王涌钢;何沐蓉;林春水
目的 观察吡非尼酮(PFD)对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的大鼠角膜基质细胞向成纤维细胞转化过程的影响,探讨PFD抗角膜基质纤维化的作用.方法 分离培养大鼠角膜基质细胞,免疫细胞化学法检测波形蛋白(Vimentin)进行细胞鉴定.实验分为对照组(DMEM + 10%FBS)、TGF-β1组(2 ng/mL TGF-β1 + DMEM + 10%FBS)和PFD组(1 mg/mL PFD + 2 ng/mL TGF-β1 + DMEM + 10%FBS).CCK-8法检测细胞增殖能力,Western blot检测细胞CollagenⅠ、CollagenⅢ、Keratocan和CD90蛋白表达.结果 大鼠角膜基质细胞呈Vimentin胞浆阳性.与对照组及TGF-β1组比较,PFD组细胞的增殖OD值显著减低(P<0.05).Western blot显示PFD组的细胞CollagenⅠ、Keratocan蛋白表达增强而CollagenⅢ和CD90蛋白表达减弱(P<0.05).PFD组的CollagenⅢ/CollagenⅠ比值在3组中低(P<0.05).结论 PFD抗角膜基质细胞纤维化是通过抑制TGF-β分子途径,从而影响胶原合成和Keratocan、CD90蛋白表达实现的.
作者:吴共发;邱丽浈;黄绮亭;刘钰君;曾宇婷;陈俊杰 刊期: 2018年第12期
血透通路是晚期肾功能衰竭患者的生命线.自体血管通道因感染率低且并发症少等特点,优于人工血管透析通道或中心静脉插管透析[1-2].我科于2014 年开始对前臂血管条件差及前臂自体内瘘失功无法行重建、上臂头静脉无法满足高位透析通道的患者选择行上臂贵要静脉一期转位(onestagebasilic vein transposition,BVT)内瘘手术,取得了较好的临床效果,现报告如下.
作者:万正东;王玖言;宋斌 刊期: 2018年第12期
目的 探讨表达分泌型TRAIL基因的腺病毒载体对人前列腺癌PC-3细胞荷瘤鼠的生长抑制作用.方法 DAPI染色检测各组PC-3细胞凋亡的情况.Transwell实验检测Ad-sTRAIL对PC-3细胞体外侵袭能力的影响.成功建立PC-3荷瘤鼠模型,经Ad-sTRAIL和Ad-LacZ分别处理后检测瘤体的生长抑制率.免疫组化实验检测裸鼠移植瘤内TRAIL表达的变化.TUNEL 检测瘤体内肿瘤细胞的凋亡.结果 DAPI染色显示Ad-sTRAIL组肿瘤细胞凋亡水平明显高于Control组和Ad-LacZ组.Transwell实验显示Ad-sTRAIL组穿入下室面的细胞数(24.8 ± 3.70)明显少于对照组(47.6 ± 4.28,q=10.68,P<0.01)及Ad-LacZ组(49.6 ± 4.39,q=11.61,P<0.01).成瘤实验表明:Ad-sTRAIL对荷瘤鼠肿瘤的抑制率3 d为8.15%,6 d为11.55%,9 d为17.23%,12 d为20.05%,15 d为27.18%,18 d为34.27%,21 d为33.08%.免疫组化实验显示:Ad-sTRAIL组荷瘤鼠肿瘤组织中TRAIL表达水平明显高于Control组和Ad-LacZ组.TUNEL实验显示:Ad-sTRAIL组荷瘤鼠肿瘤细胞凋亡水平明显高于Control组和Ad-LacZ组.结论 通过重组分泌型TRAIL腺病毒载体Ad-sTRAIL处理PC-3细胞荷瘤鼠,可以抑制裸鼠体内肿瘤细胞的增殖,促进前列腺癌细胞的凋亡.
