目的：探讨外源性硫化氢（ hydrogen sulfide，H2 S）对臭氧（ ozone，O3）致哮喘小鼠气道反应性和气道重塑的影响。方法：将15只SPF级C57BL／6雌性小鼠随机分为对照组、O3组和NaHS＋O3组，每组5只。 O3处理前0．5 h，对照组和O3组腹腔注射生理盐水，NaHS＋O3组腹腔注射NaHS（H2S的供体）；O3组和NaHS＋O3组隔天用O3处理，对照组则呼吸清洁空气。持续4周后无创测定小鼠的气道反应性，随后进行气管环张力测定，通过肺组织HE染色测定支气管基底膜周径（ Pbm）和管壁总面积（ Wat）并标准化衡量气道重塑程度，并行AB-PAS染色测定肺组织中杯状上皮细胞的变化情况以进一步评价气道重塑程度。结果：与对照组相比，O3组小鼠的气道反应性显著增高；NaHS＋O3组明显低于O3组，但与对照组相比差异无统计学显著性。与对照组相比，O3组小鼠在乙酰甲胆碱刺激时的气管收缩力显著加大；NaHS＋O3组明显小于O3组。与对照组相比，O3组小鼠的支气管壁厚度明显加大；NaHS＋O3组显著小于O3组但仍大于对照组。与对照组相比，O3组小鼠肺组织中杯状上皮细胞占气道上皮细胞总面积的百分比显著上升；NaHS＋O3组显著低于O3组但仍高于对照组。结论：外源性H2 S对O3所致哮喘的气道高反应性和气道重塑有缓解与保护作用，有望为临床药物治疗哮喘提供新靶点。
作者：周丽芬；林启旺；廖莉；梁梓明；陈庆梓；陈玲玲；黄佳婷；李建华 刊期： 2016年第02期
目的：观察叶酸对去卵巢大鼠抗氧化酶、一氧化氮合酶和一氧化氮的影响。方法：40只3月龄健康雌性SD大鼠，随机分成5组：假手术组、去卵巢组、二乙基己烯雌酚（0．03 mg · kg－1· d－1）组、低剂量（5 mg · kg－1· d－1）叶酸组和高剂量（20 mg· kg－1· d－1）叶酸组。各组大鼠于术后1周开始灌胃给药，假手术组和去卵巢组给予蒸馏水，10周后，取L5椎体和右股骨行骨密度（ BMD）检测；测定血浆和骨匀浆总抗氧化能力（ TAC）、谷胱甘肽过氧化物酶（ GSH-Px）、丙二醛（ MDA）、一氧化氮合酶（ NOS）和一氧化氮（ NO）水平。结果：与假手术组比较，去卵巢组大鼠L5椎体和股骨BMD显著降低（ P＜0.01），血浆GSH-Px、NO和骨匀浆TAC、GSH-Px、NOS及NO水平明显降低（P＜0.01），MDA浓度升高显著（P＜0.01）；与去卵巢组大鼠比较，高剂量叶酸组大鼠L5椎体和股骨BMD增加（P＜0.01），骨匀浆TAC、GSH-Px、NOS和NO水平升高（P＜0.01），MDA浓度降低（P＜0.01），血浆GSH-Px和NO水平升高。结论：去卵巢大鼠体内抗氧化酶、NOS和NO水平降低，氧化应激参与了去卵巢大鼠骨质疏松的发生；高剂量叶酸能提升去卵巢大鼠腰椎和股骨BMD，提高其体内抗氧化酶、NOS和NO水平，改善氧化应激，这可能是高剂量叶酸防治去卵巢大鼠骨质疏松的机制之一。
作者：王海敏；汤旭磊；王朝旭 刊期： 2016年第02期
目的：探讨肝细胞癌中miR-375的表达及其调控的相关靶基因和信号通路。方法：采用原位杂交检测miR-375在人肝癌组织芯片的表达情况；人全基因组表达谱芯片检测4株肝癌细胞株；MAS生物信息学软件筛选miR-375调控靶基因及相关信号通路。结果：原位杂交结果显示miR-375在肝癌组织中的表达明显高于癌旁组织（P＜0.05）；人全基因组表达谱芯片结果分析显示4株转染miR-375的肝癌细胞的共上调基因有20个，共下调基因有17个；MAS生物信息学软件分析显示4株转染miR-375的肝癌细胞共有的上调信号通路有54条，下调信号通路有48条。结论：miR-375与肝细胞癌有密切的关系。对miR-375调控的肝细胞癌相关靶基因与信号通路进行多元化筛选，为后续全面深入的研究肝细胞癌发生发展的机制提供了便利。
作者：黄波；肖影群；罗达亚；章萍；杨仙荷；钟青梅；王武；姚迪 刊期： 2016年第02期
目的：研究姜黄素衍生物B06对2型糖尿病大鼠睾酮合成的影响。方法：雄性SD大鼠35只，随机均分为正常对照组（C组）、高脂组（H组）、高脂治疗组（HT组）、糖尿病组（D组）和糖尿病治疗组（DT组），后4组高脂喂养4周后，D组及DT组用低剂量链脲佐菌素诱导糖尿病，HT组和DT组用0.2 mg· kg－1· d－1的B06灌胃8周。微量血糖仪测定大鼠血糖浓度；ELISA法测定血胰岛素水平，并计算胰岛素抵抗指数；光镜和电镜观察睾丸形态；放射免疫法测定血睾酮、雌二醇水平；免疫组化检测Leydig细胞的类固醇激素合成急性调节蛋白（ StAR）表达；RT-PCR检测睾丸Leydig细胞StAR、胆固醇侧链裂解酶（P450scc）、细胞色素P45017A1（P450c17）、细胞色素P450芳香化酶（ P450arom）、3β-羟基类固醇脱氢酶（ HSD）及17β-HSD的mRNA表达水平。结果： H组及D组血糖、胰岛素抵抗指数升高，血清睾酮水平降低，经B06治疗后好转；H组及D组睾丸曲细精管变形，生精细胞脱落， Leydig细胞内线粒体肿胀，内质网减少且扩张，胞核皱缩，染色质稀疏，经B06治疗后病变减轻；D组的StAR蛋白表达减弱，经B06治疗后表达增强；H组及D组Leydig细胞StAR、P450scc mRNA表达降低，经B06治疗后升高， P450c17、P450arom、3β-HSD及17β-HSD mRNA表达未见明显差异。结论： B06可缓解2型糖尿病大鼠睾丸病变，提高血清睾酮水平，这可能与B06改善机体代谢紊乱并上调Leydig细胞StAR及P450scc mRNA表达水平相关。
