张玉玲；周淑娴；王铭辉；王景峰
目的 自新生大鼠心脏中分离得到心肌干细胞,体外培养并观察其向心肌细胞分化的能力.方法 无菌操作取下新生鼠心脏,经反复消化后,弃去消化液,所得残余组织块进行培养,视生长情况进行传代.传代细胞采用诱导分化培养液进行培养,细胞生长至镜下可见搏动细胞时,分别对原代细胞和传代细胞进行流式细胞鉴定及免疫组化染色.结果 从消化后残留心肌组织块中成功培养出原代细胞,经流式细胞仪鉴定其表型为c-kit、CD31阳性,CD34、CD45阴性,心肌钙蛋白T(CTnT)阴性.细胞经传代培养两周后,单个细胞开始出现搏动,亦可见成团细胞的同步收缩.再次流式鉴定,表型有所改变,主要是CD31转阴性,CTnT阳性,而c-kit、CD34、CD45无明显变化.免疫组化再次证实,原代细胞并不表达心肌细胞结构蛋白CTnT,而在部分传代细胞内可见CTnT表达.结论 成功自心脏中分离得到一类表型为c-kit+CD31+CD34-CD45-CTnT-的细胞,经使用不同成分培养液传代培养,可分化为可搏动的心肌细胞,并表达心肌结构蛋白.
作者：陆东风；吴昊；黄璟；李妍 刊期： 2006年第11期
目的 通过球囊损伤兔髂动脉造成动脉损伤的动物模型,观察四逆汤对损伤后动脉内膜的保护和修复作用,以及对氧化应激的影响.方法 雄性新西兰大白兔24只,随机分为对照组、模型组、四逆汤治疗组(四逆汤组),每组8只.对照组兔给予普通饲料,模型组、四逆汤组兔给予高脂饮食.饲养2周后模型组、四逆汤组兔行髂动脉内膜剥脱术.4周后,通过电镜观察髂动脉内膜的病变情况,光镜观察血管的病理变化,并检测血清超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)和血脂的水平.结果 扫描电镜发现,对照组兔髂动脉内膜内皮细胞形态正常,排列整齐;模型组可见内皮细胞脱落,内皮细胞增生形态各异,内皮下胶原纤维暴露;四逆汤组内皮细胞排列基本正常.光镜发现,对照组兔髂动脉管腔和管壁厚度正常,管壁光滑;模型组管壁明显增厚,管腔明显狭窄,内膜增厚;治疗组血管病变程度明显减轻.四逆汤可明显改善血脂的紊乱.对照组兔血清SOD活性明显高于四逆汤组和模型组,四逆汤组SOD活性又明显高于模型组.对照组兔血清MDA水平明显低于四逆汤组和模型组,四逆汤组MDA水平又明显低于模型组.结论 四逆汤可减轻兔髂动脉剥脱术后的内膜增生和血管狭窄,其机制可能与抑制髂动脉剥脱术后兔的脂质过氧化反应、增强SOD活性有关.
作者：刘勇；钱孝贤；吴伟康；周彬；陈璘；刘金来 刊期： 2006年第11期
目的 观察环氧化酶-2(COX-2)选择性抑制剂塞来昔布对化学致癌剂7,12-二甲基苯蒽(DMBA)化学诱发的大鼠乳腺癌形成的影响.方法 DMBA油剂灌胃复制大鼠乳腺癌模型,90只大鼠分为3组:单纯诱癌组作为阴性对照、三苯氧胺组作为阳性对照和塞来昔布组,观察塞来昔布对大鼠乳腺肿瘤发生率和COX-2、VEGF蛋白表达的影响.结果 三苯氧胺组(48.15%)和塞来西布组(50.00%)肿瘤发生率明显低于单纯诱癌组(85.71%),差异具有显著性(p=0.003;P=0.004).塞来昔布组COX-2蛋白表达率(28.57%)低于单纯诱癌组(83.33%)和三苯氧胺组(69.23%),差异具有显著性(P=0.001;P=0.035).塞来昔布组VEGF蛋白表达率(42.86%)低于单纯诱癌组(79.17%)(P=0.023);和三苯氧胺组(46.15%)无显著性差异(P=0.863).结论 塞来昔布能抑制DMBA诱发的大鼠乳腺癌的发生、发展,下调COX-2和VEGF蛋白表达可能是其机制之一.