作者:高磊;潘铁军;谢鸣;蒋渊;喻希;李想 刊期: 2018年第12期
目的 研究硝苯吡啶对HK-2细胞铁超载引起的氧化应激的作用和可能的机制.方法 HK-2细胞分成空白组、铁超载组、硝苯吡啶组和共处理组,用柠檬酸铁铵和(或)硝苯吡啶处理细胞24 h后检测细胞丙二醛(MDA)含量、总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性,谷胱甘肽(GSH)含量,细胞内铁含量以及二价金属离子转运蛋白1(DMT1)和膜铁转运蛋白1(FPN1)的表达.结果 与铁超载组相比硝苯吡啶组和共处理组MDA含量降低(P<0.05),T-SOD活性增加(P<0.05),GSH含量增加(P<0.05),细胞内铁含量降低(P<0.05),DMT1表达增加(P<0.05),FPN1表达增加(P<0.05).结论 硝苯吡啶在铁超载HK-2细胞的氧化应激中有保护作用,这一作用与硝苯吡啶促进DMT1和FPN1的表达、降低细胞内铁含量有关.
作者:吕小梅;冉兵;杨茂;李雪森;蔺艳 刊期: 2018年第12期
目的 对腹腔镜Soave术(LS)和改良腹腔镜Swenson术(MLSw)在儿童短段型巨结肠的治疗效果和并发症进行比较分析.方法 回顾分析我科自2007年3月至2016年12月收治的77例儿童短段型巨结肠临床资料.LS术26例,MLSw术51例.收集两组术前、术中和术后临床资料进行分析,随访12~48个月.结果 MLSw组平均手术时间、术中出血量和住院时间比LS组少.两组术后平均进食时间无明显差异. MLSw组术后早期并发症的发生率较LS组低,但两组术后晚期并发症发生率无明显差异.结论 LS和MLSw术都适用于儿童短段型巨结肠的治疗.但MLSw操作更简单,术后早期的排便控制更好.更重要的是,MLSw术可完全切除无神经节细胞肠段,而无需保留直肠肌鞘.
作者:伍耀豪;曾乐祥;邱荣林;张杰;周嘉嘉;蒋雯丽;邓小耿 刊期: 2018年第12期
目的 比较自动弹力线痔疮套扎术(RPH)联合外剥内扎术与吻合器痔上黏膜环切术(PPH)治疗重度混合痔的临床效果.方法 重度混合痔分为观察组与对照组各84例,对照组给予PPH治疗,观察组给予RPH联合外剥内扎术治疗.结果 所有患者均成功完成手术,在手术时间、住院时间等方面,观察组比对照组明显要少(P<0.05).而且术后3个月,观察组的尿潴留、肛门失禁、肛门直肠狭窄、继发性肛裂等并发症低于对照组(P<0.05).观察组与对照组术后3个月的总有效率分别为97.6%和85.7%,观察组高于对照组(P<0.05).观察组与对照组3个月的肛管大峰值流速(PSV)与小峰值流速(EDV)值都低于术前1 d(P<0.05),观察组3个月的肛管PSV与EDV值与对照组相比降低(P<0.05).结论 RPH联合外剥内扎术治疗重度混合痔能减少痔血管血流,具有更好的微创性,能减少术后并发症的发生,从而提高治疗效果.
作者:雷新益;张志云;吉祖进;蒋学军;杨勇 刊期: 2018年第12期
目的 探讨Neuritin与HSP60在肝损伤修复过程中的表达变化以及可能的分子机制,为研究肝损伤修复提供实验基础.方法 将48只Sprague-Dawley(SD)大鼠,随机分为空白组(n=6)和实验组(n=42),空白组不做任何处理,实验组均行70%肝左叶切除以诱导急性肝损伤,并于术后6、12、24、48 h和3、7、14 d再次切除残余肝左叶,采用免疫印迹技术(Western blot)检测Neuritin与HSP60在相应时间点肝组织中的表达变化差异,行苏木精-伊红染色(HE)观察各时间点肝脏病理学改变,同时于尾缘静脉采血检测ATL和AST水平变化.结果 (1)与空白组相比,实验组于术后6、12、24、48 h血清ALT、AST含量持续增高并于48 h达到高峰,3 d开始降低、7 d几乎接近正常,差异具有统计学意义(P<0.05).病理学提示:与空白组相比,实验组肝小叶结构排列紊乱,气球样变明显,在术后48 h为明显;(2)在肝损伤修复的整个过程中,Neuritin与HSP60的表达变化呈现截然相反的差异,Neuritin的表达与肝损伤的加重或修复存在显著的负相关性(P<0.001),并且在肝损伤重的48 h时其表达量低;HSP60的表达与肝损伤的加重或修复存在显著的正相关性(P<0.001),并且在肝损伤重的48 h时其表达量高.结论 (1)采用单纯性70%肝左叶切除术,成功建立了SD大鼠的肝损伤修复模型,其损伤在术后第48小时重,该方法造模成功率为100%(42/42),操作简单、实用性强,为研究肝再生、肝损伤、肝移植等提供了一种可靠且简便的动物模型;(2)Neuritin的表达在肝损伤后逐渐降低,并在第48小时达到低,而HSP60的表达逐渐升高,并在第48小时达到高;(3)Neuritin与HSP60的表达变化与肝损伤修复过程密切相关(P<0.001),呈现出一定变化规律,两者可能通过某种相互作用而产生相应的生物效应,共同参与并促进了肝损伤的再生修复.
