学术投稿

内吞相关蛋白MyosinⅥ/Disabled-2在小鼠耳蜗毛细胞的表达及年龄相关性变化的研究

陈知己;顾翔;蔡婷;宋锐;周小清;袁伟

关键词:内毛细胞, 网格蛋白介导内吞, 囊泡, 激光共聚焦显微镜扫描技术
摘要:目的:研究不同年龄小鼠耳蜗毛细胞内吞相关蛋白MyosinⅥ和Disabled-2 (Dab2)的表达及分布特点.方法:分别选取出生后2周、5周、9周及16月龄的昆明小鼠各10只,采用免疫荧光标记联合激光共聚焦显微镜扫描耳蜗基底膜铺片,观察MyosinⅥ及Dab2蛋白的表达定位,通过荧光定量逆转录PCR测定并比较不同年龄组小鼠耳蜗2种蛋白mRNA的表达水平.结果:MyosinⅥ及Dab2蛋白在内外毛细胞均有表达,支持细胞未见表达,且内毛细胞2种蛋白均存在局部高表达的亚细胞区域.比较不同年龄组MyosinⅥ荧光染色图像后发现,2周龄和16月龄小鼠荧光强度均低于5周龄和9周龄小鼠.比较不同年龄组小鼠2种蛋白mRNA表达后发现,2周龄小鼠mRNA相对表达水平均低于9周龄小鼠,差异有统计学意义(P<0.01),5周龄及16月龄组小鼠分别与9周龄小鼠相比,差异均无统计学意义(P>0.05).结论:调控网格蛋白介导内吞过程的MyosinⅥ及Dab2蛋白表达于内外毛细胞,内毛细胞顶区表皮板及附近胞质可能是这一过程的主要部位.随着年龄的增长,MyosinⅥ及Dab2蛋白的表达可能会发生改变,网格蛋白介导内吞过程效率可能因此相继发生变化,内毛细胞功能损伤可能与此有关.
临床耳鼻咽喉头颈外科杂志相关文献
  • DCF方案诱导化疗后手术治疗喉癌及下咽癌T2-3病变疗效分析

    目的:探讨DCF方案诱导化疗后手术治疗喉癌、下咽癌T23病变临床疗效.方法:按照治疗方法将102例喉癌及下咽癌T23病变患者分为试验组62例和对照组40例,试验组患者接受DCF方案诱导化疗3个周期后评价其疗效,符合手术适应证者行根治性手术;对照组直接行根治性手术.观察试验组肿瘤缓解率及毒副反应,比较2组手术切缘阳性率及生存差异.结果:试验组肿瘤缓解率为61.3%,其中喉癌缓解率显著低于下咽癌(44.4% VS 84.6%,P<0.05).喉癌试验组与其对照组在手术切缘阳性率、中位生存时间、3年和5年生存率差异均无统计学意义(P>0.05).下咽癌试验组距癌灶边缘0.3 cm、0.5 cm切缘阳性率显著低于对照组(P<0.05),距癌灶边缘1 cm肿瘤检出率、中位生存时间、3年和5年生存率与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05).诱导化疗期间试验组未见严重毒副反应.结论:采用DCF方案诱导化疗能够使喉癌、下咽癌T23病变癌灶缩小,减少喉及下咽部的切除范围,同时保证足够的安全切缘.

