目的：探讨转染野生型 p53（ wt-p53）和突变型 p53（ mt-p53）基因对人肺腺癌细胞株 GLC-82裸鼠移植瘤生长的影响。方法：采用脂质体介导法，分别将 wt-p53和 mt-p53基因导入人肺腺癌细胞株 GLC-82，在裸鼠体内、体外实验中检测转导细胞的生长状况和裸鼠致瘤性。结果：转染 mt-p53 基因的细胞株 G418筛选的细胞集落数、 3H-TDR掺入实验、软琼脂平皿细胞集落数，以及裸鼠瘤组织重量和体积均高于对照组（ P<0.01），而转染 wt p53基因的细胞株均显著低于对照组（ P< 0.01），表明导入 wt p53基因的细胞株瘤细胞生长速度明显低于对照组细胞株和导入 mt p53基因的细胞株，即导入 mt p53基因的细胞株瘤细胞生长速度快，而导入 wt p53基因的细胞株瘤细胞生长速度慢。结论： wt p53基因能有效抑制人肺腺癌细胞生长； mt p53基因则可以明显地促进瘤细胞生长。
作者：李萍；王北宁；丁振若 刊期： 2001年第05期
目的： EB病毒 (Epstein-Barr virus,EBV)存在的变异影响到其生物学功能（如 LMP1基因）。 BamHI A区右向框 0（ BamHI A rightward fram0, BARF0）是在鼻咽癌 (Nasopharyngeal Carcinoma,NPC)病人中检出率很高的一个 EB病毒基因，对其变异性的研究尚未见报道，本研究是为了明确广东鼻咽癌组织中 EBV-BARF0基因的序列及其变异。方法：应用 PCR技术从 20例鼻咽癌组织中，扩增 EBV基因 BARF0，并对它们的序列进行测定。结果：与标准株 B95-8相比，鼻咽癌组织中 EBV-BARF0均有 4个位点发生突变： 160473（ G→ T）、 160545（ C→ T）、 160701（ C→ A）、 160707（ G→ C），并导致相应的氨基酸的改变： 2（ Ala→ Ser）、 26（ Leu→ Phe）、 78（ Arg→ Ser）、 80（ Ala→ Pro）。结论：由于 EBV的 BARF0基因在鼻咽癌细胞株及活检组织中 100％表达，在淋巴瘤组织及淋巴瘤细胞株中表达较低或不表达，本研究首次报道鼻咽癌组织中 EBV-BARF0的序列分析，与 B95-8相比存在变异，并导致了蛋白质的一级结构的改变，推测该基因很可能在鼻咽癌变过程中起着重要的作用。
作者：宋立兵；曾益新；马英红；刘庆伦；李满枝；李端；汪慧民 刊期： 2001年第05期
目的：构建白细胞介素 1受体拮抗物 (interleukin 1-receptor antagonist, IL-1RA)基因的真核表达载体，并转染人食管癌细胞株，以探讨 IL-1RA与食管癌发生的关系。方法：利用 PCR方法从正常食管组织 cDNA中扩增 IL-1RA，将 IL-1RA重组到真核表达载体 pcDNA3.1中，构建 IL-1RA的真核表达载体 pcDNA3.1-IL-1RA。然后将重组子导入人食管癌细胞株 EC9706中，用 RT-PCR及 Southern杂交的方法，筛选鉴定转染细胞，获得阳性克隆。并采用细胞计数法和流式细胞术（ FCM）分析 IL-1RA对 EC9706细胞生长的影响。结果： RT-PCR及 Southern杂交结果显示转染后的细胞克隆均呈现 IL-1RA高表达，与对照组 EC9706细胞和带有 pcDNA3.1空载体的细胞相比，转染有 pcDNA3.1-IL-1RA的 EC9706细胞由于 IL-1RA的表达，细胞增殖速度有不同程度的下降； FCM结果显示 IL-1RA不能诱导 EC9706细胞的凋亡，对细胞生长的影响亦呈现不一致性。结论：提示 IL-1RA对食管癌的发生可能只起辅助作用。
作者：徐琪；刘芝华；丁芳；吴旻 刊期： 2001年第05期
目的：建立一种以新鲜细胞进行临床肿瘤 DNA含量分析的方法。方法：血液肿瘤取肝素抗凝外固血或骨髓样本，用淋巴细胞分层液分离纯化单个核细胞；实体瘤组织则用机械法制成单细胞悬液。将细胞分成两份，一份酒精固定过夜，流式细胞术常规方法测定 DNA含量，另一份直接用 PIPES(piperazine-N,N'-bis[2-ethanesulfonic acid] disodium salt)缓冲液配制的碘化丙锭（ propidium iodide,PI）染色，以流式细胞术进行 DNA含量测定，并与同期固定细胞的 DNA含量检测结果进行比较。结果：同类型的肿瘤细胞，其固定前后 G0/G1期细胞峰的变异系数（ coefficient of variation,CV）没有明显差异（ t检验， P >0.05）。重复实验结果显示，新鲜细胞 DNA含量分析结果稳定。结论：用 PIPES缓冲液配制的 PI染液染色新鲜细胞，可以对临床肿瘤的细胞增殖状况和 DNA倍性进行分析。
作者：陶德定；冷彦；覃吉超；余源；龚建平 刊期： 2001年第05期