作者:王朝阳;朱美意;欧阳军;张宏伟 刊期: 2018年第12期
目的 探讨云南省彝族人群中睾酮5-α还原酶Ⅱ(SRD5A2)基因rs523349(V89L)、rs9282858 (A49T)和TA重复序列多态性与前列腺癌的相关性.方法 通过Sanger测序法对122例云南彝族前列腺患者和135例云南彝族非前列腺癌健康男性SRD5A2基因rs523349(V89L)、rs9282858(A49T)和TA重复序列多态性进行检测,并分析其与前列腺癌之间的相关性.结果 云南彝族前列腺癌组和对照组中均未发现SRD5A2基因rs9282858位点的AA基因型.两组间SRD5A2基因rs523349和rs9282858位点的基因型和等位基因频率分布差异无统计学意义(P>0.05).而两组间TA重复序列位点的基因型和等位基因频率分布差异有统计学意义(P<0.05),在前列腺癌组中含有(TA)9等位基因的基因型[(TA)0 (TA)9+(TA)9(TA)9]较对照组多见(P=0.033).与携带(TA)0等位基因者相比,携带(TA)9等位基因者患前列腺癌的风险明显增高(OR=2.181 ,95% CI :1.111~4.281 ,P=0.021).结论 云南彝族人群中SRD5A2基因TA重复序列多态性与前列腺癌发病危险相关,可作为前列腺癌的基因危险因素,来确定高危人群.
作者:罗钰辉;李康健;官润云;申吉泓;刘孝东;李颢 刊期: 2018年第12期
目的 探讨早期使用孟鲁司特钠预防儿童肺炎支原体感染后喘息发作的有效性.方法 选取于儿科门诊确诊为肺炎支原体感染而尚无喘息发作患儿共120例,其中60例(观察组)在抗支原体常规治疗基础上加用孟鲁司特钠咀嚼片治疗1个月,另60例(对照组)仅接受抗支原体常规治疗,比较两组患者临床治疗效果和喘息发生率.结果 观察组临床疗效及体温、咳嗽、啰音等控制显著优于对照组(P<0.05);急性期和随访期间,观察组喘息发生率明显低于对照组(P<0.05).观察组CRP和嗜酸性粒细胞计数水平较对照组明显降低(P<0.05).结论 早期预防性使用孟鲁司特钠可显著改善肺炎支原体感染后患儿临床症状、减少喘息发作.