作者：林中民；王芳；张泉波；陈霖；陈三妹；陈国荣 刊期： 2016年第02期
目的：国际上传统的小鼠尿动力学检测方法为膀胱造瘘法。该传统方法破坏膀胱连续性，与临床上广泛采用的经尿道法有明显的差异。本研究寻找到合适的小鼠导尿管材，拟探讨模拟人体经尿道插管法行小鼠尿动力学检测的优势和应用价值。方法：雌性小鼠8只，选择小儿留置针软芯进行导尿，并作为测压管和膀胱灌注管，经三通外接微量泵以及压力感受器。直肠测压采用硬膜外麻醉导管，外套乳胶手套小指末端一截制成球囊，然后导入小鼠直肠。结果：该方法成功收集到以下尿动力学指标：膀胱基础压力（ BBP）、膀胱漏尿点压（ BLPP）、大排尿压（MVP）、膀胱大容量（MBC）、残余尿量（PVR）、排尿量（VV）、排尿效率（EV）和膀胱顺应性（BC）。结论：本研究首次成功模拟人体经尿道插管法，实现小鼠尿动力学检测，成功避免膀胱造瘘对小鼠尿动力学的影响，检测后的小鼠能够长期生存，可以顺利进行后续分子和基因实验。
作者：陈林；杨进；胡海峰；邢莎莎；张汉超；喻备；杨亚飞 刊期： 2016年第02期
目的：探讨米诺环素对新生大鼠缺氧后脑室周围区域谷氨酸的作用及其可能的机制。方法：对出生后1 d的大鼠给予系统性缺氧构建缺血缺氧性脑损伤模型（ hypoxic-ischemic brain damage，HIBD）。采用液相色谱－串联质谱联用技术检测缺氧后4 h和1 d脑室周围区域谷氨酸水平；Western blot观察该区域EAAT1和EAAT2发育期变化以及EAAT1、EAAT2、Iba-1、IL-1β、TNF-α和TGF-β1蛋白在缺氧后4 h和1 d的动态变化，并同时观察给予米诺环素后对谷氨酸水平及上述蛋白的影响。结果：谷氨酸水平检测发现，缺氧后4 h和1 d，脑室周围区域谷氨酸水平明显上升；给予米诺环素（45 mg／kg）后，谷氨酸水平显著下降。 Western blot结果显示，出生后第1周EAAT1和EAAT2低表达，但在出生后第2周表达显著上升；缺氧后1 d，EAAT1、EAAT2、Iba-1、IL-1β和TGF-β1表达上调；给予米诺环素后能促进EAAT1和TNF-α的表达，但却抑制EAAT2的产生。结论：缺氧后早期，米诺环素能降低脑室周围区域谷氨酸水平，其机制可能与它选择性调控谷氨酸转运体，而非抑制该区域炎症反应有关。
作者：李虹椿；李霞；马雪涛；肖婕；牛之瑞；冯雷；李凡 刊期： 2016年第02期
目的：探讨高压氧（ hyperbaric oxygen，HBO）治疗对心理应激相关牙周炎牙周组织低氧诱导因子1α（ hypoxia-inducible factor-1α，HIF-1α）表达的影响。方法：清洁级4周龄雄性Wistar大鼠120只，随机分为4组：正常对照组；单纯应激组；牙周炎组：用浸有牙龈卟啉单胞菌株的丝线结扎左侧上颌第二磨牙牙颈部，复制实验性牙周炎模型；牙周炎＋应激组。于实验后第9周停止应激刺激，对除正常对照组外其它各组大鼠每组选取6只进行HBO治疗。于实验后2、4和8周末分批处死未治疗动物，每组处死6只；于实验后10周末处死HBO治疗及未治疗动物。处死前测量术区的牙周附着情况，制作牙体牙周联合切片，观察牙周的组织学改变。免疫组化法检测各组大鼠牙周组织HIF-1α的表达水平，计算平均阳性细胞率。结果：大体观察见正常对照组及单纯应激组牙周附着位置正常；牙周炎组出现牙龈萎缩，附着丧失明显；牙周炎＋应激组附着丧失明显，根分叉暴露，HBO治疗后，牙龈水肿减轻，牙周袋变浅；组织学观察见牙周炎＋应激组牙周组织破坏程度在各时点均重于牙周炎组；经HBO治疗后，牙周组织炎症程度减轻，炎症细胞浸润减少；牙龈指数（ gingival index， GI）及牙周附着丧失（ attachment loss， AL）检查见单纯应激组与正常对照组在各时点均无显著差异；在第4、8周时牙周炎＋应激组GI、AL明显高于牙周炎组（ P＜0.01）；HBO治疗结束后牙周炎组及牙周炎＋应激组GI、AL明显低于未治疗组（ P＜0.05）；单纯应激组与正常对照组HIF-1α免疫组化平均阳性细胞率在各时点均无显著差异；牙周炎＋应激组HIF-1α平均阳性细胞率在第4、8周时均明显高于牙周炎组（ P＜0.01）；HBO治疗结束后牙周炎组及牙周炎＋应激组HIF-1α平均阳性细胞率较未治疗组降低（ P＜0.01）。结论：心理应激可加重牙周组织缺氧程度从而加重牙周炎症状，HBO通过增加牙周组织的氧供应量对大鼠实验性牙周炎及心理应激相关牙周炎有显著的治疗效果。
作者：王瑢；顾思成；郭剑芬；黄世光 刊期： 2016年第02期
目的：观察硫化氢在心肺复苏后脑保护中的作用，并探讨其对神经元细胞自噬的影响。方法：窒息法建立大鼠心脏停搏模型。72只雄性 Wistar 大鼠随机分为假手术（ sham ）组、模型（ model ）组和硫氢化钠（ NaHS）组。自主循环恢复（ ROSC）后2 h、4 h、12 h和24 h用Western blot方法检测神经元自噬标志物beclin-1的表达和微管相关蛋白1轻链3（ LC3）的转换；ROSC后12 h，用免疫组化方法观察LC3颗粒的表达；透射电镜观察神经元自噬现象；ROSC后72 h，TUNEL染色计数顶叶皮层凋亡神经元。 ROSC后24 h、48 h和72 h行神经功能缺损评分（ NDS）评价神经功能。结果：ROSC后2 h、4 h、12 h和24 h，model组自噬标志物beclin-1的表达持续增加，而NaHS组beclin-1的表达先增加，然后逐渐降低（P＜0.05）。自噬标志物LC3 II／I的表达也是同样趋势。免疫组化显示，ROSC后12 h，model组神经元胞浆和胞核LC3颗粒的比例较NaHS组明显增多（ P＜0.05）。电镜显示，model组自噬泡明显多于NaHS组及sham组（P＜0.05）。 TUNEL染色显示，ROSC后72 h凋亡神经元数量model组明显多于NaHS组及sham组（P＜0.05）。 NDS评分显示，NaHS组在各时点神经功能优于model组（P＜0.05）。结论：硫化氢可以抑制心脏停搏模型大鼠ROSC后神经元自噬，减少神经元凋亡，改善神经功能。
