背景与目的:成骨肉瘤是青少年中常见的恶性骨肿瘤,具有易发生肺转移的特点.尽管目前已能够成功地控制原发瘤,但是仍有30%以上的患者在5年内死于肺转移.更好地理解调节转移过程的分子机制,为设计有效的治疗方案提供生物学基础,我们用原位移植的方法建立了人成骨肉瘤细胞系SOSP-9607裸鼠转移模型,用这一模型筛选出了高转移细胞系SOSP-M.本研究旨在通过比较两个细胞系的基因表达水平来克隆与骨肉瘤转移相关的基因,探讨成骨肉瘤转移的分子机制.方法:采用抑制性消减杂交技术建立人成骨肉瘤高转移细胞株SOSP-M的消减文库;用差异筛选技术筛选出阳性克隆;对部分克隆进行测序和同源性分析,用Northern杂交及反转录多聚酶链式反应技术对SOSP-M中表达上调的有意义的克隆在低转移细胞系SOSP-9607、OS-9901、高转移细胞系SOSP-M和裸鼠肺转移结节中的表达情况进行了分析.结果:在高转移细胞株SOSP-M中有2个阳性克隆均与人凋亡对抗转录因子(apoptosis antagonizing transciption factor)同源(99%同源).Northern杂交及反转录PCR证实这个基因在高转移细胞和裸鼠肺转移结节中高表达,而在低转移人成骨肉瘤细胞系SOSP-9607和OS-9901中表达微弱.结论:对抗凋亡转录因子在促进肿瘤细胞转移中可能起重要作用.
作者:殷剑宁;范清宇;郝新宝;杨宁 刊期: 2002年第02期
背景与目的:将不同类型的耐药基因同时导入造血细胞,以扩大耐药范围和进行体内选择是基因治疗的重要策略,这类载体基因片段较长,进行基因转移有一定的难度.本研究旨在寻找安全有效的长片段基因转移途径.方法:将携带不同类型的耐药基因醛脱氢酶基因(ALDH1)和多药耐药基因(MDR1)的逆转录病毒载体G1Na-AIM以NdeI酶切线性化,电穿孔法转导PA317细胞,经长春新碱(VCR)和4-氢过氧化环磷酰胺(4-HC)选择后,应用Southern blot法确定原病毒的整合,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和流式细胞术(FCM)分析转移基因的表达,筑巢式聚合酶链反应(nested PCR)检验转移系统的安全性.结果:电穿孔法有效介导了ALDH1与MDR1基因的同时转移,Southern blot法证实ALDH1与MDR1基因稳定整合至宿主细胞基因组,RT-PCR检测到转移基因的转录,FCM测定下游基因MDR1蛋白表达增高4倍,转导率达98%.nested PCR未检测到辅助病毒(env).结论:电穿孔法安全有效地介导了ALDH1与MDR1基因的共转移和高表达.
作者:阳小卫;国风;王玮;傅建新;岑建农;夏学鸣;陈子兴 刊期: 2002年第02期
背景与目的:我们已从鼻咽癌细胞株SUNE-1的克隆株中筛选出3个具有不同生物学特性的细胞亚株:5-8F(高成瘤、高转移)、6-10B(成瘤、不转移)和13-9B(不成瘤);在本研究中,我们从病毒和遗传两方面探讨鼻咽癌细胞株SUNE-1及其3个亚株的生物学特性差异的分子机制.方法:①PCR检测亚株中EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)的BamHIW片段;②应用原位杂交技术检测SUNE-1及其3个亚株中EBV潜伏膜蛋白1(latent membrane protein1,LMP1)的表达状况;③应用比较基因组杂交(comparative genomic hybridization,CGH)检测SUNE-1及其3个亚株的基因扩增情况.结果:①在SUNE-1及其3个亚株中存在EBVBamHIW片段;②在3个亚株中,都能够检测到EBV-LMP1的表达,且表达强度一致.③CGH检测发现:SUNE-1的DNA拷贝数变呈现以1、2p、3、4、5p、6、7、9、10q、11、12q、13q、17q和18q增加和22q拷贝数减少为主;5-8F染色体变化以3p、7q、8q、9q、和10q拷贝数增加为主;而6-10B和13-9B除少数几个染色体区域发生缺失外,均无DNA拷贝数的增加.结论:鼻咽癌细胞株SUNE-1及其3个亚株,均有EBV的表达和存在不同的染色体变化,提示其生物学特性的差异可能主要由于染色体的变化引起,但EBV的感染对维持鼻咽癌的恶性程度可能起着重要的作用.