目的：研究三氧化二砷 (As2O3)对人胃癌裸鼠腹腔种植腹水生成的影响及其作用机制。方法： 100只 BALB/C-nu/nu裸鼠腹腔内接种胃癌 MKN-45细胞株后，随机分为 5组，然后分别腹腔内注射生理盐水 (第 1组 )、表阿霉素 (第 2组 )及不同剂量的 As2O3(第 3、 4、 5组 )，观察癌细胞株对各组裸鼠的致瘤率、腹水生成量及生存时间；透射电镜观察 As2O3作用后腹腔内肿瘤细胞的形态学变化。结果：表阿霉素、低剂量 As2O3与生理盐水对照组相比可显著抑制裸鼠腹水的生成，延长生存期 (P<0.01)；中高剂量 As2O3除上述作用外还可通过诱导肿瘤细胞凋亡消除腹腔内肿瘤细胞，抑制腹水产生，并使裸鼠寿命明显延长。结论： As2O3可通过诱导胃癌细胞凋亡而抑制或消除人胃癌裸鼠腹腔种植及腹水的生成，不同程度地延长生存期。
作者：张兴荣；蔡洪培；邓志华；沈健伟 刊期： 2001年第05期
目的：研究 5-氮 -2′ -脱氧胞苷（ 5-aza-2′ -deoxycytidine， 5-aza-CdR）对人子宫内膜癌裸鼠移植瘤细胞凋亡及细胞周期的影响，探讨其抗肿瘤效应可能的机制。方法：用子宫内膜癌裸鼠移植瘤模型 (SL-I)观察 5-aza-CdR的抗肿瘤作用，逆转录 -聚合酶链反应（ reverse transcriptase polymerase chain reaction， RT-PCR）及流式细胞术检测裸鼠移植瘤用药后 bax基因 mRNA表达水平的改变及药物对细胞周期的影响。结果：用 5-aza-CdR后，除裸鼠移植瘤 p16基因甲基化水平逐渐降低以及 mRNA表达恢复外，诱导 bax mRNA的表达时间也长，但无明显 G1期、 G2/M期阻滞作用。结论： 5-aza-CdR抑瘤作用的机理可能主要是通过 p16基因去甲基化作用而使转录抑制去除，此外尚有诱导肿瘤细胞凋亡作用；在本实验条件下，该药对 SL-I细胞周期无明显影响。
作者：晁红霞；孙建衡；陆士新 刊期： 2001年第05期
目的：探讨 E-cadherin、α -catenin、β -catenin和γ -catenin与胃癌发生及胃癌生物学行为的关系。方法：用免疫组织化学方法检测 E-cadherin及α -catenin、β -catenin、γ -catenin在 43例胃癌， 22例胃癌前病变及 10例正常胃粘膜中的表达。结果：在胃癌前病变中 E-cadherin，α -catenin、β -catenin、γ -catenin的异常表达率分别为 22.7％、 22.7％、 18.2％、 27.3％，分别与胃癌 E-cadherin（ 53.5％），α -catenin（ 55.8％）、β -catenin（ 51.2％）的异常表达率相比差异有显著性（ P<0.05）。进展期胃癌异常表达率较早期胃癌高，除γ catenin外差异均有显著意义（ P< 0.05或 P< 0.01）。低分化胃癌 E cadherin的异常表达率较高，胃癌浸润到浆膜外及伴随淋巴结转移时 E cadherin、β catenin的异常表达率升高（ P< 0.05或 P< 0.01）。 76.7％的胃癌及 50.0％的胃癌前病变 E cadherin系统中至少有一项表达异常，二者差异有显著性（ P< 0.05），且至少有一项为表达异常病人的淋巴结转移率明显高于无蛋白异常表达者（ P< 0.01）。结论： E cadherin及部分相关蛋白的表达异常与胃癌的分化程度、临床分期、浸润深度及淋巴结转移密切相关， E cadherin系统在由胃不典型增生转化为胃癌的过程中起作用，联合检测 E cadherin及α catenin、β catenin、γ catenin可提高检测结果的参考价值。
作者：周绍弼；陈新皓；周福深；滕小军；陈德基 刊期： 2001年第05期
目的：探讨 HBV X基因在肝癌发生中的作用，并构建含 X基因真核表达质粒。方法：用 PCR法扩增含 EcoR Ⅰ与 Pst Ⅰ酶切位点的 X基因序列，对 PAS2-1载体及 X基因 PCR产物经双酶切，用连接酶将两者连接并转化到大肠杆菌 JM105，对重组质粒经序列测定，称 PAS2-1X。用乙酸锂转化法将重组质粒转化入酵母菌 AH109，经 Western blot法证实重组质粒在酵母细胞中的表达。结果：已构建的质粒 PAS2-1X经序列测定含有完整的 X基因片段，转入酵母后经 Western blot证实酵母细胞表达 X蛋白。结论： PAS2-1X表达载体是为了解 X基因与 X蛋白的致癌机制而构建，为通过酵母双杂交体系筛选体内与 X蛋白相互作用的 X相关蛋白奠定了基础。
作者：王小众；陈治新；黄月红；陈晓春；陶其敏 刊期： 2001年第05期
