目的 采用单侧输尿管梗阻(partial Unilateral ureteral obstruction,UUO)模型大鼠,研究天然虾青素(虾青素)对抗肾间质纤维化及肾细胞凋亡的作用.方法 将96只成年雄性SD大鼠随机分组,每组16只,分别为空白组、假手术组(Sham)、模型组(UUO)、天然虾青素组(高、中、低剂量)组,空白组大鼠不做任何处理,Sham组大鼠仅游离左侧输尿管,UUO组和虾青素组大鼠结扎左侧输尿管.虾青素组于术前2d灌胃给予虾青素(100、50、25 mg·kg-1·d-1,空白组、Sham组和UU0组灌胃给予等体积生理盐水,连续14d,处死大鼠,采用HE染色,观察大鼠肾脏病理情况,并通过SABC方法测定大鼠肾间质TGF-β1、SGK1、CTGF的表达情况.应用大鼠Bcl-2、Bax试剂盒,检查各组大鼠肾组织的Bcl-2、Bax表达情况.结果 天然虾青素组的大鼠肾间质TGF-β1、SGK1、CTGF表达、肾脏病理学损伤明显减少,同时天然虾青素组对于大鼠的肾小管上皮细胞凋亡也有改善作用.结论 天然虾青素可以一定程度上减少肾脏纤维化、改善肾细胞凋亡,其对纤维化肾损伤具有一定的保护作用.
作者:谢潮鑫;孟猛;殷先锋;何凤玲;叶汉深;谢栋 刊期: 2013年第02期
目的 构建稳定表达成熟miRNA-30a和miRNA-30e腺病毒表达载体.方法 小鼠基因组中分别扩增出带有酶切位点的mmu-miR-30a、mmu-miR-30e目的基因,目的基因连接到穿梭质粒pSES-HUS,带有目的基因的穿梭质粒重组到骨架质粒AdEasy1上,重组质粒转染到Hek-293细胞中包装成腺病毒载体,反复扩增之后获得高滴度的pAd-mmu-miR-30a、pAd-mmu-miR-30e腺病毒.用目的腺病毒分3组(RFP对照组,miR-30a组,miR-30e组)感染小鼠Mefs细胞,用荧光定量PCR方法检测mmu-miR-30a、mmu-miR-30e表达情况.结果 分别扩增出带有酶切位点的357 bpmmu-miR-30a,324 bpmmu-miR-30e,并成功连接到pSES-HUS上,进一步与AdEasy1重组,包装得到腺病毒表达载体,通过荧光定量PCR检测,Mefs细胞中mmu-miR-30a升高26.46±7.46倍,mmu-miR-30e升高2.76±0.25倍.结论 成功构建了成熟miRNA的腺病毒表达载体.
作者:刘强;顾金金;罗敏;施琼 刊期: 2013年第02期
目的 观察益生菌诱导的乳鼠结肠MUC2基因的表达及其对益生菌抑制E.coli K1株E44黏附侵袭肠屏障作用的影响.方法 SD乳鼠分别用益生菌、E44株和益生菌+E44株三组灌胃7d后,RT-PCR法观察益生菌和E44株诱导结肠MUC2基因的表达;靶向MUC2基因的shRNA真核质粒表达载体(shRNA MUC2)和阴性对照shRNA NC转染人结肠癌Lovo细胞,荧光定量PCR法检测其表达水平,并通过竞争性排斥方法检测MUC2基因对益生菌拮抗致病菌E44粘附侵袭的影响.结果 灌胃益生菌组SD乳鼠肠道MUC2基因明显上调,而E44组则显著降低.用shRNA MUC2转染Lovo细胞后,与阴性对照组和空白对照组相比,其表达水平明显降低,干扰率为66.7%;益生菌对E44株粘附侵袭抑制作用明显低于未处理组,与对照组相比,E44相对粘附率为56.64%,相对侵袭率为66.64%.结论 益生菌诱导的MUC2基因表达上调可能成为拮抗致病菌易位的保护机制之一;MUC2基因沉默后,益生菌对E44粘附侵袭肠上皮细胞的抑制作用明显降低.
作者:余晶仪;郝小燕;龙敏;王勤;屈娅荣;温扬明;张文炳;罗军;曹虹 刊期: 2013年第02期
目的 以艾滋病病毒(HIV)gp41为作用靶点,设计合成了12个含芳基取代的苯甲酸类化合物,并对其进行抗HIV活性测试.方法 以卤代苯甲酸或间羧基苯硼酸为原料,通过Suzuki-Miyaura偶连反应及Knoevenagel缩合反应,引入含取代基的芳环及芳杂环.ELISA法检测其抑制HIV gp41六螺旋束形成的活性.荧光素酶法检测化合物抗HIV活性.结果 化合物结构经NMR、MS得到确认,其中5个化合物(7b、7c、7d、7e、7g)具有抑制HIV gp41六螺旋束形成的活性,其中7d活性强.该化合物能抑制HIV-1 SF33病毒株的复制,其IC50为20 μmol/L.结论 合成的芳基苯甲酸类化合物7d能通过抑制HIV gp41六螺旋束结构的形成来抑制HIV的复制.
