学术投稿

艰难梭茵毒素基因3'末端重复区域基因片段的PCR克隆

杨晓强;姜泊;孙勇;王继德

关键词:艰难梭菌, 细菌毒素, 毒素A/毒素B, 基因克隆, 聚合酶链反应
摘要:目的探寻一种简单、快速、灵敏的检测艰难梭菌的方法.方法以艰难梭菌毒素A和毒素B基因3'末端高度保守重复区分别设计一对引物,进行PCR反应,同时在同一体系相同反应条件下使用相同引物分别以大肠杆菌和乳杆菌DNA为模板进行扩增,比较二者结果.结果从艰难梭菌成功克隆了毒素A基因3'端重复区域960 bp的基因片段及毒素B基因3'端重复区域1851 bp的基因片段,不同来源的菌株出现了相同的2条电泳带,并通过测序鉴定;而对照的大肠杆菌和乳杆菌株无特异电泳带出现.结论从艰难梭菌毒素A、毒素B基因3'末端重复区域克隆的基因片段具有保守性,可以作为基因探针在临床上进行艰难梭菌检测,该方法简便、灵敏,可直接用粪便标本进行检测.此外,这些基因编码的多肽具有较高的疏水性并存在着膜受体结合区域,可以此为基础进行基因工程蛋白质疫苗的研究.
南方医科大学学报杂志相关文献
  • 危重病人胃肠功能障碍与衰竭定量诊断评分方案

    胃肠功能障碍与衰竭(gastrointestinal dysfunction and failure,GIDF)是多器官功能障碍综合征(MODS)和多器官功能衰竭(MOn发生发展的一个重要因素,是多种严重疾病和器官损伤的共同病理生理过程.

    作者:但汉雷;白杨;王继德;张亚历;张振书;周殿元 刊期: 2002年第09期

  • 腹部大血管病变的3D DCE-MRA诊断

    目的阐述3D动态增强磁共振血管造影(three-dimcnsional dynamic contrast-enhanced magneticresonanceangiog-raphy,3D DCE-MRA)的原理及其在腹部大血管病变诊断中的价值.方法搜集32例腹部大血管3D DCE-MRA检查的影像资料,对其影像表现进行回顾性分析.结果(1)团注试验:对比剂通过肾动脉水平腹主动脉内的高峰时间为17~23s;(2)正常表现3例,清晰显示腹主动脉及其分支;(3)腹主动脉瘤7例,均显示主动脉受累段不规则增宽及实际的动脉腔;(4)腹主动脉夹层18例,均显示内膜片、真假两腔以及分支动脉起源的位置,显示破口12处、再破口16处;(5)动脉粥样硬化3例,均显示腹主动脉迂曲,管径粗细不均;(6)髂总静脉血栓形成1例,左髂总静脉未显影.结论3DDCE-MRA是一种非损伤性血管成像技术,对腹部大血管病变的诊断有重要意义.

    作者:郑卫权;张雪林;赵修义;曾庆乐;林志春 刊期: 2002年第09期

  • 艾滋病合并肺孢子虫肺炎20例临床分析

    目的总结艾滋病(AIDS)并发卡氏肺孢子虫肺炎(PCP)的诊断、治疗经验,分析预防性服药与防止复发的关系.方法对2000年7月~2002年5月作者所在医院收治的109例AIDS患者中并发PCP的20例患者的临床资料进行回顾性分析.结果20例患者均有发热、胸闷、气促,18例有咳嗽或咳痰,16例胸片呈间质样改变.经复方新诺明或氨苯砜治疗和治愈后预防性服药,有效率为75%(15/20),复发率为6.7%(1/15).结论对HIV感染者或AIDS患者,有典型的肺炎临床表现,胸片呈间质性改变,复方新诺明或氨苯砜治疗有效,可以诊断为PCP,并按PCP治疗;预防性服用复方新诺明可以降低AIDS患者PCP的发生率及复发率,值得推广应用.

    作者:赵清霞;李新月;何云;赵鲜丽;任英杰 刊期: 2002年第09期

  • 角质层与真皮层对氟尿嘧啶贴剂经皮吸收的影响

    目的比较皮肤角质层和真皮层及促透剂对药物经皮吸收的影响.方法制备氟尿嘧啶(5-FU)贴剂为模型药剂,以肉豆蔻酸异丙酯(IPM)为促透剂,采用Franz扩散池法,用高效液相色谱法和气相色谱法分别检测5-FU和IPM浓度,计算5-FU在各种皮肤状态下的透皮能力(Kp).结果剥离角质层后,5-FU的Kp是经完整皮肤的2.3倍;在IPM作用下5-FU的Kp为原来的1.8倍(经完整皮肤)和2.4倍(经剥离角质层皮肤).结论剥离角质层能增加5-FU的吸收;IPM主要降低角质层对5-FU的屏障作用,在剥离角质层后其对5-FU的吸收也没有增加作用.

