学术投稿

扩增bFGF的条件优化及其真核载体构建

丁焕文;张丽君;张宏斌;郭勇;王捷

关键词:成纤维细胞生长因子, 碱性, 基因表达, 遗传载体, 聚合酶链反应
摘要:目的:优化采用PCR技术从PBR322-bFGF质粒扩增bFGF 基因片段的条件并构bFGF真核表达载体,为研究bFGF基因转移在骨组织工程学中的应用提供研究基础.方法:(1)在不同的模板量、Mg2+浓度、退火温度下经PCR扩增bFGF基因, 琼脂糖凝胶电泳检测.(2)载体和PCR产物经EcoRI和HindⅢ酶切、纯化,T4连接酶连接,转化大肠杆菌,抗生素筛选重组质粒.结果:(1)得到三个佳参数为:模板量为2 μl(50.4 μg/ml);Mg2+浓度为2.0 mmol/L;退火温度为55℃.(2)酶切、PCR和DNA序列鉴定均证实插入片段的正确性.结论:在此优化条件下经PCR反应得到了特异、高效和忠实的bFGF基因片段,并成功构建了bFGF真核表达载体.
实用医学杂志相关文献
  • 预激综合征并发快速心房颤动

    预激综合征并发心房颤动是该综合征的主要临床表现之一,虽然房室旁路并不直接参与心房颤动的发生和维持,但心房颤动可经房室旁路下传引起快速心室反应,从而使血流动力学恶化及心电图表现复杂化,及时诊断和合理治疗具有重要的临床意义.

    作者:朱刚艳;江洪 刊期: 2002年第09期

  • 不扩髓带锁髓内钉治疗胫骨骨折32例

    目的: 探讨不扩髓带锁髓内钉治疗胫骨骨折的临床疗效.方法:采用不扩髓带锁髓内钉治疗胫骨骨折,闭合复位23例,切开复位9例.结果:随访半年以上2 3例,骨折全部愈合.结论:应用不扩髓带锁髓内钉治疗胫骨骨折治愈率高,并发症少.

    作者:李贤让;陈鸿辉;陈瑞光;刘向荣 刊期: 2002年第09期

  • 术后甲状旁腺功能减退症10例临床分析

    目的: 探讨甲状旁腺功能减退症(简称甲旁减)的病因、临床特点和治疗.方法:对10例术后甲旁减的临床资料进行回顾性分析.结果:10例甲旁减中占9例为甲状腺手术误切或损伤甲状旁腺引起,临床特点表现为抽搐、手足感觉异常、癔症样表现或痫性发作.目前治疗主要以补充钙剂及活性维生素D纠正低钙血症.结论:继发性甲旁减并不少见,尤其是颈部手术,临床表现不特异,易误诊,应常规作血钙、磷、镁等检查.

    作者:黄颖斌;陈亮;杨华章 刊期: 2002年第09期

  • 真性红细胞增多症伴假性低血糖4例

    当出现血糖测定值低于正常,而患者一般情况良好 ,无低血糖相应的临床表现时,应注意有无假性低血糖的可能.现将1998年1月~2002年4月本院收治的4例伴有低血糖的真性红细胞增多症报道如下.

    作者:虞容豪;刘雁 刊期: 2002年第09期

  • 后路植骨融合椎板钩内固定治疗寰枢椎失稳3例

    目的:评价椎板钩加压内固定治疗寰枢失稳的效果. 方法:对3例寰枢椎失稳者(包括齿状突骨折2例,寰枢椎脱位1例)行后路自体髂骨植骨、椎板钩(Apofix)内固定术.结果:随访6~18个月,均获得骨性愈合.结论:对寰枢失稳可采用寰枢椎后路融合椎板钩内固定术治疗.椎板钩内固定术无需椎板下穿越钢丝,避免了钢丝断裂及松脱,是一种易操作且效果可靠的内固定方法.

    作者:张和平;张普国;黄明光;李佛保 刊期: 2002年第09期

  • 手术与放射治疗联合疗法治疗恶性肿瘤

    目的:探讨晚期恶性肿瘤综合治疗的方法. 方法:对60例手术中无法切除的恶性肿瘤或考虑术床有残留的病人,将治疗管先埋置在术床或直接插入瘤体内,术后48 h进行铱192近距离放射治疗.对于未能切除的肿瘤照射总剂量 DT 36~48 Gy/6次,共3 d,外照射DT 30~36 Gy/15~18次;对于肿瘤已切除但怀疑有残留的病人照射总剂量DT 36 Gy/6次,共3 d.结果:60例病人全部进行了随访,5年生存率(41 /60)68.3%,局部复发率5%,无严重放疗副反应.结论:手术与放射治疗联合疗法治疗恶性肿瘤疗效确定,无严重放疗副反应,提高了病人的生存质量.