作者：魏红艳；李恒杰；李芳；胡春林；李欣；李慧；赵子然；张杰；廖晓星 刊期： 2016年第02期
目的：研究子宫内膜干细胞（ endometrial stem cells，EnSCs）来源细胞因子“鸡尾酒”（ EnSC-derived cytokine cocktail，EdCC）对心肌缺血再灌注损伤的影响及MEK-ERK信号通路的作用。方法：建立小鼠心肌缺血再灌注损伤模型，用TTC／Evans blue染色评估心梗面积，TUNEL染色检测细胞凋亡，Western blot检测ERK1／2磷酸化水平和cleaved caspase-3表达。结果：EnSCs具有间充质干细胞特性，表达CD90，不表达CD34和CD45。 EdCC的表皮生长因子（EGF）含量为（6811±312）ng／g蛋白。经尾静脉注射EdCC可显著升高心肌ERK1／2磷酸化水平，明显降低梗死面积，减少梗死周边区凋亡细胞数目，抑制capase-3活化。 MEK1特异性阻断剂PD98059（5 mg／kg）抑制EdCC介导的ERK1／2磷酸化，并抵消上述心肌保护效应。 EGF受体特异性阻断剂AG-1487（6 mg／kg）只能部分抵消EdCC的心肌保护作用，而单纯注射EGF不能缩小梗死面积。结论：EdCC通过激活MEK1-ERK1／2信号通路减轻心肌缺血再灌注损伤，EGF受体是该通路重要组成部分。该结果对目前成体干细胞移植治疗模式———从细胞转移到细胞因子，具有重要的理论意义。
作者：蒋智；贾中申；吴玥婷；韦方 刊期： 2016年第02期
目的：以脾气虚证大鼠为研究对象，探讨脾气虚证导致的心功能变化及其机制。方法：大鼠随机分为2组，分别为空白对照组及脾气虚模型组。采用小动物超声测定2组大鼠的心功能变化；HE染色观察心肌组织病理学变化；Western blotting法测定心肌中脑钠肽（ BNP）的蛋白表达情况；ELISA法测定血清及心肌中BNP和cAMP含量；real-time PCR测定碱性成纤维细胞生长因子（ bFGF）和蛋白激酶A（ PKA）的mRNA表达。结果：与空白组比较，脾气虚模型组大鼠心肌细胞发生不同程度坏死及变性，每搏输出量及射血分数均降低，血清及心肌中BNP和cAMP含量均升高，BNP蛋白表达及bFGF、PKA mRNA表达增加。结论：脾气虚可引起大鼠心功能下降，机体BNP、cAMP含量及PKA、bFGF表达均有所增加。
作者：姜晓琳；张立德 刊期： 2016年第02期
目的：通过观察高糖环境下给予外源性骨形态发生蛋白-7（BMP-7）对肾小管上皮细胞（NRK-52E）表达分化抑制因子2（ Id2）和转录因子E2A的影响，探讨BMP-7减轻高糖诱导的肾小管纤维化病变的可能机制。方法：将体外培养的肾小管上皮细胞NRK-52E分为3组：对照（control）组、高糖（HG）组和不同浓度BMP-7（10μg／L和20μg／L）干预组，HG组和干预组分别设12 h、24 h和48 h 3个时点。 Western blot方法检测Id2、E2A、上皮细胞钙粘蛋白（ E-cadherin）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和Ⅰ型胶原（ Col-Ⅰ）蛋白的表达，real-time PCR方法检测Id2 mRNA的表达。结果：与control组相比，HG组Id2的mRNA和蛋白水平及E-cadherin的蛋白水平明显下调，E2A、α-SMA和Col-Ⅰ的蛋白水平明显上调（ P＜0.05）；与HG组相比，20μg／L BMP-7干预组Id2的mRNA和蛋白水平及E-cadherin的蛋白水平均较同时点显著上调，E2A、α-SMA和Col-Ⅰ的蛋白水平显著下调（P＜0.05）。相关性分析结果显示，Id2蛋白与E2A蛋白表达呈显著负相关（P＜0.05）。结论：BMP-7可阻断高糖诱导的肾小管上皮细胞的纤维化，其机制可能与促进Id2蛋白并抑制E2A蛋白的表达有关。
作者：曾令萍；肖瑛；张莹莹；张昌志；吴德佩；李圆圆；石明隽；郭兵 刊期： 2016年第02期
目的：研究阻断Sonic Hedgehog （ Shh）信号对不同人肝癌细胞生长的影响，探讨阻断Shh信号抑制肝癌细胞生长的机制。方法：RT-PCR法检测Shh信号分子在3株人肝癌细胞（BEL-7402、Huh7和HepG2）中的表达，并检测Shh阻断抗体作用后BEL-7402细胞Shh信号效应分子表达变化；MTT法检测人肝癌细胞增殖活性；流式细胞术检测人肝癌细胞凋亡；Western blot检测凋亡相关蛋白表达。结果：Shh信号分子在3株人肝癌细胞中均有表达， Shh阻断抗体可以下调Shh信号效应分子patched （ Ptch）、Gli1和Gli2的表达；Shh阻断抗体可以抑制3株肝癌细胞生长，增加G0／G1期细胞，并诱导细胞凋亡；Shh阻断抗体作用后， BEL-7402细胞pro-caspase-3、pro-caspase-8和pro-caspase-9蛋白表达水平下降， cleaved caspase-3、cleaved caspase-8和cleaved caspase-9蛋白表达水平升高。结论：阻断Shh信号可抑制Shh高表达的人肝癌细胞生长，阻滞细胞周期于G0／G1期，并诱导肝癌细胞凋亡。