作者:宋立兵;鄢践;简少文;张玲;李满枝;李端;汪慧民 刊期: 2002年第02期
背景与目的:P糖蛋白(P-gp)、谷胱甘肽-S-转移酶(GST-π)和拓扑异构酶Ⅱ(Topo-Ⅱ)等多种细胞内物质是恶性肿瘤产生多药耐药的物质基础,胃癌是比较常见的恶性肿瘤,应用免疫组化方法检测化疗前P-gp、GST-π和Topo-Ⅱ三因素在胃癌中表达的报告还比较少,为此,本文检测P-糖蛋白(P-gp)、谷胱甘肽-S-转移酶(GST-π)和拓扑异构酶II(Topo-Ⅱ)在胃癌组织中的表达,探讨其与胃癌分化、转移的关系.方法:应用免疫组化方法,检测75例术前未进行化疗的胃癌患者癌组织中P-gp、GST-π和Topo-Ⅱ的表达.结果:P-gp、GST-π及Topo-Ⅱ在75例胃癌组织中表达率分别为760%、853%和680%,与患者的年龄、性别、肿瘤发生部位及浸润深度无关,其在胃癌组织中的表达管状腺癌分别与粘液腺癌、印戒细胞癌及未分化癌比较差异均有显著性(P<005).P-gp、GST-π高表达及Topo-Ⅱ低表达与其淋巴结转移有显著相关性.结论:P-gp、GST-π及Topo-Ⅱ的表达与胃癌组织类型有关,其表达可能还与胃癌细胞的分化、转移有关.
作者:秦芳;秦霞;张霞;贾海伟 刊期: 2002年第02期
背景与目的:正常肝组织富含生长激素受体mRNA,但在肝细胞癌、癌旁肝硬化组织中生长激素受体mRNA的表达情况不详,因此,本文旨在探讨肝癌组织、癌旁肝硬化组织中生长激素受体mRNA的表达情况.方法:采用逆转录-聚合酶链反应方法检测37例肝癌患者肝癌组织、癌旁肝硬化组织中生长激素受体mRNA的表达.结果:肝癌组织生长激素受体mRNA表达率(30/37,810%)较癌旁肝硬化组织的表达率(32/32,100%)低(P<005),未分化肝癌的表达率(1/4,200%)更低(P<05);癌旁肝硬化组织的生长激素受体mRNA的表达量[积分光密度比值(riOD)为(3077±824)%,n=32]较正常对照肝组织的表达量[riOD为(4493±625)%,n=5]少(P<0.05),重度肝硬化的表达量[riOD为(2190±472)%,n=8]更少(P<005).结论:生长激素受体mRNA的表达下调与肝癌的分化程度、癌旁肝硬化的严重程度有关.
作者:王洪涛;王捷;区庆嘉;刘晓平;陈双 刊期: 2002年第02期
背景与目的:近一半的胰腺癌存在DPC4/Smad4失活,使肿瘤细胞增殖的抑制作用丧失;p21waf1是Smad4调控的下游靶基因,而DPC4和p16基因在胰腺癌的发生中可能有协同作用.本研究拟通过研究DPC4/Smad4、p21wafI、p16蛋白在人胰腺癌中的表达情况,探讨三者之间的关系及它们在胰腺癌中的可能作用机制.方法:用免疫组化技术检测56例石蜡包埋人胰腺癌组织Smad4、p21wafI、p16的蛋白表达情况;用原位杂交、免疫组化技术、Westernblot检测5株人胰腺腺癌细胞系中DPC4/Smad4的mRNA和蛋白表达情况.结果:石蜡包埋人胰腺癌组织免疫组化显示Smad4、p21wafI和p16阳性率分别为58.93%、48.21%和42.86%,对应癌旁非癌胰腺组织阳性率分别为89.29%、87.5%和76.79%;P3、P4、P7人胰腺腺癌细胞系DPC4/Smad4的原位杂交、免疫组化及Westernblot均为阳性,而P1、P2均为阴性.统计学分析显示胰腺癌及癌旁非癌胰腺之间3种蛋白表达均有显著性差异(P<0.05),胰腺癌中Smad4与p21wafI表达之间有一定相关性(P<0.05),Smad4与p16表达之间有一定相关性(P<0.05),但p21wafI与p16表达之间无显著相关(P>0.05).结论:胰腺癌与正常胰腺相比,Smad4、p21wafI、p16蛋白表达明显下降,其改变在胰腺癌的发生发展中可能起重要作用.
作者:谷丽君;陈杰;卢朝晖;李理;周炜洵;罗玉凤 刊期: 2002年第02期
背景与目的:大量研究表明,外源性胃泌素对胃癌、结肠癌等胃肠道肿瘤细胞有促生长作用,但胃泌素是否参与了细胞的凋亡调控尚未见报道.本文旨在探讨胃泌素在胃癌细胞凋亡调控中的作用.方法:应用流式细胞仪观察胃泌素及其受体拮抗剂丙谷胺对MKN45胃癌细胞凋亡的影响;ABC免疫组化法测定细胞bcl-2基因的表达.结果:细胞培养48h后,胃泌素组细胞凋亡百分率为(1.39±0.54)%,明显低于对照组的(8.58±0.67)%(P<0.01);胃泌素组bcl-2基因阳性率为(22.3±5.3)%,明显高于对照组的(12.2±1.8)%(P<0.01),且随着时间延长表达率进一步增加.联合应用丙谷胺后上述作用消失.结论:胃泌素可能通过诱导细胞bcl-2基因的表达而抑制细胞的凋亡,丙谷胺可阻断胃泌素的凋亡调控作用.