    作者:李国锋;陈建海;神山文男;山本昌;陈志良 刊期: 2002年第09期

  • ACE基因的插入/缺失多态性与2型糖尿病伴高血压的相互关系

    目的探讨血管紧张素转换酶(ACE)基因插入/缺失(I/D)多态性与2型糖尿病伴高血压之间的相互关系.方法以ACE基因为候选基因,应用PCR方法,检测81例2型糖尿病伴高血压患者及117例2型糖尿病无高血压患者的ACE基因.结果2组研究对象DD、DI、Ⅱ基因型分布频率分别为27.16%vs20.51%、41.98% vs 41.88%、30.86%vs37.61%,D、I等位基因携带率分别为48.15%vs41.45%、51.85%vs58.55%,均有显著性差异(P<0.05),提示ACE基因DD型及D等位基因与2型糖尿病并发高血压的发生有相关性.糖尿病患者中ACE基因I/D多态呈DD型者发生高血压的风险率为Ⅱ型者的1.32倍,且糖尿病伴高血压患者病程显著延长.正常血压糖尿病患者ACE基因I/D多态性与单纯收缩压(SBP)升高患者ACE基因I/D多态性之间无显著差异,而与单纯舒张压(DBP)升高患者ACE基因I/D多态性之间显著相关.结论ACE基因I/D多态性参与2型糖尿病伴高血压的发病,D等位基因可能是2型糖尿病并发高血压的一个危险因子,且DBP升高在糖尿病伴高血压的发生中起重要作用.

    作者:周琳;薛耀明;罗仁;高方 刊期: 2002年第09期

  • 严重胸腹部闭合性联合伤致呼吸心跳停止成功救治1例

    报告1例严重胸腹部闭合性联合伤所致的急性呼吸心跳骤停得到成功救治的病例.闭合性胸腹联合伤后,因病情可能发展,应随时注意复查胸片、血气等;若基层医院条件不够,应及时转往上级医院,以免延误患者的治疗.

    作者:朱平 刊期: 2002年第09期

  • 腰椎小关节接触模型的有限元分析

    目的建立腰椎4~5运动节段的有限元模型,分析小关节在不同状态下的生物力学特性.方法获取一新鲜成人尸体腰椎4~5节段的断层CT扫描图像,利用此二维图像建立三维立体有限元模型,小关节部位处理为接触问题.模拟人体的不同承载状态对此模型进行计算处理.结果小关节在不同状态下承担着不同的载荷,特别是在椎体轴向旋转运动状态下抗旋作用更明显.结论小关节部位应该处理为接触问题,这有助于正确了解脊柱运动节段的生物力学特性.

    作者:张美超;肖进;李义凯;钟世镇 刊期: 2002年第09期

  • 男性乳腺发育症的X线表现

    目的探讨男性乳腺发育症的钼靶X线表现.方法对12例男性乳腺肿块患者用意大利IMS公司生产的GITTO-TECH全智能高解析钼靶机摄片诊断,并与病理对照.结果12例男性乳腺肿块病理证实为乳腺发育症,钼靶X线确诊者10例,另2例误诊为男性乳腺癌.结论男性乳腺发育症根据典型钼靶X线表现可确诊,必要时行针刺活检,需与男性乳腺癌加以鉴别.

    作者:刘光俊;陈卫国;段刚;黄婵桃;肖树海;刘蓉;黄信华 刊期: 2002年第09期

  • 泪腺区非霍奇金淋巴瘤1例

    报道了1例双眼眶泪腺区肿块患者,经手术后病理检查诊断为泪腺原发性非霍奇金淋巴瘤.