作者:王海波;陈之朋;裘佳寅;余小玲;谢扬;刘叔文 刊期: 2013年第02期
目的 探讨线粒体DNA(mtDNA)缺失对人淋巴瘤Namalwa细胞生长和迁移能力的影响.方法 采用溴化乙锭处理Namalwa细胞获得mtDNA缺失的p0-Namalwa细胞;营养缺陷法、PCR扩增线粒体DNA片段、Western bloting检测COXII蛋白表达等方法鉴定po-Namalwa细胞;MTT方法及细胞周期测定细胞增殖能力;Transwell实验检测细胞迁移及侵袭能力;流式细胞术检测活性氧(ROS)及细胞内钙离子水平.结果 p0-Namalwa细胞在选择性培养基中正常生长,而在非选择性培养基中逐渐死亡;p0-Namalwa细胞未扩增出mtDNA片段以及未表达COXII蛋白;与Namalwa细胞相比,p0-Namalwa的细胞增殖率、迁移及侵袭能力、ROS水平及细胞内Ca2+浓度明显降低,细胞阻滞于GJG1期.结论 p0-Namalwa细胞与亲本Namalwa细胞相比,生长及迁移能力减弱,可能与细胞内ROS产生减少及细胞内Ca2+浓度降低有关.
作者:马佳;张庆;陈昌杰;杨清玲;陈素莲 刊期: 2013年第02期
目的 研究甘草总黄酮对慢性浅表性胃炎大鼠胃粘膜损伤的保护作用,探讨其相关药理机制.方法 采用0.02%氨水合并饥饱失常刺激制备大鼠慢性浅表性胃炎模型,模型复制成功后动物随机分为模型对照组、维酶素对照组及甘草总黄酮高、中、低剂量组,连续灌胃给药30 d.采用HE染色观察胃组织病理学变化;阿利新蓝-糖蛋白结合法(AB-PAS)染色,检测胃粘膜上皮细胞粘蛋白合成、分泌功能;ELISA法测定血清中前列腺素E2(PGE2)含量;胃体部、幽门部微循环血流量评价胃微循环状况.结果 与正常对照组比较,浅表性胃炎模型组大鼠胃黏膜损伤率、胃组织病理学评分、粘蛋白含量显著改变;与模型对照组比较,试药组血清PGE2水平显著升高,上皮细胞粘蛋白指数及酸性粘蛋白指数提高,上皮细胞粘蛋白分泌功能增强和黏膜屏障完整性得到恢复,大鼠胃黏膜损伤率显著下降.同时,胃微循环血流量改善.结论 甘草总黄酮抑制慢性浅表性胃炎大鼠胃粘膜损伤,保护和修复损伤的粘膜组织,这种作用与提高PGE2水平相关.
作者:林晓春;陈育尧;白殊同;郑君;佟丽 刊期: 2013年第02期
目的 探讨氢气对高浓度氧导致的早产大鼠肺泡型Ⅱ上皮细胞(AECⅡ)氧化应激性损伤的影响.方法 将分离培养的原代AECⅡ随机分为空气对照组、高氧对照组、空气+氢气组、高氧+氢气组.空气组和高氧组分别暴露在21%和95%氧气中,空气+氢气组和高氧+氢气组细胞置于富氢培养基中.各组均于24 h后光镜观察细胞形态改变,采用四甲基偶唑氮蓝(MTT)法检测各组细胞增殖能力,JC-1荧光探针法检测各组细胞线粒体膜电位(△ψ)变化,化学比色法测定细胞上清丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活力.结果 与空气对照组比较,空气+氢气组各项指标均无显著差异,高氧对照组细胞的增殖活性明显受到抑制,细胞的△ψ明显降低,MDA含量显著增高,SOD活性明显降低.氢气干预后,与高氧对照组相比,细胞的增殖活性和SOD活性均有所升高,△ψ有所恢复,MDA含量显著下降(P<0.05).结论 氢气可显著减轻高氧导致的早产鼠AECⅡ的氧化损伤,提高细胞抗氧化能力,稳定细胞△ψ,减弱高氧对细胞的增殖抑制效应.
作者:姚兰;许峰;罗冲;于攀;董欣鑫;孙学军;刘成军 刊期: 2013年第02期
目的 研究糖尿病大鼠膈肌功能及钙调控蛋白基因表达的变化,探讨糖尿病大鼠膈肌功能损伤的发生机制.方法 使用链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型,SD大鼠随机分为糖尿病组(随机血糖≥16.7 mmol/L)和正常对照组,造模后4周、8周测定大鼠体质量和膈肌/体质量比值,生化指标检测各组大鼠空腹血糖和膈肌组织线粒体琥珀酸脱氢酶(SDH)活性;应用体外灌流大鼠膈肌条的方法,测定单收缩张力、大强直张力、峰值收缩时间、半舒张时间、张力-频率曲线,电镜观察大鼠膈肌超微结构,采用RT-PCR检测大鼠膈肌肌质网钙泵(SERCA)和受磷蛋白(PLB)mRNA表达.结果 (1)与正常对照组相比,糖尿病大鼠体质量和膈肌质量/体质量比值均明显降低(P<0.01),膈肌组织SDH的活性显著降低(P<0.01);(2)在给予大鼠膈肌条10、20、40、60、100 Hz刺激时,糖尿病大鼠膈肌在各频率下的收缩张力明显低于正常对照组(P<0.01);膈肌力学指标单收缩张力和大强直张力明显降低,峰值收缩时间和半舒张时间明显延长(P<0.01);(3)超微结构显示糖尿病组大鼠膈肌组织损伤明显,肌纤维断裂,肌质网扩张,线粒体水肿,数目减少,脊断裂,空泡化或囊泡化,同时可见随病程延长膈肌损伤明显加重;(4)RT-PCR结果提示:与正常对照组相比,糖尿病组大鼠膈肌SERCA mRNA表达均明显降低(P<0.01),糖尿病大鼠膈肌SERCA mRNA表达8周组比4周组明显降低(P<0.01),糖尿病大鼠膈肌PLB mRNA表达显著增强(P<0.01).结论 糖尿病大鼠膈肌超微结构受到破坏,线粒体损伤和数目减少,线粒体SDH活性降低,ATP生成减少,膈肌组织SERCA mRNA表达减少和PLB mRNA表达增强,引起膈肌肌质网摄取Ca2+减少,促成膈肌收缩和舒张功能损伤.