作者:曾军;何丽雅 刊期: 2018年第12期
目的 研究PM2.5联合中波紫外线(UVB)处理对人皮肤角质形成细胞HaCaT的影响.方法 收集环境中PM2.5并进行其金属成分分析;MTT法测定PM2.5对HaCaT细胞的半数抑制浓度(IC50);将细胞分为空白对照组(NC组)、单纯IC50浓度的PM2.5处理组(PM2.5组)、单纯30 mJ/cm2的UVB照射组(UVB组)和PM2.5联合UVB处理组(联合处理组),MTT法检测不同处理组对细胞活力的抑制;流式细胞术检测不同处理对细胞凋亡的影响;Western blot检测不同处理后PARP、LC3的蛋白表达变化.结果 PM2.5样品中金属成分有Ca、Ba、Al、Cu、Pb等;PM2.5对HaCaT细胞的IC50约为300 μg/mL;不同处理组之间,在处理后24 h,对细胞活力的抑制差异显著(P<0.001),其中联合处理组细胞对比NC组活力低(P<0.001);流式分析结果显示,与NC组比,PM2.5组、UVB组以及联合处理组细胞凋亡率增加(P<0.01),联合处理组凋亡率较PM2.5组增加(P < 0.05),但低于UVB照射组(P < 0.01);Western blot显示PM2.5组、UVB组以及联合处理组LC3-Ⅱ、PARP蛋白较NC组均有增加,联合处理组PARP较UVB组减少,LC3-Ⅱ较PM2.5组、UVB组增加.结论 PM2.5能增加UVB对HaCaT细胞的损伤,其主要可能通过增加细胞自噬,而非凋亡方式.
作者:牛梦鸽;谢雄雄;王超鹏;周美娟 刊期: 2018年第12期
目的 探究循环中解偶联蛋白2(uncoupling protein 2,UCP2)水平与慢性稳定性冠心病(stable cor-onary artery disease,SCAD)及其冠状动脉病变程度(Gensini评分和罪犯血管支数)的相关性,并比较分析UCP2与尿酸(urine acid,UA)预测SCAD的价值.方法 回顾性纳入330例住院患者,根据临床表现、实验室检查、心电图及冠状动脉造影(CAG)诊断SCAD患者(SCAD组)240例,非冠心病患者(对照组)90例.均于清晨空腹抽取患者外周静脉血检查肾功能,采用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)双抗体夹心法检测UCP2水平并进行统计学分析.结果 SCAD组循环中UCP2水平[1.60(0.67,4.60)ng/mL]显著高于对照组[0.42(0.28,0.59)ng/mL](P<0.05);多因素Logistic回归分析提示,UCP2水平与SCAD独立相关(OR=1.010,95% CI :1.001~1.020,P=0.025);UCP2水平与Gensini评分、病变罪犯血管支数呈正相关(分别r=0.780,P<0.01;r=0.543,P<0.01).受试者工作特征曲线(ROC)显示,UCP2预测SCAD的佳界值为0.64 ng/mL,敏感度为0.833,特异度为0.944.循环中UCP2与UA两者曲线下面积差异(ΔAUC)并无统计学意义(ΔAUC=0.027,95% CI:-0.083~0.137,P>0.05).结论 SCAD患者循环中UCP2水平越高,冠状动脉病变程度越重;UCP2与传统氧化应激相关指标UA水平预测SCAD价值无明显差异,可望成为预测SCAD的新指标.
作者:刘森;王丹;侯霁芯;万进东;阚竞宇;刘家欣;王沛坚 刊期: 2018年第12期
目的 探讨β-catenin、淋巴细胞增强因子1(LEF1)在急性白血病(AL)中的表达及相关性.方法 实时定量PCR方法检测62例初诊AML患者、23例初诊ALL患者、20例对照及K562、HL-60、THP-1、Raji细胞株β-catenin和LEF1 mRNA表达.结果 AML组β-catenin mRNA表达显著高于对照组,LEF1 mRNA表达显著低于对照组(P < 0.05). ALL组β-catenin、LEF1 mRNA表达均高于对照组(P<0.05).AML 、ALL组β-catenin与LEF1 mRNA表达均呈相关性(P < 0.05).在三种AML细胞株中,THP-1细胞β-catenin mRNA表达高,LEF1 mRNA表达低,表达方向基本与AML患者一致.结论 AL患者有Wnt/β-catenin路通的异常激活,β-catenin/LEF1转录复合体可能在ALL发病中发挥作用.