作者:王和明;曹秀峰;黄水清;李义生;袁爱华;张群华;张延龄 刊期: 2002年第02期
背景与目的:从肿瘤细胞中分离出的热休克蛋白gp96制备物免疫小鼠可产生抗相应肿瘤的特异性保护性细胞毒性T细胞免疫应答,为肿瘤免疫治疗开辟了一条新的可行性途径.但通常gp96在细胞中的表达水平较低,从有限的细胞或组织中获得的gp96制备物难以满足研究的需要.因此,本研究拟为制备高质量和充足的gp96而建立高表达gp96的单克隆细胞株.方法:构建人gp96cDNA的重组表达质粒pcDNA-hgp96并将其转染HeLa细胞,G418筛选稳定转染的阳性细胞克隆,然后用Western印迹分析单克隆细胞株的gp96表达量.结果:成功构建了人gp96的重组表达质粒,建立了稳定转染的单克隆细胞株,并筛选出一株高表达gp96的单克隆细胞.结论:成功建立了高表达gp96的单克隆细胞株,为gp96抗肿瘤免疫的研究奠定了基础.
作者:岳培彬;杨树德;黄常志;赵玫;杜菲;林梁;余权;周启兵 刊期: 2002年第02期
背景与目的:血管内皮生长因子C(vascular endothelial growth factor C, VEGF-C)是近期发现的血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)家族的新成员。研究发现VEGF-C可特异性作用于淋巴管内皮细胞,并在多种人类肿瘤中表达。为探索VEGF-C在肿瘤发生、发展中的作用,我们分别检测了VEGF-CmRNA和蛋白在人乳腺癌细胞株MCF-7及其耐药株MCF-7/Adr中的表达。方法:根据VEGF-C基因序列,设计合成地高辛标记的特异性寡核苷酸探针,运用原位杂交方法检测培养的细胞株MCF-7和MCF-7/Adr中VEGF-CmRNA的表达,并运用免疫组织化学方法检测两种细胞中VEGF-C蛋白的表达,实验中用缓冲液分别代替杂交液和一抗作阴性对照。结果:原位杂交法检测到MCF-7和MCF-7/Adr细胞的胞浆中有阳性蓝色颗粒,免疫组化检测发现两种细胞的胞浆中均有阳性棕黄色颗粒,而阴性对照细胞的胞浆中则均无阳性颗粒。结论:人乳腺癌细胞株MCF-7及其耐药株MCF-7/Adr细胞能够转录VEGF-CmRNA,并在其细胞浆中翻译合成相应的蛋白。
作者:高杰;刘执玉;王伟;毕玉顺;田铧 刊期: 2002年第02期
背景与目的:人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)是宫颈癌主要的致病因素,E6是主要的致癌基因之一;高危HPV基因型,如HPV16的E6蛋白表达水平是维持宫颈癌恶性表型的必要条件.而放射治疗是目前宫颈癌治疗的标准和有效的方法.本研究旨在探讨抗HPV16E6核酶(ribozyme)对宫颈癌CaSKi细胞放疗敏感性的影响.方法:以脂质体法将抗HPV16E6-ribozyme、空载体质粒分别导入CaSKi细胞,命名为CaSKi-R、CaSKi-P细胞.点杂交检测核酶在细胞中的表达,Northern杂交检测3种细胞中E6基因的表达.用克隆形成试验检测3种细胞对放疗的敏感性,Annexine/PI双标法检测细胞凋亡率,流式细胞术检测bcl-2、p53、bax蛋白表达.结果:点杂交证实核酶能在CaSKi-R细胞中稳定表达,Northern杂交证实CaSKi-R中E6表达较CaSKi-P、CaSKi中明显降低.CaSKi-R细胞生长速度较CaSKi-P、CaSKi明显减慢(P<0.01);CaSKi-R细胞对X射线的敏感性较CaSKi-P、CaSKi明显增加,克隆形成率明显下降(P<0.05),CaSKi-R细胞照射前后的凋亡率较X射线照射后CaSKi-P、CaSKi明显增加(P<0.01);CaSKi-R细胞p53、bax蛋白表达较CaSKi-P、CaSKi明显升高,bcl-2明显减少(P<0.01).结论:转染抗HPV16E6-ribozyme的CaSKi-R细胞出现一定程度的生长抑制,且对放射治疗的敏感性增加.
