学术投稿

组织芯片的研制及效果

孙廷谊;张云汉;孔令非

关键词:组织芯片, 乳癌, P53
摘要:目的:探讨研制组织芯片的方法以及在免疫组化中的应用.方法:选取乳腺良性增生及乳腺导管癌组织共82例,常规切片,HE染色下确定穿刺部位,每例穿取1.0 mm组织柱1条制备82点阵组织芯片,常规HE染色和免疫组化染色.以P53为观察指标,比较组织芯片与常规石蜡切片免疫组化染色表达情况.结果:研制的82位点组织芯片,组织排列整齐,HE染色及免疫组化染色后组织形态可观察率达100.00%,与常规石蜡切片染色结果具有高度一致性.结论:组织芯片是一种简单、经济、易于推广的技术方法.
郑州大学学报(医学版)杂志相关文献
  • 快速蛋白液相色谱系统纯化肺癌组织热休克蛋白70及其鉴定

    目的:从肺癌组织中纯化并鉴定热休克蛋白70(HSP70),为研究其免疫原性和作为肿瘤疫苗奠定基础.方法:用组织蛋白裂解液从肺癌组织中提取总蛋白,应用ConA-sepharose亲和层析和快速蛋白液相色谱系统(FRLC)连续分离、梯度洗脱获得蛋白,应用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳及Western-blot进行蛋白相对分子质量及免疫原性鉴定.结果与结论:所获蛋白的相对分子质量为70 000,经Western-blot鉴定为HSP70.

    作者:张慧珍;杨继要;范清堂;许东;吴逸明 刊期: 2007年第01期

  • 二氮嗪对心脏直视术中心肌的保护作用

    目的:探讨ATP敏感性K+通道开放剂二氮嗪对先天性心脏病室间隔缺损手术中心肌的保护作用.方法:选择期行先天性心脏病室间隔缺损修复术的患者共50例,随机分成试验组和对照组.试验组于转流前通过颈内静脉插管直接将二氮嗪(2 mg/kg)静脉注射到靠近右心房的上腔静脉,对照组静脉滴注同等体积的生理盐水.对比转流前、主动脉阻断后30 min、60 min、术后24 h各时间点心肌肌钙蛋白T(cTnT)含量、磷酸肌酸激酶同工酶(CK-MB)水平及心肌超微结构变化(线粒体评分).结果:试验组血清cTnT含量在主动脉阻断后30 min、60 min和术后24 h,CK-MB水平在阻断后60 min和术后24 h均低于对照组(P<0.05),主动脉开放后30 min试验组线粒体评分与对照组相比较差异有统计学意义(P<0.05).结论:ATP敏感性K+通道开放剂二氮嗪可减轻先天性心脏病室间隔缺损手术心肌长时程低温缺血再灌注损伤.

    作者:杨云龙;徐建平;王薇 刊期: 2007年第01期

  • 雄性无毛小鼠睾丸、附睾的发育及组织形态学观察

    目的:研究雄性无毛小鼠生殖器官的发育及组织形态学改变.方法:取8~10周龄雄性无毛小鼠5只,昆明种雄性小鼠10只.用天平称取动物体质量后,颈椎脱臼处死,摘取睾丸、附睾、前列腺,并用分析天平称重,根据每只小鼠体质量计算脏器指数.所有组织切片后行HE染色,在光学显微镜下观察睾丸曲细精管、生精细胞及间质细胞的形态和数量及附睾组织结构.结果:雄性无毛小鼠睾丸、附睾及前列腺脏器指数与昆明种小鼠相比差异无统计学意义.但睾丸组织学存在曲细精管细胞层次减少,粗线期初级精母细胞减少,胞核结构模糊.附睾及前列腺组织未见明显异常.结论:雄性无毛小鼠睾丸组织学改变可能是导致繁种、育种困难的原因之一.

    作者:王纯耀;阴志刚;阎爱华;薛敬礼;宋国英;杜春燕;史崇敏 刊期: 2007年第01期

  • 严重烧伤延迟复苏87例治疗体会

    延迟复苏是提高严重烧伤治愈率的主要限制性因素之一,其主要危害在于增加了患者对多器官功能障碍综合征(MODS)的易感性[1].从1999年开始,作者在临床上应用一套改进的救治方法,减轻了此类患者MODS和全身性感染发生率,降低了病死率,取得了良好的效果.

