背景与目的:慢病毒载体具有可感染非分裂细胞、目的基因整合至靶细胞基因组长期表达、免疫原性低等优点,适于体内基因治疗.本研究探讨慢病毒介导的双自杀基因对淋巴瘤细胞Raji的杀伤作用.方法:将表达慢病毒的3种质粒,即包装结构基因质粒pCMV△8.2、包膜基因质粒pCMV.VSVG、目的基因质粒pHR′CS.GFP或pHR′CS.CDglytk分两组(pHR′CS.Cdglytk为实验组、pHR′CS.GFP为对照组),经脂质体导人病毒包装细胞293T,包装成病毒后,收集病毒上清,浓缩后转染Raji细胞,用荧光显微镜及RT-PCR检测基因的表达.给予前体药物5-氟胞嘧啶(5-FC)和/或无环鸟苷(GCV),用MTT法测定Raji细胞的生长抑制率,检测CD和HSV-tk双自杀基因对Raji细胞的作用.结果:表达慢病毒的3种质粒可高效转染入293T细胞.荧光显微镜下观察可见大量的绿色荧光,透射电镜下观察可见富集的病毒颗粒.慢病毒介导的双自杀基因在Raji细胞中高效、稳定表达.单独使用GCV或5-FC对细胞的生长抑制率分别为51%、50%,与未转染组Raji细胞比较,差异有显著性(P＜0.01);联合使用5-FC和GCV对细胞的生长抑制率为73%,明显高于单独使用5-FC或GCV(P＜0.01).结论:慢病毒介导的双自杀基因可高效稳定转染淋巴瘤细胞;双自杀基因系统较单一自杀基因系统(CD/5-FC或HSVtk/GCV)对淋巴瘤细胞的杀伤具有明显增强作用.
作者：姜义荣；马道新；陈学良；刘春生 刊期： 2003年第09期
背景与目的:榄香烯是从姜科植物莪术中提取的抗肿瘤药物,我们应用榄香烯治疗神经胶质瘤取得了较为显著的疗效,本研究探讨榄香烯的抗胶质瘤细胞增殖和诱导凋亡作用.方法:3H-TdR掺人法检测榄香烯对鼠源性C6胶质瘤细胞及人源性SHG-44胶质瘤细胞的体外增殖抑制效应,Hoechst 33258/PI荧光染色法观察细胞形态学改变,流式细胞仪和DNA凝胶电泳检测细胞凋亡.结果:榄香烯能有效抑制C6/SHG-44胶质瘤细胞的恶性增殖,3H-TdR掺入法检测榄香烯处理不同时间(1～4天)的IC50,C6细胞为7.33～11.02 mg/L,SHG-44细胞为13.29～27.16mg/L.在相同药物浓度下,C6细胞较SHG-44细胞敏感.经榄香烯作用后,C6/SHG-44胶质瘤细胞核固缩、边集,核浆比例减小并见有凋亡小体形成,DNA直方图观察到特征性亚倍体峰(Ap峰),DNA凝胶电泳出现有明显的梯状条带.结论:榄香烯有显著的抗胶质瘤细胞增殖作用,并能诱导胶质瘤细胞凋亡.
作者：周洪语；沈建康；侯菊生；邱永明；罗其中 刊期： 2003年第09期
背景与目的:泛素-蛋白酶体途径是真核细胞中选择性降解短寿命蛋白的重要途径.S期激酶相关蛋白2(S-phase kinase-associated protein 2,Skp2)是此途径中的一个重要组件,它是决定细胞周期素依赖性激酶抑制因子p27降解的关键蛋白.近年来,在实体瘤的研究中发现Skp2是癌蛋白,能促进癌细胞的细胞周期进展,但在白血病细胞恶性增殖中所起的作用还未见报道.本实验旨在研究Skp2反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotides,ASODN)对白血病细胞系K562细胞生长和增殖的影响及其可能的机制.方法:Skp2反义寡核苷酸和K562细胞共同培养,通过显微镜下观察、四甲基偶氮唑蓝(MTT)实验观察K562细胞生长和增殖,流式细胞术分析细胞周期,逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chainreaction,RT-PCR)和细胞免疫化学测定Skp2 mRNA、蛋白及p27 mRNA、蛋白的表达.结果:Skp2反义寡核苷酸处理后,K562细胞增殖受抑,细胞周期阻滞于Go/G1期[Skp2 ASODN组(39.7±9.1)%,对照组(31.5±7.3)%,P＜0.05].Skp2 mRNA及Skp2蛋白水平降低;尽管p27 mRNA未见改变,但其蛋白水平明显升高.结论:Skp2反义寡核苷酸能抑制K562细胞增殖,这种抑制作用主要是通过调控泛素-蛋白酶体途径,进而影响细胞周期进展而实现的.