作者:方迎艳;郭晓磊;高琴;叶红伟;关宿东 刊期: 2013年第02期
目的 通过实时荧光定量PCR方法检测APPswe/PS△E9双转基因小鼠和对照小鼠脑组织中miRNA-135a-5p、miRNA-135a-2-3p、miRNA-298-5p、miRNA-466b-3p和miR-669f-3p的表达.方法 选取6月龄大小的APPswe/PS△E9双转基因小鼠为实验组,同月龄同种系的野生型小鼠C57为对照组,分别提取其脑组织总miRNA,应用实时荧光定量PCR方法检测两组小鼠脑组织中miRNA-135a-5p、miRNA-135a-2-3p、miRNA-298-5p、miRNA-466b-3p和miR-669f-3p的表达.结果 上述5种miRNAs在实验组与对照组小鼠中的相对表达量分别为0.73±0.27、1.08±0.58,2.47±6.15、1.65±0.67,0.72±0.14、1.31±0.73,0.57±0.34、1.06±0.35,0.63±0.26、1.02+0.18.其中有统计学意义的是miRNA-135a-5p、miRNA-298-5p、miRNA-466b-3p和miR-669f-3p(P≤0.05).结论 miRNA-135a-5p、miRNA-298-5p、miRNA-466b-3p和miR-669f-3p在APPswe/PS△E9双转基因小鼠中有差异表达,可能在阿尔茨海默病的发病过程中起着重要作用.
作者:田密;丁宇;侯德仁;邓炎尧;李维;奉夏露 刊期: 2013年第02期
目的 探讨黄酮类化合物槲皮素对人胶质瘤U87细胞侵袭、迁移、增殖及其细胞周期的影响.方法 将U87细胞分成Q0、Q50、Q100和Q1504个组,Q0组加适量二甲亚砜(槲皮素溶剂)处理,Q50、Q100和Q150组槲皮素的浓度分别为50、100、150 μmol/L.分别通过transwell体外侵袭实验、transwell体外迁移实验、Click-iT Edu test技术和流式细胞术检测槲皮素对其侵袭迁移能力,增殖能力及其细胞周期的影响.结果 槲皮素处理36 h后,与对照组相比,Q50、Q100和Q150组的侵袭细胞比率分别为:52.08%、24.63%和13.13%,P均<0.05.槲皮素处理12h后,与对照组相比,Q50、Q100和Q150的迁移细胞比率分别为:49.46%、26.78%和14.56%,P均<0.05.槲皮素处理24 h后,Q0、Q50、Q100和Q150组的增殖细胞百分比分别为25.21%、18.38%、16.74%和15.24%.G0/G1期C6细胞所占比例分别为71.14%、72.71%、69.29%、66.47%,S期分别为25.32%、22.48%、21.96%、23.32%,G2/M期分别为3.53%、4.80%、8.75%、10.25%;Q100、Q150组的G2/M期细胞比例与Q0组比较,P均<0.05.结论 槲皮素能明显降低胶质瘤细胞的侵袭迁移能力;并可通过阻断U87细胞的细胞周期进程来抑制其增殖.
作者:苑召虎;胡子有;张兰兰;颜晓慧;王惠丽;吴炳义 刊期: 2013年第02期
目的 确定硫酸软骨素纳米硒对T-2毒素干预体外大骨节病软骨细胞生长的影响.方法 合成并表征硫酸软骨素纳米硒粒子,依据《大骨节病临床诊断标准》(WS/T 207-2010),选择Ⅱ/Ⅲ度KBD患者6例关节软骨进行体外分离、培养.分别给予硫酸软骨素纳米硒联合T-2毒素进行干预,采用MTT、HE染色和流式细胞仪观察细胞生长和凋亡的变化.结果 合成的硫酸软骨素纳米硒中硒的含量为10.1%,可在蒸馏水中自组装成粒径为30~200 nm纳米粒子,红外图谱提示纳米硒与硫酸软骨素可能以共价键的方式结合;硫酸软骨素纳米硒在浓度为50~200 ng/ml可有效抑制20 ng/ml T-2毒素诱导大骨节病软骨细胞的凋亡作用,降低T-2毒素诱导软骨细胞的早期凋亡率[(8.64±1.57)%,P<0.05].结论 硫酸软骨素纳米硒具有抗T-2毒素诱导软骨细胞凋亡的作用,可作为一种潜在的治疗大骨节病的药物制剂.