    作者:鲁光平;潘骥群;刘志标 刊期: 2015年第07期

  • 木黄酮对人喉癌细胞Hep-2诱导凋亡及抑制增殖的研究

    目的:探讨木黄酮对人喉癌细胞Hep-2的诱导凋亡及抑制作用.方法:采用CCK-8法测定木黄酮抑制细胞系Hep-2增殖的IC50值;应用流式细胞术检测木黄酮对喉癌细胞所引起的周期分布变化与凋亡率;倒置相差显微镜下观察木黄酮干预人喉癌细胞Hep-2前后的细胞形态学变化.结果:木黄酮抑制Hep-2细胞增殖的IC50值为23.64 μg/ml;采用浓度为12 μg/ml和24 μg/ml的木黄酮分别作用于喉癌细胞24 h的凋亡率为22.4%±1.65%和30.64%±2.95%,与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05);采用浓度为12 μg/ml和24 μg/ml的木黄酮分别作用于喉癌细胞48 h的凋亡率为30.55%±0.72%和48.69%±1.06%,与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05).同一浓度的木黄酮作用于喉癌细胞24、48 h的凋亡率差异有统计学意义(P<0.05).结论:木黄酮能够明显抑制人喉癌细胞Hep-2细胞增殖,并引起Hep-2细胞的凋亡,凋亡率随时间的延长和剂量的增加而增高.

    作者:席盼盼;张淑香 刊期: 2015年第07期

  • 经鼻无创持续气道正压通气在婴幼儿喉囊肿术后机械通气撤机中的应用

    婴幼儿喉囊肿多为先天性疾病,临床上较少见,常导致婴幼儿发生喉喘鸣、呼吸吞咽障碍,甚至危及生命[1].目前此类疾病的有效治疗方法为手术切除大部分囊壁[2],虽然手术短小,但术后呼吸功能恢复较慢,常合并有手术部位水肿、创面渗出、气道狭窄等呼吸道梗阻表现,早期拔管难度大,常需要较长时间机械通气过渡.本研究通过观察经鼻无创持续气道正压通气(nasal continuous positive airway pressure,n-CPAP)在婴幼儿喉囊肿术后机械通气撤机中的应用,为临床提供更为有效、安全的治疗方法,现报告如下.

    作者:姜山;吴映辉;刘欣;冯春;何琼;钱静 刊期: 2015年第07期

  • 内吞相关蛋白MyosinⅥ/Disabled-2在小鼠耳蜗毛细胞的表达及年龄相关性变化的研究

    目的:研究不同年龄小鼠耳蜗毛细胞内吞相关蛋白MyosinⅥ和Disabled-2 (Dab2)的表达及分布特点.方法:分别选取出生后2周、5周、9周及16月龄的昆明小鼠各10只,采用免疫荧光标记联合激光共聚焦显微镜扫描耳蜗基底膜铺片,观察MyosinⅥ及Dab2蛋白的表达定位,通过荧光定量逆转录PCR测定并比较不同年龄组小鼠耳蜗2种蛋白mRNA的表达水平.结果:MyosinⅥ及Dab2蛋白在内外毛细胞均有表达,支持细胞未见表达,且内毛细胞2种蛋白均存在局部高表达的亚细胞区域.比较不同年龄组MyosinⅥ荧光染色图像后发现,2周龄和16月龄小鼠荧光强度均低于5周龄和9周龄小鼠.比较不同年龄组小鼠2种蛋白mRNA表达后发现,2周龄小鼠mRNA相对表达水平均低于9周龄小鼠,差异有统计学意义(P<0.01),5周龄及16月龄组小鼠分别与9周龄小鼠相比,差异均无统计学意义(P>0.05).结论:调控网格蛋白介导内吞过程的MyosinⅥ及Dab2蛋白表达于内外毛细胞,内毛细胞顶区表皮板及附近胞质可能是这一过程的主要部位.随着年龄的增长,MyosinⅥ及Dab2蛋白的表达可能会发生改变,网格蛋白介导内吞过程效率可能因此相继发生变化,内毛细胞功能损伤可能与此有关.

