学术投稿

人干燥综合征抗原A毕赤酵母分泌型表达载体的构建

杨湘越;兰小鹏;冯福英;吴文冰;钟智强;廖剑;朱忠勇

关键词:干燥综合征, 毕赤酵母, 分泌型表达载体
摘要:目的:构建表达人干燥综合征抗原A(SSA)的毕赤酵母分泌型表达载体.方法:以人白血病淋巴细胞HL-60株cDNA为模板,RCR扩增目的基因SSA,纯化,双酶切,DNA浓缩回收,插入酵母分泌型表达载体pPIC9k,热冲击法转化感受态大肠杆菌JM109,阳性克隆提取质粒,双酶切鉴定并测序.结果:PCR产物大小符合要求,重组质粒pPIC9k-SSA双酶切鉴定与预期一致,测序结果正确.结论:成功构建SSA毕赤酵母分泌型表达载体,为下一步取代从动物胸腺中人工提取低纯度、低产量的SSA抗原,研制新型抗SSA诊断试剂盒打下基础.
实用医学杂志相关文献
  • 屏气动作引起自发性支气管破裂2例诊治体会

    目的:探讨屏气动作引起自发性支气管破裂的机制,提高对其临床诊治及预防的认识.方法:分析2例屏气动作引起自发性支气管破裂病例的发病过程及临床表现.结果:2例均在体育运动及体力劳动时完成屏气动作后突发胸闷气促,1例伴痰血.体检2例颈肩部皮下均可触及捻发音,CT表现支气管壁的连续性中断及裂隙,颈肩部皮下及纵隔气肿;支气管镜可见破裂处管壁呼气时有气泡溢出,2例均行保守治疗痊愈.结论:屏气动作引起自发性支气管破裂结合临床病史体征,不难作出诊断;CT可进一步明确破裂的部位、裂口的大小,为首选检查方法;加强深呼吸运动锻炼,做好运动前的深吸气后屏气适应过程,可预防支气管破裂的发生.

    作者:吴明忠;周建胜 刊期: 2006年第22期

  • 急性胰腺炎患者D-二聚体及血管性假血友病因子抗原检测的意义

    D-二聚体(D-dimer,DD)是交联纤维蛋白的特异性降解产物,能反映体内纤溶功能或高凝状态.我们检测了31例急性胰腺炎(AP)患者血浆中DD及血浆中血管性假血友病因子抗原(vWF)的含量,以探讨二者在AP发病过程中的意义.

    作者:钟学军;许刚;吴桂云;赵伟伟 刊期: 2006年第22期

  • 竹叶石膏汤加味结合塞来昔布治疗放射性口炎

    目的:观察中西医结合治疗放射性口炎的临床疗效.方法:将行放射治疗的头颈部恶性肿瘤患者55例分为两组.对照组24例采用常规洁齿、冲洗口咽、口服维生素B2、双料喉风散喷喉治疗;治疗组31例采用口服塞来昔布和竹叶石膏汤加味治疗.结果:总有效率治疗组为90%,对照组为62%,组间比较差异有显著性(P<0.01).结论:口服塞来昔布和竹叶石膏汤加味治疗放射性口炎有较高的疗效.

    作者:孙雷;朱海芳;李玲珠 刊期: 2006年第22期

  • 蛛网膜下腔出血再发的护理

    蛛网膜下腔出血(SAH)是一种较常见的出血性疾病,其再发率在30%左右或更高,首发的SAH病死率在20%~30%,而再发者的病死率高达40%~60%,故再发是造成SAH死亡的主要原因[1].因此,SAH后的康复护理对防止其再发是关键.我院于1999-2005年收治58例经CT或MRI证实的SAH患者,现将防治SAH再发的护理体会分析如下.

    作者:禚丽梅;葛宝芬 刊期: 2006年第22期

  • 成人单心房并单心室及大动脉转位1例

    患者男,20岁,因紫绀、活动后心悸气促20年,加重伴乏力1 d入院.患者系足月顺产,母孕期体健,否认毒物、放射线接触史及家族遗传病史,出生后3个月即发现口唇、甲床紫绀,哭喊后气促明显,无晕厥、蹲踞表现,生长发育如正常同龄儿,平时不喜活动,轻中度活动后即感气促、心慌,休息后可缓解.

    作者:陈伟珍 刊期: 2006年第22期

  • 静脉注射丙种球蛋白治疗小儿渗出性多形性红斑的疗效分析

    自1995-2005年底我院共收治小儿渗出性多形性红斑48例,其中30例应用静脉注射丙种球蛋白,与未用静脉注射丙种球蛋白患儿比较有满意疗效.现报告如下.

