朱晓良;胡筠珠;胡华成
目的通过优化反应体系,建立SYBR Green I染料real-time RT-PCR检测RbAp46基因表达的方法.方法构建pUCm-T vector-RbAp46阳性模板,根据分子量及阿佛加德罗常数(6.023×1023分子数/mol)换算为分子拷贝数,10倍倍比稀释后做标准曲线.根据标准曲线的斜率、相关系数、荧光强度及熔解曲线优化反应体系中各组分的量及反应条件.结果 25 μl的反应体系中10×PCR缓冲液2.5 μl,25 mmol/L MgCl2 2.2 μl,10 mmol/L dNTPs0.5 μl,20×SYBR Green I 0.5 μl,12.5 umol/L引物各0.5 μl,5 U/μlTaq DNA聚合酶0.3 μl, cDNA1 μl(相当于50 ng RNA),双蒸水17 μl.反应条件为:94℃ 5 min预变性, 96℃ 20 s变性,58℃30 s退火,72℃ 45 s延伸,40个循环,80℃时采集荧光信号,可以获得好的扩增效率.结论优化后的SYBR Green I real-time PCR适合于检测RbAp46基因表达,具有比较好的重复性,灵敏度高,特异性强.
作者:胡绍燕;陈子兴;岑建农;顾伟英;赵晔 刊期: 2005年第02期
为探讨18F-FDG 符合线路SPECT显像在鉴别肺部肿块性质的应用价值,对30例肺部肿块患者进行18F-FDG符合线路SPECT显像,资料分别采用目测法和半定量法分析,前者由核医学科医师目测图像;后者计算病灶处/对侧正常部位计数比值(L/B),且对良恶性病变的L/B比值进行比较,并与病理结果相对照.结果:目测法诊断敏感度、特异度、准确度分别为92%、83%和90%;半定量法中,恶性肿瘤组和良性病变组的L/B比值分别为4.488±2.258和2.764±2.704(P<0.05).采用受试者工作特征(ROC)曲线分析,以L/B比值2.0为判断肺部恶性病变的标准,18F-FDG 符合线路SPECT诊断的敏感度、特异度、准确度分别为94%、75%、和80%.18F-FDG 符合线路SPECT对肺部良恶性病变的鉴别具有一定临床价值.
作者:朱晓良;胡筠珠;胡华成 刊期: 2005年第02期
回顾性分析78例冠心病手术患者(其中冠心病合并糖尿病患者16例)的术前准备、术后处理及术后并发症,研究冠心病(CHD)合并糖尿病(DM)患者冠状动脉旁路移植术(CABG)的围手术期处理.结果:冠心病合并糖尿病患者行冠状动脉旁路移植术病情复杂,术后并发症较多.提示围手术期血糖的控制对于减少冠心病合并糖尿病术后并发症有一定的特殊性和重要性.
作者:夏漫辉;沈振亚;李科;郑琳 刊期: 2005年第02期
目的观察生物活性玻璃颗粒在急性股骨干骨折愈合过程中的作用.方法将68例新鲜股骨干骨折随机分成两组,A组:34例,采用切开复位交锁髓内钉内固定术,骨折端填入生物活性玻璃颗粒;B组:34例,采用切开复位交锁髓内钉内固定术,未行植骨.结果所有患者进行随访,平均随访时间8个月,A组临床愈合时间平均20.5周,骨性愈合时间平均24.5周,B组均比A组迟4~5周.于术后第3、第6、第8个月进行比较,A组骨折愈合率均明显高于B组(P<0.01).结论生物活性玻璃颗粒安全、有效,是一种很好的骨缺损移植物,并能促进骨折愈合.
作者:吴锦春;孙俊英;王禹基;宋斌 刊期: 2005年第02期
目的探讨联合检测血清中肿瘤标志物在肺癌诊断中的价值.方法采用生化比色法、电化学发光法检测肺癌及肺部良性病变患者血清中肿瘤特异性生长因子(TSGF)、细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)的含量.结果肺癌患者血清中3种肿瘤标志物明显高于肺部良性病变患者(P<0.01或P<0.05);TSGF的敏感性、特异性分别为84.8%、86.1%;不同病理类型CYFRA21-1、NSE的敏感性亦不同.结论血清中3种肿瘤标志物的联合检测,在肺癌的诊断、病理类型的推断方面有一定的临床意义;TSGF可能为良好的健康体检筛选指标.
