目的 探讨应用亲代谢性谷氨酸受体亚型3(mGlu3)特异性拮抗剂LY341495阻断受体通路后对脑胶质瘤干细胞(glioma stem cells,GSCs)生物学特性的作用及相关机制.方法 将培养人脑胶质瘤干细胞以及裸鼠移植瘤动物模型分为对照组、激动剂组,拮抗剂组,采用CCK-8法测定细胞增殖率,流式细胞术观察细胞周期变化,免疫组织化学染色激光共聚焦显微镜观察细胞CD133表达情况,RT-PCR和Western blot分别检测β-catenin、c-myc等mRNA和蛋白表达,观察裸鼠移植瘤生长变化.结果 与对照组比较,拮抗剂组GSCs增殖率和进入S期的比例均显著降低(P<0.05),且呈时间依赖性;在分化培养基条件下,拮抗剂组GSCs向星形胶质细胞分化明显,Nestin阳性细胞减少而GFAP阳性细胞增多(P<0.05);mGlu3拮抗剂干预后,诱导β-catenin、c-myc等mRNA和蛋白表达明显下调(P<0.05);与对照组比较,拮抗剂组裸鼠移植瘤生长速度及肿瘤体积明显降低(P<0.05).结论 药物阻断mGlu3受体通路可显著抑制体外培养的GSCs以及裸鼠体内移植瘤的生长,并促使GSCs由去分化状态转向分化状态,此过程可能经由Wnt/β-catenin通路发挥作用.
作者:周坤;杨辉;周伟;张春青;树海峰;王彬 刊期: 2012年第17期
目的 研究白介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)对人膝关节滑膜细胞基质金属蛋白酶-2(Matrix metalloproteinase-2,MMP-2)活性的影响及MAPK和NF-κB信号通路抑制剂对该过程的影响.方法 用不同浓度的IL-1β处理体外培养的滑膜细胞72 h,明胶酶谱法检测细胞培养液中MMP-2的活性;选取10 ng/ml的IL-1β单独或分别与4种信号通路抑制剂(NF-κB抑制剂Bay11-7082,MAPK抑制剂SB203580、PD98059和SP600125)处理滑膜细胞,处理后12、24、48、72 h检测MMP-2的活性.结果 IL-1β随浓度和处理时间的增加明显上调滑膜细胞MMP-2的活性(P<0.05);与IL-1β处理组比较,Bay11-7082明显抑制了IL-1β诱导MMP-2活性的上调,并使72 h时MMP-2的活性降至13%(P<0.01);其他抑制剂对IL-1β诱导MMP-2活性上调的影响无统计学差异(P>0.05).结论 IL-1β以时间和剂量依赖方式,通过NF-κB信号通路诱导滑膜细胞MMP-2活性.
作者:陈荣富;黄伟;谢静;梁熙;KL Paul Sung;王春莉;符纯锋 刊期: 2012年第17期
目的 观察6-羟多巴(6-hydroxydopamine,6-OHDA)损伤大鼠黑质后迷走神经背核(dorsal motor nucleus of the vagus,10N)中乙酰胆碱转移酶(choline acetyltransferase,ChAT)和酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)含量的变化.方法 16只SD大鼠根据随机数字表分为6-OHDA大鼠组和对照组.6-OHDA大鼠组双侧黑质(substantia nigra,SN)内注射6-OHDA,对照组双侧SN内注射等体积的生理盐水.6周后断头取脑,Nissl染色观察SN和10N中的Nissl小体,免疫荧光和免疫印迹检测SN内TH和10N内ChAT与TH的表达.结果 与对照组比较,6-OHDA大鼠组SN内TH阳性细胞数量从(54±5)个减少至(13±2)个(P<0.05),蛋白表达水平从0.62 ±0.13降低至0.34±0.11(P<0.05),10N中ChAT阳性细胞数量从(37±3)个减少到(26±5)个(P<0.05),TH阳性细胞数量从(6±3)个增加到(13±2)个(P<0.05),背侧延髓内ChAT的蛋白表达水平从0.07±0.02下降至0.05 ±0.02(P <0.05),TH蛋白表达水平从0.08±0.05增高到0.13 ±0.04(P <0.05).结论 6-OHDA大鼠10N中ChAT和TH表达变化可能与帕金森病患者的胃排空障碍存在一定的联系.
作者:连辉;蔡青青;王志勇 刊期: 2012年第17期
目的 比较血液透析联合血液灌流与常规血液透析、血液透析滤过对慢性肾功能衰竭继发性甲旁亢患者甲状旁腺激素(iPTH)和微炎症状态的影响.方法 将60例维持性血液透析患者采用完全随机方法分为3组:血液透析组(HD)、血液透析滤过组(HDF)和血液透析+血液灌流组(HD+HP),比较对血清iPTH、白介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor Necrosis factor-α,TNF-α)和C-反应蛋白(c-reactive protein,CRP)的清除率以及对临床症状的改善.结果 (1)HD +HP组治疗前后血CRP水平比较有显著性差异(P<0.05),HD+HP组和HDF组治疗前后血iPTH、IL-6、TNF-α水平比较有显著性差异(P<0.05),HD组治疗前后比较均无显著性差异(P>0.05).HD+ HP组iPTH、IL-6、TNF-α清除率比HDF组高(P<0.05).(2)HD+ HP组、HDF组治疗后骨痛和肌无力、皮肤瘙痒、心绞痛等均明显好转,有效率均优于HD组(P<0.05);HD+ HP组的治疗有效率优于HDF组(P<0.05).(3)患者CRP与IL-6(r=0.554,P<0.01)、TNF-α(r =0.572,P<0.01)及iPTH(r=0.541,P<0.01)呈显著正相关,iPTH与IL-6(r=0.533,P<0.01)、TNF-α(r=0.516,P<0.01)呈显著正相关.结论 HD+HP可有效清除iPTH、IL-6、TNF-α及CRP,从而改善慢性肾功能衰竭继发性甲旁亢患者的微炎症状态、减轻临床症状;HDF亦能有效清除iPTH及IL-6、TNF-α,但清除效果不及HD+ HP; HD不能有效清除IL-6、TNF-α、iPTH及CRP.
