目的探讨重组大鼠肝再生增强因子(rrALR)对体外培养的肾小管上皮细胞增殖及凋亡的影响.方法将体外培养的人肾小管上皮细胞株(HK2)分组,分别加入不同浓度的庆大霉素(GM)或(和)rrALR,3H-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入法检测HK2细胞的增殖;吖啶橙/溴乙啶(AO/EB)染色和钙磷脂结合蛋白/碘化丙啶(annexin V/PI)双标记流式细胞术检测上述各组HK2细胞的凋亡.结果 (1)rrALR对常规培养条件下的HK2细胞有直接的促增殖作用,并具有量效关系(在25 ng/ml~50 μg/ml的浓度范围内逐渐增强,P<0.01)和时效关系(培养12 h即有该作用,48 h达到高峰,以后逐渐下降,P<0.05);(2)rrALR能够促进GM损伤后的HK2细胞增殖,有明显剂量依赖性(P<0.05);(3)rrALR呈剂量依赖性抑制GM诱导的HK2细胞凋亡(P<0.01).结论 rrALR能够促进体外常规培养和GM损伤后的肾小管上皮细胞增殖,抑制GM诱导的小管上皮细胞凋亡,提示ALR可能对小管上皮细胞的中毒性损伤有改善作用.
作者:廖晓辉;张玲;刘杞 刊期: 2005年第12期
目的探讨终末期糖基化终产物(AGEs)介导肾小管上皮细胞转分化和胶原(Col)Ⅰ合成的分子机制.方法体外培养正常大鼠近端肾小管上皮细胞系(NRK52E),应用自制的AGE-牛血清白蛋白(BSA)刺激NRK52E细胞.免疫细胞化学方法检测不同时间磷酸化(p)Smad2/3核转位情况.ELISA方法检测细胞培养上清TGF-β1的水平.RT-PCR方法检测α-平滑肌肌动蛋白(SMA)、E-钙黏着糖蛋白(cadherin)和Col ⅠmRNA表达.Western印迹检测α-SMA、E-cadherin和Col Ⅰ蛋白的表达.同时观察TGF-β1中和抗体对AGE-BSA上述效应的阻断作用.结果基础状态下,NRK52E细胞存在低水平p-Smad2/3核表达(16%).与BSA对照组比较,AGE-BSA以时间依赖方式上调NRK52E细胞p-Smad2/3核转位,其高峰出现在30 min(68%比30.5%,P<0.01)和24 h(76%比31.3%,P<0.01).AGE-BSA显著上调α-SMA和Col Ⅰ mRNA和蛋白表达;下调E-cadherin mRNA和蛋白的表达;并能促进NRK52E细胞合成和分泌TGF-β1.TGF-β1中和抗体能明显抑制AGE-BSA介导的24 h p-Smad2/3核转位(25.2%,P<0.01),但不能阻抑30 min活化高峰;能明显抑制AGE-BSA介导的α-SMA和Col ⅠmRNA和蛋白表达,以及显著地上调E-cadherin mRNA和蛋白的表达.结论 AGEs通过TGF-β依赖和非依赖途径诱导肾小管上皮细胞Smads信号通路活化,促进其向肌成纤维母细胞转分化和Col Ⅰ的合成.
作者:孙辽;余学清;祝胜郎;陈文芳;李哓艳;贾占军;王欣;窦献蕊;董秀清;孙惠力 刊期: 2005年第12期
目的总结急性肾衰竭(ARF)的病因、临床特点以及影响预后的因素.方法回顾性分析本科1997年1月至2004年12月收治的100例ARF患者的临床和病理资料.结果100例ARF患者中,男性63例,女性37例,平均年龄(48.14±17.80)岁.肾前性ARF 20例,感染特别是急性胃肠炎占很大比重.肾性ARF 70例,其中急性间质性肾炎(AIN)9例(12.9%),急性肾小管坏死(ATN)33例(47.1%),小球及微血管病变28例(40.0%);药物导致的肾损害33例(47.1%),包括AIN 7例及ATN 26例;35例行肾活检.肾后性ARF 10例,病因为妇科、泌尿道、胃肠道肿瘤和结石.病因分布在3个年龄组间无显著差异.老年组的Scr值、Hb和红细胞比容(Hct)均低于中年组,而ATN-ISI评分值、存在高血压和肾脏病史的比例高于中年组和青年组.少尿、血尿、蛋白尿、GFR等参数在3组间无显著差异.本研究中死亡5例(病死率5%),57例治愈,29例好转,9例无效.单因素分析显示,年龄、蛋白尿、血清白蛋白、Hb、Hct、器官衰竭的数目、ATN-ISI评分是影响预后的因素.多因素Logistic回归分析显示,年龄和器官衰竭的数目是影响病死率的因素.结论急性胃肠炎和肾毒性药物导致的ARF需要引起关注.早期诊断有助于ARF的治愈,提高存活率.在已经进展到ARF阶段后,要注意预防并发症特别是多脏器功能不全综合征(MODS)的发生.