    作者:岳爱红;历红;刘凤珍;田庆玲 刊期: 2006年第22期

  • 实验性分泌性中耳炎中耳黏膜能量代谢酶的酶细胞化学研究

    目的:探讨分泌性中耳炎(OME)的病因和发病机制.方法:采用机械性阻塞右侧咽鼓管的方法建立OME动物模型,左耳作为对照,对中耳上皮黏膜中琥珀酸脱氢酶(SDH,一种重要的与能量代谢有关的酶)进行光镜和电镜酶细胞化学研究.结果:实验组中3 d组和7 d组的SDH酶活性均较正常对照组减弱,且差异有显著性.结论:发生OME时,SDH酶活性受抑制,导致能量代谢的障碍,不能产生足够的ATP以维持强烈而有效的纤毛摆动,引起中耳积液的持续存在.

    作者:陈亮;汪建;陈勇挺;邓恒山;尤景敏 刊期: 2006年第22期

  • 下肢深静脉血栓形成后肺栓塞的防治

    目的:探讨预防下肢深静脉血栓形成后肺栓塞的方法.方法:回顾性分析浙江省永康市第一人民医院普外科2000年5月至2005年12月收治的下肢深静脉血栓形成(deep venous thrombosis,DVT)病人共50例,其中下腔静脉滤器植入(inferior vena cava filter implantation)34例,20例经股静脉切开Forgaty导管取栓,50例均行溶栓治疗.本组病例均要求病人在手术取栓后和溶栓治疗中双下肢抬高30°,并限制患肢活动,避免剧烈活动和挤压小腿腓肠肌运动,并行相应的抗凝治疗.结果:34例均经股静脉穿刺将滤器植入下腔静脉,定位于肾静脉以下,成功率100%.术后随访28例(82.4%),时间5个月~5年,1例股静脉切开取栓1年后再发DVT,经溶栓治疗痊愈.全组无急性肺动脉栓塞发生.结论:在下肢深静脉血栓形成的病人中,应用下腔静脉内滤器植入术、患肢的限制性活动和抗凝治疗可以有效地预防急性肺动脉栓塞的发生.

    作者:陈大荣;宋伟勇;吴益夫 刊期: 2006年第22期

  • 瑞芬太尼持续泵注用于颅内动脉瘤介入栓塞术

    目的:评价瑞芬太尼持续微量泵输注复合异氟醚用于颅内动脉瘤介入栓塞术麻醉的临床价值.方法:22例颅内动脉瘤患者,静脉快速诱导后,气管插管,之后按麻醉维持用药不同分为瑞芬太尼组(R+ISO组)和异氟醚组(ISO组),观察两组病人入室、诱导后、插管时、切皮后5 min、停药及拔管各时段血流动力学的变化及麻醉恢复情况.结果:两组病人血压及心率于麻醉诱导后较基础值明显降低,术中血压、心率均稳定,但拔管时R+ISO组的舒张压和心率明显低于ISO组,R+ISO组停药后神志和呼吸恢复非常迅速,苏醒时间和拔管时间明显快于ISO组.结论:采用瑞芬太尼持续微量泵输注复合异氟醚用于颅内动脉瘤介入栓塞术的麻醉是一种安全、有效、苏醒较快的麻醉用药方式.

    作者:耿津津;鲁品德;廖志品;李白莉;罗爱林 刊期: 2006年第22期

  • 门冬氨酸钾镁防治阿霉素急性心脏毒性30例

    目的:评价门冬氨酸钾镁对含阿霉素化疗方案急性心脏毒性的防治作用及安全性.方法:将60例Ⅰ~Ⅱ期乳腺癌术后行CAF方案化疗患者分为两组,治疗组30例,除按CAF方案化疗外,于化疗前2 d开始予门冬氨酸钾镁粉针3支加5%葡萄糖注射液500 mL静滴,共5 d,对照组30例仅按CAF方案化疗.所有病例均为每3周1次化疗,共6个周期.结果:两组治疗后心电图异常改变分别为6.7%(2/30)和33.3%(10/30),差异有非常显著性(P<0.01),随访4~18个月均未见肿瘤局部复发或转移.结论:门冬氨酸钾镁可降低阿霉素的急性心脏毒性,对化疗效果无影响,不增加化疗副作用.