    作者:周锐华;鄢文海;王兵;张巨祥;付双印;程国梁;韩俊杰 刊期: 2007年第01期

  • 自制微型牵引架治疗近、中节指骨粉碎性骨折15例

    从2003年8月开始,应用自制微型牵引架结合局部复位、钢针内固定治疗近、中节指骨粉碎性骨折15例,疗效较好,报道如下.1临床资料1.1一般资料 15例指骨粉碎性骨折中,男9例,女6例,年龄15~51岁.5例合并近节指骨基底的Pilon骨折,4例合并远端指骨头骨折,6例合并近、远端指关节骨折.

    作者:王锦绣;鲍朝辉 刊期: 2007年第01期

  • 冬凌草甲素芳胺类衍生物的合成及其抗肿瘤活性

    目的:对冬凌草甲素进行结构改造,合成其芳胺衍生物,并初步评价其抗肿瘤活性.方法:冬凌草甲素分别与4种芳胺发生迈克尔反应,所获产物采用IR、1H-NMR、MS和元素分析确证结构,以冬凌草甲素为阳性对照,采用MTT法观察不同浓度的产物对KB细胞增殖的抑制作用.结果与结论:合成了4个冬凌草甲素的芳胺类衍生物,初步药理试验表明该类化合物对KB细胞株有显著的增殖抑制作用.

    作者:阎学斌;张建业;可钰;周霞;刘宏民 刊期: 2007年第01期

  • 单向活瓣式补片治疗先天性心脏病合并重度肺动脉高压25例

    先天性心脏病合并重度肺动脉高压患者由于术后易发生肺动脉高压危象,往往死于术后低心排及严重右心衰竭[1].2001年1月至2005年6月,作者应用单向活瓣式补片治疗先天性心脏病合并重度肺动脉高压25例,术后无早期死亡和右心功能衰竭病例发生,取得了较好的临床效果,现报道如下.

    作者:赵根尚;郭龙辉;冯德广;法宪恩;张瑞成;王海永;李红卫;侯剑峰 刊期: 2007年第01期

  • 经口咽入路显微外科治疗环枕畸形35例体会

    环枕畸形可分为3种类型:腹侧受压型、背侧受压型及混合型[1].腹侧受压型及混合型患者畸形部位深,结构复杂,传统的单纯后路减压手术无法缓解症状,甚至可加重颅颈区腹侧压迫和神经功能障碍,导致术后病情恶化,因此,选择手术入路是影响疗效的关键[2].2001年3月至2005年8月,作者采用经口咽人路显微直视下行齿状突切除术治疗颅颈交界区腹侧受压型及混合型环枕畸形患者35例,现报道如下.

    作者:柴昌;步星耀;张建国;栗超跃;周伟 刊期: 2007年第01期

  • 地卡因咽部黏膜表面麻醉致严重全身毒性反应1例

    地卡因是目前应用较广的黏膜表面麻醉药,麻醉效能强,其吸收所引起的全身过敏性反应及毒性反应国内、外屡有报道[1-4].作者报道了1例地卡因引起全身过敏性反应致死的病例,在复习文献的基础上,对其药理学基础、中毒的临床表现、抢救及预防措施进行讨论,以期引起临床工作者的高度重视.

    作者:王巍;董雪蕾;蒋月星 刊期: 2007年第01期

  • 苯丙氨酸对慢性缺氧性肺动脉高压大鼠的保护作用

    目的:探讨苯丙氨酸(PHE)对慢性缺氧所致的肺动脉高压的影响及其可能机制.方法:28只雄性Wistar大鼠随机分为对照组(n=9)、缺氧组(n=10)、缺氧+PHE组(n=9).缺氧组与缺氧+PHE组每d给予缺氧处理.缺氧+PHE组每d于缺氧前腹腔注射PHE 400 mg/(kg·d),对照组与缺氧组腹腔注射等量生理盐水,共21 d.采用右心导管法测定右心室平均压(pMRV)及肺动脉平均压(pMPA),同时用多导生理记录仪测定心率和血压.测定右心室(RV)质量/(左心室(LV)质量+室间隔(S)质量)(mRV/(mLV+ms))比值,并观测肺血管形态结构的变化和各组血清血管内皮生长因子(VEGF)的变化.结果:缺氧组的pMRV、pMPA、(mRV/(mLV+mS)明显高于对照组(P<0.01)与缺氧+PHE组(P<0.05);缺氧组的肺细小动脉管壁厚度、管壁横截面积、管壁厚度占血管外径的百分比及管壁横截面积占血管横截面积的百分比均明显高于对照组与缺氧+PHE组(P<0.01).缺氧+PHE组大鼠血清VEGF水平明显低于缺氧组(P<0.01),但仍高于对照组(P<0.05).结论:PHE可能是通过降低VEGF的表达而降低慢性缺氧大鼠的右心室压及肺动脉高压,逆转右心室肥厚及血管结构的重建.

