NFALD可并发脂肪性肝炎(NASH)、肝纤维化和肝硬化,NASH可能是隐源性肝硬化的病因之一[1].本研究通血清Ⅲ型前胶原肽(PCⅢ)、CⅣ、LN、HA四项指标的测定,探讨NFALD肝纤维化倾向,并应用临床诊断性能(ROC)曲线综合评估了这些指标在单纯非酒精性脂肪肝(NAFL)、NASH中的检测意义.
作者：洪小飞；虞朝辉；厉有名 刊期： 2007年第03期
为进一步明确向肝细胞分化的细胞为骨髓中的那一亚群细胞,我们将纯化后的雄性小鼠造血干细胞移植到雌性受体小鼠的体内,然后在受体小鼠的肝脏内进行检测,以确定有无供体来源的肝细胞存在.
作者：朱薇；邱德凯；赖卓胜；王亚东；张亚历 刊期： 2007年第03期
建立稳定持久的人鼠嵌合肝动物模型,必须提高移植细胞的增殖能力[1].倒千里光碱与部分肝切除术(Rts/PH)联合应用,是移植肝细胞增殖常用模式.我们对诱导免疫耐受的大鼠腹腔注射倒千里光碱,2周后行2/3肝切除术,同时经脾移植Ⅰ,l'2双十八烷23,2,3',3'2四甲基吲哚羧花2高氯酸盐(DiI,美国Sigma公司)染色后的L02细胞,建立Rts/PH肝细胞增殖模型;采用免疫荧光、DiI荧光示踪等方法,检测嵌合于具有正常免疫活性大鼠肝内人L02细胞的存活、增殖情况.
作者：林沪；毛青；王宇明；蒋业贵；蒋黎 刊期： 2007年第03期
人宫颈癌基因(HCCR)是新近确定的一种癌基因,定位于人染色体12q,编码HCCR-1和HCCR-2两种蛋白[1].HCCR不仅在宫颈癌组织中表达,而且在人其他肿瘤如白血病、淋巴瘤、乳腺癌、肾癌、胃癌、结肠癌、肝癌和子宫癌中均有过度表达[2],可作为肝癌及乳腺癌诊断的标志物[3].
作者：杨杨；张国新；施瑞华；林艳；郝波；王晓勇；王宏娣；黄祖瑚 刊期： 2007年第03期
门静脉癌栓(PVTT)是原发性肝癌(PHC)的重要生物学行为,是影响PHC患者预后的重要因素,其发生率和病死率均较高[1].PHC合并PVTT首选的治疗手段是手术切除原发灶和癌栓.
作者：夏兴洲；马颖光；刘伟 刊期： 2007年第03期
对聚乙二醇化α-2b干扰素(PEG-IFN α-2b)、利巴韦林联合治疗慢性丙型肝炎的疗效、安全性情况进行观察、随访.
作者：于淑丽；张照华；吕卉；张琴冈；王耀宗 刊期： 2007年第03期
本研究采用限制性片段长度多态胜分析(RFLP)的方法检测过氧化物酶增殖体激活受体(PPAR)γ 2基因Pro12Ala多态性,以期从基因学角度进一步阐明NAFLD的发病机制.
作者：叶青；吕宗舜 刊期： 2007年第03期
HBV属嗜肝DNA病毒家族,其基因组是双链松弛环状DNA(rcDNA),相对分子量为(1.6～2.0)×109,全长约为3.2kb.在HBV的生命周期中,共价闭合环状DNA(cccDNA)是HBV的原始复制模板,对HBV的复制及感染状态的建立具有十分重要的意义[1].
作者：张涛；韩涛；高英堂；陈浩；杜智；王毅军 刊期： 2007年第03期
为探讨胸腺肽α 1在抗感染治疗中的疗效,我们观察了肝硬化合并自发性腹膜炎患者胸腺肽α 1联合抗菌素的治疗效果.
作者：马丽娜；陈新月；陈杰；黄云丽；沈成利 刊期： 2007年第03期
应用LPS联合D-氨基半乳糖(D-Gal)复制肝衰竭模型,探讨LPS与环氧化酶2(COX2)的时效关系,探讨COX2作为肝损伤治疗的一个靶的意义.