作者:饶智国;张积仁;郑燕芳;周惠;屈良鹄 刊期: 2002年第02期
背景与目的:Doc-1R基因是1999年克隆的一种新的基因,已有的研究表明Doc-1R基因可能是一种潜在的抑癌基因.为了进一步研究此基因的功能,我们首先克隆了小鼠的Doc-1R基因,并对此基因的表达进行了初步的研究.方法:根据小鼠的Doc-1R基因cDNA序列,设计合成基因组特异引物,应用巢式PCR对小鼠基因组步移文库进行扩增.对测序结果进行序列分析及剪接位点的鉴定.另外应用RT-PCR的方法研究了Doc-1R基因在小鼠肝、脾、胰、肾、肺、肠、心、脑、骨、肌肉、膀胱、卵巢、睾丸等13种组织的表达.结果:经二次基因组步移获得了小鼠Doc-1R基因组全长序列.基因组全长2787bp,含4个外显子和3个内含子,外显子与内含子接头符合GT/AG法则.RT-PCR结果表明,Doc-1R基因在小鼠13种组织和器官中均有表达.结论:成功克隆了小鼠Doc-1R基因,为进一步研究此基因的功能奠定了基础.RT-PCR表达结果提示此基因可能是对维持组织器官的功能具有重要的作用的管家基因.
作者:生秀杰;周伟强;姜莉;张梅英;王太一;张学 刊期: 2002年第02期
背景与目的:蛋白激酶CK2是一种高度进化保守性的丝/苏氨酸激酶,它的活性在人的多种癌症是上调的.CK2可作为一种癌基因起作用,它的靶向抑制可用于肿瘤的治疗.为了寻找特异性CK2抑制剂,本文观察Tyrphostin中的AG1109对重组人蛋白激酶CK2全酶的直接作用,以探讨其酶动力学机制.方法:利用基因工程克隆、表达和纯化而获得重组人蛋白激酶CK2α和β亚基,在体外等摩尔数混合构成有大生物活性的重组CK2全酶,在不同条件下测定CK2的活性.CK2活性通过测定转移到CK2底物上的[γ-32P]ATP或[γ-32P]GTP的[32P]放射活度来检测.结果:重组人CK2是一种Ca2+、cAMP和cGMP等第二信使非依赖性蛋白激酶,与天然CK2的性质一致.AG1109对重组人CK2全酶具有很强的抑制作用,其IC50为9.7μmol/L,抑制作用稍大于已知的CK2抑制剂5,6-二氯-1-β-呋喃糖苯并咪唑(DRB)和N-(2-氨乙基)-5-氯萘-1-硫胺(A3).AG1109对重组人CK2的动力学研究表明,它与GTP呈以竞争性为主的混合型抑制作用,与酪蛋白呈非竞争性抑制作用.结论:AG1109是一种很强的重组人CK2抑制剂.重组人蛋白激酶CK2可作为一种较为简便地筛选和开发有效的CK2抑制剂的分子靶点.
作者:刘新光;梁念慈 刊期: 2002年第02期
背景与目的:已有学者对尿液、胰液、肠腔冲洗液、胸水等脱落细胞端粒酶活性进行了检测,探索其对恶性肿瘤的诊断价值.而胆汁脱落细胞端粒酶活性的检测尚少见报道.本文的目的是探讨胆汁脱落细胞端粒酶活性检测及其对胆道恶性梗阻的诊断价值.方法:应用TRAP银染法检测胆汁脱落细胞的端粒酶活性.结果:44例恶性肿瘤胆道梗阻病人获得的胆汁中有33例检测到端粒酶活性阳性,阳性率750%;而良性梗阻组19例中只有1例检测到端粒酶弱阳性,阳性率53%.胆汁脱落细胞端粒酶活性阳性率与淋巴结转移、远处转移以及分化程度等肿瘤临床病理学特征无关,但胰腺癌和胆管癌病人胆汁中端粒酶活性检测阳性率高.端粒酶活性检测与脱落细胞学检查对比结果显示:44例胆道恶性梗阻的病人中31例进行了胆汁脱落细胞学检查,结果只有3例癌细胞阳性,阳性率97%,这3例脱落细胞学检查阳性的胆汁脱落细胞端粒酶活性检测均为阳性.结论:TRAP银染法可有效检测到胆汁脱落癌细胞的端粒酶活性.端粒酶可以作为诊断恶性胆道疾病的分子标志物.胆汁中脱落细胞端粒酶活性检测可作为细胞学检查的补充诊断手段.