作者:张建荣;李小萍;张艳霞 刊期: 2012年第17期
目的 观察去甲肾上腺素( norepinephrine,NE)预处理人巨噬细胞基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达及其致动脉粥样硬化机制.方法 体外培养的U937巨噬细胞,以10-10、10-9、10-8、10-7 mol/L NE分别刺激细胞0、1、3、6、12、24 h.RT-PCR法测细胞MMP-9 mRNA水平,Western blot法检测细胞MMP-9蛋白表达,ELISA法测细胞培养液上清中MMP-9蛋白水平的表达.预先加入抗氧化剂NAC( 10 mmol/L)和NAD(P)H氧化酶抑制剂DPI(10-5 mol/L)孵育1h后再用不同浓度的NE分别刺激细胞24 h,用荧光探针法检测细胞内ROS的生成;用RT-PCR及ELISA法检测细胞MMP-9 mRNA和蛋白的表达.结果 NE浓度时间依赖性地增加巨噬细胞MMP-9 mRNA(10-7 mol/L NE为对照组的4.65倍,P<0.01)及蛋白(10-7 mol/L NE为对照组的4.14倍,P<0.01)表达;随着NE浓度的升高,ROS的生成分别为对照组的2.18、3.22、3.64、4.50倍(P<0.01).NAC和DPI都一定程度地抑制了MMP-9 mRNA[ DPI组为NE组的0.752倍(P<0.05),NAC组为NE组的0.500倍(P<0.01)]和蛋白(DPI组为NE组的0.698倍,NAC组为NE组的0.671倍,均P<0.05)的表达.结论 NE浓度和时间依赖性地诱导人巨噬细胞U937 MMP-9的表达,通过NAD(P)H氧化酶介导的ROS通路而促进炎症反应,促进AS的发生、发展.
作者:李明;孙守兵;周越;庞晓明;席娟;金泰宇;姚文平 刊期: 2012年第17期
目的 观察脊髓背角糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)在慢性病理性神经痛中的作用.方法 成年SD大鼠分为假手术组、坐骨神经慢性压迫损伤(CCI)组、CCI+生理盐水组、CCI+ RU38486治疗组.测定各组大鼠不同时间点热缩足反射潜伏期(TWL);CCI组于术后7、14 d处死大鼠,取L4~L6脊髓冰冻切片,应用免疫组织化学方法观察GR表达变化;大鼠蛛网膜下腔埋管,于CCI术后1~14d鞘内注射生理盐水、GR拮抗剂RU38486,测定其对TWL的影响.结果 CCI大鼠术后1d损伤侧下肢TWL即显著降低,到第14天热疼敏仍持续存在;术后7、14 d损伤侧L4~L6节段脊髓背角GR表达显著增加(P<0.05);术后1~14d鞘内给予GR拮抗剂RU38486可明显减轻CCI所致的热疼敏.结论 脊髓背角糖皮质激素受体的激活可促进坐骨神经慢性压迫损伤所致的神经痛的发生和维持.
作者:李敏;肖菊平;曾俊伟;肖智;陈远寿;田虹;刘晓红 刊期: 2012年第17期
目的 探讨14-3-3γ基因在LPS预处理对抗心肌细胞缺氧/复氧(A/R)损伤中的作用.方法 构建pSUPER/14-3-3γRNA干扰重组质粒,转染入心肌细胞,分为5组:对照组、A/R组、LPS+ A/R组、pSUPER+ LPS+ A/R组、pSUPER/14-3-3γ+ LPS+ A/R组.Western blot检测14-3-3γ蛋白表达,生化自动分析仪测定乳酸脱氢酶(LDH)活性,MTT法测定细胞存活率,流式细胞仪检测细胞凋亡,线粒体肿胀实验检测线粒体通透性转换孔(mPTP)开放.结果 A/R损伤使细胞存活率下降,LDH升高,细胞凋亡增加,mPTP开放;LPS预处理可使14-3-3γ表达明显增加,通过抑制mPTP开放,对A/R损伤的细胞有保护作用;pSUPER/14-3-3γRNA干扰重组质粒通过抑制14-3-3γ蛋白表达,取消LPS预处理的保护作用.结论 LPS预处理可对抗心肌细胞缺氧/复氧损伤,其机制与上调14-3-3γ,从而抑制mPTP开放有关.