作者：施柏年；刘江；何建方；戴利成；周建方；赵卫锋；甘建和 刊期： 2007年第03期
目的 探讨IFN诱导的粘病毒抵抗蛋白A(MxA)和真核细胞起始因子2 α调节区2(eIF-2α-reg2)基因的单核苷酸多态性(SNP)与CHB患者IFN治疗效果的关系.方法 采用前瞻性研究方法,262例CHB患者签署知情同意书后予IFN α治疗12个月,随访至停药后6个月时评价疗效,分为持续应答和非持续应答.应用PCR及限制片段长度多态性的分析方法,检测患者MxA启动子-88、-123位点及eIF-2α-reg2的SNP,并比较SNP与IFN疗效的关系.结果 262例CHB患者IFN治疗的应答情况为持续应答50例(19.1%),非持续应答212例(80.9%).MxA启动子-88位点(G/T),GG型患者与GT型CHB患者IFN疗效比较,差异有统计学意义(OR 5.3,95%置信区间2.46～11.43,P＜0.01);TT型与GT型患者的疗效比较,差异有统计学意义(OR 4.1,95%置信区间1.86～9.09,P＜0.01).MxA启动子-123位点(C/A)、eIF-2 α-reg2位点(A/G)各基因型及MxA启动子-88与-123组成4种可能的单体型患者IFN疗效比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 MxA启动子-88位点为GT基因型的CHB患者对IFN治疗反应好,可作为IFN疗效的预测指标.
作者：黄雁翔；马丽娜；陈新月；李卓；黄云丽；沈成利；马冰 刊期： 2007年第03期
目的 动态观察慢性乙型肝炎患者重组复合干扰素(CIFN)α治疗过程中PDC、淋巴细胞亚群的变化.方法 采用流式细胞分析技术检测23例慢性乙型肝炎患者CIFN治疗过程中外周血浆样树突状细胞(PDC)和淋巴细胞亚群百分比及数量.结果 经CIFN治疗后,患者的应答率为43.5%.外周血PDC的百分比和绝对数显著减少(P值均＜0.05),有效组与无效组PDC百分比和绝对数平均值在同一时间点无明显差别.同时CD3细胞、CD4T淋巴细胞、B淋巴细胞明显减少(P值均＜0.05),CD4/CD8明显下降(P＜0.05),但在治疗的24周及随访24周后患者CD8+T淋巴细胞、自然杀伤细胞有增加(P＜0.05).结论 经CIFN治疗,慢性乙型肝炎患者外周血PDC、CD8T淋巴细胞、自然杀伤细胞数量出现变化,部分患者可以获得持续性病毒学及生化学应答.
作者：张爱民；王慧芬；季伟；张政；闫涛；张晖；王福生 刊期： 2007年第03期
目的 观察中国舟山群岛慢性HBV感染者的基因型与临床病理变化的关系.方法 180例两代以上生活在舟山群岛的当地居民,血清HBV标志物和HBV DNA均阳性的各类慢性肝病患者,男147例,女33例,年龄(39.0±11.3)岁,HBV携带者(ASC)17例,CHB轻度57例,中度48例,重度9例,重型肝炎(SHB)6例,肝炎后肝硬化(LC)39例,HCC 4例.采用PCR结合Taqman MGB探针技术,对血清中HBV基因型进行分型检测,同时检测HBV血清标志物、HBV DNA、肝功能.对其中的129例患者做肝组织活检.结果 舟山群岛慢性HBV感染者HBV基因型C型135例,占75.0%,B型40例,占22.2%,B、C混合型5例,占2.8%,未见有A、D型.随着病情加重,C型所占比例逐渐增高,在ASC、CHB、LC和SHB中C型分别占41.2%(7/17例)、75.4%(86/114例)、87.2%(34/39例)、100%(6/6例);在HCC中,B、C基因型各占2例.肝组织病理学检查中,99例C基因型患者,中、重度炎症(G3～4)有84例,占84.8%,30例B基因型患者G3～4有7例,占23.3%,Z=6.47,P＜0.01.C基因型在中、重度纤维化(S3～4)的分布与B基因型比较,差异有统计学意义.在中、重度肝脏病理损伤中C型病理改变与临床诊断符合率较好;而在轻度肝脏病理损伤中,B型病理改变与临床诊断符合率较好,C型符合率较差.结论 中国舟山群岛HBV基因型为C、B及BC昆合型,以C基因型占优势,C基因型的病理损伤程度较B型严重.