作者:俞世安;彭承宏;吴荣进;郑樟栋;陈凯;付祝能 刊期: 2002年第02期
背景与目的:实验和临床证明恶性肿瘤的生长、浸润和转移与肿瘤血管生成有关,这过程由多种血管生长因子调控,如血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF).目前在妇科恶性肿瘤患者中测定血清VEGF水平的研究报道不多.本研究测定妇科恶性肿瘤患者血清中VEGF的水平,并探讨其能否成为一种新的肿瘤标记物.材料与方法:采用R&DSystems Inc minnea polisMNUSA生产的Quantikine HumamVEGF试剂盒,用ELISA方法测定50例宫颈癌、39例子宫内膜癌和89例卵巢癌患者的术前血清,以及其中3例卵巢癌术后3、6、9个月及复发时血清的VEGF水平;另用80例健康妇女血清的VEGF水平作为对照.用SPSS9.0统计软件包进行统计分析.用5th和95th位数的区间描述变异程度.结果:80例健康妇女的血清VEGF中位水平为2185ng/L(4206-67170ng/L).50例宫颈癌、39例子宫内膜癌和89例卵巢癌患者术前血VEGF中位水平分别为27200ng/L(9194-74553ng/L)、38350ng/L(10567-77650ng/L)和47985ng/L(9947-132688ng/L),子宫内膜癌和卵巢癌患者术前血清VEGF水平显著高于健康妇女(P<00001),宫颈癌患者术前血清VEGF与健康妇女相比无显著性差异(P>005).3例卵巢癌患者术后3、6、9个月无复发时测定的血清VEGF水平较术前明显下降,其中2例术后复发时VEGF水平再次升高.晚期卵巢癌(Ⅲ-Ⅳ期)患者血清VEGF水平高于早期卵巢癌(Ⅰ-Ⅱ期),差异有显著性(P<005).结论:血清VEGF可能成为卵巢癌和宫内膜癌的一个新的肿瘤标记物,可用于诊断和监测病情的进展.
作者:彭小萍;李俊东;李孟达;叶鲜明;颜婉嫦 刊期: 2002年第02期
背景及目的:细胞角蛋白作为检测循环癌细胞的指标,越来越得到人们的重视.CK19mRNA作为微转移检测的基因标记有较高的应用价值,但其特异性及敏感度都不够理想.本实验旨在评价外周血CK19mRNA与肿瘤标记物癌胚抗原(CEA)、神经元特异性烯醇酶(NSE)和组织多肽抗原(TPA)水平的联合测定对肺癌临床诊断的价值.方法:用逆转录多聚酶链反应法(RT-PCR)检测外周血有核细胞CK19mRNA的表达水平,采用酶联免疫吸附法(ELISA)和时间分辨荧光法(TRF)测定91例肺癌、33例良性肺病患者和50例健康人的血清CEA、NSE和TPA水平,数据统计用t检验和χ2检验分析.结果:肺癌组外周血CK19mRNA和血清CEA、NSE、TPA的阳性检出率(分别为495%、659%、670%、835%)明显高于良性肺病组(分别为242%、90%、152%、90%)和健康对照组(分别为100%、40%、80%、60%)(P<001).在不同的组织类型中CK19mRNA阳性检出率无统计学差异.随着临床分期逐步升高,Ⅰ+Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期CK19mRNA的阳性检出率分别为44.4%、48.4%、54.2%呈上升趋势,但无显著性差异(P>0.05).在Ⅰ+Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期血清CEA水平[(μg/L)/阳性率(%)]分别为35/278、51/355、85/583,血清NSE水平[(μg/L)/阳性率(%)]分别为125/333、153/419、247/583,血清TPA水平[(μg/L)/阳性率(%)]分别为11/444、18/581、36/667,都呈上升趋势,但也无显著性差异(P>0.05).联检结果显示四项或三项联检比二项联检或单项检测的准确性更高.另外,TPA检测的阳性率以鳞癌高(767%);CEA检测的阳性率以腺癌高(833%),NSE检测的阳性率以小细胞癌高(792%).结论:外周血CK19mRNA和CEA、NSE、TPA联合检测可提高肺癌检出率,并能为治疗提供有力的诊断依据.
作者:潘锵荣;张行;许则丰;郑树 刊期: 2002年第02期
背景及目的:与正常肝脏相比,肝癌细胞表达的γ-谷氨酰转移酶(GGT)有一独特的碳水化合物结构,这种GGT可作为肝癌诊断的重要指标,但是,在癌变过程中GGT基因的改变机制尚不清楚,本研究探讨GGTmRNA亚型的转化与原发性肝癌(HCC)发生的关系,寻找肝癌早期诊断的新方法.方法:以RT-PCR方法检测正常对照组、非癌肝病组、肝癌组及肝转移癌肝组织及外周血的三种GGTmRNA亚型(F、H、P亚型).结果:正常肝组织、非癌肝病肝组织及肝转移癌癌周组织主要的GGTmRNA类型为F亚型,肝癌组织、癌旁组织、及远癌组织GGTmRNA-H亚型的阳性率显著高于正常肝脏及非癌肝病肝组织(P<005),肝癌组织GGTmRNA-F亚型阳性率明显低于正常对照及非癌肝病组(P<005).在26例HCC中有12例外周血中检出GGTmRNA-H亚型,AFP阴性的10例HCC中有5例检出GGTmRNA-H亚型.结论:GGTmRNA亚型转化与肝癌发生有密切关系,分析GGT基因可望成为监测肝细胞癌变的灵敏方法.