    作者:陈知己;顾翔;蔡婷;宋锐;周小清;袁伟 刊期: 2015年第07期

  • 以眼部症状为主要表现的鼻窦黏液囊肿3例

    作者:古庆家;李静娴;樊建刚;李德炳;赵李冰;何刚 刊期: 2015年第07期

  • 颏下瓣修复不保留喉功能的下咽癌术后近环周缺损的疗效

    目的:探讨应用颏下皮瓣修复不保留喉功能的下咽癌术后近环周缺损的疗效.方法:所有患者均行不保留喉功能的下咽癌根治术,术中同期行颏下瓣修复下咽黏膜缺损.结果:术后13例皮瓣全部成活,吞咽功能恢复良好,其中2例术后出现咽瘘.随访6~42个月,3例术后颈部淋巴结复发,无下咽局部复发者.7例随访3年以上,存活3例.结论:修复不保留喉功能的下咽癌术后近环周缺损,颏下瓣具有位置邻近、安全、简便、成功率高等优点,是适宜的下咽缺损修复材料.

    作者:叶飞;傅敏仪;陈国平;徐建慧;康红健 刊期: 2015年第07期

  • 左侧咽喉横纹肌瘤1例

    作者:马启奎;石业华;王雅宁;韩飞;王启荣 刊期: 2015年第07期

  • 鼻咽癌的生物靶向治疗进展

    作者:李燕巍;谦广茹 刊期: 2015年第07期

  • 白花蛇舌草多糖诱导鼻咽癌细胞凋亡及其机制研究

    目的:研究白花蛇舌草多糖(PEHD)体外抑制鼻咽癌CNE2细胞株增殖,诱导细胞凋亡及其凋亡机制.方法:用不同剂量PEHD(2、4、6 mg/ml)处理CNE2细胞24 h、48 h、72 h,用四甲基偶氮唑蓝法(MTT)检测CNE2细胞的增殖情况,计算抑制率.在不同药物浓度(2、4、6 mg/ml) PEHD作用48 h后,用Annexin V-FITC/碘化丙锭双染法(Annexin V/PI)标记的流式细胞术检测CNE2细胞的凋亡率.采用Western blot检测用药前后细胞中Bax蛋白、Bel-2蛋白和easpase-3蛋白的表达水平.结果:MTT结果显示,2、4、6 mg/ml PEHD可以明显抑制CNE2细胞增殖(均P<0.05),高抑制率可达76.5%,在2~6 mg/ml浓度内随着浓度的增加、时间的延长抑制作用逐渐增强,呈时间-剂量依赖性.流式细胞术检测到4、6 mg/ml PEHD作用48 h后,CNE2凋亡细胞比例显著增加,凋亡率分别为31.32%、46.28%,高于空白对照组4.86% (P<0.01).Western blot显示PEHD处理48 h后,CNE2细胞Bax蛋白和caspase-3蛋白表达上升,Bcl-2的表达下降.结论:在一定浓度范围内PE-HD(2、4、6 mg/ml)能够明显抑制鼻咽癌CNE2细胞的增殖,呈时间-剂量依赖性,其抑制作用与诱导细胞凋亡有关;PEHD可通过上调Bax、caspase-3蛋白表达、下调Bel-2蛋白表达,诱导CNE2细胞凋亡.

    作者:景艳;康敏;刘津;李静雨;唐安洲 刊期: 2015年第07期

  • 下咽食管巨大炎性纤维性息肉1例

    作者:王佳蓉;邱连升;陈晓芳 刊期: 2015年第07期

  • 脓腔冲洗及负压引流治疗颈深部及上纵隔脓肿

    颈深部及上纵隔脓肿病情危重,进展迅速,常呈多间隙发展,严重者及处理不当常可引起多种并发症及死亡.临床采用颈外侧切开,常规开放引流常常存在脓液引流不充分,治疗时间长,对合并上纵隔脓肿者引流更加困难,易导致脓腔进一步扩展等难题.我科于2010-01-2014-04通过改进,脓肿颈侧切开后,采用脓腔置冲洗管及负压引流管,关闭伤口,术后行脓腔冲洗及负压引流,临床疗效满意,现报告如下.