作者：李世波；林志益；丁贤君；李翊卫；李绍佐；李春生；顾若薇；郭伟丽；智日增；杜文杰 刊期： 2007年第03期
目的 探讨脂联素(ADPN)是否对肝脏的免疫性损伤具有保护作用以及可能的作用机制.方法 将小鼠ADPN基因高效表达载体导入小鼠体内,获得高血清ADPN模型小鼠(表达载体组),与导入空载体的对照小鼠(空载体组)同时静脉内注射刀豆球蛋白A(Con A),以诱导肝脏的免疫性损伤,测定不同时间点血清ALT浓度,并进行肝组织病理学检查(HE染色),观察两组小鼠肝脏损伤程度是否有差异.比较两组间血清TNF α浓度的不同,探讨可能的作用机制.结果 表达载体组小鼠注射Con A后血清ALT水平的升高明显低于空载体组,差异有统计学意义(P＜0.01),组织学检查也显示表达载体组小鼠的肝损伤明显低于空载体组.经统计分析表明,ALT水平与血清ADPN水平成负相关(r=-0.5034,P=0.0121).表达组小鼠血清TNF α水平明显低于空载体组(P＜0.01).结论 脂联素对Con A诱导的肝脏免疫性损伤具有保护作用,其作用机制可能与抑制TNF α的产生进而阻断肝细胞遭受免疫性攻击有关.
作者：王会中；林虎；高德禄；詹林盛；王全立 刊期： 2007年第03期
目的 探讨药物性肝损伤(DILI)患者的临床病理学特点,为临床诊治提供病理依据.方法 选择行肝穿刺确诊DILI病例100例(男:女48:52),年龄(33.04±14.00)岁,分为急性DILI组(39例)和慢性DILI组(61例).肝组织行HE、组织化学染色和免疫组织化学染色,进行临床病理观察分析.结果 致DILI的药物种类中,中药类占21%,激素类药物占11%.其中78%的患者出现血清ALT升高和(或)胆红素升高,急性DILI组ALT异常和高胆红素发生率均高于慢性DILI组(56.41%与34.43%,χ2=4.69,P＜0.05),且程度也明显较重(P＜0.01).急性DILI组和慢性DILI组病理改变,除纤维化和胆管增生外,其余差异无统计学意义.DILI的相对病理特点主要表现为:中央静脉周围为主的肝细胞坏死,富含中性粒细胞和嗜酸性粒细胞的炎性细胞浸润,肝细胞和(或)毛细胆管性淤胆,小泡性脂肪变性为主的混合性肝细胞脂肪变性,上皮样肉芽肿结构等.结论 包括中药在内的DILI在中国大陆地区已非少见,中药应用需进一步规范.DILI有其相对临床病理特点,在临床诊治中要注意临床表现与病理特点的密切结合.
作者：周光德；赵景民；张玲霞；孙艳玲；潘登；杨建法；赵雨来 刊期： 2007年第03期
目的 研究枸杞多糖(LBP)预防大鼠酒精性脂肪肝(AFL)的效果,探讨其作用机制.方法 125只Wister大鼠随机分为4组,正常对照组:用蒸馏水灌胃;5%LBP预防组和10%LBP预防组:LBP与乙醇同时灌胃,酒精组:单纯乙醇灌胃.比较4组大鼠:肝脏病理形态,血清ALT、AST、GGT,肝匀浆脂质过氧化酶[谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、超氧化物歧化酶(SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)]以及过氧化氢(H2O2),肝细胞色素P4502E1(CYP2E1)基因及蛋白表达.结果 10周时测定AST,5%和10%LBP预防组分别为(132.3±25.7)U/L和(127.5±29.1)U/L,GGT分别为(1.9±0.5)U/L和(1.8±0.7)U/L,酒精组AST为(245.7±32.1)U/L、GGT为(4.4±0.6)U/L,预防组与酒精组比较,差异有统计学意义,P＜0.01,ALT预防组与酒精组比较,差异无统计学意义.10周时测定GSH-PX活性,5%和10%LBP预防组分别为(13.5±1.4)U·mg-l·min-1和(13.6±1.5)U·mg-1·min-1,SOD活性分别为(206.7±13.2)U/L和(203.2±18.8)U/L,酒精组GSH-PX活性为(7.2±1.6)U·mg-1·min-1和SOD活性为(116.5±13.6)U/L,预防组与酒精组比较,明显提高,差异有统计学意义,P＜0.0l.GSH含量,两预防组分别为(65.1±11.0)mg/g和(66.6±11.1)mg/g,酒精组为(30.5±10.7)mg/g,预防组与酒精组比较,明显增加,差异有统计学意义,P＜0.01.MDA含量,两预防组分别为(5.1±0.3)nmol/mg和(5.1±0.4)nmol/mg,酒精组为(14.5±3.2)nmol/mg.H2O2两预防组分别为(135.4±23.5)mmol/g和(132.6±31.8)mmol/g,酒精组为(328.5±45.6)mmol/g,两预防组比酒精组明显减少,差异有统计学意义,P＜0.01.CYP2E1基因表达,5周和10周两预防组分别为0.39±0.04,0.40±0.06和0.41±0.05,0.42±0.08,酒精组分别为0.74±0.05和1.02±0.08.蛋白表达水平两预防组分别为3.49±0.36,3.29±0.30和3.58±0.30,3.36±0.37,酒精组分别为5.63±0.44和7.90±0.26,两预防组比酒精组显著降低,差异有统计学意义,P＜0.01.两预防组大鼠肝脏脂肪性病理变化明显轻于酒精组.结论 LBP通过抑制CYP2E1基因及蛋白表达,减轻脂质过氧化反应,有效的预防AFL .