作者:张彤;梅长林 刊期: 2005年第12期
目的探讨基质金属蛋白酶9(MMP-9)、基质金属蛋白酶3(MMP-3)和金属蛋白酶组织抑制物1(TIMP-1)在原发性膜性肾病(IMN)患者肾小球内的表达变化及其与蛋白尿、Scr的关系.方法用免疫组织化学技术分别检测44例IMN患者(IMN组)与6例正常对照者(对照组)肾小球内MMP-9、MMP-3和TIMP-1的表达.结果 MMP-9及MMP-3在对照组正常肾组织的肾小管上皮细胞、肾间质和肾小球足细胞有少量表达;在IMN组肾小球足细胞、系膜细胞、肾小球基底膜及肾小管上皮细胞有表达.IMN组肾小球内MMP-9及MMP-3的表达均较对照组显著增强(P<0.05).TIMP-1在对照组正常肾组织的肾小管上皮细胞有少量表达,肾小球内无表达;在IMN组肾小球足细胞、肾小管上皮细胞有表达.IMN组肾小球内TIMP-1的表达较对照组显著增强(P<0.01).IMN组24 h尿蛋白定量显著高于对照组(P<0.01).Ⅱ期MN组肾小球MMP-9/TIMP-1及MMP-3/TIMP-1比值较Ⅰ期MN组明显下降(P<0.01).IMN组肾小球内MMP-9的表达与Scr呈负相关(r=-0.02,P<0.05);TIMP-1的表达与Scr呈正相关(r=0.34,P<0.05).结论 MMP-9与TIMP-1从正反两方面影响IMN患者肾功能的改变.MMP-9、MMP-3的异常表达与IMN患者蛋白尿之间可能相关;IMN患者肾小球MMP/TIMP比值失衡可能与IMN患者肾小球基底膜增厚相关.
作者:刘娜;王彦;杨林;曾文;王建荣 刊期: 2005年第12期
据报道,糖尿病(DM)状态化学趋化信号的上调和单核细胞(MO)向肾脏聚集及分化为巨噬细胞(MФ)与糖尿病肾病(DN)发生发展有关[1,2].正常T细胞活化后表达和分泌的调节蛋白(RANTES)是化学趋化亚族趋化因子,主要作用于MO/MФ及某些T淋巴细胞亚群.RANTES基因缺陷大鼠可减少T细胞和MO向炎症部位的聚集[3].RANTES基因启动子-403位点的G碱基突变为A碱基,影响RANTES基因转录和表达水平,研究发现携带RANTESG-403A的基因型与多种疾病的病情进展有关[4-6].这些发现提示RANTES G-403A多态在炎症过程中起重要作用.我们选择湖南省汉族人为研究对象,探讨RANTES基因启动子G-403A多态性与DN的关系.
作者:程洁;刘瑞洪 刊期: 2005年第12期
据统计,我国慢性乙型肝炎病毒携带者约占人群10%,并发相关性肾炎比例约为8.8%[1,2].临床上慢性肾小球肾炎合并慢性乙型肝炎的患者也不少见.无论是乙肝相关性肾炎还是慢性肾炎合并慢性乙型肝炎,治疗均较棘手,目前尚无规范化治疗方案.为了探索有效治疗方法,我们观察了霉酚酸酯(MMF)、中小剂量泼尼松和抗乙肝病毒药物拉米夫定联合治疗13例原发性肾小球肾炎合并慢性乙型肝炎的患者,现将疗效和不良反应总结如下.
作者:周奕菁;梅长林;张玉强;毛志国;张黎明;徐成钢;叶朝阳;赵学智 刊期: 2005年第12期
近年来组织型转谷氨酰胺酶(tTG)在组织纤维化的发生和发展中的作用受到了关注.本实验通过观察TGF-β1对体外培养的人肾间质成纤维细胞tTG表达的影响,探讨TGF-β1与tTG的相互关系及其在肾间质纤维化中可能的作用.
