竞争性定量PCR检测TCRVγI-Jγ基因重排方法的建立及应用

徐兵；李亚洁；周淑芸；杨艺；孙竞；田红

关键词：定量PCR, 白血病, 淋巴细胞性, 基因重排

摘要：目的为提高急性淋巴细胞白血病(ALL)微小残留检测的临床意义.方法建立竞争性定量聚合酶链反应(PCR)检测TCRVγI-Jγ基因重排技术并定量分析16例ALL病人残留白血病细胞.结果建立定量PCR方法的灵敏度为10-5水平.16例ALL缓解期残留白血病细胞为(427±364)×10-5病人.3例病人可检测出寡/亚克隆重排,白血病细胞定量为117×10-5、196×10-5及211×10-5水平,其中1例寡/亚克隆水平在病程中不断增加并导致3月后复发伴克隆演化.结论所建立定量PCR技术简便、快速、灵敏;定量检测ALL缓解期残留白血病有利于预后预测并可应用于寡/亚克隆的定量检测.

南方医科大学学报杂志相关文献

应用Amplatzer封堵器经导管治疗房间隔缺损1例

1 临床资料患者,女性,37岁,自幼发现心脏杂音,1999年6月来我院住院检查治疗,入院查体:发育正常,心界不大,心率70次/min,律齐,胸骨左缘2、3肋间可闻III/6吹风样收缩期杂音.

作者：孟素荣；彭健；许顶立；翁昌鸿；龚渭冰；谢志斌刊期： 1999年第03期
骨组织工程研究(Ⅰ):人成骨细胞培养及成骨特性观察

1 实验资料成骨细胞分离培养取流产胎儿颅骨,无菌条件下清除骨板内外软组织;将颅骨剪切成3mm×3mm,TE酶消化20min除去残留软组织,加数滴血清终止胰酶;再将其剪切成1mm×1mm大小,0.5%II型胶原酶(Sigma)连续消化5次,每次20min,各次消化完毕即加入D-Hanks液吹打,收集第三、四、五次所得上清,1200r/min离心5min,沉淀加0.83%NH4Cl孵育10min去红细胞,1200r/min离心5min,沉淀用199基础培养基洗涤一次后计数接种,3d换液一次.

作者：杨德鸿；陈建庭；金大地刊期： 1999年第03期
噬菌体呈现技术研制特异性人抗骨肉瘤干扰素

目的利用噬菌体表面呈现技术研制高活性、特异性抗骨肉瘤干扰素.方法将干扰素IFNa 1c/86D DNA插入噬菌体质粒载体pCANTAB5E,并构建噬菌体IFNa 1c/86D AB环突变文库;通过在OS732细胞上竞争性亲合洗脱、MTT法对比检测抗肿瘤活性,筛选针对OS732细胞的高活性噬菌体-IFN突变体.结果获得2个噬菌体-IFN突变体,其抗OS732细胞增殖活性较突变母体分别提高4和16倍.结论 a 1型干扰素可在噬菌体表面正确折叠表达.这一技术可用于研制高活性特异性IFN.

作者：吕海；金大地；史占军；景宗森；郑燕芳；马学军刊期： 1999年第03期
尖锐湿疣患者人乳头瘤病毒的快速检测与分型

RDB是将我们设计的HPV6B、11、16、18、31、33、35的7个序列特异性寡核苷酸(SSO)探针分别依次固定在尼龙膜上,再与经PCR扩增的DNA靶序列杂交,即可在同一张膜上分辨7型HPVDNA的任一型.我们检测尖锐湿疣患者62例,对其中20例进行组织活检,阳性检出率为95%(19/20).阳性检出中,HPV6B型8例(40.0%)、HPV11型9例(45.0%)、HPV6B/11型(混合型)2例(10.0%);对其中42例进行宫颈抹片检测,阳性检出率为92.9%(39/42).阳性检出中,HPV6B型15例(35.7%)、HPV11型19例(45.2%)、HPV6B/11型3例(7.1%)、HPV16型2例(4.8%).结果表明尖锐湿疣患者检出HPV总阳性率为94%,感染HPV型主要为HPV6B及11型.