作者：古赛；王丕龙；姜蓉 刊期： 2007年第03期
人体内天然存在一类以持续高表达IL-2R α链(CD25)为特征的功能独特的T淋巴细胞亚群--CD4+CD25+调节性T淋巴细胞(CD4+CD25+Treg).它能够分泌IL 4、IL-10和TGFβ,对效应T淋巴细胞具有抑制作用,还参与了自身免疫性疾病、移植免疫、肿瘤免疫等.
作者：郑明华；张友才；陈永平 刊期： 2007年第03期
目的 探讨携带多药耐药基因1(multidrug resistance gene 1,MDR1)反义RNA重组腺病毒载体在裸鼠体内逆转肝癌多药耐药细胞HepG2/阿霉素(adriamycin,ADM)的疗效及作用机制.方法 构建携带AFP和asmdr1的重组腺病毒载体Adeno-asmdr1,ADM分级诱导肝癌细胞HepG2为多药耐药细胞HepG2/ADM,建立HepG2/ADM裸鼠皮下移植瘤模型,Adeno-asmdr1局部注射,观察移植瘤的体积、透射电镜检测移植瘤组织细胞凋亡、RT-PCR检测MDR1转录水平,评价Adeno asmdr1的抗肿瘤活性.结果 在Adeno asmdr1+ADM组,移植瘤体积无增大,而PBS组、ADM组体积明显增大;RT-PCR检测移植瘤细胞1周和4周MDR1 mRNA水平,ADM组无明显变化,Adeno-amdr1+ADM组在4周时MDR1转录水平仅为单纯ADM组的20%,经ADM+Adeno-asmdr1处理组,可见凋亡增加,ADM组和PBS处理组的裸鼠移植瘤组织中出现少量或没有凋亡.结论 携带MDR1反义RNA重组腺病毒部分逆转HepG2/ADM的多药耐药,阻止肿瘤生长,下调MDR1转录水平,导致肿瘤细胞凋亡.
作者：梅英；石毓君；丁雄；吴传新；简华刚；龚建平；刘长安 刊期： 2007年第03期
干细胞由于其多向分化的潜能而成为肝脏疾病临床治疗的新希望.关于肝相关干细胞的早期研究多集中在体外诱导分化平台和技术的建立,在基础研究取得相当进展的同时,国内外已有多家研究通过临床试验获得了一些新的资料.为我们今后肝脏疾病的治疗开辟了新的视野,带来了新的希望,同时,还形成了肝脏疾病研究领域新的课题.
作者：魏来 刊期： 2007年第03期
作为肝衰竭(hepatic failure,FHF)有效治疗手段,生物型人工肝(Bioartificial liver,BAL)可以比较全面的替代肝脏解毒、生物合成和分泌代谢等功能.BAL由三部分组成:(1)生物成分;(2)生物反应器;(3)辅助循环装置:包括外部控制系统和体外循环系统.
作者：黄建荣 刊期： 2007年第03期
研究表明干细胞能够分化为多种成熟细胞如神经细胞、心肌细胞及肝细胞[1].肝损伤目前尚没有令人满意的治疗措施,干细胞应用于肝损伤的治疗具有广阔的应用前景.
作者：姚鹏 刊期： 2007年第03期
1.肝干细胞是基因治疗的良好靶细胞:肝干细胞不同于其他的人体肝细胞,有两方面的特征,即具有干细胞的高度增殖的能力,又具有向肝细胞和胆管细胞双向分化的潜能.研究表明完全分化成熟的肝细胞移植入合适的宿主之后可以在肝脏中重新分群发挥功能.
