目的:检测不同浓度的肾上腺髓质素(ADM)和肾上腺加压素(ADT)对培养的Wistar大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)Ⅰ、Ⅲ型胶原合成和磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK1/2)表达的影响,探讨PASMCs增殖过程中ERK途径是否被激活.方法:取健康雄性Wistar大鼠,行大鼠远端PASMCs分离并进行原代培养,采用小鼠抗人平滑肌α-actin单克隆抗体对培养细胞进行鉴定;在培养基内分别加入10-7 mol/L ADM或ADT培养72 h 后加入兔抗大鼠Ⅰ型、Ⅲ型胶原抗体和兔抗大鼠p-ERK1/2抗体,0.01 mol/L PBS作阴性对照,FITC标记山羊抗兔IgG为Ⅱ抗,免疫荧光法观察PASMCs内Ⅰ、Ⅲ型胶原及p-ERK1/2表达.Western blotting检测10-7mol/L、10-8mol/L和10-9 mol/L ADM或ADT对p-ERK1/2蛋白表达的影响.结果:经平滑肌α-actin单克隆抗体对培养细胞进行鉴定,其纯度达97%.10-7 mol/L ADM可抑制PASMCsⅠ、Ⅲ型胶原及p-ERK1/2的表达(P<0.05,P<0.01);10-7 mol/L的ADT刺激后大鼠PASMCsⅠ、Ⅲ型胶原及p-ERK1/2的表达增强(P＜0.05,P<0.01).Western blotting结果显示ADM可呈剂量依赖性抑制p-ERK1/2蛋白表达(P<0.01,P<0.05);而ADT也可呈剂量依赖性促进p-ERK1/2蛋白表达(P<0.01,P<0.05).结论:ADM可抑制大鼠PASMCsⅠ、Ⅲ型胶原及p-ERK1/2表达,而ADT可促进PASMCsⅠ、Ⅲ型胶原及p-ERK1/2表达,提示PASMCs增殖过程中ERK通路被激活,ADM和ADT可能通过ERK1/2信号通路来调节PASMCs增殖.
作者：张磊；赵翠芬；李福海；王荣；夏伟 刊期： 2011年第08期
目的:研究慢性心衰大鼠室旁核微量注射血管紧张素II-1型和2型(AT1和AT2)受体阻滞剂对心率、血压和肾交感神经系统的影响,揭示心衰大鼠下丘脑室旁核对交感系统的调节机制.方法:采用SD大鼠,手术组用左冠状动脉前降支结扎术制作心衰模型,假手术组大鼠左冠状动脉前降支下穿线但不结扎.术后4周,测定血流动力学评判心功能状态,测定心脏/体重比与肺/体重比,并进行心脏病理组织学观察.对符合标准的大鼠进行麻醉,经腹膜后途径暴露左肾,在手术显微镜下剥离肾交感神经,脑立体定位仪对大鼠室旁核定位,微量注射AT1和AT2受体阻滞剂(100 nL),POWERLAB 8/30系统采集信号,记录心率、血压和肾交感神经放电活动的改变,人工脑脊液组作为对照.结果:肾交感神经放电:下丘脑室旁核微量注射AT1受体阻滞剂导致肾交感神经兴奋性减弱,对心衰大鼠交感神经的兴奋性减弱较假手术组明显.下丘脑室旁核微量注射AT2受体阻滞剂及人工脑脊液对心衰大鼠及假手术大鼠交感神经的兴奋性改变不明显.结论:心衰时室旁核内注射AT1、AT2受体阻滞剂对交感神经的输出反应有差异.在中枢肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAAS),血管紧张素II主要通过AT1受体起作用,而AT2受体无相关介导作用.
作者：潘丽华；秦晓同；朱健华；桂乐 刊期： 2011年第08期
目的:研究外源性肾上腺髓质素(ADM)的运用对肾脏急性机械性损伤早期下丘脑-垂体-肾上腺皮质(HPA)轴的影响,探讨外源性ADM在急性创伤中的生物学作用.方法:健康成年普通级Wistar大鼠104只,随机分为4组:正常对照组(8只)、单纯创伤组(32只)、伤前给药组(32只)、伤后给药组(32只);后3组采用自由落体打击仪直接打击大鼠脊肋区制作肾脏机械性损伤模型.2个给药组分别于损伤前后10 min腹腔注射ADM(0.1 nmol/kg).3 组肾损伤大鼠分为4 批分别于创伤后1、6、12、24 h采用快速心脏采血法处死.迅速解剖动物提取下丘脑标本,采用免疫组化染色法检测促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)在下丘脑的表达;放免分析法检测血浆促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质醇(CORT)浓度.结果:单纯创伤组下丘脑CRH的表达及血浆ACTH、CORT浓度较正常对照组轻微升高,但无显著差异;创伤前注射ADM使创伤后下丘脑CRH的表达在1、24 h,血浆ACTH浓度在12 h,以及血浆CORT浓度在6、12、24 h显著高于单纯创伤组及正常对照组(P<0.05);创伤后注射ADM使下丘脑CRH的表达在1、6、12 h,以及血浆CORT浓度在12、24 h明显高于单纯创伤组及正常对照组(P<0.05).结论:外源性ADM可激活HPA轴,使HPA轴各个层面的活动增强,但不同层面对外源性ADM的反应性不同,创伤前、后注射ADM对HPA轴的影响不同.
