背景与目的:死亡相关蛋白激酶DAPK1失活是影响非小细胞肺癌患者生存的独立因子,过表达的DAPK1可以诱导肿瘤细胞凋亡,抑制肿瘤转移,但抑制转移的机制尚未完全清楚.本文探讨DAPK1基因抑制高转移性肺癌PGCl3细胞生长及转移的可能机制.方法:利用基因重组技术构建含DAPK1基冈开放读码框(ORF)的真核表达载体pcDNA3.1-DAPK1,用脂质体LipofectAMINE2000介导转染PGCl3细胞系,检测转染后PGCl3细胞的生长曲线、体外软琼脂克隆形成率、体外侵袭、运动和粘附能力的变化,同时检测了胶原酶活性,p53,bcl-2基因表达的变化.结果:转染DAPK1基因的细胞生长比空白组及pcDNA3.1转染组减缓;体外软琼脂克隆形成率下降P＜0.05;pcDNA3.1-DAPK1转染组体外侵袭能力是空白组的68.5%,而pcDNA3.1转染组是空白组的88.0%;pcDNA3.1-DAPK1转染组运动能力是空白组的87.3%,pcDNA3.1转染组是空白组的95.7%;pcDNA3.1-DAPK1转染组粘附能力是空白组的62.7%,pcDNA3.1转染组是空白组的91.2%;各组的胶原酶变化不明显;pcDNA3.1-DAPK1转染组p53基因表达升高,bcl-2基因下凋.结论:DAPK1基因的过表达可以在一定程度上逆转PGCl3细胞的恶性表型,使PGCl3细胞生长受抑制,体外侵袭、运动和粘附能力下降,p53基因表达的上调及bcl-2基因表达下调,这些变化是DAPK1抑制非小细胞肺癌转移的可能原因.
作者：张海涛；朱振宇；冯哲玲；李秀英；李民友；马涧泉；梁念慈 刊期： 2004年第05期
背景与目的:乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)X蛋白是一个广义反式作用因子,同原发性肝癌的发生发展密切相关,由于其功能同蛋白-蛋白间相互作用有关,故本研究利用酵母双杂合体系筛选并鉴定HBV X蛋白结合蛋白.方法:聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)法扩增HBV X基因序列,酵母双杂合体系3构建饵质粒pAS2-1-X,进行序列测定后转化入酵母菌AH109,以Westernblot法验证X-BD融合蛋白在酵母细胞中的正确表达.pAS2-1-X及正常成人肝细胞cDNA文库共转化酵母细胞,通过选择性培养、β-半乳糖苷酶活性测定筛选阳性菌落,分离实验及交合实验排除假阳性,扩增阳性克隆的目的基因并进行序列测定,检索其同源序列.结果:成功构建了pAS2-1-X饵质粒,Western blot证实转化的酵母细胞能正确表达X-BD融合蛋白,pAS2-1-X及正常成人肝细胞cDNA文库共转化酵母细胞后,选择性培养共长出97个菌落,β-半乳糖苷酶活性测定、分离实验及交合实验后筛选出1个阳性克隆,其cDNA插入片段与Fis基因高度同源.结论:通过酵母双杂合体系筛选出一个在酵母细胞内能与X蛋白结合的Fis蛋白.
作者：李丹；王小众；陈治新；黄月红；于皆平；陶其敏 刊期： 2004年第05期
背景与目的:抑制端粒酶活性可以抑制细胞端粒延长,进而抑制永生细胞的增殖.为了探讨以端粒酶为靶的肺癌基因治疗可能性,本实验观察反义人端粒酶逆转录酶组分(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)cDNA对A549肺癌细胞的端粒酶活性和细胞增殖的抑制作用.方法:RT-PCR扩增hTERT mRNA 5′起始端835 bp的cDNA,分别正向和反向插入到逆转录病毒表达载体pLXSN质粒中,转染包装细胞PT67后获得重组病毒,病毒感染肺癌A549细胞.Western blot检测hTERT蛋白表达,TRAP法检测端粒酶活性,倒置显微镜观察细胞形态变化和绘制细胞生长曲线了解细胞增殖情况,流式细胞仪和DNA片段电泳观察凋亡情况.结果:反义hTERT作用肺癌A549细胞后hTERT蛋白表达下降,端粒酶活性被抑制,细胞增殖受到抑制并出现明显的细胞凋亡.结论:反义hTERT对肺癌细胞A549端粒酶活性具有明显的抑制作用,抑制细胞生长,促进细胞凋亡,hTERT有可能成为肺癌基因治疗靶点.
作者：田凤军；王智勇；马俊义；赵云霞；卢炜 刊期： 2004年第05期
背景与目的:在前期工作中,我们经计算机序列分析发现,在乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)基因组增强子Ⅰ上游1047～1059 bp存在P53样应答元件结合序列5′-TGCC(G)TTGCCT-3′,体外实验应用凝胶迁移方法(EMSA和EMSSA)发现这段序列与P53蛋白能够进行特异性结合.本实验拟观察肝癌细胞中P53蛋白与HBV基因组P53样应答元件结合序列之间的关系.方法:报告基因质粒pX-CAT上游为X基因增强子和启动子序列,其中含有P53样应答元件结合序列5′-TGCGTTGCCT-3′.首先用PCR方法将pX-CAT质粒中5′-TGCGTTGCCT-3′进行点突变,成为5′-TGTATTGTAT-3′,以破坏P53样应答元件结合序列.将pX-CAT和变异后的pX-CAT(mpX-CAT)分别单独或与pCMV-p53质粒共转染HepG2细胞,通过检测报告基因CAT的活化情况,观察P53蛋白与这段DNA序列的作用关系.将HBV基因P53样应答元件结合序列反向构建于真核表达质粒pZeoSV2中(αpZeoXP),转染HepG2.2.15细胞并稳定筛选,以封闭HBV基因上P53样结合位点,观察细胞中P53/P21蛋白表达的改变,以及细胞周期、细胞凋亡的变化.结果:HepG2细胞中,报告基因CAT活性在pCMV-p53与pX-CAT共转染组较pX-CAT单独转染组明显升高(1.353 vs 0.738,P＜0.05),而mpX-CAT单独转染组CAT活性则明显降低(0.304),即使与pCMV-p53共转染CAT活性也较低(0.402).与对照组相比,稳定转染了αpZeoXP的HepG2.2.15细胞中,P53、P21蛋白表达水平降低;细胞周期检测显示,与对照组相比,处于S期的细胞数增多(16.37%vs 9.48%),而细胞凋亡数减少(0.95%vs7.84%).结论:P53可促进pX-CAT报告基因在细胞内的表达,进一步提示P53与HBV增强子上游5′-TGCC(G)TTGCCT-3′序列存在结合作用,二者作用可能通过导致细胞内P53蛋白半衰期延长,而使细胞中P53及其下游基因P21蛋白表达水平和活性升高.