作者:刘俊兰;程丽静 刊期: 2005年第12期
我们在临床上利用炭肾(廊坊爱尔)血液灌流对重型破伤风患者行血液净化,发现效果良好,提示炭肾可能清除了这些游离的痉挛毒素.但炭肾对破伤风的治疗作用是否确与痉挛毒素的清除有关,尚需确切的实验证据;且血液中痉挛毒素的检测也无现成检查方法可依.因此,我们首先建立起血浆中破伤风痉挛毒素的检测方法,并对破伤风动物模型行炭肾血液净化,探讨炭肾对痉挛毒素的清除效能,为临床治疗重型破伤风提供一条新途径及其科学依据.
作者:马昌义;彭克军;杜一平;王树人 刊期: 2005年第12期
热休克蛋白70(HSP70)、血红素氧合酶1(HO-1)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)是近年来在缺血及再灌注(I/R)中引起广泛关注的一些酶类.我们探讨上述因子及血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对缺血及I/R时肾脏的作用.
作者:孙玲娣;赵浦;张鸿雁;于滨 刊期: 2005年第12期
近年来,血栓调节蛋白(TM)、内皮素(ET)和血管内皮生长因子(VEGF)在糖尿病肾病(DN)发生发展中的作用已引起广泛关注.目前国内外采用ELISA联合检测血浆TM、ET和VEGF对DN早期诊断研究甚少.我们应用联合检测血血浆TM、ET和VEGF水平可从不同病理改变和病理过程反映DN的肾小球、肾上管及间质内皮损伤程度来早期诊断DN.
作者:高锦凤;宋镇;张吉生;姚红霞;张芸;程冬玲;陈玉琴;刘玉兰;马兆萍;张依军 刊期: 2005年第12期
探讨血液透析(HD)中各类并发症与患者的年龄、透析的次数和透析时间的关系,以便更好的预防和治疗各种透析中的并发症.
作者:李明;郭玲 刊期: 2005年第12期
胰岛素抵抗是多种疾病如2型糖尿病、多囊卵巢综合征等发病的关键环节.研究显示,使用血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)或血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂(AT1RA)阻断血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)的效应可以改善胰岛素敏感性,降低新发糖尿病的发生率.我们就AngⅡ与胰岛素抵抗的相关基础及临床研究作一综述.
作者:刘小聪;刘必成 刊期: 2005年第12期
我国从上世纪60年代初就已经开展腹膜透析(腹透)治疗,并在全国各地逐渐推广和普及.截至2003年,全国共有347个腹透中心,接受腹透治疗的患者达5330人.随着我国城乡基本医疗保险制度的普及,腹透患者还会快速增加.尽管我国腹透水平在近几年取得了长足的进步,但与国际先进水平相比,还有不少的差距.首先,腹膜透析的研究队伍有待于进一步加强,尤其是高水平的腹膜透析专科医生和护理人员.第二,应根据中国的特点和现状,进行多中心、大样本、前瞻性的研究工作,制订符合中国人特点的个体透析方案.第三,加强对腹膜透析患者的管理、教育和随访,提高患者的长期存活率、生活质量和劳动能力.第四,提高透析中心的管理水平,从而获得大的社会效益和经济效益.
作者:余学清 刊期: 2005年第12期
目的研究腹透液中葡萄糖对人腹膜间皮细胞(HPMCs)分泌蛋白质影响,并采用蛋白质组学方法分析其对腹膜纤维化和腹膜功能的影响.方法采用胰蛋白酶消化法从人腹膜组织中分离HPMCs,第3代用于实验.实验分组:对照组(F12培养基)和高糖组(F12培养基+4%葡萄糖),分别观察24 h和48 h.经二维凝胶电泳(2-DE)分离人腹膜间皮细胞总蛋白,每组重复3次,PDQuest图象分析软件比较对照组和高糖组平均凝胶,求差异蛋白质.采用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定部分差异蛋白质.结果获得12块经2-DE分离的分离胶,每组3块.通过PDQuest图象分析软件发现24 h高糖组与对照组比较有27种蛋白质表达有差异(P<0.05);48 h高糖组与对照组比较有50种蛋白质的表达有差异(P<0.05),表达上调有22个蛋白质斑点,表达下调有55个蛋白质斑点;对其中23个差异蛋白质斑点进行了肽质指纹图分析,鉴定出23种蛋白质,其中有2个点为同一蛋白质.这些蛋白质涉及到高糖对HPMCs的细胞骨架、糖代谢、黏附、细胞因子、抗氧化剂、表面活性剂等物质的调节.结论高糖导致腹膜纤维化是多因素、多途径,要防止腹膜透析腹膜纤维化保护腹膜透析效能,好避免过多使用高糖透析液.