作者：康华峰；王西京；刘小旭；代志军；薛锋杰；薛兴欢 刊期： 2006年第11期
目的 寻求一种简单有效的分离培养大鼠触须毛乳头细胞的方法.方法 将大鼠触须毛囊完整拔出后,在37℃缓慢搅拌的条件下加入0.2%胶原酶Ⅰ消化3 h,间断吹打使毛乳头游离,收集上清低速离心(300r/min)后收集毛乳头进行培养,计算其贴壁率,检测α-平滑肌肌动蛋白表达.结果 全毛囊消化法能显著降低工作强度,减少污染机会,具有毛乳头贴壁快和细胞迁出时间短的优点.α-平滑肌肌动蛋白染色阳性.结论 全毛囊消化法是一种简单有效的分离培养大鼠触须毛乳头细胞的方法.
作者：孙锡金；胡志奇 刊期： 2006年第11期
目的 评估人工全膝关节置换术(TKA)围手术期的显性和隐性失血量.方法 对2002～2005年的40例TKA患者进行回顾性分析,通过Gross方程推算患者术后平均显性失血量及隐性失血量.结果 平均总失血量1538 ml,其中显性失血量747 ml (49%),隐性失血量是791 ml(51%).使用自体血回输患者的总失血量是1650 ml,其中显性失血量903ml(52%),隐性失血量是786 ml(48%);未使用自体血回输患者的总失血量是1370 ml,其中显性失血量572 ml(42%),隐性失血量是798ml(58%).结论 TKA隐性失血占总失血量的比例较高,使用自体血回输不能完全满足机体恢复体循环的需要,在围手术期要注意及时补充血容量.
作者：罗吉伟；金大地；黄美贤；廖华；徐达传 刊期： 2006年第11期
目的 探讨结肠黑变病(MC)的病因,分析其临床表现和预后.方法 回顾性分析经内镜和病理确诊为MC的17例患者的临床、内镜资料.结果 17例患者中有便秘症状者16例,服泻药15例,病变累及全结肠9例,合并腺瘤性息肉3例,上皮不典型增生1例,合并直肠癌1例.结论 MC主要与便秘和长期服泻药有关;年龄与MC发病密切相关;有恶变倾向,临床上应予重视.
作者：黄聪武；詹海勇；李壁宏；李国平；郑宗茂；吴灵飞 刊期： 2006年第11期
目的 构建编码Her2/neu膜外第一受体区、全长膜外区、膜外及跨膜区3个蛋白的重组腺病毒真核表达载体,为信号传导和免疫研究建立实验材料.方法 RT-PCR扩增出3个目的片段的cDNA,克隆进pAdTrack-CMV穿梭质粒,在BJ5183细菌内同源重组形成腺病毒质粒,脂质体法转染293细胞后,荧光显微镜观察病毒噬斑形成和绿色荧光蛋白表达,Western blot检测目的蛋白的表达.结果 PCR扩增出了预定大小的目的基因cDNA片段,测序结果和GenBank完全相符.病毒质粒转染293细胞后形成了病毒噬斑,绿色荧光蛋白和目的蛋白均获得表达.目的蛋白的表达量随着病毒感染复数的升高而增加.结论 成功地构建了在真核细胞中表达Her2/neu膜外及跨膜区蛋白的腺病毒载体,为Her2/neu膜外及跨膜区蛋白的功能研究提供了材料基础.
作者：马树东；罗荣城；丁振华；袁长青；丁雪梅 刊期： 2006年第11期
目的 建立扩增片段＜130bp,包括CSF1PO、TH01和TPOX及性染色体amelogenin基因座的miniCTTA扩增系统.方法 采用不同荧光染料标记引物,通过PCR扩增,利用ABI3100遗传分析仪进行片段长度分析,对100份无关个体血样,10个家系样本以及30份高度降解检材进行检测.结果 miniCTTA系统DNA分型结果与AmpFLSTR(R)Identifiler(R)试剂盒完全一致.结论 miniCTTA系统可以应用于个人识别和亲权鉴定,为降解DNA样本分型提供了新的方法.