作者:韩国庆;秦成勇;任万华;石军;王延军;刘华琳 刊期: 2002年第02期
背景与目的:国内外研究检测发现一些恶性肿瘤血清可溶性Apo-1/Fas(sApo-1/Fas)水平明显高于正常人,但有关化疗对血清sApo-1/Fas影响的研究不多;本课题通过检测胃癌患者血清sApo-1/Fas水平及化疗对血清sApo-1/Fas影响的研究,探讨其临床价值.方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测42例胃癌患者化疗前后血清sApo-1/Fas水平,并与30例正常人作对比分析.结果:胃癌患者血清sApo-1/Fas水平明显高于正常对照组(P<001),血清sApo-1/Fas水平与临床分期、细胞分化程度有关,与患者性别、年龄无关.Ⅳ期胃癌患者血清sApo-1/Fas水平明显高于Ⅲ期和Ⅱ期(P<005~001),Ⅲ期明显高于Ⅱ期(P<005).中、高分化胃癌患者血清sApo-1/Fas水平低于低分化胃癌患者(P<005~001),化疗后有效(完全缓解和部分缓解)患者血清sApo-1/Fas水平明显低于化疗前(P<001).结论:血清sApo-1/Fas与胃癌的发生、发展相关,可作为胃癌生物学行为和预后的标记物.sApo-1/Fas有可能成为胃癌治疗的新靶点.
作者:梁启廉;潘达超;银正民;刘国勋;扬勤;谢杰荣;蔡良真;符有文 刊期: 2002年第02期
背景与目的:在实验研究中,已证实多种化疗药物都可引起乳腺癌细胞的凋亡.但在人体内进行有关化疗药物引起乳腺癌细胞凋亡的研究,还少有报道.本文研究新辅助化疗能否引起乳腺癌肿瘤细胞的凋亡以及对乳腺癌肿瘤细胞增殖的影响.方法:应用末端转移酶介导的dUTP切口末端标记法(TdT-mediated dUTP nick endlabelling,TUNEL)及免疫组化的标记链菌亲和素生物素法(Labelled Streptavidin Biotin,LSAB),分别检测100例乳腺癌组织中肿瘤细胞的凋亡指数(Apoptotic index,AI)和乳腺癌肿瘤组织的增殖细胞核抗原(Proliferating cell nuclear antigen,PCNA)表达.结果:新辅助化疗组肿瘤细胞凋亡指数(AI)均数为7.47%,与对照组肿瘤细胞凋亡指数(AI)均数4.83%相比明显增高(P<0.01).新辅助化疗组肿瘤细胞增殖细胞核抗原(proliferatingcellnuclearantigen,PCNA)阳性表达率均数为33.71%,与对照组PCNA阳性率均数51.52%相比明显降低(P<0.01).在新辅助化疗组及对照组两组病例中,肿瘤细胞凋亡指数(AI)与增殖细胞核抗原(PCNA)的阳性表达均呈负相关.结论:在人体乳腺癌组织中,新辅助化疗能诱导肿瘤细胞发生凋亡,并能抑制其增殖.
作者:詹友庆;徐立;孙晓卫;仲坚;李威 刊期: 2002年第02期
背景与目的:喉癌手术越来越强调保留尽可能多的正常组织,这往往增加切缘阳性的机率,影响病人预后,正确确定切缘标准和原则,对患者预后有利.本研究旨在探讨部分喉切除术术中留取切缘标本对喉癌病人术后治疗的指导价值以及阳性切缘对预后的影响.方法:研究了115例术中留取切缘标本的喉癌病例.比较切缘阴性组与阳性组的复发率、生存曲线;比较切缘阳性组给予与不给予术后放疗者的生存曲线;比较切缘阴性组给予与不给予术后放疗者的生存曲线.结果:切缘阳性组的复发率较阴性组高(280%Vs78%P=0006)、生存曲线差(P=00241);切缘阳性组术后放疗者与未放疗者的生存曲线有显著性差异(P=00046);切缘阴性组给予与不给予术后放疗组的生存曲线无明显差异(P=0.0829).结论:在喉癌中,切缘阳性组的预后差于阴性组,手术切除干净重要;术后放疗能改善切缘阳性者的预后;切缘阴性者不必术后放疗.
作者:许光普;曾宗渊;夏良平;陈福进;郭朱明;张诠 刊期: 2002年第02期
背景与目的:贲门癌有较多的手术入路,但从贲门癌术后远期生存率来看哪种手术入路优,目前医学界还没有一致意见.本研究探讨贲门癌手术较好的手术入路.方法:对扬中市人民医院353例贲门癌手术治疗的患者进行分析,比较上腹、左胸、胸腹联合3种手术入路中长期生存率、切端阳性率的差异.结果:3种手术入路患者总5年生存率及切端阳性率分别为:上腹组462%、146%,左胸组376%、164%,胸腹联合组576%、208%,3组比较P值均大于005,差异无显著性.结论:手术入路对贲门癌的中长期生存率、切端阳性率并没有显著影响,应根据病灶部位、范围及患者的身体情况来综合确定手术方案.