作者：刘爱梅；余功旺；黄莉霞；孙艳；迟作华 刊期： 2016年第02期
目的：观察钙敏感受体（ calcium sensing receptor，CaSR）对淫羊藿苷（ ICA）诱导小鼠胚胎干细胞向心肌细胞分化的影响。方法：129小鼠ES-D3细胞经直接悬浮法形成拟胚体（EBs），应用ICA定向诱导，透射电镜观察分化细胞的超微结构；免疫荧光和 Western blot 分别检测细胞有无α-辅肌动蛋白（α-actinin ）和肌钙蛋白I（cTnI）的表达；流式细胞术检测细胞分化率；Western blot检测心肌特异转录因子NKx2．5、GATA-4和CaSR的蛋白表达。结果：ICA诱导2 d后，可见自发性收缩的细胞簇；随着诱导分化时间的延长，α-actinin和cTnI蛋白的表达逐渐增多；CaSR、NKx2．5和GATA-4蛋白在分化早期表达多，持续表达至晚期；电镜观察分化细胞中可见连接结构、肌丝；CaSR激动剂新霉素能够增加早期EBs中CaSR、NKx2．5和GATA-4的表达，CaSR抑制剂NPS2390能够阻断上述作用。结论：CaSR在胚胎干细胞分化的心肌细胞中有表达，CaSR活化可通过增加NKx2．5和GATA-4的表达促进心肌细胞的分化。
作者：孙健；白淑芝；李爽；许晓义；袁辉；魏韬；徐长庆；栾海蓉 刊期： 2016年第02期
目的：探索B族链球菌（ GBS）不同菌株对血小板活化的作用及可能的机制。方法：来自脓毒症伴血小板减少患者分离鉴定的6株GBS作为诱导剂，分别采用血小板聚集仪、流式细胞术、扫描电镜和Western blot-ting方法检测它们对血小板聚集率以及血小板膜蛋白CD62P、TLR2和TLR4表达的影响；进一步用TLR2和TLR4单克隆抗体封闭血小板表面TLR2和TLR4以检测它们与GBS诱导的血小板活化的关系。结果：6株GBS中有3株可诱导血小板聚集，且能明显上调血小板TLR2和CD62P的表达（P＜0.05），但对血小板TLR4的表达没有影响；封闭血小板TLR2后，GBS诱导的血小板聚集率明显下降。结论：部分GBS菌株可诱导血小板活化，血小板TLR2可能在这个过程中起重要作用。
作者：刘晓燕；刘红云；高延民；谢双锋；罗先明；常建星；徐康；马丽萍 刊期： 2016年第02期
目的：本研究通过复制氯化铵致大鼠肺损伤模型，研究咪达普利对肺损伤大鼠动脉血气、MDA、肺形态学和AngⅡ、CD54蛋白表达的影响。方法：将30只雄性大鼠随机分为3组：空白对照组、肺损伤模型组和药物组。对照组大鼠腹腔注射生理盐水2 mL／kg；肺损伤模型组大鼠腹腔注射等量6％氯化铵；药物组大鼠在注射6％氯化铵后，每天1次灌胃咪达普利（3 mg／kg），连续灌胃7 d；在实验第7天，用2％的戊巴比妥钠麻醉，采集腹主动脉血和腹腔静脉血样本；肺组织经4％多聚甲醛灌注、固定、脱水、透明、浸蜡、包埋和切片。 ELISA法测定血清TNF-α和IL-6水平，化学发光法测定血清MDA含量，HE染色观察肺部形态学变化，免疫组织化学染色法观察肺组织AngⅡ和CD54蛋白表达。结果：与对照组相比，模型组PaCO2明显升高（ P＜0.05），血清TNF-α、IL-6和MDA浓度显著增加（ P＜0.01），氯化铵腹腔注射的肺损伤模型组大鼠出现肺水肿、肺炎、肺泡壁瘀血、肺泡腔出血和肺泡壁增生等损伤，肺组织AngⅡ和CD54蛋白表达明显增高（ P＜0.01）；与模型组比较，药物组PaCO2明显降低（ P＜0.05），血清TNF-α、IL-6和MDA浓度以及肺组织AngⅡ、CD54蛋白表达显著降低（P＜0.01）。结论：咪达普利可显著改善氯化铵所致肺损伤大鼠血气，抑制脂质过氧化和血清炎症细胞因子，降低肺组织AngⅡ和CD54蛋白表达。
作者：黄丛富；郝雪琴；邓雯；刘传发；王婷婷；温小利；陶中蓉 刊期： 2016年第02期
目的：研究持续细胞外钾对野生型HERG与其突变体L539fs／47蛋白表达的影响。方法：用脂质体转染法将野生型HERG（WT）及其突变体HERG-L539fs／47（MT）分别转染HEK293细胞36 h后，0.8、4.3及10 mmol／L的钾干预6 h，流式细胞术检测HERG蛋白表达量；干预12 h用激光共聚焦成像和免疫印迹法进行HERG蛋白定位及表达量检测。结果：用激光共聚焦成像检测发现野生型HERG蛋白主要分布在细胞膜上；而HERG突变体L539fs／47蛋白大部分滞留胞浆；并且HERG蛋白的表达均随细胞外钾浓度升高而增多。流式细胞术结果显示细胞外高钾组荧光增多（ P＜0.01），WT组荧光阳性细胞百分比和荧光强度均高于MT组（ P＜0.05）。免疫印迹显示，不同于野生型HERG 135 kD及155 kD 2个条带，突变体仅60 kD 1个条带，3个条带均受细胞外钾影响（ P＜0.05）。结论：细胞外高钾增强细胞膜上野生型和突变型HERG通道蛋白的稳定性，持续低钾干预时间依赖性地减少HERG通道蛋白的表达。
作者：吕颖；张军波；刘仲伟；张爱峰；潘军强；王军奎；潘硕；韩稳琦；孙超峰 刊期： 2016年第02期