作者：尤红 刊期： 2007年第03期
目的 观察吡格列酮对TGF β诱导的大鼠HSC形态和结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响,探讨吡格列酮抑制肝纤维化的机制.方法 将大鼠HSC进行体外培养,并分为空白组、TGF β组、TGF β+不同剂量吡格列酮组.观察HSC细胞发生的形态学改变,并用免疫组织化学、流式细胞仪定性及定量检测CTGF的表达;ELISA法测定培养细胞上清液中Ⅲ型胶原的含量.结果 TGF β可以诱导大鼠HSC细胞形态发生改变和表达CTGF,且 TGF β组细胞上清液中Ⅲ型胶原含量增加(P＜0.05);吡格列酮组可以不同程度抑制TGF β诱导的细胞形态学改变,各组CTGF的表达水平以及Ⅲ型胶原分泌均低于TGF β组(P＜0.05),且呈剂量依赖性(P＜0.05).结论 吡格列酮能够抑制TGF β诱导的大鼠HSC细胞形态改变、CTGF表达及Ⅲ型胶原的分泌,对肝纤维化具有抑制作用.
作者：贾晋斌；刘燕；陈尉华；刘梅；陆伦根 刊期： 2007年第03期
目的 构建TIMP-1小干扰RNA(siRNA)真核表达载体并观察其对肝星状细胞株TIMP-1 mRNA表达的作用.方法 根据siRNA设计原则,在TIMP-1 mRNA序列中选择2个特异性靶序列(447～465 nt、552～540 nt)及1条无关对照序列;体外合成对应发卡样DNA片段,将其克隆入pGEM T连接载体,BamH I和Xho I分别双酶切pGEM-T及表达载体pRNAT-U6.2,胶回收粘末端将特异序列定向亚克隆构建TIMP-1 pRNAT-U6.2/siRNA载体,用脂质体包裹转染入T6细胞,采用RT-PCR检测TIMP-1 mRNA表达水平的变化.结果 所构建的TIMP-1 pRNAT-U6.2/siRNA载体,经酶切鉴定与测序,结果显示特定位点靶序列与设计序列完全一致;转染T6细胞后,TIMP-1 mRNA表达明显降低.结论 成功构建TIMP-1 siRNA载体TIMP-1 pRNAT-U6.2/siRNA,转染T6细胞可以有效抑制TIMP-1 mRNA的表达.
作者：田力；李继昌；赵国强；陈奎生；樊文辉；娄新；孙淼淼；曹学全 刊期： 2007年第03期
目的 探索人骨髓来源多能成体祖细胞(hMAPCs)在与人肝细胞系L02在体外共培养条件下诱导分化为肝细胞的可行性,为其在组织工程学研究和临床医学中的广泛应用奠定基础.方法 (1)取健康成人志愿者适量骨髓采用CD45、糖化蛋白A(GlyA)免疫微磁珠负分选,纯化培养CD45、GlyA hMAPCs.(2)间接共培养:将分别接种于盖玻片上的传代hMAPCs和人肝细胞系L02(密度均为1×105/ml)按照各50%比例共置于直径10 cm培养皿中,培养液共通,实现间接共培养.分别于第1、3、5、7天免疫细胞化学鉴定hMAPCs的Alb、AFP、细胞角蛋白18(CK18)、细胞角蛋白19(CK19)等肝细胞特征性表型表达变化情况,并设阳性对照(单独培养的L02细胞)和阴性对照(单独培养未经诱导的hMAPCs),计数阳性细胞比率.(3)直接共培养:将CFSE荧光(绿色)标记的hMAPCs与L02(密度均为1×104/ml)按照各50%比例混合后接种于激光共聚焦显微镜检查专用培养皿内,实现直接共培养.5 d后用SABC-Cy3免疫荧光(红色)双标后在激光共聚焦显微镜下分别观察hMAPCs表达Alb、AFP、CKl8的情况.同样设阳性对照(单独培养的CFSE标记L02细胞)和阴性对照(单独培养的CFSE标记MAPCs).镜下表达黄色荧光的细胞即是向肝细胞分化的MAPCs,为阳性细胞;单纯表达绿色荧光的细胞为未分化的MAPCs;单纯表达红色荧光的细胞为L02细胞.结果 (1)间接共培养结果:AFP作为不成熟肝细胞的表型标志,在间接共培养第1天表现为强阳性表达,随后逐渐减弱,至第7天,AFP的阳性表达已经很少.而Alb在第1天有可疑阳性表达,第3天,Alb即出现较强的阳性表达,第5天,Alb的阳性表达就达到高峰,第7天,密集生长的细胞仍广泛的阳性表达Alb.第1、3天检测CK18均为阴性,至第5天CK18开始出现阳性表达,第7天CK18阳性表达较前增强.CK19在各时间点均为阴性着色.阳性对照细胞Alb及CK18有较强的阳性表达,AFP弱阳性表达,CK19阴性表达.阴性对照细胞均为阴性表达.(2)直接共培养结果:Alb和CK18检测时,较多细胞质内出现黄色荧光表达,而AFP阳性荧光表达则仅出现在极个别细胞质内,该结果与阳性对照细胞荧光表达类似,而阴性对照细胞未见有阳性荧光表达.结论 (1)与人肝细胞系L02间接共培养能够诱导人骨髓来源的MAPCs向成熟肝样细胞定向分化.(2)与人肝细胞系L02直接共培养能够诱导人骨髓来源的MAPCs向成熟肝样细胞定向分化,且时间有提前趋势.