作者:刘映红;刘伏友;张浩;彭佑铭;成枚初;刘虹;李茂玉;李翠 刊期: 2005年第12期
目的探讨血脂联素(ADPN)与尿毒症腹膜透析(腹透)患者炎症及动脉粥样硬化的关系.方法采用酶联免疫复合物法测定正常对照组与59例规律性腹透患者血清ADPN水平,并对这些腹透患者进行为期(10.0±1.7)月的随访.分析血清ADPN水平与血脂、炎症指标、颈动脉内膜厚度、颈动脉斑块、既往心血管病(CVD)史和心血管预后的关系.结果与正常对照组相比,腹透组患者的血清ADPN水平显著升高[(13.09±7.54)μg/ml比(6.65±4.33)μg/ml,P=0.001].腹透患者血清ADPN与年龄、体重指数(BMI)、甘油三酯、C-反应蛋白(CRP)水平呈负相关;与高密度脂蛋白(HDL)呈正相关.血清ADPN水平在有颈动脉斑块及动脉粥样硬化性心血管疾病病史的腹透患者中较低.在随访期内有CVD事件发生组血清ADPN水平与无CVD事件发生组相比显著降低.结论血清ADPN水平与脂代谢异常、炎症和动脉粥样硬化性疾病有关,血清ADPN较高的患者发生CVD事件的危险性较低.在腹透患者中,ADPN可能具有心血管的保护作用.
作者:俞赞喆;倪兆慧;顾乐怡;朱彩霞;李萍;林爱武;方炜;庞慧华;曹励欧;钱家麒 刊期: 2005年第12期
目的研究长期腹透患者临床转归,分析其临床特点.方法对本院1994年1月至2003年8月腹透龄超过3年以上的58例腹透患者进行分析.根据其临床转归分为继续腹透组、转向移植组、转向血透组及死亡组.比较各组间近期营养指标(半年以内血清白蛋白水平)、近期透析充分性指标(Kt/V、Ccr)、水清除指标及残肾功能等临床特点.对死亡组同时做回顾性前后自身对照研究(死亡前半年以内与死亡前1年资料比较).对继续腹透组回顾性分析比较1年前资料,并前瞻性追踪随访1年.结果死亡组总Kt/V显著低于其余3组(P<0.05);总Ccr显著低于继续腹透组(P<0.01).继续腹透组、移植组及血透组3组间总Kt/V、总Ccr及血清白蛋白水平差异无统计学意义.血透组水清除指标显著低于继续腹透组及移植组;继续腹透组水清除指标稍高于死亡组但无显著性差异.死亡组近期总Kt/V显著低于死亡前1年总Kt/V(P<0.05);近期总Ccr显著低于死亡前1年总Ccr(P<0.01).继续腹透组近期总Kt/V及总Ccr与1年前及1年后指标比较差异均无统计学意义,但残肾Kt/V或残肾Ccr随时间推移而显著下降(P<0.05).继续腹透组残肾Kt/V或残肾Ccr显著高于死亡组及血透组(P<0.05).死亡组血清白蛋白水平较其余3组降低但差异无统计学意义.死亡组13例中有7例死于心脑血管疾病.结论腹透3年以上患者大部分仍可继续腹透.透析不充分是长期腹透患者死亡的重要原因.死亡的病因主要为心脑血管疾病.残肾功能可影响长期腹透患者的转归.
作者:林星辉;钱家麒;林爱武;姚强 刊期: 2005年第12期
目的观察过氧化物酶体增殖物活化受体γ(PPAR-γ)在大鼠腹膜间皮细胞(RPMCs)中的表达以及脂多糖(LPS)的调节作用,并探讨PPAR-γ天然配体15d-PGJ2及人工合成配体ciglitazone对RPMCs表达CD40和ICAM-1的影响.方法分离及培养RPMCs,常规传代及鉴定,取第2代细胞用于实验研究.LPS不同浓度(0.1、1.0、10、50及100 μg/ml)、LPS(1μg/ml)处理后不同时间点及15d-PGJ2(3μmoμ/L)、ciglitazone(10 μmol/L)作用细胞36 h后收集细胞.RT-PCR检测PPAR-γ、CD40以及ICAM-1 mRNA表达.免疫细胞化学检测PPAR-γ在RPMCs中的分布.Western印迹检测PPAR-γ及ICAM-1蛋白表达.结果 (1)常规培养的RPMCs表达一定量PPAR-γ,表达部位主要分布于RPMCs细胞核内,在细胞浆微弱表达.(2)随着LPS浓度逐渐增大,PPAR-γ蛋白表达水平呈逐渐增高的趋势,LPS浓度为10 μg/ml时其表达为高峰.LPS(1μg/ml)作用12 h时PPAR-γ蛋白表达强,PPAR-γ1表达高于PPAR-γ2;之后显著降低,持续至72 h.(3)LPS刺激后RPMCs CD40mRNA表达显著增强;15d-PGJ2、ciglitazone显著降低CD40 mRNA表达(P均<0.01).(4)LPS刺激后RPMCs ICAM-1蛋白表达显著增加;15d-PGJ2增加LPS介导的ICAM-1 mRNA表达(P<0.01),但显著抑制ICAM-1蛋白表达(P<0.05).ciglitazone对LPS介导的ICAM-1 mRNA和蛋白表达均有显著抑制作用(P均<0.05).结论RPMCs结构性表达PPAR-γ.LPS调节PPAR-γ表达呈现先增强后抑制趋势.PPAR-γ配体可显著抑制LPS介导的CD40 mRNA和ICAM-1蛋白的表达.提示RPMCs功能性表达PPAR-γ,可能通过负性调节炎症介质分泌而参与腹腔局部防御.