    作者:徐宁;陆晓和 刊期: 2002年第09期

  • 乙型肝炎病毒S基因变异株在母婴向的选择性传播

    目的探讨乙型肝炎疫苗和乙型肝炎免疫球蛋白联合免疫失败的婴儿血清中HBv S基因变异与母亲血清中HBVDNA含量的关系.方法应用Roche公司的LightCycler定量分析仪测定95例母亲血清中HiBVDNA含量,应用PCR技术对免疫失败的7例婴儿及其母亲血清进行扩增,扩增后克隆测序.结果95例婴儿中有7例(7.4%)出生后1年内发生HBV感染,其母亲血清中HBV DNA水平显著高于未发生感染组.对此7对母婴的序列分析,发现1对母婴婴儿的优势株为母亲的弱势株,另有1对发生婴儿131位苏氨酸到丙氨酸变异.结论免疫失败与母亲血清中高病毒血症相关,且母婴间存在选择性传播.

    作者:张瑾;王战会;侯金林;杨虹;程爱林;李秀惠 刊期: 2002年第09期

  • 肾上腺髓质增生症的诊断与治疗(附8例报告)

    目的提高对肾上腺髓质增生症(AMH)的诊断与治疗水平.方法总结分析1998年5月~2002年5月我院收治的8例AMH患者的临床资料.结果8例患者CT检查肾上腺均发现异常,术前诊断AMH 4例,嗜铬细胞瘤4例.8例均行单侧肾上腺全切除,7例痊愈,1例因对侧有增生,术后1月复发.结论AMH的诊断需与嗜铬细胞瘤鉴别,尤其是定位检查发现有结节时,确诊靠术中探查和病理检查;经腹手术是AMH治疗的主要方法,术中应注意探查双侧肾上腺.

    作者:胡卫列;曹启友;杨槐;何恢绪;吕军;聂海波;李清荣;王元利;黄孝庭;邓志雄;朱云松 刊期: 2002年第09期

  • 低热高压法制作PLGA支架的三维结构研究

    目的制作不含有机溶剂、三维结构良好的聚丙交酯-乙交酯共聚物(PLGA)支架,使之符合组织工程骨修复的需要,探讨一种新型聚合物支架制作方法.方法将聚合物与氯化钠粉碎后,采用低热高压法制作PLGA泡沫结构支架,经密度法、氯化钠法测定其空隙率、开孔率;扫描电镜观察表面和内部结构、测定孔径.结果利用此种方法制作的PLGA支架,空隙率达到90.0%和92.5%、孔径在200~250μm之间、开孔率为98.0%以上(P<0.01),平均氯化钠沥净时间为12~13 h.结论使用低热高压法制作的组织工程支架,三维结构稳定,各项参数可控制;根据模具的大小可以制作不同体积的支架;依据盐的颗粒粒度与数量控制支架的孔径和空隙率,在制作过程中不使用有机溶剂,减少了有机溶剂残留可能引起的对细胞的毒性.使用这种方法要对聚合物与氯化钠颗粒进行充分混合.

    作者:高成杰;余斌;全大萍;卢泽俭 刊期: 2002年第09期

  • 双子宫与畸形子宫葡萄胎1例

    1病例介绍患者女,22岁,未婚(性生活1年).因停经83 d,阴道少量流血1月余于2002年3月11日入院.平素月经规律,经期5 d,周期30 d.末次月经2001年12月11日,停经后有恶心、呕吐等不适.停经40 d查尿妊娠试验阳性,初诊早孕.

    作者:余庆云;邢福祺;郭遂群;李景珊 刊期: 2002年第09期

  • 英文医学科技论文写作中词的选择与搭配

    作者结合实际工作经验简要论述了英文医学科技论文写作中词的选择与搭配的问题,并就如何提高英文写作水平提出了几点建议.

    作者:王征爱;宋建武 刊期: 2002年第09期

  • 老年糖尿病合并多脏器结核1例报告

    结核病是糖尿病常见的并发症,但多为并发肺结核,合并其他脏器结核者报道较少.现将我科收治的1例老年糖尿病合并浸润性肺结核、肝结核、脾结核及心包结核报告如下.1临床资料患者女性,65岁.因多饮、多尿、消瘦8年,气促、腹胀2年,发热3月于2001-12-28入院.

    作者:周琳;高方;薛耀明 刊期: 2002年第09期

  • 慢性前列腺炎发病的多因素分析

    目的探索不良生活习惯、精神、心理等相关因素与慢性前列腺炎发病的关系.方法对慢性前列腺炎进行流行病学调查,采用单因素及多因素条件Logistic回归法进行统计分析.结果多因素Logistic回归分析发现引起慢性前列腺炎的可能因素为尿道炎、无节制的性生活、频繁的手淫、泌尿系外伤、固定体位(尤其长时间骑跨位、坐位)、酗酒、长时间憋尿等.结论本研究结果对慢性前列腺炎的预防、治疗及防止复发具有一定的临床意义.