目的：研究 3-羟基 -3-甲基戊二烯辅酶 A(3-hydroxy-3-methylgutaryl coenzyme A,HMG-CoA) 还原酶抑制剂对胃癌细胞增殖的影响。方法：采用 MTT比色法和流式细胞仪检测胃癌细胞的增殖活性和细胞周期。结果：辛伐他丁可明显降低 MNK450胃癌细胞增殖活性、 S期细胞比和细胞增殖指数，在浓度大于 1 μ mol/L 时，与对照组比较具有显著性差异（ P<0.05）。 0.2～ 100 μ mol/L 5种浓度辛伐他丁作用 72 h后，胃癌细胞增殖抑制率分别为 8.0％、 18.0％、 30.7％、 42.6％和 51.5％，同时加入 10 mmol/L甲羟戊酸则可逆转辛伐他丁的抑制作用。 1～ 20 μ mol/L 3种浓度辛伐他丁可阻止胃癌细胞由 G1期进入 S期； 20 μ mol/L辛伐他丁作用 36 h后，胃癌细胞 S期细胞比从 32.1％下降至 15.0％，加入 10 mmol/L甲羟戊酸则可逆转 5 μ mol/L辛伐他丁对胃癌细胞周期的影响。而普伐他丁对胃癌细胞增殖活性无明显影响（ P>0.05）。结论：脂溶性 HMG-CoA还原酶抑制剂辛伐他丁可抑制胃癌细胞生长增殖，提示辛伐他丁具有抗肿瘤特性。
作者：丁小云；李定国；陆汉明；徐芹芳 刊期： 2001年第05期
目的：通过转基因方法观察自杀基因 CD对人胃癌细胞株 7901的体内外杀伤作用，并观察组织病理变化。方法：应用逆转录病毒方法转导自杀基因 CD，通过体外实验观察 CD基因对人胃癌 7901细胞的杀伤性和旁观者效应；体内实验中首先在 BALB/c nu/nu裸鼠建立胃癌模型，然后将病毒上清注入瘤体内，并结合应用前药，观察肿瘤体积变化 , 通过病理切片观察组织病理变化。结果： CD基因在体外即显出明显的杀伤作用（含旁观者效应）， 20％的转基因细胞可以杀伤 70％～ 80％的肿瘤细胞。在实验动物体内， CD基因结合前药 5-Fc可显著杀伤肿瘤，而单纯转导 CD基因和只应用 5-Fc并不能起到杀伤作用。结论：自杀基因 CD联合前药 5-Fc对胃癌产生显著杀伤作用，不仅转基因细胞被杀死，而且通过旁观者效应杀伤大量周围细胞。 CD/5-Fc在体内试验对胃癌有显著杀伤作用。
作者：郭善禹；顾琴龙；朱正纲；尹浩然；林言箴 刊期： 2001年第05期
目的：研究 p16基因表达与胃癌发生发展、侵袭、转移的关系及 p16基因外显子 2缺失、突变在胃癌发生中的地位。方法：运用链霉菌抗生物素蛋白 -过氧化酶 (S-P)免疫组织化学方法检测胃癌及癌前病变组织中 p16蛋白的表达；采用聚合酶链反应 (PCR) 、聚合酶链反应 -单链构象多态性 (PCR-SSCP)分析方法检测胃癌中 p16基因外显子 2的缺失、突变。结果： (1)p16蛋白表达阳性率：①正常胃粘膜 96.25％ (77／ 80)，不典型增生 92.00％ (45／ 50)，胃癌 47.54％ (58／ 122)，胃癌组中 p16蛋白表达低于正常胃粘膜及不典型增生（ P<0.05）；②粘液腺癌 (10.00％， 1／ 10)低于低分化腺癌 (51.22％， 21／ 41)、未分化癌 (57.69％， 15／ 26)和印戒细胞癌 (62.50％， 10／ 16) （ P< 0.05）；③ 30例原发癌和淋巴结转移癌配对标本中 p16蛋白表达阳性率：原发癌 46.67％（ 14/30），淋巴结转移癌 16.67％ (5／ 30)，淋巴结转移癌低于原发癌 (P< 0.05)； (2)p16基因缺失与突变分析： 25例胃癌中检测出缺失 5例 ,但未发现突变。结论：① p16蛋白表达缺失与胃癌的发生、组织学类型及淋巴结转移有关。② p16基因外显子 2缺失可能与胃癌发生有关 ;而 p16基因突变可能与胃癌发生无关。
作者：贺修胜；苏琦；陈主初；贺修桃；车世友 刊期： 2001年第05期
目的：探讨原发性胃恶性淋巴瘤 (primary gastric malignant lymphoma, PGML）的临床表现、内镜和病理特点。方法：统计 30例 PGML患者的临床表现及 X线检查、内镜检查、病理检查的特点并进行分析。结果： 30例 PGML中临床表现以腹痛、体重下降、发热、腹块、恶心、呕吐、上消化道出血为主。病变主要位于胃体（ 73.3％）。内镜下表现为隆起型 14例（ 46.7％），溃疡型 12例（ 40.0％），浸润型 4例（ 13.3％），内镜活检与术后病理符合率为 80.0％。肿瘤起源于 B淋巴细胞 27例（ 90.0％），其中 19例为胃粘膜淋巴组织相关淋巴瘤， T淋巴细胞 3例（ 10.0％）。本病手术切除术率高，对化疗、放疗均较敏感。结论： PGML以腹痛、体重下降、发热、上消化道出血为主要表现，以胃体发生率高。内镜及大体分型的隆起型及溃疡型为多见，病理特点以 B淋巴细胞为主。原发性胃恶性淋巴瘤由于其发病率低，临床表现特殊，易造成漏诊，内镜为诊断 PGML的有效手段。手术、化疗和放疗等综合治疗是提高生存率的有效途径。
作者：黄开红；王连源；陈为宪；林萍；李海刚 刊期： 2001年第05期
目的：探讨在喉癌 T3期病例中 3种保留喉功能的治疗方法的优劣。方法：将保留喉功能的治疗方法分为单纯根治性放疗、根治性放疗失败后挽救性手术切除、部分喉切除术 3种，分析采用此 3种方法治疗的 94例 T3期喉癌病例的总体生存率、原发灶和继发灶复发率、并发症发生率。结果：在声门上型喉癌中部分喉切除术组的生存率优于单纯根治性放疗组 (P=0.0248)；在声门型喉癌中部分喉切除术组的生存率与根治性放疗失败后挽救性手术切除组相当，都高于单纯根治性放疗组 (P=0.0075)；在根治性放疗失败后挽救性手术切除、部分喉切除术组中，并发症发生率分别为 60％、 16.7％，前组高于后组（ P<0.05）；放疗组（包括单纯根治性放疗组和根治性放疗失败后挽救性手术切除组）与部分喉切除术组的原发灶复发率分别为 45.8％、 19.4％，差异有显著性（ P< 0.05）。结论：在 T3期喉癌病例中，上述 3种保留喉功能的治疗方法以部分喉切除术效果佳。