    作者:侯友贤;戴辉;李志强;李工;王者非;陈海;卫小芬;徐艳红 刊期: 2002年第09期

  • 急性心肌梗死伴室间隔破裂18例临床分析

    急性心肌梗死伴室间隔破裂为一严重并发症,死亡率极高,现将我院1995年1月~2001年11月收治急性AMI伴室间隔破裂(VSR)的资料汇总如下.

    作者:黎励文 刊期: 2002年第09期

  • 涎腺恶性淋巴上皮病变临床病理分析

    目的:总结涎腺恶性淋巴上皮病变的临床病理特点及鉴别诊断要点.方法:对本院近十年收治的5例患者的临床表现、病理学检查结果进行总结. 结果:5例均为颈部的无痛性肿块,包膜完整,切面呈灰白结节,镜下见癌细胞间有大量淋巴细胞增生,癌细胞PAS染色阴性,角蛋白阳性.结论:恶性淋巴上皮病变病理特征明显,临床上要与鼻咽转移癌、良性淋巴上皮病变和恶性淋巴瘤相鉴别.

    作者:范小明 刊期: 2002年第09期

  • 亚临床肝性脑病的诊断手段及评价

    肝性脑病是一复杂的综合征.1970年Zeegen等人[1]发现临床上某些按常规神经和精神检查正常、认为无肝性脑病表现的肝硬化患者,在进行Reitan Trail making Test时表现脑功能异常.这一发现为其后各国学者的研究所证实.Schomerus[2]和Rikkers 等人[3]把这种临床上缺乏症状,常规精神和神经功能检查正常,但智力或神经心理测验异常的慢性肝病患者,称为潜隐性或亚临床型肝性脑病(latent or subclinical hep atic encepalopathy).这一术语及其概念为世界各国所沿用.

    作者:朱权 刊期: 2002年第09期

  • 加压滑动鹅头钉加松质骨螺钉内固定治疗股骨粗隆间骨折21例

    目的:探讨应用加压滑动鹅头钉加松质骨螺钉内固定治疗股骨粗隆间骨折的疗效.方法:对21例股骨粗隆间骨折采用加压滑动鹅头钉加松质骨螺钉内固定治疗.结果:所有病人经6~36个月术后随访,优17例,良4例,无一例并发症死亡, 无髋内翻、患肢短缩畸形,无内固定物断裂、螺钉脱出股骨头,无迟发性感染等并发症.结论:应用加压滑动鹅头钉加松质骨螺钉内固定治疗股骨粗隆间骨折,加强了静压力和动压力的加压作用,加强抗扭转力,使病人可早期进行功能练习及负重,减少了并发症的发生, 临床效果满意.

    作者:王岩 刊期: 2002年第09期

  • 冷冻浓缩胸水静脉回输治疗难治性肝性胸水18例

    目的:探讨冷冻浓缩胸水静脉回输治疗难治性肝性胸水的疗效.方法:采用透析机对18例难治性肝性胸水患者的胸水进行超滤浓缩,置-18℃环境中冷冻2~3 d,37℃温育溶解后静脉回输.结果:冷冻浓缩胸水静脉回输后,胸水量减少至微量或消失,气促、胸闷、咳嗽等症状消失,症状被控制时间持续一周以上,有4例持续5个月以上未复发,有1例保持28个月无症状.治疗前后血清总蛋白分别为(46.6±8.7) g/L和 (5 4.8±6.5) g/L,白/球比值为0.99±0.17和1.23±0.14;动脉血氧分压为(7.06±1 .38) kPa和(8.75±1.23) kPa;血清钠为(123±13) mmol/L和(132±15) mmol/L,氯(98 ± 8) mmol/L和(103±9) mmol/L,以上各组数据治疗前后比较差异均具有显著意义(P<0 .05,P<0.001),副作用少.结论:冷冻浓缩胸水静脉回输能有效地使难治性肝性胸水消退,疗效持久,能提高血清蛋白水平,升高氧分压,疗效确切.

