学术投稿

HBV前C/C基因EB病毒载体的构建及在HepG2细胞中的表达

周福元;隋礼丽;骆抗先

关键词:乙型肝炎病毒, 变异, EB病毒载体, 表达
摘要:目的 研究HBV 前C/C区基因变异的生物学意义.方法 构建HBV前C/C区基因EB病毒表达载体,采用脂质体介导方法将重组质粒转染到HepG2细胞,并表达HBeAg.结果 重组质粒经PCR和酶切鉴定均阳性,转染的细胞目的DNA和表达蛋白检测均阳性.结论 采用EB病毒载体构建HBV前C/C基因的表达载体,能在HepG2细胞中稳定表达目的蛋白.由于EB病毒载体以附着体的形式复制,不整合于宿主染色体基因中,拷贝数稳定,适合于体外研究HBV C/C基因变异的生物学意义.
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  • 儿童重症肌无力的手术疗效

    目的 分析儿童重症肌无力手术疗效.方法 1984~1997年,共为36例儿童重症肌无力患者行胸腺切除术,年龄4~14岁,病程2个月~8年,按Osseriman分型,其中型27例,a型6例,b型2例,型1例,疗效评价分缓解、改善、无变化及恶化(或死亡).结果 本组缓解者占13.9%,改善69.4%,有效率(缓解或改善)达83.3%,无恶化或住院死亡者.结论 疗效与病程长短、具体分型及病理类型有关,与性别年龄无关,随访结果令人满意.

    作者:黄志勇;邹小明;张军;蔡瑞君;杨锡耀 刊期: 1999年第02期

  • 胺碘酮在治疗心房纤颤中增加QT离散度

    目的 评价胺碘酮在治疗心房纤颤(房颤)中对心肌复极的影响.方法 测量了48例用胺碘酮转复与维持治疗房颤患者的QT间期与QT离散度,并与21例阵发性房颤和43例健康对照组比较.结果 阵发性房颤组与健康组QT间期和QT离散度无差异(QT:405±44 vs 397±30,QTc:448±47 vs 424±26,QTD:29±17 vs 27±16,QTcD:28±19 vs 26±18, P>0.05),但与前两对照组比,胺碘酮明显延长QT间期并使QTD增大(QT:465±53 vs 405±44 or 397±30,QTc:499±54 vs 448±47 or 424±26,QTD:47±20 vs 29±17 or 27±16,QTcD:49±21 vs 28±19 or 26±18, P<0.01).结论 胺碘酮不仅延缓心肌复极,且使复极离散.

    作者:谢志泉;刘伊丽;贾满盈;孙勇;廉永昕 刊期: 1999年第02期

  • 冠心病、高血压病人血浆氧自由基、一氧化氮及纤溶活性的变化

    目的 探讨冠心病、高血压病人血浆氧自由基、一氧化氮(NO)及纤溶活性的变化及相互关系.方法 观察了30例正常人及185例冠心病、高血压病人血浆丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、组织型血纤维蛋白溶酶原激活剂(t-PA)、 t-PA抑制物(PAI)及一氧化氮的变化.结果 稳定性心绞痛组、不稳定心绞痛组、陈旧性心肌梗塞组、Ⅰ、Ⅱ期高血压病组、Ⅲ期高血压病组、冠心病并高血压病组病人,其血浆MDA、PAI均明显高于正常组(P<0.01),而SOD、t-PA、NO则明显低于正常组(P<0.01).结论 冠心病、高血压病人血浆中氧自由基增多,并可能引起血管内皮细胞损伤,NO合成释放减少,纤溶活性下降.

    作者:郭志刚;沈剑刚;翁昌鸿;佟丽;陈玉尧;贾满盈;刘伊丽 刊期: 1999年第02期

  • UV-C诱导体外平滑肌细胞凋亡的相关信号机理的研究

    目的 观察经UV-C照射诱导的体外凋亡动脉中膜平滑肌细胞(SMC)内Ca2+浓度及actin表达的变化.方法 应用SP免疫组织化学技术和图像分析技术检测凋亡SMC内actin的表达;应用粘附细胞分析及筛选激光细胞仪观察凋亡SMC内Ca2+浓度的变化.结果 UV-C照射后,SMC出现典型的凋亡形态学和生化指标上的改变.UV-C动态照射10 min引起胞浆内Ca2+浓度的快速升高;并引起照射后不同时期SMC中Ca2+浓度的持续升高.凋亡SMC 内actin表达较正常大大加强,并出现从胞内向核周、从胞内向核内的迁移和再分布.结论 Ca2+浓度升高和actin表达的改变可能是参与UV-C诱导的SMC凋亡信号传递过程中的重要因素.

    作者:李晓丹;李进;张薇;鲍永耀 刊期: 1999年第02期

  • 抗CD3/CD45双特异抗体激活的效应细胞对白血病细胞的杀伤效应

    目的 探讨双特异性抗体用于白血病自体干细胞移植体外净化的可能性.方法 以抗CD3/CD45双特异性抗体激活外周血单个核细胞,以HL60为靶,用LDH方法测定杀伤效应.结果 靶效比例不同时,抗CD3/CD45激活的效应细胞对HL60细胞都表现出杀伤效应.结论 抗CD3/CD45可能用于骨髓/造血干细胞移植的体外净化.