作者：夏良平；曾宗渊；陈福进；郭朱明；许光普；张诠 刊期： 2001年第05期
目的：探讨肿瘤转移患者外周血细胞的生物学变化特征。方法：用流式细胞术对 396例肿瘤转移患者和 371例非转移患者外周血细胞的 DNA倍体、凋亡水平和增殖活性进行了对比分析。结果：在有肿瘤转移的 396例患者外周血细胞中，有 45例出现了 DNA异倍体，其检出率为 11.36％； DNA异倍体患者血细胞的 DNA指数（ DNA index, DI）值为 (1.25± 0.26)。另 371例非转移患者未发现 DNA异倍体细胞。肿瘤转移者的细胞凋亡率和 S期细胞比率均显著高于非转移者 (P<0.05)，多器官转移者的细胞凋亡率和 S期细胞比率也显著高于单器官转移者 (P< 0.05)。结论：肿瘤转移能引起患者外周血细胞中出现 DNA异倍体，并使血细胞凋亡水平和增殖活性上调。
作者：周振英；朱月清；吴晓柳；沈宗丽；张军妮；王亚平；WANG Ya-ping 刊期： 2001年第05期
目的：观察交替半身照射综合方案对急性白血病残留病的治疗效果。方法：对 9例急性白血病患者经标准化疗缓解后，进行强化疗预处理（环磷酰胺 120 mg/kg,）＋交替半身照射（上半身照射 7～ 7.5 Gy，下半身照射 8～ 9 Gy）＋过激免疫治疗（结核菌素纯蛋白衍生物， rhIL-2激活的自体骨髓细胞）的综合方案治疗；观察指标：动态观察治疗前后的血象、骨髓象、骨髓 GM-CFU改变；采用筑巢式 PCR检测残留病的方法和 12-ο -十四烷酰佛波醋酸酯 -13（ 12-ο -tetradecanoyl-phorbol-13-acetate,TPA）诱导分化试验观察治疗效果。结果： 9例患者血象、骨髓象、骨髓 GM-CFU于治疗完成后 2-3周均能自行恢复至正常水平，无严重毒副作用。筑巢式 PCR检测表明，本组残留病 4例转为阴性， 2例弱阳性， 3例阳性。 9例患者经该方案治疗后均未作巩固化疗，现长已持续缓解 27个月，短为 4个月，中位缓解期 1.5个月。结论：交替半身照射综合方案，对残留白血病有良好的治疗效果。该方案毒副作用轻，费用低，可能有推广应用前景。
作者：乌庆超；马怀青；于书增；褚建新；赵歧刚；葛芙蓉；肖太武 刊期： 2001年第05期
目的：评价新辅助化疗联合放疗在中晚期鼻咽癌治疗中的价值。方法：前瞻性临床试验采用化疗方案： Cisplatin 20 mg/m2， 1～ 5天， 5-FU 500 mg/m2， 1～ 5天， BLM 7 mg/m2，第 1、 5天，化疗 2～ 3个疗程。放射治疗鼻咽剂量： 66～ 74 Gy/33～ 37次，共 7～ 9周；颈部淋巴结剂量： 60～ 70 Gy/30～ 35次，共 7～ 8.5周；颈部预防量： 48～ 50 Gy。结果： 1992～ 1993年 457例鼻咽癌病人进入研究， 17例因各种原因退出队列， 440例进入分析（化疗＋放疗组 219例、单纯放疗组 221例）。 5年生存率及无瘤生存率实验组及对照组分别为 62％ vs 55％ (P=0.1335)及 58％ vs 48％ (P=0.0539)。 5年无局部复发生存率及无远处转移生存率两组分别为 82％ vs 74％ (P=0.0412)及 79％ vs 75％（ P=0.4177)。亚组分析显示新辅助化疗能明显提高 T3～ 4期的局控率；对 N2～ 3病人的远处转移率无影响。结论：新辅助化疗未能提高中晚期鼻咽癌病人的总生存率，亦未能降低远处转移率，有提高无瘤生存率的趋势。新辅助化疗的指征： T3～ 4期病人。
作者：马骏；麦海强；洪明晃；闵华庆；毛志达；崔念基 刊期： 2001年第05期
目的：探讨结肠代食管术的临床效果。方法： 51例中，食管良性狭窄 6例，食管癌 45例，均施行结肠代食管颈部吻合术。取横结肠段 48例，其中顺蠕动吻合 27例，逆蠕动吻合 21例；取右半结肠段 3例，顺蠕动吻合。以结肠中动脉作供血血管 24例，以左结肠动脉作供血血管 27例。结果：全组无手术死亡。术后并发症包括颈部吻合口瘘 2例，颈部伤口感染 3例，喉返神经损伤 1例，结肠吻合口狭窄 1例，肺部感染 3例。结论：结肠有丰富的血供及足够的长度，可移植至颈部与食管吻合，且效果满意。熟练的操作技术可减少并发症。
作者：蔡仲达；杨汝明；何维杰；HE Wei-jie 刊期： 2001年第05期