    作者:杨小琼;王特为;黄忠碧;邓述恺;王荣丽 刊期: 2007年第01期

  • 慢性阻塞性肺疾病大鼠气道炎症细胞及黏蛋白检测

    目的:制备大鼠慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型,对支气管肺泡灌洗液(BALF)进行细胞学检查,并观察黏蛋白(Mucin5AC)的表达.方法:20只Wistar大鼠随机均分为健康对照组和COPD组.以气管内注射药物和吸烟方法制备COPD模型,6周后收集BALF进行细胞学检查,以免疫组化方法观察呼吸道杯状细胞肥大情况及Mucin5AC的表达.结果:①BALF检查:健康对照组中性粒细胞数为(17.58±3.72)×106L-1,COPD组为(251.10±42.76)×106 L-1,2组差异有统计学意义.②气道炎症病理学评分:健康对照组为(18.56±2.46)分,COPD组为(69.30±4.99)分,2组差异有统计学意义.③肺泡腔直径:健康对照组为(47.22±12.95)μm,COPD组为(92.58±4.32)μm,2组差异有统计学意义.④杯状细胞化生指数:健康对照组为(5.12±3.07)个/mm2,COPD组为(51.20±9.23)个/mm2,2组差异有统计学意义;⑤Mucin5AC阳性染色面积:健康对照组为(3.12±2.60)%,COPD组为(34.50±6.52)%,差异有统计学意义.BALF中的中性粒细胞计数与气道炎症病理学评分呈正相关.结论:多种炎症细胞参与了COPD发生及发展.

    作者:何燕霞;巨春荣;宋改芳;王俊萍;李良臣 刊期: 2007年第01期

  • 锌对氟致雄性大鼠生殖损伤的拮抗作用

    目的:探讨不同剂量的锌对高氟所致雄性大鼠生殖损伤的拈抗作用.方法:将50只雄性Wistar大鼠随机分为5组,即对照组(去离子水)、氟组(25 mg/kg氟化钠)、氟加低锌组(25 mg/kg氟化钠+4 mg/kg硫酸锌)、氟加中锌组(25 mg/kg氟化钠+20 mg/kg硫酸锌)、氟加高锌组(25 mg/kg氟化钠+50 mg/kg硫酸锌),每组10只,灌胃6周.观察氟、锌对精子数量、活动率和畸形率、血清性激素、睾丸生化标志酶及睾丸组织病理学切片的影响.结果:①精子计数、活动率:氟加中锌组大鼠精子计数、精子活动率均高于氟组、氟加低锌组和氟加高锌组,差异均有统计学意义(P<0.05);精子畸形率:氟加中锌组大鼠精子畸形率低于氟组、氟加低锌组和氟加高锌组,差异均有统计学意义(P<0.05).②血清睾酮含量:氟加中锌组血清睾酮含量高于氟组和氟加高锌组,差异有统计学意义(P<0.05).③睾丸乳酸脱氢酶活力:氟加中锌组高于氟加高锌组,差异有统计学意义(P<0.05).睾丸氟含量:氟加中锌组低于氟组,差异有统计学意义(P<0.05).④睾丸组织病理学检查结果:氟组、氟加高锌组与对照组比较,形态结构疏松;氟加低锌组、氟加中锌组与氟组比较,结构较完整.结论:中等剂量的锌可以拮抗高氟所致的雄性生殖毒性.