作者:郭国平 刊期: 2002年第02期
利用液态氮作为冷冻剂的冷冻治疗可以应用于各期肝癌的治疗,其作用机理包括低温直接引起组织破坏及提高机体免疫功能.目前,由于多种探头机器的应用,使得治疗方式也多种多样,如在开腹直视下进行,也可经皮穿刺在超声引导下进行.冷冻治疗具有使用方便、并发症少、疗效确切等优点.随着新的探头和冷冻剂的开发,冷冻外科在肝癌的治疗中将具有广阔的前景.
作者:陆军;许建衡;秦自科 刊期: 2002年第02期
背景与目的:细胞逃避转化生长因子-β(TGF-β)诱导的对细胞生长、增殖的抑制是许多肿瘤发生的一个重要机制.Smad7是TGF-β信号转导通路的抑制型Smads,它可阻断TGF-β信号在胞浆内的传导,其紊乱是TGF-β信号转导通路紊乱的机制之一.本研究旨在分析在细胞恶性转化过程中,Smad7基因表达是否发生紊乱,TGF-β1对Smad7基因的调控功能有无发生变化,以探索细胞发生恶性转化的原因.方法:培养BEP2D细胞及BERP35T-2细胞,于收获前60min和90min加入不同剂量的TGF-β1,提取细胞总RNA,分别以未加TGF-β1的细胞组作为对照,用Northernblot杂交比较两组细胞Smad7mRNA表达的差异以及细胞对TGF-β1细胞因子刺激的反应性.同时提取BEP2D及BERP35T-2细胞蛋白,用Westernblot方法比较两组细胞内源性TGF-β1表达的差异.结果:Smad7mRNA表达水平恶性转化细胞高于永生化细胞;加了TGF-β1细胞因子后,BEP2D细胞Smad7mRNA表达增高,BERP35T-2细胞表达水平改变不明显.而内源性TGF-β1的表达水平,BERP35T-2细胞稍高于BEP2D细胞.结论:Smad7在辐射致肺癌细胞系中的过表达及对TGF-β1应答的降低可能是辐射诱发肺癌发生的机制之一.
作者:霍艳英;张开泰;李邦印;段瑞峰;范保星;项晓琼;胡迎春;谢玲;吴德昌 刊期: 2002年第02期
背景和目的:IL-6能够抑制多种因素诱发的骨髓瘤细胞凋亡反应,在此过程中涉及到胞浆内一系列信号蛋白分子的参与.本研究旨在确定能够介导IL-6在人骨髓瘤细胞系XG-7上凋亡抑制效应的Bcl-2家族抗凋亡蛋白(Bcl-2,Bcl-xL,Mcl-1)和IL-6信号转导途径(JAK/STAT、Ras/MAPK、PI-3K/Akt途径).方法:采用碘化丙腚(PI)染色和流式细胞术分析XG-7细胞的凋亡情况;采用免疫印迹方法检测Bcl-2家族分子在XG-7细胞中的表达情况;分别采用针对JAK/STAT、Ras/MAPK和PI-3K/Akt途径的特异性抑制剂AG490、PD98059和LY294002处理XG-7细胞,从而确定哪条信号转导途径能够介导IL-6在XG-7细胞上的凋亡抑制效应.结果:IL-6能够抑制XG-7细胞凋亡,同时上调Bcl-2家族抗凋亡蛋白Mcl-1表达.AG490处理的XG-7细胞中Mcl-1表达上调被明显抑制;但PD98059和LY294002处理后对Mcl-1表达没有显著影响.结论:IL-6在XG-7细胞上的凋亡抑制效应是通过上调Mcl-1表达和激活JAK/STAT途径而介导的,与Ras/MAPK和PI-3K/Akt途径的活化状态无关.
作者:宋伦;黎燕;孙英勋;于鸣;沈倍奋 刊期: 2002年第02期
蛋白激酶C(Protein kinase C,PKC)是信号传导系统中的一个关键酶,它一直被认为有促癌元件作用[1].各种资料表明,PKC相关信号传导系统与肝癌的发生有重要的联系[2],但PKC相关的信号传导系统在肝癌的发生过程中究竟扮演什么角色?在癌变的不同阶段PKC的表达有什么特征?这些问题的探讨对深入理解肝癌发生的分子机制有重要的意义.
作者:向锦;赵国强;张惠忠;胡瑞德;钟觉民 刊期: 2002年第02期
近年来,DNA多态性与疾病的关系,特别是一些功能基因多态性与肿瘤的关系日益受到研究者重视.Azuma等曾报道胃蛋白酶原C(pepsnogen C,PGC)PGC基因多态性与胃体溃疡的发病有关[1].在以前的实验中[2],我们通过Southern blot方法检测、分析PGC基因RFLP,发现PGC基因多态性与胃癌发生之间存在某种联系.在本研究中我们通过PCR方法检测PGC基因的多态性,并进一步分析PGC基因多态性与胃癌发生之间的关系.