作者：王小中；冯文莉；刘兴；曹唯希；黄宗干 刊期： 2003年第09期
背景与目的:研究表明组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase,HDAC)在多种肿瘤细胞中高表达,组蛋白去乙酰化酶1(HDAC1)抑制剂制滴菌素A(trichostatin A,TSA)能抑制肿瘤细胞的生长.而缺氧是恶性肿瘤的重要特征,本实验拟研究HDAC1在低氧肺腺癌细胞株A549中的表达及TSA对细胞增殖、凋亡的影响.方法:实验设常氧组(对照组)及低氧组(实验组),实验组设A～F组,即低氧6 h组(A组),低氧6 h加TSA组(B组),低氧12 h组(C组),低氧24 h组(D组),低氧24 h加TSA组(E组),低氧48 h组(F组).用蛋白印迹法(Western blot)检测A549细胞在不同时间低氧条件下HDAC1的表达,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色、免疫组化和流式细胞仪、原位凋亡(Tunel)法检测A549细胞在不同时间低氧条件下的增殖和凋亡率以及TSA对其的影响,用RT-PCR检测A549细胞在不同时间低氧条件下HDAC1 mRNA的表达及TSA对其的作用.结果:对照组HDAC1蛋白质表达的A值为138±11,实验A、C、D、F组A值分别为78±4.0、86±5.0、124±3.0、120±9.0.对照组HDAC1mRNA的A值与β-actin mRNA A值的比值0.68±0.03,A、B、D、E组HDAC1 mRNA的A值与β-actinmRNA A值的比值分别为0.46±0.03、0.45±0.02、0.70±0.03、0.33±0.02.对照组PCNA的A值0.13±0.03、A、B、D、E组PCNA的A值分别为0.10±0.02、0.11±0.02、0.16±0.02、0.11±0.03.对照组MTT A值0.50±0.06、A、B、D、E组MTT的A值分别为0.41±0.04、0.45±0.03、0.59±0.02、0.45±0.03.对照组凋亡细胞的A值0.16±0.04、凋亡率1.11%,A组凋亡细胞的A值0.18±0.02、凋亡率18.91%,B组凋亡细胞的A值0.18±0.05、凋亡率14.30%;D组凋亡细胞的A值0.20±0.05、凋亡率36.99%,E组凋亡细胞的A值0.23±0.05、凋亡率51.92%.结论:A549细胞HDAC1的表达受低氧的调节,HDAC1在A549细胞增殖和凋亡中起重要的作用,TSA在低氧下抑制A549细胞的增殖并促进其凋亡.
作者：黄宏；张珍祥；徐永健；邵静芳 刊期： 2003年第09期
背景与目的:近年研究表明硒可诱导肿瘤细胞凋亡,并且其与端粒酶活性以及肿瘤的发生密切相关.本研究旨在通过观察二氧化硒(selenium dioxide,SeO2)对肺腺癌细胞株GLC-82的体外作用,探讨SeO2对肺癌细胞的作用机制,以及细胞凋亡与端粒酶活性之间的关系.方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定不同浓度SeO2作用不同时间对肺癌GLC-82细胞生长的抑制作用;用TRAP-PCR-ELISA法检测SeO2作用前后GLC-82细胞端粒酶活性变化;采用流式细胞术(FCM)观察SeO2作用后GLC-82细胞的凋亡率;通过琼脂糖凝胶电泳法观察DNA梯状带;通过光镜和透射电镜观察GLC-82细胞的形态变化.结果:在3、10、30μmol/L SeO2作用下,GLC-82细胞的生长和端粒酶活性明显受抑制,24 h时细胞生长抑制率分别为0.7%、12.8%、31.8%,72 h时分别达15.1%、51.2%、61.1%;24 h时端粒酶活性分别为1.173±0.029、1.127±0.067、1.050±0.098(P＜0.05),48h时为1.150±0.026、1.047±0.060、0.950±0.036(P＜0.05),未处理组24 h和48 h时端粒酶活性分别为1.227±0.032、1.167±0.023;流式细胞仪检测二倍体峰前出现凋亡峰,30 μmol/L SeO2与GLC-82细胞共育24 h、48 h、72 h后细胞凋亡率分别为0.7%、3.8%、12.1%;琼脂糖凝胶电泳显示细胞凋亡典型梯状条带;SeO2作用后,GLC-82细胞呈典型的凋亡细胞形态.结论:SeO2通过抑制端粒酶活性、诱导细胞凋亡而抑制肺腺癌细胞株GLC-82细胞的生长,其抑制作用具有时效性和量效性.