    作者:孟安启;郑少斌;陈文山;陈彤;聂军 刊期: 2002年第09期

  • 抑制性消减杂交技术检测骨髓CD34+细胞基因差异表达

    目的检测、比较骨髓和动员外周血2种来源不同的CD34+细胞基因表达的差异.方法从一健康供者分别获取骨髓和动员外周血,分离出CD34+细胞,利用抑制性消减杂交技术检测、比较该2种来源不同的CD34+细胞的基因表达差异.结果在骨髓CD34+细胞中共有21个基因高表达,主要涉及2类:(1)与细胞周期S期、G2期和M期转化相关的基因;(2)C/EBP(CCAAT/增强子结合蛋白)转录因子家族.结论骨髓和外周血CD34+细胞在基因表达上具有明显的不同,大部分骨髓CD34+细胞处于S期、G2期和M期,提示骨髓CD34+细胞比外周血CD34+增殖活跃.

    作者:陈捷;周淑芸;冯茹 刊期: 2002年第09期

  • 心房异构的病理表现及CT诊断

    目的研究心房异构的病理表现,探讨CT在心房异构诊断中的作用.方法对经手术和病理证实的2例左房异构和1例右房异构的患者分别行常规胸部和腹部CT平扫、胸腹部CT直接增强扫描及气管局部薄层扫描,研究、总结其手术所见及CT表现.结果左房异构的主要病理表现有双侧支气管对称(n=1)、左旋心(n=1)、水平肝(n=2)、下腔静脉肝内段缺如并奇静脉扩张(n=1)、短胰腺并双脾(n=1)及腹腔内脏和大血管镜位(n=1)等;右房异构的主要病理表现有双上叶气管性支气管、心脏和腹部器官镜位、短胰腺、下腔静脉在腰椎和腹主动脉之左侧等.结论CT在显示胸腹部脏器和大血管的形态及相互位置关系方面具有独特的价值,对心房异构的影像诊断极具作用.

    作者:罗正益;王霞;李兴耀;欧陕兴;吴迪 刊期: 2002年第09期

  • 大鼠外用脂质体鬼臼毒素后血液中鬼臼毒素浓度观察

    目的评价大鼠外用脂质体鬼臼毒素混悬液后经时血药浓度变化规律.方法观察组大鼠涂抹脂质体鬼臼毒素混悬液(载药量0.5%),对照组大鼠涂抹0.5%鬼臼毒素酊剂.涂药后l、2、4、6、8、10、12和24 h心脏采血,用荧光光度法测定不同时间血中鬼臼毒素浓度.结果对照组浓度曲线下面积是观察组的2.3倍.观察组用药8 h后鬼臼毒素血药浓度达峰值[(166.395±14.634)ng/ml],而对照组用药后2h即达峰值[(378.603±26.105)ng/ml].观察组鬼臼毒素的峰值浓度较低,与对照组相比有显著性差异(P<0.001).结论脂质体鬼臼毒素混悬液外用后,全身吸收明显低于外用鬼臼毒素酊剂,表明脂质体鬼臼毒素外用后能降低全身毒副作用.

    作者:张三泉;曾抗;江彬彬;李建华;颉玉胜;朱晓亮;李国锋 刊期: 2002年第09期

  • 癌组织树突状细胞浸润与肾癌预后及转移的关系

    目的研究癌组织树突状细胞(DC)浸润与肾细胞癌淋巴结转移及预后的关系.方法对1994年~2000年在我院行手术治疗的69例肾癌患者的临床资料及随访记录进行统计,用S-100蛋白抗体ABC法免疫组化染色检测并计数癌组织DC细胞,分析二者之间的关系.结果术后2年未复发组癌组织内S-100+DC数量[(61.3±14.7)个/mm2]明显高于术后2年复发组[(31.4±11.6)个/mm2];有淋巴结转移的患者癌组织内S-100+DC数量[(28.8±10.4)个/mm2]明显低于无淋巴结转移的患者[(62.6±13.5)个/mm2].结论肾细胞癌癌组织内Dc细胞浸润密度和肾癌淋巴结转移及复发明显相关,是判断肾癌预后的良好指标.

    作者:陈彤;郑少斌;谭万龙;李祖国 刊期: 2002年第09期

南方医科大学学报杂志

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