作者:刘慧杰;高华;董明;王兰;袁媛 刊期: 2002年第02期
按照UICC1997年的分期标准,声门上喉癌T3病变侵犯范围变化较大,手术治疗存在一定的复杂性.目前有多种可供选择的手术方式,但各种术式的手术适应证不够明确[1].本文回顾我院应用声门上水平部分喉切除术治疗声门上喉癌T3病变的效果,讨论并分析手术的适应证以及对T3病变的临床处理方法.
作者:刘巍巍;曾宗渊;陈福进;许光普;郭朱明 刊期: 2002年第02期
原发性肝癌诊断主要依靠临床表现、血清AFP浓度、相关的影像学表现.CT检查已成为肝癌术前及术后常规检查方法之一.但对于小肝癌检出的敏感性不如动脉造影CT(computed tomography arteriography,CTA)及经动门脉造影CT(computed tomography arterialportography,CTAP)[1],本研究通过对肝内病灶动态CTA和CTAP扫描,选择动脉和动门脉造影CT的佳时相.
作者:陈林;吴沛宏;赵明;徐志斌;郑庆生;张岩;李立;曹烨 刊期: 2002年第02期
许多因素能够诱导细胞凋亡,如电离辐射、紫外线、低氧、缺血、中毒及化疗药物等;利用某种药物增加肿瘤细胞凋亡和减少正常细胞凋亡对于肿瘤防治具有重要意义.近年来,对癌症放化疗中正常组织保护的研究主要集中在氨基硫醇类和非硫醇类药物的作用研究,如氨基硫醇类WR-2721、WR-1065、细胞因子、植物多糖、抗氧化维生素类等[1].虽然WR-2721仍为有效的抗放疗或/和化疗的细胞保护剂,但其自身的不良反应限制了常规应用.本研究通过NADH对X射线诱导正常肝细胞株L02细胞凋亡的影响,旨在探讨一种新型的抗辐射细胞保护药物.
作者:刘发全;张积仁;徐小平;李鹏 刊期: 2002年第02期
研究证明,细胞膜上的单羧酸转运器(monocarboxylate transporter,MCT)在细胞内外乳酸和丙酮酸转运及pH调节方面具有重要作用.近年来,对MCT在肿瘤细胞中功能的研究越来越受到重视[1],但对MCT基因各亚型mRNA在人类肿瘤组织中的表达情况的研究未见报道.而研究其基因亚型在人癌组织中的表达,有助于我们洞悉肿瘤细胞MCT基因各亚型在体内细胞能量及pH调节方面的作用方式,从而寻找肿瘤治疗的靶基因.本文通过RT-PCR方法,研究MCT1、MCT2两个基因亚型在人肺癌、癌旁肺组织及人肺癌细胞株中mRNA的表达情况.
作者:黄桂君;成党校;吴才林;陈杰;熊伟;钱桂生 刊期: 2002年第02期
本文通过对本院676例鼻咽癌放射治疗后患者进行纤维鼻咽镜随访4232例次,探讨鼻咽癌放射治疗后纤维鼻咽镜随诊的临床意义.1 材料与方法1.1 一般资料收集我院1988年1月至1999年12月经全程鼻咽癌根治性放疗并经纤维鼻咽镜随访4次以上的病例676例,未作常规纤维鼻咽镜复查的病例未收集入组,其中男422例,女254例,年龄14~81岁,中位年龄38岁,随访次数4~15次,全部病例均经病理确诊.
作者:吕新志;陈凯;郑燕列;李建国;邱幸生;张蔚蔚 刊期: 2002年第02期
鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)是我国南方常见的上皮源性恶性肿瘤,流行病学研究调查,鼻咽癌的发生与EB病毒感染、某些环境理化因素及遗传因素有关,但其分子机理仍不十分清楚.鼻咽癌的发生可能涉及到多个瘤基因的激活和抑瘤基因的失活,但目前国际上仍未获得鼻咽癌特异相关基因.为了进一步筛选与克隆鼻咽癌特异相关基因,我们构建了鼻咽癌上皮细胞株HNE1cDNA文库,以供进一步深入研究.
作者:张必成;李忠花;朱诗国;曹利;余鹰;李伟芳;李桂源 刊期: 2002年第02期
胃肠间质瘤(gastrointestinalstromaltumor,GIST)和淋巴瘤,是临床上较为常见的肿瘤,但两者同时发生在同一病人则非常罕见.文献中仅见1例报道.笔者遇到2例,现将其临床、组织病理和免疫组化特点报告如下.
作者:林华欢;骆新兰;梅平 刊期: 2002年第02期