作者：陈维香；曹晓哲；朱任之 刊期： 2003年第09期
背景与目的:核苷酸切除修复机制是细胞修复损伤DNA的重要途径,肿瘤细胞的耐药常伴随DNA损伤修复基因表达增强,采取反义策略降低细胞的DNA损伤修复能力可以增加肿瘤细胞的药物敏感性.本研究拟构建能在哺乳动物细胞中表达XPB反义RNA的表达质粒pcDNA-XPB/AS(XPB:着色性干皮病B基因),并初步探讨其对肺癌细胞DNA损伤修复能力及抗肿瘤药物耐药性的影响.方法:采用RT-PCR技术扩增的XPBcDNA 5′端一段69～520 bp的序列被反向插入表达质粒pcDNA3.1/His.将该重组质粒瞬时转染肺癌A549细胞.单细胞凝胶电泳(SCGE)比较阿霉素诱导的转染前后细胞DNA损伤修复情况.MTT法检测转染前后细胞对阿霉素的敏感性.结果:酶切图谱分析和基因测序证实反义表达质粒构建成功.RT-PCR显示转染细胞XPBmRNA表达水平下降.以4.0μg/ml阿霉素诱导细胞DNA损伤,SCGE显示转染细胞修复DNA损伤能力受到抑制.MTT显示未转染细胞与转染细胞对阿霉素的敏感性存在差别,但无统计学意义.结论:构建的反义表达质粒能下调转染细胞XPB mRNA表达,抑制细胞DNA损伤修复能力,为进一步研究XPB基因功能奠定了基础.
作者：周李承；蒋易；吴晓明；郝巧玲；任恕；周宜开 刊期： 2003年第09期
背景与目的:已证实在神经系统内外多种细胞中均可合成神经营养因子,如神经生长因子(nerve growth factor,NGF)、脑源性神经营养因子(brain derivedneurotrophic factor,BDNF)和神经营养素3/4(NT-3/4).这些神经营养因子不仅能促进神经细胞的存活、增殖和凋亡,也与癌细胞侵犯神经组织的活性有关;但BDNF与肺癌细胞的生物学行为是否相关尚未见报道.本文旨在研究BDNF对过氧化氢(H2O2)诱导人肺癌细胞YTMLC-90凋亡的作用.方法:用含人Ⅰ型胶原al链(COLIA1)基因启动子和增强子元件及在其3′端接BDNF cDNA的微基因pSVCEPBFCAT,转染人肺癌细胞YTMLC-90并驱动BDNF异位表达,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)显色法检测细胞增殖,吖啶橙荧光染色显微镜和电镜观察细胞形态及其超微结构的改变,琼脂糖凝胶电泳检测染色质DNA断裂.结果:经200 μmol/L H2O2作用24 h,转染pSVCEPBFCAT的YTMLC-90细胞生长抑制率为30.0%,而未转染YTMLC-90和转染空载体pSVCEPCAT的YTMLC-90细胞生长抑制率分别为84.60%和80.00%,实验组与两个对照组之间的差异均有显著性(P＜0.01);对照组YTMLC-90细胞可见凋亡特有的形态学及生物化学改变,如胞浆和核固缩、染色质断裂、DNA电泳呈梯状条带,而转染pSVCEPBFCAT的YTMLC-90细胞未发现上述凋亡特征.结论:BDNF促进YTMLC-90细胞增殖和拮抗H2O2诱导凋亡,抑制H2O2对人肺癌细胞YTMLC-90的细胞毒性.