目的：探讨大肠癌患者血清癌胚抗原（ carcinoembryonic antigen,CEA）、可溶性 Fas(soluble Fas,sFas)、白细胞介素 -6(interleukin-6,IL-6)水平的临床意义。方法：采用双抗体夹心 ELISA方法检测 162例大肠癌患者术前、术后血清中 sFas、 IL-6表达水平，同时测定了相关免疫指标及血清 CEA水平。结果：大肠癌患者血清 sFas水平为（ 20.97± 8.19） ng/L，阳性率为 53.70％； IL-6水平为（ 36.87± 11.20） ng/L，阳性率 67.91％； CEA水平为（ 32.52± 10.81）μ g/L，阳性率 41.98％ ,三者均非常显著高于良性病变及对照组。大肠癌患者术前血清 CEA、 sFas、 IL-6水平均显著高于术后（ P<0.01),以 sFas、 IL 6水平升高更明显。血清 sFas水平与癌转移相关，而血清 IL 6与肿瘤大小及癌转移明显相关（ P< 0.01)。仅血清 sFas水平与淋巴细胞转化率、 LAK及 NK活性呈显著负相关。 CEA、 IL 6、 sFas三者之间均呈显著正相关。结论：大肠癌患者血清 sFas、 IL 6检测阳性率高于 CEA。 sFas、 IL 6反映了肿瘤的增殖和转移情况，这可能与 sFas抑制了免疫功能和肿瘤细胞的凋亡有关； IL 6有促进肠癌细胞的增殖作用。三者联合检测对大肠癌患者的临床诊断、判断预后及监测疗效有重要作用。
作者：谢家印；孙贵银；罗治彬；张连阳；冷恩仁 刊期： 2001年第05期
目的：探讨 p21蛋白和雌激素受体（ estrogen receptor,ER）在大肠癌中的表达及其与大肠癌临床生物学行为的关系。方法：采用免疫组织化学方法（ LSAB），对 206例大肠癌标本分别进行 p21蛋白和 ER表达的检测 ,并结合临床资料进行分析。结果：大肠癌 p21蛋白的表达与 ER的表达具有明显负相关（ r=-0.6613， P<0.01）。 p21蛋白及 ER的表达与患者年龄、性别、肿瘤部位、大体类型、组织类型、 Dukes'分期等无关（ r< 0.4， P>0.05）；与患者预后明显相关（ P<0.01），即 p21表达水平越高患者预后越差，而 ER的表达水平越高则患者预后越好。结论：大肠癌 p21蛋白的异常表达可能与雌激素代谢紊乱有关， p21蛋白和 ER表达的检测有助于大肠癌的临床诊断及预后的评估。
作者：秦自科；万德森；林汉良；候景辉；连俊彦 刊期： 2001年第05期
细胞增殖失控和细胞凋亡障碍是癌变的根本原因，而大多数肿瘤细胞都是通过干扰 Rb（ retinoblastoma,Rb）蛋白和 p53的功能，导致细胞周期调节紊乱和凋亡反应阻抑的。 INK4a/ARF（ inhibitor of CDK4/ alternative reading frame）基因可同时调控这两条控制细胞增殖和凋亡的通路，它编码两种蛋白： p16INK4a，一种细胞周期素依赖蛋白激酶抑制蛋白 (CKI)，可以上调 Rb蛋白的活性； p19ARF，可以阻抑 mdm2抑制 p53的活性（ mdm2：小鼠双微 -2， murine double minute-2）。这种同一基因—两个产物—两条途径的方式，在哺乳动物中相当罕见，为探索肿瘤的发生提供了一种新的思路。 1 p16INK4a的发现与结构 细胞周期是由细胞周期素（ cyclin）、细胞周期素依赖蛋白激酶 (CDK) 和细胞周期素依赖蛋白激酶抑制蛋白 (CKI)来进行调控的。 CKI分为两类： INK4（ inhibitor of CDK4）和 KIP家族，其中 INK4a和 INK4b位于染色体 9p21。 1992年， Cannon-Albright[1]在研究黑色素瘤的易感基因时，发现 9p21有一个抑癌基因所在位点； 1993年， Xiong Y[2]在用 DNA肿瘤病毒 SV40转化的二倍体成纤维细胞中 ,发现了一个与 CDK4紧密结合的 16 kDa的多肽 (p16)；同年， Serrano[3]用酵母双杂合蛋白相关性筛选法，把两个融合蛋白 CAL4ad和 GALR4db与 p16基因表达蛋白进行筛选，发现 p16的 cDNA编码的蛋白与 CAL4ad 相同，命名为 p16INK4a蛋白； 1994年， Kamb[4]利用染色体步移法（ chromosal walk）的物理图和序列标记位点图 (sequence tagged sites,STSs)，研究肺癌、乳腺癌、膀胱癌等多种细胞系，发现 9p21存在一个与 p16 cDNA序列相同的多肿瘤抑制基因，命名为 MTS1(multiple tumor suppressor 1)，以后由 HUGO正式命名为 CDKN2(cyclin dependent kinase inhibitor 2)。
作者：林谋斌；骆明德 刊期： 2001年第05期