作者：刘超；王会品；孙宏钰；王慧君 刊期： 2006年第11期
目的 通过体检及问卷调查,初步探讨老年人牙周病与冠心病的相关性.方法 选取2003-2005年西安市新城区和阎良区离退休老干部662名,其中男589名、女73名,平均年龄(72.5±8.9)岁,分为冠心病组357例(病例组),包括稳定型心绞痛(SAP)141例,不稳定型心绞痛(UAP)134例及急性心肌梗死(AMI)82例和非冠心病组305例(对照组),均设计相同的问卷进行调查,比较两组牙周指数(PI)及牙齿缺失数的差异.结果 (1)冠心病组PI明显高于对照组(P＜0.01),在调整性别、年龄、体重指数、吸烟史、高脂饮食习惯、高血压病及心脑血管病家族史后,PI仍与冠心病显著相关(P＜0.01).(2)AMI、UAP和SAP组的PI与对照组比较差异均有显著性(分别P＜0.05,P＜0.01和P＜0.01);牙齿缺失数在冠心病各组与对照组之间差异无显著性.(3)吸烟(OR=0.638,P＜0.01)和心脑血管病家族史(OR=0.678,0.01＜P＜0.05)亦为冠心病的危险因素.结论 老年牙周病与冠心病之间存在一定的相关性.
作者：李高中；徐琳；权正良；寇植；蔡乐农；苏联珍；李秀燕；种永峰 刊期： 2006年第11期
目的 探讨儿茶素对小鼠的辐射防护作用.方法 采用6MVX直线加速器一次性全身照射小鼠,儿茶素加照射组以200mg/kg·d儿茶素灌服动物10 d后施行照射.比较两组小鼠体质量变化、外周血白细胞总数、平均存活时间及30d生存率.结果 儿茶素加照射组小鼠体质量减轻低于照射组,平均生存时间明显长于照射组,30 d存活率比对照组明显升高,而且儿茶素能加快单纯受照射小鼠外周血白细胞的恢复.结论 儿茶素对受照射小鼠有明显的辐射防护作用.
作者：石卫民；赵新萍；芦婷 刊期： 2006年第11期
目的 分析皮质下动脉硬化性脑病(SAE)的病因、病理、临床表现、影像学特征.方法 对63例SAE患者进行回顾性分析.结果 SAE组危险因素以高血压为主,均有神经局灶体征,较明显的认知功能障碍,多缓慢起病,临床症状呈阶梯样进展.58例CT扫描在双侧侧脑室周围白质区及半卵圆中心可见不同程度大致对称的低密度影,均合并腔隙性梗死.44例做MRI检查,T2加权像均表现为环绕侧脑室周围对称、大片融合的长T1、长T2异常信号,腔隙性梗死灶数目明显多于CT,呈点条状高信号影.结论 SAE以高血压、较明显的认知功能障碍,常见卒中样发作为主要临床特征,CT及MRI表现为侧脑室周围广泛融合成片的脑白质病变,并有脑室周围白质的明显萎缩及双侧脑室对称性扩大.
作者：高国栋；莫建伟；徐书雯 刊期： 2006年第11期
目的 克隆和表达人的神经元特异性烯醇化酶(HuNSE)基因,制备HuNSE多克隆抗体,以期用于朊病毒病及相关疾病的临床诊断.方法 经RT-PCR扩增HuNSE基因和测序验证后,将其克隆于原核表达载体pQE30,在大肠杆菌M15中诱导表达HuNSE蛋白,蛋白经Ni-NTA亲和纯化后,免疫兔子,所制备的抗血清用ELISA、Western blotting和免疫组化鉴定.结果 所表达的HuNSE蛋白相对分子质量约为22000,以其为抗原制备的HuNSE特异性抗血清具有良好的免疫反应性.Western blotting和免疫组化结果显示抗血清可识别重组和不同哺乳动物脑组织中的NSE蛋白.结论 NSE基因在大肠杆菌中获得了高效表达,所制备的NSE特异性抗血清可用于朊病毒病及其他神经退行性疾病的诊断和研究.
作者：肖新莉；韩俊；张琳；陈岚；张瑾；陈新林；周伟；姜惠英；张宝云；刘勇；董小平 刊期： 2006年第11期
目的 探索白细胞介素-1β(IL-1β)激活后的许旺细胞与人发角蛋白复合培养构建人工神经桥接体,修复神经缺损.方法 体外培养纯化的许旺细胞经IL-1β激活前、后与细胞外基质凝胶修饰的人发角蛋白进行三维方向的共培养而构建成人工神经桥接体,移植入SD大鼠坐骨神经缺损处.S-100蛋白免疫组化染色鉴定许旺细胞,倒置显微镜和扫描电镜下观察许旺细胞与人发角蛋白共培养情况,原位杂交法观察人发角蛋白降解及神经生长因子(NGF)在坐骨神经内的表达,移植术4周后检测坐骨神经功能指数.结果 经IL-1β激活后的许旺细胞能更好地黏附于人发角蛋白表面,进行分裂、增殖.3～4周,桥接体内的人发角蛋白开始降解,其周围可见IL-1β激活后的处于增殖分裂期的许旺细胞NGF表达强阳性,坐骨神经功能恢复时间提前.结论 经IL-1β激活后的许旺细胞与细胞外基质凝胶修饰的人发角蛋白复合培养构建成人工神经桥接体,具有修复神经缺损的同时还能够加速坐骨神经损伤后功能的恢复.