作者:韩晶;郭雄;吴翠艳;李春燕;何淑兰;段琛;宁玉洁 刊期: 2013年第02期
目的 明确核因子-κB (NF-κB)活化在胆红素诱导大鼠海马神经元凋亡中的作用,及反式激活蛋白-NEMO结合域(TAT-NBD)对胆红素神经毒性的干预作用.方法 原代培养海马神经元分为对照组、胆红素组、TAT-NBD早期干预组、持续干预组及晚期干预组.免疫细胞化学法检测NF-κB p65蛋白表达,改良MTT法、Annexin V-FITC/PI双染法及TUNEL法检测细胞相对存活率及凋亡率,ELISA法检测原代培养基上清IL-1β水平.结果胆红素组海马神经元NF-κB p65蛋白平均光密度值(MOD)明显高于对照组(P<0.01),6、24 h达高峰.TAT-NBD早期干预组细胞相对存活率为(80.784±9.767)%低于对照组(P<0.01)、高于胆红素组(P<0.01),细胞凋亡率为(14.100±2.252)%(Annexin V-FITC/PI双染法)、(12.883+1.629)%(TUNEL法)高于对照组(P<0.01)、低于胆红素组(P<0.01),IL-1β水平为15.348±4±0.812 pg/ml低于胆红素组(P<0.05).TAT-NBD持续干预及晚期干预组细胞存活率、凋亡率、IL-1β水平与胆红素组无显著性差异(P>0.05).结论 NF-κB双向调控胆红素诱导的海马神经元凋亡.TAT-NBD抑制NF-κB早期高峰有神经保护作用,有可能用于胆红素脑损伤的预防.
作者:宋思捷;朱叶芳;党姗姗;王少雯;华子瑜 刊期: 2013年第02期
目的 比较不同脉冲高强度聚焦超声(HIFU)辐照方式损伤离体灌注猪肝靶区临近含较大血管时的损伤情况,为临床应用提供依据.方法 建立离体猪肝经肝动脉和门静脉的体外循环灌注模型,在B超引导下选择直径为4 mm血管,于血管方向离管壁3 mm位置给予相同剂量PHIFU辐照.实验组选择脉冲波,对照组用连续波,辐照结束后观察声通道血管及靶区损伤情况,并取血管与靶区处组织送病理检查.结果 PHIFU相同剂量辐照声通道内含4 mm大血管后,实验组和对照组的声通道血管均未见损伤,两组凝固性坏死体积比较存在差异(P<0.05),实验组坏死体积大于对照组.声通道血管进行HE染色、血管弹力纤维和胶原纤维染色显示没有损伤,实验组和对照组没有差别(P>0.05).结论 当靶区临近含有较大血管时,脉冲辐照能够提高HIFU治疗效率,有效的形成损伤,且不会损伤血管.
作者:焦娇;伍烽;邹建中;李发琪;刘芳;赵欣;王琦 刊期: 2013年第02期
目的 探讨肝移植与肾移植受者外周血免疫细胞基因表达差异.方法 从GEO数据库获取27个肝移植受者及25个肾移植受者外周血的基因芯片表达谱数据.应用GSEA软件进行基因集富集分析,应用Cytoscape软件对差异基因进行生物网络分析,获得肝、肾移植相关核心基因.结果 GSEA分析筛选出肝、肾移植领头亚群高重叠基因各20个.差异基因生物网络分析,筛选出肝、肾移植相关中心蛋白质(基因)数目分别为14及13;结合GSEA及生物网络分析结果,获得核心基因各5个.结论 外周血免疫细胞的转录、翻译调节机制在肝移植免疫调节中发挥了更重要的作用,而在肾移植信号蛋白质的相互作用网络发挥了主要的免疫调控功能;免疫细胞的能量代谢与免疫调控存在密切关系;外周血肝、肾移植核心基因发挥了重要的免疫调节功能.
作者:徐洪来;肖敏;杨超;高义;雒真龙;周鸿敏;陈忠华 刊期: 2013年第02期
目的 研究一种特异性的热休克蛋白90抑制剂17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素(17-AAG)对人胃癌细胞SGC-7901细胞增殖和凋亡的影响,分析其可能的作用机制.方法 应用MTT比色法检测不同浓度的17-AAG对胃癌SGC-7901细胞的生长抑制率;荧光显微镜下观察PI染色的SGC-7901细胞凋亡形态学变化;采用流式细胞术检测SGC-7901细胞的细胞周期变化及凋亡率变化;通过免疫组化检测胃癌SGC-7901细胞中Fas蛋白的表达.结果 MTT法显示17-AAG能明显抑制胃癌SGC-7901细胞的生长增殖,呈时间、剂量依赖性;流式细胞仪细胞周期分析显示,17-AAG处理48 h后使SGC-7901细胞发生G2/M期阻滞,并有诱导SGC-7901细胞凋亡的作用;细胞免疫组化结果显示,SGC-7901细胞胞浆内有Fas表达,随着药物浓度的加大,阳性表达率也逐渐增加.结论 17-AAG通过改变细胞周期、诱导其凋亡来抑制胃癌SGC-7901细胞的增殖,上调SGC-7901细胞中Fas蛋白的表达是诱导凋亡的作用机制之一.
作者:陈美霓;许静洪;赵菊梅 刊期: 2013年第02期
目的 观察间断皮下注射信号选择性甲状旁腺素(PTH)模拟肽对去势雄性小鼠骨折愈合的影响.方法 36只7周龄C57/BL雄性小鼠去势,1周后制作股骨中段骨折模型,术后用人重组甲状旁腺素(hPTH(1-34)),信号选择性PTH模拟肽[Gly1,Arg19] hPTH (1-34)(G1,R19(1-28))和等量溶解剂注射,于术后14d和28 d处死,双能X线骨密度仪测量骨痂区骨密度以及骨矿物含量;术侧骨折愈合情况通过X线、显微CT、生物力学和组织学显示.结果 术后14d,G1,R19(1-28)组骨密度显著高于对照组(P<0.05).大力和刚度G1,R19 (1-28)低于hPTH(1-34)组.X线和显微CT显示,G1,R19(1-28)组骨痂的改建和重塑优于对照组,略差于hPTH(1-34)组.结论 信号选择性甲状旁腺素模拟肽G1,R19(1-28)促进骨折的愈合,cAMP/PKA通路对促进骨折愈合具有重要作用.
