学术投稿

人DR5真核表达载体的构建及稳定转染NS-1细胞系的建立

刘峰涛;李淑莲;马远方

关键词:真核表达载体, 稳定转染的NS-1细胞系, 死亡受体5
摘要:目的:构建人死亡受体5(DR5)真核表达载体,转染NS-1细胞,建立稳定转染的NS-1细胞系. 方法:采用RT-PCR方法,以人Jurkat细胞cDNA为模板扩增人DR5基因的cDNA编码区序列, 利用DNA重组技术将其定向插入到真核表达载体pcDNA3.0, 经酶切和测序鉴定后, 用脂质体转染法转染NS-1细胞, 通过G418筛选, 建立稳定转染的NS-1细胞系, 用FACS法检测DR5的表达. 结果:成功构建了pcDNA3. 0/DR5真核表达载体, 并建立了稳定转染的NS-1细胞系, 成功地表达目的基因. 结论:真核表达载体成功构建和稳定转染NS-1细胞系的建立为进一步进行基因治疗研究奠定良好的实验基础.
河南大学学报(医学版)杂志相关文献
  • 阿归养血糖浆美容作用的实验分析

    目的:观察阿归养血糖浆的祛黄褐斑、抗衰老和增强皮肤营养等与美容相关的作用,并对其作用机制进行初步探讨.方法:进行了对黄褐斑模型小鼠的影响、对衰老模型小鼠的影响、对急性血瘀模型大鼠血液流变学的影响和对小鼠耳廓循环的影响等四个方面的实验.结果:本品可抑制黑色素合成、清除自由基、促进胶原蛋白合成和改善血液流变学及微循环.结论:阿归养血糖浆具有一定的美容作用.

    作者:徐晓月;张广伟;李展;周继春;李逢春;杨海燕;何燕 刊期: 2009年第01期

  • 阔鳞鳞毛蕨脂溶性成分的GC-MS分析

    目的:研究阔鳞鳞毛蕨的脂溶性成分.方法:用索氏提取法提取脂溶性成分,甲酯化处理后,采用气相色谱-质谱联用技术首次对阔鳞鳞毛蕨中脂肪酸成分进行分析和鉴定.结果:从阔鳞鳞毛蕨根的脂溶性成分中鉴定了22种脂肪酸,占根中脂溶性成分的90.20%,从叶中鉴定了19种脂肪酸,占叶中脂溶性成分的91.78%.结论:阔鳞鳞毛蕨脂溶性成分的主要成分是(Z)-9-十八碳烯酸,具有很大的药用价值.

    作者:姬志强;姜晓芳;郭曙光;康文艺 刊期: 2009年第01期

  • 山药低聚糖的免疫增强作用

    目的:观察山药低聚糖对小鼠免疫功能的影响.方法:小鼠连续给药10 d,取全血比色法检测血清溶血素水平;小鼠连续给药10 d,分别用2,4-二硝基氯苯(DNCB)致敏、攻击,尾静脉注射伊文思蓝溶液,取蓝染皮肤检测迟发性超敏反应(DTH);小鼠连续给药10 d,尾静脉注射印度墨汁后,立即取血读取OD值.结果:山药低聚糖高剂量组可促进小鼠血清溶血素生成,山药低聚糖中、高剂量组可增强小鼠DTH的反应能力,山药低聚糖各剂量组均不提高小鼠巨噬细胞吞噬指数和吞噬系数.结论:山药低聚糖具有提高小鼠体液免疫、细胞免疫功能的作用,而对小鼠非特异免疫功能无显著影响.

    作者:贾士奇;黄霞;刘惠霞 刊期: 2009年第01期

  • 岩豇豆脂肪酸成分分析

    目的:对岩豇豆全草的脂肪酸成分进行研究.方法:采用索氏提取法提取脂溶性成分,用GC-MS 法鉴定其化学成分.结果:岩豇豆中鉴定了24个化合物,占色谱总馏分出峰面积的95.62%.结论:在岩豇豆鉴定的24个化合物中,有8个脂肪酸,其总含量为55.66%.亚油酸、甾醇和维生素 E可能是岩豇豆脂溶性部分的药效成分之一.