作者：慕宁；王明元；林雨冬；高毅 刊期： 2007年第03期
目的 探讨1.5 T MRI活体示踪磁标记干细胞经门静脉肝脏移植的可行性.方法 大鼠间充质干细胞以菲立磁和DAPI标记后,经门静脉注入大鼠肝脏,分别于移植前及移植后1 h、3 d、7 d和14 d行MRI扫描,并与组织荧光显像和铁染色对照.结果 移植后1 h、3 d、7 d及14 d肝脏信噪比分别为1.10±0.26、8.18±1.55、11.08±1.30、14.15±1.02,7 d以内肝脏信噪比与移植前比较均有明显降低(P＜0.05).各时相肝组织铁染色与荧光显像的空间分布一致.结论 1.5 T MRI活体示踪经门静脉移植的磁标记干细胞是可行的,MRI示踪时间可持续7 d.
作者：蔡金华；冯敢生；王新；刘官信；张德迎；胡琳燕 刊期： 2007年第03期
目的 体外诱导人胎肝非实质间充质干细胞(NPMSCs)分化为类肝细胞,对类肝细胞进行分子生物学及功能鉴定.方法 采用体外细胞培养技术,分离培养人胎肝NPMSCs,在1%基质胶作基质,2.5 mmol/L氮胞苷预处理10～12 h,肝细胞生长因子10 μ g/L加成纤维细胞生长因子4 10μg/L加肝细胞生长培养基中诱导.用显微摄像和四甲基偶氮唑盐研究细胞增殖及生长特征,用流式细胞仪、免疫组织化学和逆转录聚合酶链反应鉴定细胞表型.采用酶联免疫吸附法检测培养上清液中人Alb水平,过碘酸希夫试验进行糖原染色.结果 从人胎肝获得贴壁细胞种植后生长分裂良好,连续传10代后,每份人胎肝NPMSCs可扩增达109个细胞.NPMSCs表型为CD166阳性,CD34阴性.在添加成纤维细胞生长因子4和肝细胞生长因子的基质胶上诱导培养的NPMSCs在21～28 d时,形态由长梭形变为三角形、多角形或类圆形.细胞转圆率为40%,双核细胞比率5%.免疫组织化学和逆转录聚合酶链反应检测显示未诱导培养的NPMSCs中,有较少的细胞表达甲胎蛋白及其mRNA,未见其他肝脏特有的转录因子或者细胞质蛋白标志.诱导早期可见较多细胞表达GATA4、甲胎蛋白和CK18及其mRNA,至诱导后期表达下降,而Alb、CK18、谷胱甘肽S转移酶π和肝细胞核因子1 α表达逐渐上升.Alb、CK1 8阳性细胞比例达60%.未诱导分化的NPMSCs不分泌Alb,诱导分化的NPMSCs以时间依赖方式产生Alb.NPMSCs诱导14 d时首先见到部分细胞出现红紫色染色的糖原积聚物,28 d后阳性染色细胞数量增多.结论 在本实验诱导条件下可获得在复制及翻译各环节肝细胞标志阳性的类肝细胞.诱导后NPMSCs已具备肝细胞特有的功能性特征.
作者：何念海；赵文利；王宇明 刊期： 2007年第03期
