刘卫青;张晓晔;朱敏;秦秉玉
目的:检测喉鳞状细胞癌(喉鳞癌)组织中缺氧诱导因子-1(HIF-1)和人表皮生长因子受体2(HER-2)蛋白的表达.方法:采用免疫组化法检测78例喉鳞癌组织和23例癌旁正常组织中HIF-1、HER-2蛋白的表达,分析二者与临床病理参数的关系.结果:喉鳞癌组织中HIF-1、HER-2蛋白的阳性表达率分别为71.8%、80.8%,均高于癌旁正常组织(30.4%,34.8%,χ2=12.947和17.990,P均<0.05);HIF-1、HER-2蛋白的表达与组织分化程度、颈淋巴结转移及临床分期均有关(P<0.05).喉鳞癌组织中HIF-1和HER-2蛋白的表达正关联(rP=0.385,P<0 001).结论:HIF-1和HER-2蛋白可能在喉鳞癌的发生、分化和转移中起协同作用.
作者:巴云鹏;张晓;宋瑞彪 刊期: 2013年第01期
目的:建立高效液相色谱手性固定相法拆分联萘酚对映体的新方法.方法:采用正相高效液相色谱法,CHIRALPAK IC柱(250 mm×4.6 mm,5 μm)对联苯酚对映体进行拆分,流动相为正己烷异丙醇(6040~955,VV)和正己烷无水乙醇(6040~955,VV);柱温15~35 ℃,流速0.4~1.0 mL/min,紫外检测波长254 nm.根据拆分结果确定佳色谱条件.结果:手性分离的佳色谱条件为正己烷无水乙醇=8020(VV),流速0.8 mL/min,柱温25 ℃,联萘酚对映体在6 min内分离度达到2.43.结论:CHIRALPAK IC柱可以快速、高效地拆分联萘酚对映体,该方法可用于联萘酚的分离及其在不对称合成中光学纯度的快速检测.
作者:马思佳;贾欣;孙慧斌;金建闻;庞丽;陈政;杜斌;张振中 刊期: 2013年第01期
目的:分析预备留学本科生自尊、压力应对方式和幸福感特征,评估该群体整体心理状况.方法:采用分层随机整群抽样的方法共调查大一到大四本科生330人,其中非预备留学本科生243人,预备留学本科生87人.通过半结构化访谈以及自尊量表、压力应对方式问卷和幸福感指数量表收集数据.结果:预备留学本科生面临的压力较多来源于语言考试和学校申请,其自尊水平高于非预备留学本科生(t=5.301,P=0.022);但幸福感程度与非预备留学本科生比较,差异没有统计学意义(t=0.993,P=0.320);面对压力时,更多采用解决问题和求助等积极的应对方式,但也经常会采用幻想的消极应对策略,女生比男生更多地会采用求助的方式来解决问题(t=2.661,P=0.009).结论:预备留学本科生主要的压力来自于对适应国外学习的担心;其自尊感水平较高;积极的压力应对方式是自尊和幸福感的部分中介变量.
作者:王中杰;耿耀国;王宇中 刊期: 2013年第01期
目的:探讨伴有胃肠动力障碍的重症急性胰腺炎(SAP)大鼠结肠黏膜下神经节一氧化氮合酶(NOS)阳性神经元的改变.方法:20只SD大鼠随机分为假手术组与模型组,用逆行胰胆管注射牛磺胆酸钠的方法制作大鼠SAP模型.24 h后,测定2组小肠推进比、结肠蠕动频率、粪便含水量,并进行胰腺病理评分;制作结肠黏膜下神经丛全层标本,运用免疫荧光技术观察黏膜下神经节NOS阳性神经元的变化.结果:与假手术组相比,模型组小肠推进比减少[(41.04±4.36)% vs(14.54±2.30)%,t=15.477,P<0.001],结肠蠕动频率减慢[(13.40±1.35)min-1 vs (4.00±0.93) min-1,t=16.748,P<0.001],粪便含水量降低[(41.56±6.69)% vs(12.98±6.56)%,t=8.869,P<0.001],胰腺病理评分增高[(1.20±0.63) vs (15.75±1.72),t=23.569,P<0.001],但其结肠黏膜下NOS阳性神经元计数无明显改变[(22.49±5.14)% vs(26.36±2.57)%,Z=-1.955,P=0.055].结论:伴胃肠动力障碍的SAP大鼠结肠黏膜下NOS阳性神经元可能未发生明显重塑.