    作者:张建辉;唐嗣泉 刊期: 2015年第07期

  • 鼻内镜下低温等离子射频治疗会厌良性病变的疗效观察

    目的:总结分析鼻内镜下低温等离子射频治疗会厌良性病变的临床疗效.方法:回顾性研究经鼻内镜下低温等离子射频治疗的128例会厌囊肿、会厌乳头状瘤、会厌根淋巴组织增生患者,总结分析其临床疗效和术后并发症.结果:会厌囊肿和会厌乳头状瘤有效率100%,会厌根淋巴组织增生有效率96.36%.术后会厌表面及舌根创面均形成假膜,假膜脱落时间为术后1周左右,术后疼痛轻微.所有患者术后均未出现呼吸困难、继发出血及感染等并发症.结论:低温等离子射频配合鼻内镜是治疗会厌良性病变行之有效的方法.

    作者:李大伟;张庆丰;丁美娜 刊期: 2015年第07期

  • 扩大声门上水平喉部分切除术在中晚期喉癌及会厌谷癌中的应用

    目的:探讨扩大声门上水平喉部分切除术对中晚期喉癌及会厌谷癌的治疗效果及术后功能恢复的作用.方法:对44例喉癌患者均行扩大声门上水平喉部分切除术,即在原有声门上水平喉部分切除术基础上扩大切除范围,并对其术后生存及喉的呼吸、发声及吞咽功能恢复情况进行随访.结果:本组患者2年和3年生存率分别为72.7%和71.4%.术后随访无局部复发病例,死亡患者均由于颈部淋巴结转移或廓清后颈淋巴结复发.本组病例拔管率为97.7%(43/44).术后42例(95.5%)发声良好,其余2例行杓状软骨部分切除患者发声中等.患者术后存在不同程度误咽,但经过练习后终都拔除鼻饲.结论:扩大声门上水平喉部分切除术能够彻底切除肿瘤,术后喉部呼吸、吞咽和发声功能恢复满意.

    作者:赵旭东;季文樾 刊期: 2015年第07期

  • 自体脂肪注射治疗单侧声带麻痹的Meta分析

    目的:通过搜索文献对声带内自体脂肪注射(VFAFI)治疗单侧声带麻痹(UVCP)进行系统描述和Meta分析,分析其是否为治疗UVCP有效治疗方式之一.方法:使用相关关键词在PubMed、医知网、维普医学、万方数据、中国医院知识书仓(CHKD)、中国知网(CNKI)等电子数据库进行文献检索.提取的数据包括作者、出版时同、诊断、自体脂肪注射治疗.治疗结果用3个标准来衡量:空气动力学以及频闪喉镜结果、患者自我感觉声 ‘音的改变、主客观声学参数.Meta分析根据异质性大小采用固定效应模型或者随机效应模型来分析.结果:5篇文章被纳入研究,共包括404例患者.所有研究都显示患者接受治疗后,各种参数测量结果都有明显提高或降低.电子喉镜与频闪喉镜结果方面,实验组和对照组差异无统计学意义[OR=1.08,95% CI (0.90,1.29)].患者术后整体自我感觉较好,术后炎症反应轻微,1个月内可消失.标准化噪声能量、频率微扰术后较术前明显降低,实验组与对照组间差异无统计学意义;F0、振幅微扰、长发声时间术后较术前明显升高,组间差异无统计学意义.结论:VFAFI的损伤性很小,其不良反应可自限.接受治疗的患者主观与客观的声学测量值均有明显提高或降低.进一步的具有更长随访期更大样本的对照研究将会增加VFAFI效力的可信度.

    作者:许庆庆;翟所强;王荣光;杨仕明;黄冬雁 刊期: 2015年第07期

  • 改良式胸乳晕径路完全腔镜下甲状腺切除术122例临床报告

    目的:探讨改良式胸乳晕径路完全腔镜下甲状腺切除术的安全性和可行性.方法:回顾性分析122例采用不广泛分离胸部皮瓣的改良胸乳晕径路完全腔镜下甲状腺切除术患者的临床资料.结果:121例患者顺利完成手术,另1例术中中转为锁骨下小切口腔镜辅助手术;大结节直径为(2.05±1.06)cm,手术时间为(88.61±27.87)min,出血量为(31.23±16.14)ml,术后引流时间为(3.54±0.88)d,总引流量为(139.09±95.93)ml;术后病理标本中检测到甲状旁腺9例,未见术后低钙抽搐;术后声音改变者6例;除1例中转手术,余患者美容效果满意.随访0~24个月,未见肿瘤复发和转移.结论:改良式胸乳晕径路完全腔镜下甲状腺切除术操作便利,可避免胸部皮瓣的广泛分离,美容效果满意,是安全有效的手术径路.