作者:袁亮;林振;付兆宗;孟越;黄志平;吴秀华;杨德鸿;江建明 刊期: 2013年第02期
目的 分析上调CD99基因对经典霍奇金淋巴瘤(cHL)细胞株L428形态和免疫表型的影响,探究CD99基因对H/RS细胞发生发展的意义.方法 鬼笔环肽染色和大细胞计数分析过表达CD99基因对L428细胞形态的影响;免疫细胞化学和流式细胞检测分析上调CD99基因对L428细胞免疫表型的改变.结果 CD99基因的过表达导致L428细胞变小、骨架发生重建,丢失了cHL的诊断标记CD30和CD15,重现B细胞表型PAX5、CD19、CD79α、BCL-6和CD10.结论 CD99基因过表达调控L428细胞向B细胞方向转化,提示cHL的B细胞表型的缺失很可能是CD99基因下调的结果.
作者:周新华;黄学平;黄作平;王志强;赵彤 刊期: 2013年第02期
目的 探讨一定浓度的臭氧水对负压封闭引流(VSD)材料理化性质的影响.方法 使用臭氧水发生器制取浓度为10 μg/ml臭氧水后,将VSD材料(泡沫和密封膜)浸于其中充分接触,1h/次,2次/d,持续8d后,观察材料的大体外观及显微结构的变化,对作用前后的材料分别进行拉力测试和拉曼光谱扫描,同时制作体外负压封闭引流模拟装置,采取相同的干预方法后,负压源下检测装置的密闭效果.结果 10 μg/ml臭氧水持续8d作用后,泡沫的大体外观未见异常,显微镜下泡沫与密封膜的微孔等结构未见明显破坏.拉力测试结果表明,泡沫大拉伸负荷作用前后分别为4.25±0.73、2.44±0.19 kgf (P=0.000),试样瞬间断裂间距作用前后分别为92.54±12.83、64.44±4.60mm(P=0.000);密封膜的大拉伸负荷作用前后分别为0.70±0.58、0.71±0.08kgf (P=0.698),试样瞬间断裂间距作用前后分别为99.30±10.27、100.95±18.22mm(P=0.966).拉曼光谱仪结果显示,VSD材料在400~4000 cm-1扫描范围内仅有部分波峰强度发生变化而无新的化学基团生成.体外装置经臭氧水作用8d后,装置密闭性仍良好.结论 10 μg/ml的臭氧水与VSD材料作用8d后,除泡沫的抗拉伸性能降低外,其余理化性质未发生显著变化.
作者:姜楠;马云飞;林庆荣;陈安富;赵培冉;倪国新;余斌 刊期: 2013年第02期
目的 预测并鉴定乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)的B细胞线性表位,为乙型肝炎的诊断和治疗提供新的依据.方法 采用生物信息学分析技术,利用NCBI数据库和免疫表位数据库提供的相应软件预测HBeAg的B细胞线性表位,采用人工合成法合成相应表位肽并分别将与血蓝蛋白(KLH)偶联,作为免疫原,免疫大白兔制备抗HBeAg抗原表位抗体,ELISA法鉴定抗体的特异性.结果 发现了1MDIDPYKEFG10、37LYREALESPEHCSP50、74SNLEDPAS81、127RTPPAYRPPNAPIL140等4条新的HBeAg蛋白B细胞线性表位肽,其与KLH的偶联物作为免疫原免疫大白兔,获得特异性高效价抗体,抗体滴度大于1∶512000,ELISA实验证实上述抗体均可与HBeAg发生特异性免疫反应.结论 采用生物信息学技术成功确认了4个HBeAg蛋白B细胞线性表位肽,为深入研究HBeAg的功能和作用以及乙型肝炎的治疗提供了新依据.
作者:杨军;刘妮;张婷;赵世平;强磊;苏宝山;康安静;李宗芳 刊期: 2013年第02期
目的 探讨Sam68基因对鼻咽癌5-8F细胞增殖能力的影响及可能的分子机制.方法 通过靶向沉默鼻咽癌5-8F细胞内源性Sam68基因,研究细胞增殖能力的变化情况,并采用qRT-PCR和Western blotting实验方法检测Sam68、细胞周期相关蛋白及其上游分子的表达情况.结果 转染Sam68靶向siRNA的5-8F细胞中,Sam68蛋白和mRNA表达水平均明显降低.MTT、细胞周期实验证实干扰Sam68后5-8F细胞的增殖能力受到抑制;Westem blotting检测结果显示细胞周期相关蛋白Cyclin DI表达明显下调,p27表达上调,同时p-FOX03a、p-Akt和p-GSK-3p的表达明显下调,而总FOX03a、Akt和GSK-3β的表达则无明显变化.结论 Sam68可能通过激活Akt/FOX03a信号通路对细胞增殖的相关分子进行调控,进而影响鼻咽癌细胞的增殖能力.