作者:王巍;刘文鑫;黄永彬;洪运广;杨志刚 刊期: 2018年第12期
目的 探讨促红细胞生成素(EPO)对成年大鼠脊髓中央管膜下神经干细胞(NSCs)体外增殖能力的影响,为临床进行成体脊髓中央管膜下NSCs自体移植或异体移植治疗脊髓损伤提供实验室理论依据.方法 通过显微外科方法分离成年大鼠脊髓中央管膜下NSCs行体外培养,利用CCK8检测筛选EPO促进NSCs增殖的适宜处理时间,并检测96 h的EPO对NSCs的细胞计数和Cyclin D1表达的影响.结果 成年SD大鼠脊髓中央管膜下可提取出稳定表达Nestin蛋白和Sox2转录因子的NSCs;CCK8结果示20 U/mL、96 h可能为EPO促进NSCs增殖的适宜浓度和处理时间,细胞计数及荧光定量PCR结果示EPO处理NSCs 96 h后可明显促进细胞增殖.结论 EPO可促进行体外培养的成年大鼠脊髓中央管膜下NSCs的增殖,且20 U/mL和96 h可能为EPO促进NSCs体外增殖的适宜浓度和适宜处理时间.
作者:周潇齐;吴波;严鑫平;朱美松;彭延凯;陈仲 刊期: 2018年第12期
目的 针对广西HIV-1 B亚型毒株构建一种优化的假病毒耐药检测模型,为表型耐药检测提供成本较低、简便易行的研究工具.方法 从质粒pSV-EGFP中扩增出EGFP基因,采用双酶切法将EGFP基因克隆至骨架质粒pNL4-3.Luc.E-R-,以此构建假病毒重组骨架质粒;采用RT-PCR方法从HIV-1 B亚型慢性感染者RNA中获得包膜蛋白基因,采用双酶切法将env基因克隆至真核表达质粒pcDNATM3.1 (+),以此构建重组包膜质粒;单转染重组包膜质粒至293t细胞验证表达;共转染重组质粒至293t细胞获得假病毒;采用与TZM-b1细胞共培养法,通过荧光表达检测验证假病毒感染性.结果 两种质粒以质量比2:1(pcDNA3.1-env:pNL4-3.EGFP.E-R-)共转染至293t细胞,48 h后收集细胞上清获得假病毒.将假病毒加入到TZM-bl细胞共培养48 h后,可以观察到荧光表达.结论 带有EGFP基因重组假病毒的系统构建成功.
作者:黄春湲;王洪;梁浩;叶力;梁冰玉;蒋俊俊;陈荣凤;宁传艺;廖艳研;余军;黄颉刚 刊期: 2018年第12期
哮喘是一种具有明显异质性的慢性气道炎症疾病,给社会、医疗造成了极大负担.哮喘患者常因急性发作而入院治疗,而这种急性发作是哮喘患者死亡的重要原因.哮喘的急性发作与气道炎症有着密切关系,气道炎症表型影响着哮喘的临床表现和对治疗的反应性.然而哮喘患者的气道炎症表型并不是一成不变的,多数患者在哮喘急性发作时,其炎症表型可能已经发生了改变.早期明确哮喘急性发作时的气道炎症表型,可以尽快评估患者吸入及全身使用糖皮质激素的用量,制定个体化的哮喘治疗方案,从而缓解患者的临床症状.
作者:段留路;董航明;蔡绍曦 刊期: 2018年第12期
目的 比较夜间支具与Boston支具治疗青少年特发性脊柱侧凸的临床疗效.方法 纳入60例青少年特发性脊柱侧凸患者作为受试对象,随机分为夜间支具组和Boston支具组,各30例.分别制作支具,夜间支具组夜间佩带,Boston组全天佩带.每3个月复查1次,行全脊柱正侧位片检查,同时评价相应指标.结果 夜间支具组在主胸弯Cobb角改善、ICR及IAV方面明显优于Boston组,差异具有统计学意义(P=0.026,P=0.033,P=0.038).而在佩戴时间、腰弯Cobb角改善、T4-T12后凸及L1-S1前凸方面,两组无明显差异(P>0.05).结论 与Boston支具相比,夜间支具治疗轻中度AIS更具优势,疗效更为确切.
