学术投稿

MMP-24基因siRNA真核表达载体的构建及鉴定

骆亚平;孙贵芹;汪丽萍;黎静;钟梅

关键词:MMP-24, RNA干扰, 载体构建
摘要:目的:构建基质金属蛋白酶-24(matrix metalloproteinase-24,MMP-24)小干扰RNA(small interfering RNA, siRNA)表达质粒,以研究其对人卵巢浆液性囊腺癌细胞MMP-24基因表达的沉默效果,为探讨肿瘤的基因治疗奠定基础.方法: 根据Genbank数据库提供的MMP-24基因核苷酸序列,选择设计能转录小发卡RNA(small hairpin RNA, shRNA)结构的DNA序列,克隆到空载体pIU6-B中,构建重组质粒,并进行酶切和PCR鉴定以及测序分析.结果: 酶切和PCR鉴定以及测序证实重组质粒构建成功.结论: 利用RNA干扰技术可成功构建siRNA表达载体,为进一步探索卵巢癌基因治疗奠定了基础.
数理医药学杂志相关文献
  • 无反应肺炎的原因分析及对策

    目的:分析无反应肺炎的原因与对策.方法:从感染、非感染及原因不明因素3方面入手分析无反应肺炎的原因,对其及时作出正确临床评估,重视病史及存在危险因素,积极进行微生物学检测及放射影像学检查,必要时可进行有创检查(如支气管镜或开胸肺活检)等,总结其对策.结果:在治疗中针对原因,并采取相应治疗策略,提高治疗成功率.结论:临床医师应对无反应肺炎加以重视,明确其原因,合理用药.

    作者:李延红;宋卫东;曾飞球 刊期: 2009年第03期

  • 弓形虫抗体阳性精神分裂症一级亲属免疫球蛋白研究

    目的:了解弓形虫抗体阳性精神分裂症一级亲属免疫球蛋白的水平与正常人有无差异.方法:用速率散射比浊法检测弓形虫抗体阳性精神分裂症一级亲属免疫球蛋白(IgG、IgM)指标,并与弓形虫抗体阴性精神分裂症一级亲属、正常对照组进行比较.结果:弓形虫抗体阳性精神分裂症一级亲属免疫球蛋白明显高于两个对照组.结论:弓形虫感染可能是一种独立的发病因素,至少是一种诱发因素.

    作者:王德刚;王高华;王惠玲;王波;许安荣;李新胜;刘晓华;雷香菊 刊期: 2009年第03期

  • 病理性瘢痕与细胞因子相关性研究进展

    瘢痕是皮肤损伤达到一定程度后组织修复的必然结果, 烧伤、外伤、感染等均可造成瘢痕形成与增生.皮肤瘢痕本质上是一种皮肤伤口的病理愈合过程,其显著的特征是成纤维细胞持续活化所产生的细胞外基质(ECM)成分导致真皮的纤维化.理想的伤口愈合包含一种协调的调控机制, 参与组织愈合与修复的细胞在创口中分泌一些促进伤口愈合与组织纤维化的细胞因子,对伤口愈台进行调控.在此过程中, 正向与负向两类细胞因子调控成纤维细胞的增生与代谢活动,从而决定胶原等细胞外基质形成与降解之间的动态平衡.细胞因子调控机制的异常, 可导致这种平衡的破坏进而出现愈合的紊乱.因此深入研究生长因子,将为预防和治疗病理性瘢痕提供新的思路.

    作者:邓凌;农晓琳 刊期: 2009年第03期

  • 学生机房电脑管理系统的设计与实现

    该系统用VF编制解决了平时教学用机以及机房维护工作中用纸张、表格记录事件日积月累容易丢失又不便于查找的问题.

    作者:郑玉竹;彭建强 刊期: 2009年第03期

  • 创新药物投资项目的风险分析

    针对创新药物的研发过程,探讨了创新药物投资项目所面临的主要风险因素,并分析了所面临风险的特征,为中国医药企业投资项目的风险控制、风险管理和科学决策提供有价值的参考依据.