印迹基因是指那些表达受亲本来源影响的基因。按照孟德尔遗传规律，控制豌豆种子圆滑的基因 R无论来自父本或母本均能在子代表达种子圆滑的性状。对于哺乳动物中大多数基因而言，的确如此。但近年来遗传学家们发现约 100～ 200个 [1]基因不遵循此规律，这些基因在配子形成过程中根据其来自于父亲或母亲被打上了“标记”，这种标记能在体细胞分化中保持，当遗传给不同性别的下一代时能被消除。被打上标记的那一等位基因不能表达，从而使该基因只能表达另一等位基因，这种由亲代来源决定的单等位基因表达的现象即是基因印迹，被标记的基因称为印迹基因。印迹的机理很复杂，目前比较公认的是， DNA富含 CpG区的由亲代来源决定的胞嘧啶甲基化作用是印迹的关键。现已证实的印迹基因至少有 25个 [1]，其总数虽少，作用却不可忽视，它们在胚胎发生、生长发育、罕见的遗传病及代谢性疾病中起着决定性的作用，解释了许多孟德尔遗传无法企及的现象。近在基因印迹研究中又一个令人振奋的发现是：基因印迹与肿瘤发生有着密切的关系 [2,3]，本文将就此方面的内容作一综述。 1 基因印迹与肿瘤易感性 众所周知，肿瘤易感性由原癌基因和抑癌基因决定。 Knudson提出的抑癌基因二次突变模型（ two-hit model）指出，抑癌基因需经过两次突变使两个有功能的等位基因失活才会发生肿瘤，如视网膜母细胞瘤，只有两条同源染色体上的 Rb等位基因都失活，即经过两次突变后，才发生肿瘤。许多孟德尔遗传基因的突变导致个体肿瘤发生，已是不争的事实。 近年来越来越多的证据表明，有一类非孟德尔遗传的印迹基因以原癌基因或抑癌基因的身份在许多肿瘤的发病中起着重要的作用。印迹的肿瘤基因为单等位基因表达，相当于功能上的单倍体，仅需一次突变就使该基因失活，因而更易发生肿瘤，增加了肿瘤易感性。
作者：胡春秀；李力 刊期： 2001年第05期
目的：研究 HR24L基因编码的蛋白质在细胞内的定位及其对细胞周期的影响。方法 :PCR方法扩增 HR24L开放阅读框序列，克隆入绿色荧光蛋白载体 pEGFP C2和逆转录病毒载体 pDOR neo，分别经脂质体介导转染入 HeLa细胞。荧光显微镜观察 HeLa GFPHR24Ls细胞， Southern印迹杂交分析外源性 HR24LcDNA的整合状况。去血清处理细胞，观察 HR24L基因对细胞周期的影响。 Western印迹分析 HR24L基因对 p53表达的影响。结果 :转染获得了 HeLa GFPHR24L、 HeLa HR24Ls和 HeLa HR24La细胞。荧光显微镜观察证实 HR24L编码的蛋白质位于核内。 Southern印迹分析证实 HeLa HR24Ls和 HeLa HR24La细胞中外源性 HR24LcDNA已整合入基因组。与对照和空载体细胞相比， HeLa HR24Ls细胞中 HR24L mRNA表达升高， HeLa HR24La细胞中 HR24L mRNA表达降低。经过 24 h去血清培养后， HeLa HR24Ls细胞中 G2/M期细胞明显较其他细胞增多（ P<0.05），其他 3种细胞则无明显差别。重新加入血清培养后 24 h这种差别消失。 Western印迹分析表明， HR24L基因对 p53的表达无明显影响。结论 :HR24L基因编码的蛋白质位于细胞核内且参与细胞周期的调节。
作者：于廷曦；朱应葆；童坦君 刊期： 2001年第05期
目的：确定新免疫球蛋白基因 SNC73在大肠癌中的组织学定位；观察它在大肠癌发生、发展不同阶段的表达状况；探讨其表达与大肠癌表型的相关性。方法：用地高辛标记的原位杂交技术检测 SNC73基因在 29例大肠癌病人的正常肠粘膜、癌旁粘膜、腺瘤 (5例 )以及癌组织中的表达状况。结果： SNC73基因的表达发生在大肠的正常腺上皮结构上，着色颗粒位于胞浆，胞核无或着色较淡；癌组织中没有或有少量表达，且一般较正常粘膜染色为淡； SNC73基因在肠粘膜的淋巴滤泡中可见较多的阳性染色，而在其他间质和肌层中未见明显阳性信号。正常粘膜标本中 SNC基因阳性率为 62.07％；癌旁粘膜中 31.03％；腺瘤中 20.00％；癌组织中 20.69％。 SNC73基因在同一大肠癌病人正常粘膜和癌组织中表达之间存在显著性差异（ P<0.01） ,在大肠癌组织中表达的阳性率明显低于正常肠粘膜。结论： SNC73基因在大肠癌中的表达率一定程度上低于相应的正常粘膜，其生物学功能可能不同于一般意义上的免疫球蛋白。
作者：叶锋；郑树；方士昌；彭佳萍；董琦；耿礼义；曹江 刊期： 2001年第05期
肿瘤的生长和转移需要血管形成，现已发现有多种生物因子参与其形成过程。而血管内皮生长因子（ vascular endothelial growth factor, VEGF）被认为是重要的血管生成因子之一，在肿瘤的生长与转移中起重要作用 [1]。我们曾在卵巢癌中发现有 VEGF的高表达 [2]，因此，我们自行设计和构建了针对 VEGF mRNA的发夹状核酶基因的真核表达载体，试图采用核酶（ ribozyme）技术抑制 VEGF的表达，以探讨卵巢癌基因治疗的新途径。 1 材料和方法 1． 1 菌种、质粒和试剂 大肠杆菌 DH5α、真核表达载体 pcDNA3由第四军医大学生化教研室提供。限制性内切酶及 T4 DNA连接酶等购自原平公司。 1． 2 抗人 VEGF核酶基因的合成 针对人 VEGF mRNA第三外显子，设计并合成抗人 VEGF发夹状核酶基因的两条互补单链。为便于克隆和鉴定，该基因的 5′端及 3′端分别设有 BamH I和 EcoR I酶切位点和两个保护碱基，共 66个碱基对。核酶基因两条链的序列为： V1， 5′ -CGG GAT CCC TGA TAA GAA TCC AAC CAG AGA AAC ACA CGT TGT GGT ATA TTA CCT GGT AGA ATC CCG-3′； V2， 5′ -CGG AAT TCT ACC AGG TAA TAT ACC ACA ACG TGT GTT TCT CTG GTT GGA TGT CTA TCA GGG ATC CCG-3′