作者:杨彬;冯德辉 刊期: 2013年第02期
目的 分析南方医科大学南方医院近10年收治的112例感染性心内膜炎(IE)的流行病学、临床表现、致病菌及治疗、预后等临床特点,总结IE的变化.方法 对近10年本院收治的112例IE患者的诊治过程进行回顾性分析.结果 112例患者平均年龄46+17.1岁,其中70例(62.5%)存在各种基础心脏病,按发病高低依次为风湿性心脏病32例(28.6%),先天性心血管畸形22例(19.6%),老年性瓣膜退行性变16例(14.3%).临床表现包括发热(93.8%)、贫血(77.7%)、充血性心衰(33.0%)、栓塞现象(32.1%)等.超声心动图提示瓣膜或心内膜赘生物105例(93.8%).血培养阳性者61例(58.1%),按检出率高低依次为链球菌(23例)、葡萄球菌(22例)等.91例经治疗后痊愈或好转出院,10例放弃治疗出院,11例死亡,死亡原因为充血性心衰(8例)、肺栓塞(2例)及脑出血(1例).结论 IE的流行病学、易感因素、致病菌等发生了变化,临床表现多样,病死率仍较高,需临床医生提高警惕.
作者:何胜平;陈雅华;张振;王振康;王武军 刊期: 2013年第02期
目的 探讨磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3(GPC3)在两种常见肺癌病理类型鳞癌和腺癌中的不同表达及其与预后的关系.方法 肺鳞癌和腺癌病人共48名,肝癌对照病人10名,采用免疫组织化学方法检测肺癌组织及其癌旁组织中GPC3蛋白的表达.应用Kaplan-Meier法进行生存分析.结果 肺癌中的GPC3蛋白总表达率29.2% (14/48).GPC3在肺癌旁组织中不表达.GPC3蛋白在肺鳞癌中的阳性率为54.5% (12/22),在肺腺癌中的阳性率为7.7% (2/26),肺鳞癌中的GPC3蛋白表达明显高于肺腺癌(P<0.01).在阳性表达的肺癌样本中,肺鳞癌与肺腺癌有淋巴结转移者和低分化组GPC-3均表达更显著.肺癌与肝癌的GPC3蛋白表达特点不同.Kaplan-Meier生存分析显示GPC3蛋白与预后无关.结论 GPC3蛋白肺鳞癌患者表达更高,提示其可作为潜在候选标记物检测肺鳞癌.
作者:李慧灵;邓秋华;黄丽燕;唐海玲;成向阳 刊期: 2013年第02期
目的 分析卵巢储备功能评估指标与卵巢反应性的关系及对卵巢反应性的预测效能.方法 队列研究分析行体外受精(IVF)/单精子卵母细胞内注射(ICSI)的331个取卵周期病例,并将病例分为正常反应组、低反应组以及高反应组3组,采用ELISA方法检测患者月经第3天的血清抗苗勒氏激素(AMH)水平,同时超声测量双侧卵巢内基础窦状卵泡数(AFC),血清基础卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)及雌激素(E2)采用化学免疫发光法检测.结果 血清AMH水平、AFC、血清FSH水平、FSH与LH比值(FSH/LH)、年龄均与获卵数×1000/促性腺激素(Gn)总安瓿数相关(P<0.001);而基础E2与其不相关(P>0.05).AFC及血清AMH水平作为单一指标对于卵巢低反应的预测价值好,其ROC曲线下面积分别为0.855(0.787~0.924)和0.832(0.764~0.900),对卵巢低反应的佳预测界值点分别为AFC≤9个,AMH≤1.88 ng/ml.AFC是预测卵巢高反应的好单一指标,其ROC曲线下面积为0.787(0.728~0.847),佳预测界值点为AFC≥15个.Logistic逐步回归分析显示联合AFC、血清AMH水平以及血清FSH水平指标能更好地预测卵巢低反应,但联合各指标并不能提高对卵巢高反应的预测效能.结论 AFC、血清AMH水平、血清FSH水平、FSH/LH、年龄均是卵巢反应性的预测指标,但是其敏感性、特异性不同.AFC作为单一指标对于卵巢反应的预测价值好.联合AFC、血清AMH水平及血清FSH水平能提高对于卵巢低反应的预测效能.而对于卵巢高反应,联合多指标不能提高预测效能.
作者:何于夏;夏容;陈薪;叶德盛;唐妍;黎璞;牛静;陈士岭 刊期: 2013年第02期
目的 研究μ受体基因(OPRM1)A118G单核苷酸多态对剖宫产术后硬膜外腔芬太尼镇痛作用的影响.方法 选择广州医学院第三附属医院ASA Ⅰ~Ⅱ级,拟在腰硬联合麻醉下行剖宫产的孕产妇100例,术后行硬膜外腔芬太尼自控镇痛.抽取产妇静脉血,应用PCR-RFLP法,根据OPRM1外显子1第118位点处的碱基情况判定产妇基因型,AA型为野生型,GG型为突变型,AG型为杂合型,根据基因型将产妇分为3组即AA组、AG组、GG组.观察术后疼痛视觉模拟评分(VAS评分)、镇痛期间恶呕记录和48 h芬太尼总用量.结果 终96名产妇完成研究,各种基因型所占比例为GG(16,16.7%),AA(35,36.5%),AG(45,46.9%).术后12、24 h两个时点的VAS评分,GG组要明显高于AA组和AG组(P<0.05);术后镇痛芬太尼总用量,GG组亦明显高于AA组和AG组(P<0.05).结论 OPRM1A118G单核苷酸多态影响芬太尼硬膜外腔镇痛效果,GG型镇痛效果明显弱于AA型和AG型;达到同样镇痛效果,GG型需要更大剂量的芬太尼.