    作者:蔡宇 刊期: 2009年第03期

  • 干扰素联合高三尖杉酯碱治疗慢性粒细胞白血病17例

    异基因造血干细胞移植、格列卫等治疗慢性粒细胞白血病取得了肯定疗效,但因费用昂贵,许多患者无法得到很好治疗.我院应用IFN-联合HHT治疗初诊CML慢性期(CML-CP)患者17例,4例在3个月内进入加速期(CML-AP)或急变期(CML-BP),13例获得CHR.其中4例取得CCR,疗效肯定,现报道如下:

    作者:张秀芳;赵子义 刊期: 2009年第03期

  • 他莫昔芬对BGC-823细胞Caveolin-1表达的影响

    目的:观察Caveolin-1蛋白在胃癌细胞系BGC823中的表达情况,并探讨胃癌细胞BGC823经他莫昔芬(TAM)处理后,Caveolin-1蛋白表达的变化.方法:使用5×10-6M 和1×10-5M TAM处理胃癌细胞系BGC823 24h后,通过免疫荧光细胞化学的方法及细胞计数,检测细胞的凋亡情况以及Caveolin-1蛋白的表达变化.结果:Caveolin-1在胃癌BGC-823中高表达,经不同浓度的TAM处理24h后Caveolin-1的表达均下降(P<0.05),同时均出现明显凋亡(P<0.05).Caveolin-1的表达下降与细胞凋亡数呈正相关关系(P<0.05).结论:Caveolin-1在胃癌细胞BGC823中发挥生物学作用且与TAM介导的BGC823细胞的凋亡相关.

    作者:邓昊;易贝;曾智 刊期: 2009年第03期

  • 丹红注射液对不稳定型心绞痛治疗效果的长期临床随访观察

    目的:观察丹红注射液对老年不稳定型心绞痛的临床疗效及对血流动力学的影响.方法:选取160例老年不稳定型心绞痛患者随机分为治疗组(80例)和对照组(80例) ,治疗组在常规治疗基础上加用丹红注射液治疗15天,观察两组的临床疗效和血流动力学的变化.结果:治疗组总有效率96.3% ,优于对照组的81.3% (P<0.05) .治疗组血流动力学的改善与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05) .结论:丹红注射液治疗老年不稳定型心绞痛有较好的疗效且安全可靠,值得临床推广.

    作者:胡家顺;叶非;罗松辉;李艳;李从荣 刊期: 2009年第03期

  • 时域分析的MATLAB实现

    结合连续LTI系统的系统函数和高阶系统的微分方程给出了如何应用MATLAB求解系统的零输入响应、单位冲激响应和零状态响应.

    作者:邢国泉 刊期: 2009年第03期

  • 癌症患者化疗健康教育流程探讨及实施

    目的:探索癌症患者化疗健康教育流程表达实施对患者化疗期间心理适应能力、胃肠道反应、饮食知识自我护理能力、就医满意度等方面的影响.方法:将1205例癌症患者随机分成观察组380例与对照组420例.对照组采用一般的健康宣教方式;观察组将健康教育流程表引入到健康教育中,由管床护士从入院到出院负责,有计划有组织,阶段性对患者及家属给予全程、个体化健康教育.结果:观察组健康教育达标率明显高于对照组.结论:癌症患者化疗健康教育流程表达的实施可使患者在短时间内获得需要的疾病基本知识,从而采取健康的行为,提高心理适应能力配合化疗顺利进行.

    作者:方国娅 刊期: 2009年第03期

  • 59例腹部横切口剖宫产术娩头困难产钳助产的临床分析

    目的:探讨横切口剖宫产术娩头困难时产钳助产的疗效.方法:回顾性分析某院2007年3月~2008年10月59例腹部横切口剖宫产术娩头困难的临床资料.结果:59例中,使用产钳助娩31例(简称产钳组)占52.54%,强行加腹压按宫底徒手娩头28例(简称手取组)占47.45%.两组之间胎头娩出时间和母婴并发症差异有显著性(P<0.05).结论:横切口剖宫产术娩头困难时,产钳助产可降低母儿并发症,缩短胎儿娩出时间,值得在临床应用推广.

    作者:金艳嫒;方磊 刊期: 2009年第03期

  • 超早期手术结合川芎嗪治疗高血压脑出血的临床研究

    目的:寻求能够提高高血压脑出血临床疗效的救治方案.方法:采用随机对照试验方法对72例高血压脑出血患者进行分组治疗研究.治疗组32例,采用中西医结合方案(包括超早期手术,常规西医西药及中药川芎嗪注射液静脉滴注等综合救治方案);对照组40例,采用手术,常规西医、西药治疗.连续治疗28d后进行疗效评定.结果:治疗组临床疗效明显优于对照组(χ2=4.15,P<0.05),患者死亡数明显减少,差异有显著性(χ2=8.04,P<0.05);并发症发生数治疗组少于对照组(肺部感染6:16,χ2=11.37,P=0.001;上消化道出血8:16,χ2=4.10,P=0.04).结论:超早期手术结合中药治疗高血压脑出血疗效较不用中药组为好.