作者：曲建慧；朱明华；林静；倪灿荣；李芳梅；祝峙；于观贞 刊期： 2004年第05期
背景和目的:有研究表明核因子κB(nuclear factor κB,NFκB)与体外血管生成有关,但其与卵巢癌血管生成的关系未见报道.本研究旨在探讨NFκB在鸡胚尿囊膜(chick chorioallantcic membrane,CAM)上人卵巢癌(human ovarian carcinoma,HOC)血管生成中的作用及作用机制.方法:将指数生长期的HOC细胞株TYK细胞以1×109/只鸡胚接种于CAM以建立HOC CAM模型.1、20只鸡胚应用ELISA法检测接种细胞后0 h、6 h、12 h、24 h、48 h、72 h时间点NFκB、bFGF、αV β3的水平;2、检测NF κB、bFGF和αVβ3在CAM上人卵巢癌血管生成过程中的水平及其对血管生成的影响.另将80只鸡胚分为6组,细胞接种后6 h,不同组CAM上分别加入生理盐水(normal saline,NS)(对照组,16只)、抗NF κB(A组,16只)、抗bFGF(B组,16只)、抗NFκB+抗bFGF(D组,8只)、接种后12 h加入抗αV β3(C组,16只)和抗NF κB+抗αVβ3(E组,8只)抗体.加抗体后48h NS、A、B、C组各取出8只鸡胚,用ELISA检测CAM中NFκB、bFGF和αV β3的水平.其余的鸡胚孵育5天,用图像分析法检测各组CAM血管面积比(vessel area/area,VA/A).结果:人卵巢癌CAM模型上NF κB、bFGF水平自6h、αV β3水平自接种后12 h开始显著增加(P＜0.01)(0.185±0.01、0.771±0.16、0.231±0.02),三者水平均在48h达到高峰(P＜0.01)(0.337±0.01、1.639±0.01、0.349±0.01).在各个时间点bFGF的水平均显著高于NF κB及αV β3(P＜0.01),NF κB及αV β3的水平差异无显著性(P＞0.05).A、B组NF κB、αV β3与bFGF水平显著低于NS组(P＜0.01),(0.098±0.02、0.156±0.02、0.329±0.01;1.106±0.33、0.412±0.01、1.591±0.13;0.138±0.03、0.114±0.02、0.322±0.01).C组αVβ3水平与NS组相比显著降低(P＜0.01),(0.119±0.02、0.322±0.01),而NFκB、bFGF表达与NS组相比无显著变化(P＞0.05).A、B、C、D、E五组VA/A均显著低于NS组(P＜0.05)(26.10±13.71、34.12±4.85、25.50士11.41、14.32±3.11、24.36±4.95、66.62±17.64),D组VA/A与A组相比则显著降低(P＜0.05)(14.32±3.11、26.10±13.71),而A、B、C、E四组间差异无显著性(P＞0.05).结论:NFκB通过上调bFGF与αV β3的表达与bFGF共同促进卵巢肿瘤血管的生成;它不仅可作为血管生成的标记物,还可成为卵巢癌的治疗靶.
作者：杨丽华；王凯峰；周轶萍；李玛琳 刊期： 2004年第05期
背景与目的:目前已经肯定,抑癌基因BRCA1是细胞周期监测点调控的重要因子,但BRCA1在细胞周期阻滞中的作用机制尚不完全清楚.本研究的目的是探讨Gadd45在BRCA1诱导的细胞周期阻滞中所起的作用.方法:应用转染、流式细胞仪细胞筛选(分选)、Western blot检测分析BRCA1诱导Gadd45的表达;利用CAT酶活性测定的方法检测外源BRCA1对Gadd45启动子所起作用;以流式细胞周期分析方法检测反义Gadd45转染对BRCA1诱导的细胞G2/M期阻滞的影响;采用细胞生长集落形成分析反义Gadd45转染HeLa、HCT116细胞在BRCA1诱导的细胞生长抑制过程所起的作用.结果:外源转染BRCA1可诱导Gadd45蛋白的表达;BRCA1激活Gadd45启动子的转录;反义Gadd45可显著阻遏BRCA1诱导细胞G2/M期阻滞;反义Gadd45转染可明显降低BRCA1对HeLa、HCT116细胞集落形成的抑制作用.结论:Gadd45作为BRCA1的下游调控基因,在BRCA1诱导的细胞G2/M期阻滞过程和生长抑制中起介导作用.