作者:刘丹;尹东;汤蕾;孙惦;许旻;何明 刊期: 2012年第17期
目的 研究丙泊酚后处理对离体大鼠缺血再灌注心肌细胞的保护作用以及对PI3 K/Akt信号通路的影响.方法 选用SD大鼠28只,按照随机数字表法分为缺血再灌注组(I/R组)、丙泊酚后处理组(PPC组)、丙泊酚后处理+Wortmannin后处理组(PPC+W组)、Wortmannin组(W组).4组均建立Langendorff离体心肌缺血再灌注模型.各组心肌做相应分组处理后,观察缺血前及再灌注120 min时左室心功能变化情况,免疫组化检测Bcl-2蛋白的表达,Tunel法检测各组心肌细胞凋亡情况,Western blot测定p-Akt( Ser473)蛋白表达.结果 与I/R组相比,PPC组LVEDP降低[(43.31±4.70)vs(29.93±3.72),P<0.05],+dp/dtmax和-dp/dtmax均明显升高[(1140±138)vs(1622±160),(749±99) vs(1008±178),P<0.05],心肌组织Bcl-2蛋白和p-Akt的表达均增加[(0.1719±0.0121)vs(0.1991±0.0144),(0.2414±0.0539)vs(0.4363±0.0817),P<0.05],心肌细胞凋亡明显减少[(33.87 ± 1.72) vs (29.84±1.83),P<0.05].Wortmannin能阻断丙泊酚后处理的心肌保护效应(P<0.05).结论 丙泊酚后处理能减少离体大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡,发挥心肌保护作用,其保护机制与激活PI3K/Akt信号通路及上调Bcl-2蛋白的表达有关.
作者:刘柳;庞勇;何东伟;刘新伟 刊期: 2012年第17期
目的 研究胃转流术对2型糖尿病大鼠肝脏FoxO1表达的影响.方法 40只SD大鼠随机分为糖尿病手术组(A组)、假手术组(B组)、正常对照组(C组)、糖尿病对照组(D组),每组10只.C、D组按A、B组术前和术后4、8、16、24周检测空腹血糖、空腹和餐后血清胰岛素、胰高血糖素样肽(GLP-1).24周后处死各组大鼠,免疫组化和Western blot检测各组肝脏中FoxO1的表达.结果 A组术后4周空腹血糖由术前的(20.2±2.1)mmol/L降至(10.5±2.5) mmol/L,术后24周空腹血糖为(7.7±1.1)mmol/L,术后4周空腹胰岛素由术前(2.87±0.08) mU/L增至(2.91±0.08) mU/L,术后24周空腹胰岛素为(3.00±0.06)mU/L;术后4周空腹血清GLP-1由术前(8.7±0.9)pmol/L升至(13.2±1.0) pmol/L,术后24周为(23.5±0.2)pmol/L.A组术后24周肝脏FoxO1表达量为18.4±1.2,B组为37.6±0.5,C、D两组分别为9.2±1.0、35.8±0.4,A组术后FoxO1的表达量明显低于R、D组,差异有统计学意义(P<0.05).A组血清GLP-1浓度与肝脏FoxO1的表达量成负相关(r=-0.864,P<0.05).结论 胃转流术可显著降低2型糖尿病大鼠肝脏FoxO1的表达,降低血糖.
作者:陈志雄;张军;张刘平;寇耀;蒙长远;张能;汪志红 刊期: 2012年第17期
目的 初步研究异黄改构化合物F11的雌激素效应.方法 构建去双卵巢大鼠动物模型,经腹腔注射F11[15、50、150 mg/(kg·d)3个剂量组(F11-15组、F11-50组、F11-150组)]共10周,同时设置阴性对照组,阳性对照组(E2)和假手术组,统计分析各组大鼠子宫湿质量/体质量情况,HE染色观察用药前后阴道涂片和子宫内膜变化情况;Westernblot检测子宫内膜组织ERα和ERβ的表达情况.结果 F11-50及F11-150组大鼠子宫湿质量/体质量显著高于阴性对照组(P<0.05),且F11-150组与E2和假手术组无显著差别(P>0.05).阴性对照组大鼠阴道涂片以炎细胞为主,F11各组以角化上皮细胞为主,与E2和假手术组相似;F11各组较阴性对照组子宫内膜腺体数目增多,腺腔增大,F11-150组与E2和假手术组相似.F11各组ERα及ERβ蛋白表达均强于阴性对照组(P<0.05),其中ERα表达弱于E2和假手术组(P<0.01),而F11-150组ERβ的表达强于E2和假手术组(P<0.05).结论 F11在增加去双卵巢大鼠子宫湿质量、阴道上皮成熟及子宫内膜ER的表达等方面均表现出雌激素效应,该效应主要通过ERβ介导.
作者:陈诚;王琳;艾国平;常青 刊期: 2012年第17期
目的 构建人水甘油通道蛋白9( aquaglyceroporin9,AQP9)重组质粒,验证其在L-02肝细胞中的表达,并检测其对非酒精性脂肪肝病( nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)细胞模型的作用.方法 从人肝脏组织中提取总RNA,RT-PCR获得AQP9基因,克隆到载体pEGFP-N1上,构建重组质粒pEGFP-N1-AQP9.将其转染L-02细胞,通过荧光显微镜观察其转染情况,RT-PCR和Western blot检测AQP9基因在细胞中的表达.通过油红O染色,测定甘油三酯、游离脂肪酸及甘油含量,检测其对L-02细胞脂肪变性模型的作用.结果 成功构建pEGFP-N1-AQP9重组质粒,并能在L-02细胞中表达,将其转染L-02细胞脂肪变性模型后,油红O染色可见油酸/pEGFP-N1-AQP9转染组较油酸组细胞内脂质含量明显升高,油酸/pEGFP-N1-AQP9转染组细胞内甘油三酯、游离脂肪酸及甘油含量分别为(5.435±0.337)、(2.016±0.144)、(1.485 ±0.113) mmol/L,而油酸组分别为(3.218 ±0.220)、(1.538±0.193)、(1.024±0.148) mmol/L,两者之间差异有统计学意义(P<0.01),说明上调AQP9表达量可使其脂肪变性程度加重.结论 AQP9异常升高能够引起或加重非酒精性脂肪肝病.