    作者:程巍 刊期: 2009年第03期

  • 我国肺栓塞误诊疾病分布特点的调查分析

    目的:调查我国PE误诊疾病的分布特点,以减少PE的误诊、漏诊.方法:通过中国期刊网中国医院知识仓库(CNKI-CHKD)检索2001年~2004年发表与PE误诊有关的病例研究报告,对被误诊患者一般情况、误诊疾病等进行了回顾性调查研究.结果:①经检索后共筛选出误诊文献110篇,累计报告PE误诊患者1540例,涉及临床、医技多个科室;②误诊疾病中,呼吸系统疾病23种(占31.5%),心血管疾病16种(占21.9%),神经系统疾病6种(占8.2%),外科系统疾病5种(占6.8%), 其他系统疾病23余种(占31.5%);③被误诊疾病多达70余种,冠心病与肺炎仍占据误诊疾病数量的前两位.结论:PE临床误诊疾病的分布涉及多个系统,以呼吸系统疾病的种类占首位,其次是心血管疾病.提示应重视肺栓塞与呼吸系统疾病和心血管疾病间的鉴别,提高交叉学科疾病诊断能力.

    作者:贾卫滨;李书芳 刊期: 2009年第03期

  • IL-1β对神经元样PC12细胞IL-1RⅠ蛋白表达的影响

    目的:探讨IL-1β对神经元样PC12细胞IL-1RⅠ蛋白表达的影响.方法:将PC12细胞传代后以一定的密度种植于培养皿后,NGF诱导其分化成神经元样细胞后,随机分为空白对照组(A组)、IL-1β1ng/mL刺激组(B组)、IL-1β5ng/mL刺激组(C组)、IL-1β10ng/mL刺激组(D组).24h后分别以MTT法测定各组细胞存活率,Western Blotting方法检测神经元样PC12细胞内IL-1RⅠ蛋白表达.结果:MTT法显示,与A组相比,不同剂量组的IL-1β均可导致神经元样PC12细胞存活率的下降(P<0.01);Western Blotting方法显示,与A组相比,不同剂量组的IL-1β刺激均可引起神经元样PC12的IL-1RⅠ蛋白表达上调(P<0.05).结论:IL-1β可引起神经元样PC12细胞的IL-1R Ⅰ蛋白高表达,这可能与其所致神经元样PC12细胞细胞存活率的下降相关.

    作者:谢炜;朱琳琳 刊期: 2009年第03期

  • 早期胃癌30例的临床病理特点分析

    目的:提高早期胃癌的发现率.方法:分析30例早期胃癌患者的临床病理特点,对内镜检查及活检中漏检病例做进一步分析.结果:造成部分病例漏诊的原因除检查不仔细外,还与早期胃癌的某些病理特点有关.结论:要提高早期胃癌的发现率,必须综合分析临床症状、胃镜检查及活检结果.

    作者:彭理平 刊期: 2009年第03期

  • RNA干扰靶向抑制PI3K p85α蛋白对大肠癌细胞增值的影响

    目的:探讨RNA干扰靶向抑制PI3K p85α蛋白表达对大肠癌细胞增值的影响.方法:设计4条shRNA干扰载体及1条阴性对照载体,分别稳定转染大肠癌SW480细胞.用Western Blot筛选出一组抑制效率高的细胞进行CCK-8细胞增值实验.结果:转染shRNA/324干扰载体的SW480细胞PI3K p85 蛋白表达显著降低,抑制率约90%,选择该组细胞作为有效干扰组.CCK-8细胞增值实验显示,接种48h、72h及96h后,干扰组细胞生长速度明显低于对照组细胞 (P<0.05).结论:PI3K p85α蛋白表达缺失可降低大肠癌SW480细胞的增值速度,PI3K p85 可能是大肠癌靶向治疗的新靶点.