作者:左志通;凌春华;刘皓;郑世营 刊期: 2005年第02期
目的评价新型动力型Hoffmann外固定器在生物力学上的优缺点,为临床应用提供参考.方法以人离体胫骨中部短斜行骨折行新型动力型Hoffmann外固定器、改良型Hoffmann外固定器、多功能外固定器固定为实验模型,通过电测法观测三种外固定器固定的强度、刚度、稳定性及应力遮挡率变化.结果新型动力型Hoffmann外固定器和改良型Hoffmann外固定器在强度、刚度和稳定性上无显著差异(P>0.05),与多功能外固定器有显著差异(P<0.05),应力遮挡率均有极显著差异(P<0.01),新型动力型Hoffmann外固定器明显优于其他方法.结论新型动力型Hoffmann外固定器具有较大的生物力学优越性.
作者:王成;沈忆新;王以进 刊期: 2005年第02期
目的通过观察大鼠全脑照射后海马组织中胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)mRNA表达的变化,探讨GFAP在放射性脑损伤中的作用.方法大鼠全脑单次2 Gy、10 Gy和30 Gy照射后1 d、30 d,用逆转录聚合酶链技术(RT-PCR)观察海马组织中GFAPmRNA的表达变化,并分析照射剂量和照射后时间对其表达的影响.结果 10 Gy和30 Gy组照后1 d GFAPmRNA水平开始升高,分别为正常组的2.5倍、3倍(P<0.001),并持续到照后30 d,2 Gy组未见明显升高.结论随着照射剂量的加大和观测时间的延长,大鼠大脑海马内 GFAPmRNA表达增高,其终产物GFAP在放射性脑损伤保护和修复机制中有重要作用.
作者:杨枢;田野;章国芬;何军;陈列松 刊期: 2005年第02期
目的总结DHS与外固定支架治疗股骨转子间骨折的体会,分析并发症发生的原因和防治方法.方法从2002年1月至2003年1月应用DHS与外固定支架治疗股骨转子间骨折各30例,术后平均随访6个月.结果在DHS组中发生髋内翻畸形3例,在外固定组中有4例,外固定组中有17例发现膝关节僵硬.两组手术时间、失血量有明显统计学意义,DHS组明显高于外固定支架组.DHS组中平均骨愈合时间为12周,而外固定支架组为14周(P<0.05).结论外固定支架治疗转子间骨折较DHS具有手术安全、创伤小、失血量少、术后恢复快等优点,对于有高手术风险的病例是可供选择的一种手术方法.
作者:宋斌;孙俊英;吴锦春;王禹基 刊期: 2005年第02期
目的研究P-糖蛋白(P-gp)和C-erbB-2在胃癌组织中的表达及其相关性.方法采用S-P免疫组织化学染色法检测81例原发性胃癌P-gp和C-erbB-2的表达.结果 P-gp的阳性率为50.62%(41/81),P-gp的表达与胃癌的组织学类型、浸润深度和淋巴结转移情况无关(P>0.05),P-gp高表达率在C-erbB-2阳性组病例明显高于C-erbB-2阴性组病例(P<0.05).结论 P-gp和C-erbB-2常协同表达于胃癌组织中,并可作为胃癌患者术后化疗的参考指标.
作者:蔡颖;冯一中;张熔熔;唐威 刊期: 2005年第02期
目的探讨胃癌患者腹腔冲洗液中细胞内端粒酶活性的表达情况及临床意义.方法术中收集38例胃癌和10例良性胃溃疡患者的腹腔冲洗液,采用PCR-TRAP方法测定腹腔冲洗液中游离细胞内端粒酶的活性,同时做腹腔冲洗液细胞学检查(PLC).结果 10例胃良性溃疡患者腹腔冲洗液细胞内端粒酶活性均为阴性.胃癌患者腹腔冲洗液中细胞内端粒酶活性的阳性率为42.1%(16/38),明显高于PLC阳性率18.4%(7/38)(P<0.05).结论两种方法(端粒酶活性检测和PLC)均适用于胃癌腹腔脱落癌细胞的诊断或腹膜转移的预测.但对微量癌细胞检出的灵敏度,以端粒酶活性检测为优.