作者:王川;袁媛;姜政;王丕龙 刊期: 2012年第17期
目的 研究肿瘤坏死因子-α (TNF-α)与口腔扁平苔藓(oral lichen planus,OLP)的相关性.方法 应用限制性片段长度多态性-聚合酶链反应(PCR-RFLP)检测151例OLP患者(包括81例糜烂型扁平苔藓和70例非糜烂型扁平苔藓)和143例健康对照者的TNF-α-308位点单核苷酸多态性,分析其基因型和等位基因频率,并进行关联分析.结果 TNF-α-308位点的基因型和等位基因频率分布在OLP组与对照组之间无显著性差异(P>0.05),但在糜烂型OLP组与对照组之间比较均有显著性差异(P<0.05);基因型频率的相对风险分析发现,TNF-α-308 TNF2基因型患糜烂型OLP的风险是TNF1的2.268倍(OR=2.268,P<0.05).结论 TNF-α基因启动子区-308位点的多态性可能不是影响OLP的一个独立因素,但TNF-α- 308 *A等位基因可能是扁平苔藓局部炎症反应加重的危险因子之一.
作者:柏景坪;王红健;付洁;陈方淳 刊期: 2012年第17期
目的 比较不同的银汞粘接剂修复根面龋的充填体边缘细菌学和微渗漏情况.方法 将制备洞型后的100颗离体牙按随机数字表法分为5组(银汞充填组、树脂加强型玻璃离子联合银汞合金组、玻璃离子组、全酸蚀粘接剂联合银汞合金组、自酸蚀粘接剂联合银汞合金组)材料充填,进行细菌培养并菌落计数,染色法观察微渗漏,并进行统计学分析.结果 5组材料的细菌学和微渗漏实验结果间差异具有统计学意义(P<0.05),树脂加强型玻璃离子组细菌数量和微渗漏显著少于其他组,其次分别为全酸蚀粘接剂组、自酸蚀粘接剂组、玻璃离子组,银汞合金组则为严重.结论 用树脂加强型玻璃离子作银汞合金粘接修复的粘接剂能更有效地预防继发龋和充填物脱落.
作者:彭志庆;单春城;刘明方;魏信汉 刊期: 2012年第17期
目的 考察军医大学新生集训应激后成长及影响因素.方法 2011年某军医大学新生入学集训1个月后,采用Connor-Davidson回弹力问卷(CD-RISC)、应激后成长问卷(PTGI)、情绪调节方式问卷(ERS)、积极情感消极情感量表(PANAS)和情绪调节量表(ERQ)对来自不同地区的137名军校新生进行调查.结果 ①军校大学新生集训应激后成长与心理弹性(r=0.611,P<0.01)、抑制调节(r=0.309,P<0.01)、宣泄调节(r=0.333,P<0.01)、正性情绪(r=0.588,P<0.01)和认知重评(r=0.372,P<0.01)显著正相关,与负性情绪显著负相关(r=-0.204,P<0.05).②军医大学新生应激后成长高分组在心理弹性、抑制/宣泄调节、正性情绪和认知重评得分上显著高于低分组(P<0.05,P<0.01).③军医大学新生的心理弹性、抑制调节、正性情绪和认知重评能较好地预测应激后成长,解释率为53%.④心理弹性、抑制调节、正性情绪和认知重评直接正性影响应激后成长,且抑制调节、正性情绪和认知重评还可通过心理弹性间接正性影响应激后成长.结论 心理弹性、抑制/宣泄调节、正/负性情绪和认知重评与应激后成长密切相关,且心理弹性、抑制调节、正性情绪和认知重评是应激后成长的重要影响因素.
作者:缪毅;彭李;李敏;曹伟丽;颜怀城;蒋永恒;汪涛 刊期: 2012年第17期
目的 评估纳米羟基磷灰石( nano-hydroxyapatite,n-HA)/聚酰胺66(PA66)/玻璃纤维(glass fiber,GF)新型生物活性螺钉固定犬髁间骨折的效果.方法 制备n-HA/PA66/GF生物活性螺钉.取24只成年中华田园犬,按随机数字表法分为2组:生物螺钉实验组和金属螺钉对照组.使用电锯将动物股骨外侧髁锯断造股骨髁间骨折,分别使用生物螺钉及金属螺钉固定骨折.术后4、8、12、24周行大体观察、组织学、CT片、生物力学及血常规、生化检测,术后24周行肝、肾、脾组织学检测.结果 2种螺钉均能有效固定犬髁间骨折.术后2组动物均活动正常,切口愈合良好.术后12周CT显示2组动物髁间骨折均已骨性愈合.组织学检测发现n-HA/PA66/GF螺钉表面被新生骨覆盖,新生骨不断钙化、成熟,骨-钉界面结合紧密.金属螺钉与骨之间存在较大间隙,螺钉周围骨组织被1层纤维组织包裹.生物力学测试证实2组大推出载荷在术后4、8、12周无统计学差异(P>0.05),但在术后24周有统计学差异(P<0.05),推出生物螺钉所需的大载荷比金属螺钉对照组大.生物螺钉实验组术后24周碱性磷酸酶水平升高[ (58.8±14.49)U/L],2组其余外血常规、生化均正常.2组肝、脾、肾HE染色未见异常.结论 n-HA/PA66/GF生物活性螺钉具有良好的内固定性能和体内相容性.