目的：探讨1-磷酸鞘氨醇（S1P）在高糖诱导血管内皮细胞功能损伤中的作用及其机制。方法：在高糖培养的人主动脉内皮细胞模型中，分别或同时给予S1P、鞘氨醇激酶1抑制剂和Akt抑制剂处理后，观察一氧化氮（NO）、粒细胞-内皮细胞黏附率、细胞间黏附分子1（ICAM-1）蛋白表达、内皮细胞迁移以及Akt／内皮型一氧化氮合酶（ eNOS）信号途径的改变。结果：S1P明显降低高糖诱导的内皮细胞培养上清液中NO含量，促进粒细胞与内皮细胞黏附，显著增加内皮细胞ICAM-1蛋白表达，抑制内皮细胞迁移和Akt／eNOS信号通路激活。鞘氨醇激酶1抑制剂减少S1P生成后上述内皮细胞功能指标得以明显改善，Akt／eNOS信号通路恢复激活。结论： S1P促进高糖培养的内皮细胞功能障碍的形成，可能与其抑制Akt／eNOS信号通路激活有关。抑制S1P生成有望成为减轻内皮细胞功能损伤的治疗策略之一。
作者：刘慰华；林双峰；石吉相；潘婷；陈秋梅；王烁婷；尚慧 刊期： 2016年第02期
目的：探讨红景天苷对内皮祖细胞（ EPCs）的辐射防护作用，并分析其机制。方法：体外培养正常人外周血EPCs，观察红景天苷对辐射后EPCs活性、黏附、迁移及凋亡的影响。应用CCK-8法检测细胞活性，流式细胞术检测细胞凋亡率， Western blotting法检测细胞内磷脂酰肌醇3-激酶（ PI3K）／Akt通路中Akt蛋白表达水平。结果：4 Gy [60Co]γ射线辐射可导致EPCs损伤，不仅细胞活性、黏附和迁移能力下降，而且细胞凋亡增加；与辐射对照组比较，红景天苷则能部分逆转辐射对EPCs的损伤，提高EPCs的活性、黏附和迁移能力，减少辐射导致的细胞凋亡，增加细胞内磷酸化Akt蛋白的水平。但这些作用可被PI3K特异性抑制剂LY294002削弱。结论：红景天苷对内皮祖细胞辐射损伤具有一定的防护作用，其机制可能与增强PI3K／Akt通路的作用有关。
作者：刘善淘；朱锦灿；陈小宇；刘革修 刊期： 2016年第02期
目的：观察柴胡疏肝散对高脂饮食建立的非酒精性脂肪性肝病（ NAFLD）大鼠肝组织脂质代谢和腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）／sirtuin 1（SIRT1）通路相关蛋白的影响。方法：选用SPF级SD大鼠24只，随机分为正常（ NC）组、高脂（ HFD）组和柴胡疏肝散（ CSP）组，每组8只。采用高脂饲料喂养大鼠16周建立NAFLD大鼠模型，用药组大鼠同时灌服柴胡疏肝散浸膏剂（9.6 g· kg－1· d－1）进行干预，16周后取血和肝组织样本，全自动生化仪检测血清和肝匀浆总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）以及血清丙氨酸转氨酶（ALT）和天门冬氨酸转氨酶（AST）含量；HE染色观察肝组织病理损伤变化；油红O染色观察肝组织脂质蓄积程度，透射电镜观察肝细胞内超微结构变化；Western blot法检测肝组织AMPK、磷酸化AMPK（ pAMPK）、SIRT1和解偶联蛋白2（ UCP2）的蛋白水平。结果：大鼠肝组织HE染色、油红O染色和电镜结果证实肝细胞脂质蓄积严重，提示NAFLD大鼠模型建立成功。与NC组比较，HFD组血清和肝组织匀浆TC、TG含量显著升高（ P＜0.01），血清AST含量显著升高（ P＜0.01），肝组织pAMPK和SIRT1蛋白水平显著降低（P＜0.01），UCP2蛋白水平显著升高（P＜0.01）；与HFD组比较，CSP组大鼠肝组织脂质蓄积程度明显改善，血清和肝匀浆TC和TG含量呈下降趋势，其中肝匀浆TC和TG含量下降显著（ P＜0.05），血清AST含量显著降低（P＜0.05），肝组织pAMPK和SIRT1蛋白水平显著升高（P＜0.05），UCP2蛋白水平显著下调（P＜0.01），但各组大鼠总AMPK蛋白水平差异无统计学显著性。结论：柴胡疏肝散能够改善16周高脂饮食诱导的NAFLD大鼠肝脏脂肪代谢紊乱、减轻肝脏脂质蓄积，其作用机制可能与其激活AMPK／SIRT1通路有关。
作者：张玉佩；邓远军；胡巢凤；韩莉；杨钦河；梁荫基；孔怡琳；何毅芳；金玲；李媛媛；王观龙；程少冰；涂桂芳 刊期： 2016年第02期
目的：探讨microRNA-132（ miR-132）通过调控胆碱能通路减轻肺泡巨噬细胞炎症反应的作用机制。方法：向大鼠肺泡巨噬细胞NR8383中转染miR-132 mimic、mimic阴性对照（ NC）、miR-132 inhibitor或inhibitor NC，转染后用脂多糖（ LPS）和（或）乙酰胆碱（ ACh）处理细胞；采用real-time PCR检测乙酰胆碱酯酶（ AChE）的mR-NA表达；采用Western blot检测细胞中AChE、信号转导及转录激活因子3（ STAT3）和磷酸化STAT3（ p-STAT3），以及细胞浆和细胞核中核因子κB（ NF-κB）蛋白的改变；采用AChE活性测试盒检测细胞上清液中AChE活性的改变；采用免疫荧光检测NF-κB的核移位变化。结果：上调或下调miR-132不影响AChE的mRNA相对表达水平；上调miR-132可使AChE蛋白及活性的水平均显著降低（P＜0.05），下调miR-132可使AChE蛋白及活性的水平均显著升高（P＜0.05）。当给予LPS＋ACh作用时，miR-132 mimic组对NF-κB p65核移位的抑制作用较mimic NC组更强（P＜0.05），miR-132 inhibitor组较inhibitor NC组更弱（P＜0.05）；miR-132 mimic组对STAT3及p-STAT3蛋白的抑制作用较mimic NC组更强（P＜0.05）。结论：miR-132通过调控胆碱能通路减轻肺泡巨噬细胞炎症反应的作用机制可能是miR-132靶向作用AChE，抑制AChE对ACh的水解作用，从而增强 ACh的抗炎作用，抑制NF-κB 及STAT3的活化。
作者：刘芬；李勇；赵宁；李东海；江榕；曾振国；邵强；彭菲菲；王燕；钱克俭 刊期： 2016年第02期
