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妊娠特异性糖蛋白对人外周血树突状细胞的免疫调节作用

唐小云;姬云丽;杨美荣;聂影;桂金秋;刘亚威;李福娟

关键词:妊娠特异性糖蛋白, 树突状细胞, 同种淋巴细胞反应
摘要:目的 探讨妊娠特异性糖蛋白对人外周血树突状细胞(DC)的免疫调节作用.方法 常规分离、培养外周血树突状细胞,一定浓度妊娠特异性糖蛋白作用后,采用三色抗体(Lin1-FITC、抗HLA-DR-Percp和PE标记的CD80、CD86、CD11c和CD123抗体)流式检测DC的表型;流式细胞仪检测DC摄取抗原PE-OVA的能力;MTT法检测DC刺激同种T淋巴细胞的增殖能力.结果 与对照组比较,妊娠特异性糖蛋白作用后的DC膜表面分子CD80、CD86和CD11c的阳性百分率明显降低(P<0.01),而CD123的阳性率明显升高(氏0.01);妊娠特异性糖蛋白作用后的DC的抗原摄取能力及刺激同种T细胞的增殖能力均明显降低(P<0.01).结论 妊娠特异性糖蛋白对外周血树突状细胞具有免疫下调作用.
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    目的 制备登革病毒NS1群特异性单克隆抗体,建立可检测登革病毒1~4型NS1抗原的ELISA检测法,为登革热的早期快速诊断奠定基础.方法 应用毕赤酵母表达系统分泌表达登革病毒2型重组非结构蛋白NS1,以此为抗原免疫BABL/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合,经HAT选择培养、间接ELISA筛选和亚克隆,获得能稳定分泌登革病毒NS1群特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株;用所获得的单克隆抗体建立可检测1~4型登革病毒NS1抗原的双抗体夹心ELISA法.结果 从登革病毒2型NS1重组毕赤酵母(Pichia Pastoris-NS1)中获得了大量纯化的登革病毒重组NS1蛋白;经免疫小鼠、细胞融合、间接ELISA筛选及3次亚克隆后,终获得2株能高效分泌抗登革病毒NS1单克隆抗体的杂交瘤细胞株2D7B6B4和2D10E2F6,间接ELISA显示抗体效价高达1∶8 000~1∶16 000;ELISA及免疫荧光检测证实,其所分泌的抗体与1~4型登革病毒及其重组NS1蛋白均有特异性免疫反应,为登革病毒NS1群特异性单克隆抗体;两株单克隆抗体均为IgG2a亚类;初步建立了检测4个血清型登革病毒NS1抗原的双抗体夹心ELISA法.结论 成功研制出两株能高效分泌抗登革病毒NS1群特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株.初步建立了可检测1~4型登革病毒NS1抗原的双抗体夹心ELISA检测法.

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  • 基于网络平台的PBL教学法在医学微生物学教学中的应用初探

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