作者：陈建业；刘戟；王若菡；彭文珍；刘智敏；王晓明；陈海燕；陈俊杰 刊期： 2003年第09期
背景与目的:近几年的研究表明,端粒酶在肿瘤的发生中扮演着重要角色.人端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse trascriptase,hTERT)是端粒酶活化的惟一限制性组分.本研究探讨hTERT全长cDNA反义序列转染对人肺巨细胞癌细胞系PLA-801D恶性表型的逆转作用.方法:应用基因重组技术构建包含hTERTcDNA全长序列的反义hTERT真核表达载体pcDNA3.1(-)-hERT,用脂质体转染人肺巨细胞癌细胞系PLA-801D,通过生长曲线比较转染反义hTERT后PLA-801D细胞的增殖能力,应用逆转录-聚合酶链反应方法检测hTERT mRNA的表达水平,并应用端粒重复序列扩增-酶联免疫吸附法检测端粒酶活性.结果:成功地构建了pcDNA3.1(-)-hTERT的反义真核表达载体,并转入到PLA-801D细胞中.转染反义hTERT的细胞较未转染及转染空质粒细胞的生长增殖能力显著降低(P＜0.05);转染组细胞中野生型hTERT mRNA的表达被抑制,其相对表达量仅为对照组细胞的15.7%,转染组细胞中端粒酶活性较对照细胞下降了约82.4%.结论:hTERT cDNA的全长反义序列可以抑制PLA-801D细胞hTERT mRNA的表达水平和端粒酶活性,限制PLA-801D细胞的生长.
作者：马学斌；韩为东；郝好杰；李琦；徐周敏；卢学春；赵亚力 刊期： 2003年第09期
背景与目的:髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)基因启动子区域-463 bp处存在G/A多态位点,国外研究表明此位点与肺癌遗传易感性有关,但中国人MPO基因型与肺癌易感性关系尚未见报道,本研究拟对此问题作一探讨.方法:采用病例-对照分子流行病学方法,以PCR-RFLP技术检测98例原发性肺癌和112名健康对照MPO基因型,通过比较不同基因型者的比值比(odds ratio,OR)及其95%可信区间(confidence interval,CI)分析基因多态性与中国人肺癌易感性的关系.结果:正常人群G/G、G/A、A/A基因型频率分别为47.3%、42.9%和9.8%,肺癌病例组分别为63.3%、33.7%和3.0%,杂合子G/A在两组人群中分布无显著性差异(P＞0.05),但病例组A/A基因型频率显著低于对照组(P＜0.025).携带至少一个等位基因A者患肺癌的风险是基因型为G/G者的52.0%(95%CI 0.29～0.93).在吸烟人群中,等位基因A对肺癌易感性的保护作用有显著性意义(OR=0.41,P＜0.025),而在非吸烟人群,这种保护作用无显著性意义(P＞0.25).结论:本研究人群MPO基因多态与肺癌遗传易感性相关,等位基因A对吸烟人群的肺癌易感性有保护作用.
作者：吴晓明；周宜开；任恕；郝巧玲 刊期： 2003年第09期
背景与目的:导致卵巢癌发生、发展的分子机制目前还不完全清楚,有研究者认为癌发生可能是许多基因表达水平的改变导致细胞内出现一系列分子变化的结果.本研究的目的是应用cDNA微矩阵方法对正常人卵巢组织及卵巢癌组织基因表达的差异性进行比较研究,筛选卵巢癌的相关基因.方法:将512个人癌基因和抑癌基因的cDNA用点样仪点在特制玻片上,制成表达谱芯片;分别提取人正常卵巢组织及卵巢癌组织的mRNA,通过逆转录PCR方法,将Cy3和Cy5两种荧光分别标记到两种组织的cDNA,制备成cDNA探针,并与表达谱芯片进行杂交及扫描,通过计算机应用ImaGene3.0软件分析和处理数据.结果:对正常卵巢组织和卵巢癌组织的癌基因和抑癌基因表达谱分析,在3例或3例以上组织有共表达差异性的基因有38个,其中在卵巢癌组织中下调的基因有23个,上调的基因有15个.结论:应用cDNA微矩阵技术研究卵巢癌的基因表达谱,初步筛选出了肿瘤相关基因.