作者:袁园;林中;李小玲 刊期: 2013年第01期
恶性肿瘤导致的死亡人数在发展中国家高居第二位,而在发达国家更是高居榜首,是发达国家的首要死亡原因[1],严重威胁着人类的健康及生存.目前,恶性肿瘤的诊断与治疗水平已有了极大提高,化疗、放疗、手术治疗、生物治疗等综合治疗手段的应用已经极大改善了恶性肿瘤的治疗效果,使肿瘤患者的生存率明显提高.
作者:岳冬丽;韩交玲;关方霞;张毅 刊期: 2013年第01期
目的:探讨用乳癌组织中E-cadherin和CD44V6的表达水平预测乳癌腋窝淋巴结转移的价值.方法:用免疫组化法检测98例乳癌(浸润性导管癌)患者手术切除标本中E-cadherin和CD44V6的表达情况,以术后病理检查结果为金标准,根据E-cadherin和CD44V6的表达水平预测腋窝淋巴结转移情况,分析单一因素和联合模式预测的灵敏度、特异度、误诊率和漏诊率等指标.结果:E-cadherin单一因素预测腋窝淋巴结转移的灵敏度为60.71%,漏诊率为39.29%,特异度为92.86%,误诊率为7.14%;CD44V6单一因素预测腋窝淋巴结转移的灵敏度为64 29%,漏诊率为35.71%,特异度为61.91%,误诊率为38.10%;E-cadherin和CD44V6串联模式预测的灵敏度为41.07%,漏诊率为58.93%,特异度为95.24%,误诊率为4.76%;E-cadherin和CD44V6并联模式预测的灵敏度为83.93%,漏诊率为16.07%,特异度为59.52%,误诊率为40.48%.结论:E-cadherin单一因素和E-cadherin与CD44V6串联模式预测乳癌淋巴结转移的特异度高,可为腋窝淋巴结清扫术的取舍和术后治疗方案的选择提供帮助;E-cadherin与CD44V6并联能提高淋巴结转移的检出率.
作者:孟新;张程达;牛雅萱;刘秀玮;王蒙;张卫东 刊期: 2013年第01期
目的:探讨胃腺癌组织中SLP-2蛋白的表达情况及沉默SLP-2对胃腺癌SGC7901细胞增殖的影响.方法:采用免疫组化法检测45例胃腺癌患者的癌组织、配对癌旁正常胃黏膜组织中SLP-2蛋白的表达情况,分析其与临床病理特征的关系;将SLP-2 siRNA转染SGC7901细胞,采用MTT法和流式细胞术检测转染后细胞的增殖状况及细胞周期.结果:SLP-2蛋白在胃腺癌组织中的阳性表达率(68.9%,31/45)高于癌旁正常组织(26.7%,12/45)(χ2=15.429,P<0.001).胃腺癌组织中SLP-2的表达与淋巴结转移及TNM分期密切相关(校正χ2=4.784,5 318,P均<0.05).SLP-2 siRNA转染SGC7901细胞后,细胞增殖活性降低;G1细胞期增多,S期细胞减少(F=14 459,11.825,P均<0.05).结论:SLP-2参与了胃腺癌的发生、发展.