作者：宋咏梅；童彤；付明；董立佳；金顺钱；吴旻；詹启敏 刊期： 2004年第05期
背景与目的:胃癌是一种多因素相关疾病,幽门螺杆菌(Helicobactor pylori,HP)感染是导致胃癌发生的原因之一,但其分子机制不明.错配修复基因是保证DNA复制高保真度的重要基因,与消化道肿瘤发生具有密切关系.本研究通过检测HP感染和非感染胃癌组织及癌旁粘膜组织和慢性浅表性胃炎粘膜组织中错配修复基因hMSH2和hMLHl蛋白的表达,探讨hMSH2、hMLHI基因在胃癌发生中的作用和HP致癌的可能机制.方法:采用尿素酶快速检验法对HP感染情况进行检测;利用免疫组化方法检测胃癌及癌旁粘膜和胃炎粘膜组织中hMSH2和hMLHl的表达情况,采用x2检验对数据进行统计学分析.结果:hMSH2在胃癌组织中的阳性率(67.1％),显著高于癌旁粘膜组织(35．5％)和胃炎粘膜组织(42.1％)(P<0.05),而后两者无显著性差异(p>0.05).癌组织中低分化腺癌的hMSH2阳性率(81.1％)显著高于高中分化腺癌(54.5％)和粘液癌(52.9％)(P<0.05);后两者间无显著性差异(p>0.05).hMLHI的阳性率在胃癌组织(81.6％)、癌旁粘膜组织(90.8％)和胃炎组织(89.5％)间无显著性差异(P>0.05).hMLHl在粘液癌中的阳性率(47.1％)显著低于高中分化腺癌(81.8％)和低分化腺癌(97.3％)(P<0.05),而后两者问无显著性差异(p>0.05).在HP感染和非感染胃癌组织中,hMSH2的阳性率分别为56.8％和81.3％,二者具有显著性差异(P<0.05);hMLHl的阳性率分别为77.2％和87.5％,二者无显著性差异(p>0.05).在HP感染和非感染癌旁粘膜组织中,hMSH2的阳性率分别为29.5％和43.8％;hMLHl的阳性率分别为86.4％和96.9％,均无显著性差异(p>0.05).在HP感染和非感染胃炎粘膜组织中,hMSH2的阳性率分别为38.5％和50.5％;hMLHI的阳性率分别为88.5％和91.7％,均无显著性差异(P>0.05).结论:hMSH2基因表达异常与胃癌有关,该基因高表达可能是胃癌的标志;HP感染引起hMSH2和hMLHl基因阳性率降低可能是其导致胃粘膜癌变的分子机制之一.
作者：马坚妹；王朝晖；刘敏；王玫；张岩；吕申；刘丽娜；许国旺 刊期： 2004年第05期
背景与目的:ret基因重排活化与乳头状甲状腺癌密切相关,但它致癌的分子机制还不清楚,本文将通过研究DNA双链断裂(double-strand breaks,DSBs)感应分子毛细血管扩张共济失调症突变蛋白ATM(mutatedin ataxiatelangiectasia)与原癌基因Ret重排活化蛋白PTC1的相互作用,探讨ret重排致癌的分子机制.方法:以抗ATM抗体免疫沉淀的ATM为激酶,抗HA抗体免疫沉淀的PTC1的TK结构域为底物,进行体外磷酸化,检测ATM对ret-TK结构域的磷酸化作用;分别分离COS7细胞胞浆和胞核蛋白,研究PTC1过表达对ATM-LZPR定位的影响;用磷酸化p53抗体检测PTC1过表达对p53磷酸化水平的影响;流式细胞术分析PTC1过表达对细胞周期的影响.结果:体外磷酸化实验证明TK可以被ATM体外磷酸化;Western印迹检测发现单独表达LZPR时其在胞浆、胞核均有表达,而PTC1与LZPR共表达后,LZPR结构域仅在胞浆表达;用磷酸化p53抗体检测发现过表达PTC1抑制了ATM对p53的磷酸化作用,引起细胞G1/S期周期阻滞.结论:PTC1可能通过使ATM滞留于胞浆,干扰ATM对p53的磷酸化及其对细胞下游靶基因的转录活化功能,从而使细胞周期检查点机制失控.
作者：铁轶；毛建平；刘斌；宋宜；董燕；孙志贤 刊期： 2004年第05期
背景与目的:Stathmin作为细胞信号转导分子在细胞分化及恶性肿瘤发生、发展上发挥重要作用.本研究旨在探讨Stathmin基因在人成骨肉瘤细胞中的表达,并探讨阻断其表达对该肿瘤细胞的生物学行为的影响.方法:RT-PCR及原位杂交法检测2个人成骨肉瘤细胞系及45例人成骨肉瘤组织中Stathmin基因表达情况;以高表达Stathmin基因的人成骨肉瘤细胞系SOSP-9607为靶细胞、反义Stathmin(ASODN)为阻断剂,通过MTT实验观察ASODN对该细胞系的生长抑制作用,并用流式细胞仪分析其对细胞增殖周期的影响.结果:Stathmin基因在2个成骨肉瘤细胞系高表达,45例成骨肉瘤组织中24例呈阳性表达(阳性率为53.3%),10例正常组织中2例呈弱阳性表达,Stathmin在人成骨肉瘤组织的表达与正常组织中的表达有显著性差异(P＜0.05).ASODN明显抑制成骨肉瘤细胞的生长(P＜0.05).SOSP-9607在ASODN作用下,细胞分裂阻滞在分裂期的中期,并诱导细胞发生凋亡.结论:Stathmin基因在人成骨肉瘤中高表达,该基因有望成为成骨肉瘤生物治疗中的重要靶点.
