学术投稿

改良分子信标实时PCR快速检测大肠杆菌O157:H7

贺连华;扈庆华;石晓路;郑琳琳;李庆阁;张佳峰;庄志雄;刘小立;张顺祥;王冰;吴平芳;刘涛

关键词:大肠杆菌O157:H7, 改良分子信标, 实时PCR
摘要:目的建立改良分子信标实时PCR快速检测大肠杆菌O157:H7的快速方法. 方法根据GenBank公布O157:H7的rfbE保守序列,设计一对引物和改良分子信标探针,用FAM荧光剂标记探针的5'端,建立改良分子信标实时PCR检测O157:H7的反应体系,应用于食物中毒快速诊断和食品微生物检测. 结果共检测11种细菌,只有大肠杆菌O157:H7有荧光信号,其余10种全无荧光信号,且与其他细菌无交叉反应,DNA灵敏度为64fg,菌液灵敏度为59cfu/ml或2cfu/PCR反应体系.应用改良分子信标实时PCR反应体系检测10株O157:H7均出现特异的荧光信号,无干扰.对89份食品样品进行检测,5份O157:H7实时PCR阳性,其余样品为阴性,检测仅需2h.5份阳性样本,经传统方法培养,有3份检出大肠杆菌O157:H7. 结论改良分子信标实时PCR检测体系快速、灵敏度高,特异性强,可用于大肠杆菌O157:H7食物中毒的快速诊断和食品微生物检测,为食源性疾病的分子流行病学调查提供新的检测手段.
中国热带医学杂志相关文献
  • 咪喹莫特乳膏治疗尖锐湿疣临床观察

    尖锐湿疣(Condyloma acuminatum,CA)是由人类乳头瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)感染所致的表皮瘤样增生,属于我国常见的性传播疾病之一,目前治疗方法以局部除疣为主,但以往单一的疗法应用均易复发,局部注射药物或局麻做激光、微波、电离子术等患者较痛苦,尤其是女性患者不易接受.

    作者:邢爽爽 刊期: 2006年第05期

  • HPLC用于食品中维生素A和维生素E的测定

    目的建立反相高效液相色谱-二极管阵列检测法同时测定食品中维生素A和维生素E(α-生育酚)的方法. 方法取一定量食品样品加入无水乙醇、氢氧化钾及焦性没食子酸,80℃水浴皂化30min,石油醚提取后,氮气吹扫浓缩致干后用流动相溶解,进样5μl分析;色谱条件:色谱柱Supelco C18柱(10cm×2.1mm,5μm),流动相甲醇:水(93+7),流速0.4ml/min, 柱温40℃,DAD扫描波长范围210~370nm,检测波长325nm(Vitamin A)和294nm(Vitamin E). 结果维生素A在1.0~100.0μg/L浓度范围内线性良好,相关系数r=0.9998,维生素E在0.10~10.0mg/L浓度范围内相关系数r=0.9991.维生素A和维生素E的平均回收率在96%以上. 结论该法快速、灵敏、准确,样品处理简便易行,可用于食品中脂溶性维生素A和E的同时测定.

    作者:王晖;刘红河;尹江伟 刊期: 2006年第05期

  • 头孢哌酮与舒巴坦治疗急诊重症感染临床疗效研究

    目的观察头孢哌酮/舒巴坦治疗急诊重症感染的有效性及安全性. 方法对88例急诊重症感染患者,给予头孢哌酮/舒巴坦治疗,采用静脉滴入方式,每12h给药4.0g,观察其临床疗效及安全性. 结果头孢哌酮/舒巴坦治疗急诊重症感染的有效率为81.8%,细菌清除率为83.8%,不良反应率为5.7%. 结论急诊重症感染以革兰阴性菌为主,头孢哌酮/舒巴坦具有高效、安全的特点,可作为急诊重症感染的经验用药.

    作者:曾琦;邢柏 刊期: 2006年第05期

  • 东营市1984~2004年食物中毒事故分析

    为了摸清东营市食物中毒的原因,探讨食物中毒的发生规律,制订防治措施,减少食物中毒事故的发生,进一步提高食品卫生监管工作的水平,我们收集了东营市1984~2004年的食物中毒事故资料进行整理、分析.