作者：张辛燕；李小平；赖娟；冯捷 刊期： 2003年第09期
背景与目的:抑制恶性肿瘤的血管形成是目前肿瘤治疗研究的热点之一,本试验旨在探讨皮下注射生长抑素类似物对胃癌血管形成的抑制作用.方法:通过术前胃镜取材及免疫组织化学染色筛选血管内皮生长因子(vascular endothelialgrowth factor,VEGF)和生长抑素受体2(somatostatin receptor 2,SSTR2)表达阳性的25例胃癌患者纳入本研究.给予善得定10μg/kg皮下注射,每日两次共7天,然后行手术治疗.通过ELISA法检测用药前和用药后第1、3、7天血清VEGF和碱性成纤维细胞生长因子(b-firoblast growth factor,bFGF)的浓度,应用Western blot法检测手术前后肿瘤组织VEGF和bFGF的表达.免疫组织化学染色检测手术前后肿瘤微血管密度的变化.结果:用药1周后血清VEGF浓度较用药前显著下降[(1.02±0.41)μg/L vs(1.88±0.87)μg/L,P＜0.05],血清bFGF浓度较用药前显著下降(0.88±0.32)ng/L vs(2.12±1.06)ng/L,P＜0.05;用药后组织VEGF表达显著下降[(吸光度值:1306 vs 488,P＜0.01)],bFGF表达也显著下降(吸光度值:1287vs512,P＜0.01).用药后肿瘤微血管密度有降低趋势,但两者间差异无统计学意义(P＞0.05).结论:短期给予生长抑素可以降低胃癌组织中VEGF和bFGF表达,但对微血管密度的影响无统计学意义.用药后血清VEGF和bFGF浓度随治疗时间延长而呈下降趋势.
作者：李洪华；王昕琛；陆建荣；何科基；杨镇 刊期： 2003年第09期
背景与目的:研究证实胃癌浸润深度和淋巴结转移是多基因及其蛋白表达产物协调作用的结果,寻找与胃癌转移相关的分子生物学标志物有助于胃癌的研究.本实验旨在探讨胃癌组织及区域淋巴结中MUC1、CD44v6、nm23表达与胃癌侵袭转移及预后的关系.方法:采用SP免疫组织化学方法对110例胃癌组织及613枚区域淋巴结中的MUC1、CD44v6、nm23基因蛋白的表达进行检测.结果:①胃癌组织中的MUC1蛋白阳性表达在低分化癌组、浸润型组、T3+T4组、淋巴结转移组、Ⅲ～Ⅳ期组、生存期＜5年组分别为84.6%、88.1%、87.3%、91.7%、94.4%、95.5%,CD44v6分别为79.5%、74.6%、79.4%、81.7%、87.0%、87.9%,nm23分别为38.5%、32.2%、30.2%、25.0%、25.9%、18.2%.MUC1和CD44v6表达低分化癌组显著高于高、中分化癌组(78.9%vs 57.7%),浸润型组高于局限型组(72.6%vs 54.9%),T3+T4组高于T2组(72.3%vs 46.8%),淋巴结转移组高于无淋巴结转移组(68.0%vs 46.0%),TNMⅢ～Ⅳ期组高于Ⅰ～Ⅱ期组(67.9%vs 44.6%),生存期＜5年组高于≥5年组(59 1%vs 31.8%),各组间差异均具有显著性(P＜0.01或P＜0.05).而nm23除分化程度、Borrmann分型不同的两组之间差异无显著性外,T3+T4组低于T2组(51.1%),有淋巴结转移组低于无淋巴结转移组(56.0%),TNMⅢ～Ⅳ期组低于Ⅰ～Ⅱ期组(51.2%),生存＜5年组低于≥5年组(70.5%),其差异均具有显著性(P＜0.01或P＜0.05).②淋巴结组织中转移淋巴结组MUC1、CD44v6表达分别为94.7%、89.4%,无淋巴结转移组分别为19.6%、19.6%,前者高于后者(P＜0.01);而nm23表达淋巴结转移组(16.8%)低于无淋巴结转移组(74.9%)(P＜0.01).③胃癌区域淋巴结中MUC1、CD44v6表达阳性组5年生存率(1 3.0%、15.4%)低于表达阴性组(100%、62.1%)(P＜0.01),而nm23表达阳性组5年生存率(70.0%)高于表达阴性组(4.0%)(P＜0.01).结论:胃癌组织及区域淋巴结中MUC1、CD44v6蛋白表达增高和nm23蛋白表达降低与胃癌的侵袭转移相关.检测MUC1、CD44v6和nm23可为监测胃癌转移情况、合理选择治疗方法及评估预后提供参考依据.