作者：张惠中；高萍；闫露；林芳 刊期： 2004年第05期
背景与目的:支气管上皮细胞的癌变是一个多基闲参与、多阶段的复杂过程,但癌变机理仍不清楚,应用蛋白质组学技术研究此过程有可能识别癌变相关蛋白质,对揭示肺鳞癌癌变机制具有重要的意义.本研究的目的是优化支气管上皮组织的蛋白质样品制备方法,建立人支气管上皮癌变各阶段组织的2-DE图谱并进行差异分析,为鉴定肺鳞癌癌变相关蛋白质奠定基础.方法:收集、筛选人支气管正常上皮、鳞状上皮化生、不典型增生和上皮浸润癌组织标本.改良的脱氧胆酸-三氯醋酸(deoxycholate-trichloroaetic acid,DOC-TCA)法提纯支气管上皮总蛋白质,应用固相pH梯度双向凝胶电泳分离各阶段组织的总蛋白质,凝胶经银染显色后,用lmageMaster 2D软件分析图谱,比较差异表达蛋白质.应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assistedlaser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)得到相应的肽质指纹图谱(peptide mass fingerprint,PMF),然后搜索数据库鉴定部分差异蛋白质.结果:应用改良的DOC-TCA法提纯总蛋白质进行双向电泳,获得了分辨率高、重复性好的人支气管上皮组织的双向电泳图谱,支气管正常上皮、鳞状上皮化生、不典型增生和上皮浸润癌组织凝胶的平均蛋白质点数依次为1 189.50±39.89、1227.00±37.90、1273.00±43．31和1326．00±66.63.重复性实验表明,同一例鳞状化生组织3块凝胶的平均点数为1216±75,平均匹配点数为1 082±67,匹配率达89.3％,且3块胶在蛋白质点位置上有较好的重复性,不胶间蛋白质点在IEF方向的偏差是(0．865±O．247)am,在SDS-PAGE方向上的偏差为(0．971±O．104)mm.比较32例组织的双向凝胶电泳图谱发现,四阶段的平均总蛋白质点数存在明显差异(P<0．05),且前一阶段与后一阶段间的差异蛋白质点数分别为31.50±7.67.41.00±9.7.56.00±8.96.在不型增生与上皮浸润癌的差异点中,随机取23个蛋白质点进行肽质指纹图分析,鉴定出一些与细胞增生、分化、周期调控、信号转导或肿瘤发生等有关的蛋白质.结论:(1)改良的DOC-TCA沉淀法是一种较好的支气管上皮组织蛋白质样品制备法;(2)建立了分辨率较高且重复性好的人支气管上皮组织癌变各阶段的2．DE图谱,鉴定了一些可能与支气管上皮癌变相关的差异表达蛋白质,为进一步探讨肺鳞癌癌变机理及筛选肺鳞癌的特异性分子标志物奠定了基础.
作者：吴晓英；李萃；肖志强；李建玲；冯雪萍；易红；李茂玉；陈主初 刊期： 2004年第05期
背景与目的:ZD1839是一种喹唑啉类化合物,它是一种口服的选择性的表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂,已被美国食品药品管理局批准用于治疗晚期非小细胞肺癌.鼻咽癌是一种存在表皮生长因子受体表达的上皮源性的恶性肿瘤,ZD1839对其作用如何还未见有报道.本实验通过体外研究初步探讨ZD1839在鼻咽癌治疗中的可能价值.方法:以人鼻咽癌细胞系CNE1、CNE2、SUNE1作为研究对象,采用MTT法检测ZD1839对这些细胞株的抑制作用,同时检测ZD1839与顺铂或5-氟脲嘧啶(5-FU)联合应用对CNE2的作用情况,Bürgi法分析联合用药效果,并用流式细胞仪测定细胞周期分布和凋亡比率.结果:ZD1839能够抑制CNE1、CNE2、SUNE1细胞的增殖,并且这种作用呈剂量依赖性,ZD1839抑制CNE1、CNE2、SUNE1细胞增殖的IC50值分别是3.9 μmol/L、5.6 μmol/L和5.5 μmol/L.ZD1839能增强顺铂及5-FU的抗CNE2作用,Bürgi修正公式所得Q值分别是1.19±0.02和1.12±0.10.ZD1839浓度为0、1.95、3.9、7.8、15.6、31.25 μmol/L时,CNE2细胞G0/G1期的比值分别是(46.8±1.7)%、(48.8±1.6)%、(51.3±1.3)%、(54.0±1.3)%、(61.5±2.2)%、(71.2±1.4)%.S期的比值分别是(37.5±1.3)%、(35.8±1.6)%、(31.8±2.1)%、(34.3±2.7)%、(27.2±2.9)%、(27.6±2.4)%.G2/M期的比值分别是(15.7±0.4)%、(15.3±0.1)%、(16.9±0.9)%、(11.7±1.4)%、(11.3±0.7)%、(1.1±0.8)%.ZD1839浓度为0、1.95、3.9、7.8、15.6、31.25、62.5μmol/L时CNE2细胞的凋亡比率分别为(1.6±0.3)%、(1.7±0.3)%、(2.3±0.4)%、(3.3±0.4)%、(3.9±0.8)%、(8.0±1.1)%和(14.3±2.3)%.结论:ZD1839能够抑制鼻咽癌细胞系的增殖,并且能够增强顺铂及5-FU对鼻咽癌细胞系的抑制作用,ZD1839能够诱导CNE2细胞停滞于G1期,较高浓度的ZD1839可能诱导CNE2细胞凋亡.
作者：王树森；管忠震；姜文奇；林桐榆；张力 刊期： 2004年第05期
背景及目的:以往的研究认为,饮用河水、池塘水等易被污染的地表水,其结直肠癌发病率明显高于其他水源,但少见直接基于人年发病率的前瞻性队列研究,本研究旨在通过调查队列人群,探讨不同饮水类型与结直肠癌发病的关系.方法:以浙江嘉善县1989年5月～1990年4月期间,参加结直肠癌筛检的10个乡镇30岁及以上人群共64115人为研究队列,按不同饮水类型建立5组不同的暴露人群,通过肿瘤登记、肠癌报卡和死亡登记等系统对队列进行随访,观察结直肠癌发病及人群死亡截尾情况.随访11年后,以个人为单位计算人年,分析不同饮水类型的结肠、直肠癌人时发病率,并应用Poisson回归估计调整人群特征及吸烟等混杂因素后的相对危险度(RR).结果:长期饮用自来水、河水、泯沟水、混和水和井水者结直肠癌人时发病率依次增高,分别为29.61/10万、32.67/10万、33.45/10万、40.87/10万和58.67/10万;以发病率低的饮用自来水者为参照,只有饮用井水者与之有显著性差异(P＜0.05).多因素Poisson回归调整混杂因素后,也只有饮用井水与结肠癌、直肠癌和结直肠癌发病有显著性相关,RR值分别为1.741(95%CI 1.001～3.029)、2.228(95%CI 1.432～3.466)和2.022(95%CI1.432～2.854).结论:长期饮用井水是嘉善地区结直肠癌发病的危险因素,尤其是对直肠癌的发病来说.