    作者:陈林;姚森森;何喜娟;康文艺 刊期: 2009年第01期

  • 根痛平治疗腰椎骨质增生症的疗效观察

    目的:探讨根痛平治疗腰椎骨质增生症的疗效.方法:以腰疼宁为对照组,参照<中药新药临床研究指导原则>与<中医病证诊断疗效标准>制定观察方案,以4个疗程后复查的结果作为疗效评定.结果:根痛平组与对照组比较有显著性差异.结论:根痛平临床可用于治疗腰椎骨质增生症.

    作者:刘志刚;刘蔚;王景春;宋卫中 刊期: 2009年第01期

  • 体外循环心脏直视术后急性肾功能衰竭12例

    目的:探讨体外循环心脏术后急性肾功能衰竭的诊断及治疗.方法:自2003年10月至2006年11月,应用体外循环(CPB)共623例,术后并发急性肾功能衰竭12例,年龄8个月~57岁,男9例,女3例,心功能II级3例,III级7例,IV级2例.CPB时间35~210 min,平均(95.1±40.5)min,其中CPB时间>120 min的8例.结果:12例患者中3例经过(12±5)d药物治疗后肾功能恢复正常;2例经过血液透析肾功能也得以恢复;7例患者由于CPB时间过长(≥180 min)透析后死于消化道或呼吸道出血,多器官功能衰竭等.结论:对心脏术后合并ARF者除强调及时诊断尽早应用利尿剂及透析进行治疗外,规范手术操作步骤,缩短CPB转流时间,减少CPB对肾脏的损害,才是降低ARF的发生率、死亡率的关键.

    作者:贺飞;施巩宁;王琛 刊期: 2009年第01期

  • 5%咪喹莫特乳膏联合中药治疗扁平疣疗效观察

    扁平疣是由人乳头瘤病毒引起的常见病,好发于青少年的颜面和手背等部位,表现为米粒至绿豆大小扁平丘疹,数目多,病程长,无明显自觉症状,但影响美容且目前尚无针对性的治疗药物.本科自2007年7月至2008年9月采用5%咪喹莫特乳膏联合中药治疗扁平疣取得满意疗效,结果报告如下.

    作者:聂磊;赵春红 刊期: 2009年第01期

  • 牛角瓜属植物化学成分与药理活性研究进展

    牛角瓜属(Calotropis)隶属于萝藦科(Asclepiadaceae),该属约有6种.我国产的为牛角瓜(Calotropis gigantea L.)和白花牛角瓜(Calotropis procera L.),其作为传统药用植物在热带和亚热带地区有着悠久的药用历史.它的根、茎、叶、果及各部位的白色汁液均可药用,具有抗菌、消炎、驱虫、化痰、解毒等作用,用于哮喘、咳嗽、麻疯病、溃疡、痔疮、肿瘤等疾病的治疗.国外学者从上述两种植物中分离得到强心苷类、C21甾体类、三萜类以及黄酮类等多种类型的化合物,其中强心苷类化合物具有抗肿瘤活性,其他化合物具有抗菌和昆虫拒食等生理活性.本文将对迄今为止从牛角瓜属植物中分离得到的各类化学成分进行整理分类,同时对其药理活性,尤其是强心苷类化合物的抗肿瘤活性及构效关系进行综述.

    作者:戴好富;王茂媛;梅文莉;王祝年 刊期: 2009年第01期

  • 槐花、槐米和槐叶脂肪酸成分的GC-MS分析

    目的:研究槐花、槐米和槐叶中的脂肪酸成分.方法:采用索氏提取法分别提取槐花、槐米和槐叶中的脂溶性成分,用气相色谱-质谱联用检测其化学成分.结果:从槐花中分离鉴定了22个化学成分,占色谱总馏分出峰面积的86.73%,从槐米中分离鉴定了16个化学成分,占色谱总馏分出峰面积的55.74%,从槐叶中分离鉴定了14个化学成分,占色谱总馏分出峰面积的66.5%.结论:有7种化合物:硬脂酸、肉豆蔻酸、亚油酸、亚麻酸、花生酸、山嵛酸和植醇是槐花、槐米和槐叶所共有的.