作者:张剑;李建生;吴敏;赵晔;张自森 刊期: 2013年第01期
目的:对先天性静止性夜盲症(CSNB)候选基因附近的6个STR基因座在河南汉族人群中的遗传多态性分布进行群体遗传学研究.方法:取100名健康无关个体的河南汉族人群血样,提取DNA,应用PCR结合非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳及银染技术,对CSNB候选致病基因RHO、PDE6B和GNAT1附近的D3R1、D3R2、D4P1、D4P2、D3G1及D3G2等6个STR基因座进行基因型分析.结果:6个STR基因座的基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡定律,杂合度在0.660~0.800,多态性信息含量为0.550~0.730(≥0.5),个体识别率在0.761~0.891(>0.7),D3R1、D4P2、D3G2 的非父排除率>0.5.结论:这6个基因座是一组良好的遗传标记,可用于CSNB致病基因的定位;D3R1、D4P2及D3G2在法医学方面具有一定的应用价值.
作者:杨洋;朱运良 刊期: 2013年第01期
目的:探讨子痫前期(PE)患者血浆对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖及溶血磷脂酸(LPA)受体蛋白Edg4表达的影响.方法:体外培养HUVEC,取对数生长期的细胞分为对照组、正常晚孕组、轻度PE组和重度PE组4组,分别用RPMI 1640培养液、含体积分数20%正常晚期孕妇血浆、20%轻度PE患者血浆和20%重度PE患者血浆的RPMI 1640培养液继续孵育48 h.应用MTT比色法检测细胞增殖能力,应用免疫细胞化学SP法和RT-PCR检测细胞Edg4蛋白及其mRNA表达水平.结果:4组细胞增殖抑制率及Edy4蛋白、mRNA的表达差异均有统计学意义(F=104.200,χ2=32.941,F=5 803.360,P均<0.05).与对照组和正常晚孕组相比,轻度和重度PE组HUVEC增殖抑制率增大,Edg4蛋白及mRNA表达明显升高,且重度PE组较轻度PE组升高更明显(P<0.05).结论:PE患者血浆LPA水平升高可能是引起血管内皮细胞损伤的原因之一.
作者:李留霞;李秀芳;张兰兰;张毅 刊期: 2013年第01期
目的:构建杜氏盐藻叶绿体转化载体pUC-chlN 1622-氯霉素乙酰转移酶(CAT).方法:以光非依赖性的原叶绿素酸酯还原酶chlN基因为同源片段,以CAT抗性基因为选择标记,构建盐藻叶绿体转化载体pUC-chlN 1622-CAT,并通过电击法转入野生型盐藻细胞,筛选转化藻株.结果:在氯霉素浓度为300 mg/L的选择压力下,野生型盐藻10 d左右死亡,转化藻仍正常生长,得到表达氯霉素抗性的盐藻转化株.结论:以chlN基因作为同源片段构建盐藻叶绿体转化载体是可行的.
作者:张汇征;崔柳青;潘卫东;薛乐勋 刊期: 2013年第01期
肺癌的发病率和病死率呈逐年上升趋势,其传统的化疗、放疗方法和近年提出的肿瘤细胞免疫治疗、放射免疫治疗均给患者及社会带来了极大的经济负担[1-2].如何实现肺癌的个体化治疗已逐渐成为肿瘤治疗的新方向[3-4].近年来出现的表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)酪氨酸激酶抑制剂(如吉非替尼、厄洛替尼)备受关注.
作者:孙丽娟;付群;李宏云;秦超;冯永海 刊期: 2013年第01期
目的:评价血浆脂蛋白相关磷脂酶A2(LP-PLA2)水平对冠状动脉粥样硬化严重程度及不良事件风险的预测价值.方法:对45例急性冠脉综合征(ACS)患者和35例稳定性心绞痛(SA)患者行冠脉造影(QCA)检查和IVUS-VH分析,同时行血浆LP-PLA2水平测定.结果:ACS组斑块坏死核心、钙化成分比例较SA组高(t=5.655,10.974,P<0.001).ACS组患者冠状动脉病变处以正性重构为主,SA组以负性重构为主(χ2=40.555,P<0.001).ACS组患者血浆LP-PLA2水平较SA组显著升高(t=2.934,P=0.004).ACS和SA组患者随着Gensini积分增加,血浆LP-PLA2水平均逐渐增高(F=4.227,3.783,P<0.05).ACS患者斑块中坏死核心比例与血浆LP-PLA2水平呈明显正相关(r=0.439,P=0.003).结论:血浆LP-PLA2水平可用以评价斑块性质及冠脉狭窄严重程度.