作者:张双全;李少英;谭秀华 刊期: 2013年第02期
目的 通过比较不同预充量佳乐施对脐带血血气、脐带血血清S100β浓度及胎盘体视学的影响,观察佳乐施对剖宫产产妇脊椎麻醉低血压的防治效果并探索对母体和胎儿均有利的预充量.方法 将45例择期行剖宫产术的单胎足月初产妇随机分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组(n=15),麻醉前分别以5、10、15 ml·kg-1·h-1的速度预充佳乐斯10 min,之后开始麻醉手术并以此补液速度持续至胎儿娩出.监测并记录麻醉前(T0)、麻醉后1 min(T1)、2 min(T2)、3 min(T3)、5 min(T4)、10 min(T5)、胎儿娩出时(T6)及术毕(T7)时血压、心率的变化.比较3组新生儿1 min及5 min的Apgar评分,脐带血血气变化及脐带血血清S100β浓度.观察胎盘石蜡切片并用体视学方法分析出胎盘绒毛微血管长度密度和体积密度的变化.结果3组产妇心率、收缩压比较差异皆无统计学意义(P>0.05),组内各时点差异有统计学意义(P<0.05);Ⅱ、Ⅲ组较Ⅰ组母体血流动力学更稳定.3组脐动脉血血气、新生儿Apgar评分及脐带血血清S100β浓度比较无统计学意义(P>0.05),胎盘绒毛微血管长度密度和体积密度也没有统计学差异(P>0.05).结论Ⅱ、Ⅲ组预充量较Ⅰ组对低血压有更好的缓冲作用,但考虑到产妇心脏负荷较重,推荐以10 ml·kg-1·h-1的速度从术前10 min开始扩容至胎儿娩出,对母婴更安全有利.
作者:彭雪梅;刘慧慧;席露;王华东;李瑞满;帅兵 刊期: 2013年第02期
目的 收集南方医科大学南方医院2000~2012年组织胞浆菌病患者的既往史、临床表现、辅助检查结果、诊断、治疗及转归情况,总结分析,以求提高组织胞浆菌病确诊率.方法 选择医院2000~2012年经病理活检确诊的14例组织胞浆菌病病例进行回顾性分析.结果 组织胞浆菌病临床表现主要为发热、咳嗽、咳痰、胸痛、腹痛等,可合并神经系统症状或出现淋巴结肿大、体表包块.7/14的患者具有基础免疫受抑疾病,9/14出现胸部影像学改变,2/14出现三系减少.确诊前诊断考虑结核、恶性肿瘤、恶性淋巴瘤等疾病,后均经病理活检确诊.治疗上选择伊曲康唑、两性霉素B、氟康唑及伏立康唑等,治疗后9/10好转.结论 组织胞浆菌病发病率低,临床表现多样,影像学特异性不高,极易误诊、漏诊,确诊需靠病原学检查,在诊断后治疗效果不佳时要积极寻找有无潜在疾病,达到确诊目的.
作者:孟莹;蔡绍曦;李旭 刊期: 2013年第02期
目的 建立数字化肾结石三维模型,并虚拟仿真经皮肾镜碎石术(PCNL).方法 采集8例不同类型肾结石患者的CT数据,利用三维重建软件mimics 10.0进行图像分割和三维重建,建立一体化肾结石三维模型.根据肾结石三维模型提供的肾内及肾脏毗邻器官解剖关系,制定出合理的个体化手术方案,并通过FreeForm Modeling System进行PCNL虚拟手术仿真.结果 共建立了8例患者的肾结石三维模型,三维模型直观显示了肾内结石、集合系统、肾内血管及周围毗邻脏器的关系,在三维模型上模拟了PCNL经皮穿刺、扩张及碎石过程,完成了个体化的PCNL虚拟手术仿真.结论 数字化肾结石三维模型为手术设计提供了可靠和全面的依据,PCNL虚拟手术仿真对提高碎石率和减少手术并发症有重要指导意义.
作者:陈远波;李虎林;刘春晓;许凯;林阳彦;鲍苏苏;彭丰平;潘家辉 刊期: 2013年第02期
目的 观察低强度超声对剖宫产术后子宫复旧的影响.方法 随机选择122例剖宫产术后患者,其中67例为治疗组、55例为对照组,治疗组于剖宫产术后24h用低强度超声治疗仪对患者子宫覆盖区进行治疗,1次/d,30 min/次,连续3d;对照组自然恢复,临床观察两组患者治疗前后宫底下降程度、恶露情况.结果 治疗组宫底下降高度明显优于对照组(P<0.05),产后30 d阴道流血干净比率明显高于对照组(P<0.05),子宫复旧不良的发生率明显低于对照组(P<0.05).结论 低强度超声治疗可促进剖宫产术后子宫康复.
作者:王丹;张懿;敬李;何伟;唐枭栩;孙江川;方廖琼;王智彪;漆洪波 刊期: 2013年第02期
目的 研究组蛋白乙酰化修饰在流感病毒复制中间体dsRNA引起IL-6表达中的调控作用.方法 以病毒复制中间体dsRNA为诱导物,利用组蛋白去乙酰化酶(HDAC)抑制剂、DNA甲基转移酶(DNMT)抑制剂或HDAC siRNA分别处理A549细胞,双荧光素酶报告系统分析IL-6启动子活性、RT-PCR检测mRNA转录水平以及ELISA检测蛋白表达.结果 dsRNA可激活IL-6启动子活性、增强mRNA转录水平和蛋白的分泌表达,用HDAC抑制剂TSA处理或HADC siRNA干扰均可显著增强IL-6启动子活性和mRNA转录,同时,HDAC抑制剂TSA和DNA甲基转移酶抑制剂DAC在调控IL-6表达过程中无协同作用.结论 在流感病毒复制中间体dsRNA引起IL-6表达上调过程中受到组蛋白乙酰化修饰调控.