    作者:李艳;朱静媛;庄东刚;阎爱华;马秀云;程学敏;崔留欣 刊期: 2007年第01期

  • 近交系小鼠微卫星位点的多态性观察

    目的:观察不同品系小鼠微卫星位点的多态性.方法:取6~10周龄近交系BALB/C、豫医无毛小鼠、C57、CBA及DBA/2小鼠各5只,颈椎脱臼处死后取新鲜的脑组织0.3~0.5 cm3,提取DNA.随机选择位于小鼠2、3、4和16号染色体上的5对微卫星引物(D2Nds3、D3mit17、D3mit18、D4mit2、D16mit4),应用PCR技术对5种近交系小鼠的DNA多态性进行研究.结果:5对引物在近交系小鼠各基因座上均出现一清晰条带,D16mit4、D3mit17、D3mit18具有多态性,D4mit2、D2Nds3不具有多态性.结论:筛选出的引物D16mit4、D3mit17、D3mit18可用于检测近交系小鼠的品系来源和遗传背景,且所检测的小鼠符合近交要求.

    作者:杨卫红;王纯耀;宋国英;薛敬礼;邢金山;史崇敏;杜春燕 刊期: 2007年第01期

  • 阿莫西林完全抗原的合成与鉴定

    目的:制备阿莫西林完全抗原并鉴定.方法:采用碳二亚胺两步法将半抗原阿莫西林与牛血清白蛋白偶联制备免疫原,采用混合酸酐法将阿莫西林与卵清蛋白偶联制备ELISA包被原.采用紫外光谱分析和动物免疫试验鉴定偶联产物.结果与结论:紫外光谱分析和动物免疫试验证实阿莫西林抗原合成成功,该抗原可用于阿莫西林ELISA检测试剂盒的研制.

    作者:孙武勇;刘向辉;屈凌波;李建军;王云龙;李斐菲 刊期: 2007年第01期

  • 组织蛋白酶B特异性siRNA对食管癌EC9706细胞组织蛋白酶B基因表达的影响

    目的:探讨小分子干扰RNA(siRNA)对食管癌EC9706细胞组织蛋白酶B(CB)基因表达的影响.方法:设计并用体外转录方法合成针对CB基因的siRNA,转染EC9706细胞(设10 μmol/L、15 μmol/L、20 μmol/L 3个转染浓度),分别培养24 h、48 h、72 h(实验组),采用免疫细胞化学及原位杂交方法检测转染细胞中CB蛋白和mRNA表达的变化,并设正常对照、空白对照、无关对照.结果:不同浓度siRNA转染24 h、48 h、72 h EC9706细胞CB蛋白表达量均较正常、空白及无关对照降低(P<0.05),以转染72 h的抑制效应为明显,但3者相比差异无统计学意义(P>0.05).3个时间段内随浓度增加siRNA抑制效应增强,3者相比差异有统计学意义(P<0.05),正常对照、空白对照、无关对照均未表现出对CB蛋白表达的抑制效应.转染siRNA后部分细胞形态发生改变.结论:特异性siRNA能有效抑制EC9706细胞中CB蛋白和mRNA表达.

    作者:娄欣;张红;曹学全;孙淼淼;高冬玲;张岚;宋一民;李冰;陈奎生 刊期: 2007年第01期

  • 单纯性肥胖儿童血清瘦素及胰岛素测定

    目的:探讨儿童肥胖与激素水平变化的关系.方法:分别检测肥胖和正常儿童血清瘦素和胰岛素水平,并分析二者之间的关系.结果:单纯性肥胖儿童体内瘦素平均水平为(34.21±15.92)μg/L,胰岛素平均水平为(14.56±7.23)mIU/L;正常儿童体内瘦素平均水平为(12.40±3.77) μg/L,胰岛素平均水平为(5.75±5.07)mIU/L,2组比较差异有统计学意义(P<0.01);肥胖儿童体内瘦素与胰岛素呈正相关(r=0.37,P<0.01).结论:单纯性肥胖儿童体内瘦素与胰岛素的分泌明显高于正常儿童,2激素水平在肥胖儿童中呈正相关.