    作者:孙嫣;田华;谢晓云;肖法嫚;宋于刚 刊期: 2009年第03期

  • 姜黄素对IGF-1调控的宫颈癌淋巴转移的影响

    目的:研究姜黄素对IGF-1调控的宫颈癌淋巴转移的影响.方法:运用实时荧光定量PCR检测IGF-1不同浓度、作用时间以及姜黄素作用下宫颈癌siha细胞中VEGF-C mRNA的表达.结果:①宫颈癌siha细胞VEGF-C mRNA的表达随IGF-1浓度的递增而变化, 10ng/ml时达峰值.0.5ng/ml、1 ng/ml、5ng/ml、10 ng/ml、50 ng/ml组VEGF-C mRNA表达量依次为对照组的1.34、1.67、3.14、5.28和3.02倍.5ng/ml(6.73± 0.25)、10 ng/ml(5.98 ± 0.18)、50 ng/ml(6.79 ± 0.12)组较对照组差异具有统计学意义(P<0.05).②宫颈癌siha细胞VEGF-C mRNA表达随IGF-1不同作用时点而变化,6h 达峰值.2h组、4h组、6h组和8h组的表达量分别为对照组的1.30、2.51、5.33和2.83倍.4h(6.80± 0.12)、6h(5.66 ± 0.24)和8h组(6.03 ± 0.10)较对照组差异具有统计学意义(P<0.05).③IGF-1、IGF-1+Cur(10μm/ml)和 IGF-1+Cur(20μm/ml)组VEGF-C mRNA的表达量依次为对照组的5.51、1.42和0.67倍.IGF-1组(7.20 ± 0.85)、IGF-1 +Cur(20μm/ml)(10.23 ±1.28)的表达量较对照组差异具有统计学意义. IGF-1 +Cur(10μm/ml)(9.15± 0.47)和 IGF-1 +Cur(20μm/ml)(10.23 ±1.28)组的表达量与IGF-1组差异具有统计学意义.IGF-1 +Cur(20μm/ml)(10.23 ±1.28)的表达量与对照组差异亦具有统计学意义. 结论:姜黄素能有效降低VEGF-C的表达,显著抑制IGF-1调控的宫颈癌淋巴转移.

    作者:汪茜;汪宏波 刊期: 2009年第03期

  • 2型糖尿病及其并发冠心病 TNF-α、IL-β、IL-6水平的比较研究

    目的:探讨肥胖和非肥胖伴 2 型糖尿病 (T2DM) 患者糖代谢异常的炎症机制及其合并冠心病时肿瘤坏死因子 (TNF-α )、白介素-1 (IL-1β )、白介素-6 (IL-6) 水平的变化特点.方法:选择经临床确诊的符合入选标准的 140 例 2 型糖尿病患者,按体质量指数 (BMI)分为肥胖组 70 例 (BMI ≥ 25 kg/m2) 和非肥胖组 70 例 (BMI 25 kg/m2);正常肥胖组 30例;正常非肥胖组 30 例.其中肥胖组中有 38 例并发冠心病,非肥胖组中有 21 例并发冠心病.用 ELISA 方法分别测定血清 TNF-α、IL-1β、IL-6 值.结果: TNF-α、IL-6 水平在 2 型糖尿病肥胖组不同程度的高于 2 型糖尿病非肥胖组,合并冠心病后升高更为显著;IL-1β水平只有在合并冠心病后才显著高于其他组.结论: 糖代谢异常与冠心病可能有共同的慢性亚临床炎症起源, 2 型糖尿病肥胖患者合并冠心病后炎症因子表达更显著.

    作者:吴风栋;郑和忠;曾彬 刊期: 2009年第03期

  • 我院门诊和住院业务收入变动因素分析

    目的: 探讨某院门诊、住院业务收入的影响因素,为医院管理决策提供依据.方法: 应用因素分析法对某院2006年、2007年业务收入进行分析.结果: 2007年业务收入增加812万元,受2个因素影响:门诊人次和单位费用分别导致其增加52.6万元、759.4万元;住院收入增加1149.9万元,受3个因素影响:住院人次增加使其增加410.9万元,平均住院日减少使其减少88.7万元,住院人均费用增加使其增加827.7万元.结论:单位费用上升是医院业务收入增长的主要原因.

    作者:汪波 刊期: 2009年第03期

  • 应用SPSS实现辐射剂量存活曲线的拟合

    目的:针对生物医学研究中辐射剂量存活曲线的拟合问题,给予统计软件技术上的支持. 方法: 采用SPSS软件实现辐射剂量存活曲线的拟合.结果: 分别对3种常用辐射剂量存活曲线的生物物理模型,给出曲线拟合的SPSS程序,并进行实例分析,估计相应的模型参数.结论: 给出的SPSS程序适用于辐射剂量存活曲线的拟合.

    作者:李运明;封宗超;李小凯;许贲;孙娜;马兴;倪静 刊期: 2009年第03期

数理医药学杂志

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主管:湖北省教育厅

主办:武汉大学,中国工业与应用数学学会,医药数学专业委员会