作者:苏保;李吉东;蒋电明;李玉宝;邬均;李军 刊期: 2012年第17期
目的 研究HBV-DNA低复制、肝功能基本正常或轻微异常的慢性乙肝患者(chronic hepatitis B,CHB)肝纤维化血清指标与肝组织纤维化程度之间的关系.方法 选择84例HBV-DNA低复制、肝功基本正常或轻微异常的CHB患者,采用双抗体夹心酶联免疫法检测血清透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型胶原(PcⅢ)、Ⅳ型胶原(CⅣ)水平,并与其肝组织病理分期进行对比研究.结果 不同年龄段的HBV-DNA低复制、肝功基本正常或轻微异常的CHB患者其HA、LN、PcⅢ、CⅣ水平均具有显著性差异(P<0.01),血清HA、PcⅢ和CⅣ水平随着肝内纤维化程度的加重而递增,并与肝纤维化程度呈正相关,而LN水平在肝纤维化各期无明显差异,与肝纤维化程度无明显相关性(P>0.05).结论 对于不同年龄段的HBV-DNA低复制、肝功基本正常或轻微异常的CHB患者,血清肝纤维化指标可作为反映此类患者肝纤维化程度的参考指标,并对该类患者治疗时期的选择具有一定的指导意义.
作者:张立婷;赵荣荣;陈红;李俊峰 刊期: 2012年第17期
目的 考察汉防己碱(Tet)对白血病K562细胞生长的影响.方法 采用体外细胞培养,即在37℃、5%CO2、饱和湿度的培养箱中培养,培养液为含10%热灭活NBS的完全RPMI1640细胞培养基.待K562细胞与药物作用48 h后,收集并处理细胞,结合MTT和Western blot法研究Tet对K562细胞生长的作用特点.结果 Tet在0.33~1.00 μg/ml仅使K562及K562/ADM细胞的存活率降低至75% ~ 80%,低浓度Tet(0.33 μg/ml)使阿霉素(ADM)和顺铂(cDDP)对K562细胞生长的IC50增加(P<0.01),1.0 μg/ml Tet则降低IC50,使ADM对K562/ADM细胞的IC50增加,cDDP的IC50无明显变化.0.33μg/ml Tet有提升2种细胞的P-gp和MRP1表达的作用(P<0.05).Tet各浓度对LRP表达无明显影响.结论 Tet对K562及K562/ADM细胞生长抑制作用具浓度依耐性,低浓度具加速耐药的作用,其促进耐药细胞发展的机制至少与提升P-gp和MRP1表达有关.
作者:蒋心惠;滕永真;何百成;周岐新 刊期: 2012年第17期
目的 研究蛋白酶体抑制剂硼替佐米对人肺癌A549细胞增殖、细胞周期及在体成瘤的影响.方法 采用不同浓度的硼替佐米(0、100、200 nmol/L)作用于A549细胞4h,观察其对蛋白酶体活性的影响.用硼替佐米(0、100、200 nmol/L)处理A549细胞48 h,采用MTT法、3H-TdR掺入法检测细胞增殖;流式细胞术PI染色检测细胞周期;Westernblot检测p21、p27表达水平的变化;连续注射观察硼替佐米对裸鼠A549细胞移植瘤体积及质量的影响.结果 硼替佐米可显著抑制A549细胞的蛋白酶体活性.MTT法、3H-TdR法检测显示,100 nmol/L处理组细胞较对照组增殖率分别降低24.5%、29.5%,200 nmol/L处理组进一步显著下降(P<0.05);细胞周期分析显示,100、200 nmol/L处理组G0/G1期较对照组明显增加(P<0.05).Western blot检测显示,48 h时100、200 nmol/L处理组p21、p27蛋白表达较对照组明显增加,且呈浓度依赖(P<0.05),48 h蛋白质水平高于24h.连续注射硼替佐米后裸鼠移植瘤的质量抑制率达(36.0±12.4)%.结论 硼替佐米可抑制A549细胞增殖,诱导细胞凋亡及发生G0/G1期阻滞,在体注射可抑制裸鼠成瘤,其抗肿瘤活性可能与抑制细胞周期蛋白p21、p27的降解有关.
作者:谢燕;喻秀丽;童立纺 刊期: 2012年第17期
目的 探讨HBV感染相关的慢加急性肝衰竭患者(HBV-associated acute-on-chronic liver failure,HBV-ACLF)外周血中TCRγδT(γδT)细胞的比例及产生IFN-γ、TNF-α及IL-17等促炎细胞因子的能力,分析它们与临床指标间的相关性.方法 入选26例HBV-ACLF患者、40例慢性HBV感染患者(CHBV)、25例健康对照者,用流式细胞仪方法检测外周血中γδT细胞的频率及产生炎性细胞因子IFN-γ、TNF-α、IL-17细胞的比例,采用SPSS 13.0统计软件分析各组间各细胞比例的差异及细胞比例与临床指标的相关性.结果 HBV-ACLF患者外周血中γδT细胞占总T细胞的比例的中位值为4.8%,低于CHB患者(10.7%)与健康对照者(10.3%),差异有统计学意义(P<0.01).在体外经刺激后,IFN-γ阳性的γδT细胞在HBV-ACLF组的比例中位值为73.9%、CHBV组为70.9%,高于健康对照组(45.3%,P<0.01);HBV-ACLF患者中TNF-α阳性的γδT细胞中位值为26.7%,显著高于CHBV患者(11.5%)及健康对照组(11.7%,P<0.01);产生IL-17因子的γδT在HBV-ACLF组中中位值为0.7%,高于CHBV组(0.3%)及健康对照组(0.3%,P<0.01).经Spearman Correlation相关性分析,HBV-ACLF组中TNF-α+ γδT细胞的比例与ALT或AST水平呈负相关.结论 虽然HBV-ACLF患者外周血中总的γδT细胞比例降低,但产生炎性细胞因子IFN-γ、TNF-α、IL-17的能力显著增强,可能参与了HBV-ACLF发病过程中炎症因子急剧升高的过程.