    作者:吴秉毅;郭坤元;陈一方;严定安;王小宁 刊期: 1999年第02期

  • 苯妥英钠的治疗药物监测

    本文探讨了苯妥英钠血药浓度监测过程中的干扰因素,以及不同制剂、合并用药等对浓度的影响,浓度与疗效、不良反应间的关系等.

    作者:杨凌;胡敏燕;陈志良 刊期: 1999年第02期

  • 连续缝合法在妇产科手术中的应用

    1 临床资料选择住院行妇科开腹手术及剖宫手术者168例,其中纵切口140例,横切口28例,年龄22~45岁;选用美国氰胺有限公司的DG缝合线,两次进腹切除原疤痕者7例.

    作者:徐立红 刊期: 1999年第02期

  • 眼球摘除患者的心理护理

    眼球摘除是眼外伤和眼科疾病中不幸的结局,它严重影响患者的心理和美观.心理护理是手术前后不可忽视的问题.现将我科52例眼球摘除患者的心理护理体会报告如下.

    作者:周宏珍;杜兰芳;姜兴娴;曾丽芬 刊期: 1999年第02期

  • 临床药学工作的实践

    本文介绍了我院临床药学工作的发展现状,其中主要涉及治疗药物监测、药代动力学研究、药物不良反应监测、药物信息服务等方面.

    作者:杨凌;刘世霆;侯连兵 刊期: 1999年第02期

  • 食管穿孔的诊断和治疗

    目的 通过对20例食管穿孔的分析,探讨其病因、诊断和治疗的规律.方法 20例中行保守治疗5例,行食管修补7例,行引流术7例,行结肠代食管术1例.结果 16例痊愈,4例死亡,治愈率80%.结论 早期诊断和及时准确的处理是治疗食管穿孔的关键,应根据发病时间、病情程度选择不同的治疗措施.

    作者:蔡开灿;杨锡耀;王武军;王文林;蔡瑞君 刊期: 1999年第02期

  • 椎管内肿瘤296例分析

    作者报告椎管内肿瘤296例.肿瘤主要发生于胸段,占41.9%,其次为腰骶和颈段,分别占25%和24.3%.病理学分类以神经纤维瘤多,占122例,其次为脊膜瘤和先天性脊髓肿瘤.早期临床表现:髓内肿瘤以肢体麻木无力为主;而髓外肿瘤则以根性神经痛为主;硬脊膜外转移性肿瘤多以突发疼痛起病.早期诊断,尽早手术切除,是治疗本病有效的方法.

    作者:徐如祥;柯以铨;张世忠;杨俊;李铁林;邓国鼎;李新运;陈长才 刊期: 1999年第02期

  • 微卫星不稳定性-遗传性非息肉病性大肠癌诊断的分子标志:附4例报告

    目的 探讨微卫星DNA不稳定性(Microsatellite instability, MSI)与遗传性非息肉病性大肠癌(Hereditary nonpolysis colorectal cancer,HNPCC)的关系.方法 采用银染PCR-SSCP方法,检测4例遗传性非息肉病性大肠癌及其相应正常组织的第2、5、17号染色体的4个位点的MSI .结果 4例HNPCC均存在至少一个位点的MSI. HNPCC多位于右半结肠,低分化,粘液腺癌多见.结论 MSI是HNPCC常见的分子学事件.HNPCC有其特有的生物学特性.

    作者:徐宁;邱红明;丁彦青;徐莉 刊期: 1999年第02期

  • 骨组织工程中骨髓基质细胞的定向分化

    骨组织工程中成骨细胞有四种来源:骨、骨外膜、骨髓和骨外组织,其中以骨髓为优.因为骨髓基质细胞具有多向分化潜能,因此有必要选择佳的培养条件来促进其增殖并定向分化为成骨细胞.可通过使用物理、化学和生物等多种手段来达到此目的,其中以BMP、b-FGF和TGF-β的作用为显著和直接.也可将各种生长因子的基因转入骨髓基质细胞,使其稳定有效地表达,通过自分泌和旁分泌作用来达到同样的目的.

    作者:胡罢生;魏宽海;裴国献 刊期: 1999年第02期

  • 椎旁间隙阻滞用于开胸术后镇痛

    目的 观察椎旁间隙阻滞用于开胸术后的镇痛效果及对血流动力学的影响.方法 12例单侧开胸手术病人,术前经皮行胸椎旁间隙穿刺置管,注入0.5%布比卡因15 ml,观察血压、心率变化,术后间断注入0.5%布比卡因镇痛.结果 椎旁间隙阻滞对血压、心率无明显影响,阻滞范围为T3~T8,术后8例病人带管回病房,6例出现切口中度疼痛的时间平均为(7.5±6.2) h,再次椎旁间隙注射0.5%布比卡因15 ml后切口疼痛均缓解或完全消失.未出现恶心、呕吐及局麻药中毒症状.结论 椎旁间隙阻滞操作简单,术后镇痛完善,不影响膈肌运动,适用于开胸手术的术后镇痛.