作者：陈坤；俞维萍；马新源；姚开颜；郑树；蒋沁婷 刊期： 2004年第05期
背景与目的:复发转移是结直肠癌术后非常重要的预后因素,而复发转移的相关因素是大肠癌根治术后个体化随访和辅助治疗的依据.本文旨在探讨结直肠癌根治术后复发转移的相关临床病理因素.方法:应用单因素和多因素分析方法,回顾性分析1990年至1999年692例结直肠癌根治术后病例的临床病理因素.结果:复发转移组3、5年生存率分别为33.1%和19.7%,非复发转移组分别为92.8%和86.1%.单因素分析显示,Dukes'分期、淋巴结转移、肿瘤部位、分化程度、大体类型、肠壁浸润深度与结直肠癌术后复发转移有关.多因素分析显示,淋巴结转移、肿瘤部位是影响结直肠癌术后复发转移的预后因素.分别进行远处转移和局部复发多因素分析显示,淋巴结转移是远处转移和局部复发的预后因素,浸润深度与远处转移有关,而肿瘤部位与局部复发有关.结论:淋巴结转移是结直肠癌术后复发转移或远处转移、局部复发重要的预后因素.浸润深度是术后远处转移的重要预后因素,肿瘤位于直肠患者术后局部复发的风险较大.
作者：梁君林；万德森；潘志忠；周志伟；陈功；李力人；卢震海；伍小军 刊期： 2004年第05期
背景与目的:国内外很少报道原发性颈段气管腺样囊性癌的外科治疗,本研究探讨13例该类患者外科治疗的有效性.方法:进行气管袖状切除并一期吻合术9例(平均切除长度34.8 mm),其中3例同时进行喉松解术,有8例喉功能得到保留;全喉切除并气管造瘘术2例;气管部分切除并自体组织瓣修复术2例.13例患者中4例为完全切除,9例为不完全切除(10次)结合术后放疗.结果:未出现围手术期死亡,气道狭窄2例,喉返神经麻痹1例.7例在随访期内死亡,其中4例死于局部复发,2例死于并发症,1例死于远处转移.总的5年与10年生存率分别为69.2%(9/13)与50.0%(5/10),完全切除组分别为75.0%(3/4)与75.0%(3/4),不完全切除组分别为55.0%(5/9)与33.3%(2/6);原发灶非气管外侵犯者分别为83.3%(5/6)与83.3%(5/6),气管外侵犯者分别为57.1%(4/7)与0(P=0.001).结论:气管袖状切除并一期吻合术是原发性气管腺样囊性癌患者长期生存和功能保留的主要治疗手段之一.
作者：黄文喜；徐震纲；唐平章；祁永发；陈伟泉 刊期： 2004年第05期
背景与目的:口干燥症是鼻咽癌放疗后常见的后遗症之一,严重影响患者的生存质量.本研究旨在探讨鼻咽癌放疗后口干燥症的严重程度及其对日常生活的影响.方法:在中山大学肿瘤防治中心鼻咽科门诊选择放疗后满1年以上复查的鼻咽癌患者136例,复查时进行面对面访谈式的口干问卷调查,根据调查结果分析口干燥症的严重程度及对生存质量的影响.结果:136例患者均有不同程度的口干,其中73.5%的患者有中度至重度的口干.82.4%的患者因口干经常要喝水来帮助讲话;92.6%的患者因口干经常要喝汤水来帮助吞咽;91.2%的患者饮食习惯有明显改变,只能吃半流质食物、软食或干饭加汤水;61.3%的患者在夜间因口干而醒来需喝水;75.0%的患者诉放疗后牙齿有不同程度病变.结论:73.5%行常规放疗的鼻咽癌患者有中度至重度的口干.鼻咽癌放疗后口干燥症对患者的讲话、吞咽、睡眠有严重影响,患牙病的几率增加.
作者：刘学奎；曾宗渊；洪明晃；张爱兰；崔念基；陈福进 刊期： 2004年第05期
背景与目的:C-erbB2、C-erbB3和C-erbB4均为表皮生长因子受体家族成员,已有的研究表明C-erbB2与卵巢恶性肿瘤的发生、发展相关,但C-erbB3和C-erbB4与卵巢恶性肿瘤的临床病理关系尚未确定,本研究旨在进一步探讨C-erbB2、C-erbB3、C-erbB4表达与卵巢恶性肿瘤的临床病理关系.方法:采用免疫组织化学法对49例卵巢恶性肿瘤,21例卵巢良性肿瘤和19例正常卵巢组织进行C-erbB2、C-erbB3、C-erbB4表达的测定并分析其与临床病理及预后的关系.结果:(1)卵巢恶性肿瘤组织中C-erbB2、C-erbB3、C-erbB4表达阳性率分别为75.51%、69.39%和65.31%,明显高于正常卵巢组织(分别为21.05%、15.79%和21.05%)及卵巢良性肿瘤组织(分别为19.03%、23.81%和23.81%)(P＜0.05).(2)C-erbB2、C-erbB3、C-erbB4的阳性表达率与卵巢恶性肿瘤的组织学类型及分化级别无明显相关性(P＞0.05).(3)临床Ⅲ、Ⅳ期和腹水＞500 ml的患者肿瘤组织中C-erbB2、C-erbB3、C-erbB4阳性表达率分别为90.0%和91.3%、80.0%和82.6%、93.0%和82.6%,明显高于临床Ⅰ、Ⅱ期和腹水＜500 ml的患者(P＜0.05).(4)C-erbB2、C-erbB4表达阳性患者的累积生存率明显低于阴性患者的累积生存率(P＜0.01);Cox模型分析也表明C-erbB2、C-erbB4为影响卵巢恶性肿瘤患者预后的独立因素.结论:C-erbB家族阳性表达的卵巢恶性肿瘤患者预后不良.