作者:彭辉;陈维贤;常琳;陈敏 刊期: 2012年第17期
目的 探讨阿苯达唑( albendazole,ABZ)通过抑制人耐顺铂卵巢癌SKOV-3/DDP细胞P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)的表达对细胞耐药性的影响.方法 在体外,用溴化二甲噻唑二苯四氨唑(MTT)比色法检测ABZ对SKOV-3/DDP细胞增殖的影响,求得抑制率为0%、25%、50%、75%所对应的ABZ浓度,并按抑制率将实验分为对照组,25%抑制浓度(IC25)组、半数抑制浓度( IC50)组和75%抑制浓度(IC75)组,每组给予相应浓度的ABZ处理,并按作用时间再将每组分为12、24、36 h亚组.分别用流式细胞仪检测各组细胞表面P-gp的表达.将不同浓度的顺铂(cisplatin,DDP)、表阿霉素( epirubicin,EPI)、5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5 -Fu)按照分组,联合和序贯ABZ处理细胞后,采用MTT比色法检测SKOV-3/DDP细胞体外增殖情况.结果 ABZ作用SKOV3/DDP细胞后使P-gp表达下降,呈浓度和时间依赖性.联合和序贯ABZ均能降低DDP、EPI和5-Fu对SKOV-3/DDP细胞的作用浓度,有浓度和时间依赖性,且联合作用优于序贯作用.结论 在体外ABZ通过抑制SKOV-3/DDP细胞P-gp表达提高细胞对DDP、EPI、5-Fu的敏感性,并能逆转细胞的耐药性.
作者:何迎盈;刘娜娜;罗治彬;李少林 刊期: 2012年第17期
目的 获得鼠-人嵌合抗粘蛋白1( mucin1,MUC1) IgG全抗体,降低鼠源抗MUC1单克隆抗体(monoclonal antibody,mAb)的异种免疫原性,并在哺乳动物细胞中表达制备,初步分析其特性.方法 PCR扩增鼠mAb-6E3可变区编码基因,通过特异性限制性酶切位点克隆人含有人源IgG1抗体恒定区的哺乳动物细胞重组表达载体,获得IgG全抗体表达质粒,瞬时转染293T哺乳动物细胞,直接免疫荧光法确定细胞内人源IgG抗体表达,收获转染细胞培养上清,经亲和层析纯化后,经SDS-PAGE蛋白电泳、Western blot、流式细胞仪检测和表面等离子共振技术等分析所制备IgG抗体分子特点及其与MUC1抗原的结合活性及动力学参数.结果 所构建鼠-人嵌合IgG表达质粒能够在哺乳动物细胞中有效表达并分泌到细胞上清,纯化后蛋白质电泳分析与预期IgG抗体分子大小一致,能够与变性或天然状态下的T47D肿瘤细胞表面MUC1特异性结合,经表面等离子共振技术分析表明抗体的亲和力约为KD=2.8×10-7 M.结论 获得鼠-人嵌合抗MUC1 IgG抗体,具有与MUC1特异性结合的生物学活性.
作者:陈庆峰;牛兆河;刘翠翠;王笑峰;吴俐;张磊 刊期: 2012年第17期
目的 探讨移植巨噬细胞对大鼠缺血再灌注引起的心肌梗死后细胞外基质修复和心室重塑的影响.方法 贴壁法培养Wistar大鼠腹腔巨噬细胞,建立Wistar大鼠心肌缺血-再灌注模型,随机分为对照组(AMI组,n=23),巨噬细胞移植组(MΦ组,n=20),假手术组(n=12).术后第7天和第28天,取大鼠左室心肌组织进行组织病理学分析,分别测定膨展指数、梗死面积、非梗死区心肌细胞横截面积(CSA)、梗死区及非梗死区胶原容积分数(CVF)、梗死区胶原成熟程度.结果 与AMI组比较.,MΦ组术后第7天膨展指数[(0.27 ±0.13)vs(0.41±0.19),P<0.05]、非梗死区CSA[ (330.65 ±57.30) μm2 vs(408.00 ±99.98)μm2,P<0.01]均显著减少,MΦ组术后第28天膨展指数[(0.30±0.11 )vs(0.48±0.12,P<0.01]、非梗死区CSA[ (335.80 ±92.52) μm2vs(515.41±93.13)μm2,P<0.01]也均显著减少;术后第7天和第28天MΦ组梗死区CVF显著大于AMI组[(53.51±5.82)% vs (45.05±3.66)%,(79.17±5.58)%vs(73.17±5.94)%,P<0.01],非梗死区CVF显著小于AMI组[(2.37±0.65)%vs(4.84±1.81)%,(2.64±0.63)% vs (6.01±1.34)%,P<0.01],梗死区胶原成熟程度显著大于AMI组[(0.566±0.009)vs(0.509±0.011),(2.162±0.047) vs(1.454±0.020),P<0.01].结论 巨噬细胞心肌内移植促进梗死区胶原沉积和成熟度增加,减少梗死范围,减轻非梗死区纤维化程度和心肌肥厚程度,从而改善心肌梗死后左室重塑.