作者:吴雨岗;汪良;朱新国;张雁云 刊期: 2005年第02期
目的评价神经元特异性烯醇化酶(NSE)、癌胚抗原(CEA)、乳酸脱氢酶(LDH)在小细胞肺癌(SCLC)患者中的预后价值.方法收集苏州大学附属第二医院1997年12月至2003年11月确诊的46例非手术治疗的SCLC患者,在治疗前检测NSE、CEA、LDH及其它实验室指标,进行预后单因素和多因素分析.结果 NSE、CEA、LDH的升高率分别为48.3%、42.9%、30.4%,三者水平在广泛期均高于局限期,其中LDH、CEA有显著统计学意义(P<0.05).单因素分析NSE>12 ng/ml,、LDH>1(与上限比值)均是提示预后较差的指标.多因素分析时,NSE是独立的预后因子,LDH、CEA的影响不明显.结论 NSE、CEA、LDH中,NSE与预后的相关性强,是提示预后的独立指标.
作者:刘丽诗;胡华成 刊期: 2005年第02期
目的研究与糖尿病肾病(Diabetic Nephropathy,DN)相关的危险因素;评价β2微球蛋白与微量白蛋白尿诊断糖尿病肾病的相关性.方法根据24 h尿白蛋白排泄率(UAER)及尿蛋白定量将88例2型糖尿病患者分为单纯糖尿病组(A组)、早期糖尿病肾病组(B组)和临床糖尿病肾病组(C组),对其临床及生化指标进行多元逐步回归分析.结果① C组或B组与A组间空腹胰岛素(FINS)、空腹C肽(FC-P)、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、年龄、病程、并发症及肾功能差异均有显著性意义;②与DN相关的危险因素依次为收缩压、空腹C肽、糖化血红蛋白、病程;③β2微球蛋白(β2MG)与UAER及肾功能指标相关性良好. 结论高血压、高C肽水平、血糖控制不良及病程是DN发病的危险因素;β2微球蛋白可作为DN早期的辅助诊断指标.
作者:李珺;董吉祥 刊期: 2005年第02期
以4-(2-吡啶偶氮)间苯二酚(PAR)为离子显色剂,采用紫外分光光度法测定硫酸锌的吸收度,用初匀速法对硫酸锌口服液的稳定性进行考察研究.结果:硫酸锌口服液的热解反应活化能为79.49 KJ·mol-1,室温(20℃)的贮存期为18个月.结果表明采用初匀速法测定硫酸锌口服液的稳定性是切实可行的.
作者:朱建国;顾继红;石健 刊期: 2005年第02期
目的研究脊髓损伤行神经根移位术后的神经肌电改变.方法将30只Wistar大鼠随机分为两组,每组15只,切除L2段脊髓0.5 cm.一周后切断右侧L1和L2神经根,其中实验组(A组)行神经根移位术即L1神经根近端和L2神经根远端吻合;对照组(B组)仅行L2神经根原位吻合.术后12周行神经肌电生理检查,观察两组动物股四头肌神经肌电变化.结果术后12周电生理检查表明A组右侧股四头肌失神经支配现象明显改善,股四头肌功能有所恢复,而B组无改善.结论神经根移位术能重建脊髓损伤后的反射和传导通路,从而恢复截瘫肢体的部分功能.
作者:徐华中;唐天驷;范胜利;杨惠林;戴永萍;赵耀 刊期: 2005年第02期
目的探讨维持性血透患者的认知功能及其可能的影响因素. 方法应用MMSE对49例行门诊血透的患者进行认知功能评估,与正常人群进行对照研究. 结果血透治疗前14.3% (7/49)的患者存在轻度认知功能障碍(MMSE评分18~23分),6.12% (3/49)的患者存在中至重度的认知功能障碍(MMSE评分0~17分),治疗后其认知障碍有改善但仍低于正常人(P<0.01).多元逐步回归分析显示,MMSE分值与合并症数目增多,血红蛋白含量下降及血清白蛋白降低显著相关. 结论血透患者的认知功能减退可能与其合并症数目、血红蛋白含量、白蛋白等因素相关.
作者:张莉;兰光华;李声宏;吴爱勤 刊期: 2005年第02期
目的探讨金克(槐耳清膏)在胰腺癌细胞Panc-1生长转移过程中的影响及可能机制.方法不同浓度的金克及5-FU分别与人胰腺癌细胞Panc-1共同培养.MTT法观察生长抑制曲线,FCM观察细胞周期变化及凋亡发生,TUNEL法观察凋亡发生情况并计算凋亡率,细胞免疫组化检测凋亡基因Caspase-3的表达,ELISA法检测细胞培养上清VEGF的分泌变化.结果金克抑制Panc-1的生长,主要阻滞在G1期,促进凋亡发生、Caspase-3的表达并抑制VEGF的分泌.结论金克对于胰腺癌细胞Panc-1有确切杀伤抑制疗效.