    作者:陈健;郑红梅;江亮;邓万凯;李奇志;刘细国;樊大庆;何家林 刊期: 2015年第07期

  • 双蒂供血的胸大肌肌皮瓣在喉癌和下咽癌手术缺损修复中的应用

    目的:探讨双蒂供血的胸大肌肌皮瓣在喉癌、下咽癌手术缺损修复中的应用.方法:应用胸大肌肌皮瓣一期重建喉癌和下咽癌术后缺损22例,均为初治患者.术中保留胸肩峰血管的胸肌支及胸外侧血管的分支,制备成起始部不含肌肉的双蒂血管筋膜束,肌皮瓣经锁骨下隧道至缺损区.术后密切观察颈部术区的皮下肿胀情况、引流物的量和颜色等,以排除术区血肿的发生,有怀疑时要及时探查.结果:22例患者胸大肌肌皮瓣全部成活,发生咽瘘2例,经换药后愈合;术后接受放疗21例,无继发肌皮瓣坏死.随访6~24个月,1例颈段食管环周缺损卷筒修复者,放疗后8个月出现吻合口狭窄,后行胃造瘘治疗;余21例吞咽功能恢复良好.13例保留喉功能患者,仅1例带管生存,拔管率92.3%,均无交流障碍.因随诊时间短,无死亡患者.结论:双蒂供血的胸大肌皮瓣,若血运得到充分保证,术后不需要复杂繁琐的设备来观察和监测皮瓣血运,仅排除可能导致肌皮瓣坏死的因素,即能保证胸大肌皮瓣的成活.

    作者:张伟;李明月;刘宁;陈方文;孟庆芝 刊期: 2015年第07期

  • 322例经皮旋转扩张气管切开术的临床体会

    常规的气管切开术耗时较长,不能迅速建立畅通的气道,可能导致部分患者出现SaO2的迅速下降和严重缺氧而诱发心律失常,甚至出现心跳、呼吸停止,对危重症患者的治疗造成极其不利的影响.为了缩短床旁操作的手术时间,Ciaglia等(1985)发明了经皮扩张气管切开术(percutaneous dilatational tracheostomy,PDT),常用的PDT方法有4种:初的Ciaglia法(逐步扩张法),改良的Ciaglia Blue Rhino法(单步扩张法),导丝扩张钳技术(guide wire dilating forceps)和Fantoni法(经喉气切法,translaryngeal tracheostomy).2001年德国鲁西公司推出了一种新的PDT技术——经皮旋转扩张气管切开术[1].我院自2007年以来已应用此法实施322例PDT技术,现将方法和经验总结如下.

    作者:杨春妮;王国新 刊期: 2015年第07期

  • 颌面颈深部间隙感染62例临床分析

    颈深部感染是指颌面头颈部深处的各种感染,包括牙、咽、扁桃体、涎腺、食管、呼吸道等处的炎症,或由异物引起,感染常向颌面颈深部深浅筋膜之间扩展形成脓肿或较广泛蜂窝组织炎,如扁桃体周围间隙,颌面、颌下各间隙,咽后隙,咽旁隙,颈前肌肉深浅间隙,喉旁间隙,会厌前间隙,气管周围间隙及上纵隔等感染均属此类.云南省第三人民医院耳鼻咽喉科于2006-06-2014-11收治62例重症颌面颈深部感染患者,经手术切开脓肿及抗感染等综合治疗取得满意疗效,现报告如下.