    作者:康文艺;武小红 刊期: 2009年第01期

  • 自发性气胸的临床特征及治疗

    自发性气胸是呼吸内科常见病,也是临床急症之一,若抢救不及时,可导致呼吸循环衰竭甚至死亡[1].为探讨其临床特点及治疗对策,将我所站治的108例自发性气胸的临床资料,报告如下.

    作者:侯建中 刊期: 2009年第01期

  • 2型糖尿病中内皮细胞损伤及血小板功能状态的改变

    目的:观察2型糖尿病患者内皮细胞损伤及血小板功能状态的变化及临床意义. 方法:利用双抗体夹心( ELISA)法测定血浆血管性血友病因子抗原(vWF:Ag)水平;采用玻珠柱法测定血小板黏附率(PAdT). 结果:vWF:Ag(160.8±35.6)%、PAdT(89.5±7.8)%水平显著高于无血管病变组,差异有显著意义(P<0.05~0.01). 结论:2型糖尿病患者均存在血管内皮损伤,并由此引起血小板功能状态的改变;血浆vWF:Ag及PAdT水平在一定程度上可反映2型糖尿病患者血管病变的情况.

    作者:崔红艳;王芳 刊期: 2009年第01期

  • GC-MS法分析革叶耳蕨叶的脂肪酸成分

    目的:用索氏提取法提取革叶耳蕨叶的脂肪酸成分.方法:甲酯化处理后,采用气相色谱-质谱联用技术首次对该耳蕨叶中脂肪酸成分进行分析和鉴定.结果:发现该耳蕨叶主要的脂肪酸成分是:油酸(25.37%)、棕榈酸(16.18%)、亚油酸(10.92%)和植醇(10.96%).结论:油酸和亚油酸是革叶耳蕨叶的药效成分.

    作者:苑鹏飞;崔维恒;王二辉;康文艺 刊期: 2009年第01期

  • 胸、腰段脊柱损伤患者的急诊分级护理

    随着交通和建筑意外事故的日益增加,世界范围内急性胸、腰椎损伤的发生率已达50万~100万例/年[1].因脊柱组织构成的多样性,且常合并其他重要器官或脊髓的损伤,使此类损伤具有伤势严重、伤情复杂、伤残率高的特点.传统单一的急诊护理模式已远不能适应疾病治疗的要求.我院对急性胸、腰段脊柱脊髓损伤患者采用分级护理,取得了良好效果.

    作者:肖娴 刊期: 2009年第01期

  • ICU气管切开患者肺部感染的控制

    1 临床资料本组患者38例,男28例,女10例.年龄8~78岁,平均42.3±2.11岁.风心二尖瓣狭窄4例,肺癌9例,食管癌8例,重型颅脑外伤17例.本组并发吸入性肺炎3例,导管脱出1例,纵隔气肿2例,气胸1例.

    作者:赵继英 刊期: 2009年第01期

  • 羊膜间充质干细胞静脉移植治疗脊髓损伤的实验

    目的:探讨羊膜间充质干细胞静脉移植对脊髓损伤修复的影响.方法:90只成年SD大鼠按改良Allen′s打击方法建立脊髓损伤模型,随机分为3组:对照组、假移植组和移植组,每组30只.于脊髓损伤后1周经尾静脉移植Brdu标记的羊膜间充质干细胞.3组大鼠分别于损伤后第1 d、3 d、1周及移植后1 d、3 d、1周、2周、4周采用BBB评分法对行为学进行评价.并于移植后1 d、3 d、1周、2周、4周分批处死,切片观察Brdu标记的细胞能否迁移到损伤区.结果:脊髓损伤后第1 d,3组实验动物后肢运动功能BBB评分皆为0分;细胞移植1周后移植组动物BBB评分为5.6±0.6,对照组和假移植组动物BBB评分分别为5.3±0.4和5.2±0.6;细胞移植2周后移植组、假移植组和对照组 BBB评分分别为11.3±0.9、 6.4±0.5和6.5±0.8;4周后 3组实验动物评分分别为13.4±0.9、8.3±0.6和8.5±0.7;在损伤部位出现了Brdu标记的羊膜间充质干细胞.结论:经静脉移植的羊膜间充质干细胞能够迁移到损伤区并对脊髓损伤有一定的修复作用.