    作者:宋吉贵;陈钢;古妙宁;刘高望 刊期: 1999年第02期

  • 成功治愈特大面积深度烧伤5例报告

    1 临床资料本组男2例,女3例.年龄3.3~27岁.烧伤面积(总面积/Ⅲ度面积)平均为88%/74%,其中3例伴有中、重度吸入性损伤,入院后即行气管切开术.入院时间为4.5 h~7 d.3例在我院平稳度过休克期.5例均采取早期一次性大面积切痂加微粒皮异体皮混合移植术,切痂时间为伤后3~9 d,切痂面积为25%~48%(平均为40%).反复多次行肉芽创面植皮术,间或混植异体皮,以求严密覆盖,使裸露创面不超过3%.所有创面均在伤后45 d内封闭.入院后即静脉点滴高效,广谱抗生素(如泰能等),及时停药.伤后1个月内反复多次静脉输血及血浆,早期进食,口服营养素等.创面均涂用磺胺嘧啶银糊剂,保持室内干燥,促进创面成痂.

    作者:吴永恒;周一平;荣新洲 刊期: 1999年第02期

  • 生物素-亲合素斑点免疫金渗滤试验检测血清中登革病毒4型抗原

    目的 建立用斑点免疫金渗滤试验(DIGFA)检测血请中登革病毒抗原的方法.方法 一株DV4型特异性单克隆抗体点加于硝酸纤维膜上,以捕获血清中的DV4抗原.借助黄病毒组反应性单克隆抗体、生物素化羊抗鼠IgG抗体、金标SPA和金标亲合素,建立用DIGFA检测血清中登革病毒抗原的方法.结果 常规DIGFA 检测的敏感性高于病毒分离, 而生物素-亲合素 DIGFA(BA-DIGFA)的敏感性又高于常规的DIGFA.常规DIGFA可检测到 5. 0 TCID50的病毒抗原,BA-DIGFA可检测到4.3 TCID50的病毒抗原.结论 作者建立的BA-DIGFA简便、快速、敏感、特异,可用于快速诊断登革病毒4型感染.

    作者:姚海军;曹虹;刘久来;段馥琴 刊期: 1999年第02期

  • 应用亲和层析分离纯化人小脑乙酰胆碱酯酶的初步研究

    目的 分离纯化人小脑乙酰胆碱酯酶 (AChE).材料和方法 采用ConA和B10亲和层析法纯化人小脑AChE.以纯化的人小脑AChE为免疫原,免疫6只BALB/c小鼠制备小鼠抗人小脑AChE抗血清,并检测其与电鳐AChE和人红细胞膜AChE的交叉免疫反应性.结果 SDS-PAGE还原状态下呈一条主带,相对分子质量为67 000,比活性为373 U/mg.结论 免疫亲和层析法操作简单,可快速纯化人小脑AChE.

    作者:张兴梅;石玉生;张翰 刊期: 1999年第02期

  • 戊二醛作牙根管内消毒的临床效果观察

    完善的根管治疗包括3个步骤:根管预备、根管消毒和根管充填.根管预备后,完全固定根管内的残余物是理想的根管处理方法.戊二醛能和有机物形成快速而不可逆的结合.本文作者用2%戊二醛作根管内消毒来治疗急、慢性根尖周炎,疗效满意且副作用甚微.

    作者:申晓青;毕绍臣;卫延玲 刊期: 1999年第02期

  • 肾癌 c-myc癌基因产物p62的表达与临床意义

    采用ABC法免疫组化技术,检测8例正常肾组织,46例肾癌石蜡包埋标本中p62的表达,并用显微分光光度计测得每例肾癌标本p62的表达强度.结果发现正常肾组织标本中p62染色阴性,46例肾癌标本中29例p62染色阳性,p62的表达位于细胞核内.P62的表达强度与肾癌的病理分级、临床分期呈正相关,与预后呈负相关.

    作者:付绍杰;徐开芹 刊期: 1999年第02期

  • RER+大肠癌的临床病理特点

    目的 探讨DNA复制错误(Replication error, RER)与大肠癌(Colorectal carcinoma,CRC)的关系.方法 采用银染PCR-SSCP方法,检测61例大肠癌及其相应正常组织的第2、5、17号染色体的4个位点的微小卫星DNA不稳定性(Microsatellite instability, MSI),有两个位点的MSI则诊断为RER+.结果 61例大肠癌中,18例为RER+(29.5%).RER阳性率在HNPCC为75%与散发性大肠癌的23.9%比较(P=0.025)有显著差异.RER+大肠癌大多为低分化大肠癌(P<0.0001),多位于右半结肠(P<0.05),有家族史,年龄小于35岁,Duckes分期A、B期患者所占比例高.发现2例病理阴性者手术切缘组织RER+.结论 RER+是HNPCC常见的分子学事件.RER+肿瘤与RER-肿瘤有不同的生物学特性.RER+ 可作为大肠癌手术切缘的分子标志.

    作者:徐宁;丁彦青;邱红明;徐莉 刊期: 1999年第02期

南方医科大学学报杂志

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