验方法首选原子吸收分光光度法,直接测定时仅限于较高浓度的含量(＞0.2 mg/L)[1],对于低含量铜的检测则必须通过APDC-MIBK络合萃取后才能满足实验要求,而络合萃取法操作较繁琐,且燃烧有机溶剂MIBK造成实验室污染,对工作人员有一定危害.为了减少样品处理过程的环节,节约试剂,提高效率,本文采用简单的酸浓缩法测定质控水样中低含量铜,取得准确可靠的结果,变异系数为0.48%,回收率为98.9%～101.0%,现报告如下.
作者：欧阳云 刊期： 2007年第02期
黄酮是一类重要保健食品基料,功能为自由基清除剂.黄酮所有的还原性酚基是其发挥清除血脂作用的化学基础.针对目前市场上含黄酮成份的调节血脂和预防骨质疏松保健食品的盛行,准确检测保健食品中总黄酮含量,对保障产品质量具有重要意义[1].
作者：李松青；陆珩；许宁 刊期： 2007年第02期
目的:为了解室内游泳池中弧菌科病原菌的分布情况,预防和控制病原菌在游泳池中的传播流行.方法:采用碱性胨水增菌、TCBS平板分离和系统生化鉴定分离病原菌.并对分离到的菌株进行小白鼠毒力试验及药敏试验.结果:60份游泳池水中有25份水样检出了弧菌科病原菌,其中以嗜水气单胞菌为优势菌,其次为温和气单胞菌与非O1群霍乱弧菌.小白鼠毒力试验等证明了这些菌株都具一定的毒力.药敏试验结果表明这些弧菌科细菌存在一定的耐药现象,特别是对羟氨苄青霉素100%耐药,且嗜水气单胞菌、非O1群霍乱弧菌对头孢噻吩、头孢西丁也100%耐药.结论:弧菌科病原菌在室内游泳池水中具有较高的检出率.常规方法结合病原菌分析,能综合评价游泳池水的卫生状况.
作者：章乐怡；李毅；李小春；陈慧燕；洪程基；王良怀；吴跃进 刊期： 2007年第02期
2005年5月15日,国际标准化组织(ISO)和国际电工委员会(IEC)联合发布了ISO/IEC17025:2005《检测和校准实验室能力的通用要求》,取代ISO/IEC17025:1999.CNAL依据等同采用ISO/IEC17025:2005原则,于2005年9月1日正式颁布实施《检测和校准实验室认可准则》(CNAL/AC01:2005),取代CNAL/AC01:2003《检测和校准实验室认可准则》(等同ISO/IEC17025:1999).
作者：张镝；周颖 刊期： 2007年第02期
目的:建立简便、准确、绿色的食品中蛋白质的批量测定方法.方法:利用微波溶样技术处理样品,并与乙酰丙酮和甲醛显色定量.结果:微波消解-乙酰丙酮甲醛分光光度法与国标凯氏定氮法相比测定结果差异无显著性,该方法线性范围在5～100 μg/10 ml,相关系数r=0.9997,检出限为0.546 μg/10 ml,相对标准偏差(RSD)为1.29%～2.21%,加标回收率93.3%～103%.结论:微波消解-乙酰丙酮甲醛分光光度法测定食品中蛋白质方法简便、试剂用量少且环保,方法具有较好的准确度和精密度,适合于批量蛋白质样品的测定.
作者：王永根；王剑波；陈淑莎；沈永伟 刊期： 2007年第02期
目的:了解大兴区食品和公共场所从业人员HBsAg阳性携带的状况,更好地为食品和公共场所的卫生监督提供依据.方法:取受检者静脉血,ALT采用全自动生化分析仪速率法,HBsAg采用酶联免疫吸附试验(ELISA).结果:大兴区企业单位参加2004.6～2006.6年度健康体检的食品和公共场所从业人员共44 182人,HBsAg阳性总检出率为2.05%,行业之间有显著性差异,食品卫生行业的检出率明显高于公共场所(食品行业占73.2%,公共场所占26.8%);性别之间也有显著性差异,男性明显高于女性(男性占53.8%,女性占46.2%);属地之间有显著性差异,外地人口明显高于北京本地(外地人口占84.8%,北京本地占15.2%);各年龄组之间也有显著性差异,尤其以21岁以下的小年龄组HBsAg阳性检出率较高;单纯ALT异常总检出率为1.96%,行业之间有显著性差异,食品卫生行业的检出率明显高于公共场所(食品行业占61.8%,公共场所占38.2%);性别之间也有显著性差异,男性明显高于女性(男性占80.9%,女性占19.1%);属地之间有显著性差异,外地人口高于北京本地(外地人口占57.9%,北京本地占42.1%);各年龄组之间也有显著性差异,尤其以21岁以上的大年龄组单纯ALT异常检出率较高.年度之间无显著性差异.结论:加强宣传力度,使食品生产经营单位和每一个食品从业人员为了自己和人民群众的身体健康,重视并坚持每年进行的健康检查.