作者：严瑞兰；辛晓燕；钱新华；惠宏襄；金明；王剑波 刊期： 2001年第05期
已有研究表明，尿激酶型纤溶酶原激活剂（ urokinase-type plasminogen activator， UPA）、 UPA受体（ UPAR）和 I型纤溶酶原激活物的抑制物（ PAI-I），这三种物质连同胶原酶构成胶原溶解系统，直接影响肿瘤细胞的浸润、转移和骨质吸收的能力。本研究拟定量检测 UPA在骨巨细胞瘤组织中的表达情况，并分析其与肿瘤分级及预后之间的关系。 1 材料与方法 1． 1 材料 所有标本为中山医科大学第一附属医院及孙逸仙纪念医院 1994至 1998年的临床骨科手术标本（术前均未经化疗）。经病理诊断为骨巨细胞瘤，参考 Jaffe的分类标准分为 3级，Ⅰ级：单核基质细胞数量较少而排列疏松，形状大小较一致，异型性不明显，偶见核分裂，多核巨细胞体积大、核多，散布于单核基质细胞之间，数量较多；Ⅱ级：单核基质细胞数量增多而致密，出现异型性，核分裂增多，多核巨细胞体积缩小，核也减少；Ⅲ级：单核基质细胞分化不良，异型性明显，核分裂多见，梭形细胞常呈纤维肉瘤样，多核巨细胞体积缩小，核也减少。其中Ⅰ级 2例，Ⅱ级 9例，Ⅲ级 2例，并有 1例非骨化性纤维瘤作对照。
作者：王林；董书；文剑明 刊期： 2001年第05期
在食管癌高发区，贲门癌的发生率较高。据流行病学调查，我国食管癌高发区，贲门癌的发病率约为 50/10万，食管癌∶贲门癌约为 6 ∶ 4[1]。研究贲门癌前病变，对探索贲门癌在体内发生发展的规律具有重要意义。本研究调查分析了我国食管癌贲门癌高发区河北省涉县 [2]当地居民的贲门区粘膜的癌前病变情况，现将结果报告如下。 1 对象与方法 对象为我国食管癌高发区河北省涉县偏店、固新两乡当地居民，经舌诊法初筛，选出青紫舌者 201例，年龄 35～ 65岁，中位年龄 55岁。男 122人，女 79人。对 201人进行上消化道内镜检查，在食管胃交界线下方 2～ 3 cm长的管状贲门区粘膜取活检，活检组织迅速经中性福尔马林液固定，常规脱水，石蜡包埋，切片， HE染色，进行病理学诊断。病理诊断参照全国慢性胃炎研讨会共识意见的慢性胃炎病理诊断标准和分类标准 [3]。
作者：赖少清；王国清 刊期： 2001年第05期
江苏省扬中市为长江下游淤土冲积而成的岛市 ,总面积 332平方公里。根据 1973～ 1982年恶性肿瘤调查资料 [1]，扬中市被列为中国县级单位食管癌高发地区 [2]。 80年代以来 ,随着经济的发展 ,扬中市已逐渐步入江苏省经济相对发达地区行列 ,居民的生活水平、文化素质及生态环境均发生较大的变化 ,同时扬中市人口结构也发生相应的改变。为阐明 90年代扬中市食管肿瘤的流行情况及变化趋势 ,我们对扬中市 1991～ 1998年食管肿瘤发病情况进行了深入调查 ,以便为开展综合防治提供依据 ,现将调查结果分析报告如下。 1 材料与方法 1.1 资料收集 食管肿瘤发病资料由市三级肿瘤防治网络提供 ,即村级由乡村医生按月上报所辖村新发病例；乡镇卫生院定期汇总所辖村上报发病卡 ,经核查后报市肿瘤防治研究所；市肿瘤防治研究所专门人员每季汇总全市各级医院提供的肿瘤诊治报告卡及村、镇上报的肿瘤发病卡 ,按村逐一核对、剔除重复、补充遗缺、修正发病时间 ,疑问处返镇、村查实 ,因此外出就诊者极少遗漏。以确诊时间作为发病时间。 1.2 人口资料 由市统计局提供 ,规定每年 7月 1日作为平均人口基准日 ,标化人口以 1982年中国人口普查资料为准。 1.3 资料整理 全部资料 (病例按 ICD-9分类 )用 EPI6、 EXCEL等软件建库两次录入 ,比较无误后进行分析 ,按《中国恶性肿瘤登记报告试行规范》进行统计学处理。
作者：郭国平；华召来；周琴；王理伟；李茂生 刊期： 2001年第05期
本研究用携带单纯疱疹病毒胸苷激酶 (HSV-tk)基因的重组逆转录病毒感染结肠细胞系 SW480，观察 HSV-tk/GCV(丙氧鸟苷 )系统对结肠癌细胞的体内外抑制作用。 1 材料与方法 1.1 材料 分子生物学试剂为市售进口产品， pIC19R/MC1-TK质粒由美国匹兹堡大学 Huang L.教授惠赠，内含 1.7kb的 HSV-tk cDNA片段。 1.2 方法 1.2.1 质粒构建：将 HSV-tk cDNA克隆入 pBluescript质粒并测序。将 tk基因定向克隆入逆转录病毒载体 pDOR-neo中，构建 pDORtk质粒并酶切鉴定 [1]。 1.2.2 病毒包装及转染：用 Lipofect AMINE将 pDORtk转入 PA317包装细胞，经 G418筛选获得稳定表达株 PA317/tk。取其细胞上清液感染 SW480细胞，用 G418(800 μ g/ml)筛选获得抗性细胞克隆 SW480/tk。 1.2.3 斑点杂交 (dot blot)实验：分别提取 SW480/tk和野生型 SW480细胞基因组 DNA和细胞总 RNA，用 HSV-tk cDNA双链探针，分别行细胞基因组 DNA及细胞总 RNA斑点杂交。