作者：杨俊；邱小忠；余磊；朴英杰；秦建强 刊期： 2006年第11期
目的 研究急性心肌梗死时血管内皮细胞生长因子(VEGF)、基质细胞衍生因子(SDF-1)以及外周血CD34+细胞的动态改变,探讨其在心肌梗死(心梗)中的作用.方法 采集急性心梗患者发病第1、3、7、10、14天外周静脉血,应用酶联免疫方法检测心梗患者以及对照组患者血VEGF和SDF-1的水平.应用流式细胞仪检测心梗患者第1、7、14天外周血CD34+细胞的水平.同时对心梗患者进行心肌酶、肌钙蛋白、心电图及心脏超声等常规检查.结果 (1)心梗后第7天外周血CD34+细胞(个/μl)明显增高(2.35±0.72vs 1.48±0.49,P＜0.05);(2)心梗后血VEGF(pg/ml)明显升高,于第14天达到高峰(197.56±39.87 vs 53.79±18.12,P＜0.01);(3)心梗第1天血SDF-1(pg/m1)明显降低(1683.12±224.79 vs2178.67±265.34,P＜0.01),以后渐恢复至与对照组相同水平;(4)心梗第7天VEGF水平与外周血CD34+细胞高峰值之间有明显相关性;(5)VEGF高峰值与CK-MB高峰值和肌钙蛋白Ⅰ之间均有明显相关性.结论 心肌梗死本身即可动员干细胞至外周血;心梗后VEGF明显升高至少可持续2周以上,SDF-1短暂降低;两者的动态变化可能与干细胞动员及促使更多干细胞归巢至损伤心肌有关.
作者：邓争荣；杨春；马爱群；陈新义；耿涛 刊期： 2006年第11期
目的 观察小剂量氯胺酮联合利多卡因在人流中的麻醉效果及安全性.方法 选取我院妇科门诊人流病例105例,随机分成两组:氯胺酮联合利多卡因组(A组)58例,静脉注射氯胺酮2.0mg/kg及宫颈局部注射利多卡因;宫颈局部注射利多卡因组(B组)47例,进行人工流产术.结果 在人工流产术中采用小剂量氯胺酮联合利多卡因镇痛无痛率达到91.4%,宫颈松弛为93.1%.结论 小剂量氯胺酮联合利多卡因应用于人工流产术安全有效.
作者：李国成；陈清霞；陈志辽 刊期： 2006年第11期
目的 研究食管鳞癌组织中RhoC和OPN蛋白的表达及其与食管鳞癌生物学行为之间的关系.方法 采用免疫组织化学方法(二步法)检测80例食管鳞癌组织中RhoC和OPN蛋白的表达情况,探讨它们与食管鳞癌肿瘤大小、组织分化程度、TNM分期、淋巴结转移和预后的关系.结果 (1)RhoC蛋白在食管鳞癌组织中的阳性表达率为66.25%,其表达与淋巴结转移有关(rs=-2.115,P＜0.05),而与肿瘤大小、组织分化程度和TNM分期无关(P＞0.05);RhoC蛋白阳性表达组患者的术后生存时间较阴性表达组短,(P＜0.001);(2)OPN蛋白在食管鳞癌组织中的阳性表达率为100%,OPN蛋白的表达水平与组织分化程度(χ2=10.766,P＜0.05)及淋巴结转移有关(rs=-2.289,P＜0.05),而与肿瘤大小和TNM分期无关(P＞0.05);OPN蛋白的表达水平越高,患者术后生存时间越短(P＜0.05);(3)RhoC蛋白和OPN蛋白在食管鳞癌组织中的表达之间存在正相关性(rs=0.408,P＜0.001).结论 食管鳞癌组织RhoC和OPN蛋白的表达与淋巴结转移情况及患者的预后有密切关系,RhoC蛋白和OPN蛋白可作为食管鳞癌预后评价的参考指标.