    作者:邱超学;张琴琴 刊期: 2006年第22期

  • 抗分泌因子在大鼠内耳中的表达及其意义

    目的:通过研究抗分泌因子(AF)在大鼠内耳组织中的表达及分布,为临床治疗梅尼埃病提供实验依据.方法:选取6只健康雄性SD大鼠,断头后行内耳组织切片,用兔抗大鼠AF的特异性多克隆抗体进行免疫组织化学染色,观察AF在内耳组织中的表达情况.结果:AF在内耳组织中分布广泛,呈轻中度阳性反应,反应集中于与内淋巴关系密切的部位,如耳蜗血管纹边缘细胞、螺旋韧带Ⅰ~Ⅴ型纤维细胞分布区、前庭膜、基底膜、壶腹嵴感觉上皮及暗细胞等部位,与外淋巴相关的圆窗膜也存在中重度阳性反应,耳蜗螺旋神经节及前庭、耳蜗神经纤维均有阳性分布.结论:AF在大鼠内耳中分布范围广泛,多集中于与内淋巴关系密切的部位,提示AF可能参与内淋巴中水的调节.

    作者:李漫娜;李学佩 刊期: 2006年第22期

  • 腹腔镜胆囊切除术在合并肝硬化老年患者中的应用

    目的:探讨合并肝硬化的老年患者采用腹腔镜胆囊切除术(LC)的可行性.方法:对接受LC的40例合贩并肝硬化的老年患者的治疗结果进行回顾性分析.结果:LC成功34例,中转开腹6例.中转开腹原因,Calot三角区致密粘连、胆囊肿大僵硬3例;术中出血,镜下止血困难3例.LC平均手术时间(55.7±13.7)min,术中平均出血(84.5±35.5)mL.术后肺部感染1例.无肝功能衰竭等严重并发症,患者均治愈出院,术后住院时间3~9 d,平均住院(6.2±2.7)d.结论:合并肝硬化的老年患者采用LC治疗是相对安全的,掌握手术适应证和技术特点,注重围手术期的处理是成功的关键.

    作者:郑江华;简志祥;区金锐;王卫东 刊期: 2006年第22期

  • 胸腔镜治疗手术后乳糜胸3例

    目的:探讨电视胸腔镜术在手术后乳糜胸治疗中的作用.方法:回顾性分析应用电视胸腔镜经右胸入路膈肌上胸导管结扎治疗的3例手术后乳糜胸病例,其中左上肺癌术后左侧乳糜胸1例、食管癌术后右侧乳糜胸2例,均为男性患者;年龄分别为28、70、43岁.结果:手术时间分别为75、115、100 min,平均约100 min;术后引流量分别为2 270(包括左胸引流的420 mL)、1 170和1 100 mL,平均约1 510 mL;引流时间分别为5、7、7 d,平均约6 d.3例患者胸内均未能找到明显的胸导管渗漏部位,但成功控制乳糜胸,术后恢复顺利,无严重并发症;随访1年以上,乳糜胸无复发.结论:右胸入路的电视胸腔镜膈肌上胸导管缝扎治疗手术后乳糜胸是一种安全、有效的治疗方法,手术后乳糜胸有条件应尽早胸腔镜手术干预.

    作者:翁毅敏;谷力加;廖洪映;张健;黄邵洪 刊期: 2006年第22期

  • 重视腹腔镜胆囊切除术后的疼痛、黄疸、包块

    腹腔镜胆囊切除术已作为单纯胆囊疾病的首选治疗,它具有损伤小、病人痛苦少、恢复快之优点,然而,对于行本术式后出现的疼痛、黄疸、包块等症状应高度警惕恶性病变的可能,必须引起重视.近日笔者曾遇2例,就此浅谈体会如下.

    作者:沈中锋;郭盖章 刊期: 2006年第22期

  • 瘦素与胎肺发育关系的初步研究

    目的:探讨瘦素与胎肺发育及瘦素与地塞米松促胎肺成熟作用之间的关系.方法:采用逆转录定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测孕16~21 d Wister大鼠胎肺组织瘦素mRNA相对表达水平以及地塞米松对原代胎肺成纤维细胞瘦素mRNA表达的影响.结果:瘦素在胎肺组织有普遍表达,表达水平在孕16~17 d、孕18~19 d、孕20~21 d有逐渐上升的趋势(P<0.05);原代培养胎肺成纤维细胞经地塞米松处理24 h后,处理组瘦素表达水平高于对照组(P<0.05).结论:大鼠孕晚期胎肺组织中均有瘦素的表达,且随着胎肺的发育有增加的趋势.地塞米松能刺激培养的胎肺成纤维细胞瘦素的表达.