目的：观察番石榴叶总三萜（TTPGL）对3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗（IR）的改善作用，并探讨其可能的作用机制。方法：培养3T3-L1前脂肪细胞并诱导其分化，给予TTPGL（0.3、1、3、10μg／L），并设溶媒（0.1％DMSO）组、阳性药正钒酸钠（ Van，10μmol／L）组、正常对照（ control）组和模型（ model）组，药物作用48 h。 MTT法检测药物对前脂肪细胞活力的影响，油红O染色法观察其对细胞分化的影响。建立IR模型后，药物处理48 h，葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法（GOD-POD）检测IR脂肪细胞上清液中葡萄糖消耗量；比色法检测游离脂肪酸（FFA）水平；ELISA法检测脂肪因子分泌水平；real-time PCR检测IR脂肪细胞蛋白酪氨酸激酶1B（PTP1B）的mRNA表达量；Western blot检测磷酸化胰岛素受体底物1／胰岛素受体底物1（ p-IRS-1／IRS-1）和磷酸化蛋白激酶B／蛋白激酶B （ p-Akt／Akt）的蛋白水平。结果：与溶媒组比较，TTPGL显著提高了前脂肪细胞的活力并抑制其分化（ P＜0.01）。与IR溶媒组比较，无论在基础状态下还是胰岛素刺激状态下，TTPGL（1-10μg／L）均显著地促进了IR脂肪细胞葡萄糖消耗（P＜0.01）；TTPGL（0.3～3μg／L）显著抑制FFA的产生（P＜0.01）。与模型组比较，TTPGL（0.3和3μg／L）显著增加IR脂肪细胞脂联素的分泌（P＜0.05）并抑制TNF-α的分泌（P＜0.01），TTPGL（3μg／L）对抵抗素的分泌有显著抑制作用（P＜0.05），对瘦素分泌无显著作用；TTPGL（3μg／L）显著下调IR脂肪细胞PTP1B的mRNA表达（P＜0.01）；TTPGL（3μg／L）极显著上调p-IRS-1／IRS-1的水平；TTPGL（0.3和3μg／L）显著上调p-Akt／Akt的蛋白水平（ P＜0.05）。结论：TTPGL具有显著改善3T3-L1脂肪细胞IR的作用，其作用机制可能与TTPGL下调了IR脂肪细胞PTP1 B mRNA的表达、同时上调p-IRS-1／IRS-1和p-Akt／Akt的蛋白水平有关。
作者：李秀存；马锦锦；赵晶晶；叶开和；吕艳青；王小康；魏崧丞；张晓琦；叶春玲 刊期： 2016年第02期
目的：探索CXCL16基因缺失对链脲佐菌素（ STZ）引发的糖尿病小鼠肾脏病变的影响。方法：选取8周龄雄性C57BL／6J CXCL16基因缺失（ C16 KO）小鼠，以及相同年龄及背景的野生型（ WT）小鼠，采用STZ诱导的方式，建立糖尿病小鼠模型，观察CXCL16基因缺失对糖尿病肾病发生发展的影响。结果：在糖尿病病变方面，与STZ处理的WT小鼠相比，STZ诱导C16 KO糖尿病小鼠的空腹血糖显著降低，并且其葡萄糖耐受能力得到显著改善。在糖尿病引发的肾脏病变方面，STZ处理后，C16 KO糖尿病小鼠的尿蛋白量显著低于WT糖尿病小鼠，此外，C16 KO糖尿病小鼠的肾小球损伤也明显低于WT糖尿病小鼠。与此同时，与WT糖尿病小鼠相比，C16 KO糖尿病小鼠肾脏组织活性氧簇（ ROS）、丙二醛（ MDA）、氧化低密度脂蛋白（ ox-LDL）水平及凝集素样氧化低密度脂蛋白受体1（Lox-1）的mRNA表达水平均显著下调。此外，在STZ处理后，C16 KO糖尿病小鼠肾组织中的巨噬细胞移动抑制因子（ MIF）、炎症因子TNF-α和IL-6以及黏附因子ICAM-1和CXCL1的mRNA表达水平均显著低于WT糖尿病小鼠。结论：CXCL16基因缺失能显著抑制STZ诱导的糖尿病小鼠肾脏病变。
作者：赵乐萍；金雷钢；施立华；张赛赛；潘薛波；林灼锋；龚方华 刊期： 2016年第02期
目的：探究经典瞬时受体电位通道1（TRPC1）在转化生长因子β1（TGF-β1）诱导人支气管上皮细胞（16HBE）迁移中的作用。方法： siRNA沉默TRPC1；CCK-8法和流式细胞术分别检测细胞活力和凋亡；细胞划痕和Transwell小室实验检测细胞的迁移和侵袭。 Western blot检测E-钙黏蛋白和vimentin的蛋白表达。结果：TGF-β1刺激细胞后，TGF-β1组细胞的迁移距离大于对照组（P＜0.01）。 TGF-β1组和TRPC1沉默组的细胞活力和凋亡与对照组相比差异不显著；与TGF-β1组细胞比较， siRNA和 TGF-β1共同作用组迁移能力明显降低（ P＜0.01）。与 TGF-β1组相比，siRNA 沉默TRPC1和 TGF-β1共同作用组 E-钙黏蛋白的蛋白表达明显降低（ P ＜0.05），而vimentin的蛋白表达明显增强（P＜0.05）。结论：TRPC1通过调节E-钙黏蛋白和vimentin 的蛋白表达参与了TGF-β1诱导人支气管上皮细胞迁移的过程。
作者：钟长江；岳喜磊；李建华；许继德；成莹；杨春涛 刊期： 2016年第02期