作者：李勇；张景华；邝刚；杨进强；赵群；王晓玲；焦志凯；张志栋；王力利 刊期： 2003年第09期
背景与目的:基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)与基质金属蛋白酶组织抑制剂(tissue inhibitor of matrix metalloproteinase,TIMP)的表达失平衡在肿瘤侵袭、转移过程中起重要作用,但与乳腺癌预后关系的报道少见.本研究探讨MMP-2、MMP-9和TIMP-1、TIMP-2的表达与乳腺癌侵袭、转移和预后的关系.方法:原位杂交、免疫组化检测66例有临床和随访资料的乳腺癌患者的MMP-2 mRNA、TIMP-2 mRNA和MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2蛋白表达.统计学分析采用X2检验、Kaplan-Meier和Cox多因素回归分析.结果:MMP-2 mRNA、TIMP-2 mRNA和MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2蛋白的阳性表达率分别为66.7%(44/66)、65.2%(43/66)和71.2%(47/66)、68.2%(45/66)、40.9%(27/66)、69.7%(46/66),其中MMP-2蛋白与MMP-2 mRNA、MMP-9蛋白及TIMP-2 mRNA与TIMP-2蛋白的表达存在显著性正相关(P＜0.01);TIMP-1与MMP-9蛋白表达呈负相关(P＜0.01).有淋巴结转移的乳腺癌中MMP-2、MMP-9蛋白表达显著高于无转移者,但TIMP-2 mRNA、TIMP-1蛋白表达显著低于无转移者(P＜0.05).乳腺癌中MMP-2 mRNA和MMP-9蛋白表达与肿块大小、生存状况有显著性相关(P＜0.05),此外,MMP-9蛋白表达与临床分期存在正相关性(P＜0.01).绝经和ER表达阴性患者的MMP-2 mRNA表达水平增高(P＜0.05).MMP-2 mRNA及MMP-2、MMP-9蛋白表达的乳腺癌预后差(P＜0.01,P＜0.05).结论:MMP-2、MMP-9的过表达以及与TIMP-1、TIMP-2的表达失平衡在乳腺癌侵袭、转移过程中,对降解细胞外基质发挥重要作用;MMP-2蛋白可作为预测乳腺癌预后的标志.
作者：范松青；魏启幼；李美容；张利群；梁青春 刊期： 2003年第09期
背景与目的:临床研究表明,常规分割放射疗法治疗晚期鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)的疗效不理想,采用非常规分割放疗以及放疗配合化疗治疗晚期NPC成为目前研究的重点.本研究的目的是探讨加速分割放疗以及同期化疗治疗晚期NPC的治疗效果和放射反应.方法:将我院1993年6月～1996年6月经病理检查证实、首程接受放射治疗的416例晚期NPC患者随机分为3组:加速分割放疗(accelerated fractionated radiotherapy,AF)组138例,每周照射6天,每天1次,每次180～190 cGy,共46～49天,总剂量7 400～7 600 cGy;加速分割放疗同期化疗(accelerated fractionated radiotherapy with concurrent chemotherapy,AFC)组1 39例,放疗方法同AF组,每周加顺铂和5-氟尿嘧啶各10次;常规分割放疗(conventional fractionated radiotherapy,CF)组139例,每周照射5天,每天1次,每次200 cGy,总剂量7 000～7 500 cGy.观察各组患者的局部复发率,5年生存率和放射反应.结果:随访超过5年,AF组和AFC组的局部复发率低于CF组,分别为16.7%(23/138)、13.6%(19/139)和27.3%(38/139)(P＜0.05);AF组和AFC组的5年生存率高于CF组,分别为53.6%(74/138)、57.6%(80/139)和43.8%(61/139)(P＜0.05);急性放射反应发生率AF组和AFC组高于CF组(P＜0.05).结论:加速分割放射治疗和加速分割放疗同期化疗能降低晚期鼻咽癌的局部复发率,提高5年生存率,患者能耐受急性放射反应.
作者：王仁生；刘文其；李坚；张勇；覃玉桃 刊期： 2003年第09期
背景与目的:宫颈冷刀锥切术(cold knife conization,CKC)是一种经典的诊治方法,本研究取62例宫颈锥切标本,分析宫颈上皮内瘤变(cervicalintraepithelial neoplasia,CIN)的组织学特点,探讨CKC在CIN诊断治疗中的临床意义.方法:对比分析62例行CKC的CIN患者病理标本与术前多点活检的病理所见.结果:CKC与术前多点活检结果完全符合者有44例(71%);有差异者18例(29%),其中4例术前多点活检为CIN2和CIN3,而锥切为CIN3和微小早期浸润癌.62例均为鳞状上皮病变,其中34例为CIN3或以上,病变主要位于移行区,常累及宫颈管,30例(88.2%)同时累及≥2个象限,37例(59.7%)有HPV感染,31例(50%)鳞状上皮化生,8例伴不同程度的非典型增生.切缘病变残留率分别是3.2%(≥CIN2)和8.1%(CIN1),低于文献报道的宫颈环形电切(loop electrosurgicalexcision procedure)的残留率.56例患者随访4个月～14年,均无复发,3例术后妊娠分娩.结论:宫颈锥切在宫颈CIN的诊治中仍有其优势.