作者：赵亚刚；张学庸；惠宏襄；王成济 刊期： 2001年第05期
随着分子生物学技术的不断发展，基因克隆的方法日新月异。文库筛选获得新序列虽直接可靠，但是工作量大，周期长，耗时耗材耗力，而且选择受限于已有文库，逐渐不作为首选方法采用。 PCR技术自 1985年发明以来，以其快速敏感的特点被广泛应用于基因的表达分析及检测；近年来，其应用范围被进一步拓宽到对未知片段的克隆和分析，其假阳性率高、错配率高等缺陷亦不断得到改进；新的聚合酶的发现，使扩增产物长度可达到 20 kb（ long-distance,LD PCR） [1， 2]。同时，网络资源的共享以及网上生物学软件的免费使用，也使 PCR引物的设计和选择更趋于精确，产物特异性进一步提高。 人鼻咽是位于颅底、咽后壁之间的立方体状结构，本实验室曾用新发展的 cDNA微阵列技术克隆到鼻咽特异性表达基因 YH1[3]。为了实现转基因在鼻咽的定向表达，须获得该基因的特异性调控区。本研究利用染色体缓移的方法， PCR扩增出 YH1基因的 5′端旁侧序列，并初步分析了其调控活性。 1 材料与方法 1． 1 试剂来源 实验中所用的 Human GenomeWalker kit， Advantage-GC Genomic PCR kit， Advantage PCR Cloning kit 等均购自 Clontech公司。 1． 2 染色体缓移 实验流程：分别用 5种限制性内切酶（ DraⅠ ,EcoRⅤ ,PvuⅡ ,ScaⅠ ,SspⅠ）酶切人基因组 DNA，得到五种基因组限制性酶切片段库在基因组限切片段的末端加上接头（内含引物序列）设计两组基因特异性引物，分别与接头中的引物配对，进行巢式 PCR反应凝胶电泳检测，回收特异性 PCR产物后亚克隆测序。
作者：张玲；何志巍；李虹；韩为农；姚开泰 刊期： 2001年第05期
三维适形放疗（ 3-dimensional conformal radiation therapy, 3-D CRT）作为一种精确的放疗技术对摆位重复性的要求甚高。热塑面罩固定法是头颈部肿瘤放射治疗常用的固定方法，它具有简单、经济、无创等优点。热塑面罩固定法摆位重复性受摆位者主观因素影响较大，能否通过面膜制作和摆位各环节的质量控制减少摆位重复性误差，并将其用于 3-D CRT是值得研究的问题。本文报告了作者将面罩固定用于 26例局部复发鼻咽癌 3-D CRT的摆位质量控制及重复性验证的方法和结果。 1 材料与方法 1.1 病例资料 局部复发鼻咽癌 26例，其中女性 9例，男性 17例，年龄 23～ 71岁，中位年龄 46岁。全组病人神志清楚，摆位合作。 1.2 设备 PIKER PQ CT定位机， ACQ SIM ＆ ACQ PLAN（ CT模拟与三维计划系统） FICSHER三维 TPS、立体定向体架、多叶光栅， VARIAN 600C/D直线加速器，热塑面罩固定装置。 1.3 面罩制作与摆位过程的质量控制 1.3.1 病人准备：剃光头，着低领薄衫，以便于在病人头颈部作标记，并消除长发给面罩制作带来的不便和因长发位置变化引起的摆位误差。 1.3.2 个体化泡沫枕的制作：根据患者平卧头颈过伸时顶、枕、颈部曲面制作个体化泡沫枕，使患者头颈部能大程度地与泡沫枕接触，减少患者体位可变度。
作者：郑小康；陈龙华；徐艳丽；邓晓刚 刊期： 2001年第05期
患者，男， 55岁，因活动后心悸气促半年、加重伴不规则低热半月于 2000年 3月 27日入院 (住院号： 727618)。查体：一般情况可，心界向左下扩大，心尖区闻及Ⅲ级收缩期杂音和舒张期中晚期杂音，肝肋下 2 cm，剑突下 4 cm，腹部移动性浊音 (-)，双下肢轻度水肿。既往无栓塞和晕厥史。彩超发现左心室内一巨大肿块。 2000年 3月 31日在全身麻醉低温体外循环下行心室肿块切除术 ,术中见心包无异常，左房、左室明显增大，左心室内一不规则分叶状的巨大肿块，大小约 15 cm× 8 cm× 6 cm，基底约 3 cm× 3 cm，附于室间隔。完整切除肿块后送病理检查 (检查号 00-05104)：肿物由多个包膜不完整的肿块组成，约 13 cm× 8 cm× 6 cm大小，瘤重 112g，切面灰白色，质中等。镜下可见肿瘤组织以巢状的间皮样细胞与肉瘤样梭形细胞混合存在，呈双向分化；瘤细胞大小一致，胞浆略嗜酸性，核大，空泡状，可见小核仁，核分裂相易见 (见图 1),肿瘤细胞外可见多少不等的粘液物质。免疫组化染色： CK(＋ )， EMA(＋ )， Vim(＋ )， HBME-1(＋ )(见图 2)， Des(-)， FⅧ (-)，特殊染色 AB(＋ )，消化 PAS(-)。病理诊断：左室间隔恶性间皮瘤。
作者：任莉；董力；张尚福 刊期： 2001年第05期