    作者:江水清;项桂菊;李玉芝;宋辉;胡孝彬;曲学玲;薛爱玲;钱於枋 刊期: 2002年第09期

  • 硫化氢急性中毒急救体会

    2001年9月29日,5位清洁工人相继进入较密闭的油脂化学废物地下室做清理工作,该室事前未作任何通风处理,5名工人相继昏迷,经我院急诊科急救处理,成功4例,死亡1例,现报告如下.

    作者:彭志刚;罗惠萍 刊期: 2002年第09期

  • 致心律失常性右室心肌病

    致心律失常性右室心肌病(arrhythmogenic right ventricular cardiomyopathy,ARVC) 又称致心律失常性右室发育不良(arrhythmogenic right ventricular dysplasia,ARVD)、右室发育不良性室速、孤立性右室心肌病、右室扩张型心肌病、右室室壁瘤等,是一种主要累及右心室心肌组织的疾病.过去国内报道较少,与对该病认识不足有关.近年来,随着医疗技术的不断提高,对该病的研究,特别在诊断手段和治疗方法上有很大进展.

    作者:黄晓波;吴平生 刊期: 2002年第09期

  • 丘脑小量出血的临床特点

    自CT应用以来,有关丘脑出血的文章报道不少 ,但报道小量丘脑出血Ia级,出血量<10 ml[1]的文章少见,现将华西医科大学近 10年来资料比较完整的14例丘脑小量出血的临床特点总结如下.

    作者:胡英;张波;周东 刊期: 2002年第09期

  • 爱维治治疗冠心病心绞痛的疗效分析

    我们于1999年11月~2002年2月对78例冠心病伴心绞痛患者在常规治疗基础上加用爱维治治疗,并与常规治疗组进行比较分析取得较好的疗效.

    作者:周培毅;黄翠瑶 刊期: 2002年第09期

  • 急性心肌梗死溶栓后再灌注心律失常的护理体会

    急性心肌梗死溶栓后再灌注心律失常(RA)是再灌注并发症之一,其中部分RA严重影响血液动力学改变,甚至引起心脏性猝死,因此加强对RA的护理及急诊处理非常重要,笔者通过对25例急性心肌梗死溶栓后再灌注心律失常的临床观察 ,初步探讨RA的护理体会.

    作者:刘晓蓉 刊期: 2002年第09期

  • 皮牵引下闭合复位夹板固定治疗低龄儿童股骨干骨折

    儿童股骨干骨折随年龄大小治疗方法选择各异,对大龄儿童股骨干骨折原则上采取手术治疗[1],而低龄儿童(6岁以下)则采用非手术疗法.自1994年以来,我科采用牵引加闭合复位小夹板固定治疗低龄儿童股骨干骨折78例 ,取得了较好的效果,现总结报告如下.

    作者:郭仲华 刊期: 2002年第09期

  • 酷似脑梗塞表现的多发性硬化11例

    我院1998年7月~2001年8月收治酷似脑梗塞的多发性硬化(MS)11例,现报告如下.1 临床资料1.1 一般资料本组11例,男7例,女4例,年龄27~57岁.

    作者:杨建明 刊期: 2002年第09期

  • 维胺酯胶囊治疗寻常性痤疮疗效观察

    目的:观察维胺酯胶囊治疗寻常性痤疮的疗效和使用安全性.方法:观察组口服维胺酯胶囊50 mg,2次/d,共6周.对照组口服维生素B6,安体舒通及四环素,共6周.两组同时外搽复方硫磺洗剂.结果:观察组对粉刺及脂溢的疗效优于对照组;治疗丘疹和脓疱无显著差异;综合疗效观察组高于对照组(P<0.05).观察组5例(13.5%)发生不良反应,对照组4例(10.8%)发生不良反应,两组比较差异无显著意义(P>0.05).结论:维胺酯胶囊是治疗痤疮的安全、有效药物.

    作者:王建琴;叶聪;曾仁山 刊期: 2002年第09期

  • 糖尿病合并急性心肌梗塞

    目的: 探讨糖尿病合并急性心肌梗塞(AMI)的临床特点.方法:对49例糖尿病合并AM I患者的资料进行分析.结果:糖尿病合并AMI无痛性心梗占49%,多部位梗死占50%,并发急性心力衰竭占47%,严重心率失常占38%,心源性休克占22%,肺炎占55%,同时有多种并发症占39%,病死率40%.结论:糖尿病合并AMI与心肌细胞病变、血管病变、神经病变有关, 临床症状不典型,多部位梗塞常见,并发症多,病死率高,应早期诊断,预防并发症.

    作者:杜映红 刊期: 2002年第09期

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