信使RNA的发现,遗传密码的破解,人们对蛋白质合成的基因调节有了更深入的理解,在此基础上提出了基因表达的现代概念.随之出现了全球性的基因表达研究的热点.在检测和定量分析基因表达水平的过程中,出现了很多种方法和技术,本文就Northern杂交法、S1核酸酶保护法、差减杂交技术、差异显示法、cDNA文库的序列测定、基因表达的系列分析、基因表达芯片等技术作一简要的综述.
作者:韩光明;陈顺乐 刊期: 2001年第04期
HLAⅠ类抗原在许多肿瘤中表达降低,从而影响肿瘤的临床治疗和T细胞免疫疗法的预后.本文从肿瘤细胞HLAⅠ类抗原分子的表达情况、分子机制以及其临床意义方面对肿瘤细胞HLAⅠ类抗原研究情况作一综述.
作者:毕永春;张建琼 刊期: 2001年第04期
随着细菌多相分类学技术的发展,需氧芽孢杆菌在分类及命名方面发生了很大的变化.本文总结了现有芽孢杆菌各属的确立依据及其模式种的特征.
作者:韩延平;杨瑞馥 刊期: 2001年第04期
周围神经异体移植由于移植物免疫原性的存在,移植后受体产生免疫排斥反应,造成移植失败.本文综述了移植物的免疫成分所在、SC及细胞因子在排斥反应中的作用、T淋巴细胞的激活途径及激活信号的转导过程,并讨论了减轻免疫排斥反应的治疗进展.
作者:万新海;罗永湘 刊期: 2001年第04期
蛋白质芯片是近年来兴起的生物检测技术.本文简要综述了该技术的发展概况、基本原理及在基础研究和疾病诊断中的初步应用,并指出了存在的问题及发展前景.
作者:张浩;李晓霞;张军权;毛秉智 刊期: 2001年第04期
基因工程抗体可称为第三代抗体,其较前两代抗体有免疫原性低,用途多样等优点.其中抗体库技术又较另两种基因工程抗体(嵌合抗体,改型抗体)优越,可不经免疫制备抗体,又可实现完全人源化,理论上若构建出有足够库容量及多样性的抗体库,便可从中筛选任何抗原的单克隆抗体.该技术有可能取代杂交瘤技术.本文综述了抗体库技术的产生,发展,优点及应用前景等.
作者:张春莉;王妍 刊期: 2001年第04期
端粒酶在胃肿瘤的发生发展中可能具有重要作用,幽门螺杆菌感染与胃肠道疾病的关系密切,且幽门螺杆菌已被列为第一类致癌因子,近年来,一些研究显示了幽门螺杆菌感染与端粒酶活性之间存在一定关系,本文就端粒酶与幽门螺杆菌相关性胃疾病予以综述.
作者:戴文颖;袁媛 刊期: 2001年第04期
幽门螺杆菌是一类基因组结构变异很大的细菌,除具有共同的一般特征、看家基因、插入序列、致病岛、质粒外,还具有特殊的毒力基因,如尿素酶基因、鞭毛基因、粘连蛋白基因、vacA基因、cagA基因等.幽门螺杆菌基因组结构的不断阐明,为它的临床研究、流行病学研究以及预防和控制打下了坚实基础.
作者:代敏;段广才;施侣元 刊期: 2001年第04期
多发性骨髓瘤(Multiple myeloma,MM)是一种目前仍无法治愈的血液系统恶性肿瘤.其发生、发展与细胞因子、体内微环境以及癌基因产物等多种作用因素密切相关.本文将分别阐述影响MM细胞生存和生长的控制因子及其作用机制.
作者:宋伦;沈倍奋 刊期: 2001年第04期
分别用抗沙门氏菌多价抗体和葡萄球菌A蛋白包被胶体金制备探针,采用免疫渗滤法可检出85%的引起食物中毒的沙门氏菌,灵敏度为2.4×107cfu/ml.对常见的鼠伤寒、猪霍乱和肠炎沙门氏菌,检出率达100%.人工染菌的食品样品经简单处理,即可用于检测.该方法简单快速,适合现场检测之用.