作者：付桂英；秦红；王海云 刊期： 2007年第02期
目的:验证采用大型水蚤检测农药和无机砷污染的饮用水和地表水源水毒性的可行性.方法:采用大型水蚤的急性毒性试验方法检测饮用水和地表水源水的毒性,用SPSS12.0统计分析计算大型水蚤的LC50.结果:大型水蚤能够灵敏检测饮用水和地表水源水的0.2%高渗甲维盐和25%毒死蜱氯氰菊酯乳液污染,在农药浓度达到微克时,仍然有响应;对砷酸钠的敏感度相对较低,但仍然可以达到毫克.结论:大型水蚤的急性毒性测试方法可以用来检测饮用水和地表水源水中农药和无机砷的污染.
作者：潘力军；高世荣；孙凤英；王俊起 刊期： 2007年第02期
碘是人体必须的微量元素之一,缺乏会导致碘缺乏病的发生.尿碘水平是监测和评价人群或个体碘营养状况的重要指标之一,可以反映机体内碘的水平,是诊断和监测碘缺乏病的一个重要依据[1].通过尿碘质控对发现和分析实验中出现误差的原因,准确测定尿碘含量具有重要的意义.我们采用修订的尿中碘的过硫酸铵消化-砷铈催化分光光度测定方法[2],进行外质控样的分析测定,取得了较好的成绩.
作者：吕荣春；董永涛；朱桂爱 刊期： 2007年第02期
目的:建立用双波长催化动力学光度法测定痕量铁的新方法.方法:在硫酸介质中,利用铁催化过氧化氢氧化甲基蓝和茜素红褪色反应,分别在390 nm和610 nm处测量催化体系和非催化体系的吸光度的变化,用双波长催化光度法测定痕量铁离子.结果:测定铁离子的线性范围:0.050～1.20 μg/25 ml,检测限:3.2×10-11 g/ml.结论:该法简单,灵敏度高,选择性好,可用于水和人发中痕量铁的测定.
作者：王晨璐；孙登明；崔曼 刊期： 2007年第02期
目的:探讨大肠菌群快检纸片的研制方法及其检测水中大肠菌群的可行性.方法:大肠菌群快检纸片制作、包装和使用;以国标试管发酵法为对照,对大肠菌群快检纸片法的特异性、敏感性、抗干扰和各种类型水样进行大肠菌群平行检测,比较两法的符合率.结果:大肠菌群快检纸片法检测水中大肠菌群的效果与国标试管发酵法结果无显著差异,符合率97.1%.结论:大肠菌群快检纸片法可用于检测水中的大肠菌群.
作者：马乐好；阚方琦 刊期： 2007年第02期
目的:了解中老年旅行者的血脂水平,为有关疾病的早期预防提供科学依据.方法:于2005年分别对137名55～80岁的中老年旅行者进行血清血脂4项(总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇及低密度脂蛋白胆固醇)检测.结果:血脂异常总检出率为58.3%;男、女性总胆固醇升高检出率分别为6.6%和11.6%,女性高于男性;甘油三酯升高检出率分别为21.6%和10.3%,男性高于女性;低密度脂蛋白胆固醇升高检出率分别为51.6%和64.9%,女性高于男性.结论:通过保健体检对血脂水平异常的中老年旅行者尤其是更年期妇女给予正确的防治知识,有利于预防或减少心血管疾病的发生,提高中老年旅行者晚年的生活质量.
作者：谭华 刊期： 2007年第02期
中国卫生检验杂志
主管:中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会
主办：中华预防医学会