作者：李力；钟艳萍；张玮；张洁清；姚忠强 刊期： 2004年第05期
背景与目的:评估肿瘤组织分裂间期的AgNOR定量分布已被广泛应用于肿瘤的诊断、疗效判断和预后评估.肿瘤免疫学证实肿瘤可诱发免疫抑制,测定T淋巴细胞核仁区的AgNOR活性表达可以探知T淋巴细胞的免疫活性状态.监测外周血T淋巴细胞AgNOR活性表达在食管癌方面的研究较少.本研究旨在探讨外周血T淋巴细胞AgNOR的活性检测在食管癌患者诊断中的应用价值.方法:检测75例健康人、276例食管癌患者的外周血,利用KL型肿瘤免疫图像分析系统检测AgNOR含量(AgNOR面积与细胞面积的比值,即I/S%);同时用微粒子酶免疫分析技术、双抗体夹心法与化学比色法分别检测癌胚抗原(CEA)、鳞状上皮细胞癌相关抗原(SCC)、恶性肿瘤相关物质群(TSGF)的表达.结果:(1)食管癌患者外周血T淋巴细胞AgNOR的活性表达(5.64±0.89)明显低于健康人(7.07±0.81)(P=0.000),灵敏度0.674,特异度0.920,Youden指数0.59,Roc曲线下面积为0.886.(2)食管癌患者AgNOR阳性率(67.4%)明显高于CEA(12.86%)、SCC(15.04%)、TSGF(36.49%),差异具有显著性意义(P＜0.001);AgNOR与CEA、SCC、TSGF间的相关性无统计学意义(P＞0.05).(3)食管癌患者AgNOR阳性率明显高于CEA+SCC+TSGF联合检测的阳性率(54.4%),差异具有显著性意义(P=0.018),而与AgNOR+CEA、AgNOR+SCC、AgNOR+CEA+SCC联合检测的阳性率相近,差异无显著性意义(P＞0.05);4种指标联合检测的阳性率(87.5%)明显高于单纯检测外周血T淋巴细胞AgNOR(P=0.000).4种指标联合检测的灵敏度0.875、Youden指数0.77、ROC曲线下面积0.955均高于单纯检测AgNOR.结论:食管癌患者存在明显的细胞免疫功能抑制;外周血T淋巴细胞AgNOR检测对食管癌患者的细胞免疫功能具有较高的辨别价值,对食管癌的筛查和诊断有一定的价值;联合检测SCC、CEA和TSGF可提高食管癌检测效率.
作者：王军业；戎铁华；梁伊仁；龙浩；陈巧伦；马国伟 刊期： 2004年第05期
背景与目的:免疫组化法检测胃癌淋巴结中的微转移灶方法简便,但敏感性差.同时应用多种抗体联合检测淋巴结的微转移情况,是否能提高其敏感性,克服免疫组化法的弱点尚有一些争议.本研究应用细胞角蛋白20(CK20)、上皮膜抗原(EMA)及肿瘤相关糖蛋白72-4(CA72-4)抗体对胃癌阴性淋巴结的微转移情况进行联合检测,旨在评价多种抗体联合检测微转移的应用价值.方法:选取1991年4月至1994年4月行手术切除的未见淋巴结转移的胃癌病例44例,收集其淋巴结蜡块共466个,分别以鼠抗人CK20抗体,鼠抗人EMA单克隆抗体,鼠抗人CA72-4单克隆抗体进行免疫组化染色,显微镜下根据染色结果确定其微转移情况,然后与各病例的临床病理及随访资料进行比较.结果:全组共有18例(40.9%)51个淋巴结(10.9%)发现微转移灶.应用三种抗体免疫组化染色后,检测到的微转移淋巴结数量分别为CK20 40个(8.6%),CA72-4 27个(5.8%),EMA 21个(4.5%).淋巴结微转移与否与患者的性别、年龄、肿瘤部位、组织类型及TNM分期无关(P＞0.05).有微转移的病例5年存活率为(61.11±11.49)%,无微转移的病例为(92.31±5.23)%(P=0.0113);转移淋巴结数≥3个者5年存活率为(44.44±16.56)%,＜3个者为(77.78±13.86)%(P=0.0196).结论:多种抗体联合检测胃癌淋巴结微转移有助于发现更多的微转移灶.
作者：王贵英；王士杰；李勇；王力利；王晓玲；宋振川；范立侨 刊期： 2004年第05期
背景与目的:国内有关老年恶性肿瘤发病趋势的研究较少,本文分析1973～1999年上海市区老年人泌尿系统常见恶性肿瘤的发病趋势.方法:按照国际疾病分类(ICD-9)三位数字进行编码.依据有关年份人口普查资料中的性别、年龄构成,用内插法和外推法估算各年的年龄组平均人口数.用世界标准人口计算每三年合并资料的标化发病率.发病率年均变化百分比用线性回归计算,并用病例数加权.结果:27年间,上海市区老年人群中男性前列腺癌、膀胱癌和肾癌的发病率呈上升趋势,年均变化率分别为6.60%、1.15%和5.30%,女性肾癌发病率迅速上升,年均变化率为4.58%.结论:27年间,上海市区老年男性前列腺癌、肾癌和膀胱癌发病率上升,女性膀胱癌发病率相对稳定.