作者：齐凤菊；徐钤；黄杨中刊期： 1999年第03期
头尾串联双拷贝HBV DNA重组体的构建

为构建含筛选基因并能在转染细胞内建立HBV复制状态的真核表达载体,利用Bam H与Bgl 粘端互补的特点,将经Bam H线性化的HBV DNA(adr亚型)克隆于表达新霉素基因的载体pcDNA3的Bam H 与Bgl 位点间,获得含头尾串联双拷贝HBV基因组的重组质粒.

作者：刘定燮；骆抗先刊期： 1999年第03期
获高层次科技奖励应把握的几个问题

根据我们多年的工作体会,从科技人员的角度谈谈培养高层次成果必须注意的几个问题.1 成果评审中落选的原因科研成果评审工作已基本规范化,这主要是从成果的科学技术水平、经济或社会效益和推动科技进步的作用三方面进行评价.

作者：李海燕；赵醒村；王可炜；周增桓刊期： 1999年第03期
163例脑转移瘤疗效分析

目的回顾性分析脑转移瘤的临床疗效,比较不同方法在脑转移瘤治疗中的价值.材料和方法脑转移瘤患者163例, 原发肿瘤以肺癌多(60.7%),其次为乳腺癌和胃肠道腺癌及其他恶性肿瘤.颅内单发灶与多发灶之比为1:2.9.针对颅内转移灶的治疗方法有四种:全脑照射,手术加全脑照射,立体定向放射手术加全脑照射,立体定向放射手术.病例数分别为74例,19例,16例和54例.结果治疗后平均生存时间和一年生存率,手术加全脑照射和立体定向放射手术加全脑照射明显优于立体定向放射手术和全脑照射;手术加全脑照射优于立体定向放射手术加全脑照射;立体定向放射手术和全脑照射疗效相当,但立体定向放射手术后的颅内复发率明显高于全脑照射.

作者：石玉生；张兴梅刊期： 1999年第03期
心脏手术期间及术后血浆甲状腺激素的变化

目的观察心脏手术期间及术后血浆甲状腺激素的变化规律.方法在静脉复合麻醉下行心脏手术,分别在麻醉前、诱导插管后5min、转流开始后10min、停止转流后30min及术后1、3、5 d等时间点从外周静脉取血5ml,进行血浆T3、FT3、T4、FT4、TSH的放射免疫测定.结果在转流期间血浆T3、FT3、T4、FT4均显著降低 (P<0.001);停止转流后有所回升;术后1、3、5d血浆T3、FT3甚至低于转流停止后水平(P<0.01),而血浆T4、FT4 则回升并接近术前水平(P>0.05).结论本研究表明在心脏手术期间和术后,确实存在低T3或T4综合征,其对心脏复跳及术后低心排综合征的发生有何作用有待研究.

作者：梁仕伟；古妙宁；林春水刊期： 1999年第03期
间质胶原酶及其抑制因子-1不平衡表达与肝纤维化的关系

目的观察实验性肝纤维化过程中间质胶原酶(MMP-13)及其组织金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)基因表达的不平衡性.方法建立CCl4中毒性大鼠肝纤维化模型,采用SABC免疫组化方法和逆转录定量PCR方法测定MMP-13和TIMP-1的表达情况. 结果 MMP-13和TIMP-1在正常大鼠肝组织中有表达, 在肝纤维化发生发展过程中MMP-13表达无显著性变化,而TIMP-1的表达则逐渐增强,在肝硬化阶段达到高值.结论 MMP-13和TIMP-1在肝纤维化过程中的不平衡表达可能是肝硬化形成的重要决定因素.

作者：黄宇琦；高毅；陈泽洪；王宇；方石岗；杨继震；李朝龙刊期： 1999年第03期
外用皮质类固醇激素所致糠秕孢子菌感染性痤疮的治疗

通过对157例严重糠秕孢子菌感染痤疮患者的治疗观察发现,临床上很多痤疮患者乱用皮质类固醇激素外用药膏治疗痤疮,使轻型痤疮转化为严重糠秕孢子菌感染为主的囊肿型痤疮,给治疗上造成困难.作者将157例严重糠秕孢子菌感染痤疮患者随机分为五组,分别给予治疗.结果表明,抗真菌与抗细菌联合用药较单纯抗细菌治疗效果好.