作者:王中民;李君文;王新为;宋农;郑金来;辛忠涛;靳连群 刊期: 2001年第04期
本文采用HPLC法测定低pH静脉注射用人血丙种球蛋白中麦芽糖含量,所用色谱柱为氨基柱.首先用磺基水杨酸沉淀蛋白并离心分离,上清液上样分析.通过外标法建立三级校正曲线来测定样品中麦芽糖含量,该法准确快速较化学方法好.
作者:高雪军;冯德杰;李澍;朱莉萍;程夷 刊期: 2001年第04期
将日本大阪大学微生物病研究会(BIKEN)提供的Oka水痘病毒第28代减毒株,通过MRC-5人二倍体细胞连续传递10代,建立主代及工作代毒种批,并对其后的32代,34代,36代及38代病毒按WHO规程进行全面检定,证实其生物学特性相似,免疫原性良好,确保制备水痘减毒活疫苗毒种的稳定性和一致性.
作者:王宪明;殷月娣;徐建军;程鹏飞;周月梅;吕国贞;王树巧;陈志慧 刊期: 2001年第04期
在肾综合征出血热(HFRS)双价纯化疫苗(Vero细胞)的研制中,对病毒培养用Vero细胞致瘤性和试制疫苗的过敏原性进行了动物实验研究,结果表明,病毒培养用Vero细胞无致瘤性,三批试制疫苗无过敏原性.说明用Vero细胞为培养介质的HFRS双价纯化疫苗是安全的.
作者:李安敏;马小奇;王伟;苏玉华;孙小惠;李萍;李娟 刊期: 2001年第04期
选用在Vero细胞上初步适应的LR1(Ⅰ型)、R22(Ⅱ型)株病毒,经乳鼠脑或腹腔接种,收剖感染鼠脑并在Vero细胞传代适应,此收获病毒与直接以Vero细胞传代的病毒比较表明:抗原效价、毒力滴度有明显提高.用LR1、R22株病毒感染的Vero细胞培养物制备单价粗制疫苗和双价精制纯化疫苗免疫家兔,经空斑减少中和试验检测中和抗体,结果表明经乳鼠和Vero细胞交替传代适应后的LR1、R22株病毒具有良好的抗原性和免疫原性.
作者:李萍;李娟;王春荣;孙晓东;郭大龙;杨世龙;王维新 刊期: 2001年第04期
用0.02 mol/L磷酸盐缓冲液和不用磷酸盐缓冲液透析生产无细胞百日咳(aP),按<2000年版生物制品规程>制备和检定氢氧化铝吸附无细胞百日咳、白喉、破伤风联合疫苗(DTaP).发现用磷酸盐缓冲液和不用磷酸盐缓冲液透析生产aP组成DTaP免疫效力差异非常显著,后者100%(10/10)合格,前者合格率只有27%(3/11),用钼兰法测定DTaP中PO43-离子浓度.结果表明后者的PO43-浓度只是前者的1/10.PO43-依次影响白喉、破伤风、百日咳免疫效价.
作者:程鹏飞;周桂宝;张斌;王伟;郑丽华;许婷玲;沈立蒙;王梨平 刊期: 2001年第04期
在六个观察点用同一批冻干皮内卡介苗接种新生儿,于接种12周,用PPD做皮内试验,结果显示:各观察点间阳转率未见差异;硬结均径从大到小的观察点顺序是:北京>杭州>沈阳>哈尔滨>广州>长春,差异是由检测所用PPD不同及各观察点间若干因素不同引起.
作者:王志;于爱东;王春鹏;杨彤;李双凤;冀健 刊期: 2001年第04期
为比较不同动物来源杀菌/通透性增加蛋白(BPI)的活性部位在基因组成上的差异,为今后对人BPI进行分子改构打下基础,分别从人、恒河猴和家兔外周血白细胞中克隆出BPI全长或活性部位基因,进行序列分析和比较,并进行蛋白二级结构预测.结果发现:猴、兔BPI活性部位序列与人序列在核苷酸水平的同源性分别为94%和77%,在氨基酸水平的同源性分别为88%和62%;人氨基酸序列中包含一个糖基化位点,而猴、兔序列没有;兔序列比人、猴序列少一个氨基酸;3种BPI活性部位有近似的二级结构.