作者:汤必奎;吴守伟;胡明洁;刘小粉 刊期: 2013年第02期
目的 分析比较依赖利福平结核杆菌(依赖R菌)与耐利福平结核杆菌(耐R菌)肺结核发病特点.方法 2008年10月~2012年1月在我院住院或门诊的61例依赖R菌肺结核和148例耐R菌肺结核患者,记录人口学资料、年龄分组、抗结核药化疗史、药敏试验结果.结果 (1)依赖R菌与耐R菌肺结核均以30~44岁年龄组为主;(2)依赖R菌肺结核初治12例(12/61=19.7%),复治49例;耐R菌肺结核初治11例(11/148=7.4%),复治137例;(3)依赖R菌与耐R菌肺结核发生耐多药率分别是80.3%和92.6%.结论 依赖R菌肺结核患者以中青年为主,病情重.对初治肺结核治疗失败病人,检测利福平赖药性具有重要意义.依赖R菌肺结核病人,在治疗上应参照耐多药治疗方案.
作者:李艳;谭守勇;罗春明;黎燕琼;覃红娟;冯志宇 刊期: 2013年第02期
目的 联合血清铁蛋白、心脏及肝脏磁共振T2-star(T2*)评估重型β-地中海贫血(β-TM)患者的心脏、肝脏铁超负荷的临床意义.方法 南方医科大学南方医院输血+去铁治疗的β-TM中选择28例≥10岁,血清铁蛋白>1000 μg/L的患儿,2010~2011年分批赴香港进行心脏T2*、肝脏T2*检测,检测结果分别与年龄、血清铁蛋白、左心室射血分数(LVEF)进行比较.结果 14例(50%)发生心肌铁超负荷,其中心脏T2*<10 ms(重度)7例,10~14 ms(中度)2例,15~20 ms(轻度)5例;肝脏铁过载28例(100%),其中2.7~6.3 ms(轻度)2例,1.4~2.7 ms(中度)7例,<1.4 ms(重度)19例;发生LVEF下降共2例(7.14%),其中1例患者重度心肌铁超负荷;肝脏T2*与心脏T2*呈正相关(r=0.378,P=0.047),心脏T2*与血清铁蛋白呈负相关(r=-0.479,P=0.01),年龄与血清铁蛋白、LVEF、心脏T2*、肝脏T2*均不相关.结论 磁共振成像(T2*)是检测β-TM患者输血所致心脏、肝脏铁超负荷的有效、无创的手段,联合血清铁蛋白可作为评估机体重要脏器铁过载的主要诊断指标.
作者:吴学东;井远方;裴夫瑜;陈佳奇;冯晓勤;何岳林;张玉明;李春富 刊期: 2013年第02期
卵巢类癌是一种非常罕见的低度恶性肿瘤,大多数卵巢类癌患者无典型临床症状,常为偶然发现盆腔包块而就诊,约1/3患者出现类癌综合征,如面红、腹泻、支气管痉挛等,但本例患者的临床表现则是卵巢类癌罕见的顽固性便秘.通过对该病例的报道,可以提高对卵巢类癌的认识.
作者:欧阳密霞;曾飞 刊期: 2013年第02期
目的 对人前列腺癌PC-3细胞进行绿色荧光蛋白(GFP)标记,并建立其在动物活体荧光成像系统下直接观察肿瘤生长及转移的前列腺癌脊柱转移模型.方法 常规肿瘤细胞培养、传代,在细胞状态佳时以不同病毒感染复数实行GFP慢病毒对PC-3的感染,7d后在荧光显微镜下观察GFP在PC-3的表达情况.选取感染GFP阳性表达率高的孔继续扩大培养,然后采用悬液注射于小鼠的下腔静脉,动物活体荧光成像系统下直接观察肿瘤生长及转移,3个月后处死荷瘤鼠,常规石蜡切片苏木素-伊红(HE)染色观察.结果 经绿色荧光蛋白标记后人前列腺癌PC-3细胞在荧光显微镜下发出绿光,并可在体内、外持续稳定表达;下腔静脉注射1.5×106转染后的前列腺癌细胞后1周即可在活体荧光成像系统下观察到腰背部有绿色荧光显像,4周时可见表达绿色荧光的肿瘤增大,肿瘤骨转移率为19%(3/16);3个月后解剖裸鼠可见有3只裸鼠腰椎有肿瘤浸润,与动物活体荧光成像系统结果一致,转移率约为19% (3/16).结论 GFP慢病毒能够高效标记人前列腺癌PC-3细胞且不影响其生物学特性,并能够持久稳定表达;用绿色荧光蛋白标记的人前列腺癌PC-3细胞成功地建立了裸鼠脊柱骨转移模型,为进一步研究前列腺癌骨转移提供了一种简便、可行的新方法.
作者:崔明星;詹新立;刘会江;贺聚良;顾容赫;黄圣升 刊期: 2013年第02期
磁共振相位像的信息可应用于一些特殊MR成像技术,如磁敏感成像、弹性成像、温度监控等,但是扫描得到的相位像常常会出现相位缠绕导致相位信息不准确,因此相位解缠成为上述成像技术成功的关键.本文分析了目前常用Goldstein枝切算法产生错误解缠的原因,并在此基础上进行了算法改进,提出在解缠流程中引入掩模处理、滤波及近邻偶极子对去除的小生成树等步骤,从而改善Goldstein枝切算法需要的残差图.实验结果表明这种方法使得残差点数量明显下降,枝切线的重复连接、闭合回路及贯通线等引起错误解缠的情形得到改善,明显提高了解缠后的相位像质量.
作者:郭林;康立丽;王丹丹 刊期: 2013年第02期