目的：应用腺病毒为载体在体外过表达热休克蛋白75（Hsp75），研究Hsp75蛋白过表达对神经干细胞在Aβ诱导神经毒性中的作用，并初步探讨其作用机制。方法：体外培养小鼠神经干细胞C17.2，实验分为对照组、Aβ处理组、腺病毒阴性感染组和腺病毒Hsp75过表达感染组。使用荧光显微镜观察腺病毒的感染情况并进行细胞免疫鉴定；倒置相差显微镜观察各组神经干细胞的形态；MTT法检测细胞活力；流式细胞术检测细胞凋亡率；Western blot检测Hsp75和活化型caspase-3蛋白水平。结果：荧光显微镜观察和Western blot检测表明腺病毒成功感染神经干细胞并高效表达Hsp75蛋白。此外，腺病毒感染不会导致细胞形态改变及细胞分化，同时也不会影响细胞活力。与对照组比较，Aβ处理组及腺病毒阴性感染组细胞存活率显著降低（P＜0.05），细胞凋亡率及活化型caspase-3蛋白水平显著增高（ P＜0.05）；然而，Hsp75过表达能显著提高神经干细胞的存活率，减少细胞凋亡和降低活化型caspase-3蛋白水平（P＜0.05）。结论：Hsp75过表达对Aβ诱导损伤的C17.2细胞具有明显保护作用，其机制可能是与抑制caspase-3途径依赖的细胞凋亡有关。
作者：王艳；林继宗；陈庆状；贾思远；马艳姣；王勇 刊期： 2016年第02期
目的：研究小鼠慢性酒精中毒及戒断过程中抑郁样行为的改变，进一步探讨酒精中毒与抑郁症的共病机制。方法：构建新型慢性酒精中毒小鼠模型；实验分为正常对照组及慢性酒精7 d、14 d、21 d和28 d组。在第6、13、20和27天分别进行酒精偏好度测试，测试后戒断酒精1 d，随后次日进行抑郁行为学测试，测试结束后处死小鼠取海马与额叶皮层，采用高效液相色谱法测定5-羟色胺（5-HT）及去甲肾上腺素（NE）含量，采用免疫印迹法测定cAMP反应元件结合蛋白（ CREB）和脑源性神经营养因子（ BDNF）的含量。结果：随着酒精饮酒天数及戒断次数的增加，小鼠表现出明显嗜酒现象，并且在强迫游泳和悬尾测试中，表现出明显的不动时间增加。7d组小鼠额叶皮层内5-HT水平升高（P＜0.05），海马与额叶5-HT水平在21 d与28 d组降低（P＜0.01）；7 d和14 d组小鼠海马与额叶NE水平无明显变化，21 d和28 d组NE水平降低（ P＜0.05）。21 d和28 d组小鼠海马与额叶内p-CREB／CREB比值及BDNF表达水平明显下降（ P＜0.05），7 d与14 d组无明显变化。结论：酒精中毒、戒断阶段与抑郁的共病机制涉及5-HT。5-HT-cAMP-CREB-BDNF信号转导通路可能为酒精中毒与抑郁症的共病机制。
作者：蒋曦；田福荣；赵应征 刊期： 2016年第02期
目的：观察Th17细胞水平与慢性阻塞性肺疾病（ COPD）患者症状严重程度及预后因素的相关性，以期探讨Th17细胞水平在判断COPD临床预后方面的可能价值。方法：选取2013年5月～2014年12月我院就诊的110例COPD患者为研究对象，40例健康体检者为对照组。根据COPD全球倡议（ GOLD）将COPD患者分为A组（低危、症状轻）、B组（低危、症状重）、C组（高危、症状轻）及D组（高危、症状重），给予吸入性糖皮质激素／长效β2受体激动剂或吸入性糖皮质激素／长效β2受体激动剂＋长效胆碱能药物治疗，收集患者治疗前及治疗3个月后相关临床资料，包括外周血Th17细胞比例、细胞因子（IL-17和IL-6）、慢性阻塞性肺疾病评估测试（CAT）评分、年龄、体重指数、肺功能指标及诊断前12个月COPD急性加重（ AECOPD）次数，分析Th17细胞水平与其它临床特征间的相关性。结果：COPD患者外周血Th17细胞、IL-17及IL-6水平显著高于对照组（ P＜0.05）。随着COPD症状严重程度的增加，B、D组COPD患者外周血Th17细胞、细胞因子（IL-17和IL-6）水平及CAT评分显著高于A、C组患者（ P＜0.05）。单变量相关分析发现，治疗前B、D组外周血Th17细胞水平与CAT评分呈正相关（ P＜0.05），而与FEV1、FEV1％Pred、FVC及FVC％Pred呈负相关（P＜0.05）；A、C组外周血Th17细胞水平与CAT评分、FEV1、FEV1％Pred、FVC及FVC％Pred无明显相关性。治疗后外周血Th17细胞水平与CAT评分呈正相关（ P＜0.05），而与FEV1、FEV1％Pred、FVC及FVC％Pred呈负相关（P＜0.05）。结论：外周血Th17细胞水平与COPD患者IL-17、IL-6、CAT评分及肺功能指标有较好的相关性，具有评估COPD患者症状严重程度及预后的潜在临床价值。
作者：汪露；江涛 刊期： 2016年第02期
目的：探讨内皮源性吲哚胺2，3-双加氧酶（IDO）对周细胞迁移及收缩蛋白表达的影响。方法：体外培养人肺动脉内皮细胞（HPAECs）及大鼠脑微血管周细胞。建立过表达IDO的HPAECs模型（IDO-HPAECs）。实验分为3组：对照组，以HPAECs条件培养基干预周细胞；处理组，以IDO-HPAECs条件培养基干预周细胞；抑制组，以含1-甲基色氨酸（1-mT）的IDO-HPAECs条件培养基干预周细胞。测定共培养体系一氧化氮（NO）、色氨酸及犬尿氨酸浓度。观察周细胞活性、迁移及收缩蛋白表达情况。结果：IDO-HPAECs条件培养基干预周细胞6～48 h对其活性无显著影响。处理组的周细胞迁移能力显著低于对照组（P＜0．01），抑制组显著高于处理组（P＜0．01）。共培养体系的NO浓度在各组间差异无统计学意义（P＞0．05）。处理组的色氨酸浓度显著低于对照组（P＜0．01），而抑制组显著高于处理组（P＜0．01）。处理组的犬尿氨酸浓度显著高于对照组（P＜0．01），而抑制组显著低于处理组（P＜0．01）。处理组的α-平滑肌肌动蛋白与结蛋白表达水平显著低于对照组（P＜0．01），抑制组显著高于处理组（P＜0．01）。结论：内皮源性IDO抑制周细胞迁移及收缩蛋白表达，可能参与机体微血管功能调控。
作者：岳莉英；关志明；裴志强 刊期： 2016年第02期