作者：张洵；李凌；章文华；李淑敏 刊期： 2003年第09期
背景与目的:近年来有报道,应用逆转录-多聚酶链反应(reversetranscription-polymerase chain reaction,RT-PCR)技术检测有关肿瘤细胞标志物的mRNA表达来判断淋巴结转移情况,可以获得较高的检测灵敏度.本研究的目的在于探讨RT-PCR检测癌细胞淋巴结转移的临床意义.方法:应用RT-PCR技术检测患者腋窝淋巴结中MUC1和keratin19的mRNA表达,结合HE染色结果判断有无发生腋窝淋巴结转移.HE染色阴性患者随访3年.结果:86例肿瘤组织中可检测出MUC1和keratin19的表达,而正常淋巴结中未发现.在37例HE染色淋巴结阴性的病例中,有11例(29.7%)的keratin19检测结果阳性,这部分病例的3年复发率为45.5%,而keratin19表达阴性的病例其3年复发率仅为12.5%(P＜0.01).结论:RT-PCR检测出的MUC1和keratin19在淋巴结中的表达可作为乳腺癌转移的参考标志,有助于对乳腺癌预后的判断.
作者：郝新保；付京；邱福海 刊期： 2003年第09期
背景与目的:声门上喉鳞癌的预后较差,大量研究显示其预后与多种因素有关,但诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)和碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)表达与其预后的研究未见报道.本研究旨在探讨iNOS和bFGF表达在判断声门上喉鳞癌预后中的价值.方法:用LSAB法结合病理图像分析系统对64例声门上喉鳞癌组织中iNOS和bFGF蛋白的表达进行检测,研究二者与颈淋巴结转移、肿瘤复发和预后的关系.结果:(1)颈淋巴结阳性者iNOS和bFGF蛋白表达的阳性目标值分别为33.2±8.8和36.1±7.8,明显高于颈淋巴结阴性组的27 3±7.4和24.5±7.5;术后复发者iNOS和bFGF蛋白阳性目标值分别为36.9±1.7和34.6±2.0,高于无复发者的29.1±1.3和27.2±1.4,差异均有统计学意义(P＜0.05).(2)颈淋巴结阳性者的5年生存率低于阴性者(31.0%vs 57.1%).iNOS蛋白阳性表达者的5年生存率低于阴性表达者(40.0%vs 77.8%),bFGF蛋白阳性表达者与阴性表达者间5年生存率的差异无统计学意义(P＞0.05).(3)Cox模型多因素回归分析显示,颈淋巴结转移、iNOS蛋白表达和术后放疗对生存的影响有统计学意义,T分期和bFGF蛋白表达不是独立的预后因素.结论:iNOS蛋白表达是独立的预后因素,但iNOS和bFGF表达对声门上喉鳞癌预后的预示作用仍需作进一步的前瞻性研究.
作者：黄湛；曾宗渊；彭汉伟；夏良平；侯景辉 刊期： 2003年第09期
消减抑制杂交(suppression subtractive hybridization,SSH)是近提出的一种以抑制PCR为基础的差异显示基因克隆技术.该方法具有简便易行、特异性高、能分离出丰度较低的特异性片段等优点,并已成功应用于肿瘤、发育生物学、免疫调控等方面的研究,本文简述其原理、方法、及在肿瘤研究中的应用进展,并对其方法的优缺点和应用前景进行分析.
作者：梁莉；丁彦青；石益民 刊期： 2003年第09期
MAGE基因在许多恶性肿瘤细胞中表达,其产物是一种肿瘤排斥抗原,能诱导细胞毒性T淋巴细胞(CTL)特异性识别和杀伤肿瘤细胞,在肿瘤免疫治疗中具有重要意义.本文就MAGE基因与肿瘤的关系作一综述.