作者：张薇；项永兵；刘振伟；方茹蓉；阮志贤；孙璐；高立峰；金凡；高玉堂 刊期： 2004年第05期
背景及目的:目前认为B细胞非霍奇金淋巴瘤(B-NHL)常伴随免疫抑制,CD4+CD25+-Tregs细胞是一种新型免疫抑制性调节细胞,在肿瘤的免疫抑制及免疫逃逸机制中起重要作用,但它在B-NHL患者外周血的分布情况及其免疫抑制中的作用目前尚不清楚.本文通过分析它在化疗前及化疗后B-NHL患者外周血中比例及变化规律,初步探讨B-NHL的免疫抑制机制,以及化疗对免疫抑制的影响,为有效干预患者免疫功能提供参考.方法:应用流式细胞仪检测39例初治化疗前的B-NHL患者、32例经4～6周期化疗后完全缓解或部分缓解的B-NHL患者和25例健康志愿者外周静脉血中CD3+、CD4+、CD8+及CD4+CD25+CTLA4+-T细胞的比例.结果:化疗前组患者淋巴细胞总数及CD4+T细胞比例、CD4/CD8比值均低于正常对照组[分别为(1.3±0.39)×109,(2.1±0.41)×109;(27.5±4.1)%,(32.9±5.8)%;0.9±0.21,1.31±0.4],但其CD4+CD25+-Tregs及CD4+CD25+CTLA4+-T细胞比例明显高于正常对照组[分别为(14.7±3.1)%,(8.4±2.5)%;(7.4±1.6)%,(5.1±1.4)%].尽管化疗组CD4/CD8比值(1.19±0.3)与正常组接近,但其淋巴细胞总数[(0.8±0.53)×109]低于初治组和正常对照组,CD4+CD25+-Tregs比例[(20.3±4.1)%]及CD4+CD25+CTLA4+-T细胞比例[(11.5±2.2)%]则明显高于化疗前组和正常对照组.结论:CD4+CD25+-Tregs在初治的化疗前和化疗后B-NHL患者外周血中比例升高,提示CD4+CD25+-Tregs可能是B-NHL免疫抑制的重要原因之一.
作者：史艳侠；张晓实；刘冬耕；李永强；管忠震；姜文奇 刊期： 2004年第05期
背景与目的:基质溶素(matrilysin,matrix metalloproteinases-7,MMP-7)在肿瘤浸润转移中具有重要作用,并与多种肿瘤的预后有关.本研究旨在探讨MMP-7的表达在喉癌浸润转移中的意义及其与预后的关系.方法:采用免疫组化方法检测70例喉癌和癌旁正常粘膜蜡块标本中MMP-7蛋白的表达,运用RT-PCR技术检测24例喉癌和癌旁正常粘膜冻存标本中MMP-7 mRNA水平的表达.结果:(1)免疫组化检测的70例喉癌组织中MMP-7蛋白表达的阳性率为77.1%(54/70),显著高于癌旁正常粘膜的5.7%(4/70)(P＜0.01).RT-PCR检测的24例喉癌组织中MMP-7 mRNA表达阳性率为75.0%(18/24),显著高于癌旁正常粘膜的4.2%(1/24)(P＜0.01).(2)MMP-7蛋白表达在T3-T4组高于T1-T2组(P＜0.01);淋巴结转移组高于非淋巴结转移组(P＜0.01).(3)MMP-7 mRNA表达在T3-T4组高于T1-T2组(2.908±0.891 vs.1.662±0.508,P＜0.01),淋巴结转移组高于非淋巴结转移组(2.958±0.827 vs.1.887±0.769,P＜0.01).(4)Kaplan-Meier生存曲线显示MMP-7蛋白表达强阳性组预后较弱阳性组及阴性组差(log-rank=4.7559,8.9513;P=0.0292,0.0028),而弱阳性组和阴性组的预后差异无显著性(log-rank=0.0314,P=0.8593).结论:MMP-7与喉癌浸润、转移及预后密切相关,可作为预测喉癌浸润转移潜能及评估预后的参考指标之一.
作者：孙亚男；李源；谢民强；金德均；李鹏 刊期： 2004年第05期
背景与目的:白介素-10(Interleukin-10,IL-10)属于Th2型细胞因子,在免疫反应的多个环节起重要作用,作为一种免疫抑制性细胞因子,IL-10参与了多种肿瘤的发生和发展.本研究探讨上皮性卵巢癌患者腹水中细胞因子IL-10水平与其腹腔免疫功能缺陷的关系.方法:用ELISA法检测32例上皮性卵巢癌患者术前血清及腹水、4个卵巢癌细胞株培养上清液及10个上皮性卵巢良性肿瘤患者血清与10个正常女性(对照组)血清中IL-10的含量.结果:(1)卵巢癌患者腹水中IL-10的水平显著高于其血清IL-10的水平[(159.78±51.20)ng/L vs(12.01±4.38)ng/L,P=0.0000];卵巢癌组血清IL-10水平[(12.01±4.38)ng/L]也显著高于良性肿瘤组[(3.79±2.40)ng/L,P=0.000]及正常对照组血清IL-10的水平[(4.45±2.69)ng/L,P=0.003];而良性肿瘤组与正常对照组血清IL-10水平无显著性差异(P=0.529).(2)卵巢癌患者腹水中IL-10的水平与临床分期有关,但与细胞学分级无关.(3)卵巢癌细胞株3ao、SKOV3、CAOV3及OVCAR细胞培养上清液中均检测到IL-10的存在.结论:卵巢癌患者腹水中高水平的IL-10可能与其腹腔免疫功能缺陷有关,卵巢癌细胞可能通过其自身IL-10的分泌以利于其腹腔内的扩散转移.