目的：研究微小RNA-141（ miR-141）在人肝癌细胞和正常胎肝细胞中的表达，同时分析miR-141表达异常对人肝癌细胞恶性生物学表型的影响。方法：分别提取人肝癌细胞SMMC-7721和正常肝细胞HL-7702的总RNA，采用实时荧光定量PCR法检测miR-141的表达。采用脂质体介导的转染方法分别将miR-141 mimic转染SMMC-7721细胞，将miR-141 inhibitor转染HL-7702细胞；MTS试剂盒和BrdU-ELISA检测细胞增殖能力，流式细胞术检测转染前后细胞周期和凋亡率的变化。 Transwell实验检测miR-141表达变化对细胞体外迁移能力的影响。结果：miR-141在SMMC-7721细胞中的表达较HL-7702细胞明显下降。与空白组、脂质体组和阴性对照组相比，转染25 nmol／L miR-141 mimic的SMMC-7721细胞中，细胞增殖速度减慢，S期细胞比例降低，凋亡细胞比例上升，细胞体外迁移能力下降；转染50 nmol／L miR-141 inhibitor的HL-7702细胞中，细胞增殖速度加快，S期细胞比例上升，凋亡细胞比例下降，细胞体外迁移能力增强。结论：miR-141在人肝癌细胞中表达下降，上调miR-141表达可抑制肝癌细胞体外增殖活性和迁移能力，影响细胞周期和凋亡。在肝癌发病进程中，miR-141可能扮演抑癌基因的角色。
作者：刘瑶；贺兴波；舒涛；黄才斌 刊期： 2016年第02期
目的：探讨胞浆活化T细胞核因子1（nuclear factor of activated T-cells， cytplasmic 1， NFATc1）对人卵巢癌SKOV3细胞裸鼠移植瘤生长和肿瘤脉管生成的影响及其可能机制。方法：NFATc1 siRNA转染人上皮性卵巢癌细胞株SKOV3，免疫荧光及RT-PCR测量转染效率和基因抑制率，选取效率高的序列建立裸鼠皮下移植瘤模型，测量各组裸鼠肿瘤体积，观察NFATc1 siRNA的体内抗肿瘤作用。免疫组织化学检测各组肿瘤组织NFATc1的表达情况，并使用细胞角蛋白染色标记上皮性来源，CD34标记微血管，podoplanin标记微淋巴管。分别计算各组微血管及微淋巴管密度并进行统计学分析。应用RT-PCR及Western blot检测各组移植瘤组织NFATc1、CXC趋化因子受体2（CXCR2）、成纤维细胞生长因子2（FGF-2）及血小板源性生长因子BB（PDGF-BB）的mRNA及蛋白表达水平。结果：3条特异性序列均可显著降低NFATc1的表达水平，以siRNA-1169佳。 NFATc1在空白组及阴性对照组瘤组织高表达。干扰组抑瘤率为57.08％，且重量和体积均低于2个对照组。空白组和阴性对照组的微血管密度和微淋巴管密度明显高于干扰组。对照组比较，NFATc1 siRNA可以在mRNA水平上明显抑制NFATC1、CX-CR2、FGF-2和PDGF-BB的转录。 Western blot各组细胞在相应位置出现NFATc1、CXCR2、FGF-2和 PDGF-BB条带，空白组与阴性对照组的吸光度强，与干扰组比较具有显著差异。结论： NFATc1 siRNA明显抑制人卵巢癌SKOV3细胞裸鼠皮下移植瘤生长和肿瘤脉管生成，下调CXCR2、FGF-2及PDGF-BB的表达可能为其途径之一。
作者：龙丽；段赵宁；蔡海贝；唐良萏 刊期： 2016年第02期
目的：探讨人脐带间充质干细胞（ hUC-MSCs）对骨肉瘤Saos-2细胞增殖和迁移的作用及分子机制。方法：组织块贴壁法分离培养hUC-MSCs，流式细胞术鉴定细胞表面标记物；CCK-8法和细胞计数法检测hUC-MSCs条件培养基（CM）、重组人白细胞介素6（rhIL-6）及IL-6中和抗体对Saos-2细胞增殖的作用；ELISA检测hUC-MSCs分泌IL-6的量；RT-PCR检测增殖相关基因增殖细胞核抗原（ PCNA）、cyclin D1和survivin的转录水平；Tran-swell实验检测hUC-MSCs和Saos-2细胞迁移能力的变化。结果： hUC-MSCs可向Saos-2细胞迁移；hUC-MSCs-CM含有高浓度的IL-6，可达（1835.5±134.1）ng／L；hUC-MSCs-CM和rhIL-6均能促进Saos-2细胞增殖和迁移，IL-6中和抗体能明显削弱hUC-MSCs-CM的促Saos-2细胞增殖和迁移作用；RT-PCR显示hUC-MSCs-CM和rhIL-6均能上调Saos-2细胞增殖相关基因PCNA、cyclin D1和survivin的表达，而IL-6中和抗体则削弱了这一作用。结论：脐带间充质干细胞能向骨肉瘤Saos-2细胞迁移，并通过分泌IL-6促进其增殖和迁移。
作者：胡文龙；吴平平；耿书国；汪建样；殷明 刊期： 2016年第02期
骨质疏松症是以骨质减少，骨微观结构退化为特征，致使骨的脆性增加以及易于发生骨折的一种全身性骨骼疾病。随着老龄化人群的不断增长，骨质疏松的防治已经成为一个全球的健康问题。骨质疏松与遗传、性别、年龄、体重、种族、饮食等均有相关性。和种族、遗传因素不同，一些危险因素是可以干预的，包括饮食营养、性激素、药物应用、生活习惯等。因此，从饮食营养角度探讨骨质疏松的防治有着重要意义。
作者：朱晓峰；张荣华 刊期： 2016年第02期
多年来人们认为细胞死亡方式主要包括坏死和凋亡。坏死是不受特定调控的被动死亡方式，表现为细胞器肿胀，细胞膜破裂，内容物渗出，有炎症反应［1］，而凋亡则是由细胞内胱天蛋白酶（ caspase）调控的一种主动死亡方式，因caspase激活导致细胞内底物裂解，破坏胞膜囊泡形成凋亡小体，死亡过程中无内容物渗出，不引起炎症反应［2］。
作者：佘浪；彭军 刊期： 2016年第02期