    作者:张秀英;刘爱国;丁建华 刊期: 2006年第05期

  • 西双版纳州景洪市各类发热病人疟原虫检出情况

    目的了解景洪市不同人群疟原虫感染情况,为制定疟疾防治措施提供依据. 方法由景洪市疾病预防控制中心、州(市)各医院、农场医院、乡镇卫生院、村卫生室对各类发热病人进行涂片镜检或送检疟原虫. 结果 2002年1~12月全市血检各类发热病人11 841人,疟原虫阳性947例,平均疟原虫检出率为7.99%,间日疟占72.02%、恶性疟占27.98%.其中各类流动人群的疟原虫平均检出率为10.41%(402/3 682),明显高于当地居民的6.83%(545/7 979)(χ2=44.81,P<0.01). 结论各类流动人群发热病人的疟原虫检出率高,做好流动人口,特别是出、入境边民的管理是控制目前景洪市疟疾旒行的一项重要措施.

    作者:李兴亮;刀应华;李天军;李金海;杨昌;雷镭 刊期: 2006年第05期

  • 子痫前期患者钠钾ATP酶活性及与脂质过氧化关系的研究

    目的探讨子痫前期患者红细胞膜钠钾ATP酶(NKA)活性及脂质过氧化反应的变化及他们在疾病中的作用. 方法检测45例子痫前期患者红细胞膜钠钾ATP酶(NKA)活性及血清脂质过氧化产物丙二醛(MDA)的水平. 结果与正常妊娠孕妇相比,子痫前期患者红细胞膜钠钾ATP酶活性明显降低, 血清MDA水平明显升高.在子痫前期患者中,胎儿宫内生长受限组较非胎儿宫内生长受限组红细胞膜钠钾ATP酶活性明显降低.子痫前期患者组红细胞膜钠钾ATP酶活性与血清MDA呈负相关. 结论细胞膜钠钾ATP酶活性下降参与了妊高征的发生发展,且可能影响胎儿的营养供应.细胞膜钠钾ATP酶活性下降与脂质过氧化代谢有密切关系.

    作者:杨尚武;苟文丽;文梦灵 刊期: 2006年第05期

  • 白细胞介素1受体拮抗基因多态性与骨质疏松症的相关性

    目的了解广东地区汉族人群中白细胞介素-1受体拮抗基因 (IL-1ra)基因型的分布,探讨IL-1ra基因多态性与骨质疏松症的关系. 方法应用PCR及电泳检测等技术,对广东地区汉族人群中IL-1ra基因型的分布及其与骨质疏松症的易感性进行分析. 结果在广东人群中IL-1ra基因多态性与骨质密度紧密相关性,骨质疏松组和健康对照组在IL-1ra等位基因性的分布上有明显差异. 结论本研究人群中IL-1ra 基因型可能作为预测骨质疏松发生的危险性指标.

    作者:刘国强 刊期: 2006年第05期

  • 深圳市46例成年人麻疹临床特征及流行病学分析

    目的探讨成年人麻疹的发病特点和流行特征,为控制成年人麻疹流行提供依据. 方法对2000年1月~2005年10月所收集的46例成年人麻疹病例进行回顾分析. 结果成年人麻疹的临床特点主要为全身中毒症状较重,体温较高,皮疹典型,肝功能损害较重.患者以外来流动人员为主,平均年龄28.9岁,以3~6月为发病高峰,患者普遍无麻疹疫苗接种史. 结论成年人麻疹病情较重,合并症较多,临床症状不典型,易被误诊,建议在做好常规免疫的基础上,对15岁左右的中学生再进行一次强化免疫,以有效解决体内抗体水平随年龄增长而降低的问题.

    作者:袁飞雁 刊期: 2006年第05期

  • 1995~2004年濮阳市甲乙类传染病流行特征分析

    目的了解濮阳市1995~2004甲乙类传染病发病、死亡的变化趋势,分析传染病在该地区的流行规律与特征,为制定防治策略提供依据. 方法利用濮阳市1995~2004年传染病疫情报告资料进行分析. 结果濮阳市甲乙类传染病1997~2004年报告发病率高于1995年及1996年,2004年报告发病率达到高.年龄别发病率呈现三个高峰期,死亡率呈现两头高的现象;不同传播途径的各类传染病发病构成发生了显著变化. 结论传染病防治工作,是一项长期而艰巨的任务,需要多部门共同参与,综合防治.