作者：王晓梅；张淑琴；王晓燕；王芳；孙少华 刊期： 2011年第08期
目的:检测Wip1及相关蛋白在肺癌细胞中的表达情况,探讨Wip1在肺癌发生中的作用机制.方法:Western blotting检测各种细胞(肺腺癌细胞A549、肺鳞癌细胞NCI-1299、大细胞肺癌细胞 NCI-H460和正常支气管上皮细胞HBE)中Wip1、p53、p-p53、p38 MAPK和p-p38 MAPK蛋白的表达.结果:A549、NCI-1299和H460细胞中Wip1蛋白的表达均高于HBE细胞(P<0.05);各种肺癌细胞间Wip1蛋白的表达无明显差异(P>0.05);p-p53和p-p38 MAPK蛋白在肺癌细胞中的表达低于HBE细胞(P<0.05);肺癌细胞中Wip1表达增加,p-p38 MAPK和p-p53表达降低,存在着Wip1-p38 MAPK-p53信号通路的失衡.结论:肺癌细胞(A549、NCI-1299、H460)中存在Wip1-p38 MAPK-p53信号通路的失衡.这可能是Wip1在肺癌中的致癌机制之一.
作者：赵吉星；鲁建军；孙磊；罗红鹤；顾勇 刊期： 2011年第08期
目的:探讨蜂胶对K562细胞增殖、凋亡的影响及其作用机制.方法:体外培养K562细胞,将不同浓度的蜂胶掺入细胞,采用MTT法检测细胞增殖抑制率,流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡率,RT-PCR检测细胞中Nup98 mRNA表达水平.Western blotting检测细胞中Nup98蛋白表达水平.结果:2 mg/L、20 mg/L和200 mg/L组蜂胶K562细胞的增殖抑制率和凋亡率明显高于对照组,并具有一定的时间和剂量依赖性.高浓度蜂胶作用后,Nup98 mRNA及蛋白表达均明显低于对照组.结论:蜂胶可抑制K562细胞的增殖,诱导其凋亡,其机制可能与下调Nup98的表达有关.
作者：汪茗；章尧；戚之琳；毕富勇 刊期： 2011年第08期
目的:观察异丙酚对脂多糖(LPS)致大鼠脑损伤时脑组织p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活化的影响.方法:SD大鼠,雌雄不限,随机分为3组(n=24):对照组(C组)、LPS组(LPS组)和LPS+异丙酚组(LPS+P组),LPS组经左颈内动脉注射LPS(1 mg/kg)建立LPS性脑损伤模型,LPS+P组在给予LPS后立即通过腹腔注射给予异丙酚(100 mg/kg),C组给予等容量生理盐水.分别于注射异丙酚后6、24 、48和72 h处死6只大鼠,取大脑皮质组织,测定脑组织含水量、磷酸化p38 MAPK和iNOS表达水平,光镜下观察脑组织形态及病理变化.结果:与C组比较,LPS组各时点脑组织含水量升高,脑组织磷酸化p38 MAPK和iNOS表达水平均于6 h开始增加,24 h达高峰,48 h及72 h各指标仍高于C组(P<0.05);与LPS组相比,LPS+P组脑组织含水量、磷酸化p38 MAPK和iNOS的表达水平降低( P<0.05).脑组织含水量与磷酸化p38 MAPK、iNOS水平呈正相关(r=0.603,r=0.727,P<0.05).LPS+P组脑组织病理学损伤轻于LPS组.结论:异丙酚可减轻LPS所致的大鼠脑损伤,其机制可能与异丙酚抑制脑组织p38 MAPK活化,下调iNOS的表达,进而减轻炎性反应有关.