作者:任宁;周欣;李贺;黄体钢;叶帆;陈树涛;丛洪良 刊期: 2012年第17期
目的 通过拔牙创愈合的生理过程对邻近微种植体-骨界面骨质改建的影响进行研究.方法 选取8只健康雄性Beagle犬,按不同愈合时间段(1、3、8、12周)采用完全随机分组方式分成4组,拔除每只Beagle犬下颌第3和第4双尖牙(P3、P4).实验组微种植体邻近拔牙创区域(P3、P4区域),对照组微种植体位于第2双尖牙(P2)和第1磨牙(M1)区域.分别在植入微种植体后愈合的第1、3、8、12周处死动物.制备去除微种植体脱钙组织切片,对处于不同阶段的种植体-骨界面进行组织学观察.结果 第1周,实验组和对照组均表现为明显的炎症性反应.第3周,实验组主要表现为骨吸收,对照组主要表现为骨重建.第8周,实验组和对照组均表现为骨界面基质钙化,骨界面的网状骨已逐渐向板层骨过渡.第12周,实验组和对照组微种植体-骨界面出现钙化的层状骨.结论 拔牙创对微种植体周围骨改建进程会产生影响,在植入早期,邻近拔牙创的微种植体-骨界面炎症反应和骨吸收效应明显重于对照组,此期即刻加载风险较大.
作者:霍金凤;郑雷蕾;胡赟;赵志河;唐甜;邓锋;卫光曦;周阳明;张晓歌 刊期: 2012年第17期
目的 评估原发性高血压患者血尿酸(serum uric acid,SUA)水平与冠状动脉病变程度的相关性.方法 收集我院2010年1月至2011年12月行冠脉造影的原发性高血压患者538例,包括男性433例,女性105例,年龄31 ~ 84(62.9±9.75)岁,其中明确冠心病362例,排除冠心病176例,根据SUA水平四分位数将原发性高血压患者分为第1四分位数组、第2四分位数组、第3四分位数组、第4四分位数组,分析各组患者SUA水平与冠状动脉病变程度的相关性,冠状动脉病变程度由冠状动脉病变支数及病变Gensini积分表示.结果 SUA是高血压患者合并冠心病的独立危险因素( OR=1.003,95% CI 1.001~1.005,P<0.05),原发性高血压合并冠心病患者SUA水平与冠状动脉病变支数及冠状动脉病变Gensini积分有显著正关联(r=0.128,P<0.01;r =0.163,P<0.01).结论 原发性高血压患者SUA水平升高与冠状动脉病变程度密切相关.
作者:陈剑玲;商黔惠;赵鸿彦;邓熠 刊期: 2012年第17期
1 临床资料患者,女性,68岁,因“发现血糖高10年,控制不佳加重1月”入院.10年前,患者偶然查血糖16.2 mmol/L,无明显“三多一少”症状,于某三甲医院检查确诊为“2型糖尿病”,予“二甲双胍”等口服降糖药治疗,患者反复于餐前及夜间发生低血糖,而餐后血糖偏高,5年前因“糖尿病神经病变”换用预混胰岛素降糖,后再次交替使用各种口服降糖药及预混胰岛素(类似物)降糖,血糖始终控制不佳,低血糖频繁发生,多1晚出现4次低血糖,夜间血糖低1.6 mmol/L.
作者:周厚地;童强;段炼;陈卫;郑宏庭 刊期: 2012年第17期
1 临床资料孕39周妇女,系第1胎第1产,于2011年5月5日在外院剖宫产娩出一体双头女活婴,4.05 kg,遂于5月9日入住我院儿科,置于保温箱中,持续头罩吸氧下双头反应可,哭声较弱.刺激左侧肢体触觉、痛觉反应正常,左侧头颅面部表情改变;刺激右侧肢体触觉、痛觉反应正常(较左侧反应迟钝),右侧头颅面部表情改变.吸吮反射左头较右头好,觅食反射可正常引出,持握、拥抱反射未引出.CT三维成像见2头,2套脊柱,1对半肋骨,1对半锁骨,胸骨、肩胛骨、骨盆及四肢均1套.全脑(2个)实质密度减低,脑沟变浅,脑室显示不清,中线结构因体位受限有所偏移,颅骨缝未闭.临床诊断:双头单体女婴、复杂性先天性心脏病、两肺发育不全伴肺不张、新生儿缺血缺氧性脑病、病理性黄胆.
作者:刘立红;杨梅华;石先俊;廖白军;朱敏 刊期: 2012年第17期
131I治疗甲亢后的主要并发症是甲状腺功能减退症(甲减),且发生率较高[1].临床发现,在第1次用131I治疗甲亢后,复治时(6个月),甲状腺激素水平较正常值高1倍以内的患者,6~12个月后甲状腺激素水平可自行降至正常;若进行第2次治疗患者甲减的发生率明显增高.我们猜测是由于首次131I治疗后残留的甲状腺组织受到131I辐射作用,使其功能继续下降,不能完全恢复.我们的方法是测定131I复治时及1年后的甲亢患者甲状腺激素水平值,试图通过统计分析的方法找出复治的分界点,为制订较精确的131I复治甲亢实验室标准做一个初步的探索.
作者:吴平;易吉秀;李华;容若惠子 刊期: 2012年第17期
经股动脉穿刺行冠状动脉介入检查及治疗,由于在介入过程中应用大量肝素抗凝,故穿刺部位出血是术后常见并发症[1].为避免穿刺局部出血形成血肿,传统观念一般术后要求沙袋压迫穿刺处6h,绝对平卧24 h,同时术侧肢体制动.但此法常致患者出现不同程度的腰酸背痛,并由此引起焦虑、恐惧、睡眠障碍等并发症,增加了患者的痛苦和护理工作量.我们选择2所三级甲等医院122例经股动脉穿刺患者,通过协助术后患者改变体位,能有效减轻术后腰背痛的发生率,提高患者的舒适度.