作者:王泽维;张平;钟志宏;周葳 刊期: 2018年第12期
目的 探讨血清Ghrelin水平与非创伤性股骨头坏死(ONFH)严重程度的相关性研究.方法 选取诊断为非创伤性ONFH的患者84例,并入选性别年龄匹配的健康对照组84例,ONFH影像学分级采用FICAT分期方法,采用Harris髋关节评分和VAS疼痛评分量表评价患者髋关节症状严重程度,采用酶联免疫吸附试验测定患者血清Ghrelin水平,并同时测定血清adiponectin和IL-33的水平,探讨Ghrelin水平与影像学分级、症状严重程度与血清生物学标志物的相关性.结果 ONFH患者血清Ghrelin水平显著低于正常健康对照组,血清Ghrelin水平与影像学进展呈负相关性和VAS评分呈负相关性,与Harris评分均呈显著相关性,此外血清Ghrelin与股骨头保护蛋白adiponectin呈正相关性,与骨坏死标记物IL-33呈负相关性.结论 ONFH患者血清Ghrelin水平与ONFH严重程度呈负相关,Ghrelin的低表达反映了ONFH的严重程度.
作者:毛筝;岳永彬;鲁路;陈景杰;刘丹;赵畅;刘刚 刊期: 2018年第12期
目的 利用原核细胞体系表达、纯化GRIK3胞内区蛋白.方法 构建带有His标签的GRIK3胞内区蛋白原核表达质粒pCzn1-GRIK3-intra,转化至大肠杆菌BL21,用IPTG诱导表达His-GRIK3-intra融合蛋白后,Ni柱亲和层析纯化获得的目的蛋白.结果 成功构建插入序列正确的GRIK3胞内区原核表达质粒,该质粒能在E.coli中高效表达GRIK3胞内区蛋白;经Ni柱亲和层析后获得了纯化的目的蛋白.结论 成功表达和纯化出GRIK3胞内区蛋白,为探索膜蛋白GRIK3的胞内信号转导机制奠定了基础.
作者:高永辉;肖斌;刘明;廖扬;唐荣芝;孙朝晖;李林海 刊期: 2018年第12期
目的 探讨极早期控制性低温雾化对双腔气管导管插管后咽喉疼痛(POST)等咽部并发症的治疗作用.方法 选取胸科手术双腔气管导管插管后POST相关咽喉部不适的患者105例,随机分为3组,每组35例.采用头戴式雾化口鼻吸入装置,雾化吸入时间15 min,C组拔管即刻行20℃生理盐水12 mL雾化吸入,R组拔管即刻行20℃生理盐水10 mL加布地奈德混悬液2 mL(1 mg)雾化吸入,L组拔管即刻行0℃生理盐水10 mL加布地奈德2 mL(1 mg)雾化吸入.记录拔管后1、2、6、24 h各组患者咽喉疼痛、咽喉干涩、声嘶和吞咽困难评分.术后1 d行QoR-40量表评分.结果 L组拔管后1、2、24 h的咽喉疼痛、咽喉干涩评分显著低于C组(P<0.05),1、6、24 h吞咽困难的评分显著低于C组(P<0.05),1 h咽喉疼痛评分显著低于R组(P<0.05).R组的各个评价指标评分拔管后1 h及以后的各个时间段均低于C组,但差异无统计学意义(P>0.05),各组患者间不同时间点声嘶评分差异均无统计学意义(P>0.05).L组术后1 d QoR-40量表总分显著高于C组和R组(P<0.05).结论 术后双腔气管导管拔管即刻布地奈德低温雾化吸入能有效缓解POST相关并发症的程度,提高患者术后满意度,有助于加速患者术后康复.
作者:陈琪;钟雪娇;胡开红;兰淋;杨斌 刊期: 2018年第12期
急性早幼粒细胞白血病(APL)是一种较为凶险,且具有重现性细胞遗传学异常的血液恶性肿瘤.研究发现,微小RNA(miRNAs)对血液系统肿瘤的不同细胞发展阶段进行调控,其作用形式是通过降解目标RNA或者抑制目标蛋白质的翻译进行转录后调控.既往研究表明,miRNAs在APL中起着重要的作用,它们不仅可以作为癌基因,还可以作为抑癌基因,这为APL的诊断以及治疗的提供了新型标志物.本文综述了miRNAs与APL之间的关系,为进一步研究APL精准诊疗提供理论基础.
作者:陈诚;陈占国 刊期: 2018年第12期