作者：周建维；程琪；谢幸；陈怀增；叶大风；吕卫国 刊期： 2004年第05期
背景与目的:喉癌复发是影响预后的重要因素,但对复发性喉癌患者的临床特点和影响预后因素的研究较少.本研究的目的是总结分析复发性喉癌患者的临床特点,探讨影响复发性喉癌患者预后的主要因素.方法:回顾性分析1990～1997年80例在中山大学肿瘤防治中心治疗的喉鳞癌复发患者的临床资料,应用Kaplan-Meier法进行生存分析,组间比较用log-rank检验,多因素分析采用Cox模型.结果:复发性喉鳞癌患者的复发部位包括局部复发、颈淋巴结复发及远处转移;本组80例患者总的3年、5年累积生存率分别为50.6%、34.6%;复发后行手术、手术加放疗和手术加化疗者共30例,5年累积生存率为:73.0%;喉鳞癌复发的时间为1～156月,中位时间为11月;复发部位为局部复发36例,颈淋巴结复发36例,4例为同时发生局部和颈淋巴结复发,1例为局部复发伴远处转移,3例为颈淋巴结复发伴远处转移;单因素分析显示:影响复发性喉鳞癌预后的主要因素是:复发部位、复发时间、复发后治疗方式、年龄分组;气管造瘘口周围复发组较喉腔内复发组预后差;颈淋巴结复发组较局部复发组预后差;远处转移组较未发生远处转移组预后差;复发后放疗、化疗组较手术组预后差(P＜0.05);多因素分析表明:年龄≥60岁、复发时间＜12月、远处转移及复发后行放疗、化疗者预后差(P＜0.05).结论:手术治疗或以手术为主的综合治疗是复发性喉鳞癌的首选治疗方式;年龄超过60岁、复发时间短于12个月、远处转移及复发后行放疗、化疗而未行手术治疗是影响预后的独立因素.
作者：陈艳峰；陈福进；杨安奎；曾宗渊；宋明；李秋梨 刊期： 2004年第05期
支原体是广泛存在于自然界的条件致病微生物,可能是唯一可以与真核生物共生,并可与哺乳动物细胞长期相互作用的原核生物.多种不同的肿瘤组织中可检测到支原体的存在,某些支原体的持续感染可导致哺乳动物细胞的转化、上调癌基因的表达并引起肿瘤细胞生物学行为的改变,提示支原体感染与肿瘤的发生有潜在的相关性.
作者：宁金鹰；寿成超 刊期： 2004年第05期
背景与目的:原发性腹膜后肿瘤常侵及大血管,手术关键是对血管的处理,尤其是对下腔静脉(inferior vena cava,IVC)的处理.在肾静脉平面以上结扎IVC被认为是极其危险的.本实验旨在探讨肾静脉平面以上结扎大鼠IVC、合并右肾切除及应用川芎嗪后的心脏血流动力学改变,以期为临床手术提供理论依据和具体指导.方法:将大鼠分为正常对照组、假手术组、单纯结扎IVC组、结扎IVC并右肾切除组、结扎IVC联合川芎嗪治疗组、结扎IVC联合安慰剂组,每组7只.术后1、6、24、48h检测心率(heart rate,HR)、射血分数(eiectionfraction,EF)、心输出量(cardial output,CO)、每搏输出量(stroke volume,SV)、鼠尾动脉压(arterial pressure,AP)等心脏血流动力学指标.结果:假手术组各项指标无明显变化.单纯结扎IVC组术后1 h CO[(0.018±0.002)L/min]、SV[(0.054±0.008)ml]、AP(H)[(173±12)mmHg]、AP(L)[(161±11)mmHg]降至低点,但至术后48 h可完全代偿,动物全部存活.结扎IVC联合右肾切除组术后1 h CO[(0.012±0.002)L/min]、SV[(0.038±0.005)ml]、AP(H)[(138±8)mmHg]、AP(L)[(131±9)mmHg]降至低点,至术后48 h CO、SV仍不能完全代偿,且有2只动物死亡.结扎IVC联合川芎嗪治疗组术后1 h CO[(0.025±0.004)L/min]、SV[(0.063±0.009)ml]、AP(H)[(190±14)mmHg]、AP(L)[(163±9)mmHg]降至低点,术后24 h可完全代偿,动物全部存活,结扎IVC联合安慰剂组与结扎IVC联合川芎嗪治疗组相比,无明显差异.结论:肾静脉平面以上结扎大鼠IVC可影响心功能,但术后很快可完全代偿,同时加用川芎嗪可明显改善心功能状况,无需切除健康右肾.结扎IVC加右肾切除,会减弱心脏代偿能力,甚至引起动物死亡.
作者：郭学利；黄秀珍；时德 刊期： 2004年第05期
背景和目的:传统鼻咽癌外照射技术存在不少的缺陷,改进鼻咽癌外照射技术已成为提高鼻咽癌疗效的一个努力方向,本研究利用三维治疗计划系统对鼻咽癌传统、常规和三维适形放疗(3D CRT)计划作剂量学比较,评估采用不同方法的意义.方法:选择22例早期鼻咽癌患者,用三维治疗计划系统对每例患者分别作出传统、常规和3D CRT计划设计,然后根据靶区覆盖率(V95)、正常组织受量(D50,D33和D5等)和正常组织并发症发生率(NTCP)比较这三种计划.结果:剂量学比较表明,三种不同计划的PTVnx60和PTVnx50的V95分别为90.29%和77.67%(传统)、98.44%和98.85%(常规)、99.98%和99.63%(3D CRT),3D CRT和常规放疗有满意的V95,尤其是在亚临床病灶范围,两者均优于传统放疗;在正常组织保护方面,3D CRT和常规治疗计划均比传统方式能更好地保护脑干、颞叶、视交叉和垂体,而3D CRT比常规和传统方式更好地保护了腮腺和颞颌关节.结论:三种计划设计方式中,3D CRT和常规方法均有很好的V95,尤其是在亚临床病灶方面,而3DCRT治疗早期鼻咽癌的优势在于给予靶区特别是亚临床病灶区相同的剂量分布的前提下,可以比常规和传统方法减少某些正常组织器官如腮腺、颞颌关节等的照射剂量.
作者：罗伟；邓小武；卢泰祥 刊期： 2004年第05期