    作者:李智;陈惠池;高红 刊期: 2006年第22期

  • 脑弥漫性轴索损伤29例

    目的:对脑弥漫性轴索损伤(DAI)的诊断、临床特点、分组治疗、预后进行分析.方法:回顾我科2003年8月至2005年12月收治的29例DAI病人,主要根据其伤后昏迷时间分为轻、中、重3度,分析这3组病人的临床特点、影像资料及治疗结果,分析原发昏迷和入院时格拉斯哥昏迷评分(GCS)与预后的关系.结果:重度组22例占病例总数的75.9%,死亡6例,植物生存3例,中-重残8例,良好5例.伤后24 h CT扫描46.5%的病例中发现脑不同部位有点状高密度影.中度组4例占病例总数的13.8%,中残1例,余恢复良好.轻度组3例占10.3%,全部恢复良好.轻-中度组病例伤后24hCT扫描仅2例发现脑内点状高密度影.3组比较,年龄间无明显差异;中度组和重度组的GCS明显低于轻度组;中度组和重度组原发昏迷时间明显长于轻度组.死亡6例,均发生在重度组,总病死率为20.7%.结论:脑外伤后持续昏迷超过6 h而CT扫描无明显占位病灶者即可诊断为DAI;临床分度、GCS和原发昏迷时间有助于判断预后.

    作者:石巧玲 刊期: 2006年第22期

  • 蛋白质组学技术在鉴定肿瘤抗原和肿瘤标志物研究中的应用

    蛋白质组学(proteomics)的概念先是由两位澳大利亚学者WILKINS和WILLIAMS于1994年所提出,它研究的是一个细胞、组织或有机体所表达的全部蛋白质.由于同一时间特定的细胞、组织或有机体中并非所有的蛋白质都表达,故蛋白质组具有高度动态性及细胞特异性,一个有机体的不同细胞在不同阶段能够表达出它的全部蛋白质.蛋白质组学技术尤其是近几年发展起来的新技术改变了传统的分割式研究单个蛋白质的初级模式,对细胞或组织中蛋白质的表达状况建立起高通量、全面、快速的分析模式,成为生物医学领域研究的强有力的工具.

    作者:汤军桥;葛海良 刊期: 2006年第22期

  • 合并阴道出血的异位妊娠破裂误诊分析

    目的:探讨合并阴道出血的异位妊娠破裂患者的误诊原因,提高对异位妊娠的诊治水平.方法:回顾分析236例门、急诊异位妊娠破裂患者的临床资料,分成有阴道出血的异位妊娠破裂组及无阴道出血的异位妊娠破裂组,分析比较各组误诊率的差异.结果:有阴道出血的异位妊娠破裂组和无阴道出血的异位妊娠破裂组误诊率分别为39.86%、6.12%,两组差异有极显著性(P<0.001).结论:临床上对合并阴道出血的异位妊娠破裂患者初诊误诊率高,阴道出血易误认为月经,应提高警惕.

    作者:缪英年;李亮;王本国 刊期: 2006年第22期

  • 胰十二指肠切除术后出血原因探讨及护理

    目的:探讨胰十二指肠切除术后出血的原因及护理措施.方法:对我院2000-2005年期间169例胰十二指肠切除术病例进行回顾性分析.结果:发生术后出血17例(10.1%),其中上消化道出血15例次,腹腔内出血5例次;术后死亡的5例中4例并发术后出血;出血合并其他并发症患者的死亡比例(3/6)明显大于单纯出血病例(1/11),与出血并存的并发症中以吻合口漏、腹腔内感染和肝肾功能衰竭为常见.术后出血患者术前总胆红素≥342μmol/L者的比例及术中出血和输血量均明显大于未出血病例.结论:术前重度黄疸、术中大量出血和输血是患者术后出血的高危因素,对高危人群加强监测、护理,保持引流通畅,预防胰瘘及其他并发症的发生,是减少术后出血及死亡的关键.

    作者:叶海丹;廖培娇;雷阳阳 刊期: 2006年第22期

  • 显微外科手术治疗椎管内肿瘤64例

    目的:总结显微外科手术治疗椎管内肿瘤的经验.方法:分析5年来我科对64例椎管内肿瘤的显微外科手术治疗效果.结果:本组椎管内肿瘤64例,其中脊膜瘤22例(34.4%),神经鞘瘤20例(31.2%),脂肪瘤6例(9.4%),星形细胞瘤4例(6.2%),室管膜瘤5例(7.8%),转移瘤3例(4.7%),蛛网膜囊肿3例(4.7%),血管瘤1例(1.6%).肿瘤位于髓外硬膜内者占68.6%,位于硬膜外者占14.2%,位于脊髓髓内者占17.2%.肿瘤位于颈部者为23.4%,位于胸段者46.9%,位于腰段者17.2%,骶段者占12.5%,肿瘤显微镜下全切除率为78.1%.出院时运动功能障碍88.5%得以改善,感觉障碍改善率为83.3%,括约肌功能障碍改善率为80.0%,自发性疼痛88.9%消失.结论:椎管内肿瘤以良性居多,手术效果好,MRI检查及显微外科技术的应用是提高治疗效果的关键.

    作者:李劲松;叶敏;龙舟;张文波;黄进兴;谢锋 刊期: 2006年第22期

实用医学杂志

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