    作者:任广秋 刊期: 2006年第05期

  • 纤维连接蛋白检测在肝病中的临床意义

    目的探讨纤维连接蛋白(FN)在肝病中的意义. 方法采用免疫比浊法检测220例各种肝病患者血清FN水平,并与其他肝功能指标进行比较. 结果急性肝炎与轻/中度慢性肝炎之间差异无显著性(P》0.05);急性肝炎与重度慢性肝炎、肝硬化、慢性重型肝炎之间差异有显著性(P《0.05、P《0.001、P《0.001);与血清白蛋白(ALB)、前白蛋白(PRE-A)、凝血酶原活动度(PTA)呈正相关(P《0.001). 结论血清FN水平在一定程度上能反映肝脏损伤的程度,检测血清FN对估计重度慢性肝炎、肝硬化、慢性重型肝炎患者病情、预后、转归均有一定意义.

    作者:杨霞;许继涛;蒋立会;张占卿 刊期: 2006年第05期

  • 36例疑诊PTE的临床分析

    目的探讨无确诊条件下肺血栓栓塞症(PTE)的诊断. 方法把具有PTE 临床表现而又缺乏其他合理临床解释的36例高度疑诊PTE患者,给予肝素诊断性治疗. 结果 36例患者中:治愈30例,治愈率为83.33%,好转2例,好转率为5.56%,无效4例,无效率占11.11%. 结论在无确诊条件下,对高度疑诊PTE患者,行肝素诊断性治疗,也可诊断PTE.

    作者:陈钰;梁勇;梁梅;甘秀梅 刊期: 2006年第05期

  • 肺炎衣原体感染对急性脑梗死患者脑血流动力学的影响

    目的探讨肺炎衣原体(CPn)感染的急性脑梗死患者脑血流动力学变化情况. 方法对有CPn慢性感染的121例急性脑梗死患者作为观察1组和有CPn急性感染的25例急性脑梗死患者作为观察2组进行经颅多谱勒超声检查,并与同期非CPn感染的39例急性脑梗死患者(对照组)进行对比分析. 结果观察1组中颅内血流动力学异常的血管有3支和3支以上的患者明显少于观察2组和对照组(均P《0.01),供应梗死病灶的主要血管的平均峰流速度低于对照组(P《0.05),而阻力指数和脉动指数均高于观察2组和对照组(均P《0.05),尤其大脑中动脉和基底动脉. 结论 CPn慢性感染的急性脑梗死患者脑血管病变虽不如非CPn感染的急性脑梗死患者广泛,但其梗死区供血血管不仅血流慢,且阻力高和弹性差.

    作者:苏海芳;邹蓉;赖颂辉;涂西林 刊期: 2006年第05期

  • 突发中毒事件现场处置存在的问题及对策

    突发中毒事件是突发公共卫生事件常见的表现形式之一.目前我国中毒危害仍相当严重[1],我国疾病死亡顺位谱显示,中毒伤害死亡人数排到了第五位[2,3],各种突发中毒事件频繁发生,给人们的生命安全和社会稳定带采了严重威胁.

    作者:连轶伟;谢立璟 刊期: 2006年第05期

  • 异丙酚持续静滴抢救毒鼠强中毒的临床分析

    毒鼠强中毒临床上出现反复发作强直性抽搐呈癫痫持续状态(SE)是儿科急症之一,SE持时间长,其脑损害愈严重,病死率高,若不及时控制,可留有神经系统后遗症,甚至危及生命.因此,及时控制SE是抢救毒鼠强中毒成功的关键.海南省人民医院儿科自1999年3月~2002年2月,应用异丙酚治疗10例毒鼠强中毒所致的SE,取得较好的效果,现将有关资料报告如下.

    作者:黄美娇;向伟 刊期: 2006年第05期

  • 颅脑损伤并发医院下呼吸道感染的危险因素分析

    目的探讨重型颅脑损伤患者并发医院下呼吸道感染(NP)的危险因素. 方法对68例重型颅脑损伤住院患者进行回顾性调查,统计学处理分析. 结果重型颅脑损伤并发医院下呼吸道感染率55.9%(38/68),气管切开组NP发生率73.7%(28/68)(P<0.001),昏迷时间对照,并发NP组明显延长,平均分别为27.39及4.04d(P<0.001). 结论用logistic回归分析表明,昏迷时间、气管切开分别为重型颅脑损伤并发NP的独立危险因素.