作者:徐俊杰;徐静;王海涛 刊期: 2001年第04期
整合素(Integrins)是细胞膜蛋白的组成万分,它们是一类细胞粘附分子,并与形态形成的调节密切相关.整合素在细胞与细胞之间,细胞与基质之间的粘附中发挥着重要的作用.本研究通过选择使用鼠抗人整合素β抑止性单克隆抗体和刺激性单克隆抗体,利用噬菌体展示技术,成功地构建了单链Fv抗体(scFv),并对其与整合素β1的结合,选择佳的可溶性抗体的生产条件等诸方面,进行了应用性研究.同时,也应用链转换(China shuffling)试图改变抗体亲和力进行了探索的试验.
作者:王棣;Ken Wong;John Wilkins 刊期: 2001年第04期
用基因重组技术将截短的HIV-1 p24基因和gp41基因连接成嵌合基因,插入质粒pGEX-4T3,构建成重组表达质粒pGEX-F.将pGEX-F转化大肠杆菌BL21.经IPTG诱导表达,pGEX-F在大肠杆菌BL21中获得了高效表达.融合蛋白P24-gp41经Glutathion-Sepharose4B亲和层析纯化后,用间接ELISA和免疫印迹检测HⅣ抗体阳性血清和正常人血清,P24-gp41只与HIV抗体阳性血清反应,证明获得的融合蛋白P24-gp41有很强的抗原特异性和免疫反应性,具有较高的应用价值.
作者:陈伟;闭兰;朱华松;李茜;余模松 刊期: 2001年第04期
为了制备不含牛血清IgG的细胞培养基(-GFCS培养基),并研究其在杂交瘤细胞体外培养中的应用,采用蛋白G亲和层析的方法,将含有牛血清的细胞培养基中的牛血清IgG去除,以制备无IgG的培养基.使用该培养基体外培养杂交瘤细胞后,监测细胞生长和上清抗体浓度.对培养上清中的IgG类单克隆抗体可以采用蛋白G亲和层析进行纯化.与未去除牛血清IgG的培养基相比,-GFCS培养基培养的杂交瘤细胞的生长状况及上清抗体浓度均无明显变化;从-GFCS培养上清中成功纯化出不被牛血清IgG污染的IgG类单克隆抗体,本文结果表明,采用-GFCS培养基体外培养分泌IgG类单抗的杂交瘤细胞,可以简化上清抗体的纯化工艺.
作者:王祥斌;张卓华;孔健 刊期: 2001年第04期
为了探讨粘膜疫苗滴鼻免疫对小鼠不同粘膜部位和系统免疫部位的影响,将BALB/c小鼠随机分为三组,每组15只,FSM-2117或FS-5416 4×107cfu/只经滴鼻途径免疫小鼠,间隔两周,4次免后7天活杀,收集鼻咽、肺、肠、生殖道冲洗液和血清,ELISA法检测其中特异性抗福氏、宋内氏LPSIg和AIgG;分离NALT、鼻通道、脾、小肠PP淋巴细胞,细胞中加入全菌破碎抗原共培养,于不同时间取出细胞,提取RNA做RT-PCR.两株菌苗经鼻内免疫均诱发了鼻咽、肺、胃肠道和生殖道等不同粘膜部位及血清中特异性抗福氏、宋内氏LPSIgA、IgG的显著增加(P<0.01);免疫动物的NALT、NP、PP结淋巴细胞在体外经抗原刺激后均在不同时间出现IFN-γ和IL-4mRNA的表达,而TGF-β mRNA的表达在免疫前后无明显变化.疫苗经鼻粘膜免疫可诱导不同粘膜部位及系统免疫反应的发生,鼻粘膜是一个安全有效的免疫途径.
作者:舒翠莉;彭虹;王华;陈洁;高杰英 刊期: 2001年第04期
应用超滤浓缩技术对白喉毒素培养液进行澄清过滤和超滤浓缩,已经早已为生产厂家所使用.但是,超滤膜的通透性下降很快,使膜的使用期限大大缩短,生产成本较高.因此在试验过程中,注重摸索超滤过程的中间控制以及超滤结束后的清洗方法,特别是使用0.5 mol/LNaOH+200ppm次氯酸钠作为清洗剂,在超滤结束以后对滤膜进行彻底的恢复性清洗,可以使澄清和浓缩过滤速度分别达到平均77 L/M2·h和75 L/M2·h,回收率分别达到93.1%和92.8%,使滤膜的滤过性能(NWP)基本恢复到滤前水平.
作者:王建华;马相虎 刊期: 2001年第04期