    作者:马建;杨波;关方霞;胡炜;焦红亮;杜英;宋来君;胡祥 刊期: 2009年第01期

  • 槲皮素微孔板抗氧化微量模型探析

    目的:利用酶标仪,以具有DPPH自由基清除活性的化合物槲皮素为研究对象,建立适合天然产物抗氧化活性快速筛选的方法.方法:通过单因素考察,建立L9(34)正交试验,对正交试验结果进行直观分析和方差分析,确定适实验条件.结果:适实验条件为A3B1D2,即DPPH的佳浓度为200 μmol/L,加入量为175 μl,反应20 min.验证实验RSD为3.17%,说明该方法稳定可靠;标准品Trolox、PG 、BHA和BHT对照,证明该模型准确可行.结论:DPPH抗氧化微量筛选模型快速、准确、用样量小、且稳定可靠,适合天然产物抗氧化活性的快速筛选使用.

    作者:张丽;王丽;李彩芳;康文艺 刊期: 2009年第01期

  • GC-MS法分析辣蓼脂肪酸成分

    目的:对辣蓼全草的脂肪酸成分进行研究.方法:采用索氏提取法从辣蓼中提取脂溶性成分,用气相色谱-质谱联用检测其化学成分.结果:从辣蓼中分离鉴定了16个脂肪酸成分、2个甾类成分和1个植醇,占色谱总馏分出峰面积的92..95%.结论:辣蓼所含脂肪酸主要为不饱和脂肪酸,主要脂肪酸是油酸、亚油酸、棕榈酸.

    作者:刘瑜新;秦俊锋;张贝贝;康文艺 刊期: 2009年第01期

  • NIMV治疗在胆碱能危象并急性轻、中型呼吸衰竭的临床应用

    目的:探讨无创机械通气治疗在胆碱能危象并发急性轻、中型呼吸衰竭中的临床作用.方法:对62例胆碱能危象并发急性轻、中型呼吸衰竭患者随机分两组.无创机械通气(NIMV)组30例通过面罩机械通气,采用压力支持加呼气末正压通气模式;传统机械通气(CMV)组32例采用气管内插管进行机械通气;比较机械通气时间(h)、总住院时间及住ICU时间,并发症,呼吸机相关肺炎(VAP)及住院病死率.结果:与CMV组比较,NIMV组缩短了机械通气时间、总住院时间和ICU的住院时间(P﹤0.05);病死率分别是6.7%和15.6%(P﹤0.05);并发症发生率分别为26.7%和71.9%(P﹤0.05).结论:有机磷中毒胆碱能危象并发急性轻、中型呼吸衰竭患者应用无创机械通气减少气管内插管率,治疗效果显著.

    作者:高长庆;李拥军;李岩 刊期: 2009年第01期

  • HPLC法测定止痢宁片中穿心莲内酯含量

    目的:研究用HPLC法测定止痢宁片中穿心莲内酯的含量.方法:色谱条件为: Aglient Zorbax Extent C18柱(250 mm × 4.6 mm,5μm),流动相:甲醇∶水 = 52∶48,流速:1.0 ml/min,检测波长:225 nm,柱温为室温.结果:穿心莲内酯进样量在0.153 μg~2.292 μg范围内与峰面积呈良好的线性关系(r = 0.9996),平均回收率为99.1 %,RSD = 1.6 %.结论:本法灵敏,准确,简便,重现性好.

    作者:王先友;袁琦 刊期: 2009年第01期

  • 应用不同转移皮瓣修复拇指软组织缺损

    目的:探讨不同转移皮瓣修复拇指软组织缺损的临床效果.方法:根据拇指软组织缺损的部位、大小、范围选择不同转移皮瓣进行修复89例.结果:除4例皮瓣部分坏死,经换药后愈合,其余皮瓣成活良好.结论:探讨选择不同转移皮瓣修复拇指软组织缺损,以大限度的恢复拇指的外形、感觉及运动功能.

    作者:张松;王晓;刘怡勋;王仲锋 刊期: 2009年第01期

河南大学学报(医学版)杂志

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主管:河南省教育厅

主办:河南大学