作者:牛原源;李新华;赵晓燕;武丽娜;吴世陶;吴摇斐;李文龙 刊期: 2013年第01期
铬在自然界中分布广泛,六价铬[Cr(Ⅵ)]已被证实具有致癌性,其所致的肺癌是8种职业性肿瘤之一.有研究[1-3]表明,活体细胞内90%的抗坏血酸(ascorbic acid,Asc)参与Cr(Ⅵ)的还原代谢,且是Cr(Ⅵ)的主要还原剂.机体肺细胞内Asc的平均水平为1.3 mmol/L[4],但在体外细胞培养中含量却非常低[5-6],脱氢抗坏血酸(dehydroascorbic acid,DHA)孵育可以使细胞内氧化形成Asc,使其达到或接近机体正常生理浓度[7].Reynolds等[8]发现DHA孵育H460和IMR90细胞90 min后,再用Cr(Ⅵ)染毒细胞,细胞的急性毒性增强.作者用DHA孵育A549细胞后,观察重铬酸钾(K2Cr2O7)对A549细胞的增殖及毒性作用,探讨DHA在K2Cr2O7致A549细胞损伤中的作用.
作者:画宝勇;马丽华;李时恩 刊期: 2013年第01期
目的:用酵母双杂交的方法筛选与杜氏盐藻驱动蛋白Ⅱ动力亚基(FLA8)C端相互作用的蛋白.方法:设计特异性引物(上下游分别引入EcoRⅠ和BamHⅠ酶切位点),扩增FLA8 C端(433个氨基酸)cDNA,与穿梭载体pGBKT7连接以构建诱饵表达载体,然后转化酵母菌株Y187和AH109,Western blot法检测诱饵蛋白在转化酵母菌株内的表达.通过自激活实验和毒性实验检测诱饵表达载体是否适合利用酵母双杂交的方法筛选相互作用蛋白.转化诱饵质粒的酵母菌株Y187与AH109(文库菌)杂交,待三叶形合子形成后用营养缺陷型培养基和α-半乳糖苷酶活性实验筛选阳性克隆,并对阳性克隆进行测序.结果:成功构建了pGBKT7-FLA8-C双杂交诱饵载体;经检测该载体的表达产物对Y187和AH109均无自激活和毒性作用,可用于酵母双杂交实验;杂交后筛选得到2个阳性克隆,测序结果显示为鞭毛结合蛋白107(FAP107)和含蛋白结合结构域的预测蛋白.结论:成功筛选得到了与杜氏盐藻驱动蛋白Ⅱ动力亚基C端相互作用的蛋白,分别为FAP107和预测蛋白.
作者:李靓;崔柳青;王瑞莉;毛丽红;韩康;柴丹丹;薛乐勋 刊期: 2013年第01期
目的:建立肝癌细胞中C60含量测定的荧光分析法.方法:采用荧光分光光度法,以220 nm为激发波长,在371 nm发射波长处测定肝癌细胞中C60的荧光强度.肝癌细胞经破碎、离心处理后进行测定,以减小蛋白质和酶的干扰.结果:该方法检测肝癌细胞中C60含量的标准曲线为I=2.240 3C+44.188(r=0.995 8,P<0.05),检测范围在1.28~46.08 mg/L,检测限为0.275 mg/L,平均回收率为86.5%,RSD为10.8%.结论:该方法简便、准确、快速,可用于肝癌细胞中C60的定量分析.
作者:姚寒春;孙敏;张振中 刊期: 2013年第01期
目的:构建含人乳头瘤病毒16型(HPV16)L1基因的乳酸杆菌分泌表达载体.方法:从培养的CasKi细胞中提取DNA为模板,经PCR得到HPV16 L1衣壳蛋白基因,将其连接入乳酸杆菌分泌表达载体pVE5523质粒中,并转化入Top10菌中保存.结果:构建的HPV16 L1-pVE5523重组表达载体经PCR鉴定正确;获得的目的基因片段经测序与GenBank公布的HPV16 L1基因序列符合.结论:成功构建了HPV16 L1-pVE5523表达载体.