    作者:娄晓民;胡巧云;张德甫;段新维;陈姜 刊期: 2007年第01期

  • 甲基强的松龙对大鼠脊髓损伤组织中肾上腺髓质素表达的影响

    目的:观察甲基强的松龙(MP)对大鼠脊髓损伤(SCI)组织中肾上腺髓质素(AM)表达的干预作用.方法:SD大鼠108只随机分为假手术组、MP干预组(MP组)和脊髓损伤组(SCI组),每组36只.假手术组只切除椎板不损伤脊髓,MP组和SCI组采用Allen WD法制作大鼠急性脊髓损伤模型,并于术后1 h经尾静脉分别给予50mg/kg MP和等量生理盐水.于术后2 h、8 h、1 d、2 d、3 d、6 d取骨髓组织(每个时点6只大鼠),HE染色观察脊髓损伤情况,免疫组化染色观察AM的表达,并于术后1 d、3 d、6 d行运动功能评定.结果:HE染色,假手术组各时间点无明显异常,MP组病理变化轻于SCI组.免疫组化染色,假手术组中AM低表达,SCI组AM表达增高并于术后8 h达峰值,以后逐渐降低(P<0.01),MP组AM的表达在术后8 h、1 d、2 d、3 d均高于SCI组,差异有统计学意义(P<0.05).运动功能评分:假手术组1 d、3 d、6 d均高于MP、SCI组,MP组在术后3 d、6 d高于SCI组,P均<0.01.结论:急性脊髓损伤后AM表达代偿性增高并存在动态变化,MP干预可上调AM的表达从而减轻脊髓的继发性损伤.

    作者:郭新庆;郑启新;吴永超 刊期: 2007年第01期

  • 2型糖尿病并大血管并发症患者白细胞中核因子-κB检测

    目的:探讨2型糖尿病(T2DM)大血管并发症和转录因子核因子-κB(NF-κB)的关系.方法:60例T2DM患者根据是否合并大血管病变,分为单纯糖尿病组(30例)和糖尿病合并大血管病变组(30例),另选30例单纯大血管病变患者和30例健康人,记录所有研究对象的性别、年龄、身高、体质量指数、病程、吸烟指数、收缩压、舒张压等;采集空腹肘静脉4 ml,夹心酶联免疫吸附法检测白细胞中NF-κB;同时测定空腹血糖、2 h血糖、糖化血红蛋白、空腹血浆C肽、甘油三酯、胆固醇、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白水平;并分析NF-κB与血糖、血脂及C肽间的相关性.结果:各组白细胞中NF-κB水平分别为:糖尿病合并大血管病变组0.94±0.38,单纯大血管病变组0.75±0.23,单纯糖尿病组0.45±0.16,健康组0.26±0.13,差异有统计学意义(F=44.836,P<0.05).NF-κB与血糖、血脂及C肽间有相关性.结论:2型糖尿病合并大血管病变患者NF-κB活性升高.

    作者:王小瑞;张苏河 刊期: 2007年第01期

  • 食管鳞癌组织中淋巴管生成2种检测方法比较

    目的:探讨人食管鳞癌组织中淋巴管生成灵敏的检测方法.方法:分别采用免疫组化SP法(以血管内皮生长因子受体-3为淋巴管特异性标记物)和酶组织化学法检测49例食管鳞癌组织和癌旁组织中淋巴管密度(分别记为LVDi与LVDe).结果:癌组织中LVDe的表达和癌旁组织中LVDi、LVDe的表达在有、无淋巴结转移时差异均有统计学意义(P<0.01).有淋巴结转移癌组织中LVDi与LVDe之间差异有统计学意义(P<0.01).结论:酶组织化学法可较好地显示食管鳞癌组织中的淋巴管.

    作者:赵阿红;宋一民;张红新;高冬玲;张岚;张云汉;陈奎生 刊期: 2007年第01期

  • 仙鹤草水提液对食管癌Eca109细胞生长的抑制作用

    目的:研究仙鹤草水提液对人食管癌Eca109细胞生长的抑制作用及其可能机制.方法:MTT法测定0g/L、2 g/L、4 g/L、8 g/L、16 g/L的仙鹤草水提液分别作用于Eca109细胞24 h、48 h、72 h,观察对Eca109细胞生长的抑制作用;采用免疫组织化学染色技术检测16 g/L仙鹤草水提液作用72 h对Eca109细胞Bcl-2、P53蛋白表达的影响.结果:MTT结果显示16 g/L仙鹤草水提液作用48 h和72 h后Eca109细胞生长明显受抑;免疫组化结果显示16 g/L仙鹤草水提液作用72 h后Eca109细胞内Bcl-2蛋白表达下调,P53蛋白表达上调.结论:仙鹤草水提液体外能诱导Eca109细胞凋亡,其机制可能与下调Bcl-2蛋白表达及上调P53蛋白表达有关.

    作者:马丽萍;赵培荣;王留兴;张书红 刊期: 2007年第01期

郑州大学学报(医学版)杂志

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主办:郑州大学