作者：兰海梅；张建秀刊期： 1999年第03期
双腔起搏器对缓慢性心律失常并心力衰竭病人血流动力学的影响

目的评估双腔起搏器对缓慢性心律失常并心力衰竭病人血流动力学的影响.方法对20例缓慢性心律失常心衰病人经锁骨下静脉植入DDD型起搏器,对比分析术前及术后1～2周X线胸片、放射性核素门控心室显影和超声心动图检查结果.结果所有患者临床症状及心功能明显改善,术后心胸比例、射血分数(EF)、心排血量(CO)、心脏指数(CI)均明显好转[分别为0.70±0.13 vs 0.61±0.12、0.29±0.09vs 0.38±0.10、2.30±0.81vs 3.34±0.75(L/min)、1.31±0.71 vs 1.98±0.49(L/min·m2),P<0.05或P<0.01].结论 DDD起搏器治疗能显著改善缓慢性心律失常心力衰竭病人的血流动力学,可作为治疗缓慢性心律失常并心力衰竭的有效方法之一.

作者：孟素荣；彭健；宋跃明；祝善俊；林春梅刊期： 1999年第03期
高效液相色谱法分析测定大鼠肠系膜血管网灌流液中皮质醇、醛固酮方法的研究

采用高效液相色谱(HPLC)测定高血压模型大鼠肠系膜血管网灌流过程中灌流液皮质醇、醛固酮的含量,为定量分析血管分泌皮质醇和醛固酮机制提供可靠的量化依据,建立用HPLC分离检测皮质醇和醛固酮的方法.结果表明该方法准确、快速、稳定,检测灵敏度可达到50ng/L,仪器系统重复测定变异系数为2.32%,标准曲线线性分析相关系数r均大于99%,平均回收率均大于90%.

作者：叶绿；王煊；赵清；周俊岭；张永生刊期： 1999年第03期
烧伤患者痂下水肿液感染源的初步分析

目的分析烧伤痂下水肿液的细菌感染来源.方法收集临床痂下水肿液标本27人份,普通培养后,以Vitek-AMS作细菌鉴定,并同时作同一部位或相邻部位创面分泌物细菌鉴定行比较.结果 (1)痂下水肿液细菌培养阳性率为37%(10/27),创面细菌培养阳性率为85%(23/27);(2)痂下水肿液10份阳性结果中创面培养结果同时阳性的有9份,细菌种类一致者为70%(7/10),不相同者为20%(2/10);(3) 痂下水肿液中检出细菌以G- 杆菌为主60%(6/10),亦可见G+球菌,30%(3/10)和混合生长者10%(1/10).结论上述结果提示痂下水肿液细菌主要来自创面,但也有少数来源不明确,可能与内源性感染有关.

作者：荣新洲；周一平；吴永恒；李志清刊期： 1999年第03期
羊膜结节伴多器官畸形1例报告

1 病例报告1.1 临床资料患者,女,27岁,妊娠8月余,阴道流血2h入院.行双胎剖宫产术,术中取出一正常男婴.另一婴儿呼吸微弱,活动力差,脐带细,双下肢融合成鱼尾状,九趾,无外生殖器及肛门.产后10min死亡.两婴共单胎盘,双羊膜囊,畸形胎儿羊膜上见粟粒样结节.