作者：徐建中；林山 刊期： 2003年第09期
背景与目的:在评估4种EB病毒抗原酶联免疫吸附法的基础上,探讨优化抗重组EB病毒抗原双重抗体检测应用于血清学诊断鼻咽癌.方法:收集广州地区57例治疗前鼻咽癌患者和58例健康成人的血清.应用EB病毒特异抗原(谷胱甘肽转移酶重组融合蛋白)为基础的4种免疫酶联吸附法,即EBNA1-IgA,EBNA1-IgG,Zta-IgA和Zta-IgG检测血清中抗EB病毒的抗体水平.结果:EBNA1-IgA的灵敏度(0.9123)和阴性预测值(0.9074)是单独使用4种ELISA实验中高的.Zta-IgA具有高的正确率(n,0.8870)和Youden指数(J,0.7738).当评估配对的ELISA时,EBNA1-IgA和Zta-IgA双重阳性的所有指标是4种双重阳性实验中高的.5例EBNA1-IgA阴性的鼻咽癌患者呈Zta-IgA阳性,而7例Zta-IgA阴性的鼻咽癌患者呈EBNA1-IgA阳性.结论:EBNA1-IgA酶联免疫吸附的单独检测在血清学诊断鼻咽癌时优于其他3项(EBNA1-IgG、Zta-JgA 和Zta-IgG)单独酶联免疫吸附检测.EBNA1-IgA和Zta-IgA两项的组合应用在血清学诊断鼻咽癌时有互补作用,是血清学检测的合适组合.
作者：顾耀亮；张昌卿；吴子柏；宗永生；梁英杰；陈跃龙 刊期： 2003年第09期
背景与目的:LRRC4是作者近克隆的一个新基因,该基因在原发性脑肿瘤活检标本中明显表达下调.本研究旨在研究LRRC4基因是否具有抑制脑肿瘤生长的能力.方法:LRRC4基因的全长编码区被亚克隆至表达载体pcDNA3.1中,应用脂质体转染的方法将重组的质粒载体导入胶质母细胞瘤细胞系U251,经G41 8筛选,建立稳定表达LRRC4基因的U251的细胞系.采用细胞增殖实验、软琼脂实验、肿瘤形成实验来考察LRRC4基因表达对于细胞生长和肿瘤形成的影响.结果:经过脂质体转染和筛选,建立了稳定表达LRRC4全长编码区的U251细胞系,用于进一步实验.比较未转染组和转染空白载体组,Northern blot实验证实转染了LBRC4基因的细胞LRRC4 mRNA的表达增强.细胞增殖一定时间后,转染LRRC4基因的细胞较未转染细胞的生长速度明显减慢,克隆形成率明显降低.将这些细胞注射入无胸腺裸鼠体内,40天后处死裸鼠,测量肿瘤大小,结果显示,转染LRRC4基因的细胞形成的肿瘤明显小于对照组.结论:LRRC4基因可转染于人脑胶质母细胞瘤细胞系U251.LRRC4在U251细胞的表达有抑制瘤细胞增殖和抑制裸鼠移植瘤的形成和生长的作用.
作者：王洁如；李小玲；范松清；谭琛；向娟娟；唐珂；王蓉；李桂源 刊期： 2003年第09期
背景与目的:目前癌症基因组学研究(Cancer Genomic Projects,CGP)急需建立一种与大量候选基因再筛查和功能分析相配套的高通量下游检测技术.本研究旨在建立冰冻组织特定区域的定点捕获和组织阵列制作技术,以便在相同实验条件下高效检测各类胃粘膜病变的基因表达特点.方法:使用自制的组织微阵列制作装置,在0.7 cm2的佳切割温度复合物(optimal cutting temperature compound,OCT)载体上制作含30个组织点的胃癌/粘膜冰冻组织特定区域的微阵列.采用组织病理学和针对Caspase-3的免疫组织化学染色(immunohistochemistry,IHC)以及mRNA原位杂交技术(mRNA-in situ hybridization,RISH),对组织微阵列的特点加以鉴定.结果:组织学观察显示,定点捕获的精确度较高;各组织点较好地保持了原有的形态.IHC和RISH的结果表明,Caspase-3在非癌胃粘膜组织、癌前病变组织和胃癌组织中的检出率分别为100.0%,66.7%,20.0%和90.0%,60.0%,1 5.4%.除因脱片和卷边所致的组织点不匹配外,两者结果的吻合度为100%.结论:本研究建立的冰冻组织微阵列技术使高效而准确地分析大量冰冻标本的组织学和细胞/分子遗传学特点成为可能,它在包括癌症基因组学在内的肿瘤相关基因筛选和功能分析中有着广泛的应用前景.
作者：孙媛；孔庆友；陈晓燕；王晓炜；刘佳；李宏 刊期： 2003年第09期