作者:曲彦慧;张革利;张炜;刘美丽;赵院利 刊期: 2012年第17期
压疮主要实质是压迫性溃疡,常合并感染,是导致压疮溃疡面经久不愈的重要原因.外伤性脊髓损伤患者常合并不同程度的瘫痪,大便失禁,更易污染疮面并造成感染,全身应用抗生素因压疮处血液循环差,患处有效药物浓度不易达到,不利于炎症的控制[1].2009 - 2012年我科对收治的52例Ⅱ~Ⅲ期共56处压疮患者分别采用加替沙星眼用凝胶联合rhEGF治疗及rhEGF分组治疗,并进行临床疗效对比,现将结果报告如下.
作者:夏同霞;李媛媛;王玉和;敖俊;谢文婷;李琳育 刊期: 2012年第17期
布加综合征( Budd-Chiari syndrome,BCS)合并下腔静脉内血栓形成属于BCS的一种疑难、复杂类型,由于开通阻塞的下腔静脉后存在造成血栓脱落并导致肺栓塞的可能[1],曾被认为是介入治疗的禁忌证.我们对本院7例合并下腔静脉内长段血栓的BCS患者采用多支架充分压迫血栓后,再扩张成形下腔静脉闭塞段,均取得较满意的近、中期疗效.
作者:杨海;杨宁;张冬;高万勤;王超 刊期: 2012年第17期
目的 探讨言语辅助肌电刺激等康复疗法加团体心理治疗对脑卒中伴言语功能障碍患者的治疗效果.方法 选择住院确诊的急性脑卒中伴失语患者82例,依患者入院顺序按奇偶数随机分为对照组和研究组,各41例.前者按脑卒中常规给予规范内科治疗,后者除常规治疗外,加用言语辅助肌电刺激和团体心理治疗.两组均于治疗后3个月行语言障碍量表和脑卒中专用生活质量量表(SS-QOL)测定以评定疗效.结果 研究组言语功能障碍(包括自发言语、系列言语、复述、听名指物、听名指图、执行命令、短语理解)治疗后较治疗前显著改善(P<0.01),对照组治疗后无显著改善(P>0.05).同时患者生存质量(包括精力、家庭角色、语言、活动、情绪、个性、自理能力、社会角色、思维、上肢功能、工作/劳动)评估亦明显优于对照组(P<0.01).结论 对脑卒中伴言语障碍患者早期进行言语辅助肌电刺激和团体心理治疗,不仅有利于患者语言功能的康复,更能有效提高患者生活质量.
作者:鞠波;孙淑艳;曹巍巍 刊期: 2012年第17期
目的 了解重庆地区α与β地中海贫血(地贫)的基因突变类型和频率,预防地中海贫血患儿的出生,减少出生缺陷.方法 采用多聚酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)和反向斑点杂交(reverse dot blot,RDB)技术对1709例我院小细胞低色素贫血疑似地贫患者进行地贫基因诊断分析.结果 1709例受检者确诊为地贫者953例,其中α型地贫381例(1511例受检),阳性率为25.22%,包括--SEA/αα缺失295例(77.43%),-α3.7/αα缺失44例(11.55%),-α4.2/αα缺失.10例(2.62%),-α3.7/--SEA 15例(3.94%),-α4.2/--SEA缺失2例(0.52%),-α3.7/-α3.7缺失1例(0.26%),--SEA/ --SEA缺失(Bart's水肿胎)4例(1.05%),Hb Constant Spring (HbCS)5例(1.31%)、Hb Quong Sze (HbQS)5例(1.31%).β型地贫555例(1370例受检),阳性率为40.51%,其中CD41 - 42(- TCTT)基因类型158例为常见,CD17(A→T)154例和IVS -2 - 654(C→T)133例基因突变类型略低于CD41 - 42(- TCTT)基因突变类型.β-地贫中杂合子共534例,双重杂合子20例,CD17纯合子1例.α复合β地贫17例(1172例受检),阳性率为1.45%.结论 初步阐明重庆地区人口中的α与β地贫的基因突变类型和频率.应加强重庆地区地中海贫血的筛查,以减少地中海贫血患儿的出生.
作者:王欢;刘申;黄君富;徐莉;苗杰;张晓莉;府伟灵 刊期: 2012年第17期
目的 探讨奥卡西平、拉莫三嗪及左乙拉西坦单药治疗新诊断的成人部分性癫痫患者的临床效果及其对脑电的影响.方法 将新诊断的成人部分性癫痫患者133例按随机数字表法分为3组,分别给予奥卡西平(OXC组)、拉莫三嗪(LTG组)及左乙拉西坦(LEV组)单药治疗12个月,比较3组患者临床疗效及治疗前后脑电图的变化.结果 治疗12个月后,3组间无发作率无明显差别(P>0.05),OXC组及LTG组总有效率高于LEV组(P<0.05).3种药物对癫痫样放电(IEA)均有明显的抑制作用,3组间无统计学差异(P>0.05).3组患者治疗前后脑电背景α节律均无明显变化(P>0.05);LTG组及LEV组治疗前后α、β、δ及θ频段相对功率均无明显变化(P>0.05),OXC组θ频段功率较治疗前明显增加(P<0.05),且OXC组治疗后θ频段功率与LEV组及LTG组比较有统计学差异(P<0.05).结论 奥卡西平、拉莫三嗪及左乙拉西坦单药治疗新诊断的成人部分性癫痫均有较好的效果,3种药物对IEA均有明显的抑制作用,拉莫三嗪及左乙拉西坦对脑电背景活动无明显影响,奥卡西平可使θ频段功率明显增加.
作者:李哲;李健;李攀;杨春清;赵磊;杨环玲;李文玲 刊期: 2012年第17期