作者:周进;李德春;匡玉庭 刊期: 2005年第02期
目的探讨血小板P选择素(P-selectin)在哮喘患者中的表达及其临床意义.方法体外分离13名健康对照者,37名哮喘急性发作患者,22名哮喘缓解者的血小板和血浆,用流式细胞仪对血小板进行P-selectin测定,用放射免疫分析法对血浆血栓素B2(TXB2)、6-酮前列腺素F1α(6-K-PGF1α)进行测定.同步测定所有参试者肺功能,分析与P-selectin表达的关系.结果哮喘急性发作者P-selectin、TXB2、6-K-PGF1α均较健康对照者明显升高(P<0.05),当经过治疗处于缓解期时,P-selectin、6-K-PGF1α较健康对照组无明显差别(P>0.05).P-selectin的表达水平与FEV1占预计值百分比(FEV1% Pred)成显著负相关(r=-0.583,P<0.01).结论哮喘急性发作患者有P-selectin的高表达,表达水平与肺功能成负相关,P-selectin在哮喘的发病中起着一定的作用.
作者:雷伟;黄建安;杨新静;於葛华;张学光 刊期: 2005年第02期
目的研究99mTc标记葡萄糖99mTc-EC-DG在正常小鼠体内的生物学分布规律,用于临床肿瘤显像作基础研究.方法正常昆明小鼠48只,分8组,每组6只,实验前小鼠禁食8 h以上.尾静脉注射99mTc-EC-DG 3.7 MBq (100 μCi) 后5 min、15 min、30 min、1 h、2 h、4 h、8 h和24 h放血处死,取心、肝、脾、肺、脑、肾、肌肉、骨、小肠、胃和血液等组织或器官,称重并测量其放射性,计算每克组织百分注射剂量率(%ID/g).结果 99mTc-EC-DG主要经肾脏代谢,脑不吸收99mTc-EC-DG,肌肉组织摄取亦较少.各组织、器官的百分剂量率在1 h内除血液下降稍慢外,其余均有明显下降.结论 99mTc-EC-DG标记方便,体内外稳定性好,小鼠体内生物学分布表明其可能是一种较好的葡萄糖代谢显像剂.
作者:唐军;周俊东;陈杰;杨仪 刊期: 2005年第02期
目的研究辐射对人脐静脉内皮细胞系ECV-304生物学特性的影响,探讨放射性皮肤烧伤的愈合机制.方法倒置显微镜观察不同剂量辐射下ECV-304细胞形态学的变化;3H-TdR掺入法和CB法检测辐射对ECV-304增殖抑制及微核发生率的影响;RT-PCR半定量法检测辐射对内皮细胞VEGF的表达.结果辐射可导致ECV-304细胞核体积增大,细胞均质性变差;且对ECV-304增殖的抑制作用呈剂量依赖性,随剂量增加而增大;随剂量增加,微核发生率明显增加;RT-PCR结果表明,VEGF在细胞受到辐射后8 Gy以上表达增高,而且持续表达至72 h.结论γ射线通过损伤DNA和细胞染色体抑制ECV-304增殖,同时VEGF在内皮细胞受辐射后表达升高,可能对细胞具有辐射防护作用,这为放射性烧伤的治疗奠定了理论基础.
作者:章文成;杨占山;杨淑琴;潘秀花;岳凌 刊期: 2005年第02期
回顾分析腹腔镜阑尾切除术23例的临床资料,探讨腹腔镜阑尾切除术在小儿外科中的应用.结果:23例均在腹腔镜下完成阑尾切除术,1例脐部切口感染,2例残余腹腔脓肿,无因出血、肠瘘、肠粘连、肠梗阻而再手术者.提示腹腔镜阑尾切除术具有创伤小、恢复快、误诊率低、并发症少、切口小而美观等优点,可降低切口感染、肠粘连、肠梗阻的发生率,此术式尤其适用于肥胖小儿及异位阑尾炎患者.
作者:朱丽均;孙庆林 刊期: 2005年第02期