    作者:周信永;马煜 刊期: 2006年第05期

  • 健康教育对术后患者康复的影响

    目的探讨健康教育对患者生理及心理状况的影响. 方法采用类实验性研究方法,进行非随机方便取样,样本随机分为对照组和试验组各60例.对试验组的干预措施为有系统、有计划、有针对性的健康教育.研究者分别于手术后5~7d、出院后1个月、2个月时访视患者并填写问卷. 结果试验组患者术后部分生理状况改善时间明显缩短;试验组患者抑郁和焦虑得分在出院后1个月、2个月均明显低于对照组. 结论健康教育可以提高患者自我护理的知识水平和技能,缓解部分生理症状,改善其抑郁、焦虑心理,从而加速患者术后康复进程.

    作者:张瑞莲;史云飞 刊期: 2006年第05期

  • 某部入伍新兵新学员结核易感性调查

    目的分析部队人群的结核易感性,为部队结核病防治提供参考资料. 方法对某部1990~2002年入伍新兵及新学员进行结核菌素试验,并进行相关分析. 结果共调查1990~2002年新学员5 612 人,结核菌素试验强阳性193人(3.43%),阳性2 666人(47.51%)及阴性2 753人(49.05%)和调查1990~2000年新兵2 511人,结核菌素试验强阳性78人(3.11%),阳性1 021人(40.66%)及阴性1 412人(56.23%).结核菌素阳性率在不同年度,不同来源的人群间比较具差异有显著性. 结论部队人群中有一定数量的高危人群,需对这部分人群加强监控.

    作者:李红梅;冯丹;刘玮;蒋宝贵;高燕;李静;曹务春 刊期: 2006年第05期

  • 氯氮平与舒必利对精神分裂症阴性症状的疗效观察

    目的探讨单用氯氮平及氯氮平与舒必利两药联用对精神分裂症阴性症状的疗效. 方法将64例以阴性症状为主的精神分裂症患者随机分为两组,对照组单用氯氮平治疗,实验组则联用氯氮平与舒必利.治疗8周后作简明的疗效评定. 结果实验组显效率75%,高于对照组的56.3%(P<0.05). 结论氯氮平与舒必利联用能提高对精神分裂症阴性症状的疗效.

    作者:许彪 刊期: 2006年第05期

  • 原发性肺组织胞浆菌病的临床X线诊断与鉴别

    目的探讨原发性肺组织胞浆菌病的X线表现及鉴别诊断. 方法回顾性分析9例经临床治疗、实验室等检查确诊为原发性肺组织胞浆菌病的X线表现. 结果 9例原发性肺组织胞浆菌病人中,1例为淋巴结肿大型,3例为结节型,5例为粟粒播散型.其中1例合并有肺门阴影增大、增宽、增浓,肺门淋巴结呈蛋壳样钙化;其中3例合并有胸膜增厚,其中1例合并有叶间胸膜增厚. 结论原发性肺组织胞浆菌病活动期的X线表现特异性不强,须充分结合临床症状才能提出诊断,愈合期的X线表现以钙化为主.

    作者:王辉勇 刊期: 2006年第05期

  • 羊膜移植联合丝裂霉素C治疗翼状胬肉的疗效观察

    目的探讨羊膜移植术联合丝裂霉素C治疗翼状胬肉的疗效. 方法 32例(32眼)翼状胬肉患者行胬肉切除后,术中一次性应用丝裂霉素C(0.2mg/ml),再将甘油保存的羊膜移植缝合固定于巩膜暴露区.术后给予典必舒眼药水及托百士眼膏应用半月. 结果随访6个月,有2例复发,复发率为6.13%.未见其他并发症. 结论羊膜移植术联合丝裂霉素C治疗翼状胬肉能有效防止胬肉复发.

    作者:郑振优;黄雄高;邢健强;王康宏;吴江 刊期: 2006年第05期

中国热带医学杂志

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主管:国家卫生和计划生育委员会

主办:中华预防医学会;海南疾病预防控制中心