作者：张惠忠；刘金耿；魏益平；吴澄；曹永科；王梅 刊期： 2006年第11期
目的 研究石杉碱甲对老年患者全麻苏醒期脑内胆碱酯酶和乙酰胆碱的影响.方法 30名拟接受全身麻醉复合连续腰麻的老年手术病人随机分为两组,每组15例.Ⅰ组于手术结束前30 min静脉注射石杉碱甲2 ml计0.3 mg;Ⅱ组空白对照,静脉注射生理盐水2 ml.两组病人均在蛛网膜下腔置管完成、手术结束后5 h两个时点抽取脑脊液1.5ml,测定脑脊液胆碱酯酶活力及乙酰胆碱含量.结果 各组术后5 h脑脊液乙酰胆碱含量均低于全麻前(P＜0.01),组间比较石杉碱甲组明显高于对照组(P＜0.01).石杉碱甲组病人术后5h脑脊液胆碱酯酶活力低于全麻前(P＜0.01);组间比较石杉碱甲组术后5 h脑脊液胆碱酯酶活性低于对照组(P＜0.01).结论 石杉碱甲可以抑制老年患者全麻苏醒期脑内胆碱酯酶活性,增加脑内乙酰胆碱含量,促进胆碱能神经功能的恢复.
作者：王刚；张双全；詹鸿 刊期： 2006年第11期
目的 克隆mTLR-2基因氨基端序列,并表达和纯化N端融合蛋白,制备抗mTLR-2 N末端的多克隆抗体.方法 采用PCR技术扩增编码mTLR-2N端1～153氨基酸的基因,并将其克隆到pET32A载体中,测序验证;用大肠杆菌表达融合蛋白,并以Probond树脂柱纯化;免疫家兔制备多克隆抗体,采用免疫组化、流式细胞术及间接ELISA检测抗体特异性及效价.结果 成功构建了融合表达载体pET-N,表达和纯化了相应的融合蛋白,所制备多克隆抗体可与pGEX-N表达的融合蛋白反应,并可结合表达TLR-2的RAW264.7及转染mTLR-2全长基因的CHO细胞.结论 获得了mTLR-2 N末端重组融合蛋白及其可与天然mTLR-2结合的多克隆抗体.
作者：杨翠兰；赵文忠；刘艳君；朱平；富宁 刊期： 2006年第11期
目的 评价广州市危险化学品监控与应急救援体系建立的现状.方法 分析广州市天河区黄埔大道东路危险化学品工厂事故发生的原因、应急处置的方式.结果 事故发生的原因为企业经营者及其员工缺乏防范化学事故的意识;事故单位违反国家、行业有关危险化学品经营单位选址规定;事故发生后广州市能及时启动危险化学品事故应急救援预案,科学应对、社会联动、相关部门协同作战是成功控制事态扩大、避免大规模人员伤亡的关键.结论 广州市已具备科学应对和处置突发化学事故的能力,但应进一步加强对城市内重大危险源的辨识和监控工作,以期能从源头上遏制城市化学灾害事故的发生.
作者：葛长荣；于德宪；俞守义 刊期： 2006年第11期
目的 利用细菌内同源重组法构建带有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)标签的γ-干扰素诱导蛋白10(IP-10)重组腺病毒载体并制备重组腺病毒.方法 将IP-10编码序列克隆入带有EGFP示踪的腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV中,形成转移载体pAdTrack-CMV/IP-10,将其在大肠杆菌BJ5183内与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1同源重组,得到重组腺病毒载体pAd/IP-10;酶切鉴定正确后转染HEK293细胞.收集病毒上清,PCR鉴定正确后,扩增并再次感染HEK293细胞检测病毒感染能力.结果 重组质粒经酶切、PCR和测序鉴定正确无误,并在HEK293细胞中包装成有感染活性的病毒颗粒.结论 成功地构建了表达IP-10蛋白的重组腺病毒载体并制备了重组腺病毒Ad/IP-10,为研究IP-10的蛋白功能提供了一个重要工具.
作者：邵紫韫；刘志锋；彭毅；徐佳；邓鹏；姜勇 刊期： 2006年第11期
南方医科大学学报杂志
主管:广东省教育厅
主办：南方医科大学