作者:罗波;段素群;郑小莉;毛樱逾 刊期: 2013年第01期
目的:探讨AHDC1基因变异及临床病理指标对食管癌高低发区患者生存期的影响,加深对食管癌预后分子机制的认识.方法:采用入户家访、现场问卷普查、电话随访和住院病理核查等方法收集3 478例食管癌患者的临床病理资料和死亡情况;采集每例患者空腹外周静脉血5 mL,采用Taqman基因分型技术检测AHDC1基因rs4908343位点的变异情况.结果:Kaplan-Meier分析显示AHDC1基因AA/AG型患者5 a生存率高于GG型患者,浸润黏膜层患者高于浸润肌层和浆膜层患者,无淋巴结转移患者高于有淋巴结转移患者,早期患者高于中晚期患者,手术治疗的患者高于非手术患者,食管癌高发区患者高于低发区患者(χ2=6.650、52.756、39 087、61 314、75 635、175.205,P均<0.05);Cox回归模型分析提示AHDC1基因GG型[RR(95%CI)=1.197(1.008~1 421)]、中晚期[RR(95%CI)=2.004(1.358~2.956)和3.594(2.392~5.399)]及低发区[RR(95%CI)=2.891(2 243~3.726)]影响食管癌患者的预后(P均<0.05).结论:AHDC1基因型、临床分期及高低发区是影响食管癌预后的重要因素.
作者:李洪雷;范宗民;王伟鹏;周胜理;王亚豪;黄静;董金成;李贝;郭金生;张连群;王立东 刊期: 2013年第01期
血管生成在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的发生和发展中起非常重要的作用.参与血管发生过程的细胞因子多种多样,血管内皮生长因子(vascular epithelial growth factor,VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)是其中重要的.
作者:刘少平;钱文军;茅卫东 刊期: 2013年第01期
目的:应用抑制性消减杂交技术初步筛选志贺菌基因转移耐多药相关基因.方法:以志贺菌基因转移耐多药株DNA为检测子,以其敏感株DNA为驱赶子,构建DNA消减文库,采用PCR鉴定及斑点杂交进行筛选,并随机挑取阳性克隆测序,所得结果在GenBank中进行同源性比较和分析.结果:成功构建了志贺菌基因转移耐多药株的特异性DNA消减杂交文库.选取部分阳性克隆进行杂交筛选,其中5个测序成功,与GenBank数据库进行初步比对,3个可能为新基因,2个为已知基因(Tn3926转座子部分的转座酶基因及23S rRNA核糖体核糖核酸).结论:成功构建了志贺菌基因转移耐多药株的特异性DNA消减杂交文库并获得了其耐多药相关基因,提示转座子介导的耐药机制可能在志贺菌基因转移耐多药中起重要作用.
作者:宋春花;王颖芳;段广才;郗园林 刊期: 2013年第01期
目的:分析西部民族地区高校大学生城镇居民医疗保险(城居医保)的参保情况及其影响因素.方法:采用分层随机整群抽样的方法抽取627名西部民族地区某高校在校大学生作为样本,采用问卷调查方法对城居医保的参保情况进行调查.结果:64.9%的学生不了解城居医保,74.8%的学生认为政府、学校、学生三方共同承担医保费用,大学生城居医保的参保率为38.4%,未参保的主要原因有觉得没有必要参加(28.3%)、参加了其他类型的医疗保险(23.3%)、家庭经济状况(21.4%)等,59.7%的参保大学生对城居医保的满意程度感觉一般,不满意的方面主要有报销比例低、报销程序复杂、卫生服务态度较差、医疗服务不能满足健康需求等.结论:西部民族地区大学生城居医保参保率及利用率偏低;应进一步完善筹资机制,改善医疗服务质量,建立以城居医保为主,其他医疗保险为补充的、全面可持续的大学生医疗保障体系.
作者:郭振友;石武祥;张丽华;杨子靖;孟繁文 刊期: 2013年第01期