作者：曹慧灵；但伶；邓必高 刊期： 2011年第08期
血管新生参与了人体多种生理与病理过程,前者如创伤愈合,后者包括肿瘤、动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)、类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)等多种疾病,血管新生与这些疾病的发生发展密切相关.磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase, PI3K)作为细胞内重要的信号蛋白,可介导细胞迁移、增殖与血管新生等多种生物学行为的信号转导.
作者：权伟；张丽莙 刊期： 2011年第08期
自噬(autophagy)是真核细胞在营养与能量缺乏情况下,通过分解亚细胞成分提供生物合成原料,使蛋白质和细胞器得以循环利用的一种降解代谢途径,同时调控线粒体更新及过氧化物酶体等,从而维持细胞稳态.
作者：洪远；郭松雪；张建民 刊期： 2011年第08期
细胞容积调节广泛参与细胞的各种生理病理过程,如上皮细胞物质转运、物质代谢、细胞兴奋性、激素释放、细胞迁移、细胞增殖及细胞坏死凋亡等[1, 2].在低渗环境刺激下,容积激活性氯通道参与细胞容积调节,对维持细胞容积起着重要调节作用.
作者：柏志全；李华荣；张海峰；朱林燕；王立伟；陈丽新 刊期： 2011年第08期
目的:建立EL9611红白血病小鼠急性移植物抗宿主病(GVHD)的动物模型.方法:同种异基因骨髓移植(allo-BMT)以C57BL/6(H-2b)鼠为供鼠,BALB/c(H-2d)为受鼠.设白血病组(n=10)、照射对照组(白血病鼠照射后不进行allo-BMT,n=4)、GVHD组(白血病鼠照射+allo-BMT,n=10)及正常对照组(n=4).白血病组采用每只BALB/c鼠尾静脉输注2×106个EL9611红白血病细胞建立红白血病动物模型;GVHD组于接种白血病细胞7 d后行总剂量为8.0 Gy的1次性[60Co]γ射线全身照射(TBI),照射后5 h内每只小鼠尾静脉输注C57BL/6鼠骨髓细胞2×106个+脾细胞1×107个,建立EL9611红白血病小鼠的急性GVHD动物模型.观察小鼠体位、皮毛、大便等临床表现,病理检查肝脾、皮肤、小肠、外周血和骨髓,计算生存率.结果:白血病组生存时间(14.5±2.1) d[从照射当天(第0 d)算起为(7.5±0.7) d],生存时间与GVHD组相比P<0.01,死亡率100%,无自发缓解,死亡时肝脾肿大(肝重2.40 g±0.48 g,脾重0.84 g±0.20 g,与正常对照组比P<0.01),外周血WBC升高[死亡前(3.33±0.27)×1010/L,与正常对照组比P<0.05],病理检查示组织正常结构破坏,白血病细胞浸润.照射对照组生存时间为(9.0±0.7) d,生存时间与GVHD组和正常对照组相比差异显著(P<0.01),死亡率100%,病理检查显示造血衰竭.GVHD组生存时间为(32.0±3.2)d,生存时间与其它各组相比P<0.01,死亡率100%,allo-BMT后第10-13 d出现症状,临床表现和病理检查符合Ⅰ到Ⅱ度GVHD的改变.结论:采用EL9611红白血病细胞(2×106/鼠)静脉输注的方式可成功建立EL9611红白血病动物模型;接种EL9611红白血病细胞第7 d行TBI +allo-BMT可成功建立EL9611红白血病小鼠的急性GVHD动物模型.
作者：五纳宁；何善阳；徐霖；陈康；赵湛；廖冰；曹开源 刊期： 2011年第08期
目的:探索建立寒冷刺激致小鼠上呼吸道黏膜免疫功能低下模型.方法:将昆明种小鼠置于-20 ℃寒冷环境中,分别给予5 min、10 min、15 min、20 min 4个时段的寒冷刺激,以小鼠唾液分泌型免疫球蛋白A(SIgA)含量和溶菌酶活性作为关键检测指标,评价模型的建立是否成功.结果:20 min组小鼠出现50%的动物死亡;15 min组小鼠SIgA含量及溶菌酶活性明显降低(P＜0.05,P＜0.01);10 min组小鼠仅出现溶菌酶活性降低(P＜0.05);5 min组小鼠则各项指标均无显著差异(P>0.05).结论:将小鼠置于-20 ℃寒冷环境中15 min,能成功建立上呼吸道黏膜免疫功能低下模型.
作者：李娴；雷娜；段小花；吴盛友；李秀芳；林青 刊期： 2011年第08期