作者：江庆萍；郭琳琅；曹长安刊期： 1999年第03期
降钙素基因相关肽在大鼠纹状体边缘区内分布及其纤维联系的研究

应用免疫细胞化学ABC法对降钙素基因相关肽(CGRP)在大鼠纹状体边缘区内的分布以及与杏仁核、终纹床核等边缘系统结构之间的联系进行了研究.结果发现:(1)CGRP免疫阳性纤维在纹状体内存在于纹状体的中部和尾侧,位于尾壳核和苍白球之间,即相当于纹状体边缘区的部位,形成一条明显的背腹方向走行的带状.CGRP免疫阳性纤维分布越靠纹状体尾,则纤维越密集,且阳性带越宽;(2)在纹状体的尾侧,除边缘区外,尾壳核的外侧缘也出现一条致密的阳性纤维带,与边缘区走向一致.并与边缘区的CGRP阳性纤维带之间存在较多的横向联系纤维;(3)纹状体边缘区的CGRP阳性纤维向背侧通过终纹与吻侧的终纹床核联系,向腹侧与杏仁核的CGRP阳性纤维相连,向尾侧和中脑黑质外侧部及其背外侧区的CGRP阳性胞体相连;(4)边缘区的CGRP阳性纤维主要与杏仁中央核相联系,少量与杏仁内侧核相联系;尾壳核外侧缘的CGRP阳性纤维也主要与杏仁中央核相联系.结果提示:CGRP阳性纤维在纹状体边缘区、杏仁核、终纹床核以及黑质背外侧区之间形成了一个相互联系的神经网络,纹状体边缘区与边缘系统之间存在密切的纤维联系.

作者：李耀宇；舒斯云；包新民；吴文龙刊期： 1999年第03期
原发性脾结核1例报告

1 病例报告患者,男,23岁,于1997年3月出现间歇性发热,体温高达39.5℃,常于下午发作,曾用先锋霉素Ⅴ静脉滴注但效果不明显,5月份未经特殊治疗体温渐至37.0℃.8月20日B超体检发现脾多发占位性病变,23日入我院.

作者：梁树立；朱玮冰；吕祥枝刊期： 1999年第03期
金属烤瓷美容修复前牙的护理

1 临床资料门诊患者458例,男187例,女271例,年龄21～45岁.随访2年以上.2 烤瓷修复的护理配合2.1 基牙预备要求严格磨削牙前先让患者放松,医生切磨牙时,护士主动配合患者作好吸唾工作,注意吸引器头的放置位置,同时协助医生牵拉口角,压患侧舌体,以防邻近组织受伤,为医生提供清晰和干净的视野,使基牙预备顺利进行.

作者：刘桂平刊期： 1999年第03期
石膏加压治疗耳廓假性囊肿68例报告

1 资料与方法男40例,40耳;女28例,28耳.年龄25～52岁,平均38.5岁.左耳38例,右耳30例.患者均为偶然发现耳廓前面外侧上半部有一局限性隆起,无痛,但逐渐增大,偶有胀感、痒感或灼热感.皮肤色泽正常,无压痛,触之较硬或有积液波动感.

作者：周王英刊期： 1999年第03期
苯妥英钠血药浓度监测结果分析

目的对97例次苯妥英钠血药浓度监测结果进行分析,以探寻剂量与浓度、浓度与疗效间的关系.方法采用荧光偏振免疫分析法.结果 21例血药浓度为10～20mg/L的患者中,有效11例(52.4%),无效9例(4.3%),中毒1例(4.8%).47例患者口服日剂量均为0.3g,血药浓度＜10 mg/L的有31例(66.7%),10～20mg/L 的有8例(16.7%),20～30mg/L的有5例(10.6%), ＞30 mg/L的有3例(6.3%).结论苯妥英钠个体药代动力学参数差异大;特殊情况下应监测游离浓度.

作者：杨凌刊期： 1999年第03期
思密达对驻营区部队急性腹泻病的防治效果

目的评价思密达对驻营区部队急性腹泻病的防、治效果.方法比较综合性预防(A组)和思密达预防(B组)实施后急性腹泻病的发病率和思密达、黄连素治疗后主要临床表现的消失时间与治疗效果.结果实施上述措施后急性腹泻病的发病率分别下降55.76%和46.00%.思密达治疗有效率较黄连素高约20%, 且主要临床表现期明显缩短.结论思密达预防在短期内可以取得同综合性预防措施相似的预防效果,其治疗效果优于对照药.

作者：聂军；孙长柱；梁力；梁晓珊；王红；俞守义刊期： 1999年第03期