作者:张云芳;阳晓;张亚杰;孙玉玲;孔庆瑜;董秀清;叶晓箐;余学清 刊期: 2005年第12期
目的观察改良腹膜平衡试验(改良PET)在腹膜透析(腹透)患者中的应用,初步建立改良PET转运参数的参考值,探讨其评估腹膜溶质转运特性的准确性及临床意义.方法97例腹透患者用高渗腹透液(4.25%葡萄糖)进行改良PET,分别测定4 h透析液肌酐与血肌酐比值(4h D/Pcr)、计算物质转运面积系数(MTAC)、1 h透析液钠与血钠比值(1h D/PNa+)及记录净超率量(nUF).其中有14例患者在1个月内曾行标准腹膜平衡试验(标准PET),其结果与改良PET进行自身比较.所有患者在研究时及研究前1个月内均无腹膜炎.结果 97例腹透患者中有90例nUF大于400ml,这些患者的转运参数经正态分布校正后建立了改良PET的参考值.改良PET的4 h D/Pcr为0.70±0.15,标准PET 4 h D/Pcr为0.68±0.13,两者非常接近,差异无统计学意义.两种PET对患者腹膜转运特性分型结果相似.7例nUF小于400 ml的患者中有5例有效腹膜表面积增大;2例存在水通道介导的水转运障碍,其中1例同时存在有效腹膜表面积增大,还有1例患者改良PET转运参数在正常范围内.结论与标准PET相比,用高渗腹透液进行改良PET能够准确地评估腹膜小分子溶质转运特性,此外还能提供更多更敏感的液体转运信息,为临床诊断超滤衰竭,以及进一步鉴别其原因提供了有力的手段.
作者:方炜;钱家麒;林爱武;顾爱萍;张凤棣 刊期: 2005年第12期
目的观察规律性腹透患者使用低钙腹透液的有效性和安全性.方法在规律性随访的患者中选择高血钙和(或)高血磷,iPTH<150 pg/ml的患者25例,改用Baxter PD4透析液(钙1.25 mmol/L,其余成分不变),同时增加碳酸钙用量.使用低钙透析液期间每1~2个月检测血总钙、血磷、iPTH和血白蛋白,同时观察患者使用低钙透析液有何不适.结果在使用标准钙透析液的1年中,血钙浓度逐渐升高,血iPTH逐渐下降,并差异有统计学意义.换用低钙透析液治疗后,第1个月的血钙值明显下降(P<0.05),且维持在正常范围.腹透治疗开始时每日碳酸钙(2.83±0.53)g,低钙透析液治疗后每日碳酸钙为(3.57±0.74)g(P<0.05).治疗后2个月和3个月,血磷浓度较治疗前略有下降,差异有统计学意义.iPTH值同样在第1个月时显著升高(P<0.05),以后未观察到再进行性升高,并维持在200 pg/ml左右.血清白蛋白在治疗前后差异无统计学意义.在整个治疗过程中,1例患者治疗2周后出现低钙,iPTH升高明显而停用低钙透析液.其余患者能很好地耐受低钙透析,没有低血压、抽搐等情况发生.结论在高钙、高磷、低转运骨病的腹膜透析患者中使用钙浓度为1.25 mmol/L的透析液透析同时注意钙的补充,有助于钙磷代谢和骨病的改善.
作者:林爱武;钱家麒;庞慧华;姚强;俞赞喆;顾爱萍;张凤棣 刊期: 2005年第12期