    作者:代学忠;何晓光;明澄;周扬;鲍学钰 刊期: 2015年第07期

  • 中重度OSAHS患者海马及脑皮质代谢紊乱与认知功能障碍的相关性研究

    目的:分析中重度OSAHS患者手术前后海马及脑皮质代谢产物BDNF、H2S和S-100β的血清水平,并分析其与早期认知功能的相关性.方法:随机选取44例中重度OSAHS患者,经蒙特利尔认知评估量表(MoCA)分为认知功能正常组(19例)和认知功能障碍组(25例).对认知功能障碍组患者行UPPP手术治疗,术后随访6个月,25例患者中21例(治疗组)得到随访,失访4例;同期随机选取19例体检健康者为对照组.各组均检测血清BDNF、H2S和S-100β水平,并分析其与睡眠紊乱、缺氧和认知功能的相关性.结果:①PSG监测结果显示,OSAHS患者与治疗组和对照组比较:AHI、Ⅰ+Ⅱ期、LA/HT和SLT 90%升高,Ⅲ+Ⅳ期、REM期、MSaO2和LSaO2降低;认知功能障碍组与认知功能正常组比较:Ⅲ+Ⅳ期、REM期和LSaO2降低.②认知功能障碍组与认知功能正常组、治疗组与对照组比较:BDNF和H2S升高,S-100β减低;MoCA总分、注意、记忆/延迟回忆评分降低.③生化指标与PSG相关性:血清BNDF和H2S与AHI负相关,与Ⅲ+Ⅳ期、REM期、MSaO2和LSaO2正相关;S-100β与AHI正相关,与Ⅲ+Ⅳ期、REM期、MSaO2和LSaO2负相关.④生化指标与MoCA评分相关性:血清BNDF、H2S与MoCA总分、注意、记忆/延迟回忆均正相关;S-100β与MoCA总分、注意、记忆/延迟回忆均负相关.⑤OSAHS患者认知功能障碍的MoCA总评分与血清生化指标的直线回归方程式为:YM.CA=40.131+0.22 XBDNF+0.012 XH2S-0.647Xs-100β(R2 =0.461).结论:OSAHS患者睡眠结构紊乱和夜间低氧血症会导致以注意力和回忆力为主的认知功能障碍.外周血BDNF、H2S和S-100β等可间接反映OSAHS患者海马和脑皮质代谢紊乱程度,可作为评估OSAHS患者早期认知功能障碍的较敏感指标.

    作者:汪斌如;徐先荣;梁耕田;张莹莹;刘莉;张涓 刊期: 2015年第07期

  • 喉癌侵犯下咽部环后段的MRI表现

    目的:观察喉癌侵犯下咽部环后段的MRI表现,并为临床早期发现喉癌侵犯环后段提供依据.方法:回顾性分析18例喉癌侵犯环后段患者的MRI影像学资料,观察正常结构和层次的破坏情况以及肿瘤侵犯范围,找出喉癌侵犯环后段共同的表现.结果:喉癌侵犯环后段所在区域前壁的黏膜层、黏膜下脂肪层及肌层者为18例,侵犯后壁的黏膜层、黏膜下脂肪层及肌层者为14例,可以见到软组织肿块者15例,下咽腔消失者16例.既侵犯前壁全层又侵犯后壁全层,并伴有软组织肿块以及下咽腔消失者14例.结论:喉癌侵犯环后段时多伴有黏膜层、黏膜下脂肪层和肌层的破坏及信号的异常,并可见到软组织肿块,熟悉喉癌侵犯环后段的MRI表现,对于早期发现喉癌侵犯环后段尤为重要.

    作者:黄勇华;黄平波;王勇;侯庆宇;陈志章;李燕;张忻宇 刊期: 2015年第07期

临床耳鼻咽喉头颈外科杂志

临床耳鼻咽喉头颈外科杂志

主管:中华人民共和国教育部

主办:华中科技大学同济医学院附属协和医院